更新于：2023-09-06

Bevifimod

更新于：2023-09-06

概要

研发状态

概要

基本信息

药物类型

微生物提取物

别名

Staphylococcal protein A、PRTX-100、PRTX-001

靶点-

作用机制

巨噬细胞抑制剂

治疗领域

免疫系统疾病、血液及淋巴系统疾病、皮肤和肌肉骨骼疾病

在研适应症

特发性血小板减少性紫癜、类风湿关节炎

非在研适应症

重症肌无力

原研机构

Protalex, Inc.

在研机构-

非在研机构

Protalex, Inc.

最高研发状态(全球)临床2期

首次获批日期(全球)-

最高研发状态(中国)-

特殊审评-

序列信息

Sequence Code 536548088

Source: WHOINN

关联

项与 Bevifimod 相关的临床试验

NCT02566603 / Terminated临床1/2期

A Phase 1b Open-Label, Dose Escalation Study of PRTX-100 in Adult Patients With Persistent/Chronic Immune Thrombocytopenia

Pre-clinical and clinical evaluations show that PRTX- 100 has biological activity that may lead to improved platelet levels where these are decreased due to immunological pathologies and that PRTX-100 has an acceptable safety profile. In vivo treatment with PRTX-100 has been shown to raise platelet counts in a mouse model of immune thrombocytopenia (ITP). The primary objective of the study is to assess the efficacy of PRTX-100 in terms of platelet response in patients with chronic/persistent ITP.

开始日期2015-11-01

申办/合作机构

Protalex, Inc.

NCT02401061 / Terminated临床1/2期

A Phase 1/2, Open-Label, Dose Escalation Study of PRTX-100 in Adult Patients With Persistent/Chronic Immune Thrombocytopenia

开始日期2015-09-01

申办/合作机构

Protalex, Inc.

NCT02330445 / Completed临床1/2期

Phase I/II Open Label Evaluation of Safety and Feasibility of 6 Months IV PRTX-100 Administrations in Previous Rheumatoid Arthritis Study Participants and Development of Immunological Samples for Assay Development From Normal Volunteers

Part A Primary Objective To determine the safety of six months of PRTX-100 administration. Part B Primary Objective To obtain antisera from normal volunteers that have developed anti-PRTX-100 antibodies.
Secondary Objective(s) To assess rheumatoid arthritis activity during the period of PRTX-100 treatment To evaluate the development of anti-PRTX-100 antibodies To explore feasibility of joint evaluations with ultrasound To explore feasibility of biomarkers as disease markers

开始日期2015-02-01

申办/合作机构

Protalex, Inc.

100 项与 Bevifimod 相关的专利（医药）

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项与 Bevifimod 相关的文献（医药）

2021-09-20·Vox sanguinis4区 · 医学

Profile of the single-use, multiple-pass protein A adsorber column in immunoadsorption.

4区 · 医学

Article

作者: Nadine Schossee ; Gabriele Veit ; Julia Gittel ; Johannes Viebahn ; Marius Niklaus ; Philipp Klingler ; Nurcan Üçeyler ; Erdwine Klinker ; Anna Kobsar ; Markus Boeck ; Juergen Koessler

BACKGROUND AND OBJECTIVES:

Immunoadsorptions (IA) are used to remove autoantibodies from the plasma in autoimmune disorders. In this study, we evaluated the effects of a single-use, recombinant staphylococcal protein A-based immunoadsorber on blood composition of the patient.

MATERIALS AND METHODS:

In a cohort of patients with myasthenia gravis or stiff-person syndrome, essential parameters of blood cell count, coagulation, clinical chemistry or plasma proteins and immunoglobulins (Ig) were measured before and after IA (n = 11).

