LAMTOR1

林圣彩团队长期且系统地致力于葡萄糖感知机制到辟谷/间歇性饥饿与长寿的原理研究，解析了细胞的葡萄糖感知以及偶联到AMPK激活的全新机制即开创性发现的“AMPK活化的溶酶体通路”，围绕AMPK激活发表了一系列重量级文章。 2022年2月，该团队在Nature上发表题为“Low-dose metformin targets the lysosome–AMPK pathway through PEN2”的文章，用“钓鱼”的方法破解了二甲双胍直接作用靶点之谜，找到了二甲双胍的分子靶点——PEN2，能够介导二甲双胍启动溶酶体途径激活AMPK。敲除PEN2后，二甲双胍不但不能激活AMPK，它对于降低脂肪肝、缓解高血糖、延长寿命等诸多效果就都不存在，充分说明二甲双胍通过PEN2激活AMPK，并起到各种功效，即PEN2是二甲双胍的靶点。 近日，该团队在Nature上同时发表2篇文章，聚焦于4个关键词“卡路里限制”，“衰老”，“AMPK”，“石胆酸” 第一篇文章：从卡路里限制小鼠的血清出发，经过代谢组学鉴定和随后的逐个排查，最终找到了卡路里限制的模拟物——石胆酸，并在线虫、果蝇和小鼠中分别验证了石胆酸延缓衰老，延长寿命的作用。 第二篇文章：作者进一步探索石胆酸的作用机制，最终找到了石胆酸的分子靶点——TULP3，并发现了TULP3能够通过激活sirtuin-v-ATPase信号轴，激活在卡路里限制中起到延缓衰老关键作用的AMPK。 现对两篇文章做细致解析： 文献1：石胆酸发挥类似于热量限制的抗衰老作用 1、来自CR处理小鼠的血清可以激活细胞和小鼠中的AMPK 在这项研究中，作者推断热量限制（CR）后发生变化的血清代谢物可能具有在细胞和生物体水平上诱导有益作用的能力。从经CR 4个月的小鼠制备的血清（CR血清）足以激活小鼠胚胎成纤维细胞（MEF） 、HEK293T细胞、原代肝细胞和原代肌细胞中的AMPK。通过测量AMPKα（pAMPKα）和底物乙酰辅酶A羧化酶（pACC）的磷酸化水平来评估AMPK活化。此外，将CR血清灌注到随意饮食的小鼠中导致肝脏和肌肉中的AMPK激活，这表明CR血清足以在生物体水平上激活AMPK。 在56°C加热后，CR血清保留了在培养细胞中激活AMPK的能力，而透析的CR血清则不能，这些结果表明，CR血清中存在的热稳定、低分子量代谢物可以赋予激活AMPK的能力。接下来，作者对CR处理的小鼠和非CR处理的小鼠（对照血清）制备的血清样品进行了一系列代谢组学分析。 将CR血清通过亲脂性Lipidex柱后，该柱可吸收非极性化合物和脂质，洗脱的馏分仍然保留了在MEF中激活AMPK的能力，结果表明非极性化合物和脂质可能不参与AMPK激活。因此，作者专注于CR后发生改变的极性代谢物（212种增加，129种减少），并评估了这些代谢物在MEF中激活AMP 的能力。在CR后增加的212种代谢物中，有204种进行了MEF中AMPK活化的检测（8种由于无法合成代谢物或法律禁止而未进行检测），鉴定出6种代谢物可激活AMPK（图1）。 图1 来自CR处理小鼠的血清可以激活细胞和小鼠中的AMPK 2、LCA在CR后增加并负责AMPK激活 在初步筛选测定中鉴定的六种AMPK激活代谢物中，在MEF、HEK293T细胞、原代肝细胞和原代肌细胞中测试时，LCA是唯一在培养基中以1μM 激活AMPK的代谢物（浓度类似于CR后血清中检测到的浓度）。与AMPK 激活一致，pACC增加，并且mTORC1被抑制。此外，当CR血清通过Lipidex色谱柱时，LCA被部分吸收（约30%），这解释了为什么过滤后的CR血清显示激活AMPK的能力降低。值得注意的是，尽管其他胆汁酸在CR期间上调，但它们并没有激活AMPK。此外，LCA衍生物在MEF中也没有激活AMPK。这些结果表明LCA是CR血清中的一种特异性代谢物，可在生理浓度下激活AMPK（图2）。 图2 LCA在CR后增加并负责AMPK激活 3、LCA发挥抗衰老效果依赖于AMPK 接下来，作者评估了了LCA对衰老相关表型的影响。结果显示，对老年雄性和雌性小鼠施用LCA 1个月可改善肌肉性能的各个方面，其程度与CR期间观察到的相似。值得注意的是，LCA 给药不会导致肌肉流失，这一结果与CR后小鼠和人类肌肉含量的减少形成鲜明对比。与肌肉功能的改善一致，LCA治疗改善了与年龄相关的葡萄糖耐量不良和胰岛素抵抗。而敲除小鼠肌肉中的AMPKα抑制了LCA在改善肌肉功能方面的作用（图3）。 图3 LCA发挥抗衰老效果依赖于AMPK 4、LCA延长了寿命和健康寿命 接下来，作者测试了LCA是否可以延长使用寿命。使用秀丽隐杆线虫和黑腹果蝇作为模型，因为CR可以诱导其寿命延长，且依赖于AMPK。结果显示LCA显著改善了线虫和果蝇的寿命和健康寿命。而敲除线虫和果蝇中的AMPK消除了LCA的所有抗衰老作用，这表明AMPK对于LCA的效果是必需的。最后，作者测试了LCA对小鼠寿命的影响，结果显示LCA增加小鼠的中位寿命。因此，LCA处理足以模拟CR对线虫、果蝇和小鼠的抗衰老作用（图4）。 图4 LCA延长了寿命和健康寿命 文献2：石胆酸结合TULP3激活sirtuins和AMPK以延缓衰老 1、LCA导致v-ATP酶脱乙酰化以激活AMPK 在这项研究中，作者测试了LCA是否通过溶酶体途径激活AMPK。结果显示LCA诱导AXIN-LKB1转位到小鼠胚胎成纤维细胞（MEF）中的溶酶体，增加AXIN-LKB1和v-ATP 酶-Ragulator 之间复合物的形成，抑制了MEF中的v-ATP酶，而敲除编码v-ATP酶、Axin1或Lamtor1（编码 Ragulator 的一个亚基）阻止了LCA介导的AMPK 激活。结果表明LCA抑制v-ATP酶通过溶酶体途径激活AMPK。 接下来，作者探讨了LCA如何抑制v-ATP酶，发现LCA在醛缩酶和TRPV受体的下游发挥作用，进入溶酶体AMPK通路。进一步作者想知道 v-ATP 酶的翻译后修饰是否可能是 LCA 介导的 AMPK 激活的起始点，免疫沉淀结合质谱发现v-ATP酶乙酰化最常见，添加抑制去乙酰酶的烟酰胺和曲古抑素A，阻止了 LCA 介导的 AMPK 激活，表明去乙酰化是 LCA 的一种可能作用机制，进一步深入研究确定了关键氨基酸残基，这些数据表明LCA对V1E1的去乙酰化通过溶酶体途径激活AMPK（图5）。 图5 LCA导致v-ATP酶去乙酰化以激活AMPK 2、去乙酰化酶是 v-ATP 酶去乙酰所必需的 接下来，作者探讨了LCA如何导致V1E1去乙酰化。Sirtuin去乙酰酶家族（SIRT1-SIRT7）的任何成员的异位表达，但不是其显性阴性突变体，足以导致V1E1脱乙酰化。相比之下，没有组蛋白脱乙酰酶（HDAC1-HDAC11）使K99去乙酰。这些结果表明sirtuins而不是HDAC参与V1E1的去乙酰化。此外，敲除编码 SIRT1-SIRT7 的基因 （Sirt1-7–/–） 阻断了LCA诱导的V1E1 脱乙酰化、v-ATP酶抑制和AMPK激活，而将单个sirtuins重新引入Sirt1-7–/–MEF部分恢复了LCA的AMPK激活，SIRT1产生最强的效果。此外，LCA在仅表达SIRT3-SIRT5的MEF中激活了AMPK和脱乙酰化V1E1（图6）。 图6 去乙酰化酶是 v-ATP 酶脱乙酰所必需的 3、TULP3 是LCA的结合蛋白，用于激活sirtuins 然后，作者探讨了LCA如何激活sirtuins。结果发现在使用无细胞系统中（纯化的SIRT1与LCA孵育），LCA没有激活SIRT1，此外，pulldown发现LCA不与SIRT1结合。然而，在与MEF的裂解物预孵育后，添加LCA后，SIRT1活性增加，这些观察结果表明，LCA通过细胞裂解物中的未知伴侣激活sirtuins。 