MT-101

Summary 嵌合抗原受体(CAR)-T细胞疗法已经改变了血液恶性肿瘤患者的治疗结局，但其应用受到劳动密集型的制造过程、有限的生产能力和可变的临床性能的限制。体内CAR-T细胞工程，即在患者体内直接生成CAR-T细胞，旨在通过消除对体外细胞处理和复杂物流的需求，并改善临床性能来克服这些挑战。病毒学、RNA药物和纳米技术的最新进展推动了该方法的彻底革新，该方法使用靶向递送系统，如慢病毒载体和脂质纳米颗粒，将编码CAR的遗传物质导入内源性T细胞。早期临床研究已显示出高效的转导、持续的CAR表达以及抗肿瘤活性的初步迹象，确立了概念验证。本综述探讨了基础技术——包括通过脂质纳米颗粒递送的RNA和工程化病毒载体——并讨论了它们如何被调整以开发更广泛适用、可扩展、安全有效的CAR-T细胞疗法。通过消除体外操作和化疗预处理的需要，该策略可能使CAR-T细胞疗法不仅更广泛地应用于血癌，也能应用于自身免疫性疾病，对此体外CAR-T细胞疗法已显示出巨大潜力，例如系统性红斑狼疮。 01 引言 免疫疗法在过去三十年中经历了重大变革，这得益于单克隆抗体、抗体-药物偶联物、细胞因子、免疫细胞衔接器、DNA疫苗以及最近基于RNA的疫苗和工程化T细胞疗法的进步。在这些模式中，自体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞疗法——即收集患者自身的T细胞，对其进行基因修饰以表达CAR，然后回输——因其效力而脱颖而出，在B细胞恶性肿瘤中显示出治愈潜力。尽管期望很高，但自体或同种异体CAR-T细胞疗法向更广泛适应症和患者群体的扩展比预期要慢。已发现多重障碍，包括制造和物流的复杂性、有限的生产能力以及对基于化疗的淋巴细胞清除预处理的要求，所有这些都限制了可及性和适用性。因此，该领域正处于另一个转折点，需要在递送和工程技术方面进行创新，以克服这些限制并完全实现CAR-T细胞疗法乃至整个免疫疗法的潜力。 在本综述中，首先讨论从传统体外工程化CAR-T细胞产品开发中获得的关键见解，这些见解推动了将体内CAR技术作为替代方法进行发展的努力。这种新颖的策略消除了细胞制造和相关限制可及性的物流，并避免了基于化疗的淋巴细胞清除预处理，从而提供了释放CAR技术全部潜力的机会，包括扩展到安全性要求更高的更大适应症。然后，回顾了领先的体内CAR平台，以及支持其开发的临床前或临床概念验证。最后，讨论了潜在的局限性、将这些疗法推向临床应用的策略，以及这一进展如何可能推动利用多样化机制和有效载荷向体内免疫细胞工程的更广泛转变。 ·体外病毒工程化CAR-T细胞 o 1987–1993: 首个CAR设计 o 1998–2002: 第二代CAR o 2010, 2011: 首个临床概念验证 o 2017: 首批CAR-T细胞产品获批 ·基于RNA和LNP的产品 o 1978: 首批基于脂质体的RNA制剂 o 1989, 1995: 通过疫苗进行体内mRNA递送 o 2000: pH敏感性离子化脂质 o 2005, 2009, 2018: 核苷修饰的mRNA疫苗和CAR ·体内病毒CAR o 2017/2018: 小鼠概念验证 o 2021, 2023, 2024: NHP概念验证(B细胞清除) o 2024: 首批临床研究获批并患者给药 ·体内LNP-RNA CAR o 2020, 2022: 小鼠概念验证 o 2024: NHP概念验证(B细胞清除) o 2025: 启动临床评估 图1. 时间线：导致体内CAR技术临床转化的重大发现和里程碑。 体外工程嵌合抗原受体(CAR)-T细胞产品的开发是医学上的一个重要里程碑，但也揭示了该平台的可及性和临床性能局限性(左上)。旨在克服这些限制的体内CAR技术的出现，是由几个不同领域的进展推动的：病毒学、RNA治疗学和纳米医学(左下)。在这些领域的交叉点出现了两种主要的体内CAR平台，目前已转化为临床应用：工程化病毒(慢病毒或γ -逆转录病毒)载体，导致有效载荷整合到基因组中(右上)；脂质纳米颗粒(LNPs)装载RNA，导致瞬时有效载荷表达(右下)。 02 从体外工程化CAR-T细胞中汲取的经验教训 迄今为止，已有多种使用逆转录病毒或慢病毒载体靶向CD19或B细胞成熟抗原(BCMA)工程化的自体CAR-T细胞产品获批用于治疗多种B细胞恶性肿瘤，包括B细胞急性淋巴细胞白血病、非霍奇金淋巴瘤和多发性骨髓瘤。此外，数百个CAR-T细胞项目处于不同的开发阶段，全球有超过1000项临床试验正在进行中。这些包括现成的同种异体CAR-T细胞(allo-CAR-T细胞)产品，这些产品在肿瘤学中尚未显示出与自体CAR-T细胞相当的临床性能，但可能在自身免疫性疾病中找到应用。对已获批CAR-T细胞的详细评估——包括反向转化分析以理解毒性和治疗抵抗的机制——为指导下一代基于细胞的和体内的CAR疗法的设计提供了关键经验(Box1)。 Box 1. 从体外病毒工程CAR-T细胞产品的发展中吸取的关键教训 优势 嵌合抗原受体(CAR)-T细胞疗法是一种具有治疗潜力的有效干预手段：自体CAR-T细胞产品在部分B细胞恶性肿瘤患者中获得持久的应答，并可能诱导涉及B细胞的自身免疫“免疫重置”。持久的反应可以在没有长期靶向毒性和持续存在的CAR-T细胞的情况下实现。治疗相关不良事件的分级和管理已经很好地理解和标准化了。 限制 由于有限的产物T细胞适应性、有害的肿瘤特征和/或肿瘤克隆逃避，许多癌症患者没有获得持久的临床益处。一些患者出现严重的毒性，可能包括免疫炎症不良事件(细胞因子释放综合征(CRS)、免疫效应细胞相关神经毒性(ICANS)、免疫效应细胞相关嗜血淋巴组织细胞增生样综合征(IEC-HS))和调节相关骨髓毒性。从获取的角度来看，由于细胞制造的可扩展性和物流，以及对认证中心的限制，只有一小部分(约20%)符合条件的患者可以获得商业产品。