TSC2

导读：脂质纳米颗粒 （LNP） 在商业疫苗、临床阶段疫苗/治疗药物中被开发用作 RNA 治疗的非病毒递送载体。然而，基于LNP递送的RNA疗法具有肝脏趋向性，限制了其广泛的临床应用。 鉴于RNA在蛋白替代和基因编辑的应用潜质，其在遗传性肺病治疗方面的应用备注期待，如囊性纤维化、纤毛运动障碍和α -1抗胰蛋白酶缺乏症等。尽管RNA-LNP在全身给药后能够通过血流到达肺内腔，但在脾脏或肝脏中的脱靶转染会增加不良反应的风险。因此，肺靶向RNA递送策略的开发至关重要。 本期文章菌菌汇总了肺靶向LNP的开发进展，包括两个主要方向：① 全身给药条件下增强LNP的特异性递送，如使用基于永久性阳离子脂质的5组分LNP、含多尾可电离磷脂 （iPhos）的4组分LNP、含酰胺系列可电离脂质的4组分LNP；② 雾化给药条件下增强LNP-RNA的稳定性，如改善PEG脂质占比、添加赋形剂等策略。 01 永久性阳离子脂质-LNP 2020年，得克萨斯大学西南医学中心Daniel J. Siegwart课题组在Nature子刊Nat Nanotechnol（影响因子38.1）发表了肝外靶向SORT LNP的开发策略。通过在常规四组分LNP中添加补充成分（称为 SORT 分子）可以精准改变体内 RNA 递送位置。研究人员证实了，利用SORT 分子的百分比和生物物理特性，能够工程化设计LNP，实现RNA的特异性递送。 研究人员选择了一种永久性阳离子脂质1,2-二油酰-3-三甲基铵-丙烷 （DOTAP）用于SORT LNP的开发【永久性阳离子脂质定义为带正电荷、且不解离或pKa＞8的阳离子脂质】。结果显示，不含DOTAP的LNP-RNA主要富集在肝脏中；随着 LNP中DOTAP 摩尔比例的增加，产生的目的蛋白表达位置逐渐从肝脏移动到脾脏、然后到肺部，且DOTAP摩尔比为50%时最适合用于肺部递送。 此外，研究还通过CRISPR/Cas系统证明，由50% DOTAP组成的SORT LNP能够精准将Cas9 mRNA/gRNA递送至肺部并实现靶基因的编辑，同时55%DOTAP组成的SORT LNP能够将Cas9蛋白-gRNA复合物（RNP）递送至肺部并实现基因编辑。 此外，研究还评估了另外两种永久性阳离子脂质DDAB或EPC，将其掺入LNP中的表达谱DOTAP。 图示 含永久性阳离子脂质的SORT LNP平台 02 多尾可电离磷脂（iPhos）-LNP 除阳离子脂质外，磷脂也是LNP的重要组分。LNP中最常用的磷脂是 1,2-二硬脂酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱 （DSPC）和 1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺 （DOPE）。二者均拥有1 个在生物体中恒定不可逆的两性离子和两个疏水尾巴，缺乏可操纵的化学手柄。 2021年，Siegwart课题组继续在Nature Materials（影响因子37.2）期刊发表了一种保留四组分LNP的RNA靶向递送策略，他们筛选得到一种性能最佳的多尾可电离磷脂 （iPhos）9A1P9，其特征为包含一个可电离胺、一个磷酸基团和三个疏水尾部。与DOPE 和 DSPC 相比，iPhos 9A1P9的体内功效高出 40 ~ 965 倍。 此外，结合上述研究中使用的永久性阳离子脂质，配制得到肺特异性9A1P9-DDAB iPLNP，9A1P9-DDAB iPLNP 有效转染~34% 的所有内皮细胞、~20% 的所有上皮细胞和 ~13% 的免疫细胞，且能够递送Cas mRNA/gRNA至肺部并诱导肺部特异性基因编辑。 图示 基于多尾可电离磷脂 （iPLNP）的LNP 组分 03 酰胺系列可电离脂质-LNP 2022年，塔夫茨大学生物医学工程系研发人员在PNAS发表了一种新的肺靶向LNP开发策略。 LNP中可电离脂质是一种尾部含酯键的连接物，他们发现，将可电离阳离子脂质尾部的酯键替换为酰胺键（类脂分子113-N16B），能够将mRNA的递送位置从肝脏转移至肺部。 