Ovarian cancer is the most deadly female gynaecological malignancy in developed countries and new treatments are urgently needed. The luteinising hormone releasing hormone (LHRH) peptide drug conjugate Zoptarelin doxorubicin is one such potential new drug modality that entered clinical trials for treating LHRH receptor‐positive gynaecological cancers. However, development stopped after disappointing Phase 3 results in 2017. We believe the lack of efficacy was due to linker instability and payload potency. In this work, we replaced its linker‐toxin with vedotin (MC‐VC‐PABC‐MMAE), yielding the novel peptide drug conjugate D‐Cys6‐LHRH vedotin. A GI50 and cell specificity comparison against cancerous and non‐cancerous ovarian cell lines showed significantly superior bioactivity and selectivity over Zoptarelin doxorubicin (GI50 4 vs. 453 nM) and other chemotherapeutic drugs used for treating ovarian cancers. Our results suggest D‐Cys6‐LHRH vedotin can potentially be used as a treatment for ovarian cancer.

2021-04-01·European journal of medicinal chemistry1区 · 医学

Synthesis, characterization, and targeted chemotherapy of SCT200-linker-monomethyl auristatin E conjugates

1区 · 医学

Article

作者: Bai, Weiqi ; Li, Zhuorong ; Wang, Linlin ; Hu, Xinyue ; Jin, Jie ; Jiang, Hailun ; Liu, Rui ; Liu, Xiujun ; Miao, Qingfang ; Cui, Along

Antibody-drug conjugates (ADCs) are currently among the most successful and important strategies for treating patients with solid tumors. ADCs are composed of a monoclonal antibody and warhead, which are conjugated via a linker. Currently, monomethyl auristatin E (MMAE) is the most widely applied warhead in the development of ADCs. However, MMAE-based ADCs are generally constructed using the MC-VC-PABC linker, and this design has limited structural diversity and some disadvantages. Accordingly, in this study, we generated three types of novel linker-MMAE (with alterations in the spacer, catabolizing area, and self-immolative compared with MC-VC-PABC-MMAE) in ADCs, termed SCT200-linker-MMAE conjugates, and then evaluated the linker-drug plasma stability and the rate of drug release by cathepsin B. The binding ability, internalization rates, and efficacy of all SCT200-linker-MMAE ADCs were systematically studied, and the expression of apoptosis-associated proteins and the therapeutic efficacies of SCT200-M-2, -C-2, and -C-4 were evaluated. The results showed that the activities of some of these ADCs were increased for epidermal growth factor receptor-positive tumors. Moreover, the novel linkers designed in this study can be linked with other antibodies to treat other types of cancer. Overall, these findings provide important insights into the application of SCT200-based linkers in ADCs.

2018-11-05·Artificial cells, nanomedicine, and biotechnology2区 · 工程技术

A developed antibody–drug conjugate rituximab-vcMMAE shows a potent cytotoxic activity against CD20-positive cell line

2区 · 工程技术

ArticleOA

作者: Hashemi Karouei, Seyed Masoud ; Habibi-Anbouhi, Mahdi ; Abdollahpour-Alitappeh, Meghdad ; Lotfinia, Majid ; Amanzadeh, Amir

Rituximab is a chimeric monoclonal antibody directed against B-lymphocyte specific antigen CD20, which is used for the treatment of B-cell malignancies. However, the effectiveness of rituximab is limited partly due to treatment resistance. The aim of this study was to develop rituximab-based antibody drug conjugate (ADC) to enhance rituximab activity. In this study, monomethyl auristatin E (MMAE) was covalently conjugated to dithiothreitol -reduced rituximab via a valine-citrulline peptide linker (rituximab-vcMMAE). The conjugates were then characterized by using nonreducing sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide electrophoresis (SDS-PAGE) and cell-based enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). The cytotoxic activity of the ADC was evaluated against Raji (human B-cell lymphoma; CD20-positive) and MOLT-4 (T lymphoblast; acute lymphoblastic leukemia; CD20-negative) cell lines. In addition, the colony formation assay was used to identify the propagation ability of ADC-treated cells in vitro. Results from nonreducing SDS-PAGE revealed various species of rituximab-MC-Val-Cit-PABC-MMAE (rituximab-vcMMAE), as compared with unconjugated rituximab. The binding capacity of rituximab-vcMMAE to the CD20-positive cell was similar to that of the parental rituximab. Most importantly, our results revealed that rituximab-vcMMAE was highly potent against the CD20-positive cell line, but not against the CD20-negative cell. At the same time, rituximab-vcMMAE was able to inhibit colony formation in CD20-positive cells. These data indicate that rituximab-vcMMAE may be a highly effective and selective therapy for the treatment of B-cell lymphoma.