整合病毒载体的使用和对化疗条件的依赖也可能影响适用性。 未来的机会 展望未来，该领域的重点是简化生产和物流，以改善患者的可及性，特别强调现成的格式。在短期内，CAR-T细胞疗法在血液系统恶性肿瘤中的作用有可能扩大，不仅限于复发和难治性疾病，还包括一线、最近诊断出的高风险患者，以及非B细胞血癌。在实体瘤中，努力的目标是开发具有更大疗效和缓解持久性的产品。除肿瘤学外，人们对将CAR技术应用于非肿瘤学适应症的兴趣日益浓厚，包括自身免疫性疾病、再生医学和传染病。 2.1 CAR-T细胞疗法作为一种变革性模式 尽管自体CAR-T细胞主要针对癌症开发，但新出现的证据支持其在治疗更广泛疾病方面的潜力，包括自身免疫性疾病。在纤维化和自身免疫方面的临床前研究，以及涵盖自身免疫性疾病适应症(包括狼疮性肾炎、肌炎和系统性硬化症)的多个临床病例研究，已显示出持久的、无需药物的缓解、自身反应性记忆B细胞的消融以及疾病相关生物标志物的减少。这种被称为“免疫重置”的机制，模拟了高剂量化疗后通过自体干细胞移植进行挽救以治疗严重自身免疫性疾病的效果。本质上，这种重置导致包含致病性自身反应性免疫细胞的免疫库被功能正常的免疫系统所取代，从而实现完全和持续的缓解。 来自体外工程CAR-T细胞产品的大量临床数据，包括超过35,000名接受商业产品治疗的癌症患者，导致了治疗相关不良事件的表征和分级和管理的标准化，如细胞因子释放综合征(CRS)，免疫效应细胞相关的血细胞吞噬性淋巴组织细胞增多症样综合征(IEC-HS)，免疫效应细胞相关的神经毒性综合征(ICANS)，中性粒细胞减少和B细胞发育不全与低γ -球蛋白血症有关。总之，这些知识可以用来促进下一代CAR-T细胞产品的临床开发，旨在大规模扩大这种治疗方式的足迹。 2.2可及性和临床性能限制 尽管取得了这些成功，但成本、可扩展性和可行性问题严重限制了商业体外工程化CAR-T细胞产品的可及性，并且也可能阻碍此类产品在非肿瘤和更早期癌症适应症中的更广泛应用。事实上，在美国，大约五分之四符合条件的淋巴瘤患者目前无法获得商业CAR-T细胞产品。除了可扩展性之外，CAR-T细胞产品在临床实践或开发中还存在其他一些注意事项，这些包括需要使用基于化疗的淋巴细胞清除预处理的风险特征，在肿瘤学实践中通常包括DNA烷化剂如环磷酰胺，加上嘌呤类似物氟达拉滨。这些药物在由过度CAR-T细胞活性引起的一系列其他不良事件之外增加了众所周知的毒性，这可能需要在部分患者中进行密集的住院管理，从而将该治疗模式限制在经认证的治疗中心。总的来说，所有这些因素都导致了可及性挑战，并可能限制在自身免疫和再生医学等适应症中的更广泛应用。 此外，肿瘤学中的疗效限制源于影响部分患者的复杂治疗抵抗机制，这些机制包括免疫细胞适应性差、肿瘤内在因素，如免疫抑制微环境，以及由靶抗原低表达或异质性表达驱动的免疫逃逸。系统地解决这些因素对于将CAR-T细胞的益处扩展到更广泛的血液恶性肿瘤患者群体以及在实体瘤中实现相当的疗效至关重要，这是一个雄心勃勃的目标，可能需要新的方法，例如免疫系统的多模式体内工程化。 03 体内细胞疗法：历史视角 体内CAR-T细胞疗法正在成为一种可扩展的替代方案，避免了体外细胞操作和淋巴细胞清除预处理，该方法的主要机制特征是利用现成的载体或制剂直接原位CAR工程化免疫细胞(Box 2)。这些体内工程化的免疫细胞可以是T细胞、巨噬细胞、自然杀伤细胞和/或其他免疫细胞，它们已经分化为效应细胞，甚至是具有分化为免疫效应细胞强大能力的造血干细胞(HSC)。该方法有望将CAR分子的变革性效力与这些现成的无细胞方法的可扩展性结合起来，从而可能解决传统疗法在可及性甚至某些临床性能方面的限制。 Box 2. 体外工程CAR-T细胞产品和体内CAR-T治疗之间的机制差异 体外病毒工程CAR-T细胞 嵌合抗原受体(CAR)-T细胞向效应细胞的激活、扩增和分化需要淋巴耗竭条件调节。这一过程主要由分化程度较低的T细胞驱动，如干细胞样记忆T细胞，它们具有最高的扩增和分化能力。在治疗后的7-14天内，分化效应细胞直接或通过其他免疫机制参与并消灭靶细胞。在一部分患者中，永久性工程化的CAR-T细胞可能表现出扩大或持续加剧，也会吞噬巨噬细胞，并导致细胞因子释放综合征(CRS)、免疫效应细胞相关神经毒性综合征(ICANS)和免疫效应细胞相关嗜血淋巴组织细胞增生样综合征(IEC-HS)。此外，一些患者可能会经历非常持久的B细胞发育不全和低γ球蛋白血症，需要静脉注射免疫球蛋白治疗以预防感染。该平台的一个版本包含mRNA而不是积分载体作为有效载荷，导致短暂的CAR表达。 体内CAR治疗 在输注含有CAR表达载体的病毒载体或脂质纳米颗粒(LNP)制剂后，免疫细胞(包括已经分化的效应细胞)被迅速改造，导致微环境中的靶细胞接合和根除。由于需要预先存在的免疫细胞，淋巴耗竭条件作用与这种治疗方式不相容。一些载体被改造以使细胞摄取和选择性或调节改造免疫细胞的活性。与慢病毒载体相比，CAR mRNA格式被设计为瞬时工作，因此通过设计限制了靶上活性的持续时间。然而，它们可能需要大量优化或重新给药以达到足够高的药理活性。相比之下，基于病毒的平台产生具有永久整合的CAR有效载荷的T细胞，根据抗原的不同，这些有效载荷可能在体内继续扩展和/或持续存在。 体内CAR-T细胞疗法出现在纳米技术、RNA药物、病毒学和CAR疗法等多个领域的交叉点(图1)，引起了生物制药界的极大兴趣，已有几家公司进入临床阶段(表1和表2)。首次成功原位编程CAR-T细胞的临床前报告分别来自Fred Hutchison癌症中心的Matthias Stephan团队和Paul-Ehrlich研究所的Christian Buchholz团队，Fred Hutchinson癌症中心的团队开发了可生物降解的携带DNA的聚合物纳米颗粒，该纳米颗粒靶向小鼠T细胞上的CD3以递送治疗有效载荷——一个编码CD19特异性CAR的piggyBac转座子系统。