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（点击图片 查看详情） 摘要：目的 为我国生化药品生产企业提升质量管理能力提供参考。方法 概述国内外相关法规要求；并于《药品生产质量管理规范（2010 年修订）生化药品附录》实施后，回顾2017 年9 月至2022 年8 月国家药品监督管理局食品药品审核查验中心（以下简称核查中心）对国内（不含港澳台）25 家生化药品生产企业《药品生产质量管理规范》（GMP）实施情况进行的跟踪检查及受邀对生化药品开展的11 次观察检查，分析其的缺陷。结果跟踪检查共发现缺陷302 条，其中严重缺陷0 条，主要缺陷26 条，一般缺陷276 条。观察检查中2 次原料药检查无缺陷条款，3 次检查现场未定义缺陷级别，其他6 次观察中现场告知存在缺陷55 条，包括严重缺陷1 条、主要缺陷15 条和一般缺陷39 条。跟踪检查结果显示，生化药品在质量控制与质量保证、文件管理、附录：无菌药品、确认和验证及其附录方面存在较多缺陷。观察检查显示，质量控制与质量保证方面的问题最多，其次是确认与验证；且车间设备不适合预定用途、厂房设施维护不到位情况比跟踪检查中略多。结论建议国内生化药品生产企业根据实际情况进一步完善生产质量管理，完善从原材料开始的产品全生命周期管理；药品监管机构完善被检查单位的检查档案管理并加强检查结果的运用，调整抽样和日常监管频次，合理制订生化药品的检查指南或检查备忘清单。 生化药品从动物的器官、组织、体液、分泌物中提取，经前处理、提取、分离、纯化等制得，主要包括蛋白质、多肽、氨基酸及其衍生物、多糖、核苷酸及其衍生物、脂、酶及辅酶等（不包括生物制品附录所列产品）［1］。作为我国医药产品的一个大类，生化药品具有针对性强、毒性低、不良反应轻、易为人体吸收等特点，临床应用广泛［2 - 3］。《国家基本药物目录（2012年版）》收载的28种生化药品，涉及18个临床药理学分类，占总分类（25个）的72%，是我国临床用药不可或缺的一部分［4］。同时，肝素、玻璃酸、硫酸软骨素、尿激酶、辅酶A等品种在国际上占有重要地位，实现了规模经济效益，为保障全球药品的可及性贡献了中国力量［4 - 5］。但由于生化药品主要来源为动物脏器，也有一部分来源于人或动物的体液或分泌物，其原料本身具有不均一性，易携带病原微生物，且易被微生物污染；质量控制通常采用生物分析技术，可变性比理化测定更大，导致部分生化药品企业发生过原辅料供应链及起始原料的质量控制等问题［3］。近年来，国家药品监督管理局食品药品审核查验中心（以下简称核查中心）组织了国内外生化药品跟踪检查和观察检查，发现的多项缺陷均带有生化药品的明显特点。现报道如下。 1 国内外法规要求概述 国内药品检查机构：鉴于生化药品的独特性、复杂性和监管需求，原国家食品药品监督管理总局于2017年3月17日发布《药品生产质量管理规范（2010年修订）》（以下简称《生化药品附录》）配套文件，自2017年9月1日起施行。该附录共九章四十四条，从范围、原则、人员、厂房与设备、病毒去除/ 灭活及验证、供应链管理、生产管理、质量管理等方面细化了生化药品的生产质量管理规范。同时声明，来源于人的组织、尿液的产品按此附录执行。适用于原材料的前处理、提取、分离、纯化等原料（原液）及其制剂的制备和质量控制的全过程，原材料的采集过程应符合国家相关规定，药品生产企业应监督控制其来源及质量。 国际药品检查合作组织（PIC / S）和欧洲药品管理局（EMA）：两者均将从动物的器官、组织、体液、分泌物中处理、提取、分离、纯化等制得药品和来源于人的组织、尿液的产品作为生物制品种类进行检查。PIC / S 的PE 009 - 17 附录2B［6］与EMA 的GMP 附录2［7］内容也基本一致，对人员的资质、厂房与设备的防止污染和交叉污染的基本策略规定比较原则，对通风过滤器、排放系统的要求比较具体。2个附录对病毒去除/ 灭活也提出了要求，但未作详细叙述，供应链也有类似《生化药品附录》的要求，但对于各环节的质量管理要求更为详细和具体。例如在屠宰场获取动物组织时，应当证明屠宰场符合欧洲联盟（EU）同等标准；相关机构针对起始物料或原料的控制措施，应包括质量管理体系的适当要素，以确保适当的操作培训、物料溯源、控制与一致性达到令人满意的水平。 世界卫生组织（WHO）：WHO发布的TRS 996 附录3［8］中对非转基因动物来源提取、分离、纯化的产品要求与PE 009 - 17附录2B类似。