Beckman Coulter Biotechnology (Suzhou) Co. Ltd.

跨国药企在中国重点资讯 文 | 苏丁 企业动态 西门子医疗新帅上任，黎海先生将掌舵西门子医疗诊断业务实验室解决方案中国区业务。黎海在医疗行业深耕逾二十年，在销售管理、市场策略及业务合作伙伴管理方面积累了丰富的经验。他拥有美国华盛顿大学圣路易斯奥林商学院EMBA学位。 GE医疗5月9日，由GE医疗主办的中国大健康产业领军人物千人大会暨第六届大健康领袖峰会在长春召开。同期，中国大健康产业高质量发展“价值共生计划（Value Alliance）”正式启动。该计划由GE医疗联合多家头部非公医疗机构倡议发起，旨在围绕价值医疗构建一整套可预期、可定制、可持续的服务与合作模式，打造非公医疗“价值共生”的生态伙伴关系。此次启动的“价值共生计划”包含四大板块：临床解决方案、金融解决方案、数字化/人工智能解决方案和战略咨询服务。GE医疗还与漫迪医疗、中国心磁技术专家协作组就心磁图项目签署战略合作。 飞利浦 4月27日，飞利浦伟康深圳生产基地焕新启幕。飞利浦此次投资升级该基地，旨在进一步加强本土创新与智能制造布局，推动供应链升级。升级后的基地将聚焦高复杂度、高附加值环节，承担新产品导入、精密制造及自动化工艺研发等核心职能，产品销往北美、欧洲、亚太等全球市场。飞利浦目前在中国设有五大生产基地及多个研发中心，已实现中国研发与制造供应全球。 贝克曼库尔特贝克曼库尔特生命科学宣布旗下Avanti J系列多用途高效离心机实现苏州本土化生产。三款国产机型Avanti JXN-30、Avanti JXN-26与Avanti J-26S XP面世。Avanti JXN-30智能型亚超速离心机，可实现外泌体、病毒及纳米颗粒等样品的高效纯化分离；Avanti JXN-26 GLP/GMP合规型高速离心机 专为规范化实验室环境设计，标配符合GLP/GMP标准的完整追溯功能；Avanti J-26S XP 经典高效离心机 延续经典旋钮控制面板设计，操作简便直观。 杰特贝林生物技术公司杰特贝林出席2026 ChinaBio生物医药产业国际合作大会。值此进入中国市场40周年之际，杰特贝林全球机会探寻与评估负责人Stephen Pitt博士出席了主题为“新合作范式：从资产交易到生态联盟”的专题讨论，分享杰特贝林对中国市场的长期承诺、未来合作模式的洞察以及本土创新合作的新思路。杰特贝林此次参展，恰逢公司深耕中国市场四十周年。自1986年将公司第一批人血白蛋白引入中国以来，杰特贝林始终致力于服务罕见病及危重症患者。2025财年，公司已累计惠及逾400万中国危重症患者。 赛诺菲在第二十八届中国北京国际科技产业博览会开幕之际，赛诺菲携全球创新成果再度亮相，重点展示其在免疫、心血管、罕见病及疫苗等重点领域的创新产品，以及深度融入中国医药创新生态、持续强化本土能力建设的最新实践。目前，赛诺菲已向中国引入60余种创新药物和疫苗，覆盖中国前十大致死疾病中的七种，为本土高发疾病患者带来更多突破性治疗选择。在本届科博会上，赛诺菲重点呈现9款代表性成果，覆盖免疫、呼吸、心血管代谢、移植、肿瘤及罕见病等多个疾病领域，包括在中国率先获批、实现“全球首发”的创新药物，以及已在国内获批多个适应症的重点产品。进入中国40余年来，赛诺菲持续加码本土投入，已构建覆盖研发、生产制造与商业运营的全产业链布局。勃林格殷格翰5月7日-10日，第六届TOPS它博会于国家会展中心举行。勃林格殷格翰携旗下创新驱虫产品超可信、博来恩，治疗产品勃欣定、圣咪乐等多元化产品组合以及数字化工具集中展出，展现公司以宠物全生命周期健康管理为核心，通过持续创新解决不同阶段宠物核心健康需求的愿景。 中美施贵宝 上海医药转让中美上海施贵宝30%股权尘埃落定——上海联合赛尔生物工程有限公司以10.23亿元底价接盘，上海联交所将全部股权转让款划转至上海医药指定账户。上海联合赛尔生物工程有限公司成立于1995年，是一家集基因工程疫苗、治疗用生物制品研发、生产、销售于一体的高新技术企业。 卫材近日，复旦大学上海医学院举行2024-2025学年度卫材中国奖助学金颁奖仪式。