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抗癌新靶点ROR1 从基础研究到临床转化的大汇总 引言 默沙东在第66届ASH会议上首次以口头报告形式公布了Zilovertamab vedotin在弥漫性大b细胞淋巴瘤的最新临床数据。这款ROR1 ADC在1.75 mg/kg剂量组中，联合利妥昔单抗加环磷酰胺、多柔比星和泼尼松治疗先前未经治疗的DLBCL患者，实现了100% 的完全缓解率。 ROR1是受体酪氨酸激酶样孤儿受体家族成员，在正常组织低表达或不表达，在慢性淋巴细胞白血病、乳腺癌、卵巢癌、黑色素瘤、肺腺癌等多种恶性肿瘤中高表达，这种在肿瘤组织和正常组织中的差异表达模式，使ROR1成为肿瘤特异性治疗极具吸引力的靶点。 ROR1 恶性肿瘤 临床进展 01 R0R1的结构概述 表1 基于激酶结构域序列的RTK亚家族分类 1 ROR1所属家族及特性：ROR1属于受体酪氨酸激酶样孤儿受体家族，该家族是受体酪氨酸激酶（RTKs）的一个亚家族，以其保守且独特的激酶域为特征。ROR1最初因发现时配体未知被视为孤儿受体，后证实其通过与Wnt家族蛋白结合并激活来发挥功能，在细胞间通讯、细胞内信号传导以及细胞增殖、分化、转移和存活的调控中具有重要作用。 图1 ROR1和ROR2在人类激酶组系统发育树中的位置 2 ROR1的结构与定位：ROR1编码基因位于染色体1p31.3，全长2812bp，编码含937个氨基酸的I型跨膜受体酪氨酸酸激酶蛋白。其胞外部分包含免疫球蛋白样结构域、卷曲蛋白结构域（FZD）和近膜kringle结构域，FZD结构域参与Wnt通路信号传导，kringle结构域有助于识别Wnt并结合大分子结构；胞内部分有酪氨酸激酶结构域（TKD）、两个富含丝氨酸/苏氨酸结构域（S/TRD）和一个富含脯氨酸结构域（PRD）。 图2 ROR1蛋白的结构 3 ROR1的氨基酸序列 Extracellular Helical Cytoplasmic 30-406 407-427 428-937 4 ROR1的激酶活性：ROR1的激酶活性存在争议。因激酶结构域保守基序存在替换，缺乏ATP结合能力和催化活性，ROR1被归类为假激酶1。 图3 ROR1与ROR2、FLT3、ERBB-2和MET的序列比对 5 ROR1的亚型情况：拥有四种亚型，分别为完整细胞膜受体(105kD)、糖基化完整细胞膜受体 (130kD)、完整细胞膜受体二聚体形式蛋白(260kD)和截短变体(64kD)。其中截短形式主要分布在细胞核，低表达或难以检测，与肿瘤发生和严重程度无关；而完整ROR1在多种肿瘤组织中表现出高特异性，是研究的重点对象。 02 ROR1介导的信号通路 图4 Wnt5a和YAP/TAZ信号通路图 Wnt5a信号通路 ROR1主要通过非典型Wnt信号通路发挥作用，与Wnt5a结合后激活NF-κB信号通路，激活的ROR1/Akt/p65通路会促进促炎因子（如IL-6）的分泌，推动肿瘤细胞的迁移、侵袭、上皮-间质转化（EMT）和肿瘤转移。 YAP/TAZ信号通路 Wnt5a与ROR1/FZD复合物结合后，通过结合Gα12/13激活RhoA，抑制Lats1/2活性，导致YAP/TAZ去磷酸化并转移至细胞核。在细胞核内，YAP/TAZ与TEAD结合，诱导细胞增殖、干细胞自我更新以及与肿瘤发生相关基因的转录。同时，YAP/TAZ转录增加会进一步上调ROR1表达。该通路与肿瘤发生和化疗耐药密切相关。 03 ROR1的表达和功能 在不同组织中的表达差异 ROR1在胚胎发育过程中广泛表达，敲除ROR1基因会导致胚胎致死，这表明它在胚胎发育中起着不可或缺的作用。在成年个体中，ROR1在大多数产后组织中不表达，但在脂肪组织中高表达，在部分内分泌腺、胃肠道组织以及未成熟B淋巴细胞中也有表达。 图5 ROR1的人类蛋白质组的基于组织的图谱 在多种癌症中的高表达 ROR1在大多数癌症中均有表达，但在不同癌症类型中的特异性有所差异。 图6 ROR1在28种癌症中的表达 促进肿瘤细胞的增殖、存活和迁移 在CLL中，Wnt5a/ROR1激活Rho-GTPaseRhoA和Rac1，还诱导HS1的酪氨酸磷酸化，促进细胞迁移，同时激活NF-κB信号通路，调节促炎细胞因子IL-6的自分泌，其表达水平与CLL疾病进展紧密相关。