此外，对于人员还补充了清洁和消毒程序等培训，强调了质量风险管理进程是实施控制污染和交叉污染风险所需的技术和组织措施的基础，并列举了其从始物料到厂房设施设备设计、相关清洁和验证中的应用；对于起始物料的管理，其取样和附条件使用应基于质量风险管理原则，留样时间建议储存条件下保存至少1年，超过相应成品的有效期等。 总体而言，对于动物的器官、组织、体液、分泌物中经前处理、提取、分离、纯化等制得药品和来源于人的组织、尿液的产品，国内外药品检查机构均在药品生产质量管理规定的基础上，针对产品特性进一步细化了管理要求。PIC / S、WHO 和EMA 原则上将生化药品作为生物制品的一个种类进行监管，我国针对生化药品发布的专门的附录更具系统性和针对性。 2 国内生化药品跟踪检查 2. 1 药品检查风险等级 《药品检查管理办法（试行）》规定药品检查缺陷分为严重缺陷、主要缺陷和一般缺陷，其风险等级依次减弱，缺陷等级依据《药品生产现场检查风险评定指导原则》确定［9］。严重缺陷包括对使用者造成危害或存在健康风险；与药品GMP要求有严重偏离，给产品质量带来严重风险；有文件、数据、记录等方面的欺骗行为；存在多项关联主要缺陷，综合分析显示，质量管理体系中某一系统不能有效运行。主要缺陷包括与药品GMP要求有较大偏离，给产品质量带来较大风险；不能按要求放行产品，或质量受权人不能有效履行其放行职责；存在多项关联一般缺陷，经综合分析表明质量管理体系中某一系统不完善。一般缺陷即尚未达到严重缺陷和主要缺陷程度的缺陷［10］。 2. 2 检查情况 2017年9月至2022年8月，核查中心对国内（不含港澳台）25家生化药品生产企业GMP实施情况进行跟踪检查，检查范围包括骨肽、胸腺肽、鹿瓜多肽、促肝细胞生长素、垂体后叶、脑蛋白水解物、肝素等多组分生化药品［11］。检查共发现缺陷302条，其中严重缺陷0条，主要缺陷26条，一般缺陷276条（见图1）。 从缺陷条款归属上看，生化药品在质量控制与质量保证、文件管理、无菌药品、确认和验证也存在较多缺陷，主要缺陷包括与产品质量相关的偏差/ 超出标准的结果（OOS）/变更管理不足、质量保证体系不完善、无菌保障措施不足、验证不到位、数据可靠性保障措施不到位、物料管理不到位等。 进一步分析发现，这些缺陷的发生很大程度上与企业对生化药品的特点和要求认识不到位有关。1）生化药品主要来源为动物脏器、人或动物的体液或分泌物，易携带微生物，生产企业未建立“生化药品病毒去除/ 灭活及验证”相应的管理文件，未按照批准的质量标准对降压物质、异常毒性和过敏试验等进行检测或验收；未结合原材料来源或工艺特性，对新增供应商或变更工艺进行充分研究；供应商审计不符合要求等。2）生化药品生产企业生产和质量控制过程中电子化程度较低，纸质记录贯穿产品的整个生命周期，记录不完整、不受控的情况较突出。如部分企业批生产记录、辅助记录、纸质台账等未按要求受控发放，部分记录缺失或同时存在多份记录。3）生化药品受原材料的理化性质、稳定性和生物学特性影响，属于无菌制剂的产品较多，易出现无菌保障操作、管理或验证不规范等。4）在确认与验证方面，部分企业预处理工序、原液生产线清洁方式未验证；投料量和工艺参数范围过大，滤芯/ 填料/回收溶剂使用次数等缺少数据支持等。 2. 3 典型问题 病毒去除/ 灭活不规范：1）未在《生化药品附录》颁布后对既往委托开展的病毒灭活验证进行系统性审核，存在委托验证工艺与实际采用的病毒去除/ 灭活工艺步骤不同的情况。如病毒灭活验证样品处理方法为0. 12 MPa热压“骨肽溶液”1 h，报告显示实际对“猪骨”进行热压；用脑蛋白水解物注射液超滤法病毒灭活验证代替注射用脑蛋白水解物病毒灭活验证，未确定方法的适用性；病毒去除/ 灭活验证的工艺步骤与生产中的病毒去除/ 灭活工艺不符。2）某品种病毒灭活以日本脑炎病毒和伪狂犬病毒为标准样本，与同期某院验证证明选取的猪细小病毒、水泡性口炎病毒样本完全不同，企业未分析评价最优病毒。3）变更工艺灭菌后或全国发生新的非洲猪瘟疫情，未对首次病毒灭活验证报告进行再验证或分析评价。4）病毒去除灭活验证仅考察了超滤膜包对1批浓缩液的病毒去除灭活效果，而工艺规程规定生产时可以4批浓缩液合批后进行超滤操作。 原材料管理不足：1）接收原材料时未确认运输温度、运输时限和来源并填写验收记录。2）入库的猪脑、乳猪肝等原材料无“动物产品检疫合格证明”，未抽样检测人畜共患病毒和非洲猪瘟病毒。3）原材料为供应商在一段时间内采集而得，无法有效追溯到其在供应商处的存放时限。4）原材料或中间产品仓库缺少温度监控记录，温度报警未处置记录；未及时发现原材料和中间产品存放温度超标情况并纠正；未评估贮存时间和条件偏离其对产品的质量的影响。