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3 月 24 日（周二） 19:00-20:00   破解困局——流式在创新药药效与安全性协同优化中的应用 马上扫码预约： 近日，石药集团启动 SYS6055 治疗复发/难治侵袭性 B 细胞淋巴瘤的 I/Ⅱ 期临床研究，成为首款启动注册类型临床试验的本土体内 CAR-T。 放眼全球，阿斯利康、艾伯维、吉利德、BMS 等 MNC 在过去一年里相继以数十亿美元重押这一赛道，而 Umoja（吉利德收购）、EsoBiotec（阿斯利康收购）、Kelonia（强生合作）等企业的临床数据密集读出，为无需清淋、体内生成 CAR-T 的技术路线注入了确定性。 截至当下， Capstan（艾伯维收购）、Myeloid、传奇生物、嘉晨西海、济因生物、星锐医药、阿法纳生物等全球数十家企业将体内 CAR-T 管线推进至临床阶段，病毒载体与非病毒载体递送企业呈现「五五开」的格局。随着临床数据的持续读出，体内 CAR-T 赛道已进入价值兑换的「决胜」阶段。 MNC 重注背后的逻辑： 从「个性化定制」到「现货型民主化」 与传统 CAR-T 相比，体内 CAR-T 的颠覆性在于将「vein-to-vein」时间从数周压缩至数天，治疗成本有望降至传统自体 CAR-T 的十分之一，有望实现「现货型」细胞治疗的民主化。 然而，不同于体外制备可精确控制细胞制剂，体内 CAR-T 细胞的生成数量、组织分布及持久性存在显著个体差异，这对药效学和安全性评估提出了极高要求。 流式如何贯穿体内 CAR-T  开发全链条？ 在体内 CAR-T 等创新药开发的全流程中，流式技术始终是获取关键生物学证据的核心手段一一从早期靶点发现与验证，到候选药物的功能筛选与优化，再到临床前安全性评价及临床阶段生物标志物分析。以下为例： 在精准表征层面，通过多参数流式 panel 可纵向监测体内 CAR-T 细胞的扩增动力学、表型分化及组织分布，在非人灵长类模型中，流式是区分 CD4⁺/CD8⁺ CAR-T 细胞、评估 CD62L/CCR7 记忆标志物表达的金标准，直接预测人体持久性。 在安全性防控层面，流式技术可定量检测非 T 细胞的 CAR 表达以评估脱靶风险，通过监测 CD69、HLA-DR、CD107a 等活化标志物，结合胞内细胞因子的 CBA 多因子检测构建 CRS 早期预警模型，同时对 PD-1/TIM-3/LAG-3 耗竭标志物的动态追踪为判断干预时机提供依据。 在大动物转化层面，实验猴、比格犬等模型中的 TBNK 免疫分型、Treg 检测及微小残留病监测是核心评估内容，然而适用于这些物种的高质量流式试剂长期匮乏，成为数据可靠性的瓶颈。 爱博泰克提出「无爱博 · 不流式」全方位流式解决方案，围绕细胞流式与微球流式两大技术路径，提供高性能流式试剂及智能化流式仪器，涵盖 TBNK 免疫分型、体内 CAR-T 研究、微小残留病（MRD）检测及细胞因子分析等多个关键场景，为制药企业赋能创新，助力药物开发进程。 ▲ 猴 TBNK 亚群检测 药企反馈：使用爱博泰克和竞品 B 的组合抗体对食蟹猴全血进行 TBNK 检测，结果显示，分群效果良好。这说明爱博泰克的抗体不仅自身质量优良，与其他品牌抗体的兼容性同样优秀。 推荐产品： 其他案例： 为系统解析流式技术如何破解体内 CAR-T 等创新药的药效与安全性困局，3 月 24 日 19:00-20:00，爱博泰克免疫事业部 VP 吴海与熙宁集团副总裁、熙宁生物上海实验室负责人朱国振将带来直播课：破解困局——流式在创新药药效与安全性协同优化中的应用，分享实战经验与前沿洞察，欢迎扫码参与。 嘉宾介绍｜ 爱博泰克免疫事业部 VP 吴海 硕士毕业于复旦大学，博士毕业于罗切斯特大学医学遗传系，获遗传学博士。2014 年共同创立 Yurogen，共同研发并商业化 SMab® 单 B 细胞抗体开发平台。从 2021年起，吴海博士担任爱博泰克免疫事业部 VP，主持爱博泰克兔单克隆抗体开发战略，推动公司抗体产品线由多抗产品全面转型进入重组兔单抗产品，建立重组兔单抗开发全流程的“设计决定质量”兔单抗研发和管理体系，系统规划和建设重组抗体开发能力。公司已经成为国内重组单抗开发生产规模最大、平台最齐全、技术最领先的企业之一。团队产品涵盖高生物活性重组蛋白、普通科研抗体、优质 IHC 病理抗体、细胞流式抗体和多因子联检试剂，为科研、诊断和抗体药物早研和临床提供关键试剂工具和解决方案。 