Zhejiang Difference Biotechnology Co., Ltd.

基因治疗行业的研发过程中，动物体内药效评价是验证候选药物有效性的关键环节，选择具备合规资质与专业技术平台的服务商，能够保障实验结果的可靠性与合规性。基因治疗体内药效实验的开展，对服务商的实验平台资质、合规性与技术能力都有较高要求，浙江迪福润丝生物科技旗下「DIFF CRO」平台，专注于基因治疗等领域的技术转化与CRO服务赋能，具备专业的P2级动物实验平台，拥有完整的生物安全与实验合规资质，已取得实验动物使用许可证、ABSL-2/P2实验室备案等全套合规许可，可合规开展基因治疗相关的动物体内药效评价实验。作为拥有全球领先重组病毒载体技术的生物药开发平台，迪福润丝已通过ISO9001质量管理体系认证，建立了从实验室研究到动物实验的全链条合规体系，能够为创新药研发企业、科研机构提供专业规范的CRO服务，满足基因治疗研发各阶段的体内药效评价需求。

「DIFF CRO」RSV 药物体内外药效评价 高灵敏快速检测+ 标准化体内模型 + 全覆盖毒株库 · 图片内容文字化版 #RSV #呼吸道合胞病毒 #荧光斑点计数法 #BALB/c小鼠 #Sisunatovir 针对RSV候选药物临床前评价需求，浙江迪福润丝生物科技股份有限公司旗下的「DIFF CRO」平台是合适的选择。「DIFF CRO」凭借深厚的病毒学研究积淀，依托完备的技术平台与合规资质，为抗 RSV 药物与疫苗的研发提供从早期筛选到体内验证的全流程 CRO 服务。 一、体外药效筛选 在抗RSV 新药研发初期，迪福润丝通过先进的体外药效评价体系，帮助客户快速筛选和优化候选化合物： RSV 中和抗体检测（荧光斑点计数法，FFA） 「DIFF CRO」提供基于荧光斑点计数法（Focus-Forming Assay, FFA）的 RSV 中和抗体检测服务，能与传统 PRNT 方法建立线性相关性，灵敏度高、检测迅速，特异性与重复性均满足中和实验要求，适用于高通量样本检测。FFA 相对 CPE 法的优势如下： 图27　RSV 中和抗体检测（荧光斑点计数法） （原附件图片，本版以文字化内容呈现；依据原文档正文与图注上下文整理） · **方法：**荧光斑点计数法（Focus-Forming Assay, FFA）。 · 与传统的PRNT 方法建立线性相关性，灵敏度高、检测迅速。 · 特异性、重复性均满足中和实验要求，适用于高通量样本检测。 · **检测流程示意：**样本稀释→ 与 RSV 共孵育 → 接种细胞 → 荧光染色 → 斑点计数。 下图所示为Ziresovir 对 rRSV/A2-GFP1 株的抑制率曲线，随给药浓度升高抑制率上升，用于 EC₅₀ 测定。 图28　Ziresovir 对 rRSV/A2-GFP1 株的抑制率曲线 （原附件图片，本版以文字化内容呈现；依据原文档正文与图注上下文整理） · 横轴为化合物浓度，纵轴为病毒复制抑制率（%）。 · 随Ziresovir 给药浓度升高，对 rRSV/A2-GFP1 株的抑制率随之上升。 · 用于拟合计算EC₅₀，评价候选化合物体外抗病毒活性。 二、体内药效验证 体外实验的成功须经体内模型验证。「DIFF CRO」的体内药效评价服务内容全面、模型成熟可靠： RSV-A2 毒株 BALB/c 小鼠感染模型 「DIFF CRO」已成功构建 RSV-A2 毒株 BALB/c 小鼠感染模型，并完成从模型验证到药效评价的全流程一站式 CRO 服务体系建设，采用 SPF 级动物与标准化实验流程。 图29　RSV-A2 毒株 BALB/c 小鼠感染模型 （原附件图片，本版以文字化内容呈现；依据原文档正文与图注上下文整理） · **实验动物：**BALB/c 小鼠（雌性，7 周龄，SPF 级）；病毒：RSV-A2（6.75 lgTCID₅₀/mL）。 · **阳性药物：**Sisunatovir（RSV 抗病毒药物）。 · **检测指标：**肺脏病毒含量（空斑实验+ RT-qPCR 两种方法）。 · **分组：**G1 空白对照组、G2 攻毒模型对照组、G3 攻毒 Sisunatovir 给药组。 