5）原材料、中间产品存放时限未验证，原液存放时间验证检验项目未考察微生物限度。6）病毒灭活后精提液转运污染防控措施不足。7）中间产品反复冻融的使用缺少数据支持。 供应商管理不到位：1）供应商评估和批准管理程序、合同、质量保证协议等缺少针对生化药品原材料的专门规定，如未规定原材料的饲养、种属、年龄、采集、运输要求，未要求原材料供应商参照《生化药品附录》要求管理。2）供应商档案未收集养殖场地、种属、年龄、采集要求等信息，购销合同未明确生产商的信息；合格供应商文件变更不及时；新增供应商未按要求进行变更研究。3）供应商审计档案未包括规模及原材料的动物来源、采集部位及方法等。 3 国外生化药品观察检查 3. 1 药品检查风险等级 根据国家药品监督管理局（NMPA）与境外药品监管机构签署的相关合作协议，当境外药品监管机构对我国人用药品进行检查时，我国药品监督管理部门会派出具有经验的药品检查员对境外药品监管机构的检查过程进行见证和记录［12］。国外检查的GMP 缺陷分级一般包括严重缺陷、主要缺陷和一般缺陷或其他缺陷，不同级别缺陷的定义与我国《药品生产现场检查风险评定指导原则》基本一致。在缺陷之外，PIC / S、WHO 检查中还提出了“建议项”的概念，一般只有药品GMP 没有明确规定但有助于企业提升质量管理的事项，或与其他发现的任何问题均无关联性的特别微小的差异才会被作为建议项［13］。 3. 2 检查情况 2017年9月至2022年8月，核查中心共受邀对生化药品观察检查11次，邀请机构包括美国食品和药物管理局、欧洲药品质量管理局（EDQM）、PIC / S成员、WHO等。包括8次原料药生产现场检查，3次注射剂及其原料药的生产现场检查。有2次原料药检查中无缺陷条款，3次检查现场未定义缺陷级别，其他6次观察中现场告知存在缺陷55条，包括严重缺陷1条、主要缺陷15条和一般缺陷39条。详见图2。 与跟踪检查类似，国外观察检查结果显示，质量控制与质量保证方面问题最多，其次是确认与验证。由于检查范围以原料药为主，检查过程中原材料至粗品的生产也是检查的重点之一，检查发现车间设备不适合预定用途、厂房设施维护不到位情况比跟踪检查中略多；且在物料与产品发现了严重缺陷。 3. 3 主要缺陷 质量控制与质量保证方面：1）依诺肝素钠质量标准未控制多硫酸软骨素杂质。2）注射级软骨素最终步骤采用纯化水作为工艺用水未控制内毒素。3）未向负责放行的人员提供有效信息。现场检查发现系统中存在手动积分，但其批检测记录中未包含该信息，该批次手动积分信息未传递至负责批放行的人员；批检测记录中未记录或未链接发生的偏差/ OOS / 异常事件，负责放行批次的质量授权人无法评估上述事件以做出客观、独立的放行决策。4）手动积分管理不足。被检查单位无法从色谱系统Empower 2和Empower 3中筛选手动积分的审计追踪，导致检查人员必须依靠企业手写的手动积分审批单了解手动积分的执行情况，检查发现存在未批准的手动积分；即使成功进行了系统适应性测试，也可手动终止色谱运行；文件中未明确仅在计算了初始色谱运行的最终结果后才允许进行手动积分，如果此计算导致OOS，则不允许手动积分，且需要启动OOS程序。 确认与验证：1）工艺验证设计不合理。未考虑生物起始物料的高可变性，工艺验证其中2个批次起始物料为同一家供应商生产，第3个批次是使用上述供应商和另1家供应商混合生产的；工艺验证批次使用的肝素钠粗品供应商，未获得EU - GMP证书；冻干工艺验证是在较宽范围内对单个冻干循环状态进行，由于其高可变性，该工艺未处于控制状态下，或者设备无法满足其要求。2）未参考欧洲药典进行有关物质的验证。3）工艺验证方案和报告不完整。如新厂区的方法转移和确认活动未完成，但入厂物料检测、稳定性样品存储/ 检测、样品留样的外协活动未在工艺验证方案和报告说明；验证方案的偏差未记录为偏差，不能使负责人对于工艺验证结果有客观和独立的评估。4）在新的厂区进行审计检查时，现场只有约25％的厂区设备完成了确认验证；在不能进行商业生产的新生产场地（因为相关的变更未获得批准），同步进行性能验证和工艺验证的做法不恰当。 其他：1）降低污染和交叉污染的措施不足、如设备的位置、房间的设计、固定设备的管道系统、线的连接，均存在无法清洁的位置；墙面地面粗糙、有霉点，U型钢架难以清洁；房间的维护保养不佳，罐的封头生锈；清洁规程规定不完善或人员执行不到位，现场发现较多备用设备集尘；粗品干燥用热风循环烘箱的进口处不卫生；部分工序产品暴露于空气中；洁净区内离心步骤，离心机布袋未完全晾干，且为非不脱落纤维的材质。2）企业的核磁检测为委托检验，但未提供受托实验室提供的核磁共振仪器合格证。