通过Pulldown结合质谱鉴定发现1655种潜在的SIRT1结合蛋白，设计了所有1655种蛋白质的表达质粒，并验证了其中157种蛋白在HEK293T细胞中单独表达时可以被HA标记、MYC标记或Flag标记的SIRT1共免疫沉淀。然后，通过慢病毒介导的短发夹RNA沉默分别敲低MEF中的这157种蛋白质。敲低Tulp3（有报道可与SIRT1相互），使细胞对LCA处理不敏感。 接着，作者通过评估pAMPKα的水平、V1E1和组蛋白H3的乙酰化以及v-ATP酶的活性，证实了这一结果。敲除Tulp3的MEF证实了TULP3对LCA诱导的AMPK和sirtuins激活的需求。深入研究证实LCA可结合TULP3以激活SIRT1（图7）。 图7 TULP3是LCA的结合蛋白，用于激活sirtuins 4、LCA-TULP3-sirtuin-v-ATP酶轴发挥恢复活力的作用 接下来，作者确定了动物模型中TULP3-sirtuin-v-ATP酶轴是否介导LCA和CR的年轻化和抗衰老作用。结果显示V1E1（3KR）是 v-ATP 酶 V1E1 亚基的去乙酰化形式，其肌肉特异性表达导致AMPK激活，改善老年小鼠的肌肉功能，独立于LCA，而AMPK的肌肉特异性敲除损害了V1E1（3KR）表达带来的所有好处。肌肉特异性将TULP3（4G）重新引入肌肉特异性敲除Tulp3的小鼠中，阻断了CR介导的肌肉年轻化作用。 然后，作者使用秀丽隐杆线虫和黑腹果蝇作为模型来测试TULP3和sirtuins在LCA对寿命调节中的依赖性。发现敲除 tub-1（线虫中的TULP3同源物）或敲除ktub（黑腹果蝇中TULP3同源物）损害LCA对AMPK的激活，并消除LCA 对寿命延长的影响。此外，tub-1和ktub都能够结合LCA，而这三个残基tub-1（3G）和ktub（3G）突变体的突变使各自的蛋白质无法介导AMPK 激活和LCA的寿命延长。将野生型 TULP3 而不是TULP3（4G）重新引入tub-1敲除蠕虫和ktub敲除果蝇中，恢复了LCA延长寿命的程度。线虫中去乙酰化酶的敲低和果蝇（敲除Sir2）损害了LCA诱导的AMPK 激活和寿命延长（图8）。 总之，这些结果表明TULP3–sirtuin–v-ATP酶轴通过v-ATP酶的V1E1亚基的去乙酰化将LCA信号传递到AMPK激活，最终在线虫、果蝇和小鼠中复制CR的有益作用。 图8 LCA-TULP3-sirtuin-v-ATP酶轴发挥恢复活力的作用 总结 厦门大学林圣彩院士团队从卡路里限制小鼠的血清出发，经过代谢组学鉴定和随后的逐个排查，最终找到了卡路里限制的模拟物：石胆酸（LCA），并在线虫，果蝇和小鼠中分别验证了石胆酸延缓衰老，延长寿命的作用。在此基础上，作者又进一步探索，最终找到了石胆酸的分子靶点——TULP3，并发现了TULP3能够通过激活sirtuin-v-ATPase信号轴，激活在卡路里限制中起到延缓衰老关键作用的AMPK（AMP-activated protein kinase）蛋白，从而延缓衰老（图9）。 图9 石胆酸激活TULP3-sirtuin-v-ATPase-AMPK通路重现热量限制抗衰作用 参考文献 Qu Q, Chen Y, Wang Y, Long S, Wang W, Yang HY, Li M, Tian X, Wei X, Liu YH, Xu S, Zhang C, Zhu M, Lam SM, Wu J, Yun C, Chen J, Xue S, Zhang B, Zheng ZZ, Piao HL, Jiang C, Guo H, Shui G, Deng X, Zhang CS, Lin SC. Lithocholic acid phenocopies anti-ageing effects of calorie restriction. Nature. 2024 Dec 18. doi: 10.1038/s41586-024-08329-5. Epub ahead of print. PMID: 39695227. Qu Q, Chen Y, Wang Y, Wang W, Long S, Yang HY, Wu J, Li M, Tian X, Wei X, Liu YH, Xu S, Xiong J, Yang C, Wu Z, Huang X, Xie C, Wu Y, Xu Z, Zhang C, Zhang B, Feng JW, Chen J, Feng Y, Fang H, Lin L, Xie ZK, Sun B, Tian H, Yu Y, Piao HL, Xie XS, Deng X, Zhang CS, Lin SC. Lithocholic acid binds TULP3 to activate sirtuins and AMPK to slow down ageing. Nature. 2024 Dec 18. doi: 10.1038/s41586-024-08348-2. Epub ahead of print. PMID: 39695235. 声明：发表/转载本文仅仅是出于传播信息的需要，并不意味着代表本公众号观点或证实其内容的真实性。据此内容作出的任何判断，后果自负。若有侵权，告知必删！ 长按关注本公众号  粉丝群/投稿/授权/广告等 请联系公众号助手 觉得本文好看，请点这里↓

俗话说“要想活到老，饭吃七分饱”，而这里的“七分饱”，说的便是受到衰老研究领域广泛认可的一种延长寿命、延缓衰老的方法——卡路里限制 （calorie restriction, CR）：它是指在不造成营养缺乏的基础上，将食物的摄入量减少到原先的70%左右的饮食方式。卡路里限制的强大之处在于它是目前为止唯一一种在所有被研究过的实验动物——包括酵母、线虫、果蝇、小鼠和灵长类中，都能观察到抗衰老的益处的方法。近年来，在人群的回溯性与实验性研究中，也观察到了卡路里限制能改善衰老相关的肥胖、胰岛素抵抗、肌肉退化、血脂异常和癌症等并发症，并且不影响受试者的生活质量。 然而，尽管卡路里限制有如此广泛的益处，长期的饮食控制在人群中却是难以推广的，尤其是在真正需要延缓衰老的老年人群中，限制饮食还可能造成他们的营养不良和肌肉萎缩。因此，探究卡路里限制抗衰老的“好的一面”，也就是它延缓衰老的具体机制，并在此基础上模拟卡路里限制，最终让人们不用控制饮食，便能达到延年益寿的效果，就是我们追求的目标。目前，已有大量能够模拟卡路里限制的药物——如二甲双胍、白藜芦醇和雷帕霉素等，他们的共同特征都是靶向卡路里限制下游的关键作用蛋白以及通路，达到延寿的目的。然而，机体在真实的卡路里限制中发生了什么改变，这些改变产生了什么信号，又如何传导到上述通路并发挥抗衰老的作用，尚未得到完整的解释，这给我们进一步设计相关的干预策略带来了不小的困难。 厦门大学林圣彩院士团队从卡路里限制小鼠的血清出发，经过代谢组学鉴定和随后的逐个排查，最终找到了卡路里限制的模拟物：石胆酸（LCA），并在线虫、果蝇和小鼠中分别验证了石胆酸延缓衰老，延长寿命的作用。在此基础上，他们又进一步探索，最终找到了石胆酸的分子靶点——TULP3，并发现了TULP3能够通过激活sirtuin-v-ATPase信号轴，激活在卡路里限制中起到延缓衰老关键作用的AMPK（AMP-activated protein kinase）蛋白，从而延缓衰老。相关工作分别以“Lithocholic acid phenocopies anti-ageing effects of calorie restriction”和“Lithocholic acid binds TULP3 to activate sirturins and AMPK to slow down ageing”为题，以两篇Article的篇幅，发表在Nature期刊上。 研究者们首先确定了经过四个月的卡路里限制的小鼠，其体内的AMPK被充分激活（图1，下，以肌肉为例），这与AMPK在卡路里限制时起到的关键作用相符。