熙宁集团副总裁；熙宁生物上海实验室（上海精翰生物）负责人  朱国振 现任熙宁生物副总裁，上海精翰生物实验室负责人；曾任上海精翰生物流式检测平台负责人, 带领团队支持了药明巨诺细胞治疗产品“倍诺达”、恒润达生细胞治疗产品“恒凯莱" 等产品的 BLA 申报相关生物分析工作；主要负责抗体、细胞治疗、小分子、疫苗等创新药物的临床 PD 分析开发、验证、检测等相关工作，累计开发流式相关方法 100 多个，支持 200 多个项目；创造性的开发了全血冻存等样品处理方式，目前已经在淋巴细胞亚群、受体占位检测、组蛋白甲基化、乙酰化等项目中成功开展相关检测工作。 扫码即可预约直播课！ 【医麦课堂】直播报名入口： 温馨提示 1、直播开始前会有短信提醒或者邮件提醒，请报名的时候务必填写正确的手机号码及邮箱地址。 2、课程内容总结将发布在「医麦客」订阅号 ( 微信号：eMedClub)，更多课程预告也会及时发布，不想错过的小伙伴请快快关注~ 医麦课堂    为助力中国生物医药产业人才成长，医麦客特隆重推出“医麦课堂”栏目，诚邀生物医药行业内资深权威的大咖专家，聚焦新药研发过程中的各类问题，为广大医药产业人才提供即时即看即学的精彩课程。累计在线浏览人次7.5W+，深受好评！ 责任编辑丨菊 参考资料： 1.Bot, A., Scharenberg, A., Friedman, K. et al. In vivo chimeric antigen receptor (CAR)-T cell therapy. Nat Rev Drug Discov 25, 116–137 (2026). https://doi.org/10.1038/s41573-025-01291-5 2.Chen, Y., Xin, Q., Qiu, J. et al. In vivo CAR-T cell engineering: concept, research progress, potential challenges and enhancement strategies. Exp Hematol Oncol 14, 133 (2025). https://doi.org/10.1186/s40164-025-00725-5 3.https://mp.weixin.qq.com/s/Vc2DNq0E3bUdXdQamOlA_w

关注无癌家园 我们战癌到底 面对“冷肿瘤”这一免疫治疗的天堑，一种名为CAR-DC的革命性疗法正以其独特机制，在胰腺癌、肺癌等实体瘤中展现出前所未有的潜力。 在癌症免疫治疗领域，科学家们最近发现了一种巧妙的方法，能够将原本对免疫治疗不敏感的“冷肿瘤”转化为“热肿瘤”。 这种被称为CAR-DC的创新疗法，正在改写“冷肿瘤”免疫治疗的游戏规则。在传统免疫治疗屡屡受挫的领域，CAR-DC正以其双重机制——既能够直接识别并清除癌细胞，又能够重塑肿瘤微环境（TME），成为攻克实体瘤的崭新武器。 图源摄图网（已获授权） 免疫治疗困境：冷肿瘤为何难以攻克？ 癌症免疫疗法在血液肿瘤中取得了显著成果，但在实体瘤治疗中却频频受挫。核心难题在于大多数实体瘤属于“冷肿瘤”，其特征在于缺乏足够免疫细胞浸润，特别是CD8+ T细胞严重不足，肿瘤微环境呈高度免疫抑制状态。 冷肿瘤内部存在着复杂的免疫屏障。肿瘤微环境中DC数量稀少且功能异常，无法有效呈递肿瘤抗原并激活T细胞。 同时，肿瘤细胞常通过丢失抗原逃避免疫攻击。肿瘤内部充斥免疫抑制性的巨噬细胞，使得T细胞难以维持持续杀伤。 传统CAR-T细胞依赖自身抗原识别，难以应对这种“动态异质性”，导致疗效受限。即使一些T细胞能够进入肿瘤，也因免疫微环境抑制而迅速“耗竭”失去功能。 我们通常说的冷肿瘤主要指绝大多数实体瘤——特别是胰腺癌、胶质母细胞瘤和某些肺癌等，这些肿瘤微环境免疫细胞浸润极少，对传统免疫治疗反应极差。 据临床统计，这些冷肿瘤对传统免疫检查点抑制剂（ICIs）的客观缓解率通常低于15%，令人沮丧。 以胰腺导管腺癌（PDAC）为例，这种癌症中高达93%存在KRAS基因突变。手术后即使进行标准放化疗，仍有过半患者会出现复发，中位总生存期仅约17个月，5年生存率不足25%。 谢海燕教授团队在2025年的一项研究中指出，冷肿瘤的免疫抑制性TME是阻碍治疗的关键因素。