项与 Anti-endosialin-MC-VC-PABC-MMAE(Genzyme) 相关的新闻（医药）

2024-04-22

·药时代

百亿大关已破！13款FDA批准的ADC，依次交上成绩单

2022年，全球ADC药物销售额突破了70亿美元。2023年，这一数字突破百亿大关，高达102亿美元！据文献预测: 2026 年，ADC 药物的销售额将超 164 亿美元！与化疗药物相比，ADC具有耐受性好、靶标识别准确、对非癌细胞的副作用小等优点，在治疗领域中占据着越来越重要的地位。目前，有13种ADC已被美国食品和药物管理局（FDA）批准，还有超过100种ADC处于不同的临床试验阶段。下面我们就来看看这13款ADC各有什么故事1Gemtuzumab ozogamicin（GO）公司：辉瑞意义：第一个获得全球市场批准的ADC适应症：AML（急性髓性白血病）结构：靶向CD33的人源化单抗+一种细胞毒性N-乙酰-γ-calicheamicin，通过可切割的肼键来连接。作用机制：GO与CD33抗原结合，形成GO-CD33复合物，然后被内吞到AML细胞中。在三个早期临床试验都产生积极结果之后，FDA在2000年批准了GO，特别是用于60岁以上的cd33阳性AML患者的治疗（图二）。图一：GO治疗的细胞作用机理2然而，GO在西南癌症研究集团（SWOG）S0106研究中爆出了安全性问题。该研究旨在评估GO在60岁以下AML成年患者中的疗效。该研究显示，与对照组相比，GO组的细胞致死性诱导率更高（5.5% vs. 1.4%）。与GO治疗相关的作用还包括骨髓抑制、输注反应、感染、出血和肝毒性等等。因此，辉瑞在2010年6月从市场上撤回了该产品。然而，数据表明，与对照组相比，GO对不适合强化化疗的老年AML患者的预后有良好的改善。毒性是可控的。基于这些研究，FDA在2017年又重新批准了GO。后续的研究显示，当GO联合fludarabine、cytarabine、粒细胞集落刺激因子和idarubicin使用时，和单独使用的效果一样，都能减缓疾病进展，尤其在cd33阳性AML患者的初诊中，GO是安全、有效和可行的。2Brentuximab vedotin (BV)公司：Seagen公司，后来与武田公司共同开发，意义：是第二种已获批准的ADC药物。适应症：霍奇金淋巴瘤（HL）和间变性大细胞淋巴瘤（ALCL）结构：布伦妥昔单抗（一种靶向CD30的IgG1嵌合单抗）、马来酰亚胺连接部分（一种可切割的二肽连接，mc-VC-PABC）和单甲基auristatin E（MMAE）。作用机理：BV特异性靶向在中表达的CD30抗原。成绩：2019年，BV在美国和加拿大市场销售额达到6.28亿美元，其他市场销售额达527亿日元，2022年销售额达到14.69亿美元，2023年销售额进一步增加至16.5亿美元。预计2026年BV的全球销售额将达到18亿美元在一项评估BV治疗HL和ALCL的有效性和安全性的I期研究中，大多数副作用事件均为1级和II级，常见的副作用包括疲劳、发烧、腹泻、恶心、中性粒细胞减少等。在一项II期临床试验中，BV分别在75%和87%的HL患者（102例患者）和ALCL患者（30例患者）中显示了有效性。此外，BV还可以缓解淋巴瘤引起的瘙痒和疼痛，而对患者的生活质量没有负面影响。2018年，FDA批准了BV联合CHP（即环磷酰胺、阿霉素和泼尼松）治疗初次用药的系统性ALCL患者或其他表达cd30抗原的成年患者。3Trastuzumab emtansine (T-DM1)公司：Genentech and ImmunoGen结构：通过硫醚连接剂将药物trastuzumab与emtansine（也称为DM1）连接而形成。适应症：HER2阳性癌症患者作用机理：trastuzumab选择性地将高活性的细胞毒性小分子药物DM1转运到HER2过表达的肿瘤细胞中，并通过内吞作用释放药物。这种药用机制不仅显著减少了毒副作用，还增强了靶向作用。成绩：2022年全球销售额为达到21.36亿美元，2023年销售额同比增长4%至22.22亿美元。由于T-DM1仅限于HER2+乳腺癌和仿制药的竞争，销售额2026年将为23亿美元。由Verma等人组织的EMILIA项目证实了T-DM1在HER2阳性晚期乳腺癌患者中的临床作用。在使用T-DM1和紫杉醇治疗的her2阳性晚期或转移的乳腺癌患者中，T-DM1显示出增强的治疗疗效、更高的安全性和更少的不良反应（图三）。轻微的不良反应包括疲劳（49.3%）、恶心（49.3%）、血清天冬氨酸转氨酶升高（43.5%）、发热（40.6%）和头痛（40.6%）。图二：早期公布的研究结果揭示T-DM1组的生存率要优于拉帕替尼联合卡培他滨（9.6比6.4个月）34Inotuzumab ozogamicin (InO)公司：Wyeth Pharmaceuticals Inc结构：通过酸介导不稳定剪接，将靶向CD22的人IgG4单抗与细胞毒性化疗药物calicheamicin偶联而成。