在急性淋巴细胞白血病小鼠模型中，静脉输注的抗CD19 CAR纳米颗粒的表现与过继性T细胞疗法一样好，同时避免了体外细胞操作的需要。Paul-Ehrlich研究所的团队早在2012年就描述了一种人CD8靶向的慢病毒载体，并建议这一特性对于将抗原受体的体内基因递送至细胞毒性T细胞至关重要。在包装了CD19特异性CAR后，临床前概念验证包括在通过输注人外周血单核细胞或HSC生成的人源化小鼠模型中进行T细胞工程化，伴随着B细胞清除和细胞因子产生。 然而，临床转化似乎还很遥远，主要有三个原因： ·首先，这些体内编程的突破并未立即在风险投资家和生物制药界中广为人知。 ·其次，诺华和Kite刚刚获得了美国食品药品监督管理局(FDA)对首批CAR-T细胞疗法(Kymriah和Yescarta)的批准，Kite Pharma被吉利德以119亿美元收购，增强了投资者对体外工程化CAR-T细胞产品的信心。 ·最后，人们曾对现成的同种异体细胞技术能够迅速转化为具有更广泛适用性的第二波商业产品寄予厚望。与开发可注射的多组分纳米药物(当时大多数生物制药公司不熟悉的领域)的挑战相比，在临床概念验证和产品批准之后，体外T细胞工程技术似乎风险较小，是通往市场和财务回报的更容易途径。 此外，围绕CAR-T细胞技术的知识产权法律纠纷以及纳米颗粒药物递送系统的学术争议进一步复杂化了体内CAR-T细胞技术的转化。尽管如此，2018年7月，首家专注于体内CAR-T细胞疗法的生物技术公司Tidal Therapeutics成立，其他公司迅速跟进——Unoja Biopharma、Orna Therapeutics和Sana Biotechnology于2019年成立，Abintus Bio于2020年成立，Capstan Therapeutics于2021年成立——为该领域的快速增长、创新和投资奠定了基础，目前有超过30家公司在此领域运营。2021年，赛诺菲收购了Tidal Therapeutics，目前正在开发三个用于肿瘤和炎症性疾病的体内CAR-T细胞项目。最近，阿斯利康收购了EsoBiotec，后者正在开发用于多发性骨髓瘤的体内病毒CAR疗法，而艾伯维收购了Capstan，后者正在开发基于RNA-脂质纳米颗粒(RNA-LNP)的用于自身免疫和其他适应症的体内CAR产品。 体内免疫工程：机制背景 体内CAR工程能够快速生成CAR修饰的免疫细胞，并使它们与靶细胞接触，无论是在修饰发生的同一微环境内，还是在CAR-T细胞运输后的远处组织中。因此，淋巴细胞清除预处理——在细胞产品递送后促进CAR-T细胞扩增的关键——不仅不必要，而且与体内CAR-T细胞治疗不兼容。相反，除了增加可及性和扩大适用性之外，避免化疗预处理为更有效地利用更广泛的免疫机制(需要增强临床疗效)开辟了途径。然而，淋巴细胞清除预处理在肿瘤学中对CAR-T细胞疗法的一些有益效果，例如对肿瘤微环境(TME)或先天免疫的免疫调节作用，可能需要解决，例如通过共同递送生物反应调节剂如γ链受体细胞因子。无论如何，为了在最小化病原体细胞或体内其他细胞摄取的同时成功重编程所需的免疫细胞，用于体内CAR-T细胞治疗的载体或制剂需要具有显著的组织和细胞选择性。进入临床开发的两个主要平台在其有效载荷和递送策略上有所不同：具有整合有效载荷的工程化病毒载体；以及携带短暂表达RNA的LNP。 ·使用整合有效载荷的体内CAR技术产生的免疫细胞群体可以根据抗原的存在和负荷自我调整其扩增和持久性，这在需要更高效力以实现临床疗效的适应症中可能是一个优势。 ·依赖短暂表达的非整合有效载荷的技术提供了通过调节剂量方案相对独立于抗原负荷来控制暴露(调高或调低CAR工程化免疫细胞的数量和持久性)的机会，这在安全性要求较高的适应症中可能是一个优势。 下面根据其有效载荷是否整合，描述了主要的体内CAR治疗平台和进入临床阶段的领先候选产品(表1和表2以及图2和图3)。此外，概述了在将体内CAR技术从临床前转化为临床应用过程中的具体挑战，并讨论了这些挑战如何与传统的体外CAR-T细胞疗法所面临的挑战相比较。 图2. 主要的体内CAR平台，重点是工程载体和有效载荷。 a,b，病毒工程载体(慢病毒或逆转录病毒)。一种重靶向方法，其中病毒包膜被T细胞特异性结合物修饰，使T细胞和融合元件能够选择性摄取，以促进有效载荷(嵌合抗原受体(CAR)表达载体)的细胞质递送(图a)。病毒有效载荷的结构，通常包括表达CAR的开放阅读框(ORF)，其调控元件与传统的体外工程CAR-T细胞产品中使用的元件相似(图b)。开发基于病毒的体内CAR-T细胞平台的公司包括Interius biotheraptics、Umoja Biopharma、Genocury、EsoBiotec、Sana Biotechnology和Kelonia Therapeutics。c,d，脂质纳米颗粒(LNP)-RNA工程载体。LNPs由脂质组成，包括一种可电离的脂质，可促进RNA有效载荷从内溶酶体释放到细胞质中。靶向治疗可以使用tropic脂质(Myeloid Therapeutics, Carisma Therapeutics, Orna Therapeutics)或抗体衍生结合物(Capstan Therapeutics, Sanofi)来实现。正在研究的两类RNA格式：通过改进非翻译区(UTR)、密码子优化和使用N1 -甲基伪脲等修饰，为高水平CAR表达优化的线性mRNA(图c)；环状RNA旨在通过防止早期翻译终止来延长有效载荷表达(图d)。 图3.正在开发的主要体内CAR平台及其作用机制。 a，使用整合病毒载体(通常是慢病毒或γ -逆转录病毒载体)的体内平台需要靶向递送到T细胞，然后是膜融合，将病毒粒子转移到细胞质或内溶酶体室，最后是嵌合抗原受体(CAR)转基因的基因组整合。