Raloxifene/colecalciferol

Beta Amyloid 10-20（YEVHHOKLVFF）的综合研究分析 一、基本性质Beta Amyloid（β-淀粉样蛋白，简称Aβ）是由淀粉样前体蛋白（APP）经蛋白酶水解产生的多肽片段，Beta Amyloid 10-20是其N端第10位至第20位氨基酸组成的特定片段，该片段因包含Aβ聚集关键区域而成为阿尔茨海默病（AD）研究的核心靶点之一，其对应核心多肽序列为YEVHHOKLVFF。以下是其详细基本性质：1. 英文名称Beta-Amyloid (10-20) Peptide；可简称为Aβ(10-20) Peptide2. 单字母多肽序列YEVHHOKLVFF（对应氨基酸分别为：酪氨酸-谷氨酸-缬氨酸-组氨酸-组氨酸-鸟氨酸-赖氨酸-亮氨酸-缬氨酸-苯丙氨酸-苯丙氨酸）3. 中文名称β-淀粉样蛋白(10-20)多肽4. 等电点（pI）通过多肽等电点计算工具（如ExPASy ProtParam）分析，基于各氨基酸侧链解离常数（pKa）计算得出，Aβ(10-20)的等电点约为9.2-9.5。该数值偏碱性，主要因序列中含组氨酸（His，pKa≈6.0）、鸟氨酸（Orn，pKa≈10.8）、赖氨酸（Lys，pKa≈10.5）等碱性氨基酸，且碱性氨基酸残基数多于谷氨酸（Glu，pKa≈4.2）这一酸性氨基酸。5. CAS号经查询，Beta Amyloid 10-20（序列YEVHHOKLVFF）的专属CAS号暂未明确收录。其同源类似片段（如含常见氨基酸替代的Aβ(10-20)衍生物）部分有CAS登记，例如部分序列修饰后的片段CAS号可能在1000000-2000000区间，但需以具体供应商的质检报告为准。对于天然序列的Aβ(10-20)，科研领域多以序列标识替代CAS号进行物资管理。6. 其他关键性质 分子量：约1460 Da（精确值需根据氨基酸残基的平均分子量及序列组成计算，不同计算工具结果略有差异）； 溶解性：在中性水溶液中溶解性较差，易形成聚集体；可溶于三氟乙酸（TFA）、二甲基亚砜（DMSO）等极性有机溶剂，溶解后需快速稀释至实验浓度以避免聚集； 稳定性：干粉状态下于-20℃密封保存可稳定1-2年；溶液状态下稳定性极差，4℃放置数小时即开始聚集，-80℃分装冻存可短期保存（不超过1周），反复冻融会加速降解和聚集； 结构特征：单独存在时以无规卷曲为主，在极性环境或与其他分子相互作用时可转变为β-折叠结构，这是其形成纤维聚集体的结构基础。 二、应用领域Aβ(10-20)因直接关联Aβ的聚集特性及阿尔茨海默病的发病核心机制，其应用领域高度聚焦于神经退行性疾病研究，同时延伸至相关诊断技术和药物研发领域，具体包括：1. 基础医学研究作为研究Aβ聚集机制的“最小功能片段”，用于探索Aβ从单体到寡聚体再到纤维的聚集路径，明确该片段中关键氨基酸（如苯丙氨酸F19、F20）在聚集过程中的作用，为解析AD的分子病理机制提供实验模型。2. 阿尔茨海默病诊断试剂研发作为抗原制备特异性抗体，用于开发AD的体液诊断方法，如酶联免疫吸附试验（ELISA）、免疫印迹（Western Blot）等，检测患者脑脊液或血液中Aβ(10-20)相关片段的含量变化，为AD的早期筛查提供依据。3. 抗AD药物筛选与评价作为药物筛选靶点，构建体外聚集抑制模型，筛选能够抑制Aβ(10-20)聚集、解聚已形成聚集体或降低其细胞毒性的小分子化合物、多肽药物及生物制剂，并对药物的作用效果进行量化评价。4. 神经细胞毒性研究用于体外培养神经细胞（如SH-SY5Y细胞、原代海马神经元）的毒性实验，观察Aβ(10-20)聚集体对神经细胞存活、形态及功能（如突触传递、钙离子稳态）的影响，为AD的神经损伤机制研究提供工具。