Nature | 中国科学院张余团队揭示酵母mRNA转录终止的机制

2024-03-28

信使RNA寡核苷酸临床2期核酸药物

引言高效终止是基因转录所必需的。真核生物使用保守的外核糖核酸酶介导的机制来终止RNA聚合酶II (Pol II)的mRNA转录。2024年3月27日，中国科学院分子植物科学卓越创新中心/中国科学院合成生物学重点实验室张余研究组（曾媛为论文的第一作者）在Nature 在线发表题为”Structural basis of exoribonuclease-mediated mRNA transcription termination“的研究论文，该研究报道了与5 '至3 '外核糖核酸酶Rat1及其伙伴Rai1结合的酿酒酵母 Pol II预终止转录复合物的两个冷冻电镜结构。结构表明，Rat1取代了延伸因子Spt5，停靠在Pol II茎结构域。Rat1屏蔽Pol II的RNA出口通道，引导新生RNA走向其活性中心，并在新生RNA的5 '端堆叠三个核苷酸。这些结构进一步表明，Rat1在缩短RNA时向Pol II旋转。总之，该研究揭示了酵母mRNA转录终止的分子机制。转录作为中心法则中必不可少的一步，在基因表达过程中承担重要作用。转录按照其反应过程可以分为转录起始，转录延伸，转录终止。近年来转录起始和转录延伸的机制逐渐被揭开。然而，由于转录终止的动态和不稳定特性，其机制仍不清楚。转录终止（transcription termination）是指RNA聚合酶（RNA polymerase，RNAP）停止RNA延伸、释放RNA并从DNA解离的过程。正确的转录终止对mRNA的稳定性和RNA聚合酶的高效循环利用至关重要。酵母细胞RNA聚合酶II（RNA polymerase II，Pol II）的转录终止机制根据其合成的RNA类型主要分为两类，第一类是mRNA的转录终止，第二类是non-coding RNA的转录终止。mRNA的转录终止机制在真核生物中普遍保守。当Pol II转录至基因末端的多聚腺苷化信号（Polyadenylation Site; PAS）时，pre-mRNA在PAS位点下游被切割分为两段。切割后的mRNA完成PolyA加尾后被转运至细胞质翻译，而Pol II仍然朝下游转录继续合成RNA，其转录终止依赖一个保守的5’-3’ RNA外切酶（酵母Rat1，哺乳动物XRN2，植物XRN3），针对真核细胞mRNA转录终止的机制已经被研究了多年，提出了包括“鱼雷”、“异构”等多个模型，但是其机制尚存争议。异构模型认为，核酸外切酶Rat1结合诱导Pol II构象变化，促进mRNA自发解离。鱼雷模型认为，核酸外切酶Rat1切割下游RNA并追赶Pol II，当Rat1赶上Pol II后触发mRNA解离。转录终止具体通过何种机制尚存争论。图1 外切酶Rat1与Pol II形成的复合物结构（Credit: Nature）鉴于mRNA转录终止过程快速连续，难以捕捉其中间状态。研究团队利用磷硫键修饰的不同长度RNA组装Pol II转录终止复合物，重构了外切酶缩短RNA的中间态过程，并解析了上述中间状态的复合物结构（图1）。研究团队发现外切酶稳定结合在Pol II的RNA通道外侧，RNA从Pol II的活性中心延伸到了外切酶的活性中心。外切酶的结合位置和Pol II的转录延伸因子互相重叠，外切酶结合促使了延伸因子的解离，解释了外切酶延缓Pol II转录延伸速率的原因。根据以上结构信息，研究团队提出了外切酶介导的mRNA转录终止机制：外切酶覆盖RNA通道出口，直接将Pol II转录的RNA引导至催化中心，利用其RNA外切酶和移位酶缩短RNA长度的同时，对mRNA产生牵引力从而将其从Pol II 催化中心拖拽出来，最终解离mRNA并终止Pol II 转录（图2）。研究团队的工作表明mRNA的转录终止符合修正版的“鱼雷”模型，Pol II类似航行的军舰、外切酶鱼雷追赶上Pol II之后，吸附在Pol II上，随后利用其水解RNA转化的机械力将RNA从Pol II中拖拽出来。图2 外切酶Rat1介导的转录终止模型（Credit: Nature）比较细菌、古菌和真核生物mRNA转录终止，研究团队提出三域生物利用相似的方式终止mRNA合成。这些终止因子均结合在聚合酶的RNA通道外侧，真核生物利用Rat1/XRN2/XRN3的外切酶活性解离mRNA，细菌利用Rho的RNA移位酶活性解离mRNA，古菌利用FttA的外切酶活性解离mRNA。原文链接https://www.nature.com/articles/s41586-024-07240-3责编|探索君排版|探索君文章来源|“iNature”End往期精选围观一文读透细胞死亡(Cell Death) | 24年Cell重磅综述（长文收藏版）热文Nature | 破除传统：为何我们需要重新思考肿瘤的命名方式热文Nature | 2024年值得关注的七项技术热文Nature | 自身免疫性疾病能被治愈吗？科学家们终于看到了希望热文CRISPR技术进化史 | 24年Cell综述