3）多数文件［标准作业程序（SOP）、生产记录、检测记录等］仅有中文版本，缺少英文版本等。 3. 4 严重缺陷 EDQM检查发现严重缺陷1项，内容如下。1）在检查前提交的2份肝素钠粗品供应商清单中的供应商数量1 份有11 家，另1 份有13 家，与批准的12 家不符。2）登记号为APC - 19 - 0007的偏差来自2个未经批准和不合格的树脂肝素厂家生产的肝素钠粗品，企业入库时已发现对应树脂肝素供应商批准状态但仍被用于生产。3）多数肝素钠粗品供应商（包括树脂肝素工厂）均无EU - GMP 证书，即使EU - GMP 指南第二部分（包括附录2）适用于前端“植物、器官、组织或体液的收集”以及肠黏膜在DMF 中被定义为原料药起始物料。EDQM综合原材料肝素钠粗品供应商管理与资质问题将以上缺陷评定为严重缺陷。该评级与2008年美国百特公司肝素钠药品不良事件有关，该事件使各国加强了肝素产品中多硫酸软骨素的检验，同时加强对肝素钠及其原材料生产的监管。 4 改进建议 近年来，我国生化药品生产企业接受的国内外药品监管机构GMP检查中的高频缺陷类似，主要集中在质量控制与质量保证、文件管理、确认和验证、物料与产品等方面，典型问题多与生化药品的特性相关，且通常涉及多个方面或同时涉及多个系统。建议生化药品生产企业将药品的质量管理视为一个有机整体，从多角度看待问题剖析风险，制订整改预防措施；结合生化药品特点，重视起始原料的管理和前处理及相关粗品工序的生产，对生产工艺充分评估和验证以使产品持续稳定符合要求；加强全生命周期的管理，定期自检回顾，督促供应商参照《生化药品附录》管理；针对生化药品供应链的广泛性和复杂性，基于当前技术发展不断优化管理和控制方法，建立有效的追溯系统和控制措施。建议药品监管机构完善被检查单位的检查档案管理并加强检查结果的运用；根据生产企业接受检查历史，调整抽样和日常监管频次，必要时对原料来源单位开展延伸检查；可根据当前法规要求、生化药品特点和风险制订生化药品的检查指南或检查备忘清单，进一步提高生化类药品检查的针对性和效率。 参考文献 ［1］国家食品药品监督管理总局. 总局关于发布《药品生产质量管理规范（2010 年修订）》生化药品附录的公告（2017 年第29 号）［A / OL］.（2017 - 03 - 16）［2024 - 07 - 04］.https：// www. nmpa. gov. cn / xxgk / ggtg / ypggtg / ypqtggtg /20170316165701295. html. ［2］孙莉.《中国药典》2010 年版二部生化药品增修订概况［J］.中国现代药物应用，2011，5（4）：248 - 250. ［3］颛孙燕，朱佳娴，施绿燕. 生化药品GMP 附录实施情况的分析与探讨［J］. 中国药事，2018，32（7）：893 - 896. ［4］任丽萍，范慧红. 我国生化药品的质量现状与展望［J］. 中国生化药物杂志，2016，36（10）：1 - 4. ［5］中航证券. 共给修复，静态花开—— 肝素行业深度报告［EB / OL］.（2020 - 11 - 06）［2024 - 07 - 04］. https：// pdf.dfcfw. com / pdf / H3_AP202011111428204038_1. pdf？1605105206000. pdf. ［6］Pharmaceutical Inspection Convention and Pharmaceutical Inspection Co - operation Scheme. Annex 2. Manufacture of biological medicinal substances and products for human use［EB / OL］.（2023 - 08 - 25）［2024 - 07 - 04］. https：//picscheme. org / docview / 8881. ［7］European Medicines Agency. Annex 2. Manufacture ofbiological active substances and medicinal products for humanuse［EB / OL］.（2018 - 05 - 13）［2024 - 07 - 04］. https：//www. gmp - compliance. org / files / guidemgr / 2018_annex2_en. pdf. ［8］World Health Organization. WHO TRS 996 Annex 3 WHO good manufacturing practices for biological products ［EB / OL］.