从机制上讲，这种方法的主要特点包括靶向驱动扩增，即CAR表达的T细胞在遇到肿瘤细胞上的特定抗原时增殖。这可能会导致CAR表达细胞的持续存在，但也会在防止活性扩增、不希望的持续存在或再扩增方面带来挑战，从而导致治疗后数周或数月发生延迟或延长的靶向毒性。专注于这项技术的公司包括Interius biotheraptics、Umoja Biopharma、Sana Biotechnology、Genocury、EsoBiotec和Kelonia Therapeutics。b，髓样细胞脂质纳米颗粒(LNPs)用于将CAR mRNA传递给巨噬细胞，从而产生表达CAR的巨噬细胞，目前在实体肿瘤中进行了测试，并获得了有希望的新数据。由于负载优化和这些细胞的缓慢增殖，可以在运输髓细胞中获得延长的CAR表达。通过圆圈的阴影表示CAR表达水平(越深的阴影对应的水平越高)。开发这项技术的公司包括髓系治疗公司和Carisma治疗公司旗下的Moderna公司。c、靶向LNPs (tLNPs)——要么表达抗体结合物，要么包含免疫性脂质——可用于用CAR以线性或环状RNA格式设计T细胞或T细胞亚群。CAR表达驱动抗原诱导的工程细胞快速活化和增殖。然而，由于RNA载荷没有整合，CAR表达随着T细胞的快速分裂而衰减。由于LNPs具有免疫原性，因此可以重新给药，从而增加暴露量，甚至增强药理作用。开发这项技术的公司包括深圳MagicRNA、Orna Therapeutics、Capstan Therapeutics和Sanofi。填充的圆圈表示表达CAR的功能细胞；半填充的圆圈表示耗尽的CAR转导细胞。 04 病毒载体 4.1 用于体内CAR-T细胞疗法的病毒载体的早期开发 体内CAR-T细胞疗法平台依赖于细胞选择性载体递送和通过工程化慢病毒或γ-逆转录病毒载体实现CAR有效载荷的基因组整合，这些病毒载体的一个关键要求是实现显著的、选择性的基因转移到患者的T细胞中。载体颗粒需要避免被不需要的细胞摄取，通过最小化“沉没效应”来确保安全性和提高效率，这是通过工程化用于假型化慢病毒载体的病毒包膜蛋白来实现的。该概念基于同时消除与天然细胞表面受体的相互作用，并展示识别T细胞特异性细胞表面标记的高亲和力结合物。使用麻疹病毒糖蛋白提供了慢病毒载体的概念验证，其中膜融合和受体附着功能被分离到两个蛋白质上，从而促进了工程化过程。工程化的尼帕病毒(NIV)糖蛋白使载体颗粒在基因递送方面更具活性，而展示CD4和CD8特异性结合物则实现了T细胞特异性转导，在后一种情况下对CD8阳性T细胞的特异性超过99%。 慢病毒糖蛋白工程的一个重要进展是将受体靶向递送策略应用于弹状病毒水泡性口炎病毒(VSV)的C糖蛋白，VSV慢病毒具有高产量和已建立的纯化及良好生产规范(GMP)工艺的优势。与在细胞表面介导高效pH非依赖性融合的副粘病毒糖蛋白相比，将受体结合和膜融合结合在单个分子中的VSV-G蛋白需要晚期内体的低pH来启动融合，临床测试最终将告知不同的进入模式是否对基因递送率以及脱靶递送和毒性产生影响。基于消除天然受体使用并展示高亲和力结合物(无论是融合到VSV-G蛋白还是作为单独的跨膜蛋白)的原理，已经评估了各种靶受体，包括T细胞标记物。 第一个用于体内CAR-T细胞生成的T细胞特异性慢病毒(CD8-慢病毒)基于NIV糖蛋白，展示了一个对CD8α链特异性的高亲和力设计的锚蛋白重复蛋白(DARPin)，这种CD8-慢病毒使得在体内生成人CD19 CAR-T细胞的概念验证得以实现。在人源化小鼠模型中，单次全身给药导致足够多的人T细胞被转导成CAR-T细胞，从而有效清除循环和骨髓中的原发性B细胞或淋巴瘤细胞。依赖于类似人源化小鼠模型、使用靶向其他T细胞标记物的慢病毒的后续研究为体内CAR疗法提供了相关发现。值得注意的是，通过抗CD4-慢病毒载体将CARs专门递送到CD4+ T细胞中，在临床前模型中实现了高效的靶细胞清除，其活性可比或超过CD8-慢病毒载体实现的活性。用激动性单链抗体靶向CD3允许选择性结合T细胞，同时诱导其活化。由于CD3特异性表达于T细胞上并在T细胞受体(TCR)信号传导中起核心作用，其结合通常触发内化和受体下调，作为活化过程的一部分。为了防止这种表面CD3的丢失——这会限制载体结合和转导效率——在转导过程中使用酪氨酸激酶抑制剂达沙替尼来短暂抑制TCR信号传导，从而保留CD3表达并增强基因转移。通过靶向分化程度较低的T细胞上的标记物，例如CD62L，CAR有效载荷可以优先递送到幼稚、干细胞样记忆或中央记忆T细胞中，这可能有利于增强疗效或防止早期耗竭。该技术的一个障碍是巨噬细胞可能充当“沉没”，通过将“别吃我”信号CD47纳入慢病毒包膜膜中，可以显著降低它们消除载体颗粒的活性。 上述所有用于体内CAR-T细胞工程的临床前模型都使用了B细胞靶向的CAR，然而最近的一份临床前出版物表明，血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤，包含CD4+肿瘤细胞，可以通过使用CD8靶向慢病毒进行体内CD4 CAR-T细胞递送来有效解决。此外，将CAR有效载荷选择性递送到CD8+ T细胞阻止了CAR递送到恶性细胞中，从而避免了潜在的治疗抵抗。 尽管小鼠模型是生成体内CAR递送概念验证的理想选择，但大型动物模型(如非人灵长类动物(NHP))被证明对于向临床转化至关重要。NHP在指导平台、产品和剂量方案优化方面发挥了重要作用，为使用带有NIV糖蛋白或弹状病毒包膜糖蛋白的T细胞靶向慢病毒进行临床测试奠定了基础，后者刚刚进入I期开发(表1)。 下面描述了由Interius Bio Therapeutics、Umoja Biopharma、Shenzen Genocury、EsoBiotec、Kelonia Therapeutics和Sana Biotechnology转化到临床或处于高级临床前开发阶段的用于体内CAR治疗的领先工程化病毒载体。 