RESULTS:

In average, IA reduced the levels of total IgG, IgG1, IgG2 and IgG4 by approximately 60%, the acetylcholine receptor autoantibody levels by more than 70%. IgG3, IgA or IgM were diminished to a lower extent. In contrast to fibrinogen or other coagulation factors, the column markedly removed vitamin K-dependent coagulation factors II, VII, IX and X by approximately 40%-70%. Accordingly, international normalized ratio and activated partial thromboplastin time were increased after IA by 59.1% and 32.7%, respectively. Coagulation tests almost returned to baseline values within 24 h. Blood cell count, electrolytes, total protein or albumin were not essentially affected. No clinical events occurred.

CONCLUSION:

The single-use, multiple-pass protein A adsorber column is highly efficient to remove IgG1, IgG2 and IgG4 or specific acetylcholine receptor autoantibodies from the plasma. Coagulation parameters should be monitored, since the column has the capacity to largely reduce vitamin K-dependent factors.

2021-06-01·Zhongguo shi yan xue ye xue za zhi

[Reaserch Advances in the Treatment of Primary Immune Thrombocytopenia--Review].

Review

作者: Xin-Yu Li ; Yang He ; Chang-Geng Ruan

Primary immune thrombocytopenia (ITP) is a blood system disease mediated by autoimmune mechanism. Currently, the goal of treatment for primary ITP is to keep patients' peripheral platelet count at a safe level to prevent severe bleeding. Recently, avatrombopag and fostamatinib have been approved by the FDA for the treatment of primary ITP in adults, while new drugs such as rozanolixizumab, efgartigimod, PRTX-100, decitabine and atorvastatin have shown efficacy in early clinical trials. This review summarizes the current accepted therapies for the clinical treatment of primary ITP in adults, and briefly discuss the progress of new therapies.

2017-08-05·Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis3区 · 医学

Application of protein A-modified capillary-channeled polymer polypropylene fibers to the quantitation of IgG in complex matrices

3区 · 医学

Article

作者: Trang, Hung K. ; Marcus, R. Kenneth

Polypropylene (PP) capillary-channeled polymer (C-CP) fibers loaded with recombinant Staphyloccocus aureus protein A (rSPA) were used as an affinity chromatography stationary phase for the quantitation of immunoglobulin G (IgG) in complex biological matrices. Optimization of the chromatographic method regarding mobile phase components and load/elution conditions was performed. The six-minute analysis, including a load step with 12mM phosphate at pH 7.4, an elution step with 0.025% phosphoric acid and a re-equilibration step, was employed for quantitation of IgG1 from 0.075 to 3.00mgmL^-1 in an IgG-free CHO cell supernatant matrix. Quantification of IgG1 content in a different CHO cell line was accomplished using the external calibration curve as well as using a standard addition approach. The high level of agreement between the two approaches suggests that the protein A-modified C-CP fiber phase is immune from matrix effects due to concomitant species such as host cell proteins (HCPs), host cell DNA, media components and other leachables and extractables. The inter-day and intra-day precision of the method were 3.1 and 3.5%RSD respectively for a single column. Column-to-column variability was 1.31 and 6.62%RSD for elution time and peak area, respectively, across columns prepared in different batches. The method reported here is well-suited for IgG analysis in complex harvest cell culture media in both the development and production environments.