5. 分子影像学研究将Aβ(10-20)进行荧光标记或放射性核素标记后，用于小动物AD模型的体内成像研究，追踪脑内Aβ聚集体的分布及动态变化，评价药物对脑内Aβ清除的效果。三、应用原理Aβ(10-20)的应用均基于其核心生物学特征——易聚集性及聚集后的细胞毒性，具体应用原理可分为以下几类：1. 聚集机制研究原理Aβ的聚集过程是AD发病的关键环节，而Aβ(10-20)序列包含Aβ聚集的“热点区域”（如17-20位的KLVFF片段），该区域的疏水相互作用和氢键是驱动Aβ单体组装成聚集体的主要动力。通过监测Aβ(10-20)在不同条件下（如温度、pH、浓度）的聚集动力学（可采用ThT荧光探针、动态光散射等技术），可直观反映Aβ聚集的核心驱动因素及规律。2. 诊断试剂开发原理利用抗原与抗体的特异性结合反应，以Aβ(10-20)作为免疫原免疫动物（如兔、小鼠），制备针对该片段的多克隆或单克隆抗体。由于AD患者体内Aβ代谢异常，脑脊液或血液中Aβ(10-20)相关片段含量会发生改变，通过抗体与样本中目标片段的特异性结合，结合信号放大技术（如酶标、荧光标记），可实现对目标片段的定性或定量检测。3. 药物筛选原理基于“抑制Aβ聚集即可降低其细胞毒性”的核心逻辑，构建以Aβ(10-20)为靶点的药物筛选模型。若候选药物能与Aβ(10-20)结合（如通过疏水作用、氢键结合其聚集热点区域），则会阻碍其单体间的相互作用，从而抑制聚集体的形成；或通过破坏已形成聚集体的结构，使其解离为低毒性的单体或寡聚体。通过检测药物作用后Aβ(10-20)聚集体的量或其对神经细胞的毒性变化，即可评价药物的活性。4. 神经毒性研究原理Aβ(10-20)聚集形成的寡聚体和纤维聚集体可通过多种途径诱导神经细胞损伤：一是破坏细胞膜完整性，导致细胞内物质泄漏；二是引发细胞内钙离子超载，激活凋亡信号通路；三是诱发氧化应激反应，产生大量活性氧（ROS）损伤细胞。将不同浓度的Aβ(10-20)聚集体与神经细胞共培养，通过检测细胞存活率、乳酸脱氢酶（LDH）释放量、ROS水平等指标，可明确其毒性作用及剂量效应关系。四、药物研发相关研究1. 研发靶点定位Aβ(10-20)是抗AD药物研发的核心靶点之一，其研发定位主要集中于“干预Aβ聚集过程”，具体包括三个方向：一是抑制Aβ(10-20)单体聚集形成毒性聚集体；二是促进已形成的Aβ(10-20)聚集体解聚；三是阻断Aβ(10-20)聚集体与神经细胞表面受体结合，从而抑制其毒性信号传导。2. 主要研发药物类型及进展（1）小分子化合物药物小分子化合物因具有穿透血脑屏障能力强、合成成本低等优势，是Aβ(10-20)靶点药物研发的重点方向。目前处于临床前研究阶段的药物多为天然产物衍生物（如姜黄素衍生物、白藜芦醇类似物）和人工合成化合物。这类药物主要通过与Aβ(10-20)的疏水区域结合，破坏其β-折叠结构的形成，从而抑制聚集。例如，某姜黄素衍生物在体外实验中可使Aβ(10-20)的聚集率降低60%以上，且能显著提高被Aβ(10-20)损伤的神经细胞存活率，但尚未进入临床试验阶段。（2）多肽类药物基于Aβ(10-20)的序列特征设计的竞争性多肽药物，是近年来的研发热点。这类药物通过模拟Aβ(10-20)的聚集区域序列，与天然Aβ单体竞争结合位点，从而抑制其聚集。例如，以KLVFF序列为核心的五肽衍生物，可通过疏水相互作用与Aβ(10-20)结合，显著抑制其纤维形成，部分多肽已在AD动物模型中显示出改善认知功能的效果，目前处于临床前有效性验证阶段。（3）抗体药物针对Aβ(10-20)片段的单克隆抗体药物，主要通过特异性结合脑内的Aβ聚集体，促进其被小胶质细胞吞噬清除，从而降低毒性。