Rho-associated kinases inhibitors(Beijing Puqi)

编者按  血栓与止血作为血液学研究的重要分支，不仅关系到血液疾病的基础科学理解，也直接影响心脑血管疾病及免疫性血小板减少症（ITP）等临床治疗策略。在第67届美国血液学会（ASH）年会上，血栓与止血领域亮点频出，多项前沿研究展示了从基础机制到临床转化的新进展。为帮助大家全面了解这些最新成果及其临床意义，《肿瘤瞭望-血液时讯》现场特邀该领域资深专家——加拿大多伦多大学倪合宇院士与河南省肿瘤医院（郑州大学附属肿瘤医院）周虎教授，就血栓与止血领域的重磅研究进展、潜在临床应用及中外合作机遇进行深入解读，全面呈现该领域的最新科学动态与发展前景。 《肿瘤瞭望-血液时讯》 01 随着ASH大会的召开，今年在血栓与止血领域，我们见证了很多令人兴奋的研究进展。作为基础研究领域的资深专家，您能否为我们解读一下，凝血机制等方面有哪些重大热点和突破，尤其是您认为最具里程碑意义的新发现？ 倪合宇院士 今年在血栓与止血领域涌现出诸多创新亮点，但目前难以预判哪项将对该疾病治疗产生更为深远的影响。值得一提的是，美国洛克菲勒大学Barry S. Coller博士团队研发的糖蛋白IIb/IIIa（整合素αIIbβ3）抑制剂Zalunfiban已完成III期临床试验，相关研究结果于11月10日发表于《NEJM Evidence》。该工作可能重塑IIb/IIIa拮抗剂的整体格局，并对心脑血管疾病治疗产生重大影响。 此外，其团队在本次ASH大会上展示的另一项研究（Publication Number: 3016）表明，蛋白质二硫键异构酶（PDI）可与整合素αIIbβ3相互作用，此发现有望为新型药物研发提供关键信息。该研究方向与我们本次ASH报告内容具有一定相似性，但采用的方法及未来药物研发路径可能存在显著差异。我们发现，整合素β3 PSI（plexin-semaphorin-integrin）结构域通过二硫键的相互转换，有望在未来药物研发中发挥重要作用。具体而言，此类药物不仅能抑制血小板聚集，还可阻断血小板与凝血系统的相互作用，实现双重效应。 与Barry S. Coller博士团队的研究相比，我们的工作开展得更早一些，为未来药物研发提供了新的方向。因为血小板聚集和凝血系统是血栓形成的两大核心支柱，若能够同时对二者进行干预，那么未来有望为血栓性疾病的治疗带来超出预期的积极效果。因此，该研究方向值得持续关注与期待，我们也将进一步完善相关研究。 《肿瘤瞭望-血液时讯》 02 ITP治疗领域近年来取得了显著进展，尤其是在复发/难治性患者的管理上。今年的ASH大会也展示了许多前沿成果。能否请您谈谈，今年大会在ITP治疗策略上有哪些新的突破？特别是在评估疗效和治疗方案方面，是否有新的进展值得我们关注？ 周虎教授 近年来，ITP领域新药研发进展迅速。本届ASH年会上，多项新药研究公布了最新临床数据：（1）由和黄医药研发的SYK抑制剂在完成关键Ⅲ期研究后，其扩展研究的长期随访结果由中国医学科学院血液病医院（中国医学科学院血液学研究所）杨仁池教授进行口头报告；（2）针对共价BTK抑制剂的LUNA 3研究长期随访结果亦在本届会议上发布，该药物Ⅲ期研究的主要结果已于今年发表于《Blood》，主要疗效终点显示64%的患者获得缓解；（3）Fc单抗（Fc片段融合蛋白）的研究结果以壁报形式展示，尽管长期完全缓解率相对较低（长期随访约5%，Ⅲ期研究中为22%），但其主要疗效终点及长期随访数据均达到阳性标准。 除上述临床研究外，国内团队在机制探索和基础研究方面亦取得了多项进展。例如，张晓辉教授团队围绕JAK1抑制剂开展了系统的作用机制研究；倪合宇教授团队及我们团队也在ITP相关基础与转化研究方面持续推进。其中，我们团队关于ROCK抑制剂治疗ITP机制的研究荣获本届ASH大会摘要成就奖（Abstract Achievement Award），研究表明其通过调控细胞毒性T细胞（CTL）相关信号通路发挥作用。此外，针对PI3Kδ抑制剂的相关研究亦在同步开展中。总体而言，当前ITP研究领域呈现百花齐放的发展态势，多种机制新型药物及深入的机制探索为患者带来了更多潜在治疗选择与治愈机会。 《肿瘤瞭望-血液时讯》 03 您团队的研究揭示了整合素β3 PSI结构域及其L33P多态性在血小板促凝过程中的作用。请问这一发现如何改变我们对血栓形成机制的理解？