项与 Bevifimod 相关的新闻（医药）

2023-07-13

·生物制品圈

抗体药 Protein A 的残留质控，通用性很重要

天然的蛋白A（Staphylococcal Protein A，SPA）是分离自金黄色葡萄球菌细胞壁的一种蛋白质。其含有E、D、A、B、C共5个同源性较高的抗体IgG结合结构域，以及1个胞膜结合结构域。蛋白A与抗体IgG的Fc段特异性结合，与抗体IgG的Fab段有较弱结合。利用蛋白A与抗体Fc段的高亲和力，将蛋白A通过共价偶联结合于纯化介质之上，制备的蛋白A亲和层析填料广泛地应用于抗体类产品的生产纯化过程中。上图引用自文献 Amritkar V , Adat S , Tejwani V ,et al.Engineering Staphylococcal Protein A for high-throughput affinity purification of monoclonal antibodies[J].Biotechnology Advances: An International Review Journal, 2020(44-):44.检测必要性 NECESSITY OF DETECTION蛋白A作为抗体类药物生产时多用到的纯化柱填料，其不可避免会有蛋白A配基脱落，导致抗体药物中蛋白A的残留。这些微量残留对抗体药物的安全性（引起机体副反应）和有效性（影响药效和药代动力学）具有潜在的隐患，使其成为工艺相关杂质。相关法规 REGULATIONS012020版《中国药典》第三部《人用重组单克隆抗体制品总论》3.2.4 工艺相关杂质章节中提出“采用适宜的方法对供试品宿主蛋白质、宿主细胞和载体DNA、蛋白A及其他工艺相关杂质进行检测。供试品测定结果应在规定的范围内。”022020版《中国药典》第三部《尼妥珠单抗注射液》3.1.3.3 蛋白质A残留量中提出“用酶联免疫吸附法（通则3429）测定，蛋白质A残留量应不高于蛋白质总量的0.001%”。03美国 FDA美国FDA提出在定量检测蛋白A时，应尽可能使用高度灵敏的分析方法，并且结果应低于该方法可检测水平。04美国 USP130USP130《PROTEIN A QUALITY ATTRIBUTES》表示，“在纯化人用抗体时应清除滤出的蛋白A，并相应验证生产工艺。基于酶联免疫吸附试验(ELISA)的残留检测通常用于工艺开发和验证，以确保在蛋白A亲和层析后的工艺步骤中有效去除残留蛋白A”。君研 Protein A ELISA KIT君研生物自主研发生产的蛋白A（Protein A）残留检测试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法，可定量检测各种生物制品中蛋白A的残留量。具有通用性高、操作简便等优势，并经过了全面的性能验证。该试剂盒遵循ISO13485质量管理体系进行研发生产。产品优势 | PRODECT ADVANTAGE 通用性高：可以检测国外主流的4种标准品，以及国内多种天然、重组、耐碱型蛋白A标准品（MabSelect SuRe（Cytiva）、MabSelect PrismA（Cytiva）、TOYOPEARL AF-rProtein A(HC)-650F（Tosoh）、Eshmuno A（Merck））操作简便：37℃静置反应，无需振荡。