在肺癌中，ROR1参与激活c-Src和MET，抑制肿瘤细胞凋亡，还作为cavin-1和caveolin-1的支架蛋白激活AKT，但具体作用机制仍需进一步研究。 与癌症恶性程度及预后的关系 在多种癌症中，ROR1的高表达与肿瘤的恶性程度及患者预后不良相关。在卵巢癌患者中，ROR1高表达的患者复发率高达约85%，中位生存期较短。在肺癌患者中，肺腺癌组织中ROR1蛋白表达显著高于癌旁非肿瘤组织，且晚期患者和淋巴结转移阳性患者的ROR1表达水平更高。在黑色素瘤中，ROR1异常表达与患者复发后生存率低相关，同时可促进肿瘤细胞的生长、迁移。在乳腺癌中，ROR1促进PI3K/AKT通路的激活，高表达ROR1与疾病的更严重进展相关。此外，在结直肠癌、胰腺癌、子宫内膜癌等多种癌症中，均发现ROR1高表达与患者预后不良存在关联。 图7 ROR1信号传导和肿瘤细胞抑制的靶向治疗 04 ROR1靶向药物研发进展 表2  ROR1靶向药物研发进展 单克隆抗体 mAbs可直接阻断ROR1的配体结合，激活免疫系统来清除肿瘤细胞。目前已开发出多种针对ROR1的mAbs，其中Cirmtuzumab是唯一进入临床试验的此类药物。在CLL患者的I期临床试验中，Cirmtuzumab显示出安全性和有效性，可减少肿瘤细胞数量，且针对乳腺癌或CLL/MCL患者的Ib期和I/II期联合试验正在进行中，其他抗体如UC-961也在探索中。 图8 Cirmtuzumab的作用机制 抗体偶联药物 ADC药物在多种血液肿瘤和实体瘤的临床试验中评估安全性和抗肿瘤活性，初步数据显示有潜力。如VLS-101，由Cirmtuzumab和单甲基奥瑞他汀E（MMAE）组成，能有效靶向ROR1阳性恶性细胞，诱导细胞死亡，其针对肺癌、乳腺癌和血液系统恶性肿瘤的临床试验正在进行中；NBE-002是另一种ADC，由针对ROR1的人源化mAb与PNU-159682的衍生物结合而成，在多种肿瘤的患者来源异种移植模型中显示出显著抗肿瘤活性，相关临床试验也在开展。 图9 VLS-101的作用机制 双特异性T细胞衔接器 BiTEs可结合T细胞和肿瘤细胞，在临床前和试验中展现出前景。BiTE的代表药物NVG-111，可利用T细胞的细胞毒性靶向ROR1阳性恶性细胞，在CLL和实体瘤的临床前研究中展现出有前景的T细胞介导的细胞毒性，目前针对CLL和MCL的临床试验正在进行。 图10 NVG-111作用机制 CAR-T 细胞疗法 CAR-T细胞疗法对表达ROR1的恶性细胞具有强大的效力和特异性，已在ROR1阳性血液系统和实体恶性肿瘤患者的临床试验中进行评估。ROR1 CAR-T可使用多种单克隆抗体（如2A2、R12、XBR1-402等）来源的scFv构建，通过慢病毒非复制载体或转座子系统进行基因递送。 图11 靶向ROR1的CAR-T 小分子抑制剂疗法 由于对ROR1激酶活性的认识不足，针对它的小分子抑制剂开发相对滞后。不过，已发现一些有潜力的化合物。KAN0439834能抑制CLL和胰腺癌细胞的存活以及ROR1的磷酸化，其诱导CLL细胞凋亡的能力与venetoclax相当，在此基础上开发的第二代抑制剂KAN0441571C在斑马鱼模型中对抑制DLBCL有更好的效果。此外，ARI-1靶向ROR1的细胞外CRD，阻断Wnt5a结合，可抑制非小细胞肺癌细胞生长；strictinin能结合ROR1的细胞内结构域，抑制乳腺癌细胞的AKT磷酸化和存活，但这些化合物的作用机制还需进一步研究。 表3 用于调节ROR1活性的小分子 05 ROR1在不同癌症中的研究进展 血液肿瘤 慢性淋巴细胞白血病（CLL）：ROR1是CLL的特异性标志物，其高表达与疾病进展和不良预后密切相关，并增强肿瘤细胞的耐药性。目前，多种针对ROR1的治疗药物在CLL治疗中展现出前景，联合治疗可降低耐药风险。 套细胞淋巴瘤（MCL）：ROR1在MCL中高表达，沉默ROR1基因能够抑制MCL细胞的生长。目前多种治疗MCL的方案中，靶向ROR1的治疗策略，如联合用药和新型疗法等正在研究，有望改善治疗效果。 弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）：ROR1在DLBCL中表达与不良预后相关，敲低ROR1可抑制肿瘤细胞生长，针对ROR1的治疗有望改善DLBCL患者预后，多种靶向ROR1的治疗手段正在进行临床前和临床试验评估。 多发性骨髓瘤（MM）：MM治疗存在挑战，ROR1可作为潜在治疗靶点，未来有望为MM患者提供更多的治疗选择，但目前针对MM的ROR1靶向治疗研究较少。 急性髓系白血病（AML）：部分AML细胞表达ROR1，抗ROR1单克隆抗体在部分样本中有显著反应，ROR1靶向治疗在AML中可能有效。 表4 血液系统恶性肿瘤的ROR1靶向治疗 实体瘤 乳腺癌：ROR1与肿瘤细胞生长相关，Wnt5a可与ROR1结合，激活PI3K/AKT/CREB通路，促进癌细胞生存、增殖和迁移，化疗还会增加ROR1水平。 卵巢癌：ROR1高表达与患者生存期短有关，高表达ROR1的患者中位生存期较短，这与癌症干细胞（CSCs）有关，CSCs对化疗耐药且具有转移表型，靶向ROR1的治疗可抑制癌细胞自我更新和移植能力； 肺癌：ROR1高表达与恶性细胞特征及不良预后相关，沉默ROR1可抑制肿瘤细胞增殖。 黑色素瘤：ROR1增强AKT激活，参与EMT过程，增加间质标记物波形蛋白和N-钙粘蛋白的表达。 胰腺癌：在循环肿瘤细胞（CTCs）中，ROR1表达水平较高，且与CTCs的增殖和侵袭能力相关，敲低ROR1可抑制CTCs的迁移和侵袭。 06 ROR1靶向疗法的未来展望 ROR1的翻译后修饰影响其表达和降解，利用PROTAC技术可靶向降解ROR1，相关研究有望克服耐药机制，提高治疗效果。ROR1是有潜力的癌症治疗靶点，但仍面临增强靶向特异性、明确下游信号通路等问题。未来可从个性化治疗、联合治疗策略、开发新疗法、免疫调节、早期检测和监测等方面开展研究，推动ROR1靶向治疗的发展。 关于仁域生物 成都仁域生物成立于2019年1月，是一家专注基因工程抗体技术和天然抗体库开发的公司，拥有优化的噬菌体展示抗体库技术和现代化的骆驼/羊驼养殖免疫基地。 公司核心技术平台包括全球最大的5000+天然驼源纳米抗体库(总库容＞3×10^12)、肿瘤细胞系免疫的骆驼免疫库、万亿级大容量全人源噬菌体展示scFv抗体库(总库容＞1×10^12)。 可为客户提供14天、100%成功率的先导抗体分子发现服务，彻底解决传统抗体定制的周期长、失败率高、成本高三大难题。目前已经成功完成300+靶点抗体筛选项目！ 科研专用—万亿级天然抗体库产品 （一步到位，轻松搭建基因工程抗体平台） 产品限量供应 protocol 获取 / 产品咨询 邮箱｜find@renyubio.com 电话｜19136178673 地址｜成都市经开区科技产业孵化园 参考文献 Tigu AB, Munteanu R, Moldovan C, Rares D, Kegyes D, Tomai R, Moisoiu V, Ghiaur G, Tomuleasa C, Einsele H, Gulei D, Croce CM. 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摘要：双特异性抗体作为生物医药领域的明星分子，全球超过85个项目正处于临床开发阶段，覆盖癌症、炎症性疾病、血友病等多个疾病领域。这些抗体通过同时靶向两个不同的抗原或表位，展现出独特的治疗潜力。本文综述了双特异性抗体的全球管线现状，分析了主要靶点和作用机制，并探讨了临床开发中的挑战与市场前景。随着技术的不断进步和临床研究的深入，双特异性抗体有望为患者带来更多的治疗选择，并改善治疗效果，预示着全球管线和靶点研究的新纪元。1. 概述1.1 定义与特点 双特异性抗体（Bispecific Antibodies，BsAbs）是一种人工设计的抗体，能够同时特异性结合两种不同的抗原或同一抗原的两个不同表位。这种独特的双靶向能力使得双特异性抗体在治疗多种疾病，尤其是癌症方面展现出巨大的潜力。与单克隆抗体相比，双特异性抗体的主要特点包括： 高度特异性：双特异性抗体可以同时靶向两个不同的分子，提高治疗的精准度。 增强疗效：通过同时激活或抑制两个信号通路，双特异性抗体可能增强治疗效果。 