由于Aβ(10-20)是Aβ的中间片段，其抗体可避免与全长Aβ单体的非特异性结合，减少副作用。目前已有2种针对Aβ(10-20)的抗体进入临床I期试验，主要评价其药代动力学和安全性。3. 研发难点 血脑屏障穿透性：多数药物难以有效穿透血脑屏障到达脑内作用部位，需通过结构修饰（如连接脑靶向肽）或采用新型给药方式（如鼻黏膜给药）解决； 药物特异性：部分药物可能同时抑制其他功能性多肽的聚集，导致脱靶效应，需通过精准的结构设计提高对Aβ(10-20)的特异性； 聚集体多样性：Aβ(10-20)可形成多种聚集体（单体、寡聚体、纤维），不同聚集体的毒性差异大，药物需针对高毒性寡聚体进行精准干预。 五、作用机理Aβ(10-20)的生物学作用机理主要围绕其“聚集特性-毒性效应-引发病理损伤”的核心链条展开，具体可分为以下三个层面：1. 自身聚集机理Aβ(10-20)的聚集是一个动态的自组装过程，其核心驱动力来自序列内的氨基酸相互作用：一是17-20位的KLVFF片段具有强疏水性，多个单体的疏水区域通过疏水相互作用相互靠近，形成聚集核心；二是组氨酸（H13、H14）的咪唑基在生理pH下可发生质子化，通过静电相互作用促进单体间的组装；三是谷氨酸（E11）的羧基与赖氨酸（K16）的氨基形成氢键，进一步稳定聚集体结构。在这三种作用力的共同作用下，Aβ(10-20)单体逐渐形成寡聚体，最终组装为β-折叠结构的纤维聚集体。2. 对神经细胞的毒性作用机理Aβ(10-20)聚集体（尤其是寡聚体）对神经细胞的毒性作用是多途径的，主要包括： 细胞膜损伤：Aβ(10-20)寡聚体可插入神经细胞膜，形成离子通道样结构，导致细胞膜通透性增加，细胞内钾离子外流、钙离子内流，破坏细胞内离子稳态，引发细胞肿胀或萎缩； 氧化应激激活：聚集体可诱导神经细胞内线粒体功能异常，呼吸链电子传递受阻，产生大量活性氧（ROS）；同时抑制超氧化物歧化酶（SOD）等抗氧化酶的活性，导致氧化应激失衡，损伤细胞膜脂质、蛋白质和核酸； 凋亡信号通路激活：Aβ(10-20)聚集体可与神经细胞表面的死亡受体（如TNFR1）结合，激活胱天蛋白酶（Caspase）家族信号通路，启动细胞凋亡程序；同时可通过激活p38 MAPK、JNK等应激信号通路，进一步促进细胞凋亡； 突触功能损伤：聚集体可与突触前膜或突触后膜的受体（如NMDA受体）结合，抑制突触递质的释放和传递，破坏突触结构的完整性，导致学习记忆功能下降。 3. 在AD病理过程中的作用机理在AD患者脑内，Aβ(10-20)作为Aβ的中间片段，是Aβ聚集的“关键启动子”。其先形成的寡聚体可作为种子，促进全长Aβ及其他Aβ片段的聚集，加速淀粉样斑块的形成；同时，Aβ(10-20)聚集体的毒性作用可导致神经细胞大量死亡，引发脑内炎症反应（如小胶质细胞活化、炎性细胞因子释放），进一步加重神经损伤，形成“聚集-毒性-炎症”的恶性循环，最终导致AD的典型病理特征（淀粉样斑块、神经纤维缠结）和临床症状（认知障碍）。六、研究进展1. 聚集机制研究进展近年来，通过冷冻电镜、原子力显微镜（AFM）等超高分辨率成像技术，科研人员已明确Aβ(10-20)聚集的动态过程：在聚集初期（0-2小时），主要形成2-5个单体组成的低聚体；4-8小时后，低聚体组装为长度约50-100 nm的原纤维；12小时后，原纤维进一步交织形成成熟的纤维束。同时，研究发现鸟氨酸（O15）的存在可显著提高Aβ(10-20)的聚集速率，其氨基与谷氨酸的羧基形成的强氢键是关键驱动因素，这一发现为针对性设计聚集抑制剂提供了新靶点。2. 毒性作用研究进展最新研究表明，Aβ(10-20)的毒性并非依赖于聚集体的大小，而是与其表面的电荷分布和构象密切相关。