致密的肿瘤基质阻碍T细胞的迁移与浸润；免疫抑制性肿瘤微环境削弱T细胞的存活能力和增殖潜能；肿瘤细胞固有的免疫逃逸机制降低T细胞的细胞毒性，形成了三重障碍。 CAR-DC疗法：巧妙融合的免疫武器 面对冷肿瘤的治疗困境，科学家们开始探索如何将CAR技术的精准性与DC细胞的抗原提呈能力结合起来。CAR-DC（嵌合抗原受体工程化树突状细胞）疗法应运而生，它代表了细胞免疫治疗的一个重要发展方向。 CAR-DC的原理是通过基因工程技术，让DC细胞表达嵌合抗原受体。这些改造后的DC不仅能更有效地识别肿瘤抗原，还能在肿瘤微环境中促进T细胞的活化和增殖，打破免疫抑制状态，使“冷肿瘤”转变为“热肿瘤”，为后续免疫治疗创造有利条件。 2017年，Myeloid Therapeutics公司就提出了CAR-DC的专利概念，通过改造单核细胞使其在接触肿瘤抗原后分化为DC，既能精准靶向肿瘤，又能激活广谱免疫反应。 与传统CAR-T相比，CAR-DC具有独特的优势，目前认为具有靶向多种癌症的潜力：由于DC本身寿命有限，这种疗法减少了对宿主长期影响的担忧；同时，DC作为专业的抗原提呈细胞，能够激活多种T细胞克隆，应对肿瘤的抗原异质性。 临床进展：突破血液与实体肿瘤的壁垒 在血液肿瘤领域，CAR-DC联合疗法已展现出令人鼓舞的成果。一项针对难治/复发性成人B细胞急性淋巴细胞白血病的研究显示，CAR-T联合DC疫苗治疗使8名患者全部实现完全缓解，其中2名患者维持微小残留病灶阴性完全缓解超过4年。 8例患者的治疗情况及治疗结果 （图源ASH Home，侵删） 南方医科大学珠江医院血液科的临床数据显示，急性B淋巴细胞白血病患者经CAR-T治疗可获得超80%的完全缓解率，如果联合该中心独立研发的白血病DC疫苗，患者缓解率可接近90%。 此外，有一项针对血液恶性肿瘤：CAR-T和CAR-DC靶向CD19联合治疗复发和难治性B淋巴瘤（NCT05585996）临床试验正在进行中，让我们拭目以待最新临床数据。 在实体瘤治疗方面，最新研究也取得突破。通过工程化改造T细胞分泌Flt3L和XCL1，研究人员在小鼠黑色素瘤和结直肠癌模型中，将肿瘤内cDC1数量提升了3~5倍。 更关键的是，这些改造后的DC能有效呈递多种肿瘤抗原，激活内源性T细胞的“多克隆扩增”。在与PD-L1抑制剂联用时，小鼠生存期延长超过50%。 如何寻求CAR-DC治疗 若想寻求CAR-DC、mRNA疫苗或国内外治疗新技术帮助的患者，可以先将病理报告、治疗经历及出院小结等资料提交至无癌家园医学部（400-626-9916）进行初步评估。 典型案例：五年无癌生存的见证者 62岁的老柯是一位复发、难治性急性淋巴细胞白血病患者。在传统化疗无效后，他于2019年参加了我国某科研团队开展的CAR-T细胞联合肿瘤DC疫苗的临床研究。 在接受个性化CAR-T细胞制备和回输后，老柯经历了一个有惊无险的高热反应期，随后状态越来越好。后续随访检查中，再未发现肿瘤细胞，至今已保持五年多无癌生存。 这个案例展示了CAR-DC联合疗法的潜力：即使在传统治疗无效的晚期患者中，也能实现长期完全缓解。目前，类似老柯这样通过CAR-DC联合疗法完全治愈并正常回归家庭工作的患者越来越多。 研究显示，接受DC疫苗联合CAR-T治疗的患者中，CAR-T细胞持久时间中位数为336天，最长的甚至超过4年。患者的抗原特异性细胞免疫活动在DC疫苗接种后显著增强。 机制创新：从单兵作战到系统激活 CAR-DC疗法的核心创新在于它改变了免疫治疗的作用模式——从单纯增强特定免疫细胞的杀伤能力，转变为重塑整个肿瘤免疫微环境。 最新研究发现，CAR-T细胞分泌的IFN-γ在促进抗原扩散中起着关键作用。疫苗增强的CAR-T细胞能够改变代谢，转向氧化磷酸化，并与内源性免疫系统相互作用，引发和维持抗原扩散。 具体而言，CAR-DC疗法通过多个层面发挥作用：它增加DC向肿瘤的招募，增强DC对肿瘤抗原的摄取，并促进内源性抗肿瘤T细胞的启动。 华东师范大学江文正教授团队的研究进一步揭示了DC疫苗如何增强CAR-T细胞的抗肿瘤效果。他们发现装载RAE1的DC疫苗能增强NKG2D-CAR-T细胞的毒性、增殖以及向中央记忆表型转变的能力，促进关键细胞因子的分泌。 这种疗法甚至能够克服抗原异质性问题。研究表明，由疫苗增强的CAR-T诱导的抗原扩散，即使初始肿瘤中有50%的细胞不表达CAR靶向抗原，也能实现一定比例的完全缓解。 