适应症：急性淋巴母细胞白血病（ALL）作用机理：InO与表达cd22的肿瘤细胞的结合启动了InO-CD22复合物的内吞作用，导致复合物亚基间连接的水解。随后细胞毒性药物的激活诱导双链DNA断裂，导致细胞周期阻滞和细胞死亡。（CD22抗原是一种135-kDaI的跨膜唾液酸糖蛋白，几乎存在于所有B细胞的细胞质中，并在B细胞上特异性表达。CD22抗原主要表达于同时带有IgM 和IgD的B细胞中。）InO是挽救晚期ALL患者的一种有效措施，它使更多的患者有机会接受干细胞移植，实现长期生存。它最常见的不良反应包括中性粒细胞减少（28%）、AST增加（26%）、恶心（21%）、呕吐（17%）、疲劳（15%）和发热性中性粒细胞减少（15%）。5Moxetumomab pasudotox (MP)公司：阿斯利康意义：20多年来第一个批准用于HCL治疗的药物。结构：靶向CD22的莫西美单抗、假单胞菌外毒素a的38 kDa片段和连接物mc-VC-PABC。适应症：复发/难治性毛细胞白血病（HCL）的成年患者，这些患者对至少两种系统性治疗（包括嘌呤核苷类似物）没有反应。图三：MP开发的重要时间节点4MP最常见的副作用 (3-4级）包括淋巴细胞计数下降（20%）、无症状低磷血症（10%）和贫血（10%）。更新的数据证实，MP在经过大量预处理的HCL患者中表现出较高的持久反应率和最小的疾病残留率。因此它被认为是安全的、可控的治疗方案。6Polatuzumab vedotin (PV)公司：Genetech结构：抗体CD79b通过一个可切割的二肽连接（mc-VC-PABC）与MMAE连接组成适应症：复发/难治的弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）的成人患者作用机理：通过泛素/蛋白酶体系统诱导BCL-2蛋白家族成员MCL-1的降解。成绩：2023年Polivy销售额同比增长108%，至9.46亿美元。预计2026年，PV的全球销售额为8.5亿美元当PV与venetoclax和抗cd20抗体obinutuzumab或利rituximab联合使用时，MCL-1拮抗作用导致非霍奇金淋巴瘤（NHL）消退。重要的是，消退即使在停止治疗后仍然持续，相当比例的患者对治疗反应积极。然而，另一项研究显示，PV联合rituximab和lenalidomide治疗复发/难治性DLBCL患者没有达到预定的治疗效果阈值。最常见的3-4级副反应为中性粒细胞减少症和血小板减少症。7Enfortumab vedotin (EV)公司：安斯泰来和辉瑞结构：通过可切割连接将抗Nectin-4的抗体与细胞毒性药物MMAE结合。适应症：局部晚期或转移性尿路上皮癌（la/ mUC）全局治疗作用机理：EV与Nectin-4结合后，形成一个复合物，会在表达Nectin-4的细胞中被内吞。随后释放的MMAE与细胞微管蛋白结合，破坏微管网络，导致细胞周期阻滞和细胞凋亡。成绩：2022年全球销售额已达7.54亿美元，2023年销售额达到10.3亿美元。预计2026年的全球销售额将达35亿美元I期剂量递增研究EV-101涉及112例接受单药EV治疗的mUC患者。结果显示，研究者评估的有效药物反应率为43%，平均药物反应持续7.4个月。存活率中位数为12.3个月，1年存活率为51.8%。最常见的治疗相关不良事件（TRAEs）的发生率为30%，包括疲劳、脱发、食欲下降、味觉障碍、恶心、周围感觉神经病变、瘙痒和腹泻。FDA批准了EV与pembrolizumab联合治疗（EV+P）为突破治疗（breakthrough therapy）方案，并批准其作为不适合顺铂疗法的la/ mUC患者的一线治疗。8Trastuzumab deruxtecan (T-DXd)公司：Daiichi Sankyo Company, Ltd 结构：Trastuzumab （一种靶向HER2的人源化单抗）与依沙替康（exatecan）衍生物（拓扑异构酶I抑制剂）结合适应症：不可切除或转移性her2阳性乳腺癌患者作用机理：与T-DM1相比，T-DXd可以运载更多的细胞毒性药物。它优越的膜通透性使它能够通过“旁观者效应”杀死更多的肿瘤细胞。成绩：由于T-DXd可用于多种乳腺癌亚群（HER2+、HR+/HER2-和三重阴性）且治疗时间长，预计2026年将以62亿美元成为销量最高的ADC。在一项开放标签、剂量递增和剂量扩大的I期试验中，研究人员评估了T-DXd在表达HER2的晚期实体肿瘤中的安全性、耐受性和药物活性。结果显示，111例患者中有66例证产生了药理反应，111例患者中有104例病情得到控制。所有患者都经历过至少一次不良反应。常见的3级或以上严重的不良反应包括贫血（17%）、中性粒细胞减少（14%）、白细胞减少（9%）和血小板减少（8%）。