（2016 - 05 - 13）［2024 - 07 - 04］. https：// cdn. who. int /media / docs / default - source / medicines / norms - and -standards / guidelines / distribution / trs996 - annex03 - gmp -for - biological - products. pdf？sfvrsn = b04b05b4_1&download = true. ［9］国家食品药品监督管理总局. 食品药品监管总局关于印发药品生产现场检查风险评定指导原则的通知［A / OL］.（2014 - 05 - 13）［2024 - 07 - 04］. https：// www. nmpa. gov.cn / xxgk / fgwj / gzwj / gzwjyp / 20140513120001350. html. ［10］国家药品监督管理局. 国家药监局关于修订《药品检查管理办法（试行）》部分条款有关事宜的通知［A / OL］.（2023 -07 - 21）［2024 - 07 - 04］. https：// www. nmpa. gov. cn /xxgk / fgwj / gzwj / gzwjyp / 20230721091201181. html. ［11］国家食品药品监督管理局. 印发关于药品注册管理的补充规定的通知［A / OL］.（2008 - 12 - 23）［2024 - 07 - 04］.https：// www. nmpa. gov. cn / xxgk / fgwj / gzwj / gzwjyp / 20031223010101201. html. ［12］徐长波，翟铁伟. 我国化学药生产企业境外检查观察情况分析［J］. 中国药业，2024，33（3）：38 - 42. ［13］颜若曦. 基于《PIC / S GMP 缺陷分级指南》的药品生产质量管理规范检查缺陷分级研究［J］. 现代药物与临床，2023，38（6）：1509 - 1516. （收稿日期：2024 - 07 - 22；修回日期：2024 - 11 - 26） ------------THE END------------ 内容来源：药事管理  2024 年12 月20 日 点击查看：投稿获丰厚稿费（24年6月起执行） 关注药研 一路同行 药研论坛：始终把为药品研发一线人员提供高质量、高性价比培训为第一宗旨。自成立以来，累计举办100余期药品研发注册与GMP合规领域研讨班。据统计，中国医药工业百强企业和研发百强企业均超过90%参加过药研收费类培训。截至2024年底，包括上海强生、辉瑞、阿斯利康、山德士、日本大冢、大鹏、卫材、小林制药、扬子江、恒瑞、正大天晴、东阳光、科伦、中科院等在内的3000余家企事业单位参加过药研线下收费培训，得到业界普遍认可与好评！药研学院：已同众多企业合作超百期直播课，全网观看突破150万+，药研直播课聚焦药品研发相关主题，平均观看人数行业领先。药研自媒体矩阵20万+：目前药研公众号研发领域关注用户约10万人！双直播平台10万人，微信社群5万人，其中制药企业和研发机构关注量5000+。商务合作：15911172616

摘要：药品是保障国民生命健康的最有力屏障，药品检测能有效保障药品安全。微生物快速检测技术成为顺应行业发展的需要。本文对新发展的快检技术现状进行分析，同时讨论了其在药品监管方面的应用意义，以期为药品微生物检测及监管提供新思路。 药品安全是国民关注自身健康的首要话题，微生物检查法是保障药品质量的有效措施，药品特别是无菌制剂的微生物检查是保证药品质量的必要手段[1]。《中华人民共和国药典》规定的微生物检查法虽成熟，但整个过程中人员操作居多，从准备到实验结束受主观因素影响较多，程序复杂，且判定时间较长，在一定程度上限制了监管部门及时发现有效解决相关问题的能力。在这种前提下，更加科学合理、快速先进的新检测技术和方法成为行业发展的需要，而飞速发展的微生物快速检测技术则能够适应现代化发展，以更高的检测效率、更精准的检测结果等特点切实保障药品质量安全，守护国民生命健康。 