肺淋巴管平滑肌瘤病 （LAM）是一种罕见的遗传性肺病，其特征是由结节性硬化症复合体 1 或 2（Tsc1 或 Tsc2）基因的失活突变引起的异常 mTORC1 过度活跃。研究人员借助LAM 临床前模型，表明了113-N16B LNP成功将小鼠Tsc2 mRNA递送至肺部，并恢复其生物学功能，在减轻肿瘤负荷方面取得了显著的治疗效果。 这项研究表明，通过将LNP中脂质接头的酯键（ O 系列）更改为酰胺键（ N 系列），成功将 mRNA的递送谱从肝脏转移到肺，并在临床前模型中验证了其治疗肺部疾病的潜力。 图示 酰胺系列可电离脂质-LNP 04 LNP-RNA雾化稳定性改善 RNA-LNP的吸入给药是直接递送到肺部的有效途径。然而，雾化器产生的强大剪切力易影响RNA-LNP药物的稳定性和递送效率。因此，吸入给药的重点是优化吸入装置与纳米颗粒的相容性或抵抗剪切力。 Lokugamage等人报告了较高的PEG脂质占比，能够保护LNP免受雾化作用干扰，有利于mRNA在肺中的高效递送和表达。也有研究表明，优化PEG脂质的摩尔浓度和甾醇结构可以稳定雾化的mRNA-LNP，从而促进囊性纤维化肺中mRNA的表达。还有报道称，研究人员通过在雾化过程中添加赋形剂、优化LNP配方，从而增加电荷来抵抗雾化过程中LNP的聚集。 近期，上海交大章雪晴教授作为通讯作者在Nature Communications发表最新研究，他们提出了“LOOP”平台，用于开发具有卓越抗剪切力和高表达的 LNP。经LOOP平台优化的LNP具有高辅助脂质占比、酸性透析缓冲液和赋形剂辅助雾化缓冲液，在肺部表现出卓越的稳定性和增强的 mRNA 表达。这一递送平台能够将编码 IL-11 单链片段可变 （scFv） 的 mRNA有效递送至雄性小鼠的肺部，抑制肺部纤维化。该mRNA-LNP制剂在抑制成纤维细胞活化和细胞外基质沉积方面优于吸入和静脉注射IL-11 scFv（蛋白）。 05 总结 在各种mRNA递送载体系统中，脂质纳米颗粒（LNP）是临床上最先进的。然而目前mRNA/LNP 疗法的临床试验主要针对肝脏疾病，但mRNA疗法的潜力远不止于此。 为充分释放 mRNA/LNP 疗法的前景，目前的研究热点在LNP的肝外器官递送方面。本篇文章汇总了肺靶向LNP的开发进展，有望为肺部疾病的治愈提供可能。 参考文献  [1] Song D, Zhao Y, Wang Z, Xu Q. Tuning Lipid Nanoparticles for RNA Delivery to Extrahepatic Organs. Adv Mater. 2024 Sep 5:e2401445. doi: 10.1002/adma.202401445. [2] Cheng Q, Wei T, Farbiak L, Johnson LT, Dilliard SA, Siegwart DJ. Selective organ targeting (SORT) nanoparticles for tissue-specific mRNA delivery and CRISPR-Cas gene editing. Nat Nanotechnol. 2020 Apr;15(4):313-320. doi: 10.1038/s41565-020-0669-6. [3] Liu S, Cheng Q, Wei T, Yu X, Johnson LT, Farbiak L, Siegwart DJ. Membrane-destabilizing ionizable phospholipids for organ-selective mRNA delivery and CRISPR-Cas gene editing. Nat Mater. 2021 May;20(5):701-710. doi: 10.1038/s41563-020-00886-0. [4] Qiu M, Tang Y, Chen J, Muriph R, Ye Z, Huang C, Evans J, Henske EP, Xu Q. Lung-selective mRNA delivery of synthetic lipid nanoparticles for the treatment of pulmonary lymphangioleiomyomatosis. Proc Natl Acad Sci U S A. 2022 Feb 22;119(8):e2116271119. doi: 10.1073/pnas.2116271119. 