然而，研究者们进一步发现在此时，小鼠却并没有发生“低血糖”，也就是血糖并未下降到先前他们发现的、足以激活AMPK的程度（5 mM以下）：与正常饮食的小鼠在饥饿8小时血糖就降低到4 mM（图1，左上）相比，卡路里限制小鼠的血糖至少在5.5 mM（图1，右上），这说明卡路里限制所导致的AMPK激活并不因为降低葡萄糖所引起。研究者们于是尝试将卡路里限制小鼠的血清添加到细胞培养液中，的确发现即使在高糖（25 mM）的DMEM中，AMPK仍旧能被激活（图2），这说明卡路里限制对AMPK激活的信号存在于血清中。研究者们进一步发现血清透析，去除其中的小分子代谢物，抑制了其对AMPK的激活；而热灭活血清，去除其中的蛋白则无此作用，这说明了卡路里限制后的血清通过其中的小分子激活了AMPK。 图1. 卡路里限制与饥饿对小鼠血糖和肌肉AMPK激活的效果对比 图2. 卡路里限制后的小鼠血清可以激活高糖培养的细胞中的AMPK 研究者们于是进一步利用多种质谱方法（包括液相色谱-质谱，气相色谱-质谱和毛细管电泳质谱联用等），寻找卡路里限制后血清中发生显著变化的小分子代谢物。发现在他们能测得的代谢物中，卡路里限制影响了超过一半的代谢物水平（695个，包括341个极性代谢物和354个脂类），这也和传统的“饮食决定代谢”的观点吻合。研究者于是继续探究是哪些化合物影响了AMPK的激活。他们首先去除了血清中的脂质，发现仍能引起AMPK的激活，于是他们就把重点放在剩下的341个极性代谢物中。在这些代谢物中，有212个水平升高和129个降低：对于升高的代谢物，他们将其直接添加至细胞培养基中，观察其是否能够直接激活AMPK；而对于含量降低的代谢物，他们则假设这些代谢物起到了抑制AMPK的作用（在卡路里限制后，这种抑制作用就被解除）——于是将其添加到了已被卡路里限制的血清激活了AMPK的细胞的培养基中，观察其是否能够反过来抑制AMPK的激活。他们也设计了实验所用的代谢物的浓度：对于已报道了生理浓度的，直接结合卡路里限制后的变化进行选择；未报导生理浓度的，则统一选择10 mM作为最高浓度，以此为基准进行下调，就此设定浓度梯度。经过逐个筛选，他们鉴定出了6个代谢物能够激活AMPK，而这其中，只有石胆酸能够在符合卡路里限制后的浓度下（血清中稳定在1 μM左右，且不随着进食等条件发生变化；图3，左），激活AMPK（图3，右），而直接对小鼠，以及线虫、果蝇等其它模式动物喂食石胆酸后，也能观察到其体内的AMPK被激活。 图3. 卡路里限制小鼠血清中石胆酸含量（左）以及该浓度下石胆酸对AMPK的激活（右） 研究者们于是进一步在线虫、果蝇和小鼠中验证石胆酸是否能模拟卡路里限制的抗衰和延寿效果。通过喂食石胆酸，他们发现线虫和果蝇的寿命显著增加，而且抗氧化应激能力和极端环境下的生存能力（抗逆性）也得到显著的提升（图4）。对于老年小鼠，发现石胆酸喂食一个月后，可以提升其抓握力和跑步能力（图5），同时其肌肉的损伤修复能力也明显提升，这表明石胆酸有促进小鼠肌肉的年轻化的作用。进一步地，在AMPK敲除或敲低的线虫和果蝇（分别为aak-2的线虫和Act5C-GAL4-AMPKα RNAi的果蝇；图4），以及AMPK肌肉特异性敲除的老年小鼠（图5；α-MKO）中，就观察不到石胆酸的上述作用，这说明石胆酸是通过激活AMPK，模拟了卡路里限制的有益作用。有意思的是，作为一种次级胆酸，石胆酸是由肝脏合成的初级胆酸分泌到肠道后，由肠道微生物转化而来；而至少目前，这样的转化机制在线虫和果蝇体中还未被发现。然而即便如此，石胆酸仍能在线虫和果蝇中激活AMPK并延寿，这说明上述动物中有一条保守的AMPK激活通路，维持了健康长寿的有益效果。 图4.石胆酸通过AMPK延长线虫（a）和果蝇（b）的寿命 图5. 石胆酸通过AMPK增加老年小鼠的握力（上）和跑步能力（下） 研究者们于是进一步探索石胆酸通过何种通路激活AMPK。他们观察到石胆酸，乃至卡路里限制对与AMPK的激活都不会引起AMP水平的上升，也不会引起细胞钙离子水平的增加，排除了传统的AMP或者钙离子依赖的激活途径。研究者们于是探究了先前他们鉴定出的葡萄糖感知途径即溶酶体途径，的确发现石胆酸是通过该途径激活AMPK的：敲除了溶酶体途径关键蛋白AXIN和LAMTOR1，石胆酸不再能够在细胞中激活AMPK。而鉴于石胆酸和卡路里限制都没有降低血糖到能够启动溶酶体途径的程度的能力——也就是他们先前所鉴定的感知葡萄糖的相关受体和机制都不再适用，研究者们进一步尝试寻找石胆酸靶向溶酶体途径的受体和机制。由于石胆酸能够抑制溶酶体上的质子泵v-ATPase复合体——这是溶酶体途径活化的关键节点，研究者们于是探究了石胆酸对v-ATPase的影响。他们发现，石胆酸显著影响了v-ATPase的翻译后修饰，尤其是乙酰化修饰——在添加了去乙酰化酶抑制剂，使得v-ATPase的乙酰化无法被移除（无法去乙酰化），就能够阻止石胆酸对AMPK的激活。利用蛋白质修饰质谱，他们进一步得到了构成v-ATPase复合体的全部21个（种）亚基的总共263个乙酰化修饰的位点。通过逐一将这些位点突变成R，从而模拟其去乙酰化的方式，他们最终发现，只要同时引入v-ATPase的V1E1亚基的三个位点——K52、K99和K191的突变体（V1E1-3KR），就能够在没有石胆酸处理的条件下抑制v-ATPase，并激活AMPK到和石胆酸处理相当的程度（图6），而在线虫、果蝇和小鼠肌肉中引入V1E1-3KR突变，也能起到激活AMPK和延缓衰老的效果。 图6. 细胞中引入V1E1的突变对AMPK的激活效果 在此基础上，研究者们进一步探索石胆酸是如何引起V1E1的去乙酰化的。已知体内去乙酰化酶主要是由两大家族即SIRTs （sirtuins）家族（有SIRT1到SIRT7七个成员）和HDACs家族（HDAC1到HDAC11）组成，而在细胞中表达任意一个SIRT——尤其是SIRT1，即可以直接激活AMPK。相比较之下，HDACs家族蛋白的表达则无此现象。需要注意的是，SIRTs家族的蛋白之间有较强的redundancy，例如敲除SIRT1，其功能会被其它SIRTs所弥补，因此在细胞中敲除单个SIRT，并不能完全阻断石胆酸对AMPK的激活。研究者们于是将7个SIRT家族蛋白全部敲除，终于检测到了对石胆酸所引起的V1E1的去乙酰化以及对AMPK的激活的完全阻断。作为对照，研究者们还检测了石胆酸对另一个SIRTs（SIRT1、SIRT2和SIRT6）的经典底物——组蛋白H3的K9位点的乙酰化水平 (12-14)，结果也表明，石胆酸促进了H3-K9的去乙酰化。因此，石胆酸是通过促进SIRTs的活力，使其去乙酰化V1E1并抑制v-ATPase的活力，从而启动溶酶体途径并激活AMPK。 然而，当研究者们试图进一步在体外重构上述石胆酸促进SIRTs活力的过程时，却遇到了困难：他们发现，尽管原核表达的SIRT1的确能够在体外去乙酰化合成的V1E1多肽，但石胆酸却不能促进这一过程（图7，左）。这和体内得到的结论完全不同，也让研究者们陷入了困境——难道是上述的筛选过程出错了吗？于是，他们把体外系统中的每种成分一步步地“替换”成近似于细胞内的成分，最终发现，当使用从细胞中纯化（免疫沉淀）所得到的SIRT1代替原核表达的SIRT1，或者让原核表达的SIRT1先和细胞裂解液孵育，再加进体外系统中，就能够观察到石胆酸对SIRT1活力的提升了（图7，右）！这意味着SIRT1在体内天然存在着一个“伙伴”：由它来结合石胆酸，再反过来导致SIRT1的激活；而原核表达的SIRT1没有这个“伙伴”的结合，自然也就不能响应石胆酸的调节。 图7. 石胆酸对原核表达SIRT1蛋白（左）以及与细胞裂解液孵育后的、原核表达的SIRT1蛋白（右）的去乙酰化活力影响 为了找到这个“伙伴”，研究者们将与细胞裂解液孵育后的SIRT1进行了蛋白质谱鉴定，鉴定到了1655个SIRT1的潜在相互作用蛋白。