BMF

*仅供医学专业人士阅读参考 无论如何我都没有想到，被誉为“最毒乳腺癌”的三阴性乳腺癌（TNBC），竟然能以这样一种方式死去。 近日，由哈佛医学院附属布列根和妇女医院Karen Cichowski领衔的研究团队，在顶级期刊《自然》上发表一项重磅研究成果[1]。 她们发现，将AKT抑制剂与EZH2抑制剂联用，可以通过两步诱导TNBC细胞死亡。 第一步，EZH2/AKT抑制剂会协同促使基底样TNBC细胞进入分化程度更高、更容易治疗的管腔样状态。 随后的第二步非常出人意料，这两种药物竟然会劫持正常乳腺退化（泌乳停止后乳腺相关细胞死亡）所需的信号通路，进而通过一种非常自然的方式杀死TNBC细胞。 不得不说，哈佛团队发现的这招针对三阴性乳腺癌的“降维打击”，非常值得期待。 ▲ 论文首页截图 在乳腺癌中，PI3K/AKT1通路经常被过度激活。 在HR阳性的管腔型乳腺癌中，最常见的驱动基因突变是PIK3CA，它编码PI3K的p110α亚基。目前，PI3Kα选择性抑制剂已获批用于治疗晚期HR阳性乳腺癌。 在基底样TNBC中，PTEN失活突变更常见，由于PTEN主要通过PI3K p110β亚基发挥对PI3K通路的抑制作用；因此，从理论上讲，靶向PI3K通路下游AKT1的抑制剂，可能对三阴性乳腺癌有效。 然而，已经有临床试验发现，AKT抑制剂没有改善TNBC的预后[2]。如此一来，一个问题就摆在了科学家面前：AKT抑制剂究竟是没用，还是说需要一点儿助力？ 作为一名研究癌症的医学家，Karen Cichowski也注意到了上述问题。然而，她还注意到，PI3K抑制剂在管腔型乳腺癌中发挥着良好的疗效。因此，她们想知道，是不是调节下TNBC细胞状态（例如管腔化），就可以让TNBC细胞对AKT抑制剂敏感。 ▲ Karen Cichowski（左）和论文第一作者Amy Schade 这个想法让她们将目光聚焦到EZH2身上，因为它就是调节管腔细胞增殖的关键。虽然已经有研究发现，抑制EZH2不会影响乳腺癌细胞的生长，但是会限制TNBC的转移[3]。这或许就是个好兆头。 更幸运的是，无论是AKT抑制剂，还是EZH2抑制剂，目前都有在研或已批准上市的药物。在本研究中，她们使用的AKT抑制剂是在研的ipatasertib，使用的EZH2抑制剂是已获FDA批准上市的tazemetostat。 她们一开始的研究思路也很简单，AKT抑制剂或EZH2抑制剂单药处理TNBC细胞系，或者先用EZH2抑制剂处理，然后再上ipatasertib。实验结果非常明显，AKT和EZH2抑制剂单药不能有效杀死TNBC细胞系，但二者联合使用时却能以剂量依赖的方式杀死TNBC细胞系。 ▲ 联合使用的杀伤效果非常显著 显然，她们可能猜对了。 于是，她们在异种移植、基因工程小鼠模型（GEMM）来源同种异体移植和患者来源异种移植（PDX）模型中，开展大规模体内疗效评估。 一言以蔽之，都观察到了疗效。 不难看出，EZH2/AKT抑制剂联用是治疗TNBC的潜力组合。 ▲ 多种模型中都观察到了EZH2/AKT抑制剂联用的疗效 接下来的问题是，EZH2抑制剂为啥会增敏AKT抑制剂呢？真是因为EZH2抑制剂改变了TNBC细胞的状态吗？ 转录组测序显示，EZH2/AKT抑制剂联用会下调与基底细胞和乳腺干细胞相关的基因（如KRT5、KRT14和VIM），同时上调管腔相关标志物（如GATA3和ELF3）。 不难看出，EZH2/AKT抑制剂联用确实会驱动基底型TNBC细胞进入类似管腔的细胞状态。基于患者来源异种移植（PDX）模型的研究数据，她们证实EZH2/AKT抑制剂在体内也会使TNBC进入管腔样状态，从而导致癌细胞快速死亡和肿瘤持久消退。 ▲ CK14是基底细胞标志物，CK8是管腔细胞标志物 值得注意的是，对于控制管腔分化的主发育转录因子GATA3而言，它的表达上调最大化，需要EZH2抑制剂和AKT抑制剂同时存在。 一旦除去GATA3，EZH2抑制剂和AKT抑制剂的协同抗癌作用就大打折扣，但仍有一定的抗癌效果（这可能是两种抑制剂对多种细胞周期基因表达有影响造成的）。 ▲ GATA3是EZH2/AKT抑制剂联用起作用的关键 随后，Cichowski团队探索了EZH2/AKT抑制剂联用增加GATA3水平，促进基底型TNBC细胞进入管腔样细胞状态的机制。 她们发现，EZH2抑制剂能打开GATA3增强子位点的染色质；而AKT抑制剂则负责诱导FOXO1去磷酸化，增强FOXO1进入细胞核，促进GATA3编码基因的转录，最终达到提升GATA3水平的目的。 那EZH2/AKT抑制剂又是如何进一步促进进入管腔状态的TNBC细胞死亡的呢？ 除了管腔标志物上调之外，Cichowski团队还注意到，EZH2/AKT抑制剂处理之后，促凋亡蛋白BMF在所有对联合治疗敏感的细胞系中都上调了，而且上调水平居所有上调细胞凋亡相关基因之首。如果抑制BMF，就可阻止多种细胞系对EZH2/AKT抑制剂的细胞毒性反应。 这一发现大大出乎Cichowski团队的意料。 