创新作用机制：双特异性抗体可以桥接免疫细胞和肿瘤细胞，如T细胞重定向双特异性抗体，增强免疫细胞对肿瘤的杀伤能力。1.2 全球管线现状 截至目前，全球有超过85个双特异性抗体处于临床开发阶段，覆盖了广泛的疾病领域。以下是全球双特异性抗体管线的一些关键数据和趋势： 癌症治疗：癌症是双特异性抗体临床开发的主要领域，约占所有管线的86%。这些双特异性抗体主要靶向血液学恶性肿瘤和实体瘤，其中一些已经进入后期临床试验阶段。 非癌症适应症：除了癌症，双特异性抗体也被开发用于治疗炎症性疾病、血友病等非肿瘤疾病。例如，Emicizumab是首个获批用于治疗血友病的双特异性抗体。 技术平台多样性：已有20多个不同的商业化技术平台用于双特异性抗体的开发，这些平台通过不同的设计策略解决链相关问题，提高了双特异性抗体的功能性和稳定性。 临床研究增长：近年来，全球双特异性抗体的临床研究数量逐年增加，反映了该领域的活跃度和发展潜力。 市场潜力：根据市场分析，双特异性抗体市场规模在2014-2022年间从0.03亿美元增长至57.93亿美元，显示出强劲的增长势头。 综上所述，双特异性抗体因其独特的治疗潜力和广泛的应用前景，已成为全球生物医药研发的热点领域。随着技术的进步和临床研究的深入，预计未来将有更多的双特异性抗体药物获批上市，为患者提供更多的治疗选择。2. 临床应用2.1 癌症治疗 双特异性抗体在癌症治疗领域的应用占据了其临床管线的主要部分，全球超过85个双特异性抗体中约86%针对癌症治疗。这些双特异性抗体的开发反映了其在提高治疗效果和克服耐药性方面的潜力。 血液学恶性肿瘤：在血液学恶性肿瘤治疗中，双特异性抗体主要靶向CD19、CD20、CD33等已知的B细胞或髓系抗原。例如，靶向CD19和CD3的blinatumomab已获FDA批准用于治疗急性B淋巴细胞白血病。此外，还有约14个双特异性抗体正在临床上接受评估，包括靶向HER2、EGFR变体(v)III、PSMA和EpCAM等实体瘤抗原的bsTCEs。 实体瘤治疗：双特异性抗体在实体瘤治疗中的应用也在不断扩展。例如，靶向HER2的双特异性抗体ZW25正在开发中，旨在通过同时结合HER2上的两个非重叠表位来增强结合强度和治疗效果。此外，一些双特异性抗体如JNJ-61186372和Zenocutuzumab正在临床研究中，它们联合靶向多个致癌受体酪氨酸激酶(RTKs)，如EGFR和HER2，以克服耐药性问题。 T细胞重定向：约一半的临床阶段双特异性抗体是T细胞参与的双特异性抗体(bsTCEs)，它们通过结合T细胞上的CD3ε激活T细胞，进而杀伤肿瘤细胞。尽管基于CD3的bsTCEs具有良好的前景，但也存在潜在的高毒性和疗效限制问题，这促使研究者探索招募特定的T细胞亚群来提高治疗效果。2.2 非癌症适应症 双特异性抗体的应用不仅限于癌症治疗，它们也在非癌症适应症中展现出治疗潜力，如炎症性疾病、血友病等。 炎症性疾病：双特异性抗体在炎症性疾病的治疗中也一直是研究的重点。这些双特异性抗体通过同时靶向炎症介质和免疫细胞上的受体，以期达到更好的抗炎效果。 血友病：2017年，FDA批准了emicizumab，这是首个用于治疗血友病的双特异性抗体。Emicizumab靶向凝血因子X和因子IXa，通过模拟凝血级联反应中的天然凝血因子VIIIa的功能，为A型血友病患者提供了新的治疗选择。 传染性疾病：双特异性抗体也被开发用于传染性疾病治疗，如HIV感染和乙型肝炎病毒。这些双特异性抗体旨在将CD8+ T细胞重定向到表达病毒表面抗原的被感染细胞，增强病毒特异性免疫反应。 再生医学：基于双特异性抗体的重定向策略正在研究中，以增强干细胞和祖细胞的靶向递送，改善组织再生的效率。 综上所述，双特异性抗体的临床应用范围正在不断扩大，它们在癌症和非癌症适应症中的治疗潜力正逐步被发掘。随着临床研究的深入和新药上市，预计双特异性抗体将为患者提供更多的治疗选择，并改善治疗效果。3. 靶点分析3.1 主要靶点介绍 双特异性抗体的靶点选择是其研发过程中的关键环节，目前全球临床管线中的双特异性抗体涉及多种靶点，以下是一些主要的靶点介绍： CD19和CD3：CD19是B细胞表面的标志物，而CD3是T细胞表面的标志物。