1 微生物快速检测技术的研究现状 1.1 聚合酶链式反应技术 聚合酶链式反应（PCR）是一种在体外将某段DNA片段放大扩增的分子生物学技术，利用高温条件将双链DNA变性为单链DNA，退火后引物与单链以碱基互补配对的方式相结合，经DNA聚合酶延伸并进行多个循环复制，最终达到可检测的范围。PCR技术快速、灵敏度高、特异性强，被应用于检测无菌制品中的细菌污染。但该方法也有一定的局限性，如PCR技术的灵敏度直接受细菌是否充分裂解的影响，核酸提取仪法细菌含量较低的情况下，阳性和阴性的结果判定区分度不足；同时，对样品中的细菌活性要求较高，若存在死菌会干扰试验结果；且试剂盒成本高，并不适用于常规检测。王晓冲等[2]利用PMA去除样品中死菌DNA干扰，将PCR方法应用于人工污染药品无菌快速检测，能够更加快速准确检测出样品中活菌的存在，可应用于药品无菌检查的快速筛查。 1.2 流式细胞术 流式细胞技术（flow cytometer method，FCM）是采用流式细胞仪（flow cytometer，FC）对悬液中高速流动的单细胞或其他生物粒子进行快速定量分析和分选的一种生物学技术。该技术通过选用适当的荧光物质标记样品中微生物细胞，在特定波长光下激发荧光信号，可获取纯细胞群体。该检测方法速度快、精确度高、准确性好，是目前最先进的定量分析技术之一，目前该技术已广泛应用于各类液态产品及血液生物制品的微生物检测研究中。Stiefel等[3]研究发现采用FCM与常规试验法相比能有效缩短检出时间，使用特定染料物质SYTO9染色标定15 min加入金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌的样品后，可在半分钟得到检测结果，当含菌量在10~104 cfu 之间时，其检出时间比常规方法缩短了40%~70%。 1.3 电阻抗技术 电阻抗技术是根据微生物在培养基中代谢活动的不同产生相异的电活性物质，通过电阻抗测量法对待测样品中微生物的含量和类别进行鉴定的一种技术该技术适用性强，可用于不同种类的、污染菌来源不明确的产品检测，已广泛应用于食品药品安全检测中。该方法体系的建立有助于提高生产企业的技术水平，同时也减少了检验机构的检测时间，提升检验机构的检测能力。但该技术也有一定的局限性，主要是无法鉴别出待测样品中污染微生物的来源，若培养基中有污染菌则会影响鉴定结果，并且该方法与传统培养方法有出入，在一定程度上限制了该技术的发展。根据其技术原理，电阻抗技术可分为直接阻抗测量法和间接阻抗测量法，二者的区别在于间接阻抗法是通过检测电极周围的KOH溶液中微生物代谢的CO2引发的阻抗变化来反映微生物活性水平，而非直接检测培养基中微生物代谢分解营养物质引发的阻抗变化。间接阻抗法是直接阻抗法的补充，多用于记录直接阻抗法难以记录数据的研究，如含有产气芽殖微生物以及霉菌和酵母菌群等的酸性类食品药品中。已有研究运用电阻抗法检测罐藏食品商业无菌，显示用直接阻抗法检测低酸性产品，间接阻抗法检测酸性产品建立的快速检测方法体系比常规检测法缩短了7天的检测时间，仅用3天便可得到所有的数据结果，并且该方法操作简便，作业人员效率高。 1.4 免疫学技术 免疫学技术是指利用免疫反应的特异性原理，建立各种检测与分析技术，主要有免疫荧光技术、免疫层析技术、酶联免疫吸附技术和免疫磁珠技术等。 免疫荧光技术又称免疫抗体技术，其工作机制是抗原和抗体的特异性结合。利用萤火虫发光作用原理，将抗体与萤光素酶相结合，可对待测样品中的抗原进行示踪，即ATP荧光法快速检测技术。该技术目前已被国内外研究人员广泛应用于微生物菌落总数的测定，根据荧光信号来判定微生物含量，该技术成本低廉、反应快、操作简便。免疫层析技术则是运用层析技术先将抗体固定在硝酸纤维素膜上，当加入待测样液时再利用抗原抗体特异性识别原理，发生特异性抗原抗体反应，产生的复合物通过显色反应来判断是否存在目标微生物。该技术可在10min~15 min之内检测出结果，时效性高，操作简便，适用于普通人群的自测。酶联免疫吸附技术利用以酶标记的特异抗体来指示抗原-抗体的结合，通过结合后的显色反应来检测样品中的微生物。该技术灵敏度高、特异性强，广泛应用于食源性致病菌检测。免疫磁珠技术是磁珠与单抗结合，可特异性识别待测样本中的抗原，形成的复合物在磁场下分离，可判断出待测样品中是否存在微生物。该方法操作简便，不易污染，是一种新的免疫技术。 1.5 纸片法 纸片法在微生物试验的操作和培养条件上与常规方法一致，但省去了培养基配制过程，并且培养时间大幅缩短，因此得到了研究人员尤其是食品工程方面的广泛关注。