研究者们构建了所有这些蛋白的表达质粒，通过逐一在细胞中和SIRT1共表达再进行免疫共沉淀，鉴定出了157个蛋白与SIRT1有直接的相互作用。进一步，研究者们逐一在细胞中敲低了这157个蛋白，最终发现一个名为TULP3的蛋白的敲低几乎可以完全阻断石胆酸对于AMPK的激活。研究者们进一步发现，石胆酸确实可以直接结合TULP3，而分子对接模拟实验则显示出TULP3上有四个位点（Y193, P195, K333和P336），它们通过疏水作用，构成了石胆酸的潜在结合口袋。在TULP3敲除的细胞系中回补突变了这四个位点的TULP3（TULP3-4G）同样阻断了石胆酸对AMPK的激活（图8）。重要的是，在体外加入原核表达的TULP3，就能够观察到石胆酸对SIRT1活力以及对V1E1去乙酰化作用的促进，加入TULP3-4G却不行，这进一步证实了TULP3是石胆酸激活SIRT1从而启动溶酶体途径激活AMPK的靶点。 图8. TULP3敲除阻止了石胆酸对AMPK的激活（左），且回补不结合石胆酸的突变体（TULP3-4G）无法恢复石胆酸对AMPK的激活（右） 最后，研究者在线虫、果蝇和小鼠中分别探究了TULP3-sirtuin-v-ATPase轴对衰老和寿命的影响，类似于AMPK的敲除，他们发现只要将上述物种体内的TULP3敲除，或者引入无法结合石胆酸的TULP3突变体，石胆酸便无法发挥抗衰效果（图9；以小鼠肌肉中敲除TULP3再回补TULP3-4G突变体为例）。 图9. 石胆酸对老年小鼠抓握力（上）和跑步能力（下）的提高依赖于TULP3 综上，林圣彩院士团队鉴定了一个卡路里限制的模拟物——石胆酸，并解析了石胆酸通过TULP3-sirtuin-v-ATPase-AMPK轴发挥延寿效果的具体机制（图9，右），这一发现补全了机体感知卡路里限制引起的代谢信号并发挥延缓衰老作用的空白。石胆酸是否可以作为新的长寿药物将进行进一步临床验证。同时，对于石胆酸延寿机理的解析也为开发新的长寿药物提供了新的理论和靶点。 回顾起来，林圣彩院士感叹，他的团队从发现（低）葡萄糖感知通路是延长寿命的核心轴 (8-10, 15)，到发现该通路除了能感知餐前正常的葡萄糖下降，也介导了二甲双胍的有益功能（图10，左），再到现在加上了卡路里限制的模拟物也就是石胆酸的“借道”（图10，右），他越发觉得AMPK的溶酶体通路是高等生物中的固有的通路，也很可能因为这样重要的生理功能，而在进化上被保留下来。可以说，这是大自然赐予生命的不仅能抵抗饥饿，还能从饥饿中获得益处的“赋能”。 图10. 溶酶体通路全景图 这两篇文章的第一研究者瞿琦是厦门大学2014级本科生，于2018年留校攻读硕士，并在2019年转博至今。据林圣彩院士介绍，瞿琦是在2016年，通过厦门大学“大学生创新训练计划”进入他的实验室学习的，从那时起，他就参与了这个工作，为石胆酸及其靶点和机制的鉴定付出了八年半的辛勤努力；尤其是在发现石胆酸并不能直接促进SIRT1的活力，还需要重新寻找其靶点的时候，他没有气馁，而是心无旁骛地又付出了三年半的时间，最终完成了整个机制的发现，也深深地鼓舞了团队的所有人。两篇文章的共同第一研究者陈艳和王钰则分别鉴定出了石胆酸及其通路在果蝇、小鼠和线虫中的功能，而第二篇文章的共同第一研究者王维澈则承担了SIRTs的相互作用蛋白的筛选和鉴定，他们和林圣彩院士团队的其它成员一起，都为该工作的研究做出了不可替代的贡献。此外，大连化物所朴海龙研究员和遗传与发育所税光厚教授指导了本文的代谢物鉴定，北京大学姜长涛教授和厦门大学郭浩教授指导、分析了肠道菌群对石胆酸的产生影响，厦门大学俞勇教授、北京大学刘颖教授和厦门大学刘波教授、郑燚明教授分别指导了线虫和果蝇的相关实验，厦门大学邓贤明教授指导了石胆酸制剂的制作与使用，厦门大学田华雨教授和陈颖教授指导、协助了多个敲入细胞系的构建，厦门大学分析测试中心的多位技术人员承担了本研究的代谢物和蛋白质谱鉴定工作，厦门大学实验动物中心则提供、构建了本研究所用到的小鼠品系。 ▲@考研生，厦大送饺子啦！花式宠爱，祝你“饺”好运！ ▲绿色的，厦大的冬！ ▲人生没有剧本！在厦大找到属于我的Passion! 来源：生命科学学院 责编：张火火 厦门大学党委宣传部出品 快给我厦科学家点个 赞 和 在看 ！

OTC2024类器官前沿应用与3D细胞培养论坛圆满落幕，点击图片可查看会后报告，咨询OTC2025类器官论坛请联系：王晨 180 1628 8769 文章来源：外泌体之家 9月份国内新出的细胞外囊泡/外泌体领域论文不完全统计有390篇。IF>10的有92篇；IF>20的有12篇。本期主要内容包括：癌症相关恶病质、成骨作用、胆固醇在外泌体递释RNA药物中的关键作用、纳米封装的肿瘤囊泡用作自体肿瘤疫苗、胃癌转移、增强非小细胞肺癌的免疫治疗、免疫检查点抑制剂相关的心脏毒性、肝细胞癌中T细胞介导的抗肿瘤免疫、结直肠癌免疫逃逸、血友病关节软骨缺损的整体修复、抑制血管钙化和衰老、肺部疫苗接种、肾缺血再灌注损伤和纤维化、糖尿病伤口治疗、衰老和年龄相关功能障碍、水凝胶微针贴片促进慢性伤口愈合、工程益生菌递送双纳米抗体、动脉粥样硬化等方面内容。内容十分丰富，不容错过。外泌体之家 1.北京大学詹启敏、王嫣：GRP75触发白色脂肪组织褐变，促进癌症相关恶病质 Chen, X., et al. (2024). "GRP75 triggers white adipose tissue browning to promote cancer-associated cachexia."  Signal Transduct Target Ther 9(1): 253. IF=40.8 恶病质影响50%-80%的癌症患者，是一种使人虚弱的综合征，导致20%的癌症相关死亡。恶病质的一个关键特征是脂肪组织萎缩，但其如何促成恶病质的发展却知之甚少。该研究在癌症恶病质小鼠模型中证明，白色脂肪组织褐变可能是一种早期发病特征，它发生在体重减轻和骨骼肌萎缩之前。通过分析来自恶病质诱导肿瘤的细胞外囊泡中差异表达的蛋白质，确定了一种分子伴侣——葡萄糖调节蛋白75（GRP75），作为脂肪细胞褐变的关键介质。从机制上讲，GRP75与腺嘌呤核苷酸转位酶2（ANT2）结合形成GRP75-ANT2复合物。稳定的ANT2增强了其与解偶联蛋白1的相互作用，导致后者表达升高，进而促进脂肪细胞褐变。用GRP75抑制剂醉茄素治疗可以逆转这种褐变，并在体内减轻恶病质表型。该研究结果揭示了肿瘤衍生的GRP75在恶病质发展过程中调节白色脂肪组织褐变的一种新机制，并提出了一种以白色脂肪组织为中心的早期恶病质干预潜在靶向方法。 2.解放军总医院唐佩福团队：组蛋白去乙酰化酶抑制可增强来自肌肉的细胞外囊泡，通过miR-873-3p促进成骨作用 Chen, M., et al. (2024). "Histone deacetylase inhibition enhances extracellular vesicles from muscle to promote osteogenesis via miR-873-3p."  Signal Transduct Target Ther 9(1): 256. 有规律的身体活动被广泛认为可以降低各种疾病的风险，其中骨骼肌通过释放对多个器官和组织有益的生物分子发挥关键作用。然而，许多人，特别是老年人和患有某些临床病症的人，无法进行体育锻炼，这就需要采取替代策略来刺激肌肉细胞分泌有益的生物分子。组蛋白乙酰化和去乙酰化对运动诱导的基因表达有显著影响，这表明靶向组蛋白去乙酰化酶（HDACs）可以模拟一些运动反应。这项研究探讨了HDAC抑制剂曲古抑菌素A（TSA）对人骨骼肌成肌细胞（HSMMs）的影响。