CAR-DC免疫细胞疗法的热门靶点盘点 CAR-DC疗法的核心在于其“双功能”：既能像CAR-T细胞一样精准识别肿瘤抗原，又能像树突状细胞（DC）一样高效激活多克隆T细胞反应。这一特性使其在实体瘤的复杂靶点环境中展现出独特潜力。今天无癌家园小编就该给癌友们盘点下CAR-DC那些热门靶点。 1. GPC3（Glypican-3）：在超过70%的肝细胞癌（HCC）中过表达，是极具潜力的靶点。目前针对GPC3的研究主要集中在CAR-T疗法（如C-CAR031、CT017等），其在晚期HCC患者中已显示出可喜的抗肿瘤活性。CAR-DC疗法在此靶点的临床研究尚处早期，但基于GPC3的肽疫苗或DC疫苗研究已证实能诱导特异性的细胞毒性T淋巴细胞（CTL）反应，为CAR-DC的构建提供了抗原基础。 2.CLDN18.2（Claudin18.2）：在胃癌、胰腺癌等消化道肿瘤中特异性高表达，已成为明星靶点。除了热门的实体瘤CAR-T疗法（如Satri-cel），研究也探索了负载CLDN18.2抗原的DC疫苗。临床前研究表明，此类DC疫苗能成功诱导出针对CLDN18.2的特异性CTL，并对表达该抗原的肺癌细胞产生显著的杀伤作用，杀伤效率呈剂量依赖性。这为开发靶向CLDN18.2的CAR-DC疗法奠定了坚实基础。 3. GCC（鸟苷酸环化酶C）：在约95%的结直肠癌中表达，是消化道肿瘤的理想靶点之一。针对GCC的CAR-T疗法（如GCC19CART）已在转移性结直肠癌（mCRC）的I期试验中取得突破，客观缓解率（ORR）达40%。CAR-DC疗法在此靶点的应用旨在解决CAR-T在实体瘤微环境中浸润不足和容易耗竭的问题，通过DC的抗原呈递功能，可能激发更广泛、持久的抗肿瘤免疫。 4. EPHA2：在多种实体瘤中过表达，与肿瘤进展相关。针对EPHA2的CAR-DC疗法是目前该领域较为前沿的探索。中国人民解放军总医院等机构正在开展一项I期临床试验（NCT05631886），评估“TP53-EphA-2-CAR-DC”疫苗联合PD-1抗体治疗晚期实体瘤或淋巴瘤的安全性与有效性。该疗法将靶向EPHA2的CAR与负载TP53突变肽的DC疫苗结合，旨在同时实现精准靶向和扩大免疫应答，在临床前模型中已显示能抑制肿瘤生长。 5.HER2与TROP2：均是重要的肿瘤相关抗原，在乳腺癌、肺癌等多种癌症中靶向药物研发活跃。目前针对这两个靶点的细胞疗法研究以CAR-T为主，CAR-DC的公开临床数据有限，但其理论优势在于可能克服单一靶点抗原丢失导致的耐药。 6.CD19：是CAR-T治疗B细胞血液肿瘤的经典靶点，疗效显著。在实体瘤领域，CD19有时被用作“诱饵”或联合靶点。例如，针对结直肠癌的GCC19CART疗法就同时包含了靶向CD19和GCC的CAR-T细胞，利用CD19 CAR-T的活化来增强GCC CAR-T的抗肿瘤效果。这种思路未来也可能融入CAR-DC的联合策略中。 7.KRAS：作为“不可成药”的常见驱动基因突变，是肿瘤免疫治疗的重要方向。研究已涉及设计靶向KRAS突变肽的异体抗原呈递细胞，以激发特异性免疫反应。虽然直接针对KRAS的CAR-DC报道罕见，但利用DC呈递KRAS新抗原，是与之互补的热门研究路径。 疗效聚焦：在结直肠癌与胰腺癌中的突破 结直肠癌和胰腺癌是典型的免疫“冷”肿瘤，传统免疫疗法效果有限。CAR-DC及其相关疗法正在这些领域寻求突破。 转移性结直肠癌（mCRC）治疗挑战巨大。靶向GCC的CAR-T疗法GCC19CART在I期临床试验中，为经多线治疗失败的难治性患者带来了希望。该研究显示，在15例重度经治的mCRC患者中，GCC19CART治疗的客观缓解率（ORR）为40%，中位总生存期（OS）达到22.8个月。这是首次在难治性实体瘤中观察到CAR-T疗法产生客观临床活性。 尽管这是CAR-T数据，但它印证了GCC作为结直肠癌高效靶点的可行性。CAR-DC疗法若靶向GCC，其优势在于可能通过DC激活内源性T细胞，产生针对更多肿瘤抗原的“抗原扩散”效应，从而有望获得更持久的效果并降低抗原逃逸风险。 胰腺导管腺癌（PDAC）预后极差，极易复发。靶向CLDN18.2的CAR-T疗法（Satri-cel）已开始探索用于胰腺癌术后辅助治疗。一项针对高危胰腺癌患者的Ib期研究初步结果显示，该疗法展现出令人鼓舞的初步疗效和可控的安全性，术后患者持续无病生存且肿瘤标志物CA19-9水平显著下降。这提示细胞免疫疗法有望清除微小残留病灶，改变疾病进程。 对于CAR-DC，其价值可能体现在改善胰腺癌极度免疫抑制的微环境。