因为在泌乳结束之后，乳腺会发生自然退化，而BMF诱导细胞死亡的能力，在这一过程中发挥着关键作用。 这一发现暗示，EZH2/AKT抑制剂不仅能将TNBC细胞转变为管腔样状态，还能通过激活正常情况下驱动管腔细胞退化的信号来杀死TNBC。 至于背后的分子机制，她们也解开了。 简单来说，EZH2抑制剂可通过增加逆转录表达元件和内源性逆转录病毒水平，诱导2′3′-cGAMP的形成；而AKT抑制剂会加强STING和TBK1之间的相互作用；两相结合，会导致细胞因子IL-6的产生，而IL-6会作用于JAK1-STAT3-BMF通路，促进BMF的产生，进而诱导已经管腔化的TNBC细胞发生与退化类似的死亡。 ▲ 机制示意图 不得不说，Cichowski团队的这个研究做得非常棒。 我已经找不到合适的词形容这一发现了。我只能说，太精彩了！ 在我看来，这对于难治的TNBC来说，真是一个不错的结局。 需要注意的是，Cichowski团队在研究中也发现，在耐药的TNBC细胞中，GATA3不会被EZH2/AKT抑制剂组合诱导。 那如何区分哪些TNBC对EZH2/AKT抑制剂敏感，哪些是耐药的呢？Cichowski团队业开发了一个机器学习算法，有望帮助区分，不过仍需在临床研究中检验有效性。 值得一提的是，Cichowski团队还发现，即使遇到对EZH2/AKT抑制剂耐药的TNBC，也有解决办法。GATA3和STING激动剂可以将耐药TNBC重编程，使耐药TNBC对EZH2/AKT抑制剂敏感。 当然啦，Cichowski团队这项激动人心的研究成果还处于临床前研究阶段，EZH2/AKT抑制剂对TNBC的疗效究竟如何，还需要临床研究去检验。 或许我们也不用等太久，因为EZH2抑制剂和AKT抑制剂均有获批的药物，后续开展临床研究要方便得多。 参考文献： [1].Schade AE, Perurena N, Yang Y, et al. AKT and EZH2 inhibitors kill TNBCs by hijacking mechanisms of involution. Nature. Published online October 9, 2024. doi:10.1038/s41586-024-08031-6 [2].Turner N, Dent RA, O'Shaughnessy J, et al. Ipatasertib plus paclitaxel for PIK3CA/AKT1/PTEN-altered hormone receptor-positive HER2-negative advanced breast cancer: primary results from cohort B of the IPATunity130 randomized phase 3 trial. Breast Cancer Res Treat. 2022;191(3):565-576. doi:10.1007/s10549-021-06450-x [3].Yomtoubian S, Lee SB, Verma A, et al. Inhibition of EZH2 Catalytic Activity Selectively Targets a Metastatic Subpopulation in Triple-Negative Breast Cancer. Cell Rep. 2020;30(3):755-770.e6. doi:10.1016/j.celrep.2019.12.056 本文作者丨BioTalker

关注并星标CPHI制药在线导读：       骨髓纤维化是骨髓弥漫性纤维组织增生并代替骨髓造血组织的一种疾病，通常与JAK2信号失调有关。针对JAK2信号通道设计的JAK抑制剂是骨髓纤维化治疗的主要药物。2023年，骨髓纤维化伴贫血第一个药物，葛兰素史克公司的JAK抑制剂Ojjaara在美获批。近日，诺华公司斥资29亿美元押宝MorphoSys骨髓纤维化药物的相关报道，引起MorphoSys公司股价的大幅上涨。消息来源见https://www.nature.com/articles/d41573-024-00030-6?诺华公司计划以27亿欧元（29亿美元）收购MorphoSys公司，使得该公司的股价大涨。MorphoSys去年晚些时候报道了pelabresib与JAK抑制剂鲁索利替尼（Jakafi）在骨髓纤维化患者中的混合III期试验结果，并正在向美国食品药品监督管理局申请进一步研究[1]。MorphoSys公司近年在临床研发方面并不算太理想，这笔交易，为这家德国公司画上了句号。       MorphoSys成立于1992年，由Simon Moroney博士和Andreas Plückthun教授在德国Martinsried创立，最初专注于和大型制药公司合作，为其感兴趣的靶点寻找抗体。随着公司发展，MorphoSys过渡到一家以产品为基础的公司，该公司拥有自己的研发管线，其中包括小分子药物。