未来是否有可能将这一基础研究成果转化为抗栓治疗策略？ 倪合宇院士 如前所述，本研究的核心价值在于同时作用于血栓形成的两大支柱——血小板聚集与凝血系统。对这两个过程的同步干预有望从根本上阻断血栓形成，为脑梗死、心肌梗死等心脑血管疾病患者提供具有突破潜力的治疗策略。因此，本研究兼具重要的科学价值与临床转化意义，未来我们也期望发表于顶级医学期刊。 需要指出的是，Barry S. Coller 博士此前关于整合素 αIIbβ3 抑制剂的研究，其核心理念与其在本次大会所展示的研究以及我们研究的科学概念并不完全一致。我们关注的是整合素β3 PSI结构域中的 L33P 遗传多态性，该多态性在欧洲人群中较为常见。 既往研究显示，整合素β3 PSI 结构域中第 33 位氨基酸由亮氨酸变为脯氨酸（L33P）与心脑血管事件风险升高相关，但其机制尚不明确。我们的研究发现，该多态性可同时增强血小板功能以及凝血系统功能，即促进血栓形成的两大支柱作用，这可能是携带该多态性个体心脑血管疾病高发的重要原因。 该多态性在欧洲，尤其是北欧人群中的高频分布，可能与历史生存环境中对高效止血能力的自然选择压力相关。尽管该多态性在华人群体中较为罕见，但我们进一步发现，整合素PSI与凝血系统之间可能存在相互作用，这一发现在不同人群中均具有重要意义。换言之，该机制对于未来同时针对血栓形成两大支柱的新型药物研发具有重要价值，有望起到“一箭双雕”的作用。 《肿瘤瞭望-血液时讯》 04 您在本次报告中提到，林普利塞在复发/难治性成人ITP患者中显示了具有临床意义的血小板应答。您如何看待PI3Kδ抑制剂在ITP治疗中的潜力？从作用机制到临床应用，未来的研究重点和挑战又有哪些？ 周虎教授 PI3Kδ抑制剂最初获批用于淋巴瘤，其作用机制独特。一方面，作为BTK的上游，PI3Kδ可抑制BTK信号通路。而BTK通路激活主要诱导Ⅱb/Ⅲa特异性抗体产生，并通过脾脏巨噬细胞的Fcγ受体依赖性机制破坏血小板。目前该路径已有多种成熟治疗手段，包括糖皮质激素、丙种球蛋白、利妥昔单抗、SYK抑制剂以及BTK抑制剂等。其中BTK抑制剂（如rilzabrutinib）也已于2025年8月29日获美国FDA批准，用于治疗复发/难治性ITP患者。 另一方面，PI3Kδ还可调控AKT信号通路。既往研究表明，AKT信号通路的激活可促进B细胞分化并产生IbIX特异性抗体，该抗体可与血小板表面IbIX抗原结合，进而通过肝脏Kupffer细胞的Fcγ受体依赖性吞噬作用导致血小板破坏。而目前针对这一信号通路尚缺乏高效的特异性药物。因此，PI3Kδ抑制剂通过同时阻断BTK和AKT两条关键信号通路，有望在以IbIX抗体为主的难治性ITP患者中实现突破性进展。 《肿瘤瞭望-血液时讯》 05 在这项II期试验中，不同预处理患者亚组（如曾使用TPO-RAs或rhTPO）显示了不同应答率和持续应答率。周教授，您认为哪些因素可能影响ITP患者对PI3Kδ抑制剂的疗效？在临床实践中，我们如何优化患者选择和疗效监测？ 周虎教授 该研究目前尚未完成，总共筛选了27名患者，其中22名患者已入组。在入组的患者中，10名已完成12周的主要随访，8名已完成24周随访。对于这18例患者的主要疗效终点分析，我们观察到66.67%（12例）患者达到了主要疗效终点。 值得强调的是，本研究入组患者均为常规治疗[包括糖皮质激素、丙种球蛋白、促血小板生成素受体激动剂（TPO-RA）及BTK抑制剂等]无效或复发的ITP人群。在这一高度难治的患者队列中，仍有超过三分之二的患者获得疗效应答，该初步结果令人鼓舞。此外，入组患者中超过半数既往接受TPO-RA治疗无效，使用PI3Kδ抑制剂后仍表现出较好疗效，进一步提示该药物可能在TPO-RA失败后的难治性ITP中具有潜在价值。我们期待后续完成全部入组及长期随访后，获得更完整的疗效及安全性数据，以进一步验证其临床应用前景。 《肿瘤瞭望-血液时讯》 06 近年来，中国专家在出凝血疾病领域取得了诸多重要成果，您对此也有关注。未来在中外合作方面，您认为在哪些领域可以进一步加强，以共同推动全球治疗标准的进步？ 倪合宇院士 在ITP领域，国内学者开展了多项开拓性工作，包括周虎教授，齐鲁医院侯明教授、彭军教授，安徽医科大学第一附属医院曾庆曙教授，以及安徽医科大学第二附属医院陶莉莉教授等。