临床前研究类似“双引擎”T细胞（分泌Flt3L和XCL1）的策略，能显著招募并激活肿瘤内的树突状细胞，从而逆转免疫抑制状态。这种通过改造免疫细胞来“加热”肿瘤微环境的方法，为胰腺癌的CAR-DC治疗提供了重要的机制参考。 个性化治疗：mRNA技术赋能CAR-DC疗法 个性化治疗是癌症免疫治疗的未来方向。通过结合mRNA技术和CAR-DC疗法，研究人员开发出了个性化肿瘤新生抗原疫苗，如中国的LK101注射液。 这种个性化肿瘤新生抗原疫苗采用mRNA-DC疫苗形式，通过将编码数十个基于患者自体肿瘤突变信息设计的个性化肿瘤抗原靶点的mRNA转导入树突状细胞，从而兼具mRNA疫苗和DC疫苗的优势。 在LK101注射液二期临床项目启动会上，研究团队提出在LK101早期原发性肝癌研究者发起的研究（IIT）中，LK101单药辅助治疗实现5年生存率100%，安全性表现良好。 目前，LK101注射液的"一项评估LK101注射液用于晚期肺癌患者的有效性和安全性的随机、开放、多队列Ⅱ期临床试验"项目已在北京启动，将在全国20余家临床中心开展，覆盖多个省、直辖市和自治区。有意向的晚期肺癌患者可以先将病理报告、治疗经历及出院小结等资料提交至无癌家园医学部（400-626-9916）进行初步评估。 专家表示，LK101目前的初步数据在安全性和疗效趋势方面均展现出积极信号，为个体化肿瘤免疫治疗提供了新的方向。个性化疫苗代表了一个突破性的治疗策略，LK101为我国免疫治疗领域带来了重要进展。 小编有话说 CAR-DC疗法作为细胞免疫治疗领域的“潜力股”，正以其独特的机制优势，为攻克实体瘤开辟一条充满希望的新路径。随着更多临床前验证和临床试验的开展，我们有望在未来看到它从理论走向实践，为更多患者带来福音。 本文为无癌家园原创，转载需授权！ 参考文献 1.https://m.mp.oeeee.com/oe/BAAFRD000020240804982630.html 2.https://www.cell.com/cell-reports-medicine/fulltext/S2666-3791(25)00380-5 3.https://ash.confex.com/ash/2023/webprogram/Paper186308.html 4.https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC10372881/ 5.https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1043661825002920?via%3Dihub 6.https://wchscu.cn/technology/86038.html 7.https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S266637912500583X?via%3Dihub 8.https://ichgcp.net/zh/clinical-trials-registry/NCT05631886 9.https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC12552347/ 10.https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC11511808/ 无癌家园提醒癌友们 国内细胞免疫治疗技术，包括CAR-T细胞（除上市的CAR-T外）、树突细胞疫苗、NK细胞、TILs细胞（除上市的TILs外）、TCR-T细胞（除上市的TCR-T外）、癌症疫苗等技术均处于临床试验阶段，未获准在医院正式使用。国内患者可以参加正规临床试验，在医生的监管下使用，无癌家园网不推荐患者冒然尝试任何医疗机构和研发机构的收费治疗。 无癌家园 抗癌资讯｜新技术｜新药研发｜权威专家 热门细胞疗法 相关文章 Review past  ▶▶▶ 1.【实体瘤细胞疗法招募】急招宫颈癌患者！实体瘤“杀手锏”TILS细胞治疗临床试验强势来袭！ 2.【TCR-T疗法免费招募】TC-N201注射液终于启动临床啦！现正急招滑膜肉瘤等NY-ESO-1阳性实体瘤患者！ 3.【肺癌新药招募】@EGFR 20ins非小细胞肺癌患者注意啦！新一代靶向药PLB1004终于启动临床啦！ 4. 1年生存率近60%！国研Vx-001癌症疫苗全面出击肺癌、前列腺癌！ 5.【CAR-T-19招募】RC19D2注射液终于启动临床啦！急招B细胞急性淋巴细胞白血病患者！