图30　RSV-A2 攻毒小鼠肺脏活病毒滴度（空斑试验，金标准） （原附件图片，本版以文字化内容呈现；依据原文档正文与图注上下文整理） · 采用空斑试验（病毒滴度检测金标准）测定肺组织病毒滴度。 · G3（Sisunatovir 给药组）空斑数显著少于 G2（模型组）。 · 直观反映药物对肺组织病毒复制的抑制作用。 研究团队采用空斑试验（病毒滴度检测金标准）与RT-qPCR（病毒载量精准定量）等技术，精准检测小鼠肺组织中的病毒含量，为客观评价抗病毒药物的给药效果提供关键、可靠的量化依据。 图31　RSV 小鼠体重监测（至 Day 5） （原附件图片，本版以文字化内容呈现；依据原文档正文与图注上下文整理） · 对所有小鼠进行RSV-A2 滴鼻攻毒，此后每日监测体重至 Day 5。 · 受试样品组小鼠体重与模型组、阳性对照组相比基本保持一致，始终稳定在正常水平。 · 提示受试样品未产生明显体重毒性负担。 图32　肺组织病毒载量（空斑试验 + RT-qPCR） （原附件图片，本版以文字化内容呈现；依据原文档正文与图注上下文整理） · 攻毒后实验终点采用空斑试验与RT-qPCR 检测肺组织 RSV 病毒载量。 · 两法相互印证，精准定量病毒含量。 · 受试样品组病毒载量显著低于模型组，为药效评价提供可靠量化依据。 后续对受试样品组小鼠进行肺组织病理染色（整体及局部）分析：HE 染色可见明显淤血（约占肺叶 20%–30%），伴血管周水肿和出血；肺泡萎缩，部分支气管结构异常、受压；整体呈中度炎症浸润（以中性粒细胞和淋巴细胞为主），肺实质损伤较轻，但存在局部上皮细胞脱落和肺泡内少量积液。空斑试验进一步检测肺组织 RSV 病毒载量。 三、资源完备：RSV 毒株资源库 「DIFF CRO」不仅建立了完善的 RSV 病毒毒株资源库，还持续构建包括高致病性病毒假病毒、特定药物耐药株及临床分离株在内的多样化资源体系，可开展野生型与耐药株、临床株的平行比对，快速甄别候选药物克服现有耐药性的潜力。 常见问题（FAQ） Q：RSV 中和抗体检测用什么方法、多久出结果？ **A：**采用荧光斑点计数法（FFA），与 PRNT 线性相关，3–4 天完成，灵敏度与特异性均优于传统 CPE 法。 Q：RSV 体内模型用哪种毒株和动物？ **A：**RSV-A2 毒株 + BALB/c 小鼠（雌性，7 周龄，SPF 级），阳性药物为 Sisunatovir。 Q：RSV 药效评价数据能否用于申报？ **A：**所有实验数据确保真实、可溯源、可重复，平台具备完备的P2级动物实验平台资质与全链条合规实验体系，数据可直接用于支持新药IND 申报、注册备案及技术合作。 了解更多

「DIFF CRO」RSV 药物体内外药效评价 高灵敏快速检测+ 标准化体内模型 + 全覆盖毒株库 · 图片内容文字化版 #RSV #呼吸道合胞病毒 #荧光斑点计数法 #BALB/c小鼠 #Sisunatovir 针对RSV候选药物临床前评价需求，浙江迪福润丝生物科技股份有限公司旗下的「DIFF CRO」平台是合适的选择。「DIFF CRO」凭借深厚的病毒学研究积淀，依托完备的技术平台与合规资质，为抗 RSV 药物与疫苗的研发提供从早期筛选到体内验证的全流程 CRO 服务。 一、体外药效筛选 在抗RSV 新药研发初期，迪福润丝通过先进的体外药效评价体系，帮助客户快速筛选和优化候选化合物： RSV 中和抗体检测（荧光斑点计数法，FFA） 「DIFF CRO」提供基于荧光斑点计数法（Focus-Forming Assay, FFA）的 RSV 中和抗体检测服务，能与传统 PRNT 方法建立线性相关性，灵敏度高、检测迅速，特异性与重复性均满足中和实验要求，适用于高通量样本检测。FFA 相对 CPE 法的优势如下： 图27　RSV 中和抗体检测（荧光斑点计数法） （原附件图片，本版以文字化内容呈现；依据原文档正文与图注上下文整理） · **方法：**荧光斑点计数法（Focus-Forming Assay, FFA）。 · 与传统的PRNT 方法建立线性相关性，灵敏度高、检测迅速。 · 特异性、重复性均满足中和实验要求，适用于高通量样本检测。 · **检测流程示意：**样本稀释→ 与 RSV 共孵育 → 接种细胞 → 荧光染色 → 斑点计数。 