研究结果表明，TSA诱导的高乙酰化增强了肌管融合，并增加了富含miR-873-3p的细胞外囊泡（EVs）的分泌。这些TSA-EVs通过靶向H2调宁蛋白（CNN2）促进了人骨髓间充质干细胞（hBMSCs）的成骨分化。在体内，对骨质疏松小鼠全身施用TSA-EVs可显著改善骨量。此外，TSA-EVs模拟了运动诱导的EVs的成骨益处，这表明抑制HDAC可以复制运动诱导的对骨骼健康的益处。这些结果表明，TSA诱导的肌肉来源的EVs作为一种治疗策略，在增强骨形成和预防骨质疏松方面具有潜力，特别是对于无法进行运动的人。鉴于各种HDAC抑制剂已获得美国食品药品监督管理局（FDA）的批准，这种方法在骨质疏松治疗的快速临床转化方面具有重大前景。 3.【综述】郑州大学杨帅玺、胡军红、谷晓明：转移前生态位的形成、特征和治疗 Wang, Y., et al. (2024). "Pre-metastatic niche: formation, characteristics and therapeutic implication."  Signal Transduct Target Ther 9(1): 236. IF=40.8 该综述重点关注肿瘤衍生分泌因子、细胞外囊泡和循环肿瘤细胞在形成转移生态位中的作用。 4.中国科学院上海药物研究所甘勇研究员、俞淼荣副研究员与浙江大学胡国庆教授团队合作：胆固醇在外泌体递释RNA药物中的关键作用 Zhuo, Y., et al. (2024). "Direct cytosolic delivery of siRNA via cell membrane fusion using cholesterol-enriched exosomes."  Nat Nanotechnol. IF=38.1 在治疗应用中使用短干扰RNA（siRNA）时，高效的胞质递送是一个重大障碍。该研究表明富含胆固醇的外泌体易于通过膜融合进入癌细胞，实现siRNA的直接胞质递送。分子动力学模拟表明，变形以及与靶细胞膜增加接触有助于膜融合。在体外实验中，与天然的和去除胆固醇的牛奶来源外泌体（MEs）以及传统的转染试剂相比，富含胆固醇的MEs实现了siRNA显著更高的基因沉默效果，诱导了更优的癌细胞凋亡。当对患有原位肿瘤或皮下肿瘤的小鼠进行口服或静脉给药时，富含胆固醇的MEs/siRNA表现出优于脂质纳米颗粒的抗肿瘤活性。总的来说，通过调节外泌体膜的胆固醇含量以促进通过膜融合进入细胞，该研究为基于siRNA的基因治疗提供了一种有前景的方法，为有效、安全和简单的基因治疗策略铺平了道路。 5.南京邮电大学有机电子与信息显示国家重点实验室及化学与生命科学学院汪联辉教授、丁显光教授团队与新加坡国立大学David Tai Leong团队合作：纳米封装的肿瘤囊泡用作自体肿瘤疫苗 Ding, X., et al. (2024). "Non-discriminating engineered masking of immuno-evasive ligands on tumour-derived extracellular vesicles enhances tumour vaccination outcomes."  Nat Nanotechnol. IF=38.1 个性化癌症免疫疗法的成功取决于初始肿瘤抗原向树突状细胞和巨噬细胞的呈递。肿瘤来源的细胞外囊泡（TEVs）含有丰富的肿瘤抗原分子。然而，TEVs 表面存在如分化簇 47（CD47）等抗吞噬信号，这会导致相同的树突状细胞和巨噬细胞无法对其进行吞噬。该研究表明氢氧化铁纳米复合材料可以成功地掩盖 TEV 表面并解除吞噬作用的阻滞，而不影响细胞外囊泡所引发的免疫目标。在被内化后，掩盖物在溶酶体中分解，释放出肿瘤抗原物质。这在动物模型中触发了抗原呈递，并促进了树突状细胞的活化和成熟以及巨噬细胞的重编程，导致肿瘤体积和转移显著减少，在人类恶性胸腔积液临床样本中也是如此。这种直接的掩盖策略消除了临床样本中普遍存在的抗吞噬阻滞，可以普遍应用于所有患者特异性的 TEVs，作为肿瘤抗原剂用于增强免疫治疗。 6.江苏大学张徐、南通大学顾建美、江苏大学李翀：N2 TANs外泌体在体外和体内促进胃癌转移 Zhang, J., et al. (2024). "Exosomal miR-4745-5p/3911 from N2-polarized tumor-associated neutrophils promotes gastric cancer metastasis by regulating SLIT2." Mol Cancer 23(1): 198. IF=27.7 肿瘤细胞重塑肿瘤微环境（TME）细胞的表型和功能，以利于肿瘤进展。先前的研究表明，肿瘤微环境中的中性粒细胞在肿瘤衍生因子的作用下极化为N2肿瘤相关中性粒细胞（TANs），从而促进肿瘤生长、转移、血管生成、治疗抵抗和免疫抑制。外泌体在人类健康和包括癌症在内的疾病中充当关键的细胞间信使。到目前为止，来自N2 TANs的外泌体在胃癌中的生物学作用尚未得到充分表征。该研究首次报告了来自N2 TANs的外泌体在体内外均促进胃癌转移。研究发现来自N2 TANs的外泌体将miR-4745-5p/3911转移到胃癌细胞中，下调SLIT2（slit导向配体2）基因表达。腺病毒介导的SLIT2过表达逆转了N2TANs衍生外泌体对胃癌转移的促进作用。进一步揭示了胃癌细胞通过外泌体HMGB1（高迁移率族蛋白B1）/NF-κB通路诱导中性粒细胞的葡萄糖代谢重编程，该通路介导中性粒细胞N2极化和miR-4745-5p/3911上调。进一步采用微滴式数字PCR（ddPCR）检测人血清样本中N2 TANs外泌体中miR-4745-5p/3911的表达，发现与健康对照者和良性胃病患者相比，胃癌患者中其水平升高。总之，结果表明，N2 TANs通过外泌体miR-4745-5p/3911调节胃癌细胞中的SLIT2促进癌症转移，这为肿瘤微环境细胞衍生外泌体在胃癌转移中的作用提供了新的见解，并为胃癌诊断提供了一个潜在的生物标志物。 7.中国医科大学赵立/刘宏旭研究团队：LAMTOR1降低外泌体PD-L1以增强非小细胞肺癌的免疫治疗效果 Wu, B., et al. (2024). "LAMTOR1 decreased exosomal PD-L1 to enhance immunotherapy efficacy in non-small cell lung cancer." Mol Cancer 23(1): 184.IF=27.7 在利用免疫检查点阻断（ICB）治疗非小细胞肺癌（NSCLC）方面已经取得了巨大进展。针对在肿瘤细胞上表达的程序性细胞死亡蛋白1（PD-1）及其配体PD-L1的疗法在提高患者生存率方面显示出潜力。一个未解决的问题涉及肿瘤微环境（TME）中由外泌体PD-L1诱导的免疫抑制，特别是对于CD8(+)T细胞。研究揭示了LAMTOR1在抑制非小细胞肺癌中外泌体PD-L1以及促进CD8(+)T细胞浸润方面的关键作用。通过与HRS相互作用，LAMTOR1促进PD-L1的溶酶体降解，从而减少外泌体PD-L1的释放。值得注意的是，LAMTOR1促进PD-L1溶酶体降解的能力依赖于一个特定的泛素化位点和一个HRS结合序列。研究结果表明，利用LAMTOR1构建肽可能是一种有前景的策略，以增强非小细胞肺癌免疫治疗的疗效。对LAMTOR1如何抑制外泌体PD-L1释放的发现和理解为改善免疫治疗的潜在治疗策略提供了见解。有必要进行进一步的研究和临床试验，以调查在非小细胞肺癌治疗中靶向LAMTOR1的可行性和有效性。 8. 