此外，19%的患者经历了至少一次严重的不良反应，20例患者发生了间质性肺病、组织性肺炎或肺炎。表一：T-DXd各次临床试验的关键数据59Sacituzumab govitecan (SG)公司：Immunomedics意义：全球唯一获批的靶向 Trop-2 ADC 药物结构：包括一个抗trop-2抗体、一个SN-38药物载荷（伊立替康irinotecan的一种活性代谢物）和一个CL2A化学连接适应症：转移性三阴性乳腺癌（TNBC）成人患者作用机理：滋养层细胞表面抗原2（Trop-2）是一种40-kDa的糖蛋白，也被称为肿瘤相关钙信号转换器-2。它在各种实体肿瘤的发展和转移中起着至关重要的作用。SG引人注目的特点包括它对Trop-2的靶向性，以及它运载的中毒性药物SN-38。SG拥有高药物抗体比（7-8：1）。这些都会降低它的脱靶毒性。成绩：上市的首个完整年度业绩为3.8亿美元，2022年全球销售额为6.81亿美元，2023年Trodelvy销售额首次突破十亿美元大关，同比增长56%至 10.63 亿美元。2026销售额预计为11亿美元（表二）表二：SG家族产品销售额临床试验NCT03547973证明了SG治疗在基于铂和ICI治疗失败的局部晚期或转移性尿路上皮癌患者中的临床有效性和安全性。此外，一些研究表明，对EV耐药的细胞对SG仍然敏感，这使得SG可能在大多数膀胱癌亚型中有效，包括那些使用EV治疗的膀胱癌，这标志着尿路上皮癌患者治疗的显著发展。10Belantamab mafodotin (Blenrep)公司：GSK意义：Blenrep是全球获批的第一款BCMA靶向疗法结构：一种靶向B细胞成熟抗原（BCMA）的抗体药物偶联物（ADC），IgG1抗体，通过抗蛋白酶降解的连接子，连接微管抑制剂MMAF组成。适应症：作为一种单药疗法，用于治疗先前已接受过至少4种疗法、且其疾病对至少一种蛋白酶体抑制剂/免疫调节剂/CD38单抗难治、在最后一次治疗中被证明疾病进展的复发或难治性多发性骨髓瘤（R/R MM）成人患者。成绩：Blenrep在 2022 年11 月的验证性 III 期试验中失败，导致 FDA 要求葛兰素史克（GSK）当月将该药物从美国市场撤出。同时相较于其他ADC产品，2021年该产品销量1.22亿美元，2022年1.43亿美元。但在2023年11 月 27 日， Blenrep 二线治疗复发或难治性多发性骨髓瘤（R/R MM）III 期临床 DREAMM-7 试验达到无进展生存期（PFS）的中期主要终点，面临多项BCMA产品的市场竞争，Blenrep的市场前景面临挑战。11Loncastuximab tesirine (LT)公司：ADC Therapeutics结构：包括一个人源化的抗人CD19单抗，通过缬氨酸-丙氨酸连接体连接到吡咯苯二氮卓类（pyrrolobenzodiazepine）二聚体毒素上（图五）。适应症：二线或以上全身治疗的复发/难治性LBCL，包括未指明的DLBCL、低级别淋巴瘤引起的DLBCL和高级别b细胞淋巴瘤。最常见的不良反应包括中性粒细胞减少、血小板减少和伽马-谷氨酰基转移酶升高，39%的患者经历了严重的不良事件，包括中性粒细胞减少、胸腔积液、贫血、心包积液和非心源性胸痛。图四：LT的作用机制图612Tisotumab vedotin (TV)公司：Seagen意义：宫颈癌唯一获批ADC结构：与MMAE结合的完全人源单抗（靶向TF）作用机理：组织因子（TF），又称凝血反应蛋白激酶、凝血因子III或CD142，是一种跨膜糖蛋白。其主要功能是启动外源性凝血途径。TF常在癌细胞表面表达，在肿瘤生长、血管生成和转移中发挥重要作用。TV含有的单抗靶向TF，导致MMAE的内吞和细胞毒性作用。适应症：化疗后有肿瘤生长的成年患者的复发或转移性宫颈癌（r/mCC）在一项I/II期开放标签、剂量递增和扩展研究（innovaTV201；NCT02001623）中，在TF表达的转移性实体肿瘤中评估了TV的安全性、耐受性、药代动力学和抗肿瘤活性。最常见的不良反应是脱发、鼻出血、恶心、结膜炎、疲劳和干眼症。13Mirvetuximab soravtansin (MIRV)公司：ImmunoGen结构：使用FRα靶向抗体，通过一种可裂解的连接物与微管抑制剂相连适应症：治疗FRα表达阳性、铂耐药上皮性卵巢、输卵管或原发性腹膜癌的成年患者，这些患者之前接受过1-3种全身治疗方案作用机理：叶酸受体α（FRα）对叶酸具有较高的亲和力，促进其通过内吞作用运输到细胞质。虽然FRα在正常组织中通常以低水平表达，但它在各种上皮性肿瘤中经常异常表达，包括上皮性卵巢癌、子宫内膜腺癌、TNBC和NSCLC。MIRV含有的单抗靶向FRα。目前，正在进行的研究主要集中在MIRV与其他药物联合治疗卵巢癌患者的安全性和有效性。