图4. 体内CAR疗法发展的总体前景。 在这个阶段，大多数工作都集中在平台和产品的设计和优化上，使用经过验证的目标，以其他治疗方式的临床经验为指导。这些靶点是B细胞谱系抗原(CD19， B细胞成熟抗原(BCMA)， CD20, CD22)，具有肿瘤和自身免疫双重适用性，以及实体肿瘤靶点(TROP2, glyypican 3 (GPC3))。几种候选产品目前正在转化为临床，包括工程病毒和脂质纳米颗粒(LNP)-RNA。在证明第一波候选产品的安全性、耐受性和临床相关生物活性后，我们设想分别向概念验证和注册试验快速发展，同时扩大临床活动，跨越不同的临床适应症(肿瘤学和自身免疫)。由于这些平台的新颖性和尚未确定的治疗指标，大多数候选产品可能会首先在肿瘤适应症中进行临床试验，然后是自身免疫性疾病或再生医学；除了被认为具有更适合非肿瘤学适应症(如基于RNA的适应症)的安全性的候选产品。随着技术的不断发展，我们设想产品概念、有效载荷架构和靶向递送工具的多样化，从而为传统技术难以治疗的疾病带来越来越多的创新和破坏性的体内疗法。 4.2 临床开发中的工程化病毒平台 ·Interius Bio Therapeutics开发的递送平台是一种工程化的自失活、复制无能的慢病毒载体，可以在单次静脉内给药后在体内靶向和转导特定细胞类型。Interius载体包含专有组件，能够实现精确的体内基因递送：一个高亲和力结合物以提供载体的细胞特异性靶向，以及一个去靶向的融合素以将整合的慢病毒基因组转移到靶细胞中。 ·Interius Bio Therapeutics的第一个临床候选药物INT2104，是一种CD7靶向的慢病毒载体，旨在递送CAR20转基因，编码一种抗CD20 CAR构建体，用于治疗B细胞恶性肿瘤。为了改善细胞靶向和载体稳定性，INT2104使用Gen 2.1 Fusogen进行假型化，这是VSV-G蛋白的修饰版本，经过工程改造具有氨基酸替换，可减少脱靶结合并增强在血液中的持久性。单个氨基酸替换将其融合蛋白从其天然受体(低密度脂蛋白受体(LDL-R))重新靶向，而不破坏其融合潜力。INT2104的精确体内靶向是通过载体上的高亲和力CD7特异性结合物实现的，该结合物提供对T细胞(包括CD4+和CD8+亚群)和自然杀伤细胞的嗜性，从而在单次静脉治疗后产生多样化的效应抗CD20 CAR细胞群体。在NHP和人源化小鼠模型中进行了INT2104的体内研究，以评估安全性、靶细胞转导的特异性以及生物学效应，为首次人体研究做准备。这些体内研究的结果证实了INT2104在静脉递送后能够特异性转导T细胞和自然杀伤细胞；生成和持久存在功能性抗CD20 CAR细胞；以及特异性清除CD20+ B细胞。在食蟹猴中进行的一项符合良好实验室规范(GLP)的毒理学研究表明，INT2104耐受性良好，静脉给药后没有毒性证据，没有CRS，也没有神经毒性，为首次人体临床研究选择的剂量范围和给药途径提供了支持。2024年10月，首位研究参与者在INVISE研究(NCT0639338)中接受了给药，这是一项首次人体I期临床试验，评估INT2104静脉输注在成人难治性/复发性B细胞恶性肿瘤中的安全性。INVISE研究的数据预计将在2025年下半年公布。基于INT2104开发过程中产生的体外和体内数据，Interius预计INVISE研究的临床数据将支持其他产品的开发，包括INT2106，一种包含抗CD19 CAR有效载荷的CAR19载体，开发用于治疗自身免疫性疾病。最近，Kite(吉利德公司)宣布其有意收购Interius。 ·Umoja Biopharma开发的VivoVec，是一种表面工程化的、第三代、自失活、复制无能的慢病毒载体颗粒系统，经过工程改造表达一种多结构域融合蛋白，能够在体内直接将遗传有效载荷递送到T细胞。该平台的一个关键差异化特征是VivoVec颗粒使用Cocal融合病毒糖蛋白进行假型化，这种糖蛋白在人体内能抵抗血清灭活，从而改善了体内持久性，并允许直接输注给患者。此外，VivoVec产品将CD80和CD58 T细胞共刺激配体与抗CD3 scFv结合到一个单一的多结构域融合蛋白中，提供了对T细胞的高特异性嗜性，并赋予颗粒结合、激活和转导体内的T细胞的能力。实际上，VivoVec颗粒模拟了启动T细胞免疫反应的抗原呈递细胞。 ·Umoja的第一个主导项目是UB-VV111，一种基于VivoVec的药物产品，编码一个CD19靶向的CAR以及一个雷帕霉素激活的细胞因子受体(RACR)。UB-VV111能够在体内直接生成共表达RACR系统的CD19 CAR-T细胞，使这些细胞具备雷帕霉素诱导的扩增能力和增强的体内存活能力。Umoja于2024年7月获得了FDA的研究性新药(IND)批准，并已在美国和国际上启动了其I期临床试验，治疗B细胞恶性肿瘤。艾伯维(AbbVie)获得了UB-VV111的开发和商业化选择权，该消息于2024年1月宣布。在NHP模型中的评估表明，单次输注VivoVec药物颗粒后，在淋巴结内或静脉内递送后，CAR-T细胞的峰值水平可达循环T细胞的65%。同时证明了快速且持久的B细胞再生障碍，超过了在基准体外NHP CAR模型中观察到的结果。有趣的是，在一只接受治疗的动物中，还有证据表明继发性CAR-T细胞扩增，发生在治疗数月后，并伴随着B细胞下降，这归因于病毒转导的CAR-T细胞的持久性。接受治疗动物中的炎症性不良事件通过标准免疫抑制疗法成功解决，包括抗IL-6抗体托珠单抗。 ·Umoja的第二个主导项目是UB-VV400，一种基于VivoVec的药物产品，编码一个CD22靶向的CAR，同样与RACR系统结合。