【综述】中南大学刘傥、黎志宏：癌症相关成纤维细胞衍生的细胞外囊泡介导的癌症治疗抵抗——从生物学机制到临床意义及影响 Lin, Z., et al. (2024). "Cancer therapy resistance mediated by cancer-associated fibroblast-derived extracellular vesicles: biological mechanisms to clinical significance and implications."  Mol Cancer 23(1): 191.IF=27.7 癌症相关成纤维细胞（CAFs）是肿瘤微环境中的一种多样化的基质细胞群体，在癌症进展和患者预后中发挥着基础作用。多项证据表明，CAFs在塑造肿瘤微环境的结构和功能方面起着关键作用，在调节肿瘤行为如转移、侵袭和上皮间质转化（EMT）等方面具有众多功能。CAFs可以通过产生细胞外囊泡（EVs）、多种分泌因子和代谢物与癌细胞广泛相互作用。值得注意的是，CAF衍生的EVs已被确定为癌症治疗抵抗的关键介质，并构成了癌症管理中的新型治疗靶点和生物标志物。本综述旨在总结CAF衍生的EVs在介导癌症对化疗、靶向治疗药物、放疗和免疫治疗的抵抗中的生物学作用和详细分子机制。我们还讨论了CAF衍生的EVs作为癌症临床管理中的新型靶点和临床生物标志物的治疗潜力，从而为提高癌症治疗效果和改善患者预后提供一种新的治疗策略。 9.浙江大学Chen Ting、周建维：揭示细胞外囊泡网络——洞察卵巢癌转移和化疗耐药性 Dai, W., et al. (2024). "Unraveling the extracellular vesicle network: insights into ovarian cancer metastasis and chemoresistance."  Mol Cancer 23(1): 201. IF=27.7 卵巢癌（OC）是最常见且致命的妇科恶性肿瘤之一，其高死亡率主要源于其侵袭性、频繁转移以及对标准疗法的抵抗。最近的研究强调了细胞外囊泡（EVs）在这些过程中的关键作用。EVs由生物体分泌，携带多样且具有生物活性的物质，在细胞间通讯中起着至关重要的作用。在功能上，物质的转移协调了多个过程，不仅积极影响原发性肿瘤，还影响局部和远处的转移前微环境。此外，它们独特的生物学特性使EVs成为新型治疗靶点和有前景的药物递送系统，对癌症患者具有潜在的深远影响。本综述总结了EV生物学的最新进展，深入探讨了EVs促成卵巢癌转移和耐药的复杂机制。它还探索了EVs在卵巢癌临床背景下的最新进展和治疗潜力。尽管已经取得了进展，但卵巢癌中的EV研究仍处于起步阶段。因此，本综述提出了现有研究的局限性，并为未来的研究提供了途径。总之，该综述旨在阐明EVs在卵巢癌中的关键作用，并突出它们在该领域的有前景的潜力。 10. 河北大学李振华团队：通过生物正交代谢工程驱动的细胞外囊泡重定向逆转免疫检查点抑制剂相关的心脏毒性 Fan, M., et al. (2024). "Reversing Immune Checkpoint Inhibitor-Associated Cardiotoxicity via Bioorthogonal Metabolic Engineering-Driven Extracellular Vesicle Redirecting."  Adv Mater: e2412340. IF=27.4 免疫检查点抑制剂（ICIs）引起的心脏毒性与高死亡率相关。T细胞在ICI诱导的心脏损伤中起重要作用。抑制局部T细胞活性被认为是减轻ICI相关心脏毒性的有效策略。肿瘤来源的细胞外囊泡（EVs）通过PD-L1过表达促进免疫抑制。在这项研究中，开发了一种生物正交代谢工程驱动的细胞外囊泡重定向（Biomeder）策略，用于原位工程化具有心肌靶向肽的细胞外囊泡。积累的肿瘤来源的细胞外囊泡（TuEVs）通过增加心肌细胞中的PD-L1水平和/或直接抑制T细胞活性来逆转心脏中的免疫环境。更重要的是，发现TuEVs的重定向进一步破坏了肿瘤中的免疫抑制，这有助于抗肿瘤活性。因此，将TuEVs重定向到心脏同时增强了基于ICI的治疗的抗肿瘤疗效和安全性。此外，Biomeder策略成功扩展到预防ICI诱导的1型糖尿病。这种Biomeder技术是一种用于治疗各种ICI相关不良事件的通用方法。 11. 海军军医大学东方肝胆医院付静：质膜蛋白ADCY7的核易位增强了肝细胞癌中T细胞介导的抗肿瘤免疫 Chen, J., et al. (2024). "Nuclear translocation of plasma membrane protein ADCY7 potentiates T cell-mediated antitumour immunity in HCC."  Gut.IF=23 T细胞介导的反应效力是免疫疗法治疗恶性肿瘤有效性的决定因素；然而，由于广泛的免疫抑制微环境，T细胞疗法在肝细胞癌（HCC）中的临床疗效有限。该研究旨在研究导致肝细胞癌免疫逃逸的关键基因，并提出重塑肝细胞癌微环境的新治疗策略。设计：进行全基因组体内规律间隔成簇短回文重复序列（CRISPR）筛选文库，以确定与免疫耐受相关的关键基因。使用单细胞RNA测序（scRNA-seq）、流式细胞术、肝细胞癌小鼠模型、染色质免疫沉淀和免疫共沉淀来探索腺苷酸环化酶7（ADCY7）在肝细胞癌免疫监测中的功能和机制。结果：全基因组体内CRISPR筛选确定了一种新的免疫调节剂-ADCY7。跨膜蛋白ADCY7通过小窝介导的内吞作用进行亚细胞易位，然后在富含亮氨酸重复序列的蛋白59（LRRC59）和输入蛋白β1（KPNB1）的帮助下易位到细胞核。在细胞核中，它作为CCAAT/增强子结合蛋白α（CEBPA）的转录辅因子，诱导CCL5转录，从而增加CD8(+)T细胞浸润以抑制肝细胞癌进展。此外，ADCY7可以作为外泌体分泌并进入邻近的肿瘤细胞以促进CCL5诱导。具有高ADCY7水平的外泌体促进CD8(+)T细胞在肿瘤内的浸润并抑制肝细胞癌肿瘤生长。结论：该研究描述了ADCY7的非常规功能和亚细胞定位，强调了其在肝细胞癌中T细胞介导的免疫中的关键作用以及作为有前景的治疗靶点的潜力。 12. 南方医科大学基础医学院病理学系梁莉教授团队：TSH/TSHR信号通路促进CD8+ T细胞耗竭和结直肠癌免疫逃逸的分子机制 Zeng, S., et al. (2024). "Local TSH/TSHR signaling promotes CD8(+) T cell exhaustion and immune evasion in colorectal carcinoma."  Cancer Commun (Lond). IF=20.1 背景：肿瘤微环境（TME）中CD8(+)T细胞功能障碍导致肿瘤免疫逃逸和免疫治疗耐受。先前已有报道瘦素、类固醇激素和糖皮质激素等激素对T细胞功能的影响。然而，甲状腺刺激激素（TSH）/甲状腺刺激激素受体（TSHR）信号在CD8(+)T细胞耗竭和肿瘤免疫逃逸中的潜在机制仍知之甚少。本研究旨在探讨TSH/TSHR信号对结直肠癌（CRC）中CD8(+)T细胞功能和免疫逃逸的影响。方法：通过免疫荧光和流式细胞术评估CD8(+)T细胞中TSHR的表达水平。功能研究包括在细胞和小鼠模型中调控TSHR表达以研究其在CD8(+)T细胞中的作用。主要通过RNA测序、蛋白质印迹、染色质免疫沉淀和荧光素酶活性测定获得机制方面的见解。使用免疫荧光、流式细胞术和蛋白质印迹研究结直肠癌组织中TSH和TSHR的来源。结果：TSHR在结直肠癌组织中的癌细胞和CD8(+)T细胞中高表达。TSH/TSHR信号被确定为促进CD8(+)T细胞耗竭的内在途径。在CD8(+)肿瘤浸润淋巴细胞（TILs）中条件性删除TSHR通过蛋白激酶A（PKA）/cAMP反应元件结合蛋白（CREB）信号通路改善效应细胞分化并抑制程序性细胞死亡蛋白1（PD-1）和甲型肝炎病毒细胞受体2（HAVCR2或TIM3）等免疫检查点受体的表达。