步骤简便，实验操作时间短性能优异：检测限低至5.12pg/mL，准确度高，重复性好性能指标 | PERFORMANCE INDEX验证数据 | VALIDATION DATA 标准曲线验证：标准曲线是经4-PL拟合得到，P0111A-96检测范围在5.12-500pg/mL，R2可达到0.99。试剂盒通用性：君研生物蛋白A（Protein A）残留检测试剂盒（P0111A-96）可检测的蛋白A类型有MabSelect SuRe（Cytiva）、MabSelect PrismA（Cytiva）、Eshmuno A（Merck）、TOYOPEARL AF-rProtein A（HC）-650F（Tosoh）、重组耐碱蛋白A（杭州纽龙）、重组金黄色葡萄球菌蛋白A（杭州纽龙）、rProtein A（楚天微球）等。试剂盒准确度：经验证，君研生物蛋白A（Protein A）残留检测试剂盒（P0111A-96）检测高、中、低浓度质控品，测量偏差绝对值均≤15% 样品加标回收率检测：经验证，君研生物蛋白A（Protein A）残留检测试剂盒（P0111A-96）实际样品高、中、低浓度加标回收率均在70%~130%范围内。君研产品推荐 JUNYAN PRODUCTSEND关于君研生物ABOUT JUNYANBIO君研生物科技（山西）有限公司成立于2021年，作为独立创新的研发、生产和销售一体型企业，君研专注于为生物医药产业提供符合国际标准的质量安全检测产品和服务。公司位于山西省太原市综改示范区，由海归科学家与业内资深专家领队，建设有 ~3200 平米符合 cGMP 标准和 ISO 13485:2016 体系要求的研发生产基地。君研生物致力于在CGT药企、抗体药、疫苗等领域提供专业合规的工艺杂质残留、宿主细胞核酸及蛋白残留、含量测定、外源污染物检测等产品和服务。结合医药产业发展需求，公司特色的快速即用型检测开发技术已经覆盖20多种检测试剂盒系列产品，拥有专利类知识产权 10 余项。作为助力您成功的生物安全检测合作伙伴，君研生物始终坚持生物原料中国造，为生物医药安全提供国际品质的产品和专业的技术服务。君研生物科技（山西）有限公司经专业机构北京国医械华光认证有限公司评审专家的严格审核后，顺利通过GB/T 42061-2022 idt ISO13485:2016医疗器械质量管理体系认证，体系覆盖产品设计开发、生产和服务全过程，并且获得认证证书。国医械华光认证证书联系方式CONTACT INFORMATIONCONTACTNFORMATIN销售电话15234188795技术支持18734150104/19503412257联系邮箱junyans21@163.com公司官网www.junyanbios.cn识别微信二维码，添加生物制品圈小编，符合条件者即可加入生物制品微信群！请注明：姓名+研究方向！版权声明本公众号所有转载文章系出于传递更多信息之目的，且明确注明来源和作者，不希望被转载的媒体或个人可与我们联系(cbplib@163.com)，我们将立即进行删除处理。所有文章仅代表作者观点，不代表本站立场。