识别微信二维码，添加生物制品圈小编，符合条件者即可加入 生物制品微信群！ 请注明：姓名+研究方向！ 版 权 声 明 本公众号所有转载文章系出于传递更多信息之目的，且明确注明来源和作者，不希望被转载的媒体或个人可与我们联系(cbplib@163.com)，我们将立即进行删除处理。所有文章仅代表作者观点，不代表本站立场。

来源：药渡 撰文：幻目     编辑：维他命 受全球经济下行压力和生物制药资本寒冬影响，生物医药行业裁员现象日益普遍。裁员原因包括被并购、产品开发失利、业务重组、降低管理成本等多方面。2024年8月，又有一些公司正在勒紧裤腰带裁员，详情下表所示。 表1. 8月药企裁员名单 8月30日 据美国证券交易委员会(SEC)的一份文件显示，在BioMarin宣布高管重组约一周后，这家生物技术公司正在裁员，在全球范围内裁员约225人。受影响的员工已于8月28日接到通知，裁员工作将在今年年底前基本完成。 BioMarin也曾在5月份进行了裁员。根据5月份提交给美国证券交易委员会(SEC)的文件显示，此次裁员影响了全球约170名员工，预计将在7月底前基本完成。在药渡5月药企裁员汇总文章中有提到：【药企裁员风波再起】五月汇总。 根据最新的文件，最近的裁员与BioMarin的重组、血友病基因疗法Roctavian的更新策略和BMN 293(一种肥厚性心肌病亚型的临床前基因疗法)的停止开发有关。 8月29日 Repare Therapeutics公司宣布，该公司将裁员约25%，其中大部分来自临床前团队。Repare表示，此次裁员与公司重新调整研发工作的战略优先级有关，以专注于推进临床阶段肿瘤项目的投资组合。 根据公告，该公司预计第三季度支出与裁员相关的非经常性现金支付总额约为150万至200万美元。该公司指出，预计每年将节省约1500万美元，这将使其现金流延长至2026年下半年。 8月29日 生物技术公司基因泰克(Genentech)将在其南旧金山总部裁员93名员工。包括工程师、经理、分析师和副总裁职位，但裁员最严重的是科学家职位。根据通知显示，裁员将于10月8日生效。 这是基因泰克公司2024年的第二轮裁员。今年4月，一位公司代表证实，该公司将在多个部门裁员约3%，预计将有400多个工作岗位受到影响。 本月早些时候，基因泰克宣布将重新调整对癌症研究的投资，关闭其癌症免疫小组。 8月27日 路透社援引瑞士报纸NZZ的报道称，拜耳正在裁员，这次将在瑞士巴塞尔的消费者保健国际总部裁员约150人。在拜耳巴塞尔的1000名员工中，裁员将主要影响消费者健康部门和支持该部门的行政职能部门，并将于2025年生效。 本月早些时候，该公司发布了第二季度财报，首席执行官比尔·安德森表示，消费者健康部门已经“恢复增长”，销售额增长5.3%，达到15.9亿美元。 巴塞尔裁员是拜耳2024年裁员计划中最新的一次，今年3月，该公司裁减了近一半的高管团队，从14人减少到8人。今年5月，该公司又裁员1500人，其中大部分是管理职位。 8月27日 根据在马萨诸塞州提交的《工人调整和再培训法案》通知，基因编辑初创公司Tome Biosciences将解雇131名员工，几乎是其全部员工。裁员将从11月1日持续到11月14日。 在给endpoint News的一份声明中，Tome首席执行官Kakkar拒绝提供有关重组的更多细节，例如在公司逐步关闭业务之际，是否会有一个小团队留下来管理公司等问题。 8月22日 精密肿瘤公司Aadi Bioscience宣布，为了在最大限度地扩大商业业务的同时保持现金流，将裁减80%的研发人员。 提交给美国证券交易委员会(SEC)的文件显示，到第四季度末，Aadi将裁掉22名员工，占其员工总数的32%。本月早些时候提交给SEC的一份文件显示，截至6月30日，Aadi拥有70名全职员工，其中包括48名研发人员。