我们最早在动物模型中发现，存在糖蛋白Ibα（GPIbα）自身抗体的ITP患者，对一线治疗（包括糖皮质激素和丙种球蛋白）的应答较差。该发现最初由陶丽丽教授和曾庆曙教授在临床人群中验证。随后，侯明教授、彭军教授在全国大样本队列研究中证实了这一现象。周虎教授在河南及其他国内中心的研究也得出一致结论。 进一步的机制研究表明，抗GP Ibα抗体可导致血小板脱唾液酸化，使血小板主要在肝脏而非脾脏被清除。这解释了该类患者脾切术疗效有限及一线治疗反应不佳的临床特征，同时提示靶向特定受体的药物可能对其有效。国内研究成果也相继得到了德国、法国、西班牙及加拿大等国际团队的验证。尽管目前尚未形成国际指南，但全球ITP顶级专家正在逐步形成共识，即抗GP Ibα或部分抗IIb/IIIa抗体导致的血小板脱唾液酸化，是影响治疗反应的重要因素。这为未来难治性ITP的治疗提供了新的策略和潜在突破口。 此外，在国际合作方面，随着我国综合国力提升，深化双向开放尤为重要。一方面，继续积极引进发达国家先进理念、技术和人才，邀请国际知名学者来华交流、分享，促进前沿思想与产业对接；另一方面，通过“一带一路”等倡议，向沿线国家辐射优质科技产品与合作模式。针对我国基础研究（0到1）相对薄弱而规模化转化（1到N）具有显著优势的现状，加强国际合作基金支持、人才引进及学术交流，将有效弥补短板，助力我国在全球科技与产业格局中占据引领地位。 专家简介 倪合宇 院士 加拿大多伦多大学 多伦多大学医学系、生理系和病理生物系三个系的正教授 加拿大国家血液署资深科学家 多伦多大学附属圣迈克尔医院“血液学-肿瘤-免疫病”平台中心主任 CCOA Therapeutics创始人 因其在血栓与出血疾病，血小板减少性紫癜，胎儿和新生儿免疫性血小板减少性紫癜（FNAIT）等领域的研究中取得了多个突破性研究成果并对医学科学做出的杰出贡献，2020年获选加拿大医学科学院院士。 周虎 教授 河南省肿瘤医院(郑州大学附属肿瘤医院) 河南省肿瘤医院(郑州大学附属肿瘤医院)主任医师、教授、博士生导师 医学博士，河南省肿瘤医院血液科副主任 河南省肿瘤医院贫血、止血血栓病区主任 河南省止血血栓诊断研究工程中心主任 河南省卫健委领军人才 中华医学会血液学分会止血与血栓学组委员 中国老年医学会血液学分会委员及血小板学组委员 中国生理学会止血血栓专委会委员 中国血液病专科联盟再障协作组副组长 中国罕见病联盟血友病专委会常委 河南省血液学专业委员会止血与血栓学组副主委 《血栓与止血学》、《Hematology》、《BLOOD》中文版杂志编委 主持国家自然科学基金面上项目2项 主编参编参译专著《血液分册/内科疑难病例系列丛书》《威廉姆斯血液学第十版》等7部 作为PI或Leading Pl主导或参与注册临床研究98项 作为通讯(共同通讯)或第一作者(共同第一)在ITH(影响因子17分)，lancethaematology(影响因子30分)Britishjournal ofhametology等近5年共发表论文55篇 （来源：《肿瘤瞭望–血液时讯》编辑部） 温馨提示 声明：本文仅供医疗卫生专业人士了解最新医药资讯参考使用，不代表本平台观点。该信息不能以任何方式取代专业的医疗指导，也不应被视为诊疗建议，如果该信息被用于资讯以外的目的，本站及作者不承担相关责任。

撰文 | 觉主在路上 子宫内膜异位症、多囊卵巢综合征和不孕症等生殖系统疾病已影响全球超过10%的人口，但该领域的创新疗法开发长期滞后【1】。目前广泛采用的辅助生殖技术是体外受精（in vitro fertilization, IVF），但它依赖于大剂量促性腺激素的施用，使女性面临卵巢过度刺激综合征（OHSS）的严重安全风险。作为一种更温和、痛苦更小的替代方案，体外成熟（in vitro maturation, IVM）技术仅需极少量的激素方案，能显著降低OHSS风险。然而，传统IVM技术由于将卵子置于“静态”的培养基中，缺乏卵子与卵巢体细胞之间必要的动态信号交流，导致其胚胎发育率一直处于较低水平，限制其在临床当中的应用【2,3】。虽然研究表明利用原代颗粒细胞进行共培养可以改善现状，但原代颗粒细胞（granulosa cells）来源于人体组织，属于有限且不可再生的资源，使得在大规模临床实践中使用变得困难【4】。 近日，来自美国生物技术公司 Gameto Inc. 