从2006年开始，卫材中国在复旦大学基础医学院开始设立卫材中国奖助学金项目，每年捐赠10万余元人民币用于奖励品学兼优的学生完成学业，截至目前，已连续近20年共有680位学生获得卫材中国奖学金。 阿斯利康在2026年5月10日世界狼疮日，由新华网和患者组织SLE解忧杂货铺联合主办、阿斯利康中国支持的「主场时刻」系统性红斑狼疮患者关爱行动在上海正式启幕。在全球范围内，阿斯利康持续聚焦系统性红斑狼疮患者的未尽之需，积极支持全球专家与患者组织开展交流与合作，共同推动诊疗理念更新和患者关爱实践，为提升疾病认知、优化管理理念和改善患者生存质量贡献建设性支持。 SCIEX2026年4月，SCIEX硬件研究团队的刘畅博士再次获得国际学术界重要认可，荣获2026年Analytical Sciences and Spectroscopy Award（分析科学与光谱学奖）。这是刘畅博士继2025年当选SLAS Fellow（国际实验室自动化与筛选学会会士）后，再度斩获国际权威学术荣誉，充分印证SCIEX在分析科学领域的技术实力与行业影响力。 产业动态 阿斯利康宣布，中国国家药品监督管理局已正式批准英飞凡（英文商品名：Imfinzi，中文通用名：度伐利尤单抗）联合英卓凡（英文商品名：Imjudo，中文通用名：曲麦利尤单抗）用于晚期或不可切除的肝细胞癌（HCC）成人患者的一线治疗。此外，度伐利尤单抗亦获批单药治疗作为晚期或不可切除的肝细胞癌（HCC）成人患者的一线治疗。 拜耳公司宣布，asundexian（BAY 2433334片）“用于降低缺血性卒中或短暂性脑缺血发作（TIA）成人患者的卒中（复发）风险，不包含心源性栓塞性卒中患者”的上市申请已获国家药品监督管理局药品审评中心受理。 史赛克本土创新——患者匹配聚醚醚酮颅骨板（悟空随形）正式获批上市。悟空随形是一款利用聚醚醚酮材料修复颅骨缺损的创新产品，通过减材制造技术，实现定制化的、与颅骨匹配的植入式解决方案。作为本土化创新产品，悟空随形深度融合史赛克全球经验与中国本土化需求，在个性化定制、数据安全、快速交付三大维度构建差异化聚合优势。 时安生物宣布，与GSK就SA030达成一项全球独家许可协议（中国大陆、香港、澳门及台湾地区除外）。SA030是一款长效的小干扰RNA（siRNA），正处于开发阶段，用于治疗代谢与心血管疾病。SA030近期已进入1期临床试验，靶向激活素受体样激酶7（ALK7）。根据协议，GSK将支付首付款，以及未来基于成功达成的开发、注册与商业化里程碑付款，总额最高达10.05亿美元。时安生物将主导SA030的临床开发工作直至1期临床试验完成，在此之后，GSK将承担中国大陆、香港、澳门及台湾地区以外的开发、注册申报与商业化相关职责。 苏州瑞博生物技术股份有限公司及其子公司Ribocure Pharmaceuticals AB（合称“瑞博生物”）共同宣布，其与勃林格殷格翰合作开展的肝脏疾病创新疗法项目再获重要突破，达成又一里程碑。这也是双方在包括代谢功能障碍相关脂肪性肝炎（ MASH ）在内的肝脏疾病创新疗法合作中，成功实现的第三个关键里程碑，标志着双方合作研发进程持续深入。 联系美通社 +86-10-5953 9500 info@prnasia.com

来源：CACLP 2026年5月1日，全球患者监测技术企业迈心诺医疗（Masimo Corporation）宣布，在当日召开的特别股东大会上，公司股东已正式投票通过此前公布的与丹纳赫之间的合并协议。这标志着该笔近百亿美元级别的医疗科技并购交易迈出关键一步。 根据双方于2026年2月16日签署的合并协议，丹纳赫将通过其子公司以每股180美元的现金价格收购迈心诺医疗全部已发行普通股，交易总企业价值约为99亿美元（含债务）（约合673亿元）。交易完成后，迈心诺医疗将作为独立运营公司纳入丹纳赫诊断业务板块。 迈心诺医疗首席执行官Katie Szyman表示，股东的支持体现了对本次交易战略价值的高度认可。她指出，加入丹纳赫后，迈心诺医疗将在保持独立运营的同时，依托其全球平台加速创新技术的推广，持续提升临床诊疗水平与患者护理质量。 丹纳赫总裁兼首席执行官Rainer M. Blair则表示，迈心诺医疗在血氧监测及患者监护领域具有领先技术优势，此次收购将进一步强化丹纳赫在诊断领域的布局。