李俊霞等[4]以金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和枯草芽孢杆菌为研究对象，分别用纸片法和国标法测定菌落总数并加以分析，结果显示二者无明显差异，纸片法可缩短检测流程及时间，提高工作效率，可以作为替代方法用于食品中菌落总数的检测。李宇等[5]对食品中细菌菌落总数、沉降菌及环境菌落总数进行测定，结果表明纸片法与传统检测法无差异，并且在灵敏度和准确性方面有更好表现。 1.6 BACTEC TM FX系统 该系统集成能够快速、准确地检测和鉴定细菌，是目前最先进的荧光培养检测系统之一。培养仪用于自动化培养和鉴定，特定成分的培养基提供营养物质，与待测样品一起放于培养瓶中，微生物生长过程中的代谢产物CO2激活培养瓶内荧光物质而发出特定波长荧光，其荧光变化反映瓶内微生物水平，判断是否有微生物生长。该系统具有准确可靠、自动化操作及信息化数据管理等特点，其检测时间与常规微生物检验法相比更短，检测效率更高，在食品药品检测领域应用广泛。杨燕等[6]利用BACTEC FX全自动系统对部分无菌制剂的无菌进行快速检查，并在方法的专属性、检测限、重复性及耐用性方面与药典法进行比较发现，BACTEC FX全自动系统用于药品无菌检查具有快速、灵敏度高的优势，有望为常规无菌检查法带来有效的补充。 1.7 光谱检测技术 光谱检测技术具有快速、灵敏、无损检测等特点，近期引起了国内外学者的广泛关注。尤其是表面增强拉曼光谱可对食源性致病微生物无标记快速识别，对其进行的大量深入研究可逐步提升对食源性致病微生物的快速鉴别能力，为相关监管检验机构的日常监管、质量控制等方面提供了新思路和途径。 1.8 MTT法快速检测技术 MTT法原理是外源性MTT（噻唑蓝）可在微生物线粒体中琥珀酸脱氢酶的作用下还原成蓝紫色结晶甲臜，该物质具有不溶性，会沉积在细胞中，但该反应仅限于活体微生物。用酶联免疫检测仪测定吸光度可反映出活菌细胞数量。该方法可用于检测待测样品中的活体微生物。 2 快速检测技术在药品监督管理中的应用 2.1 为药品检测提高效率提供可靠方法 快速检测技术具备快速、可靠的特性，利用各种新型仪器和精准的分析方法，在短时间内检测鉴定出样品中的微生物。如分子生物学技术可从DNA层面快速鉴定微生物菌种及分类，并能进一步分析其来源，可有效助力监管；另外，BACTEC TM FX系统可缩短检测时间，提高生产企业过程及质量控制能力。 2.2 为药品应急检验提供高效检测手段 快速检测技术在突发疫情的监管和检验方面也有重要作用。在全球化病毒更迭不断的背景下，如何能够在紧急状态下快速、准确检测显得尤为重要，同时对于普通群体来说，用于突发状况下的自测产品也要易于操作。该方法对应急检验的意义重大，可争取更多宝贵时间，更好地保障人民的生命安全。 2.3 为药品实验室认证提供技术支撑 药品生产企业及机构洁净实验室等的传统微生物检测法时限长，操作复杂，而快速检测技术可提供快速、简便的方法，为实验室认证提供新手段，可以在短时间内获得准确的检测结果，未来对该技术的研究可提高认证的效率和质量，从而在过程控制及源头上保障药品的质量安全。 3 结束语 当前医药行业飞速发展，人们对自身健康关注日益密切，药品质量安全关乎人类生命，因此研究微生物快速检测技术意义非凡。本文介绍了当前应用广泛的快速检测技术，阐述并分析了其检测方法及研究现状，同时讨论了其在药品监管方面的应用，以期切实保障药品安全，推动药品行业的高质量发展。 参考文献 [1] 刘国石.基于新时代背景对我国食品药品安全监管的思考[J].产业与科技论坛，2023，22（24）：33-36. [2] 王晓冲，周继昌，李军，等.实时荧光定量PCR方法应用于药品无菌快速检测的研究[J]. 中国现代应用药学，2013，30（12）：1333-1337. [3] STIEFEL P，SCHMIDT-EMRICH S，MANIURA-WEBERK，et al. Critical aspects of using bacterial cell viability assays with the fluorophores SYTO9 and propidium iodide[J].Bmc Microbiology，2015，15（1）：36. [4] 李俊霞，周浩，朱文斌，等.3M菌落总数测试片的验收方法研究[J].实验室检测，2023，1（1）：30-34. [5] 李宇，姚卢悦.菌落总数检测纸片法与国标方法的比较研究[J].食品工业，2012，33（10）：157-159. [6] 杨燕，冯震，秦峰，等.BACTEC FX全自动系统用于药品无菌快速检查的评价研究[J]. 