目前尚不清楚Aadi公司自6月份以来是否已经裁员，或者该公司是否计划在8月提交的文件中提到的22人之外再裁员，之前文件提到了裁员32%，现在到80%不清楚6月份以后是否有裁员，所以比例增加到了80。 Aadi公司在公告中表示，该公司暂停了西罗莫司白蛋白结合型纳米颗粒在实体肿瘤患者中用于TSC1或TSC2（结节性硬化病基因）失活改变的PRECISION1试验，因为该试验不太可能达到支持加速批准所需的疗效阈值。该公司还将暂停两项正在进行的西罗莫司白蛋白结合型纳米颗粒治疗晚期或复发性子宫内膜样型子宫内膜癌和神经内分泌肿瘤的2期临床试验的新入组。 8月19日 在其midomafetamine(MDMA)胶囊辅助治疗创伤后应激障碍的药物未能获得批准不到一周后，Lykos Therapeutics宣布将裁员约75%，作为重组的一部分。据STAT News报道，在裁员之前，Lykos约有100名员工。 8月9日，FDA发布了midomafetamine(MDMA)胶囊的完整回复函，称Lykos的新药申请(NDA)无法根据迄今提交的数据获得批准。在6月份的一次咨询委员会会议上，FDA的精神药理学药物咨询委员会以10比1的投票结果反对推荐这种治疗方法，称其风险大于益处。详情可见药渡前文：Lykos裁员75%！“一药不成万骨枯”，FDA审批下的药企裁员众生相。 根据8月15日的公告，此次重组旨在简化临床开发和监管参与的组织，因为它准备重新提交MDMA胶囊的NDA。 8月15日 Galera Therapeutics宣布，该公司将在8月31日将员工人数减少到3人，因为该公司正在计划关闭。根据SEC当天提交的文件，Galera董事会于8月8日批准了一项清算和解散计划，并于8月9日解雇了22名员工，占员工总数的70%。 Galera专注于放射治疗药物，该公司在公告中表示，已停止所有临床试验活动和候选产品的开发，以探索该业务的潜在战略替代方案。现在，它将准备在10月17日左右就解散计划进行股东投票。 根据Galera的公告，截至6月30日，该公司拥有现金和现金等价物1070万美元，预计至少在未来12个月内将用于支付运营费用，包括与解散相关的成本。 8月15日 在将Illumina剥离Grail不到两个月后，该公司宣布裁员约350人。根据SEC的一份文件显示，截至6月30日，裁员人数约占员工总数的25%。 根据文件显示，专注于癌症诊断的Grail也将取消2024年的招聘计划。Grail的一位发言人称，大约有150个空缺职位被取消。 根据SEC的文件，裁员是重组计划的一部分，旨在重新调整资源优先级，专注于公司核心的多癌早期检测业务，并减少总体支出，因为Grail正在努力完成注册研究和Galleri的上市前批准申请提交。根据公告，由于整体成本的降低，Grail预计现有的现金流维持运营时间将从2026年下半年延长到2028年。 8月14日 Viracta Therapeutics在一份新闻稿中宣布，该公司将裁员23%。这家临床阶段精密肿瘤公司此前在7月29日提交给SEC的文件中提到了裁员，称强制裁员将于本月完成。Viracta没有具体说明裁员人数，但5月9日提交给SEC的一份文件显示，截至3月31日，该公司有40名全职员工，其中包括30名研发人员。 根据新闻稿，Viracta已调整其资源，优先考虑其爱泼斯坦-巴尔病毒阳性(EBV+)淋巴瘤项目。该公司指出，它从与FDA的会议中获得了积极的反馈，明确了nana-val（nanatinostat联用valganciclovir)在复发或难治性EBV+外周T细胞淋巴瘤患者初始注册的潜在监管途径。 8月14日 在8月12日提交给SEC的文件中，Boundless Bio宣布“适度裁员”。这家临床肿瘤公司没有说明有多少员工被解雇。然而，5月13日提交给SEC的文件显示，截至5月6日，该公司有72名全职员工。 在最近提交的文件中，该公司宣布打算缩减早期药物发现工作，包括减少员工人数，以延长运营跑道。Boundless指出，根据目前的运营计划，截至6月30日，公司现有的现金、现金等价物和短期投资为1.793亿美元，足以支撑公司到2026年第四季度。 此次强制减持发生在Boundless宣布上市计划约5个月后。