通过丹纳赫业务系统（DBS）及全球资源整合，双方有望在重症医疗等关键场景中拓展应用边界、改善患者预后。 据介绍，迈心诺医疗将与丹纳赫旗下雷度米特、徕卡生物系统、赛沛及贝克曼库尔特等企业共同构成其诊断业务矩阵。丹纳赫预计，该交易将在完成后的首个完整财年即对每股收益产生正向贡献，并在中长期带来收入增长及协同效应。 从协同效益来看，丹纳赫预计在交易完成后第五年实现每年超过1.25亿美元的成本协同及5000万美元以上的收入协同。迈心诺医疗在2027年的EBITDA预计将超过5.3亿美元，并有望实现中高个位数的长期核心收入增长。 目前，该交易仍需满足包括监管审批在内的常规交割条件。双方预计交易将在2026年下半年完成。 业内人士认为，此次收购不仅体现了大型跨国企业在高端诊断与患者监测领域持续加码的趋势，也反映出以智能传感、AI赋能为代表的新一代监护技术正在成为全球IVD与医疗科技融合的重要方向。 声明：本微信注明来源的稿件均为转载，仅用于分享，不代表平台立场，如涉及版权等问题，请尽快联系我们，我们第一时间更正。

本 文 目 录 1、大分子药物生物分析中的主要应用技术 2、药物分析方法开发:DoE在分析方法开发中的应用 3、小分子及大分子药物生物分析种类及方法 一、大分子药物生物分析中的主要应用技术 （原创 Viny 丹纳赫生命科学） 生物大分子药物目前主要包括治疗性蛋白药物与核酸药物等，随着生物技术的迅速发展，生物大分子已被普遍用以治疗肿瘤、本身免疫系统疾病和遗传代谢病等多种疾病。生物治疗药物在临床和商业上的成功引起了行业内对其开发的日益重视，需要高质量的生物分析来支持这些药物的开发。 与常规药物一样，评估大分子药物的安全性和有效性需要彻底了解其药代动力学（PK）、药效学（PD）、毒代动力学（TK）以及免疫原性等特征。在药物与机体相互作用中，PK是研究机体对药物的处置作用，而PD和TK是分别研究药物对机体有益/有害的效应。PD/PK和PK/TK的相互关系是药物药理学评价的核心。FDA、NMPA等监管机构要求药物进入临床前必须证明其有效性和安全性，临床前和临床研究均需要研究药物的PK，同时FDA建议对免疫原性风险检测最好在IND阶段和临床I期开展。因此，建立好的PD/PK/TK等生物分析方案对于大分子药物的临床前及临床分析评价极为重要。 与小分子药物相比，大分子药物具有分子量大、结构复杂、细胞外基质不容易透过、使用量低、身体易溶解等特性，其生物分析充满挑战。 生物大分子药物与传统小分子药物的药代动力学 特征比较（药学进展 ，2018年8期 ） 传统的生物分析方法通常依赖于基于小分子检测的液质联用系统和基于生物制剂的配体结合分析（ligand-binding assay，LBA)），目前这两种方法也用于抗体等生物药的生物分析中。在现在的创新药物中，还有mRNA、病毒载体、细胞治疗产品等，这些药物本质上并非蛋白质药物，因此qPCR、流式细胞术、成像技术等手段也越来越多地用于生物药的生物分析中。 01 基于配体结合分析 生物分析中基于配体结合分析LBA是一种常用的分析工具，用于根据与其他生物分子的相互结合作用（binding interaction），定量测定生物分子（目标分析物，Analyte）在生物体液中的浓度，主要包括酶联免疫(ELISA)等。 目前ELISA是生物制药行业使用最广泛的配体结合式（LBA）检测平台，它一直以来都是蛋白质定量分析最常用的技术，现在大多数生物标志物的商业检测试剂盒都是基于ELISA的。这项技术对于某些临床前生物分析的应用仍然很有吸引力，比如血清单克隆抗体的PK。但是ELISA操作复杂、测试运行时间长，采用自动化平台可缩短分析人员操作的时间， 提高工作效率。 丹纳赫生命科学旗下贝克曼库尔特的Biomek i7自动化工作站结合美谷分子仪器的SpectraMax i3 多功能酶标仪，可以自动化地对样本进行高通量的ELISA操作，大大避免实验误差及重复的人工劳动。 自动化工作站进行ELISA实验流程 自动化工作站进行ELISA实验的结果 02 液相色谱串联质谱检测系统LC-MS/MS 与LBA 相比，LC-MS/MS 在生物分析中的优势在于可以提供快速的方法开发和验证、高特异性和高重现性，还可以实现多种分析物同时定量。