Nectin-4(Syndivia)

一、研究背景 Nectin-4是抗肿瘤靶点：Nectin-4 仅在胚胎/ 胎盘正常组织表达，在乳腺癌、尿路上皮癌、卵巢癌等多种实体瘤中高特异性过表达，并通过 PI3K/AKT 等通路驱动肿瘤增殖、转移与血管生成，与不良预后直接相关。 已上市药物：全球首款 Nectin-4 ADC 药物Enfortumab vedotin(EV)仅对尿路上皮癌有效，且存在眼部、肺部、血液毒性，易导致减量或停药；同时 EV 为随机偶联，DAR 值不均一，稳定性差、脱靶毒性高。 定点偶联技术优势：定点偶联可保证 ADC 药物组分均一、稳定性提高、优化疗效与安全性。 二、研究方法药物设计与制备筛选高亲和力人源化抗体 MW282 mAb；研发双取代马来酰亚胺新型含药连接子 BL20E（BL20-MMAE），引入 PEG 与氟苯结构提升稳定性与亲水性；在此基础上，通过对偶联条件的优化，制备得到一款靶向Nectin-4、以双取代马来酰亚胺为接头、含4个PEG 片段、以缬氨酸和瓜氨酸为酶切肽段、偶联活性小分子MMAE 的ADC采用链间二硫键定点偶联技术，制备 DAR=4 的均ADC9MW2821。体外特性结合特异性、亲和力、Fc 功能（ADCC）检测；细胞毒性、旁观者杀伤、内吞与溶酶体定位、血清稳定性评价。体内药效与药代多种 **CDX（细胞系异种移植）与PDX（人源肿瘤异种移植）** 模型评估抗肿瘤活性；荷瘤小鼠药代动力学、组织分布（⁸⁹Zr-PET/CT）研究。安全性评价食蟹猴重复给药毒性试验，测定最大无严重毒性剂量（HNSTD）与毒代动力学。 三、核心结论 1）9MW2821 是一款新颖的定点偶联Nectin-4 ADC。研究结果表明9MW2821具有结构均一、质量稳定、纯度高等特性。所使用的偶联方式保留了抗体本身的天然特性，具有较好的选择性与亲和力。此外，上述偶联改善了传统ADC 药物递送效率，通过将ADC药物快速内吞至细胞内，从而诱导肿瘤杀伤作用。 2） 9MW2821 具有良好的体外、体内药代特性。在体外血清稳定性研究结果，与对照已上市药物Enfortumab Vedotin（EV）相比，其具有更好的体外血清稳定性；提示9MW2821 的硫醚桥连接头比EV 的单马来酰亚胺接头更稳定，不会因逆迈克尔反应导致药载脱落。在荷瘤小鼠中体内药代动力学研究表明，与EV 相比，其血清MMAE 暴露量更低、瘤内MMAE暴露量更高。进一步确认了定点偶联产生的Nectin-4 ADC 在药代方面的特点。 3）9MW2821 具有靶点特异性杀伤与良好的体外、体内活性。体外杀伤研究表明，9MW2821 具有抗原表达依赖的杀伤活性，并且具有旁观者杀伤作用，但对阴性细胞不具有杀伤作用。体内研究表明，9MW2821 在CDX 模型中，表现了相对已上市对照药Enfortumab Vedotin（EV）更加优异的肿瘤抑制效果。同时，在不同肿瘤类型与不同Nectin-4 表达量的PDX 模型中，9MW2821也表现出了强大的肿瘤抑制活性和良好的实体肿瘤穿透性，可根除异质性表达Nectin-4 的肿瘤。 4）. 9MW2821 具有良好的安全性，在食蟹猴体内的安全性研究结果表明9MW2821 的HNSTD 为6 mg/kg，毒性症状轻微且可逆。毒代动力学研究显示9MW2821 比EV 具有更低的暴露量，推测9MW2821毒性较小可能与更低的暴露量有关。与EV 相比，9MW2821 具有更好的耐受性。 四、新颖点 技术创新：首创双取代马来酰亚胺定点桥连偶联平台，双取代3,4-4-苯酰吗啉马来酰亚胺组成，这个结构能够提高药物的亲和性并且提高药物的水溶性。这个连接子-含药载荷复合物能够进行一种半胱氨酸的定点偶联，并且无需引入任何半胱氨酸突变或者非天然氨基无需抗体突变即可实现位点特异性偶联，产物高度均一。结构创新：连接子引入3,5 - 二氟苯基加速水解、PEG4增强亲水性，从分子层面解决传统 ADC 稳定性差、毒素脱落的痛点。疗效突破：突破 EV 仅对高表达尿路上皮癌有效局限，对多癌种、中低抗原表达、实体瘤均强效。安全升级：定点偶联 + 稳定接头实现高肿瘤富集、低全身暴露，毒性更温和可逆，治疗指数显著提升。 MW282 mAb合成 中国仓鼠卵巢细胞（CHO 细胞）上表达的重组抗Nectin-4 人源化抗体 H-Val-Cit-PAB-MMAE 的结构 9MW2821含药连接子BL20E结构式 制备9MW2821 起始：抗体溶液 ↓ 超滤浓缩换液30 KDa 超滤离心管缓冲液：50 mM 磷酸盐 + 50 mM NaCl，pH7.4终浓度：~10 mg/mL ↓ 抗体还原反应加入 8 倍摩尔当量 TCEP 水溶液室温反应 2 h ↓ 还原后超滤换液30      KDa 超滤离心管缓冲液：50 mM 磷酸盐      + 50 mM NaCl，pH7.0 ↓ 偶联前准备调整抗体浓度：~5 mg/mL加入总体积 7.4% DMA 预混 ↓ 抗体 - 连接子偶联反应加入 5 倍摩尔当量含药连接子 DMA 溶液室温反应 1 h ↓ 产物：偶联后 ADC 中间体 本文引自《基于定点偶联技术的新型Nectin-4 抗体偶联药物开发》 本公众号相关文章 糖定点偶联专利 糖定点偶联ADC CDE 文章|双载荷抗体偶联药物研发进展和药学审评考虑 抗体偶联药物制剂开发的基本性质与核心研究方向 翻译稿|均相多载荷抗体药物偶联物（ADC）第一弹 均相多载荷抗体药物偶联物（ADC）第二弹 以CD79b为靶点抗体偶联药物的质量研究 ,后台私信获取全文 Ø如需转载本文，请在转载正文内添加本公众号二维码，感谢您的理解与配合。 Ø 本文仅为行业交流、学术探讨使用，不构成药品监管、药品注册、临床诊疗、投资决策等任何形式的专业建议。 Ø 文中数据、制度、案例等均来自公开资料整理，仅供参考，不保证绝对完整与最新。  Ø 本文仅代表作者个人观点，与任何机构无关，不代表官方立场。  Ø 如有内容侵权或异议，请联系后台及时处理。