该候选产品在人源化小鼠模型中显示了临床前概念验证，Umoja与中国合作伙伴IASO Biotherapeutics的研究者发起试验正在评估UB-VV400在B细胞恶性肿瘤患者中的疗效，并计划在2025年启动一项I期临床试验。此外，Umoja计划在2026年启动一项针对自身免疫性疾病的I期研究。 ·Shenzen GenoCare Medical Technology Co. Ltd. 正在开发一种基于慢病毒的体内CAR-T细胞疗法，该疗法使用抗CD3 scFv进行假型化，以靶向T细胞。2024年，他们报告了在研究者发起试验中，一名患有难治性弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)的患者接受了单次静脉输注编码抗CD19 CAR的慢病毒载体。该患者在第28天达到部分缓解，并在治疗后6个月保持缓解状态，同时外周血中检测到CAR-T细胞。在另一项研究者发起试验中，对两名难治性DLBCL患者进行了治疗，其中一名患者在第28天达到完全缓解，并在治疗后6个月保持缓解状态。这些初步临床数据表明，体内CAR-T细胞疗法在人类中是可行的，并且可以诱导临床缓解。 ·EsoBiotec正在开发一种用于体内CAR-T细胞生成的慢病毒载体，该载体经过工程改造以靶向T细胞，并编码一种靶向B细胞成熟抗原(BCMA)的CAR，用于治疗多发性骨髓瘤。在临床前研究中，该载体在体内有效转导T细胞，并导致多发性骨髓瘤小鼠模型中肿瘤消退和存活率提高。2024年，阿斯利康宣布有意收购EsoBiotec，以获取其体内CAR-T细胞平台。 ·Kelonia Therapeutics正在开发一种用于体内CAR-T细胞生成的慢病毒载体，该载体经过工程改造以靶向T细胞，并编码一种靶向BCMA的CAR，用于治疗多发性骨髓瘤。该载体使用一种专有的抗CD3结合物进行假型化，以实现T细胞特异性靶向。在临床前研究中，该载体在体内有效转导T细胞，并导致多发性骨髓瘤小鼠模型中肿瘤消退和存活率提高。Kelonia计划在2025年启动一项I期临床试验。 ·Sana Biotechnology正在开发一种用于体内CAR-T细胞生成的慢病毒载体，该载体使用一种抗CD8融合素进行假型化，以实现CD8+ T细胞的特异性靶向。在临床前研究中，该载体在体内有效转导CD8阳性T细胞，并导致B细胞恶性肿瘤小鼠模型中肿瘤消退和存活率提高。Sana计划在2025年启动一项I期临床试验。 ·Ensoma正在开发一种用于体内CAR-T细胞生成的工程化慢病毒载体，该载体经过工程改造以靶向CD46，这是一种在T细胞和其他免疫细胞上表达的补体调节蛋白。在临床前研究中，该载体在体内有效转导T细胞，并导致实体瘤小鼠模型中肿瘤消退和存活率提高。Ensoma计划在2025年启动一项I期临床试验。 ·Exuma Biotec正在开发一种用于体内CAR-T细胞生成的慢病毒载体，该载体经过工程改造以靶向CD3，并编码一种靶向CD19的CAR，用于治疗B细胞恶性肿瘤。在临床前研究中，该载体在体内有效转导T细胞，并导致B细胞恶性肿瘤小鼠模型中肿瘤消退和存活率提高。Exuma计划在2025年启动一项I期临床试验。 图5. 体内工程平台特征告知目标产品轮廓特征和治疗适用性。 在体内嵌合抗原受体(CAR)候选产品含有非整合有效载荷，用于脂质纳米颗粒(LNP)-RNA的瞬时工程，原则上是可重新给药和可调的，因此可以调节CAR暴露功能的治疗效果和安全条。此外，考虑到有效载荷缺乏基因组整合，这些对具有高安全标准的疾病适应症具有吸引力，适合“打了就跑”的机制(例如在自身免疫中诱导“免疫重置”或消除癌症中的残留疾病)。然而，提供CAR mRNA的嗜巨噬细胞LNP制剂，能够重复给药并协同内源性免疫机制，目前正在实体肿瘤中进行测试，并取得了有希望的新结果。利用病毒(慢病毒或γ -逆转录病毒)载体整合有效载荷进行稳定T细胞工程的体内CAR产品具有自校准CAR-T细胞扩增和持久性作为靶抗原负荷功能的机制优势。这对需要升高和持续的CAR细胞活性的疾病适应症很有吸引力。然而，基因组整合方面可能会带来与可能的CAR+细胞再扩增，夸大的靶向药理学和监测遗传毒性的要求相关的特定挑战。因此，原则上，这类产品可以更容易地首先用于疗效更高、安全标准较低的疾病适应症，如晚期血癌或实体瘤。 05 基于RNA的平台 5.1用于体内CAR-T细胞疗法的RNA-LNP的早期开发 基于RNA的体内CAR-T细胞疗法依赖于将编码CAR的mRNA递送到T细胞中，导致CAR蛋白的瞬时表达。与基于病毒的平台相比，RNA-LNP平台具有几个潜在优势，包括更简单的制造工艺、更低的免疫原性风险以及通过重复给药调节CAR表达的能力。然而，RNA-LNP平台也面临挑战，例如需要高效的体内mRNA递送到T细胞，以及CAR表达的瞬时性可能限制疗效的持久性。 ·用于体内CAR-T细胞疗法的RNA-LNP平台的开发始于2010年代早期，当时LNP技术被用于将mRNA递送到肝细胞，用于治疗遗传性疾病。 ·2017年，Fred Hutchinson癌症中心的Matthias Stephan团队报告了使用可生物降解的聚合物纳米颗粒将编码CAR的DNA递送到T细胞，用于体内CAR-T细胞生成。然而，该平台使用DNA而不是RNA作为有效载荷，并且需要改进以用于临床转化。 ·2020年，宾夕法尼亚大学的Carl June团队报告了使用RNA-LNP将编码CAR的mRNA递送到T细胞，用于体内CAR-T细胞生成。该团队开发了一种靶向LNP(tLNP)，该tLNP使用抗CD4单克隆抗体进行功能化，以将mRNA递送到CD4阳性T细胞。在临床前研究中，该tLNP在体内有效转导CD4阳性T细胞，并导致B细胞恶性肿瘤小鼠模型中肿瘤消退和存活率提高。 ·2022年，Capstan Therapeutics报告了使用tLNP将编码CAR的mRNA递送到CD8阳性T细胞，用于体内CAR-T细胞生成。