Malaria vaccine(GenVec, Inc.)

点击蓝字，关注我们 2026年初，印度东部的西孟加拉邦出现尼帕病毒感染病例，目前已有5例确诊病例，再次让这款“致命病毒”进入全球视野。作为与埃博拉同属BSL-4级的病原体，尼帕病毒的恐怖之处不仅在于40%-75%的超高病死率，更在于其全球流行28年来，至今仍无获批疫苗与特效治疗药物，成为公共卫生领域的“潜在定时炸弹”。（整理自网络） 那么，这种病毒会不会传播到中国？会不会是新冠2.0呢？ 结合国家疾控局权威通报及专家研判，尼帕病毒目前在中国不会形成大规模传播，且我国尚未发现本土尼帕病毒病例，但存在极低的境外输入风险。我国各省疾控中心均具备实验室检测能力，通过强化边境检疫、进口货物消杀、医疗机构预警等措施，实现风险可控。普通民众无需过度恐慌，只需牢记 “避接触（动物/疫区病人）、讲卫生、早就医” 即可科学防护。（来源：新华社） 在生物医药领域，可以针对这种病毒做些什么研究呢？ 目前全球尚无获批上市的尼帕病毒疫苗及特异性治疗药物，临床治疗以对症支持和并发症处理为主。现已取得的相关研究结果如下： 01 尼帕病毒的结构 尼帕病毒的结构和蛋白质的图示[1] 尼帕病毒（Nipah Virus）是副黏病毒科亨尼帕病毒属的有包膜单股负链RNA病毒，生物安全等级为4级，被世界卫生组织列为最危险的病原体之一，具有高致死性、人畜共患、可人际传播等核心特征。 NiV基因组编码六种结构蛋白，即融合蛋白(F)、附着糖蛋白(G)、基质蛋白(M)、磷蛋白(P)、核蛋白(N)和大RNA依赖性RNA聚合酶蛋白(L)。N、P和L蛋白与病毒RNA结合形成病毒核糖核蛋白(vRNP)复合物，调节病毒基因组的转录和病毒复制；NiV F蛋白高度糖基化，介导病毒进入并整合到宿主膜中，改变F蛋白的糖基化模式会减少其融合。不同的研究报告了NiV G糖蛋白上的N-聚糖充当诱饵并保护病毒包膜免受抗体介导的中和。NiV-F和NiV-G蛋白是中和抗体的主要靶标，因为它们不仅有助于病毒结合和融合，而且有助于病毒出芽。 02 寄主-病原体相互作用 尼帕病毒生命周期的图示，包括从进入宿主细胞到退出宿主细胞的所有重要阶段[1] NiV 包膜的 F/G 蛋白调控病毒附着与宿主细胞侵入。宿主细胞受体 EFNB2（上皮细胞）、EFNB3（神经元）为 G 蛋白结合配体，G 蛋白球状头部7个连续残基介导其与 EFNB2 的相互作用。受体结合后暴露 G 蛋白茎域，诱导 F 蛋白构象变化（融合前→发夹前中间体→融合后），为膜融合做准备。F 蛋白胞质尾区的 KKR 基序不依赖 pH 值促进病毒膜与宿主细胞膜融合，助力病毒粒子侵入。F 蛋白最初以 F₀前体形式存在，经 Vero 细胞中组织蛋白酶 L、MDCK 细胞中组织蛋白酶 B 水解加工，形成二硫键连接的 F₁/F₂亚基，构成成熟促融合 F 异源二聚体，其中 F₁亚基主要介导病毒膜与宿主细胞膜融合。 03 实验室诊断 尼帕病毒诊断方法的示意图[1] 早期诊断对于NiV感染极为关键，因为NiV感染的特征是严重的病例致死率。临床诊断时，使用血液、喉咙/鼻腔拭子、尿液以及感染者和动物的脑脊液作为样本。病毒学诊断通过核酸扩增检测（NAATs），例如逆转录酶聚合酶链式反应（RT-PCR），这些检测具有高灵敏度和特异性，尤其是在早期感染阶段。免疫组化和病毒分离技术也被用于确诊诊断，尽管病毒分离耗时更长。血清学检测，如酶联免疫吸附检测（ELISA），检测NiV特异性IgM和IgG抗体。此外，聚合酶链式反应（PCR）和重组酶聚合酶测定也被用于检测NiV。 04 治疗与预防 目前，尚无有效药物或疫苗针对NiV，因此患者的治疗仅限于支持性治疗和预防措施。维持呼吸功能、减少静脉血栓形成的可能性以及保持液体和电解质稳态，是检测后对抗NiV感染最重要的临床策略。此外，广谱抗生素也被施用于NiV感染者。已有多项研究致力于开发针对NiV的抗病毒药物。 表 针对尼帕病毒的抗病毒药物开发[1] https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC12214056/table/Tab2/ 酵母核 / 膜双杂交筛选 VHH 纳米抗体：助力尼帕病毒研究 01 技术原理 瑞源医学开发了一种人工合成的纳米抗体库，并构建酵母文库。以骆驼科抗体基因为基础依据纳米抗体特点，在互补决定区设计变体，在CDR1中引入了4个、CDR2中引入了1个、CDR3中引入了7个、11个、15个连续位置的高度多样化序列。