的Christian C. Kramme团队在Cell Stem Cell上发表了Development of human induced pluripotent stem cell-derived ovarian support cells as a clinical-grade product for in vitro fertilization。研究通过调控 NR5A1、RUNX2 和 GATA4关键转录因子，将人诱导多能干细胞（human induced pluripotent stem cells, hiPSCs）高效分化为卵巢支持细胞（ovarian support cells, OSCs），并开发出临床级产品 Fertilo。Fertilo 通过“旁分泌”机制重建了动态卵巢微环境，在 OSC-IVM 共培养中显著提升了成熟率，使卵子转录组特征高度趋近体内自然发育状态。作为全球首个进入美国三期临床试验的 hiPSC 衍生产品，Fertilo 在首次人体研究中表现卓越，将每治疗周期的持续妊娠率从传统 IVM 的 20% 提升至 41%，并已促成多名健康婴儿诞生，且未报告任何与产品相关的严重不良事件。该研究首次展示了 hiPSC 衍生产品从端到端制造、质量控制到临床治疗的完整闭环。 床前转录因子定向分化技术建立和验证 研究人员首先通过在 hiPSC 中引入 NR5A1、RUNX2 和 GATA4 这三种关键转录因子的诱导表达系统，构建了分化原型。利用强力霉素（Doxycycline）、 WNT 激活剂和 ROCK 抑制剂进行为期 5 天的分化，分化后的 OSCs 表现出明显的颗粒细胞样形态，并稳定表达 CD82 和 FOXL2 标志物。为了确保分化OSCs的纯度，研究团队通过利用Barcode-seq 技术和基于 SNP 的 PGT-A检测对培养系统进行了异体细胞残留验证。结果显示在成熟卵子和胚胎中均未发现任何 OSC 遗传物质残留，从基因组层面消除了细胞转移风险。 临床级工艺优化与质量控制转化 这一阶段的核心是从研究级（RUO）原材料向临床级（CG）制造工艺的系统性升级。研究人员采用了Design of Experiments（DOE）实验设计方法系统评估了培养基成分、诱导参数和培养基质对分化效率的影响，发现基质选择对关键标志物FOXL2的表达具有决定性影响。通过对比分析，确定层粘连蛋白-521（Laminin-521）为最佳分化底物，它在提升细胞活力、增加 OSC 纯度（CD82+细胞）以及将残留多能性标志物（如 TRA-1-60）降至最低方面显著优于传统的 Matrigel。这种优化确保了生产过程的高可重复性和一致性，为符合 GMP 规范的标准化制造奠定了基础。 为了获得稳定的起始材料，研究团队建立了临床级 hiPSC 细胞库。通过选用来自合规供体的 hiPSC 系（VCT-37-F35），并在 GMP 条件下进行重编程，从 9 个候选克隆中筛选出在类固醇合成能力、OSC 标志物表达及转录组特征上表现最均衡的克隆（2-D10）做为起始克隆。 此外，团队制定了详尽的分析检测计划，以满足监管机构对临床产品的要求，如残留 hiPSC 监测：利用高灵敏度的 RT-qPCR 技术检测多能性标志物（OCT4 和 NANOG），其标准被设定为残留比例必须低于 0.1%；基因组完整性监测：通过全基因组测序监测生产过程中的遗传变异，确保细胞无核型异常或致癌突变；严格的效力（potency）放行标准：研究开发了小鼠卵子成熟测定方法（murine oocyte maturation assay，MOMA）作为产品的效力放行标准，将小鼠的未成熟卵子与待测批次的 Fertilo 共培养 18 小时，评估受精后的囊胚形成率（blastocysts formation rate, BFR）。只有当 BFR 达到 ≥80% 时，该批次产品才被认为具备临床效力。 最后，整体开发的制造工艺能够展现良好的可扩展性，并在定义的存储条件下可保持长达 12 个月的效力，并能承受 7 天的物流运输过程。 首次人体临床试验与结果评估 在完成临床级产品准备后，研究人员开展了Fertilo首次人体临床实验研究，该临床研究是一项多中心、纵向队列研究，旨在严谨评估其安全性和有效性。研究分为两个阶段，受试者均为 18 至 37 岁、具有正常卵巢储备（AMH > 2 ng/mL）的原发性不孕女性。患者接受 3-4 天的极低剂量激素刺激，随后抽取不成熟的卵子，将其与 100,000 个 Fertilo 细胞共培养 30 小时进行体外成熟。 