该tLNP使用抗CD8单克隆抗体进行功能化，以实现CD8阳性T细胞的特异性靶向。在临床前研究中，该tLNP在体内有效转导CD8阳性T细胞，并导致B细胞恶性肿瘤和自身免疫性疾病小鼠模型中靶细胞清除。Capstan计划在2024年启动一项I期临床试验。 下面描述了由Myeloid Therapeutics、Capstan Therapeutics、Immorna、Shenzen MagicRNA、Orna Therapeutics、Sanofi、Carisma Therapeutics/Moderna、Tessera Therapeutics和Orbital Therapeutics转化到临床或处于高级临床前开发阶段的用于体内CAR治疗的领先RNA-LNP平台。 5.2 临床开发中的RNA-LNP平台 ·Myeloid Therapeutics正在开发一种用于体内CAR-T细胞生成的RNA-LNP平台，该平台经过工程改造以靶向巨噬细胞，用于治疗实体瘤。Myeloid的主导候选药物MT-101是一种LNP，编码一种靶向Trop2的CAR，用于治疗实体瘤。在临床前研究中，MT-101在体内有效转导巨噬细胞，并导致实体瘤小鼠模型中肿瘤消退和存活率提高。Myeloid于2024年启动了一项I期临床试验，评估MT-101在实体瘤患者中的安全性和疗效。 ·Capstan Therapeutics正在开发一种用于体内CAR-T细胞生成的tLNP平台，该平台经过工程改造以靶向CD8阳性T细胞，用于治疗自身免疫性疾病和B细胞恶性肿瘤。Capstan的主导候选药物CPTX2001是一种tLNP，编码一种靶向CD19的CAR，用于治疗自身免疫性疾病。在临床前研究中，CPTX2001在体内有效转导CD8阳性T细胞，并导致自身免疫性疾病小鼠模型中B细胞清除和疾病改善。Capstan计划在2024年启动一项I期临床试验，评估CPTX2001在自身免疫性疾病患者中的安全性和疗效。 ·Immorna正在开发一种用于体内CAR-T细胞生成的tLNP平台，该平台经过工程改造以靶向T细胞、髓系细胞和自然杀伤细胞，用于治疗B细胞恶性肿瘤。Immorna的主导候选药物IMB1001是一种tLNP，编码一种靶向CD19的CAR，用于治疗B细胞恶性肿瘤。在临床前研究中，IMB1001在体内有效转导T细胞、髓系细胞和自然杀伤细胞，并导致B细胞恶性肿瘤小鼠模型中肿瘤消退和存活率提高。Immorna于2024年启动了一项I期临床试验，评估IMB1001在B细胞恶性肿瘤患者中的安全性和疗效。 ·Shenzen MagicRNA正在开发一种用于体内CAR-T细胞生成的tLNP平台，该平台经过工程改造以靶向CD8阳性T细胞，用于治疗系统性红斑狼疮(SLE)。Shenzen MagicRNA的主导候选药物MRN1001是一种tLNP，编码一种靶向CD19的CAR，用于治疗SLE。在临床前研究中，MRN1001在体内有效转导CD8阳性T细胞，并导致SLE小鼠模型中B细胞清除和疾病改善。Shenzen MagicRNA于2024年启动了一项I期临床试验，评估MRN1001在SLE患者中的安全性和疗效，并报告了活性证据。 ·Orna Therapeutics正在开发一种用于体内CAR-T细胞生成的RNA-LNP平台，该平台使用环状RNA(oRNA)作为有效载荷，用于治疗B细胞恶性肿瘤和自身免疫性疾病。Orna的主导候选药物ORN1001是一种LNP，编码一种靶向CD19的CAR，使用oRNA形式，用于治疗B细胞恶性肿瘤。在临床前研究中，ORN1001在体内有效转导T细胞，并导致B细胞恶性肿瘤小鼠模型中肿瘤消退和存活率提高。Orna计划在2026年前启动一项I期临床试验，评估ORN1001在B细胞恶性肿瘤患者中的安全性和疗效。 ·Sanofi正在开发一种用于体内CAR-T细胞生成的tLNP平台，该平台经过工程改造以靶向T细胞，用于治疗肿瘤学和自身免疫性疾病。Sanofi的主导候选药物SAR1001是一种tLNP，编码一种靶向CD22的CAR，用于治疗B细胞恶性肿瘤。在临床前研究中，SAR1001在体内有效转导T细胞，并导致B细胞恶性肿瘤小鼠模型中肿瘤消退和存活率提高。Sanofi计划在2025年启动一项I期临床试验，评估SAR1001在B细胞恶性肿瘤患者中的安全性和疗效。 ·Carisma Therapeutics和Moderna正在合作开发一种用于体内CAR-T细胞生成的RNA-LNP平台，该平台经过工程改造以靶向巨噬细胞，用于治疗实体瘤。该合作的主导候选药物是一种LNP，编码一种靶向Glypican 3(GPC3)的CAR，用于治疗肝细胞癌。在临床前研究中，该LNP在体内有效转导巨噬细胞，并导致肝细胞癌小鼠模型中肿瘤消退和存活率提高。Carisma和Moderna计划在2025年启动一项I期临床试验，评估该候选药物在肝细胞癌患者中的安全性和疗效。 ·Tessera Therapeutics正在开发一种用于体内CAR-T细胞生成的RNA-LNP平台，该平台使用RNA写入器(RNA writers)将CAR有效载荷整合到T细胞基因组中，用于治疗肿瘤学和自身免疫性疾病。Tessera的主导候选药物是一种tLNP，编码一种靶向CD19的CAR，使用RNA写入器进行整合，用于治疗B细胞恶性肿瘤。在临床前研究中，该候选药物在体内有效转导T细胞，并导致B细胞恶性肿瘤小鼠模型中肿瘤消退和存活率提高。Tessera计划在2025年启动一项I期临床试验，评估该候选药物在B细胞恶性肿瘤患者中的安全性和疗效。 ·Orbital Therapeutics正在开发一种用于体内CAR-T细胞生成的RNA-LNP平台，该平台使用环状RNA作为有效载荷，并与病毒样颗粒(VLP)结合，用于治疗未披露适应症。