另外，LC-MS/MS 方法也更容易在不同的分析物类别和基质之间转移。但是灵敏度、样品制备、方法开发和定量准确度相关的难题也亟需解决。 丹纳赫生命科学旗下SCIEX开发了一种通用的混合LBA和LC-MS/MS两种技术的工作流程，该工作流程结合了这两种技术的优势，可用于蛋白质药物的PK分析。该方法检测阿达木单抗在小鼠血浆中的浓度，先用磁珠方法进行免疫亲和性样品的制备，然后将阿巴利单抗标准品进行消化后进入TripleTOF™ MS系统进行肽图谱分析，用以选择蛋白质定量的特征性肽段。在QTRAP 6500+系统进行定量分析后，50 到 10000 ng/mL 的线性关系可达0.99763，定量限为50 ng/mL。 LC-MS/MS方法的前处理流程 阿达木单抗的提取离子色谱图    SCIEX QTRAP™ 6500+ 系统 03 qPCR技术 qPCR法是常用的分析核酸药物表达量的一种方法，其定量下限可以达到pg/mL甚至fg/mL，这可以极大增强药物在体内暴露的检测时间。此外，RT-qPCR使用的样本量极少，只需要几微升血浆样本或1毫克组织即可满足分析需求，减少了对珍贵样本的使用，而且能够使用384孔板实现对样本的高通量分析。然而获得信号特异、低背景的qPCR结果也非易事，丹纳赫生命科学旗下IDT埃德特的双淬灭荧光探针，在靠近报告基团9bp左右的位置增加一个中间淬灭基团，为FRET作用中提供了一个能量的“中转站”，拉近了能量传递中每个基团间的距离，从而提高了荧光淬灭率降低了背景信号。 IDT 双淬灭荧光探针示意图 （蓝色序列片段即为双淬灭荧光探针） 在过去20年中，新型治疗方式的出现改变了生物分析领域的现状，导致了一系列技术的发展和成熟。在发现阶段以及药物开发的临床前和临床阶段，健全的生物分析方法非常重要，这将有助于开发更安全、更有效的药物，同时减少开发的时间和成本。丹纳赫生命科学一系列先进的生物分析工具和方法能够有效帮助应对创新药物复杂结构和不同作用机制对PK、PD和免疫原性评估提出的重大挑战。 二、药物分析方法开发:DoE在分析方法开发中的应用 （药研知讯） 分析方法应用在药物研发的不同阶段，其目标与目的各不同，不同药物研发阶段对应着不同特点的分析方法开发。基于质量源于设计的理念，实验设计在分析方法开发中的应用越来越多，它帮助制药分析人员更多的理解和掌握分析方法知识，从而不断提高产品质量控制手段和策略。 分析方法开发的不同阶段 候选药物开发阶段，分析方法用于支持临床前的药物纯度与含量的评价，处方前研究的评估，以及原始早期化合物稳定性研究。这个阶段分析方法以检测为主，基本不需要有过多的设计与开发，试错法完全可以满足当前阶段要求。根据化合物的结构特点，筛选找到合适的检测器和色谱系统，方法有足够的专属性，能满足它的目标。 临床研究阶段，在药物完成初步筛选和安全性评估后，得到官方的批准进入临床试验。这个阶段的分析方法需要有足够的能力完成化合物鉴别、纯度、表征、含量，以及药物效价的评估。该阶段分析方法需要有简单的验证或者确认，以确保方法的专属性、可靠性、准确性和精密度。 药物上市后研究阶段，分析方法常常发生不同实验室的技术转移，因此方法的耐用性在该阶段需要重点考察。经历前面临床研究的稳定性考察，分析方法得到进一步优化，其专属性和准确性将得到进一步的确认，以用于商业化产品的放行和稳定性考察。 分析质量源于设计（AQbD，Analytical Quality of Design） 传统分析方法开发采用的试错法用于单因素单水平的试验，需要不断摸索、不断重复试验，最后幸运地找到一个合适的方法。这种方法开发的模式比较盲目，费时费力费成本，方法开发时不会考虑各参数的空间，耐用性差，不同实验室转移时常出现方法测试不能重现的现象。 现代分析方法开发是基于分析质量源于设计的理念，对方法进行系统性的研究，多因素多水平同时评估。利用方法开发工具和统计学软件进行数据的分析与处理，最后得到一个高性能的方法。这类方法耐用性好，设计空间可靠，准确性高，收集的方法知识多，使用的生命周期长，大大节省人力和时间成本。 新药研发重点关注药物的质量可控性、安全性和有效性。通过质量源于设计和过程分析等工具，帮助制药行业不断提高药品研发的质量。