结直肠癌细胞通过外泌体分泌TSHR以增加CD8(+)T细胞中的TSHR水平，从而导致肿瘤微环境中的免疫抑制。髓源性抑制细胞（MDSCs）是肿瘤微环境中TSH的主要来源。结直肠癌中TSHR的低表达是免疫治疗反应的预测因子。结论：本研究结果强调了内源性TSH/TSHR信号在结直肠癌中CD8(+)T细胞耗竭和免疫逃逸中的作用。TSHR可能适合作为结直肠癌免疫治疗中的预测性和治疗性生物标志物。 13. 南方医科大学陈滨等：载外泌体的新型可注射黏附水凝胶用于血友病关节软骨缺损的整体修复 Yang, Q., et al. (2024). "Novel injectable adhesive hydrogel loaded with exosomes for holistic repair of hemophilic articular cartilage defect." Bioact Mater 42: 85-111. IF=18 14. 中南大学湘雅二医院代谢内分泌科袁凌青教授团队：血管壁微环境——内皮细胞源性外泌体通过m6A依赖方式介导褪黑素抑制血管钙化和衰老 Shan, S. K., et al. (2024). "Vascular wall microenvironment: Endothelial cells original exosomes mediated melatonin-suppressed vascular calcification and vascular ageing in a m6A methylation dependent manner." Bioact Mater 42: 52-67. IF=18 15. 徐州医科大学药学院郑爱萍：Fc增强的外泌体具有更好的上皮层传递和肺分布能力，用于肺部疫苗接种 Meng, F., et al. (2024). "Fc-empowered exosomes with superior epithelial layer transmission and lung distribution ability for pulmonary vaccination."  Bioact Mater 42: 573-586. IF=18 16. 中山大学附属第六医院邱剑光主任、王德娟主任团队联合清华大学深圳国际研究生院徐弢教授团队：生物打印间充质干细胞微纤维来源的细胞外囊泡减轻单侧肾缺血再灌注损伤和纤维化 Guo, Q., et al. (2024). "Bioprinted mesenchymal stem cell microfiber-derived extracellular vesicles alleviate unilateral renal ischemia-reperfusion injury and fibrosis by inhibiting tubular epithelial cells ferroptosis." Bioact Mater 40: 649-664. IF=18 17. 中南大学湘雅医院陈灿：可溶解的微针伤口敷料经皮并持续提供抗炎和促血管生成外泌体用于糖尿病伤口治疗 Cao, Y., et al. (2024). "Dissolvable microneedle-based wound dressing transdermally and continuously delivers anti-inflammatory and pro-angiogenic exosomes for diabetic wound treatment."  Bioact Mater 42: 32-51. IF=18 18. 中南大学湘雅医院李长俊：衰老的骨髓巨噬细胞通过细胞外囊泡介导的旁分泌衰老来驱动全身衰老和年龄相关功能障碍 Hou, J., et al. (2024). "Aged bone marrow macrophages drive systemic aging and age-related dysfunction via extracellular vesicle-mediated induction of paracrine senescence."  Nat Aging. IF=17 19. 厦门大学颜晓梅：红细胞来源的细胞外小泡通过表面展示唾液酸抑制流感病毒 Cai, N., et al. (2024). "Red Blood Cell-Derived Small Extracellular Vesicles Inhibit Influenza Virus through Surface-Displayed Sialic Acids."  Angew Chem Int Ed Engl: e202413946. IF=16.1 20. 军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所岳文：装载干细胞线粒体微泡的水凝胶微针贴片促进慢性伤口愈合 Yao, W. D., et al. (2024). "Hydrogel Microneedle Patches Loaded with Stem Cell Mitochondria-Enriched Microvesicles Boost the Chronic Wound Healing."  ACS Nano 18(39): 26733-26750. IF=15.8 21. 南京大学宋玉君：工程益生菌时空递送双纳米抗体通过靶向肿瘤源外泌体逆转肿瘤免疫抑制 Qin, S., et al. (2024). "Spatiotemporal Delivery of Dual Nanobodies by Engineered Probiotics to Reverse Tumor Immunosuppression via Targeting Tumor-Derived Exosomes."  ACS Nano 18(39): 26858-26871. IF=15.8 22. 【综述】南方医科大学崔力：肿瘤微环境来源的外泌体——T细胞免疫治疗的双刃剑 Lu, Y., et al. (2024). "Tumor Microenvironment-Derived Exosomes: A Double-Edged Sword for Advanced T Cell-Based Immunotherapy." ACS Nano.IF=15.8 23. 【综述】重庆医科大学刘博：线粒体细胞外囊泡——诊断和治疗肺部疾病的一个有前途的途径 Ding, F., et al. (2024). "Mitochondrial Extracellular Vesicles: A Promising Avenue for Diagnosing and Treating Lung Diseases." ACS Nano 18(37): 25372-25404. IF=15.8 24. 北京上海交通大学医学院附属仁济医院/上海市肿瘤研究所向冬喜：细胞外囊泡液体活检用适配体引导的荧光极化平台 Pham, C. V., et al. (2024). "An aptamer-guided fluorescence polarisation platform for extracellular vesicle liquid biopsy." J Extracell Vesicles 13(9): e12502. IF=15.5 25. 