这一组合的双特异性抗体，如blinatumomab，通过将T细胞重定向至B细胞，增强了对B细胞相关癌症的免疫反应。目前，这类双特异性抗体在治疗急性B淋巴细胞白血病和非霍奇金淋巴瘤中显示出显著效果。 HER2：HER2是一种在某些乳腺癌和胃癌细胞表面过表达的受体酪氨酸激酶。靶向HER2的双特异性抗体，如ZW25，通过同时结合HER2上的两个不同表位，增强了对肿瘤细胞的杀伤效果。 EGFR和HER3：这两个靶点在多种实体瘤中表达，尤其是在非小细胞肺癌中。双特异性抗体通过同时阻断这两个靶点，可以减少肿瘤逃逸的可能性，并提高治疗效果。 CD38：CD38是一种在多发性骨髓瘤细胞表面高度表达的抗原。双特异性抗体通过靶向CD38，可以增强对多发性骨髓瘤的治疗效果。 PSMA：前列腺特异性膜抗原（PSMA）在前列腺癌中高度表达。靶向PSMA的双特异性抗体正在开发中，用于提高对前列腺癌的治疗效果。3.2 靶点选择的科学依据 双特异性抗体的靶点选择基于以下几个科学依据： 疾病生物学：靶点的选择通常基于对疾病生物学的深入理解，包括疾病相关抗原的表达模式、信号通路和疾病进展过程中的关键分子。 临床需求：选择的靶点应满足临床上未被满足的治疗需求，特别是在单克隆抗体治疗中出现耐药性或疗效不足的情况下。 免疫学机制：双特异性抗体的设计常常基于免疫学机制，如通过T细胞重定向来增强对肿瘤的免疫反应，因此选择的靶点需要能够促进这种免疫反应。 药物动力学和药效学：靶点的选择还需考虑药物动力学和药效学特性，确保双特异性抗体能够在体内达到有效的浓度，并发挥预期的生物学效应。 安全性和耐受性：选择的靶点应具有较好的安全性和耐受性，以减少潜在的副作用和免疫原性。 靶点验证：靶点的选择通常基于大量的前期研究，包括实验室研究、动物模型和早期临床试验，以验证靶点的有效性和安全性。 综上所述，双特异性抗体的靶点选择是一个复杂的过程，涉及多学科的知识和技术创新。随着对疾病生物学和免疫学机制的进一步理解，预计未来将有更多的创新靶点被发掘，并应用于双特异性抗体的开发中。4. 技术平台4.1 现有技术平台概览 双特异性抗体的开发依赖于创新的技术平台，这些平台通过解决双特异性抗体设计和生产中的特定挑战，使得双特异性抗体的商业化成为可能。以下是一些全球范围内广泛使用的技术平台概览： BiTE®平台：由Amgen开发，BiTE®平台通过串联单链抗体(scFv)的形式，将两个不同的抗原结合位点连接在一起，代表药物有Blincyto，用于治疗急性B淋巴细胞白血病。 DuoBody®平台：由Genmab开发，DuoBody®平台能够产生类似于天然IgG的双特异性抗体，通过Fab臂交换技术实现，已成功应用于Rybrevant和Tecvayli等药物的开发。 CrossMAb®平台：由Roche开发，CrossMAb®平台通过分子模块交换和Knob-into-hole技术解决轻重链错配问题，代表药物有Hemlibra，用于治疗A型血友病。 DART®平台：由MacroGenics开发，DART®平台产生的双特异性抗体由两条多肽链结合形成，通过二硫键提高稳定性，并可通过融合Fc片段延长半衰期。 TandAb平台：由Affimed开发，TandAb平台产生的四价双特异性抗体，针对两种抗原各有两个结合位点，结构为Fv1-Fv2-Fv2-Fv1。4.2 技术平台的比较与选择 在选择双特异性抗体的技术平台时，需要考虑多个因素，包括平台的成熟度、产品的成药性、生产效率、临床效果和安全性等。以下是对不同技术平台的比较： 成熟度与批准情况：BiTE®、DuoBody®和CrossMAb®等平台已有药物获批上市，显示出较高的成熟度和可行性。这些平台在临床效果和安全性方面已有验证，为新药开发提供了可靠的基础。 生产效率与成本：DuoBody®和CrossMAb®等平台由于能够产生类似于天然IgG的双特异性抗体，可能在生产效率和成本控制方面具有优势。这些平台的生产工艺相对成熟，有助于降低生产成本和提高产量。 临床效果与安全性：不同技术平台产生的双特异性抗体在临床效果和安全性方面可能存在差异。例如，BiTE®平台的Blincyto由于其较短的半衰期，需要频繁给药，可能影响患者依从性。而DART®平台通过融合Fc片段延长了半衰期，改善了这一问题。 