一、前言 今天我们要解读的这篇文章，正是发表于顶级期刊《Nature Reviews Drug Discovery》（影响因子高达101.8）上的重磅综述《体内嵌合抗原受体（CAR）-T细胞疗法》。而更引人注目的是其背后的作者团队，堪称“群星璀璨”，完美体现了学术界与工业界的深度融合。这篇文章的通讯作者，是被誉为“CAR-T疗法之父”的Carl H. June教授。正是他团队的突破性工作，推动了全球首个CAR-T药物的上市，开启了细胞治疗的新时代。如今，他领衔撰写这篇综述，为体内CAR-T领域的发展指明了方向，其权威性不言而喻。然而，这场“体内革命”并非仅靠一位巨星就能实现。它汇聚了来自超过10家顶尖生物技术公司的创始人、首席科学家，以及多位学术界的先驱。这份作者名单仿佛是一张“体内CAR-T领域”的明星企业地图： 学术奠基者：除了June教授，还包括弗雷德·哈钦森癌症中心的Matthias Stephan团队和德国保罗·埃利希研究所的Christian Buchholz团队。他们是这项技术最早的探索者，在2017-2018年发表了开创性的 preclinical 研究。 工业界领袖：团队成员分别来自Capstan Therapeutics、Umojia Biopharma、Myeloid Therapeutics、Sana Biotechnology 等新锐公司，以及 Moderna、Sanofi 等制药巨头。他们正在将不同的技术平台——无论是利用工程化病毒载体，还是先进的脂质纳米颗粒（LNP）递送RNA——推向临床阶段。 二、文章主要内容 2.1 从体外工程化CAR-T细胞中汲取的经验 迄今为止，多种靶向CD19或B细胞成熟抗原（BCMA）的自体CAR-T细胞产品已获批用于治疗多种B细胞恶性肿瘤。此外，数百个CAR-T细胞项目处于不同开发阶段，全球有超过1000项临床试验正在进行中。这包括尚未在肿瘤学中显示出与自体CAR-T细胞相当疗效的现货型同种异体CAR-T细胞（allo-CAR-T）产品，但它们可能在自身免疫性疾病中找到应用。对已获批CAR-T细胞的详细评估（包括反向转化分析以理解毒性机制和治疗耐药性）为指导下一代细胞疗法和体内CAR疗法的设计提供了关键经验。 2.2 体内细胞疗法：历史视角 体内CAR-T细胞疗法正在成为可扩展的替代方案，避免了体外细胞操作和清淋预处理。该方法的主要机制特征是使用现货型载体或制剂直接原位对免疫细胞进行CAR工程化改造。这些体内工程化的免疫细胞可以是T细胞、自然杀伤（NK）细胞或髓系细胞，从而可能解决传统疗法在可及性和部分临床性能方面的限制。 体外病毒工程化CAR-T细胞，需要清淋预处理以使输注的CAR-T细胞激活、扩增和分化为效应细胞。持久工程化的CAR-T细胞可能表现出加剧的扩增或持久性，导致细胞因子释放综合征（CRS）等毒性。 体内CAR疗法：输注携带CAR表达载荷的病毒载体或LNP制剂后，包括已分化的效应细胞在内的免疫细胞被快速工程化，从而在微环境中参与并清除靶细胞。清淋预处理与该治疗模式不兼容。与慢病毒载体相比，CAR mRNA格式设计为瞬时工作，从而从设计上限制了靶上活性的持续时间。 该领域emerged于纳米技术、RNA药物、病毒学和CAR疗法的交叉点。首批成功的体内CAR-T细胞编程的临床前报告发表于2017年和2018年。然而，临床转化一度滞后，原因包括风险投资和生物制药公司初期的认知不足、对体外CAR-T细胞技术和现货型同种异体细胞技术的关注度更高，以及知识产权争议。自2018年起，多家生物技术公司相继成立，推动了该领域的快速发展、创新和投资。近年来，大型制药公司通过收购积极布局，彰显了对其未来潜力的认可。 2.3 递送平台 文章系统性地呈现了体内嵌合抗原受体（CAR）技术从概念萌芽到临床转化的关键发展路径。该时间轴揭示，体内CAR技术的诞生源于两个独立研究领域的交汇，其一是传统体外病毒载体工程化CAR-T细胞的发展脉络（左上），自1987年首个CAR设计问世，历经多代技术迭代，至2017年首个CAR-T产品获临床批准，这一成功凸显了该平台在可及性与临床性能方面的局限性；其二是基于RNA与脂质纳米颗粒（LNP）的药物递送平台的发展（左下），自1978年脂质体RNA制剂起步，逐步完善体内mRNA递送与疫苗技术。