2021年7月，该公司以17亿美元收购了美国生物技术公司Constellation Pharmaceuticals，收购了pelabresib和另一个极具吸引力的候选药物。2021年8月，在欧盟和加拿大有条件批准该公司Minjuvi®（tafasitamab）与来那度胺联合治疗某种淋巴瘤患者。       MorphoSys去年在美国血液学学会（ASH）上发表的对430名骨髓纤维化患者进行的pelabresib和ruxolitinib联合治疗一线骨髓纤维化的综合3期MANIFEST-2结果。结果显示66%的联合用药受试者在24周时脾脏体积减少大于35%，而安慰剂受试者为35%。然而，它未能在测量患者症状方面显示出统计学上的显著差异，在11月造成公司市值损失了20%。       该药物有望在今年晚些时候提交给美国食品药品监督管理局审批，届时FDA将决定这些数据是否足够。到目前为止，美国食品药品监督管理局已经批准了四种针对该疾病的JAK抑制剂，包括葛兰素史克的JAK1/JAK2/ACVR1阻断剂莫莫洛替尼（Ojjaara），这家大型制药公司去年以19亿美元从Sierra Oncology收购了该药物，是骨髓纤维化伴贫血首个药物。       通过这笔交易，诺华还将获得tulmimitostat，这是一种EZH1和EZH2的双重抑制剂，用于治疗实体瘤和淋巴瘤。MorphoSys收购了tulmimetostat，作为其收购Constellation的一部分。诺华公司是使用MorphoSys的技术发现了ianalumab，是一种用于自身免疫性疾病开发的BAFF受体靶向抗体。       MorphoSys以2500万美元的价格将其另一个临床项目，即抗CD19抗体tafasitamab（Monjuvi）出售给Incyte。       骨髓纤维化 （BMF） 是指起源于多能造血干细胞水平的费城染色体 （BCR-ABL1） 阴性骨髓增生性肿瘤 （MPN）。骨髓纤维化可表现为原发性骨髓纤维化，或由既往诊断为真性红细胞增多症或原发性血小板增多症引起。BMF的特征是不同程度的血细胞减少、髓外造血等，导致进行性脾肿大和衰弱的疾病相关全身症状，影响生活质量。BMF 还会导致早期死亡，受影响患者的中位生存期约为6年。早期死亡的原因包括白血病转化、进行性骨髓衰竭引起的并发症、感染、血栓形成和出血等[2]。       一般来说，MF定向治疗的目标可分为两大类：克隆根除和针对与BMF相关的各种信号通路和介质的治疗。在慢性粒细胞白血病动物模型中根除BCR-ABL1克隆细胞与病理性BMF的逆转有关。除造血干细胞移植外，用于治疗 MF 的常规疗法均不被认为是治愈性的。       在过去 10 年中，随着选择性 JAK2 抑制剂被引入临床研究，骨髓纤维化治疗迎来了一个新的进展。在临床前和临床评估大约有十几种口服 JAK2 酪氨酸激酶抑制剂。芦可替尼是其中的代表性药物之一，对参加关键性III期COMFORT研究的MF患者在接受芦可替尼治疗6个月和12个月时获得的骨髓活检标本结果的分析未能显示组织病理学异常的改善。然而，一些病例报告和回顾性分析表明，较长的芦可替尼治疗时间可能对一部分患者的 BMF 产生适度影响。在几份已发表的病例报告中，在芦可替尼治疗17周和48周后观察到 BMF 消退。芦可替尼化学结构式       靶向纤维化细胞因子是另外一种治疗策略。吡非尼酮是代表性药物。吡非尼酮是一种抗纤维化药物，可抑制纤维化细胞因子，包括血小板衍生生长 因子、肿瘤坏死因子-α和 TGF-β等。       参考文献：       [1] Asher Mullard.Novartis bets US$2.9 billion on MorphoSys and an anti-myelofibrosis drug [J], nature reviews drug discovery. https://www.nature.com/articles/d41573-024-00029-z?utm_source=xmol&utm_medium=affiliate&utm_content=meta&utm_campaign=DDCN_1_GL01_metadata      [2] Abou Zahr A, Salama M E, Carreau N, et al. Bone marrow fibrosis in myelofibrosis: pathogenesis, prognosis and targeted strategies[J]. Haematologica, 2016, 101(6): 660.【智药研习社近期课程预告】来源：CPHI制药在线声明：本文仅代表作者观点，并不代表制药在线立场。本网站内容仅出于传递更多信息之目的。如需转载，请务必注明文章来源和作者。投稿邮箱：Kelly.Xiao@imsinoexpo.com▼更多制药资讯，请关注CPHI制药在线▼点击阅读原文，进入智药研习社~