免疫疗法临床研究

2022-07-29

·生物制品圈

protein A 配基改造策略用于治疗性抗体高通量纯化

摘要：随着精准化医疗理念逐渐被认可，治疗性抗体：如单克隆抗体、双特异性抗体的研发成为各大制药企业追逐的热点。在抗体研发的过程中上游细胞培养的技术不断提升，在高密度培养技术的辅助下Titer可以达到10-15g/L,这个下游纯化工艺带来了巨大挑战。protein A亲和层析作为下游纯化捕获阶段的“金方法”，广泛应用于治疗性抗体纯化工艺。然而protein A填料价格高昂、动态结合载量低、循环使用次数有限，需要较低的pH进行洗脱使得终产物中聚集体的含量大大增加，难以实现较高通量的纯化，因此很大程度上提高了各大制药企业的研发成本。本文综述了将五年来各种工程化的技术策略用于提升protein A亲和层析可用性，以期望为治疗性抗体工业化纯化提供帮助。文章亮点1、总结了近年来主流的用于提高protein A填料耐碱性、动态结合载量以及洗脱pH的蛋白质工程策略，可以为层析填料制造方提供研发思路2、总结了近五年各大填料供应商中性质优良的protein A填料，可以为各大药企在治疗性抗体纯化工艺开发阶段提供理论指导。背景：治疗性抗体包括单克隆抗体、双特性抗体、以及抗体片段（Fabs、ScFv）逐渐占据了治疗性生物制品的半壁江山。各大药企的竞争也十分激烈，因此高效快速的研发出高质量的治疗性抗体就显得尤为重要。据统计表明抗体下游纯化工艺开发所需的时间平均占到治疗性抗体工艺开发的64.1%，投入经费也占到整个项目的55.8%。主流的抗体纯化通常包含三步层析、两步过滤、以及病毒灭活，以及浓缩换液（图1）。其中protein A亲和层析具有高特异性而广泛应用于抗体的捕获阶段。这一阶段对于整个抗体的纯化来说具有重要意义，然而由于动态结合载量低、循环使用次数有限，需要较低的pH进行洗脱，大大降低了治疗性抗体纯化过程中的通量。因此需要更好的技术开发来提高protein A的应用价值。本文综述了以及工程化的策略用于提升protein A的应用价值，以期望为治疗性抗体的工业化纯化提供依据。1、protein A结构以及亲和机制概述protein A 作为存在于金黄色葡萄球菌细胞表面蛋白，分子量为42KDa, 从结构上来看protein A由五个结合结构域（A、B、C、D、E）以及一个非结合结构域X所所构成。这五个结合域均由三个螺旋束所组成，包括三个a螺旋以及两个LOOP环结构。亲和层析过程中，protein A结合域中螺旋I和螺旋II通过氢键以及范德华力等作用力与抗体Fc端的相关位点进行结合（图2）。此外，Fab(抗体可变区)可以与protein A螺旋II和螺旋III的相关位点产生亲和力。当缓冲体系的pH在3.0-4.0之间时结合力消失，使得治疗性抗体得以洗脱下来。图2 protein A五个结合结构域2、工程化protein A用于提高洗脱pH在较低的pH条件下（pH<4.0）洗脱容易导致抗体发生可溶性聚集从而使得患者出现免疫原性反应，并且在较低的pH条件下还会出现不溶性的聚集体从而造成收率上的损失。因此提高纯化过程中洗脱pH具有较大的意义。有研究表明如下策略可以提高protein A亲和层析的洗脱pH:1.将protein A 与抗体可变区（Fab）亲和力较高的结构域截短可以提高洗脱pH。有研究表明protein A 的D、E两个结构域主要与IgG的Fab段相结合，因此将D和E两个结构域截短之后可显著提高洗脱pH。此外，当工程化的protein A 配基中仅含有B结构域时，洗脱的pH可由3.0-4.0提升到3.6-4.0。2、使用碱性氨基酸替换亲和力结合位点，可以适当降低亲和力，从而提高洗脱pH。当使用定点突变的手段将protein A螺旋I上的谷氨酰胺以及天冬酰胺替换为碱性氨基酸组氨酸时，洗脱pH由4.2提高到了5.6。3、对protein A 的Z结构域进行修饰，可进一步提高洗脱pH。Z结构域是在protein A 的B结构域进行了定点修饰，将29位甘氨酸替换成了丙氨酸。修饰之后配基耐碱性提升的同时，洗脱pH也得以相应提升。有研究表明在Z结构域插入甘氨酸片段可进一步提高洗脱pH，LOOPII中DPSQ序列替换为GGGG以及GGGGGG时洗脱pH由3.3提高到了4.5。此外，Ca离子依赖型protein A配基实现了在温和条件下进行洗脱，有研究人员将有Ca离子亲和力的LOOP环插入到Z结构域的LOOPII和LOOPIII之间形成Zca结构域，改造之后的protein A 配基在EDTA存在的条件下可以在pH5.5的情况下洗脱抗体。3、工程化protein A用于提高耐碱性在抗体纯化过程中，使用NaOH进行消毒去除生物制品内毒素等具有重要的意义，然而天然的protein A配基不具备耐碱性，长期接触碱性环境会造成配基脱落从而降低填料循环使用次数。因此使用工程化技术提高protein A配基耐碱性具有重要意义。目前主流提高protein A 配基耐碱性的方法是采用Z结构域配基。已有研究表明protein A的 B结合域中天冬酰胺-甘氨酸序列对碱处理较为敏感，因此将第29位甘氨酸替换为丙氨酸后，耐碱性有了较大幅度的提升，该修饰过后的结构域被称为Z结构域。Z结构域可以0.5M NaOH中孵育7.5小时后仍然可以保持72%以上的动态结合载量。2、对Z结构域进一步修饰，可以更好提高配基的耐碱性。首先在Z结构域结合位点处引入苏氨酸可以进一步提高耐碱性。将Z结构域中位于LOOPI以及第LOOPII的天冬氨酸（Asn23）替换为苏氨酸后在0.5M NaOH中孵育27小时后仍然可以保持91%以上的动态结合载量。