在上述两类技术积淀的交叉点上，近年来涌现出两大体内CAR平台：基于工程化病毒载体实现基因组整合的体内病毒CAR平台（右上），其概念验证于2017/2018年在小鼠模型中实现，并于2024年进入首个人体研究阶段；以及基于LNP递送RNA实现瞬时表达的体内LNP-RNA CAR平台，自2020年在小鼠中完成概念验证后，于2025年启动临床评估。该图清晰地勾勒出体内CAR技术如何继承并融合传统细胞治疗与核酸递送领域的突破，最终推动这一颠覆性疗法走向临床应用的完整路径。 图1、体内CAR技术临床转化的主要发现和里程碑时间线 文章汇总了当前进入临床或高级临床前开发阶段的主要体内CAR-T细胞平台，清晰地勾勒出两大核心技术路径的竞争格局与发展现状。基于慢病毒或γ-逆转录病毒载体的平台（Table 1）旨在通过靶向T细胞的工程化病毒实现CAR基因的基因组整合，从而在体内生成持久性的CAR-T细胞，其代表项目如Interius BioTherapeutics的CD20靶向疗法INT2104和Umoja Biopharma的CD19靶向疗法UB-VV111，已进入早期临床阶段，主要应用于B细胞恶性肿瘤。而基于脂质纳米颗粒（LNP）递送RNA的平台（Table 2）则利用线性mRNA或环状RNA实现CAR的瞬时表达，其技术路径进一步分为利用天然免疫细胞趋向性的非靶向LNP（如Myeloid Therapeutics用于实体瘤的MT-302/TROP2 CAR）和采用抗体片段功能化的靶向LNP（如Capstan Therapeutics的CD19靶向疗法），后者可精准编辑特定T细胞亚群，并在自身免疫性疾病领域展现出巨大潜力。这两类平台在CAR表达的持久性、生产复杂度和安全性风险上各有优劣，共同推动了体内细胞疗法向更可及、更安全的治疗模式发展。 表1&2：开发中的基于慢病毒、LNP的体内CAR-T细胞平台 2.4 体内CAR平台的分子设计蓝图 图2详细展示了病毒载体和LNP-RNA两种体内CAR工程平台的载体结构和payload组成。 对于病毒载体平台，其核心是经过靶向改造的病毒颗粒。通过将病毒包膜蛋白如VSV-G与T细胞特异性结合域如抗CD3 scFv融合，同时保留fusogen功能，实现选择性膜融合和基因组递送。payload通常是整合型慢病毒载体，包含CAR表达框以及调控元件，类似于传统离体CAR-T所用的载体。 对于LNP-RNA平台，LNP由可离子化脂质、辅助脂质等组成，其中可离子化脂质能促进内涵体逃逸。靶向性可通过“嗜性脂质”或表面偶联的抗体片段实现。RNA形式分为两种：优化的线性mRNA（含修饰核苷酸和UTR）和环状RNA，后者设计用于延长CAR表达时间。 图2：主要体内CAR平台及其工程化载体和payload] 2.5 两大技术路径的体内作用机制 图3对比了整合型病毒载体和非整合型RNA-LNP在体内的作用机制差异。病毒载体的“自我调节”特性，病毒载体递送并整合CAR基因后，体内CAR-T细胞的数量和活性会受抗原刺激调节。当遇到肿瘤细胞时，CAR-T细胞增殖，发挥杀伤作用。这种“靶向驱动扩增”可带来持久疗效，但也可能导致不可控的过度扩增，引发延迟性毒性。 髓系细胞LNP的“驻留与招募”，图3b展示了髓系细胞嗜性LNP递送CAR mRNA至巨噬细胞，生成CAR-巨噬细胞（CAR-M）。这些细胞能浸润实体瘤，并通过吞噬作用、抗原提呈和T细胞招募，调动适应性免疫。由于髓系细胞增殖缓慢，通过payload优化可延长CAR表达。 靶向LNPs的“精准打击”，图3c展示了靶向LNPs（如抗CD8抗体修饰）将CAR mRNA递送至CD8 T细胞。瞬时CAR表达后，CAR-T细胞杀伤靶细胞。该方式可通过重复给药调节暴露量，避免长期毒副作用，尤其适合自身免疫病等安全性要求高的场景。 图3、开发中的主要体内CAR平台及其作用机制 2.6 临床开发的路线图与预期 图4以流程图形式描绘了当前体内CAR疗法从平台优化到临床验证，再到适应症拓展的预期路径。目前多数项目集中在利用已验证靶点，如CD19、BCMA、TROP2、GPC3优化递送平台和payload设计，通过临床前模型（包括非人灵长类）和早期临床研究，验证安全性和生物活性。 概念验证与注册试验：首批临床数据预计将在未来一两年内公布，为后续概念验证和注册试验提供剂量选择依据。