药物分析杂志，2021，41（11）：2017-2023. ------------THE END------------ 内容来源：品牌与标准化  2025年第1期 点击查看：投稿获丰厚稿费（24年6月起执行） 关注药研 一路同行 药研论坛：始终把为药品研发一线人员提供高质量、高性价比培训为第一宗旨。自2017年成立以来，累计举办100余期药品研发、注册领域研讨班。据统计，中国医药工业百强企业和研发百强企业均超过90%参加过药研收费类培训。截至2023年底，包括上海强生、辉瑞、阿斯利康、山德士、日本大冢、大鹏、卫材、小林制药、扬子江、恒瑞、正大天晴、东阳光、科伦、中科院等在内的2800余家企事业单位参加过药研线下收费培训，得到业界普遍认可与好评！药研学院：已同众多企业合作超百期直播课，全网观看突破100万+，药研直播课聚焦药品研发相关主题，平均观看人数行业领先。药研自媒体矩阵20万+：目前药研公众号研发领域关注用户约10万人！双直播平台10万人，微信社群5万人，其中制药企业和研发机构关注量5000+。商务合作：15911172616

动脉网第一时间获悉，苏州原位芯片科技有限责任公司（简称“苏州原位”）宣布于2024年岁尾完成近千万美元A+轮融资，投资方为美元基金。本轮融资，将推动公司加速布局基于MEMS压电技术的药液微量泵送模组的全自动化生产产线， 携手下游客户加速推动国产全抛贴敷式胰岛素泵的落地。 苏州原位是一家由清华大学和中科院微电子专业人才创立的高新技术企业，专注于MEMS技术及产品的研发。公司拥有近1000平方米的研发中心，现已掌握60+项核心技术与27项专利布局。凭借自主研发的MEMS芯片，公司推出的液体微量泵送模组和医用液体流量传感器均为国内首创，填补了国内在全抛贴敷式胰岛素泵驱动装置领域的空白，解决了市场长期以来的技术瓶颈。 根据行业会议报告，3毫升的胰岛素储药器能够满足64%的成年2型糖尿病患者三天用药需求，2毫升的储药器只能满足38%的相同人群需求，但现有市面在售的全抛贴敷式胰岛素泵都无法承载3毫升容量的胰岛素，造成患者治疗选择的限制。 苏州原位经过多年潜心研发，成功推出满足全抛贴敷式3毫升储药需求并能实现0.01U泵送精度的药液微量泵送模组，解决了这一痛点。为加速国产全抛贴敷式胰岛素泵的落地，公司还推出了基于MEMS药物微泵的3毫升全抛弃式贴敷胰岛素泵公版原型机（械药重量比9.3，最多填充3毫升胰岛素）。与Insulet胰岛素泵相比（械药重量比12.5，最多填充2毫升胰岛素），该原型机为医疗器械厂商简化胰岛素泵研发、生产和制造流程提供了解决方案和建议。 3毫升全抛弃式贴敷胰岛素泵公版原型机实物图 苏州原位联合创始人马硕表示，“目前全抛式胰岛素泵使用的记忆合金丝杆式驱动与传动技术的运动零件数量多、生产制造过程复杂，可靠性保障困难。苏州原位创新性地开发了基于MEMS的药液微泵模组，实现了零运动部件和模块化的全抛胰岛素泵系统解决方案。可以帮助下游厂商快速推出容易量产、质量可靠、专利FTO保障的产品。 本轮融资的完成标志着公司已经完成了MEMS药液微泵模组的自动化封测产线的资金准备。公司将在本年内完成第一期自动化产线的建设与调试，实现MEMS药液微泵模组的自动化批量生产。” 基于MEMS技术的药液微量泵送模组，为医疗器械厂商提供了一种全新的驱动技术方案。目前，苏州原位的药液微泵驱动模组已完成数十家知名医疗器械客户交付，这将加速国产全抛贴敷式胰岛素泵的商业化落地，使糖尿病患者有望使用轻便、小巧且高性能的全抛贴敷式胰岛素泵，改善生活质量。 投资方代表表示：“作为MEMS技术领域的创新者，苏州原位在创新型的医疗器械核心驱动部件研发生产方面具备显著优势，其基于MEMS的液体微量泵送驱动技术路线是一项颠覆性技术。我们相信，凭借其领先技术，公司将在医疗设备领域继续拓展，获得更广泛的市场份额。” 关于苏州原位 苏州原位成立于2015年，是一家由清华大学和中科院微电子专业人才创立的高新技术企业，专注于MEMS技术在医疗领域的创新应用。公司拥有近1000平方米的研发中心，现已掌握60+项核心技术与27项专利布局。以自主研发的MEMS芯片作为技术壁垒，公司推出的液体微量泵送驱动和医用液体流量传感器均为国内首创，填补国内空白。 如果您想对接文章中提到的项目，或您的项目想被动脉网报道，或者发布融资新闻，请与我们联系；也可加入动脉网行业社群，结交更多志同道合的好友。 近 期 推 荐 声明：动脉网所刊载内容之知识产权为动脉网及相关权利人专属所有或持有。未经许可，禁止进行转载、摘编、复制及建立镜像等任何使用。 动脉网，未来医疗服务平台