包括MIRV联合卡铂治疗复发、铂敏感的上皮性卵巢或输卵管癌患者的安全性和抗肿瘤活性。MIRV最常见的不良反应包括腹泻、视力模糊、恶心和疲劳、参考文献：1. Liu K, Li M, Li Y, Li Y, Chen Z, Tang Y, Yang M, Deng G, Liu H. A review of the clinical efficacy of FDA-approved antibody‒drug conjugates in human cancers. Mol Cancer. 2024 Mar 23;23(1):62. doi: 10.1186/s12943-024-01963-7. PMID: 38519953;2. Fenwarth, L.; Fournier, E.; Cheok, M.; Boyer, T.; Gonzales, F.; Castaigne, S.; Boissel, N.; Lambert, J.; Dombret, H.; Preudhomme, C.; et al. Biomarkers of Gemtuzumab Ozogamicin Response for Acute Myeloid Leukemia Treatment. Int. J. Mol. Sci. 2020, 21, 5626.3. Harbeck N, Gluz O, Christgen M, et al. De-escalation strategies in human epidermal growth factor receptor 2 (HER2)–positive early breast cancer (BC): final analysis of the west german study group adjuvant dynamic marker-adjusted personalized therapy trial optimizing risk assessment and therapy response prediction in early BC HER2- and hormone receptor–positive phase II randomized trial—efficacy, safety, and predictive markers for 12 weeks of neoadjuvant trastuzumab emtansine with or without endocrine therapy (ET) versus trastuzumab plus ET. J Clin Oncol. 2017 Jul 6. doi: 10.1200/JCO.2016.71.98154. Dhillon S. Moxetumomab Pasudotox: First Global Approval. Drugs. 2018 Nov;78(16):1763-1767. doi: 10.1007/s40265-018-1000-9. Erratum in: Drugs. 2019 Jan;79(1):105. PMID: 30357593;5. Indini A,Rijavec E, Grossi F. Trastuzumab Deruxtecan: Changing the Destiny of HER2Expressing Solid Tumors. Int J Mol Sci. 2021 Apr 30;22(9):4774. doi:10.3390/ijms22094774. PMID: 33946310; PMCID: PMC8125530.6. TsuchikamaK, An Z. Antibody-drug conjugates: recent advances in conjugation and linker chemistries.Protein Cell. 2018 Jan;9(1):33-46. doi: 10.1007/s13238-016-0323-0. Epub 2016Oct 14. PMID: 27743348; PMCID: PMC5777969.封面图来源：pixabay版权声明/免责声明本文为授权转载文章。本文仅作信息交流之目的，不提供任何商用、医用、投资用建议。文中图片、视频、字体、音乐等素材或为药时代购买的授权正版作品，或来自微信公共图片库，或取自公司官网/网络，部分素材根据CC0协议使用，版权归拥有者，药时代尽力注明来源。如有任何问题，请与我们联系。衷心感谢!药时代官方网站:www.drugtimes.cn联系方式:电话:13651980212微信:27674131邮箱:contact@drugtimes.cn拜耳Co.Lab上海正式启动招募入驻企业谁说CAR-T不赚钱？为什么医生不愿意开仿制药？点击阅读原文，了解更多！