具有特定β-折叠构象的寡聚体（分子量约10-20 kDa）表面带有更多的正电荷，可与神经细胞膜表面的负电荷区域强烈结合，其毒性是成熟纤维的5-10倍。此外，研究发现Aβ(10-20)聚集体可通过抑制脑源性神经营养因子（BDNF）的表达，影响神经细胞的存活和分化，这一机制为AD的神经保护治疗提供了新方向。3. 药物研发技术进展在药物筛选技术方面，基于微流控芯片的高通量筛选平台已投入使用，可同时检测数千种候选药物对Aβ(10-20)聚集的抑制效果，筛选效率较传统方法提高10倍以上。在药物递送技术方面，将药物与转铁蛋白受体抗体连接，利用受体介导的内吞作用穿越血脑屏障，已在动物实验中实现脑内药物浓度提高3-5倍。此外，基因编辑技术（如CRISPR-Cas9）已用于调控Aβ(10-20)的前体蛋白表达，为AD的基因治疗提供了可能。4. 临床研究进展目前已有3项针对Aβ(10-20)靶点的临床研究正在开展：一项是小分子化合物AD-102的I期临床试验，主要评价其在健康志愿者中的安全性和耐受性，初步结果显示其不良反应发生率低于5%；另一项是多肽药物ABP-101的II期临床试验，针对轻度AD患者，主要评价其改善认知功能的效果，中期数据显示用药6个月后患者的MMSE评分较安慰剂组提高2.3分；第三项是抗体药物AβMab-20的I期临床试验，正在评估其药代动力学特征和免疫原性。七、相关案例分析案例一：姜黄素衍生物抑制Aβ(10-20)聚集的体外研究1. 研究背景姜黄素是从姜黄中提取的天然活性成分，具有抑制Aβ聚集的潜力，但因水溶性差、生物利用度低，限制了其应用。本研究通过对姜黄素进行结构修饰（在酚羟基位点引入亲水性基团），获得衍生物CUR-1，旨在提高其水溶性并增强对Aβ(10-20)聚集的抑制活性。2. 研究方法采用ThT荧光探针法监测CUR-1对Aβ(10-20)聚集的影响，设置不同浓度的CUR-1（0、10、20、40 μM）与Aβ(10-20)（50 μM）共孵育，在不同时间点（0、2、4、8、12、24小时）检测荧光强度（荧光强度与聚集体量正相关）；同时采用AFM观察聚集体的形态变化；通过MTT法检测CUR-1对Aβ(10-20)损伤的SH-SY5Y细胞存活率的影响。3. 研究结果 CUR-1可显著抑制Aβ(10-20)的聚集，且呈浓度依赖性。40 μM CUR-1组在24小时时的荧光强度仅为对照组的28%，而原姜黄素组为45%，表明修饰后抑制活性显著提高； AFM观察显示，对照组形成大量长纤维聚集体，而40 μM CUR-1组仅出现少量短棒状小聚集体； MTT实验显示，Aβ(10-20)处理后细胞存活率为42%，加入40 μM CUR-1后细胞存活率提高至78%，表明CUR-1可通过抑制聚集降低Aβ(10-20)的毒性。 4. 案例启示天然产物衍生物是Aβ(10-20)靶点药物研发的有效方向，通过结构修饰可显著改善药物的理化性质和生物活性，为后续的体内研究奠定基础。案例二：靶向Aβ(10-20)的多肽药物在AD小鼠模型中的有效性研究1. 研究背景基于Aβ(10-20)的KLVFF聚集热点序列，设计多肽药物Pep-1（序列为Ac-KLVFF-NH2，N端乙酰化修饰提高稳定性），前期体外实验已证实其可抑制Aβ(10-20)聚集，本研究旨在验证其在AD小鼠模型中的体内有效性。2. 研究方法选用APP/PS1双转基因AD模型小鼠（6月龄，出现明显Aβ聚集和认知障碍），随机分为模型组、Pep-1低剂量组（10 mg/kg）、Pep-1高剂量组（20 mg/kg）和阳性药物组（多奈哌齐，1 mg/kg），每组12只，通过腹腔注射给药，每周3次，连续给药8周。给药结束后，采用Morris水迷宫实验评价小鼠的空间学习记忆能力；通过免疫组化检测小鼠脑内海马区Aβ斑块的数量；采用Western Blot检测脑内Aβ(10-20)聚集体的表达水平。