CAR-T、CAR-NK慢病毒载体制备质控滴度检测新利器

2023-12-27

细胞疗法诊断试剂免疫疗法

近年来，细胞与基因治疗（CGT）备受瞩目。CAR-T细胞治疗在血液瘤中已取得非常成功的疗效，有多款产品获批上市，但自体CAR-T细胞依然存在许多局限性。以CAR技术为核心衍生的CAR-NK细胞治疗则显示出显著的抗肿瘤作用，作为一种新型治疗方案，有望克服CAR-T细胞治疗的局限性，并且有望实现大规模生产即用/现货型产品，降低成本，为更多癌症患者带来福音。在CAR-T、CAR-NK细胞制备过程中，通常选择借助病毒载体将特定CAR基因转导至T细胞或者NK细胞中，慢病毒载体是目前的热门选择。为了将CAR基因高效导入目标细胞中，高转导效率是关键，而病毒滴度在很大程度上决定了转导效率的高低，因此高质量的慢病毒对CAR-T、CAR-NK细胞制备也是非常重要的。除转导滴度外，慢病毒物理滴度是慢病毒载体质量控制的重要指标之一，中国食品药品检定研究院发布的《CAR-T 细胞治疗产品质量控制检测研究及非临床研究考虑要点》，CDE发布的《基因治疗产品药学研究与评价技术指导原则》、《体外基因修饰系统药学研究与评价技术指导原则(试行)》等相关指导原则都明确了病毒载体物理滴度检测的必要性，对于慢病毒载体物理滴度提到了认可通过ELISA法检测样本中的p24蛋白从而进行物理滴度的检测。那么如何快速准确地检测慢病毒物理滴度呢？Takara Bio经典款慢病毒滴度p24 ELISA检测试剂盒（632200），采用经典的“三明治”ELISA方法，可以在3 hr快速测定慢病毒滴度，主要的操作步骤包括：收集上清液，裂解、结合、洗涤（3X）、检测，需要历经3个洗涤步骤，每个洗涤步骤需要进行3次洗涤。检测板选择了可分离的96孔板（12 x 8孔）形式，使用起来要更加灵活，不会造成不必要的浪费。这款试剂盒已被诸多CDMO、CGT企业所认可，并用于CDMO、CGT产品开发研究中。为了更加适应慢病毒物理滴度的测定需求，Takara Bio推出了全新升级的Single Wash慢病毒滴度p24 ELISA检测试剂盒（631476），通过ELISA法特异性测定病毒上清液中的p24衣壳蛋白含量，适用于所有HIV-1-based慢病毒。优势亮点是只需一回洗涤，让操作更简便、耗时更短，有助于提高实验速度，搭配自动化移液机器人，更容易实现自动化操作。1更少的操作步骤，更快速的检测Single Wash慢病毒滴度p24 ELISA检测试剂盒，主要操作步骤包括：收集上清液，裂解、结合、洗涤（1X）、检测。减少了实验操作步骤，只需一个洗涤步骤，检测时间缩短至1.5 hr。这对研究人员来说，可以更快速获得检测结果，节省实验时间。升级前后操作流程比较图（631476 vs 632200）2宽泛的测定范围，操作更方便Single Wash慢病毒滴度p24 ELISA检测试剂盒，p24测定范围为100–1,600 pg/ml，宽泛的样品测定范围，减少了稀释步骤和重复次数，使用起来更为便捷。对于高滴度慢病毒样品的检测要更为友好。升级前后测定范围比较（631476 vs 632200）除此以外，ELISA检测板使用可分离的96孔板（12 x 8孔）形式，使用灵活，同时本试剂盒提供p24蛋白作为阳性对照，用于制定标准曲线、测定样品中的病毒含量。在慢病毒滴度测定方面，Takara Bio作为行业资深企业可谓颇有发言权。Lenti-X GoStix Plus可以在10分钟之内检测慢病毒物理滴度，这种检测方法以智能手机作为数据读取和分析工具，不需要购买任何检测仪器；Lenti-X qRT-PCR Titration Kit基于qRT-PCR方法而开发，通过检测病毒基因组快速测定慢病毒物理滴度。除此之外，Lenti-X Provirus Quantitation Kit是一款整合慢病毒(也就是前病毒)定量试剂盒，通过量化已整合到靶细胞核DNA中的慢病毒的拷贝数，来确定慢病毒的有效滴度。对于全新升级的Single Wash慢病毒滴度p24 ELISA检测试剂盒（631476），如有意向请扫描下方二维码申请试用装。Takara Bio作为重要的生物技术企业，在病毒基因导入系统方面造诣颇深、体系完备，拥有慢病毒系统、逆转录病毒系统、腺相关病毒系统、腺病毒全套解决方案，为相关生物学基础研究提供强力支持，为寄予厚望的细胞与基因治疗研究护航加码。关于TakaraTakara Bio中国有两家公司--宝生物工程（大连）有限公司和宝日医生物技术（北京）有限公司。宝生物工程（大连）有限公司是Takara Bio Inc. 在中国的生产基地，宝日医生物技术（北京）有限公司负责Takara Bio Inc.旗下所有品牌在中国市场的宣传及销售。宝日医生物技术（北京）有限公司成立于2004年1月，公司主要销售生物工程研究用试剂和仪器（包括Takara、Clontech、Cellartis品牌），产品主要包括PCR/qPCR、基因克隆、基因功能研究、蛋白质功能研究、二代测序、干细胞研究等产品及服务，并可提供客户定制化服务。还开展以细胞治疗为中心的生物工程领域的技术开发与服务，销售细胞治疗和基因治疗相关产品。