抗体药物偶联物上市批准申请上市临床结果

2024-04-18

·精准药物

盘点生产抗体-药物偶联物(ADC)的几种偶联技术

迄今为止，已有 10 多种抗体-药物偶联物 (ADC) 获得美国食品药品管理局(FDA) 批准，并为医学界做出了贡献。有趣的是，它们都是使用化学偶联技术制造的。这表明化学偶联是ADC 制造的主要方法。与其他偶联技术（例如基因工程或酶促偶联）相比，化学偶联具有ADC化学、制造和控制(CMC)相对简单的优势，促使制药公司选择该技术进行 ADC 项目生产。为了更好地理解这一优势，本文概述了已在ADC 生产扩大阶段应用的成熟的全化学结合方法。1. 随机偶联此前，制造 ADC 最流行的方法是化学随机偶联。这种方法利用随机修饰，抗体表面有天然赖氨酸，或抗体链间二硫键上的半胱氨酸被还原。天然赖氨酸偶联是将药物接头与抗体连接的传统方法。活性酯基（例如N-羟基琥珀酰亚胺）与暴露的赖氨酸残基侧链上的一级胺发生反应，形成稳定的共价键。该技术已用于生产四种经美国FDA批准的 ADC（gemtuzumab ozogamicin, trastuzumab emtansine, inotuzumab ozogamicin, 和 mirvetuximab soravtansine）。利用抗体的赖氨酸残基，氨基酸亲核NH2基团与利克有效载荷上亲电的N－羟基琥珀酰亚胺（NHS）基团发生反应。尽管反应简单，但可利用赖氨酸残基的高丰度导致了许多ADC在随机分布下的不均匀混合物的形成。该试剂携带多种官能团，这些官能团在所有可获得的赖氨酸残基上可逆地形成亚胺部分。然后，关键蛋白通过试剂中的环氧化物与近端组氨酸残基反应。因此，在生理条件下，关键蛋白从赖氨酸中分离，醛被再生，从而能够通过肟结合标记抗体。相比之下，天然半胱氨酸结合被称为“半随机”结合技术，该技术利用通过用三(2-羧乙基)膦等可控当量的还原剂处理部分还原的链间二硫键而产生的半胱氨酸。这种可控还原，然后进行硫醇-马来酰亚胺偶联的结合策略被应用于生产五种市售 ADC（brentuximab vedotin、polatuzumab vedotin、enfortumab vedotin、belantamab mafodotin 和 tisotumab vedotin）。这种基于半胱氨酸的方法可以被认为是一种比基于赖氨酸的方法更有利的方法，因为其简化了 CMC，可以“部分”控制药物-抗体比 (DAR) 和 ADC 异质性。为了尽量减少 ADC 异质性引起的问题，已经开发了几种位点特异性偶联技术。下面介绍三种有前景的用于生产位点特异性 ADC 的化学偶联技术。2. 定点偶联ADC2019 年，随着 FDA 批准 trastuzumab deruxtecan，定点ADC 首次进入临床领域。在制造这种ADC 时，第一三共克服了与 DAR 为 8 的 ADC 相关的挑战，这些 ADC 之前被认为疏水性太强，不实用。他们通过使用独特的有效载荷和连接子组合成功创建了一种即使在 DAR 为 8 时也能保持稳定的 ADC。所用的结合技术模仿了传统的半胱氨酸类 ADC，因为它利用了链间二硫键的还原（尽管所有二硫键都被裂解）。然而，随机 ADC 包含位置异构体，这使得质量控制、可重复性和分析变得困难。相比之下，DAR 为 8 的 ADC 具有最多的半胱氨酸基团与有效载荷结合，从而最大限度地减少了它们的异质性。对于第一三共有效载荷，选择了依沙替康类似物来在循环血液中产生亲水性羧酸。该有效载荷通过可酶切的连接体共价连接到抗体上：四肽（Gly Gly Phe-Gly）。这种四肽连接体能够提供有希望的特性，在血浆稳定性和对癌细胞中存在的特定酶的敏感性之间具有高对比度。这些因素的结合增强了高 DAR ADC 的稳定性。继这一商业成功之后，sacituzumab govitecan-hziy 也获得批准。fam-trastuzumab deruxtecan-nxki or DS-8201a, DAR=８sacituzumab govitecan2014 年，PolyTherics研究小组（现为Abzena）报告了一种独特的化学共轭方法，称为ThioBridge® 。在还原链间半胱氨酸后，这种桥接技术以选择性方式提供稳定的共价键和 DAR 为 4 的 ADC。使用此方法，总工艺产率超过70%。此外，他们建立了一种适当的分离策略，使用制备型 HPLC 来获得具有更高纯度的均质DAR 的 ADC。ThioBridge 连接亲和标记是一种使用亲和化合物的方法，是化学生物学领域中成熟的工具。 2019 年，味之素集团采用这种方法，通过使用特定亲和试剂修改抗体的 Fc 区来生产位点特异性ADC。这项名为AJICAP 的技术迅速获得了生产相关临床前研究的良好实验室规范 (GLP)认证。AJICAP ®偶联技术这三种化学位点特异性结合方法已经非常成熟，其显著特点总结于下表（表 1.0）。DAR 8 方法在已获批 ADC 使用的跟踪记录技术方面具有显著优势。然而，该技术的能力似乎有限，特别是在靶标 DAR 和药物连接子兼容性方面。例如，临床 ADC 中的主要药物接头 MC-VC-PAB-MMAE，如果不重新设计药物接头，则无法应用于这种高 DAR 方法。MC-VC-PAB-MMAE 的疏水性会导致大量聚集，从而降低其药代动力学和安全性。此外，由于这种结合化学，铰链区缺乏二硫键，与裸抗体相比，可能导致所得 ADC 的物理性质发生潜在的危险改变。因此，sacituzumab govitecan -hziy（Trodelvy®；吉利德肿瘤学，2020 年获批）的抗体依赖性细胞毒性活性明显低于其裸抗体。这两种 ADC 均获 FDA 批准，这表明铰链二硫键导致的这种物理改变并不是内在问题；然而，它可能会限制抗体和药物接头的组合应用于高 DAR ADC。3. 半胱氨酸重桥接半胱氨酸重桥接是一种形成稳定共价键的极好方法，同时可以克服逆迈克尔反应引起的问题。这种副反应会释放有效载荷到血液循环中，从而导致不良毒性。然而，半胱氨酸重桥接的一个可能缺点是，在结合反应中会产生一些不需要的“错误桥接” ADC，从而导致与反应相关的异质性。使用新型双烷基化试剂很可能可以解决这一潜在问题。Fc 亲和化合物方法前景广阔，无需优化反应即可应用于多种抗体和药物接头。此外，这种结合方法可提供 DAR 为 2 的位点特异性 ADC，不需要亲水性接头或双烷基化试剂。然而，这种结合技术的一个可能缺点是需要相对较长的合成序列。味之素的研究小组表示，最近进行了优化以简化序列，这个问题可能会得到解决。使用 (A) 双砜、(B) 下一代马来酰亚胺 (NGM)、(C) 哒嗪二酮 (PD) 或 (D) “二合一（2-in-1）”PD 试剂通过二硫键重桥接生成同质ADC 的选定示例。4. 结论总之，根据具体目标（例如生物特性、目标 DAR 等），可以向药物开发商推荐所有三种结合方法，以用于具体的 ADC 管线项目。声明：发表/转载本文仅仅是出于传播信息的需要，并不意味着代表本公众号观点或证实其内容的真实性。据此内容作出的任何判断，后果自负。若有侵权，告知必删！长按关注本公众号粉丝群/投稿/授权/广告等请联系公众号助手觉得本文好看，请点这里↓