经过评估在通过人工合成的纳米抗体与动物免疫获得的纳米抗体相当，经酵母表面展示及高通量测序，该文库包含了超过108个全长纳米克隆，并能在酵母表面表达和展示。抗原基因通过与 GAL4 DNA结合域(DNA-BD/诱饵)融合在体内表达，VHH克隆到 DNA-AD/猎物质粒中，经过Y2H筛选得到对抗原具有特异性的VHH抗体。[2,4] 02 应用场景 1. 针对难纯化 / 膜蛋白的 VHH 筛选 适用靶点：GPCR、离子通道、跨膜受体等难表达、难纯化的膜蛋白； 优势：酵母双杂交在胞内 / 核内完成互作，无需蛋白体外折叠与纯化，规避传统噬菌体展示对膜蛋白抗原制备的依赖。 2.疾病诊断与治疗用 VHH 开发 肿瘤标志物（如 PD-L1、EGFR）、病毒抗原（如新冠 S 蛋白、流感 HA）VHH 筛选； 获得高特异性、高亲和力纳米抗体，用于ELISA、胶体金、流式检测，或 ADC、中和抗体药物开发。 3. 胞内活性纳米抗体（intrabody）筛选 VHH 在胞内稳定性强，可作为胞内抗体干扰蛋白功能； 酵母双杂交直接在真核胞内筛选，获得的 VHH 更适配胞内环境，用于蛋白功能阻断、信号通路调控。 4. 抗原表位精细定位与结构域互作 构建抗原截断体 / 突变体库作为诱饵，筛选对应 VHH； 定位 VHH 结合的关键结构域、氨基酸位点，用于药物靶点机制研究。 5. 蛋白互作机制与小分子拮抗筛选 以 VHH 为工具，解析抗原 - 抗体互作界面； 联合小分子化合物，筛选阻断 Ag-VHH 互作的小分子，用于先导化合物发现。 滑动查看更多 03 结果展示 04 相关文献 猪流行性腹泻病毒（Porcine epidemic diarrhea virus，PEDV）是一种高度传染性的冠状病毒，可感染猪肠道上皮细胞，造成高发病率和死亡率。本研究采用酵母双杂交技术从合成构建的纳米抗体酵母文库中筛选靶向PEDV S蛋白的八个特异性VHH序列。将重组VHH基因克隆到原核表达质粒中，纯化得到的重组VHH（简称PEDV S-VHH）经间接免疫荧光（IFA）和Western blotting分析证实，这些VHH能与PEDV及其S蛋白特异性结合，中和试验表明，其中7个PEDV S-VHH对PEDV具有较强的中和活性。此外，这七种抗体的组合显示出增强的抗病毒效果。还对这些VHH与PEDV之间的结合位点进行了初步预测。本研究中描述的PEDV S-VHH具有作为预防和治疗PEDV感染的候选物的潜力。 通过酵母双杂交筛选与pGBKT 7-PEDV-S相互作用的纳米抗体[3] 瑞源医学技术赋能：一站式技术支持与定制化服务 瑞源医学专注医学服务线，整合五大核心技术平台：细胞生物学实验、互作筛选、互作验证、AI数字化技术及多组学。 致力于为医学科研工作者提供从靶点发现到功能验证的一站式解决方案，以高效、精准、可靠的技术服务， 赋能前沿科研探索！ 更多相关咨询，可添加【瑞小e】，悄悄告诉你，超多福利准备ing~ 添加 瑞小e 福利加载中！ 参考文献 [1] Madhukalya R, Yadav U, Parray H A, et al. Nipah virus: pathogenesis, genome, diagnosis, and treatment[J]. Applied Microbiology and Biotechnology, 2025, 109(1): 158. https://doi.org/10.1007/s00253-025-13474-6. [2] McMahon C, Baier A S, Pascolutti R, et al. Yeast surface display platform for rapid discovery of conformationally selective nanobodies[J]. Nature Structural & Molecular Biology, 2018, 25(3): 289-296. https://doi.org/10.1038/s41594-018-0028-6. [3] Zhang L, Miao W, Zhou M, et al. Neutralizing VHH Antibodies Targeting the Spike Protein of PEDV[J]. Veterinary Sciences, 2024, 11(11): 533. https://doi.org/10.3390/vetsci11110533. [4]https://www.bestofbest.top/about_5/namikangtishaixuan.html 滑动查看更多