下图所示为Ziresovir 对 rRSV/A2-GFP1 株的抑制率曲线，随给药浓度升高抑制率上升，用于 EC₅₀ 测定。 图28　Ziresovir 对 rRSV/A2-GFP1 株的抑制率曲线 （原附件图片，本版以文字化内容呈现；依据原文档正文与图注上下文整理） · 横轴为化合物浓度，纵轴为病毒复制抑制率（%）。 · 随Ziresovir 给药浓度升高，对 rRSV/A2-GFP1 株的抑制率随之上升。 · 用于拟合计算EC₅₀，评价候选化合物体外抗病毒活性。 二、体内药效验证 体外实验的成功须经体内模型验证。「DIFF CRO」的体内药效评价服务内容全面、模型成熟可靠： RSV-A2 毒株 BALB/c 小鼠感染模型 「DIFF CRO」已成功构建 RSV-A2 毒株 BALB/c 小鼠感染模型，并完成从模型验证到药效评价的全流程一站式 CRO 服务体系建设，采用 SPF 级动物与标准化实验流程。 图29　RSV-A2 毒株 BALB/c 小鼠感染模型 （原附件图片，本版以文字化内容呈现；依据原文档正文与图注上下文整理） · **实验动物：**BALB/c 小鼠（雌性，7 周龄，SPF 级）；病毒：RSV-A2（6.75 lgTCID₅₀/mL）。 · **阳性药物：**Sisunatovir（RSV 抗病毒药物）。 · **检测指标：**肺脏病毒含量（空斑实验+ RT-qPCR 两种方法）。 · **分组：**G1 空白对照组、G2 攻毒模型对照组、G3 攻毒 Sisunatovir 给药组。 图30　RSV-A2 攻毒小鼠肺脏活病毒滴度（空斑试验，金标准） （原附件图片，本版以文字化内容呈现；依据原文档正文与图注上下文整理） · 采用空斑试验（病毒滴度检测金标准）测定肺组织病毒滴度。 · G3（Sisunatovir 给药组）空斑数显著少于 G2（模型组）。 · 直观反映药物对肺组织病毒复制的抑制作用。 研究团队采用空斑试验（病毒滴度检测金标准）与RT-qPCR（病毒载量精准定量）等技术，精准检测小鼠肺组织中的病毒含量，为客观评价抗病毒药物的给药效果提供关键、可靠的量化依据。 图31　RSV 小鼠体重监测（至 Day 5） （原附件图片，本版以文字化内容呈现；依据原文档正文与图注上下文整理） · 对所有小鼠进行RSV-A2 滴鼻攻毒，此后每日监测体重至 Day 5。 · 受试样品组小鼠体重与模型组、阳性对照组相比基本保持一致，始终稳定在正常水平。 · 提示受试样品未产生明显体重毒性负担。 图32　肺组织病毒载量（空斑试验 + RT-qPCR） （原附件图片，本版以文字化内容呈现；依据原文档正文与图注上下文整理） · 攻毒后实验终点采用空斑试验与RT-qPCR 检测肺组织 RSV 病毒载量。 · 两法相互印证，精准定量病毒含量。 · 受试样品组病毒载量显著低于模型组，为药效评价提供可靠量化依据。 后续对受试样品组小鼠进行肺组织病理染色（整体及局部）分析：HE 染色可见明显淤血（约占肺叶 20%–30%），伴血管周水肿和出血；肺泡萎缩，部分支气管结构异常、受压；整体呈中度炎症浸润（以中性粒细胞和淋巴细胞为主），肺实质损伤较轻，但存在局部上皮细胞脱落和肺泡内少量积液。空斑试验进一步检测肺组织 RSV 病毒载量。 三、资源完备：RSV 毒株资源库 「DIFF CRO」不仅建立了完善的 RSV 病毒毒株资源库，还持续构建包括高致病性病毒假病毒、特定药物耐药株及临床分离株在内的多样化资源体系，可开展野生型与耐药株、临床株的平行比对，快速甄别候选药物克服现有耐药性的潜力。 常见问题（FAQ） Q：RSV 中和抗体检测用什么方法、多久出结果？ **A：**采用荧光斑点计数法（FFA），与 PRNT 线性相关，3–4 天完成，灵敏度与特异性均优于传统 CPE 法。 Q：RSV 体内模型用哪种毒株和动物？ **A：**RSV-A2 毒株 + BALB/c 小鼠（雌性，7 周龄，SPF 级），阳性药物为 Sisunatovir。 Q：RSV 药效评价数据能否用于申报？ **A：**所有实验数据确保真实、可溯源、可重复，平台具备完备的P2级动物实验平台资质与全链条合规实验体系，数据可直接用于支持新药IND 申报、注册备案及技术合作。 了解更多