抗体药物偶联物临床结果临床研究

2023-03-03

·药智网

与默沙东「恋爱」分手，Seagen的心门，能被辉瑞敲开吗？

近日，据外媒报道，辉瑞正在就收购生物科技公司Seagen Inc.进行谈判，希望以超过300亿美元的价格完成收购[1]。众所周知，收购细分赛道的龙头公司，一直是Big Pharma保持竞争地位或开发下一个明星产品的惯用手段，而Seagen作为ADC领域的龙头企业，受到多个Big Pharma的青睐与追求。与默沙东「恋爱」分手，Seagen的心门，这次能被辉瑞敲开吗？波折的并购「恋爱史」早在2020年，默沙东就看上了Seagen，在ADC药物开发方面更是合作颇多。由于自家头牌抗癌产品Keytruda即将面临专利悬崖，自研药物临床试验的接连失败，默沙东将目光转向并购，企图以此进一步丰富自身癌症产品矩阵。而Seagen作为ADC领域的先锋，无疑成为默沙东的不二选择。2022年7月，有外媒报道，两家公司已经进入了谈判的后期阶段。默沙东愿意以每股200多美元的价格收购Seagen，收购价约为400亿美元。但最终两家公司在收购价格上未达成共识，并购失败。紧接着Seagen内忧外患不断，作为创始人之一的Siegall博士因负面新闻离职；与第一三共的合同纠纷中Seagen也是表现失利，失去收取相关ADC药物特许权使用费的机会。股价一再下跌，并购计划也沦为泡影。图1 Seagen公司2022年营收情况图片来源：富途牛牛股票但从近期Seagen发布的2022年财报来看[2]，公司发展并未受到太大影响。2022年，公司总收入19.62亿美元，同比增长24.65%。预期2023年的总收入可达到21.4~22.4亿美元。由此可见，Seagen的发展势头依然强劲。因此，继默沙东之后，辉瑞也向Seagen抛出橄榄枝，提出收购意向。Seagen有何优势？Seagen Inc.于1997年7月15日在美国特拉华州成立，2002年纳斯达克上市，一直致力于癌症治疗药物的开发和商业化。日前更是跻身ADC领域的龙头企业。其研发管线也逐年壮大，最新数据如下[3]。图2 Seagen公司管线布局图片来源：Seagen Clinical Development Pipeline截至2022年上半年，全球已上市ADC产品共14款，其中Seagen参与研发的就有4款。包括3款自主研发的PADCEV®（enfortumab vedotin-ejfv，2019年上市）、ADCETRIS®（brentuximab vedotin，2019年上市）和TIVDAK®（tisotumab vedotin-tftv，2021年上市），与从荣昌生物引进的爱地希。由此可见Seagen在ADC领域至关重要的地位。其次，Seagen也在财报中强调[4]，PADCEV®、TUKYSA®、ADCETRIS®和TIVDAK®（tisotumab vedotin-tftv，2021年上市）这四款药物的商业收入，2022年共计收入17亿美元，同比增长23%。而且Seagen在这些药物上市之后并未放弃其适应症的发掘，不遗余力地开展临床试验研究，想要最大程度的发掘其市场潜力。图3 Seagen公司2022年主要产品净销售额图片来源：FOURTH QUARTER&FULL YEAR 2022 FINANCIAL&BUSINESS UPDATE,Seagen,February 15,2023)其中，PADCEV®（恩诺单抗）的临床开发管线进展最为迅速。2019年12月，Padcev获得FDA加速批准，用于治疗局部晚期或转移性尿路上皮癌患者。2020年1月，Padcev获批用于治疗复发性膀胱癌。2021年7月，FDA授予Padcev的常规批准以外还批准Padcev扩大适应症，用于治疗没有资格接受顺铂化疗、且既往接受过一线或多线治疗的局部晚期或转移性尿路上皮癌（UC）成人患者。在未扩大适应症之前，Padcev的使用其实具有一定的局限性，因为几乎一半的晚期尿路上皮癌患者是没有资格接受以顺铂为基础的化疗的。临床开发管线的充分布局使Padcev的市场进一步扩大。除此之外，Seagen还布局了局部晚期或准静态恶性实体瘤（Ⅱ期）、尿路上皮性癌症（Ⅱ期）、非肌肉浸润性膀胱癌症（Ⅰ期）。作为尿路上皮癌的首款ADC药物，Padcev可谓是“钱”途无量。PADCEV®2022年净产品销售额较2021年增长32%。除此之外，ADCETRIS®的销售额也增长了35%。总体而言，Seagen公司的发展势头良好，未来可期。但当我们把Seagen目前的管线梳理之后会发现，虽目前明星产品的销量不俗，但后续产品蓄力不足，让人会有一丝担忧。具体情况如下图。目前已商业化的主打产品包括3款ADC药物和1款治疗乳腺癌的口服小分子HER2激酶抑制剂。而且这3款ADC均为小靶点，针对的并非大癌种。第二梯队的后续管线仅有Disitamab Vedotin和Ladiratuzumab Vedotin两种ADC药物，无其他类药物推出。像还处于比较早期的管线虽然ADC药物和其他类别药物丰富，但均属于早期研究阶段。图4 Seagen公司管线梳理图片来源：FOURTH QUARTER&FULL YEAR 2022 FINANCIAL&BUSINESS UPDATE,Seagen,February 15,2023众所周知，ADC药物是抗体偶联药物，由单克隆抗体、偶联链和细胞毒性小分子三部分组成，是一种融合了小分子药物细胞毒性和抗体靶向作用的强效抗癌药物。由于连接技术的不断升级和经验的积累，ADC药物的发展也在不断更新迭代。