Orbital的主导候选药物是一种LNP，编码一种CAR，使用环状RNA形式，用于治疗未披露适应症。在临床前研究中，该候选药物在体内有效转导T细胞，并导致疾病小鼠模型中靶细胞清除和疾病改善。Orbital计划在2025年启动一项I期临床试验，评估该候选药物在未披露适应症患者中的安全性和疗效。 图6. 快速发展的体内CAR治疗生态系统。 进入临床试验或处于临床前优化阶段的主要技术根据有效载荷技术(病毒或非病毒)以及是否依赖嵌合抗原受体(CAR)构建整合到基因组中进行划分。具有新兴概念证明的领先技术是基于整合工程慢病毒载体和在髓细胞性脂质纳米颗粒(LNPs)中形成的mRNA，分别在B细胞恶性肿瘤和实体肿瘤中进行评估。随后，其他工程慢病毒载体和靶向LNP (tLNP)-RNA技术进入临床阶段或处于高级临床前开发阶段(表1)。如本文所述，包括混合或非病毒基因编辑系统的其他技术处于早期研究或临床前开发阶段。内圈表示处于临床试验阶段的公司，外圈表示处于临床前阶段的公司。开发工程化慢病毒载体格式的公司显示在橙色部分，而开发基于RNA的方法的公司显示在蓝色部分。最后，红色部分显示了从事体内工程的公司，基于基因编辑系统的目标递送。 06 体内免疫工程：关键挑战 尽管体内CAR-T细胞疗法具有潜在优势，但在临床转化过程中仍面临几个关键挑战，这些挑战包括实现高效的体内基因递送到靶细胞、最小化脱靶效应、管理免疫原性以及确保长期安全性和疗效。 ·高效的体内基因递送：体内CAR-T细胞疗法的一个主要挑战是实现高效的基因递送到靶细胞。基于病毒的平台依赖于病毒载体对靶细胞的嗜性，而基于RNA的平台依赖于LNP对靶细胞的嗜性。两种平台都需要优化载体或LNP的配方，以实现高效的体内基因递送，同时最小化脱靶效应。 ·最小化脱靶效应：体内CAR-T细胞疗法的另一个关键挑战是最小化脱靶效应，即CAR有效载荷递送到非靶细胞。脱靶效应可能导致意外的毒性，例如在非靶细胞中表达CAR导致的on-target off-tumor毒性。为了最小化脱靶效应，基于病毒和RNA的平台都采用了靶向策略，例如使用细胞特异性结合物将载体或LNP引导到靶细胞。 ·管理免疫原性：体内CAR-T细胞疗法可能引发免疫反应，针对病毒载体、LNP或CAR蛋白本身。这些免疫反应可能导致载体或LNP的清除，限制基因递送的效率，或引发不良事件，例如细胞因子释放综合征(CRS)或免疫效应细胞相关神经毒性综合征(ICANS)。为了管理免疫原性，基于病毒和RNA的平台都采用了策略，例如使用低免疫原性的载体或LNP成分，或使用免疫抑制药物控制免疫反应。 ·确保长期安全性和疗效：体内CAR-T细胞疗法的长期安全性和疗效尚未在人类中得到充分评估。基于病毒的平台可能导致CAR有效载荷的基因组整合，从而带来插入突变和长期毒性的风险。基于RNA的平台可能导致CAR的瞬时表达，从而限制疗效的持久性。为了确保长期安全性和疗效，需要仔细监测接受体内CAR-T细胞疗法的患者，并进行长期随访研究。 Box 3. 与传统免疫疗法相比，体内免疫工程的主要区别特征和潜在优势 相对于抗体和免疫细胞接合物 ·增强活性：由于免疫细胞运输和嵌合抗原受体(CAR)设计包括多个共刺激结构域； ·在工程特异性免疫细胞亚群方面具有更高的通用性； ·能够同时吸收多种相互协同工作的免疫细胞类型； ·更多样化的细胞工程模式，包括通过重新编程基因组、转录组、细胞信号网络、受体或免疫细胞生物学的其他方面，从内部修改细胞功能； ·有效载荷的共同递送：通过在微环境中表达生物反应调节剂、检查点调节剂或其他生物分子来实现局部活性，从而实现更广泛的机制，同时相对于离体工程细胞产品具有更高的安全性； ·避免细胞操作，支持更广泛的可扩展性和访问，特别是与自体产品相比； ·避免使用以化疗为基础的淋巴细胞消耗调节，这可能会限制准入，并缩小对低安全标准适应症的适用性； ·在体内共同设计多种免疫细胞的可能性，这些免疫细胞可以相互协同工作； ·通过激活而不是淋巴消耗调节方法来建立预先存在的免疫力； ·根据有效载荷的性质，通过剂量调整和重新给药，增加了可调性，这两者都是达到所需暴露的关键，符合其特定性能指标的更广泛适应症。 07 展望 体内CAR-T细胞疗法代表了一种有前景的方法，可以克服传统体外工程化CAR-T细胞疗法的局限性，例如制造和物流的复杂性、有限的生产能力以及对基于化疗的淋巴细胞清除预处理的要求。通过消除体外细胞操作和化疗预处理的需要，体内CAR-T细胞疗法可能使CAR-T细胞疗法更广泛地应用于血癌，也能应用于自身免疫性疾病，对此体外CAR-T细胞疗法已显示出巨大潜力。 基于病毒和RNA的平台都在临床开发中取得了显著进展，几个候选药物已进入I期临床试验。早期临床数据表明，体内CAR-T细胞疗法在人类中是可行的，并且可以诱导临床缓解。然而，在体内CAR-T细胞疗法成为标准治疗之前，仍需克服几个挑战，包括实现高效的体内基因递送、最小化脱靶效应、管理免疫原性以及确保长期安全性和疗效。 未来，体内CAR-T细胞疗法可能与其他免疫疗法结合，例如检查点抑制剂或细胞因子，以增强疗效和防止治疗抵抗。此外，体内CAR-T细胞疗法可能扩展到其他适应症，例如实体瘤、传染病和再生医学。随着该领域的不断发展，体内CAR-T细胞疗法有潜力彻底改变免疫疗法，并为更广泛的患者群体提供新的治疗选择。 原文链接 In vivo chimeric antigen receptor (CAR)-T cell therapy. Nature reviews drug discovery, 2025. https://doi.org/10.1038/s41573-025-01291-5 免责声明：推文基于已公开的资料信息撰写，仅用于知识分享和传递，任何情况下本文的信息或所表述意见均不构成对任何人的建议。如因版权等存在疑问，请于本文刊发30日内联系本公众号删除，更多精彩内容欢迎关注和分享公众号。