创新性与适应症：一些新兴的技术平台，如TandAb平台，提供了新的结构设计，可能适用于特定的适应症和创新治疗机制。这些平台的创新性为双特异性抗体的开发提供了新的可能性。 综上所述，技术平台的选择应基于具体的治疗目标、药物特性和市场需求。随着双特异性抗体领域的不断发展，预计未来将有更多创新的技术平台出现，为双特异性抗体的开发提供更多选择。5. 机制与作用模式5.1 细胞桥接机制 双特异性抗体的细胞桥接机制是其最引人注目的作用模式之一，尤其在癌症治疗领域显示出巨大潜力。这一机制主要通过以下方式发挥作用： T细胞重定向：双特异性抗体能够将T细胞重定向至肿瘤细胞，通过同时结合T细胞上的CD3ε和肿瘤细胞表面的特异性抗原，如CD19或HER2。这种物理连接激活T细胞，导致其释放细胞毒素，进而杀伤肿瘤细胞。目前，约有40多个T细胞重定向双特异性抗体正处于临床开发阶段，用于治疗血液学肿瘤和实体肿瘤。 免疫细胞募集：除了T细胞，双特异性抗体还可以桥接其他类型的免疫细胞，如自然杀伤(NK)细胞，通过结合NK细胞表面的CD16与肿瘤细胞表面的抗原，增强免疫细胞对肿瘤的识别和杀伤能力。 疗效与安全性：细胞桥接机制的双特异性抗体在提高治疗效果的同时，也面临着潜在的安全性挑战。例如，由于T细胞的广泛激活可能导致的细胞因子释放综合征(CRS)，需要通过剂量控制和监测来管理。5.2 受体交联机制 双特异性抗体的受体交联机制涉及将两个或多个受体或配体拉近，从而激活或抑制特定的信号通路。这一机制在多种疾病治疗中显示出应用潜力： 信号通路抑制：在实体瘤治疗中，双特异性抗体可以通过同时靶向两个不同的受体酪氨酸激酶(RTKs)，如EGFR和HER2，阻断肿瘤生长和存活的信号通路。这种策略有助于克服单靶点治疗中出现的耐药性问题。 免疫检查点调节：双特异性抗体还可以同时靶向两个免疫检查点，如PD-1和CTLA-4，以增强T细胞的活化和抗肿瘤免疫反应。这种双重阻断策略已经在一些早期临床研究中显示出潜在的疗效。 功能性复合体形成：双特异性抗体通过同时结合同一抗原的两个不同表位，如HER2的两个非重叠表位，可以形成功能性复合体，增强对肿瘤细胞的杀伤效果。这种Biparatopic双特异性抗体在提高治疗效果的同时，也减少了脱靶效应的风险。 综上所述，双特异性抗体的细胞桥接和受体交联机制为其在多种疾病治疗中提供了新的策略和可能性。随着临床研究的深入和新药上市，预计这些机制将进一步推动双特异性抗体在精准医疗中的应用。6. 临床开发挑战6.1 安全性与有效性评估 双特异性抗体的临床开发过程中，安全性与有效性评估是关键环节。这些评估不仅决定了药物能否顺利进入市场，也直接影响患者的治疗结果。 临床试验设计：全球超过85个双特异性抗体处于临床开发阶段，每个抗体的临床试验设计都需要精确评估其安全性和有效性。例如，针对T细胞重定向双特异性抗体，临床试验通常包括剂量递增研究以确定最大耐受剂量和合理的生物效应水平（MABEL）。 剂量确定：剂量确定是评估双特异性抗体安全性和有效性的重要步骤。通过群体药代动力学（Population PK, PPK）模型，可以将多个研究的数据汇集，以预测药物在人体中的药代动力学行为，从而确定合适的剂量。 疗效评估：疗效评估通常依赖于生物标志物和临床终点。例如，对于治疗癌症的双特异性抗体，客观缓解率（ORR）和无进展生存期（PFS）是常用的疗效评估指标。而对于治疗非癌症疾病的双特异性抗体，如血友病的emicizumab，年出血率（ABRs）和凝血因子活性是关键的疗效评估指标。 安全性监测：安全性监测包括对不良事件（Adverse Events, AEs）的记录和分析。特别关注的是免疫相关不良事件，如细胞因子释放综合征（CRS），这在T细胞重定向双特异性抗体中较为常见。通过严格的监测和适时的干预措施，可以管理这些风险。6.2 免疫原性问题 双特异性抗体作为治疗性蛋白，其免疫原性问题一直是临床开发中的挑战。 抗药抗体（ADA）的形成：双特异性抗体进入体内后可能引发免疫反应，产生抗药抗体。ADA分为中和抗体（nAbs）和非中和抗体（non-nAbs），它们对药物的疗效和安全性有重要影响。