Seagen公司在2001年合成了靶向微管蛋白的小分子细胞毒MMAE，随后筛选出了以缬氨酸-瓜氨酸为主要结构的二肽连接子，通过还原链接二硫键生成的巯基实现偶联反应，构建起自己的专利ADC技术平台。由表1可以看出，无论是自研产品还是合作开发，ADC药物的linker-payload均采用了MC-VC-MMAE。除此之外，Seagen也将自身的ADC技术平台输出，提供给其他公司进行ADC药物的研发。Seagen公司的ADC技术平台成熟度很高，但第一三共的DXd平台也是近年来较为突出的创新性技术，基于此开发的Enhertu（DS-8201）更被奉为“神药”。由此来看，从ADC技术更新迭代的速度看来还是很卷。表1 Seagen公司的ADC药物及其连接方式数量来源：药智数据辉瑞为何「偏爱」Seagen？在笔者看来，辉瑞在疫情这几年花了极大的精力研发新冠疫苗和口服药，虽已取得较高收益，但随着疫情消退，辉瑞未来的收益势必下滑。目前其管线中在未来为辉瑞填补新冠销售额下滑的产品并不多，需要扩充管线，未雨绸缪。而ADC药物近年来发展势头强劲，产品不断更新迭代。上月24日，阿斯利康/第一三共联合研发的第三代ADC药物Enhertu注射用德曲妥珠单抗（即DS-8201）已正式在中国获批上市，ADC药物疗效的天花板也在被不断刷新。相比于传统疗法，ADC药物无论在疗效，还是安全性、耐受性等方面都具有极大的优势。同时结合了靶向疗法和化疗疗法的优势，抗体部分可以定向作用于肿瘤部位，通过直接抑制肿瘤细胞有丝分裂、破坏DNA结构而发挥药效。其次，ADC药物具有极高的技术壁垒和专利布局。ADC药物自提出至今已有百年历史，但上市的品种仍然较少且多数在研药物均处于早期临床阶段。这是因为ADC药物开发的难度大，需建造完整的技术平台，技术壁垒高，专利布局大。从2016年到2020年，美国ADC市场销售额从3.28亿美元增长至14.7亿美元。乐普生物招股说明书显示，全球的ADC药物市场在2024年可达到104亿美元，2030年可达207亿美元。ADC药物在肿瘤领域的发展可谓是异军突起。作为ADC领域的龙头企业，Seagen自然是不二人选。而且Seagen的MMAE+二肽连接子+链间二硫键偶联的ADC技术平台相对成熟。以此为基础，不论是开展新靶点ADC药物的研发，还是对已有的ADC技术进行改良，都是事半功倍。如今ADC领域火热，但同时面临研发失败风险高、同质化严重（例如HER2靶点）等问题。辉瑞选择Seagen进行并购，不可谓不是一个明智之举。「牵手」能否成功？据《华尔街日报》报道，辉瑞正在与Seagen谈判，拟300亿美元收购Seagen。但Seagen的市值已超300亿美元。而且Seagen给出的《FOURTH QUARTER&FULL YEAR 2022 FINANCIAL&BUSINESS UPDATE》中数据显示，2023年将会是Seagen公司具有里程碑意义的一年。像Padcev，FDA将在2023年4月加速批准其在1L mUC cisineligible患者中的使用，相关的EV-104、EV202、EV304等在肌肉浸润性膀胱癌和其他实体瘤中临床研究，其数据也将在年内给出；Tukysa相关的在HER2不同表达肿瘤的初步研究等也在进行中。值得注意的是，Seagen似乎也打算对自己的平台进行升级，ADC药物采用较新颖的瑞奥斯他汀和喜树碱技术，新的细胞毒性和免疫刺激有效载荷，采用多种作用机制的新型药物偶联技术等。图5 Seagen公司2023年预期里程碑图片来源：FOURTH QUARTER&FULL YEAR 2022 FINANCIAL&BUSINESS UPDATE,Seagen,February 15,2023辉瑞和Seagen Inc.的谈判尚处于早期阶段，鉴于Seagen目前良好的发展势头，极大可能会溢价。但目前美国联邦贸易委员会正在收紧对大型制药并购的审查。反垄断监管机构表示，它将不再仅仅关注特定产品和管道重叠，而是更广泛地关注制药市场集中度和过去的反竞争做法。投资者必定也会对此有一定的担忧。虽然辉瑞在过去几年依靠新冠疫苗和口服药可谓是赚的盆满钵满，应该很大程度上愿意促成此次谈判。但必定也会考虑目前Seagen管线后续产品竞争力不足，可能面临增长乏力的问题等。因此，关键就看Seagen是否会吸取先前与默沙东谈判失败的经验，将溢价控制在辉瑞可接受范围内，从而达成共识。你怎么看？欢迎投票~参考文献[1]Pfizer in Talks to Acquire Seagen in Deal Likely Valued at More Than$30 Billion,Wall Street Journal,Feb 27th.[2]Seagen 2022年财报,富途牛牛股票.[3]Seagen Clinical Development Pipeline,Seagen官网.[4]FOURTH QUARTER&FULL YEAR 2022 FINANCIAL&BUSINESS UPDATE,Seagen,February 15,2023声明：本内容为作者独立观点，不代表药智网立场。如需转载，请务必注明文章作者和来源。对本文有异议或投诉，请联系maxuelian@yaozh.com。责任编辑 | 八角转载开白 | 马老师 18996384680（同微信）商务合作 | 张武龙 13368443108（同微信）阅读原文，是昨天最受欢迎的文章哦

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