预计大部分产品候选者会先在肿瘤适应症中测试，而安全性更优的RNA平台有望更快进入自身免疫病等非肿瘤适应症。 远期展望：技术多元化和颠覆性疗法：随着技术持续进步，payload架构和递送载体将不断多样化，催生更创新的疗法，应用于传统技术难以治疗的疾病。 图4：体内CAR疗法开发的前沿视角 2.7 平台特性决定治疗适用性 对比了整合型与非整合型体内CAR平台的目标产品特征，并据此推测其初始治疗适应症。 非整合型（LNP-RNA）平台：由于CAR表达瞬时、可重复给药且无基因组整合风险，其暴露水平可通过剂量和给药次数灵活调节（类似药物浓度-时间曲线下面积）。因此，这类平台适合对安全性要求较高、需要“快打快撤”的适应症，如自身免疫病的免疫重置或实体瘤的辅助治疗。图中用黄色区域表示。 整合型（病毒载体）平台：由于CAR基因永久整合，CAR-T细胞的扩增和持久性受抗原负荷自我校准，能实现强效且持续的细胞活性。因此，这类平台更适合对疗效要求高、风险耐受度也高的适应症，如晚期血液瘤或实体瘤。但其基因组整合特性可能带来CAR-T细胞再扩增、药理学效应放大以及需要监测基因毒性等问题。图中用蓝色区域表示。 例外情况：以髓系细胞为靶点的CAR mRNA-LNP平台（如Myeloid的CAR-M）因可重复给药并调动内源免疫，目前正在实体瘤中测试，属于图中的特例。 图5、体内工程化平台特性决定目标产品特征和治疗适用性 2.8 快速演进的体内CAR疗法生态系统 图6展示了当前体内CAR疗法领域的主要参与者和技术分布，按payload类型（病毒vs非病毒）和是否整合基因进行分类。 技术分布：内圈是已进入临床阶段的公司，外圈是处于临床前开发阶段的公司。橙色部分代表开发工程化慢病毒载体的公司（如Interius,  Umoja, EsoBiotec, Kelonia, Sana），蓝色部分代表开发RNA-LNP平台的公司（如Myeloid,  Capstan, Orna, Sanofi），红色部分代表开发基因编辑递送系统的公司（如Tessera）。 临床验证进展：目前已有多个产品进入临床。图中标注了已有病例报告的公司：EsoBiotec（多发性骨髓瘤）、Genocury（非霍奇金淋巴瘤）和Myeloid Therapeutics（实体瘤），显示了初步的人体概念验证数据。 生态持续扩张：基于临床前阶段公司的数量及领域内日益增长的兴趣，预计未来进入临床开发的公司数量将持续快速增长，呈现两位数扩张。 图6、快速发展的体内CAR疗法生态系统]结论与展望 三、小结与讨论 这篇综述清晰地描绘了一幅即将到来的免疫治疗新图景，从量身定制走向现货通用，从体外加工走向体内编程。体内CAR-T疗法正站在巨人的肩膀上如传统的CAR-T、RNA疫苗、病毒学，力图破解细胞疗法的可及性难题。 首批临床数据已经验证了其概念可行性，并展现了令人鼓舞的疗效。虽然前方的技术挑战依然存在，但随着Interius、Umoja、Capstan、Myeloid等公司的快速推进，我们有理由相信，这种更简便、更普惠的疗法，将在未来十年重塑癌症和自身免疫疾病的治疗格局。 作者们展望，未来的发展方向将包括，通过多靶点CAR或TCR工程改造多种免疫细胞协同作战；利用植入式生物材料支架实现局部原位编程；开发基于AAV或非病毒基因写入技术的新一代载体；以及通过组织特异性miRNA结合位点或合成启动子实现更精准的时空表达控制。最终目标是实现对免疫系统的“体内重编程”，将其应用于更广泛的疾病领域。 四、参考文献 Bot A, Scharenberg A, Friedman K, Guey L, Hofmeister R, Andorko JI, Klichinsky M, Neumann F, Shah JV, Swayer AJ, Trudeau K, Weissman D, Stephan MT, Buchholz CJ, June CH. In vivo chimeric antigen receptor (CAR)-T cell therapy. Nat Rev Drug Discov. 2026 Feb;25(2):116-137. doi: 10.1038/s41573-025-01291-5. Epub 2025 Sep 30. PMID: 41028170. 转载须知： 本文为基于公开学术文献的解读与科普，旨在传递科学信息。如需转载，请注明文章来源，并保持文章完整性。内容仅供学术交流，不构成医疗建议。