ICH Q8、Q9和Q10紧密联系，为药物的开发研究、质量风险管理，以及制药质量体系提供了很好的理论和实践指南。ICH Q11为原料药的合成工艺开发、设计和质量提供了实施指南。 相对于原料药工艺开发的设计，ICH目前还没有具体的指南用于指导分析方法开发，在不久的将来，ICH Q14将为分析方法开发提供实践指南，内容包含有分析质量源于设计的部分，分析行业人员期待该指南的正式发布。 相对于工艺的质量源于设计过程，分析方法的开发设计流程类似，如图1。首先找到方法中分析目标概况→定义关键质量属性→对方法进行初步的风险评估→方法优化和实验设计→找到方法的可操作和设计区域→得到方法的控制策略，进一步风险评估→基于QbD的方法验证→最后进行持续的方法监测。 图1：分析QbD工具和生命周期 分析方法的QbD手段有三种方式：实验设计、风险评估和过程分析。实验设计和风险评估是实践中较为常用的手段。 在进行方法开发实验设计时，首先对方法进行初步的风险评估，找到影响方法的关键变量参数，设计关键因素不同水平的实验，得到一系列的数据，使用工具软件导入与处理这些分析数据，进行色谱数据的统计学分析，建立数学模型，最后找到分析方法重要参数的可设计空间。 分析方法开发实验设计（DoE，Design of Experiment） 以有关物质HPLC方法为例，它的分析目标概况大致包括下面内容，如表1： 表1：有关物质HPLC方法通用分析目标概况序号有关物质方法要求序号有关物质方法要求1分析物的数量（API和杂质）12检测器（紫外/示差折光/蒸发光散射/电雾式）2所有分析物的分离13建立相对保留时间/相对响应因子3流动相（缓冲液和有机溶剂）14流速4洗脱方式（梯度或等度）15进样体积5样品浓度16柱温箱温度6样品溶剂17运行时间7对照品和样品溶液稳定性18系统适用性参数选择与限制8样品制备过程（释释和超声过程）19检测限和定量限浓度的确定9过滤或离心20杂质计算方法10杂质标准限度21准确度（回收率）11色谱柱类型（固定相或尺寸） 对上述的21个分析目标概况进行分析，用理论知识和实践经验找到关键影响因素，减少变量，简化数学模型。 图2：影响有关物质分析方法的因素 对图2中影响方法开发的四个因素，进行初步的风险评估，得到实验设计中具体的关键影响因素，如表2。 表2：有关物质HPLC方法的风险评估分析影响选择性因素严重性发生率检测是否关键（Y/N）色谱柱填料（硅胶）311N键合化学321N厂家111N流动相pH322Y有机溶剂比例223Y流速322Y样品溶解性112N仪吕检测波长312N柱温322Y 通过风险评估，确认影响分析方法选择性的关键影响因素：流动相的pH，有机溶剂的比例，流速和柱温。根据风险评估确定的影响因素对方法开发进行实验设计（DoE, Design of Experiment）。 实验设计是应用统计学的一个分支，通过计划、执行和分析，以及解释一系列控制性的测试，用于评估对工艺参数的影响因素。实验设计是一个非常有用的数据收集和统计分析工具。 用于筛选的实验设计工具包括全因子设计, 部分因子设计,placket-burmann,混料设计和最优设计等。用于优化的实验设计包括Central composite design, Box Benken和Doehlert等。 分析方法实验设计时，通过不同因素不同水平实验得到的响因值，建立因素与响因值之间的回归模型关系。比如对单因素水平流动相pH值的筛选：不同pH值条件下，可以得到不pH条件下化合物之间的分离度，通过系列的pH值和分离度数据，建立pH值和分离度的数学回归模型，从而找到化合物在某pH值条件下的最佳分离度，同时还可以找到满足分离要求的pH值空间范围。 常用的色谱优化实验设计软件包括，Drylab,ACD ChromManager和ChromSword。 简单的实验计为单因素设计。比如，筛选方法的pH值，分离度为关键属性（Rs），三个水平pH2.9、3.5和4.1。只需要进行三次实验，得到的分离数据建立单因素三水平的模型，通过模型找到最佳分离并预测pH值。 稍微复杂一点的分析方法开发，需要对两个因素两个水平的考察。比如梯度和温度，各两个水平。需要2*2，4次实验，建立模型用于预测不同梯度和温度条件下的分离情况，找到两个因素的最佳范围。 