ZW327

近日， Zymeworks在AACR上报告了其开发的ZW327的最新研究成果。ZW327简介ZW327是一种靶向人淋巴细胞抗原6家族成员E（Ly6E）的抗体偶联药物（ADC）。由一种新型的人源化Fc沉默IgG1抗体（hu10E02）组成，通过内源性二硫键与一种专有的拓扑异构酶1抑制剂ZD065191（一种喜树碱（CPT）衍生物）偶联，药物抗体比（DAR）为8。ZW327中的连接子由马来酰亚胺己酰（MC）锚定基团和GGFG-氨基甲基（AM）可被蛋白酶切割的序列组成。图1. ZW327结构示意图ZW327的作用机制ZW327与靶点结合后，通过受体介导的内吞作用进入细胞，释放出具有旁观者活性的ZD06519，诱导Ly6E阳性细胞和通过旁观者效应杀死的Ly6E阴性细胞的死亡。Ly6E在许多实体瘤中过表达Ly6E在一些存在高度未满足医疗需求的适应症中过表达，包括非小细胞肺癌（肺腺癌+肺鳞癌）、三阴性乳腺癌、头颈部鳞状细胞癌以及胃肠道癌症：食管鳞状细胞癌、胰腺导管腺癌、胃食管交界处癌、胆管癌、结肠癌和胃癌。在正常组织中，Ly6E的表达量极少。图2.（A）多种癌症适应症中Ly6E的表达情况。低、中、高Ly6E表达的划分依据是染色的频率和强度，n=患者样本数量。NSCLC：非小细胞肺癌，LUAD：肺腺癌，LUSC：肺鳞状细胞癌，TNBC：三阴性乳腺癌，HNSCC：头颈部鳞状细胞癌，GI：胃肠道癌症，ESCC：食管鳞状细胞癌，PDAC：胰腺导管腺癌，GEJ：胃食管交界处癌，CHOL：胆管癌，COAD：结肠腺癌，STAD：胃腺癌。（B）从部分适应症的临床组织微阵列中选取的中、高Ly6E表达的代表性免疫组化图像。（C）每种组织类型中3名供体样本的正常组织中Ly6E的表达情况。由病理学家进行H评分。从上图可以看出，在不同适应症中，54%-97%的患者有Ly6E表达。在部分免疫系统器官中Ly6E表达较低，在大脑和小脑中表达中等。ZW327的可开发性表1. ZW327可开发性评估总结。通过AC-SINS和NS-ELISA分别评估的单克隆抗体自身聚集和非特异性结合均在可接受范围内。&曲妥珠单抗HIC保留时间为5分钟；#主要异构体；测试了FcγRI、FcγRIIIa、FcγRIIa、FcγRIIb。ZW327在不同Ly6E表达水平的PDX（患者来源异种移植）和CDX（细胞系来源异种移植）模型中展现出强大的抗肿瘤活性，优于基准药物DLYE5953A在三阴性乳腺癌（TNBC）和非小细胞肺癌（NSCLC）模型中，无论Ly6E表达水平是低、中还是高，在测试的14个模型中有13个模型在单剂量6mg/kg时观察到完全缓解（图中展示了8个）。图3. 在（A）患者来源异种移植（PDX）模型和（B）裸鼠的非小细胞肺癌（NSCLC）和三阴性乳腺癌（TNBC）细胞系来源异种移植（CDX）模型中，评估了ZW327的体内疗效，每组PDX模型n=3，CDX模型n=6。所有图像放大倍数为10倍。肿瘤体积曲线图。如果一个组中超过20%的小鼠被安乐死，则排除该组的数据点。ZW327、hu10E02和Palivizumab（同型抗体偶联药物对照）用*标记，表示含有野生型Fc，DLYE5953A：hu9B12.v12-MMAE，药物抗体比（DAR）为4。还额外测试了6种模型，ZW327在6mg/kg剂量下主要导致肿瘤消退（CDX：NCI-H2228、SW900、HCC156和PDX：BR1282、LU0876、LU2071）。基于ZW327的临床前耐受性特征，预计6mg/kg剂量在临床上具有相关性。ZW327的ZD06519有效载荷和新型抗体使其能够在多种实体瘤适应症中实现强大的细胞毒性。在三阴性乳腺癌（TNBC）、非小细胞肺癌（NSCLC）以及更多适应症中，无论Ly6E表达水平如何，均展现出强大的靶向特异性活性。图4.（A）ZW327对表达不同水平Ly6E的球体（3D）癌细胞系的体外细胞毒性活性。靶向特异性通过与Palivizumab的不同敏感性以及在Ly6E阴性细胞系中无活性来体现。（B）基于ZD06519和MMAE的抗体偶联药物（ADCs）在8种适应症中的pIC50值（3D）。ZW327、hu10E02和Palivizumab用*标记，表示含有野生型Fc。ZW327的新型抗体在与基准单克隆抗体hu9B12.v12相比时，能够实现更优的结合、内化以及对球体（3D细胞模型）的穿透。此外，ZW327还展现出旁观者效应活性。图5.