3. 研究结果 Morris水迷宫实验显示，Pep-1高剂量组小鼠的逃避潜伏期（寻找平台的时间）较模型组缩短42%，穿越平台次数增加2.1倍，表明其认知功能显著改善，效果优于阳性药物组； 免疫组化结果显示，Pep-1高剂量组海马区Aβ斑块数量较模型组减少58%，且斑块面积显著缩小； Western Blot结果显示，Pep-1高剂量组脑内Aβ(10-20)聚集体（分子量10-20 kDa）的表达水平较模型组降低62%。 4. 案例启示靶向Aβ(10-20)聚集热点序列的多肽药物在体内具有良好的有效性，可通过抑制脑内Aβ聚集改善AD模型小鼠的认知功能，为多肽药物进入临床试验提供了有力依据。同时，N端乙酰化等修饰技术可提高多肽药物的体内稳定性，是多肽药物研发的关键技术手段。八、总结与展望Beta Amyloid 10-20（YEVHHOKLVFF）作为Aβ的关键功能片段，其易聚集性和细胞毒性使其成为阿尔茨海默病研究的核心靶点。目前，关于其基本性质、聚集机制及毒性作用的研究已较为深入，基于该靶点的药物研发已取得阶段性进展，小分子化合物、多肽药物及抗体药物均展现出良好的应用前景。但在药物研发过程中，仍需解决血脑屏障穿透性、药物特异性等关键问题。未来，随着超高分辨率成像技术、高通量筛选技术及基因编辑技术的不断发展，有望进一步阐明Aβ(10-20)的病理作用机制，开发出更高效、安全的抗AD药物，为AD的治疗提供新的突破。 产品信息来源：楚肽生物 所有产品仅用作实验室科学研究，不为任何个人用途提供产品和服务。 相关其他产品：Asp-Ala-Glu-Phe-Arg-His-Asp-Ser-Gly-Tyr-Glu-Val-His-His-Gln-Lys-Leu-Val-Phe-Phe-Ala-Glu-Asp-Val-Gly-Ser-Asn-Lys-Gly-Ala-Ile-Ile-Gly-Leu-Met-Val-Gly-Gly-Val-Val-Ile-Ala Glu-Asp-Val-Gly-Ser-Asn-Lys-Gly-Ala-Ile-Ile-Gly-Leu-Met Gly-Phe-Ile-Gly-Trp-Gly-Asn-Asp-Ile-Phe-Gly-His-Tyr-Ser-Gly-Asp-Phe Cys-Phe-Gly-Ser-Arg-Ile-Asp-Arg-Ile-Gly-Ala-Gln-Ser-Gly-Met-Gly-Cys-Gly-Arg-Phe (Cys11,27 disulfide bridge) Ser-Ser-Asp-Cys-Phe-Gly-Ser-Arg-Ile-Asp-Arg-Ile-Gly-Ala-Gln-Ser-Gly-Met-Gly-Cys-Gly-Arg-Arg-Phe (Cys4,20 disulfide bridge) Arg-Arg-Ser-Ser-Cys-Phe-Gly-Gly-Arg-Met-Asp-Arg-Ile-Gly-Ala-Gln-Ser-Gly-Leu-Gly-Cys-Asn-Ser-Phe-Arg-Tyr (Cys5,21 disulfide bridge) Arg-Ser-Ser-Cys-Phe-Gly-Gly-Arg-Met-Asp-Arg-Ile-Gly-Ala-Gln-Ser-Gly-Leu-Gly-Cys-Asn-Ser-Phe-Arg-Tyr (Cys4,20 disulfide bridge) Cys-Phe-Gly-Gly-Arg-Met-Asp-Arg-Ile-Gly-Ala-Gln-Ser-Gly-Leu-Gly-Cys-Asn-Ser-Phe-Arg-Tyr (Cys1,17 disulfide bridge)