再复杂一点的方法设计，在上面两因素两水平的条件下，引入一个因素pH值，三个水平，这时需要2*2*3，12次实验，建立模型预测三个因素的最佳范围。 现代实验设计的色谱工具软件已经发展的非常强大， 可以建立多因素多水平的实验模型，建立二维、三维、甚至多维的模型图，预测复杂的成分分离，建立实验条件的耐用性范围。 关于有关物质分析方法实验设计实例 选择方法中的四个关键方法参数：梯度程序，柱温，流动相pH，以及有机相组成及比例，每个参数选择不同个水平，具体的流程如下图3： 图3：方法开发实验流程 分析的化合物包括扁桃酸、邻苯二甲酸、间羟基苯乙酸、异香兰素、对乙酰氨基酚、对羟基苯乙酸、苯甲醇、香兰素酸、4-羟基-3-甲氧基苯甲醇及其它未知成分。 实验条件为梯度程序两个水平：30min和90min，色谱柱温度水平：30摄氏度和60摄氏度，流动相水相离子浓度100mM三个pH水平：2.4、3.0和3.6。流动相有机相组成三个水平：纯乙腈，纯甲醇，乙腈：甲醇（50：50）。 梯度程序和温度两个水平，pH值和有机相比例各三个水平，共36次实验，得到36组色谱数据，四因素设计如图4。 图4：分析方法开发：四因素优化实验设计 得到36组数据后，使用工具软件对数据中的色谱峰分析、识别与标记。匹配完成，所有产生的色谱数据将自动导入工具软件中，得到分离二维图（图5）。每个图对应固定的pH值和有机相，以及梯度和柱温两因素模型图。在各图中可以找到分离度大于1.5的各因素的空间和范围。 图5：梯度与温度的二维分离回归模型图 不同梯度、温度、pH和有机相比例的模拟结果如下表3： 表3：不同有机相和pH对应的分离度 可以看到，不同pH值，pH3.0分离度最高，pH3.0次之，pH3.6最低；不同有机相，甲醇分离度最高，混合溶剂次之，乙腈最低。  在pH3.0的条件继续优化温度和梯度程序，找到最优的梯度和温度，软件模拟和真实实验色谱分离如下图6，结果非常接近： 图6：优化温度和梯度条件下的预测和真实色谱图 通过上面的多因素与多水平的优化，能找到多对关键色谱分离对，说明在分析方法开发时，尤其是复杂的有关物质分离，固定一对分离对是很难实现的。通过软件建立分离模型，可以找到多对分离对的设计空间，如图7。 图7：移动的关键色谱分离对 在工具软件中，可以通过多因素多水平的实验，建立三维的模型。上例中在pH3.0条件的三维模型图，如梯度、温度和有机相比例，能够找到温度、梯度和有机相比例三个因素的色谱分离耐用性范围，如图8。 图8：三因素三维模型图 通过建立三维模型图，对实验中实际产生的各峰保留时间与模型中预测的保留时间进行对比，如表4，两者的相关性良好： 表4：在pH3.0,有机相ACN:MeOH(25:75)，柱温42摄氏度，梯度120min，条件下各峰保留时间和模型预测的保留时间 运用软件工具，对梯度和流速进一步的优化，最终得到20min内实现14个组分优良分离的条件，如图9。 图9：保留时间的最终优化 该实例充分运用分析方法QbD理念，通过实验设计，大幅减少实验的次数，仅用了36次实验，通过多因素多水平建立的分离模型，提高色谱分析工作效率，得到的分析方法具有良好的耐用性范围，最佳分离度，以及适当的保留时间。 结束语 FDA相关专家认为，通过分析质量源于设计，可以帮助制药专业分析人员更多地了解和理解产品工艺参数，收集影响产品风险的知识，确认产品的工艺和质量风险，最终帮助制药人员用于产品工艺和质量持续性改进和生命周期的管理。 参考文献： 1.Analytical Quality by Design Approach to Test Method Development and Validationin Drug Substance Manufacturing. N.V.V.S.S.Raman, et al. Journal of Chemistry,2015. 2.USP: ICH guideline Q14 Analytical Procedure Development, Amanda Guirldelli, 2018 3.QbD Considerations for Analytical Methods – FDA Perspective, IFPAC AnnualMeeting, Baltimore, Sharmista Chatterjee, January 25, 2013. 