例如，blinatumomab的ADA发生率为1%，而catumaxomab的所有患者均产生ADA，但并未显著影响治疗效果。 免疫原性风险因素：双特异性抗体的免疫原性与药物结构、患者的免疫状态、给药途径等因素相关。例如，含有外源序列的双特异性抗体可能具有更高的免疫原性风险。 免疫原性评估：在临床前和临床研究中，需要对双特异性抗体的免疫原性进行评估。这包括监测ADA的发生率、滴度和对药物PK/PD的影响。对于已上市的双特异性抗体，如emicizumab，ADA的监测显示其免疫原性较低，但仍需持续关注。 免疫原性管理：为了降低免疫原性风险，可以采取多种策略，如提高抗体的人源化程度、优化给药方案和使用免疫抑制剂。此外，治疗药物浓度监测（TDM）也是一种有效的管理手段，可以帮助调整给药方案，以保持药物在治疗窗内，减少免疫原性风险。 综上所述，双特异性抗体的临床开发面临着安全性与有效性评估以及免疫原性问题的挑战。通过精心设计的临床试验、严格的安全性监测和免疫原性评估与管理，可以有效地推进双特异性抗体的研发进程，并最终为患者带来新的治疗选择。7. 市场前景与投资趋势7.1 市场前景分析 双特异性抗体的市场前景备受业界关注，其在全球管线中的活跃度和多样化的治疗领域预示着广阔的市场潜力。 市场规模增长：根据华经产业研究院的数据，全球双特异性抗体市场规模从2014年的0.03亿美元增长至2022年的57.93亿美元，年复合增长率高达45.2%。预计到2024年，中国双特异性抗体行业市场规模将达到50亿元人民币，显示出强劲的增长势头。 临床管线活跃：全球有超过85个双特异性抗体处于临床开发阶段，其中约86%的分子在癌症患者中进行评估。这一数据反映了双特异性抗体在癌症治疗领域的研发热情和市场潜力。 适应症扩展：双特异性抗体的应用范围正从癌症治疗扩展到炎症性疾病、血友病等非肿瘤领域。例如，Emicizumab作为首个获批的非癌症适应症双特异性抗体，为血友病治疗提供了新的方案。7.2 投资趋势观察 双特异性抗体领域的投资趋势显示出资本对于这一新兴技术的高度关注和信心。 投资活跃度：自2018年以来，中国在双特异性抗体领域的投资和合作开发显著活跃。例如，康宁杰瑞与赛诺菲的合作，以及信达生物与罗氏的合作，都是国际合作的典型案例，显示出资本对于双特异性抗体研发的支持和期待。 技术平台投资：随着双特异性抗体技术平台的成熟，如BiTE、DuoBody、CrossMAb等，投资趋势开始向这些平台技术集中。这些平台的成功应用和商业化前景吸引了大量投资。 早期研发投资：尽管双特异性抗体研发仍处于早期阶段，但全球每年新开的双特异性抗体临床试验数量逐年增加，显示出投资者对于早期研发项目的兴趣和信心。 市场竞争与合作：市场竞争格局尚不明确，企业研发竞争尚不充分。因此，掌握相关技术平台的企业更容易获得投资，成为未来双特异性抗体领域的龙头代表企业。 综上所述，双特异性抗体的市场前景广阔，投资趋势活跃，尤其是在技术平台和早期研发领域。随着临床研究的深入和新药上市，预计双特异性抗体将为投资者带来显著的回报。 识别微信二维码，添加生物制品圈小编，符合条件者即可加入 生物制品微信群！ 请注明：姓名+研究方向！ 版 权 声 明 本公众号所有转载文章系出于传递更多信息之目的，且明确注明来源和作者，不希望被转载的媒体或个人可与我们联系(cbplib@163.com)，我们将立即进行删除处理。所有文章仅代表作者观点，不代表本站立场。

双特异性抗体(Bispecific Antibody，BsAb)简称双抗，是一种特殊形式的人工抗体,具有两条抗原结合臂的抗体变形结构，能够同时识别两种不同的抗原。与单克隆抗体相比，双抗增加了一个特异性抗原结合位点，因而特异性更强、可较准确靶向肿瘤细胞并降低脱靶毒性。因其特异性和双功能性，现已成为抗体工程领域的研究热点，在肿瘤治疗及自身免疫病等领域中具有广阔的应用前景。双抗根据结构大体可以分为2类：全长双抗（结构和IgG单抗类似，有Fc区）和片段双抗（由IgG单抗的Fab区组成，无Fc区）。含Fc区双特异性抗体保持了传统单克隆抗体的结构，但与传统单克隆抗体不同，这两个Fab能够结合不同抗原，可以进一步分为对称模式和非对称模式。Fc区的存在与否直接影响双抗的生物学效应、半衰期、研发&生产成本等。