第一阶段是对 20 名患者进行的单臂观察性研究，主要用于验证安全性并确立临床成功指标。结果显示，Fertilo 辅助卵子MII成熟率为68%，受精率为84%，持续临床妊娠率达到53%，并成功促成了全球首例健康女婴的诞生（出生体重3255克，Apgar评分为9/9）。 第二阶段则扩展为包含 20 名患者的 1:1 随机对照试验，将 Fertilo 辅助的 OSC-IVM 与传统“静态”IVM 进行直接对比，每组各10人，以提供疗效衡量标准并指导未来的三期试验设计。结果显示，Fertilo 显著优于传统组：MII 卵子成熟率提升至 70%（传统组为 52%），高质量囊胚率翻倍（14% vs. 7%），而整倍体囊胚形成率是传统组的五倍（10% vs. 2%）。尤为关键的是，Fertilo 组每治疗周期的持续妊娠率达到 41%，远高于传统组的 20%，且该组中有 80%（8/10）的患者获得了可供移植的整倍体胚胎，远高于传统组的30%（3/10）。安全性方面，研究未报告任何产品相关的严重不良事件，且胚胎中无异体细胞遗传物质残留，从基因组层面确保了临床安全性。截至研究发布，该技术已成功促成8名健康婴儿诞生，且未报告任何与产品相关的严重不良事件。 总的来说，本研究通过标准化制造工艺成功开发了首个 hiPSC 衍生卵巢支持细胞产品 Fertilo，并经首次人体临床试验证实其能显著提升不孕症患者的卵子成熟质量与持续妊娠率，为辅助生殖提供了更高效的方案。 原文链接： https://www.cell.com/cell-stem-cell/fulltext/S1934-5909(25)00454-0 制版人： 十一 参考文献 [1] Smith, K. (2023). Women’s health research lacks funding – in a series of charts. Nature 617, 28–29. [2] Marchante, M., Barrachina, F., Piechota, S., Fernandez-Gonza′ lez, M., Giovannini, A., Smith, T., Kats, S., Paulsen, B., Gonza′ lez, E., Calvente, V., et al. (2024). Donor side effects experienced under minimal controlled ovarian stimulation with in vitro maturation vs. conventional controlled ovarian stimulation for in vitro fertilization treatment. F. S. Sci. 5, 242–251. [3] Vuong, L.N., Pham, T.D., Ho, T.M., and De Vos, M. (2023). Outcomes of clinical in vitro maturation programs for treating infertility in hyper responders: a systematic review. Fertil. Steril. 119, 540–549. [4] Jahromi, B.N., Mosallanezhad, Z., Matloob, N., Davari, M., and Ghobadifar, M.A. (2015). The potential role of granulosa cells in the maturation rate of immature human oocytes and embryo development: A coculture study. Clin. Exp. Reprod. Med. 42, 111–117. 学术合作组织 （*排名不分先后） 战略合作伙伴 （*排名不分先后） · 转载须知 【原创文章】BioArt原创文章，欢迎个人转发分享，未经允许禁止转载，所刊登的所有作品的著作权均为BioArt所拥有。BioArt保留所有法定权利，违者必究。 BioArt Med Plants 人才招聘 近期直播推荐 点击主页推荐活动 关注更多最新活动！