4.Aspects of the “Design Space” in high pressure liquid chromatography method development.I.Molnar,2010. Journal of Chromatograph A. 三、小分子及大分子药物生物分析种类及方法 （先导药物） 前言 作为新药研发中不可或缺的一环，生物分析旨在研究生物分子、细胞和组织在各种生理和病理条件下的变化和功能，它涉及从基因组学到蛋白质组学，再到代谢组学的广泛领域，为生物医学研究提供了深入、全面的视角。在制药行业中，生物分析被广泛应用于药代动力学、毒代动力学、一致性评价、生物利用度、药效动力学等方面‌，通过深入研究生物分子的相互作用和功能，帮助科学家们更好地理解疾病的发病机制和药物的作用机制，为新药的发现、开发和优化提供了坚实的基础。 今天我们为大家介绍几种常见的药物 分析检测方法： 01 小核酸生物分析 小核酸药物的分析方法众多，不同的分析技术在定性、定量等不同应用场景中均有优势和不足。其中，LC-MS分析技术具有灵敏度高、检测限低、线性范围宽和特异性强等特点，已成为主流的分析方法；液相色谱荧光检测法（LC-FLD）具有优异的灵敏度优势，是重要的生物分析补充方法。成都先导分析平台（下文简称“平台”）同时开发了LC-MS和LC-FLD方法，可完成寡核苷酸药物的体外稳定性评估以及体内药代动力学分析。目前平台检测的小核酸药物覆盖ASO、siRNA和Aptamer三大类型，完成了ASO-PO、ASO-PS、ASO-LNA、Dimer-ASO、siRNA-LNP、siRNA-GalNAC、C16-siRNA、siRNA-Aptamer等近30种不同修饰或递送基团的核酸检测。平台建立的LC-MS方法在体内组织样品中的定量下限可低至1.0 nM；利用PNA荧光探针开发的LC-FLD方法，其定量下限可低至0.05nM（图1）。 图1. 小核酸生物分析方法和定量下限 LQC:低浓度质控；LLOQ：定量下限；QC0:零浓度样品（含内标的处理过的基质）；Blank：空白样 02 ADC药物的DAR检测 ADC是将单克隆抗体通过偶联臂与小分子药物共价偶联形成的复合物，其以单抗为载体将小分子药物靶向运输至目标肿瘤细胞，进而发挥抗肿瘤作用。DAR是描述ADCs特征的一个重要理化参数，它决定了小分子药物的载量，影响着ADCs的安全性和有效性。DAR的分析方法包括紫外可见分光光度法、液相色谱法以及液质联用法等，其中质谱检测具有更高的灵敏度、特异性和准确性，对DAR的分析更具优势。平台基于Q-TOF开发了RP-LCMS法和SEC-LCMS法，可应用于变性条件和非变性条件下获得ADC药物的DAR值（图2）。 图2. ADC药物DAR值分析 03 小分子药物生物分析 在过去30年里，LC-MS/MS凭借其特异性、灵敏度和分析速度方面的优势，一直是许多小分子药物分析的首选方法。然而，生物分析样本（如血浆、血清、组织、尿液和其他基质）含有的脂肪、糖和蛋白等内源性物质容易干扰目标物的检测，影响实验的准确性和重现性。为了应对这些挑战，平台开发了基于三重四级杆质谱体系和Q-TOF的LC-MS/MS方法，可解决生物介质样品干扰杂质多、浓度低、样品少等问题，具有良好的重现性、线性范围和信噪比。目前，平台的检测项目覆盖体外稳定性考察和体内组织分布项目，可承接的生物样品种类包括血清、血浆、肝、肾以及肿瘤组织等，定量下限低至2.0 nM（图3）。 图3. 小分子药物的定量分析 04 小分子和多肽AS-MS AS-MS是一种小分子药物发现的早期筛选方法，该技术利用活性小分子与靶蛋白间的亲和作用形成蛋白-小分子复合物，并通过特殊方法提取出复合物中的小分子，再配合高分辨率高灵敏度的质谱分析，完成目标配体的定性定量鉴定。相较于传统的高通量筛选模式，AS-MS可以做到上千个化合物混合筛选、一次分析的高效模式，效率大大提升。