类似地,Z结构域突变体Zvar(Q9A,E47T)在引入苏氨酸突变体后，在0.5MNaOH中循环1000分钟仍然可以保持80%以上的动态结合载量。3、C结构域改造可提升配基耐碱性。当C结构第29位甘氨酸替换为丙氨酸后可以在0.5M NaOH中孵育25小时保持稳定。综上所述，第29位甘氨酸是改良配基碱稳定性的关键位点。4、工程化protein A用于提高动态结合载量动态结合载量作为影响下游纯化通量的关键因素，是筛选填料的关键因素。通常传统protein A亲和层析的载量仅在20-30g/L左右纯化通量较低。较高的动态结合载量，可以减少装柱体积，节省填料降低成本。目前主流的策略是在不同结构域中添加连接子（Linker），从而减少空间位阻从而提高动态结合载量。目前商业化的protein A填料，如JSR Life Sciences公司的AmsphereTM A3，以及Cytiva公司的MabSelectTM PrismA动态结合载量均在50g/L以上。5、商业化Protein A亲和填料概览目前各种主流商业化Protein A亲和层析填料信息如下表（表一），目前商业化的protein A填料如cytiva公司的MabSelectTMPrismA以及默克公司的Eshmuno A填料均展现出较好的动态结合载量以及耐碱性。然而进口填料价格高昂，大大提高了下游纯化的研发成本。因此开发可替代性国产填料成为各大新型技术公司研发热点，如纳微科技的UniMab EXE填料，采用单分散PMMA微球以及葡聚糖涂层相结合的技术，完美融合了软胶以及硬胶的优势，因此有更高的载量以及耐碱性，此外博格隆公司的AT Protein A Diamond Plus填料动态载量可以达到60mg/ml以上。随着越来越多性质优良的国产填料上市，可大大降低国内制药企业研发成本，为企业提质增效，也有利于生物类似药的降低价格惠及民生。表1 各种主流商业化Protein A亲和层析填料总结：作为治疗性抗体下游纯化的金方法，protein A层析具有重要的意义。然而天然的protein A配基具有耐碱性差，动态结合载量低，需要低pH洗脱等缺陷使得抗体下游纯化的通量较低。本文综述了提高protein A耐碱性、动态结合载量以及洗脱pH的分子修饰策略，此外本文还总结几种主流的商业化protein A填料的特征性，因此可以为抗体工业化纯化工艺开发阶段提供基础信息。参考文献：1.Amritkar V , Adat S , Tejwani V , et al. Engineering Staphylococcal Protein A for high-throughput affinity purification of monoclonal antibodies[J]. Biotechnology advances, 2020:107632.2.[Ramos DDP, Ana M, González-Valdez, José, . Protein A chromatography: Challenges and progress in the purification of monoclonal antibodies[J]. Journal of Separation Science, 2019.

抗体

2014-06-13

·BioSpace

Protalex, Inc. Announces Data from U.S. Phase 1(b) Trial Of PRTX-100 In Active Rheumatoid Arthritis Patients Presented At The 2014 EULAR Annual European Congress of Rheumatology

FLORHAM PARK, N.J.--(BUSINESS WIRE)--Protalex, Inc. (OTCQB:PRTX), a clinical-stage biopharmaceutical company, today announced that results from Cohorts 1-4 of its U.S.-based multicenter Phase 1(b) randomized, multiple-dose, dose-escalation study of PRTX-100 in combination with methotrexate or leflunomide in adults with active rheumatoid arthritis (PRTX-100-104 Study) was highlighted in a poster presentation at EULAR’s Annual European Congress of Rheumatology being held in Paris, June 11-14, 2014. PRTX-100 is an investigational drug incorporating a highly purified form of Staphylococcal Protein A. The abstract is now available on EULAR’s website at and the complete poster is available on the Company’s website at Help employers find you! Check out all the jobs and post your resume.