V66-Exatecan

传统的ADCs在临床应用中面临诸多挑战，包括缺乏特异性肿瘤靶点、内化效率低下以及难以有效递送至特定肿瘤部位等。这些限制因素不仅削弱了ADCs的治疗潜力，也限制了其在多种癌症类型中的广泛应用。 近日，Molecular Cancer（IF 33.9）期刊上公布了一篇名为“Harnessing ExDNA for precision exatecan delivery in cancer: a novel antibody-drug conjugate approach”的研究型论文，为了解决上述问题，耶鲁大学的研究团队开发了一种新型的抗体药物偶联物（ADC）——V66-exatecan。这种ADC利用了细胞外DNA（exDNA）和ENT2转运蛋白的表达来增强核药物递送和肿瘤特异性。 分子设计：V66-exatecan ADC利用了高亲和力的抗exDNA人源化抗体V66，通过可切割连接子与强效拓扑异构酶I抑制剂exatecan相连。 作用机制：V66抗体通过识别肿瘤微环境中的细胞外DNA（exDNA）来特异性地靶向肿瘤细胞。一旦识别到exDNA，V66抗体通过ENT2转运蛋白进入肿瘤细胞，并最终定位于细胞核内。这种双重靶向机制使得V66抗体具有高度的肿瘤选择性和核定位能力，从而能够有效地将药物递送至肿瘤细胞核内，发挥其治疗作用。 细胞外DNA（extracellular DNA,exDNA）是一种新兴的肿瘤微环境标志物，它是存在于细胞外环境中的DNA片段，主要来源于细胞的自然死亡（如凋亡和坏死）、免疫细胞的分泌以及肿瘤细胞的裂解等过程。 研究方法与结果 首先，研究人员将荧光标记的V66抗体注入携带DLD1肿瘤的小鼠体内，发现V66能特异性地在肿瘤中积累，且主要定位于肿瘤细胞核内，而在非肿瘤组织中几乎无分布，仅肝脏有少量摄取，这表明V66抗体具有高度的肿瘤靶向性和核定位能力。 随后，研究人员将V66抗体与exatecan药物通过可切割连接子连接，制备了V66-exatecan ADC。实验结果显示，该ADC保留了V66抗体的细胞穿透和核定位特性，且在多种癌细胞系中展现出低纳摩尔级的强效抗肿瘤活性，而对正常细胞无明显毒性，证实了其作为新型ADC的高效性和特异性。 接着，研究人员观察到在BRCA2缺陷的肿瘤细胞和小鼠模型中，V66-exatecan ADC表现出显著增强的抗肿瘤效果。与野生型细胞相比，BRCA2缺陷细胞对V66-exatecan的敏感性大幅提高，其EC50值降低了10至17倍。在体内实验中，V66-exatecan不仅能有效抑制BRCA2缺陷肿瘤的生长，还显著延长了小鼠的生存期，部分小鼠甚至实现了完全缓解，这为治疗BRCA缺陷肿瘤提供了新的策略。 接下来的研究发现，BRCA2缺陷细胞因DNA损伤修复能力下降，导致细胞外DNA（exDNA）积累增加，这促进了V66抗体的摄取。实验中，DNase I预处理可显著降低V66抗体的摄取，而RNase I预处理则无影响，表明V66抗体的摄取依赖于exDNA而非ENT2表达水平的变化。此外，辐射诱导的DNA损伤也能增强V66抗体的摄取，进一步证实了exDNA在V66摄取中的关键作用。 随后，研究人员在BRCA1和BRCA2缺陷的髓母细胞瘤小鼠模型中，观察到V66-exatecan ADC不仅成功穿过血脑屏障并特异性地定位到脑肿瘤中，还显著延长了小鼠的生存期。这一结果表明，V66-exatecan ADC能够有效靶向中枢神经系统肿瘤，为治疗这类难以攻克的肿瘤提供了新的希望。 最后，在单剂量给药的毒性实验中，V66-exatecan ADC在5至50 mg/kg剂量范围内显示出良好的耐受性，仅在100 mg/kg剂量时观察到轻度毒性，200 mg/kg剂量时出现严重毒性。即使在最低剂量（5 mg/kg）下，V66-exatecan ADC也能显著抑制肿瘤生长，且随着剂量增加，抑制效果更为显著。血液学和生化指标分析显示，V66-exatecan ADC在治疗剂量下对肝肾功能无显著影响，表明其具有良好的安全性和抗肿瘤活性，为后续的临床应用提供了基础。 结语 综上所述，总结了以下关键结论： V66-exatecan在多种癌细胞系中显示出强大的抗肿瘤活性，对健康小鼠原代成纤维细胞无影响，EC50值在低纳摩尔范围内。 V66-exatecan能诱导强烈的DDR信号、TOP1降解和旁观者杀伤效应。 BRCA1/2缺陷模型显示出更高的穿透性和敏感性，与BRCA野生型对照相比，EC50值降低了高达17倍。 在TNBC和BRCA突变中枢神经系统肿瘤的小鼠模型中，V66-exatecan显著抑制了肿瘤生长，并延长了生存期，包括在BRCA2缺陷模型中观察到的完全缓解和延长的中位生存期。 毒理学研究显示，在高剂量或重复给药下，V66-exatecan没有引起显著的血液学、肾脏、肝脏或骨髓毒性。 该研究开发的V66-exatecan ADC代表了一种新型的ADC，它通过利用exDNA和ENT2介导的核递送来克服传统ADC的局限性。这种新型ADC在治疗DDR缺陷和难以到达的肿瘤方面显示出广泛的治疗效果和良好的安全性，为癌症治疗提供了新的策略。 点击下方“阅读原文”获取文章来源。 我们已经建立了医药交流群，群里有各大著名企业和重点高校的研究人员。大家可以一起讨论医药热点，分享经验，共同进步。想加入的话，扫码或添加小编微信（VX：chirouzhenxiang666），拉您进群！ 推文用于传递知识，如因版权等有疑问，请于本文刊发30日内联系医药速览。 原创内容未经授权，禁止转载至其他平台。 ©2021 医药速览 保留所有权利 往期链接 “小小疫苗”养成记 | 医药公司管线盘点  人人学懂免疫学| 人人学懂免疫学（语音版） 综述文章解读 | 文献略读 | 医学科普|医药前沿笔记 PROTAC技术| 抗体药物| 抗体药物偶联-ADC 核酸疫苗 | CAR技术| 化学生物学 温馨提示 医药速览公众号目前已经有近12个交流群（好学，有趣且奔波于医药圈人才聚集于此）。进群请扫描上方二维码，备注“姓名/昵称-企业/高校-具体研究领域/专业”，此群仅为科研交流群，非诚勿扰。 简单操作即可星标⭐️医药速览，第一时间收到我们的推送 ①点击标题下方“医药速览”   ②至右上角“...”  ③点击“设为星标