南京师范大学郭志刚团队：氧化应激过程中8-氧鸟嘌呤DNA糖基酶-synaptotagmin 7通路增加细胞外囊泡释放并促进肿瘤转移 Ma, Y., et al. (2024). "The 8-oxoguanine DNA glycosylase-synaptotagmin 7 pathway increases extracellular vesicle release and promotes tumour metastasis during oxidative stress."  J Extracell Vesicles 13(9): e12505.IF=15.5 26. 中山大学孙逸仙纪念医院林天歆、陈长昊：含有整合素α6的细胞外囊泡通过与CD151的相互作用促进淋巴结转移前生态位形成的淋巴重塑 Lin, Y., et al. (2024). "Integrin α6-containing extracellular vesicles promote lymphatic remodelling for pre-metastatic niche formation in lymph nodes via interplay with CD151."  J Extracell Vesicles 13(10): e12518.IF=15.5 27. 浙江农业科学院刘燕、鲍国连：外膜囊泡包覆纳米地黄多糖增强对细菌感染的保护性免疫 Huang, Y., et al. (2024). "Enhancing protective immunity against bacterial infection via coating nano-Rehmannia glutinosa polysaccharide with outer membrane vesicles."  J Extracell Vesicles 13(9): e12514.IF=15.5 28. 山东大学刘永军、张娜：靶向glypican-3的巨噬细胞递送载药外泌体在小鼠实体瘤模型中提供了有效的细胞治疗 Liu, J., et al. (2024). "Glypican-3-targeted macrophages delivering drug-loaded exosomes offer efficient cytotherapy in mouse models of solid tumours."  Nat Commun 15(1): 8203. IF=14.7 29. 中国科学院上海药物研究所俞淼荣：内质网靶向递送雷公藤红素和PD-L1 siRNA增强免疫原性细胞死亡和增强癌症免疫治疗 Wang, J., et al. (2024). "Endoplasmic reticulum-targeted delivery of celastrol and PD-L1 siRNA for reinforcing immunogenic cell death and potentiating cancer immunotherapy." Acta Pharm Sin B 14(8): 3643-3660. IF=14.7 30. 中国医学科学院药物研究所吴练秋：半合成硫酸软骨素CS-semi5上调miR-122-5p，通过p38/MMP13途径对骨关节炎产生治疗作用 Li, X., et al. (2024). "Semi-synthetic chondroitin sulfate CS-semi5 upregulates miR-122-5p, conferring a therapeutic effect on osteoarthritis via the p38/MMP13 pathway."  Acta Pharm Sin B 14(8): 3528-3542. IF=14.7 31. 【综述】四川大学与杜兰大学医学院合作：细胞外囊泡在肺癌治疗中的应用进展 Huang, G., et al. (2024). "Recent advances to address challenges in extracellular vesicle-based applications for lung cancer."  Acta Pharm Sin B 14(9): 3855-3875. IF=14.7 32. 台湾大学&长庚大学：Mir221-和mir222富集的adsc-外泌体通过调节BNIP3-MAP1LC3B-BBC3/PUMA通路减轻PM暴露加重的心脏缺血-再灌注损伤 Lee, T. L., et al. (2024). "Mir221- and Mir222-enriched adsc-exosomes mitigate PM exposure-exacerbated cardiac ischemia-reperfusion injury through the modulation of the BNIP3-MAP1LC3B-BBC3/PUMA pathway."  Autophagy: 1-20. IF=14.6 33. 厦门大学朱志教授课题组：细胞外囊泡的聚糖指纹图谱助力癌症液体活检 Zhang, G., et al. (2024). "Fingerprint Profiling of Glycans on Extracellular Vesicles via Lectin-Induced Aggregation Strategy for Precise Cancer Diagnostics." J Am Chem Soc. IF=14.4 前期报道：JACS｜厦门大学朱志教授团队：细胞外囊泡的聚糖指纹图谱助力癌症液体活检 34. 南京鼓楼医院骨科钱邦平/邱勇教授课题组：强直性脊柱炎中韧带组织转运白介素- 17a的细胞外小泡介导韧带-骨串扰 Wang, K., et al. (2024). "Extracellular Vesicles Derived from Ligament Tissue Transport Interleukin-17A to Mediate Ligament-To-Bone Crosstalk in Ankylosing Spondylitis."  Adv Sci (Weinh): e2406876.IF=14.3 35. 上海交通大学医学院附属第六人民医院急诊医学科傅一牧团队：基因工程化铈外泌体通过重塑免疫微环境和修复 DNA 损伤治疗动脉粥样硬化 Wei, P., et al. (2024). "Gene-Engineered Cerium-Exosomes Mediate Atherosclerosis Therapy Through Remodeling of the Inflammatory Microenvironment and DNA Damage Repair." Small: e2404463. IF=13 前期报道：Small｜上海交通大学傅一牧团队：基因工程化铈外泌体通过重塑免疫微环境和修复 DNA 损伤治疗动脉粥样硬化 36. 宁波市中医院陈宁刚/浙江大学高建青：来自水果、蔬菜和中药的PELNs在生物治疗和药物递送中的研究进展 Zhao, B., et al. (2024). "Exosome-like nanoparticles derived from fruits, vegetables, and herbs: innovative strategies of therapeutic and drug delivery."  Theranostics 14(12): 4598-4621. IF=12.4 END 免责声明：本文仅作知识交流与分享及科普目的，不涉及商业宣传，不作为相关医疗指导或用药建议。文章如有侵权请联系删除。 OTC2024类器官前沿应用与3D细胞培养论坛圆满落幕，点击图片可查看会后报告，咨询OTC2025类器官论坛请联系：王晨 180 1628 8769