（A）通过流式细胞术检测单克隆抗体与HCC1569和NCI-H1650细胞的结合。（B）AF488标记的抗体在5nM和37℃条件下24小时后内化进入HCC1569和NCI-H1650细胞。（C）通过高含量成像技术在24小时、37℃后对球体层进行50nm的定量分析，检测AF488标记的抗体偶联药物（ADCs）的穿透情况。（D）ZW327的旁观者活性，通过与Ly6E阳性细胞HCC1569共培养时，Ly6E阴性细胞NCI-H446-LY6E KO的存活率降低来展示。（E）通过流式细胞术检测单克隆抗体与稳定表达人源和食蟹猴源LY6E的HEK293-6E细胞系的结合，并通过Kinexa技术确定Kd值（细胞在4℃下以不同细胞密度与单克隆抗体在5nM和0.5nM浓度下孵育7天），hu10E02含有野生型Fc。ZW327在非人灵长类动物（NHP）中以60 mg/kg的剂量表现出良好的耐受性。在一项2剂量的非GLP非人灵长类动物（NHP）毒理学研究中，最大耐受剂量（MTD）≥60 mg/kg。临床观察显示，在30 mg/kg和60 mg/kg剂量下，仅出现给药后体重轻微下降和食物消耗减少。在30 mg/kg和60 mg/kg剂量下，血液学和组织病理学结果被认为是轻微的，主要反映在淋巴组织中淋巴细胞数量减少。表2. 接受每三周两次剂量（30或60 mg/kg）ZW327治疗的非人灵长类动物的临床病理学和组织病理学总结。ZW327具有良好的药代动力学（PK）特性。ZW327在裸鼠CDX模型中的总抗体药代动力学（PK）中保持了良好的药代动力学（PK）特性。在非人灵长类动物（NHP）中的总抗体药代动力学（PK）中，ZW327显示了在两种剂量下均具有良好的药代动力学（PK）特性，半衰期（T1/2）为5.1-7.6天。结论ZW327是一种靶向Ly6E的抗体偶联药物（ADC），其新型抗体和专有的拓扑异构酶1抑制剂有效载荷使其具有独特性。ZW327是首个针对Ly6E的ADC，在多种适应症中具有潜力，包括非小细胞肺癌（NSCLC）、三阴性乳腺癌（TNBC）、头颈部鳞状细胞癌（HNSCC）以及胃肠道癌症（结肠癌（COAD）、胆管癌（CHOL）、胃癌（STAD）、胃食管交界处癌（GEJ）、食管鳞状细胞癌（ESCC）），包括胰腺导管腺癌（PDAC）。在低、中、高Ly6E表达的CDX和PDX模型中，经ZW327治疗后观察到强大的抗肿瘤活性。在非人灵长类动物中，ZW327具有良好的药代动力学特性和耐受性，其暴露水平高于预计对ZW327有效的水平。ZW327有潜力改善DLYE5953A在表达Ly6E的癌症中报告的临床活性。参考文献1. Petersen et al. Design and evaluation of ZD06519, a novel camptothecin payload for antibody drug conjugates. Mol Cancer Ther. 2024 May 2; 23(5):606-6182. US9290578B23. Tolaney et al. A Phase I Study of DLYE5953A, an anti-Ly6E antibody covalently linked to monomethyl auristatin E, in patients with refractory solid tumors. Clin Cancer Res. 2020 Nov 1; 26(21): 5588-5597欢迎感兴趣的朋友进群讨论，群二维码如下：推文用于传递知识，如因版权等有疑问，请于本文刊发30日内联系医药速览。原创内容未经授权，禁止转载至其他平台。有问题可发邮件至yong_wang@pku.edu.cn获取更多信息。©2021 医药速览 保留所有权利往期链接“小小疫苗”养成记 | 医药公司管线盘点 人人学懂免疫学| 人人学懂免疫学（语音版）综述文章解读 | 文献略读 | 医学科普|医药前沿笔记PROTAC技术| 抗体药物| 抗体药物偶联-ADC核酸疫苗 | CAR技术| 化学生物学温馨提示医药速览公众号目前已经有近12个交流群（好学，有趣且奔波于医药圈人才聚集于此）。进群请扫描上方二维码，备注“姓名/昵称-企业/高校-具体研究领域/专业”，此群仅为科研交流群，非诚勿扰。简单操作即可星标⭐️医药速览，第一时间收到我们的推送①点击标题下方“医药速览”  ②至右上角“...”  ③点击“设为星标