平台建立了小分子和多肽的AS-MS技术，利用磁珠法捕获蛋白-小分子复合物，通过洗脱得到复合物中的目标配体，再利用LC-MS鉴定目标配体（图4）；不仅如此，还可以利用LC-MS的定量技术进一步评价蛋白与配体的特异性结合能力。目前，平台已检测AS-MS样品40余批次，积累了丰富的分析经验。 图4. AS-MS筛选和定量分析 05 PEG和PEG-小分子定性分析 聚乙二醇（PEG）是一种被广泛应用于蛋白质和多肽等的共价修饰高分子材料。PEG化修饰是将PEG共价结合在药物上，以改善药物的药代动力学、药效学和免疫学特性，从而增强其治疗效果的一种药物技术。PEG可以增加蛋白质的溶解度和稳定性，也有利于药品的生产和存储，因此也常被用作药物递送系统和辅料。PEG和PEG化药物的生物分析，对于更好地控制不良反应以及设计更高效、靶向性更好的PEG化药物具有重要意义。LC-MS具有高灵敏度和选择性，并且相较于其他技术的开发时间更短，近年来被应用于PEG和PEG化药物的定性定量分析。平台开发了LC-MS方法检测PEG、PEG-官能团及PEG-小分子的分子量信息（图5），辅助判断PEG作为辅料或修饰基团是否符合安全性和有效性要求。 图5. PEG及PEG-小分子的分子量分析 06 完整蛋白质分子量分析 分子量测定是生物药研发及生产中不可或缺的表征内容，在完整蛋白层面进行分子量测定可用于评估抗体药物结构完整性，获得药物抗体偶联比。实现蛋白质药物分子量测定依赖于高分辨率和高质量精度的仪器，质谱技术因其快速、准确、可实现相对定量的特点，已广泛应用于完整蛋白质的分子量确定。平台利用Q-TOF的高分辨分析能力建立了完整蛋白质分子量的检测方法，包括反相色谱(RP)、分子排阻色谱（SEC）以及质谱（MS）直接进样的方法，检测蛋白样品超过100个，涵盖了变性及非变性体系的检测手段，再经过质谱数据解卷积，为完整蛋白质分子量检测提供快速且直观的结果（图6）。 图6. 完整蛋白质分子量检测 成都先导分析平台介绍 成都先导分析平台凭借丰富的分析设备资源和药物分析经验，已成功开发出多种生物分析方法。检测对象覆盖：小核酸、小分子、多肽、聚乙二醇（PEG）以及蛋白质药物（图7）；检测项目包括：小核酸及小分子药物的体外稳定性考察和体内组织代谢分布，小分子和多肽的亲和质谱（AS-MS）分析，PEG及PEG结合小分子的定性分析，抗体偶联药物（ADC）的药物抗体偶联比（DAR）检测以及完整分子量计算。平台制定了严格的生物分析标准操作规程，实现了样本处理的标准化，确保样本分析的高质量。平台可根据客户的具体需求和项目特性，推荐最佳分析方案，为客户提供全面定制化的研发分析解决策略。 图7. 成都先导分析平台业务范围 成都先导分析平台的设备资源 成都先导分析平台拥有多台高精设备仪器（图8），可提供高质量的检测数据，满足多类型样品检测需求。平台配置了四级杆飞行时间液质联用仪（Q-TOF），结合四级杆的质量过滤和离子传输能力，以及飞行时间器的高分辨率等多项技术优势，为分析人员提供高精度的质量检测和强大的质谱分析。高效液相色谱仪（HPLC）配备了5种检测器，包括示差、荧光、蒸发光、二极管阵列及质谱检测器，可覆盖大多数类型样品的检测需求。三重四级杆液质联用仪（Triple Quadruple LC-MS/MS）结合了液相色谱和三重四级杆质谱的分析技术，具有高灵敏度、高稳定性等多种技术优势，可监测样本中的基质干扰物、代谢物、杂质和降解产物，同时可以准确定量目标化合物，广泛应用于复杂样品的定量和定性分析。同时，平台还拥有超高效液质联用（UPLC-MS）、液质联用（LC-MS）和HPLC设备共30余台，能够满足客户的各类检测需求。 图8. 成都先导分析平台高精密仪器 end 本公众号声明： 1、如您转载本公众号原创内容必须注明出处。 2、本公众号转载的内容是出于传递更多信息之目的，若有来源标注错误或侵犯了您的合法权益，请作者或发布单位与我们联系，我们将及时进行修改或删除处理。 3、本公众号文中部分图片来源于网络，版权归原作者所有，如果侵犯到您的权益，请联系我们删除。 4、本公众号发布的所有内容，并不意味着本公众号赞同其观点或证实其描述。其原创性以及文中陈述文字和内容未经本公众号证实，对本文全部或者部分内容的真实性、完整性、及时性我们不作任何保证或承诺，请浏览者仅作参考，并请自行核实。