一般来说，片段双抗免疫原性更低，清除速度更快，半衰期更短，而全长双抗则可以发挥Fc介导的效应功能，二者各有优劣。表1.双抗一般性特点对比来源：国泰君安证券对于存在Fc区的IgG样双抗来说，研发过程中需要解决的是抗体结构错配问题，也就是链交换问题。也是这些问题所在，导致双抗产业化效率低、杂质蛋白多。而对于不含Fc区的非IgG样双抗来说，问题则在于半衰期较短。不含Fc区的非IgG样双抗分子量较小，易被靶细胞溶酶体降解，导致半衰期通常仅有两小时。所以解决研发技术问题的平台百花齐放，而基于平台技术的双抗企业也将在双抗药物领域占有一席之地。全球范围内比较知名的双抗技术平台有Amgen（Micromet）的BiTE、Sanofi（Ablynx）的Bi-Nanobody、MacroGenics的DART、Affimed的TandAb、Abbott的DVD-Ig、Roche（Genetech）的KIH等。国内自主研发的双抗技术平台也已呈现出群雄逐鹿的态势。特别是IgG样双抗平台已在临床前或临床阶段表现出较好的疗效，并越来越多的参与到技术授权的行列，包括：友芝友生物的YBODY、康宁杰瑞的CRIB、岸迈生物FIT-Ig、和铂医药的HCAb和HBICE、天演药业DPL、君实生物TEAC、康方生物Tetrabody、齐鲁药业MabPair、百利制药GNC等。这也预示着双抗的开发迎来了高速发展期。鉴于双抗药物潜在的疗效和安全性优势，国内外企业纷纷布局双抗领域。据统计，截至2022年11月，双特异性抗体的研发药物共有931个，涉及的靶点228个，研发机构507家，针对的适应症264种，临床研究项目共2112项。目前全球共有9款双抗产品获批上市，其中在中国获批上市的有3种，包括安进靶向CD3和CD19的Blincyto、罗氏靶向FIX和FX的Hemlibra、康方生物的卡度尼利单抗。其中卡度尼利双抗是国内企业自主研发的首款双抗药物，也是全球第一个基于 PD-1 获批上市的的双抗药物。表2.全球获批双抗盘点来源：网络，凯莱英整理据统计，截至2022年12月，全球临床3期的试验项目共约有436项，包括的靶点有：CD3、VEGF、VNGPT2、F10、激活型凝血因子IX、VEGFR、CD19、PGF、GR、TNF-α、COX-2、IL-6、CRBN、Bcr-Abl、VEGF、c-Met/HGFR、DHFR、BCMA、DLL4等。目前这些临床3期试验项目中较多为已获批准药物的更多适应症治疗和更多研发机构仿制药的研究，真正的原研新药只有20个。国内已有超过30家药企布局双抗的研发，合计约300余款双抗在研药物，进入临床阶段的药物已超100款。其中，康方生物的卡度尼利是首款上市的国产双抗药物，将来有望纳入医保。另外处于临床3期的药物共7款。表3.国外临床三期双特异性抗体来源：医药速览，凯莱英整理表4.国内临床三期双特异性抗体来源：医药速览，凯莱英整理受益于双抗药物逐渐扩大的适应症范围、良好的临床优效性等，双抗药物市场规模持续扩张。据统计，2015年全球双抗市场规模约1亿美元，2019年增长至17亿美元，2022年双抗药物的市场规模达52亿美元。随着双抗药物获批上市进程持续加快，全球双抗市场规模将快速上升，预计2030年全球双抗市场规模将达807亿美元。我国双抗市场规模也将快速扩张，2030年将达到108亿美元。图1.双抗药物市场规模来源：凯莱英整理双抗领域出现的爆发性批准上市势必为已经布局的企业带来信心。受此影响，未来或出现研发扎堆的现象，赛道也会变得拥挤，因此药企需提前布局，避免同质化竞争加剧的情况。参考文献：1.https://mp.weixin.qq.com/s/RHsnJPcaaAEduV4k9dpGKw2.https://mp.weixin.qq.com/s/fgRII4pQiFJ2bAqIgD-l0Q识别微信二维码，添加小编，符合条件者即可申请加入微信群！请注明：姓名+研究方向！声明：本文来源凯莱英，旨在传递更多信息，版权归原作者所有。原创文章转载均需经过授权并注明来源，如涉及内容、版权或其他问题请时联系小编删除！文章仅代表作者个人观点，并不代表公众号立场。本公众号拥有对此声明的最终解释权！投稿邮箱：yck19876@163.com