根据8月12日提交的文件，在扣除承销折扣、佣金和其他发行费用后，首次公开募股的净收益约为8770万美元。 8月13日 根据8月7日SEC的一份文件，FibroGen将在旧金山裁员127人，此前曾宣布裁员75%，包括此次的127人。这家专注于研发抗癌新药的生物制药公司于8月2日通知了员工。 根据SEC提交的文件，FibroGen预计将在2025年第一季度末完成大部分裁员。该公司估计，将产生1600万至1800万美元的非经常性费用，这与其减少运营费用的总体计划有关，主要包括遣散费、通知费、累计休假、工资税和员工福利。 根据FibroGen公司7月31日的声明，裁员是由于两项晚期试验未能达到主要的总生存期终点：一项II/III期试验研究了该公司的实验药物pamrevlumab与吉西他滨联合用于转移性胰腺导管腺癌(mPDAC)患者的一线和二线治疗，另一项单独的III期试验评估了pamrevlumab与吉西他滨或folfirinox联合治疗胰腺癌。该公告还指出，该公司正在实施一项“立即且显著”的成本削减计划，以终止pamrevlumab项目。 8月12日 根据8月1日的警告通知，Ajinomoto生物制药服务公司是一家合同开发和制造组织，将于9月30日起裁员71人。据该公司称，这一数字占该公司美国员工总数的13%。 该公司还报道称，此次裁员是一项更大计划的一部分，该计划旨在整合Ajinomoto在俄亥俄州哥伦布市的原料药生产，该工厂是一家CDMO公司，在2023年以6.2亿美元收购Forge Biologics时获得的。 8月12日 8月7日SEC提交的一份文件显示，专注于新型小分子药物的生物制药公司AN2Therapeutics将裁员约50%。早前提交给SEC的一份文件显示，截至2月29日，该公司在临床操作、临床开发、研究、制造、监管和质量等领域拥有41名全职员工。 在最近的文件中，AN2指出，裁员应该在2024年底之前基本完成，其中包括8月30日公司首席医疗官Paul Eckburg的离职。Eckburg将在该日期之后为该公司提供长达一年的咨询服务。 根据SEC提交的文件，此次裁员与AN2在EBO-301研究终止后计划的重点转移有关，EBO-301研究评估了Epetraborole治疗难治性鸟分枝杆菌（MAC）肺病。此次裁员也是为了进一步扩大公司的运营资本。8月8日的一份新闻稿称，AN2计划加快其硼化学平台的研发工作。 8月8日 根据SEC提交的一份文件，Entero Therapeutics公司将解雇所有非必要员工，并终止首席执行官James Sapirstein和总裁Jack Syage的雇佣关系，但Sapirstein将继续担任顾问。Entero Therapeutics是一家处于后期临床阶段的生物制药公司。6月初，该公司有16名员工和6名全职顾问。 今年5月，Entero更名为Entero Therapeutics，原名First Wave BioPharma。该公司最近与ImmunogenX合并。根据SEC的文件，8月2日，ImmunogenX收到了一份违约通知，要求立即支付所有债务，总额约为700万美元。 根据该文件，Entero将搬出其位于佛罗里达州博卡拉顿的办公室，暂停非必要的研发活动，并正在探索为公司利益相关者实现价值最大化的方法，包括但不限于筹集资金和重组债务。 8月7日 基因和细胞治疗公司Precigen宣布，将裁员20%以上。根据公告，这些战略变化大大减少了非优先项目所需的资源，并将使公司能够专注于PRGN-2012的商业化前工作，PRGN-2012是其用于复发性呼吸道乳头状瘤病的基因疗法。截至2022年底，Precigen拥有约190名员工。 8月6日 住友制药美国公司(Sumitomo Pharma America)将在马萨诸塞州马尔伯勒(Marlborough)裁员53人。该公司美国总部位于剑桥，今年3月已宣布在美国裁员400人。 8月6日 百时美施贵宝(Bristol Myers Squibb)宣布将在今年裁员2200人。该公司在7月份的一份警告通知中披露，该公司将裁减新泽西州劳伦斯维尔(lawrencville)的117名员工。在最新一轮裁员之前，劳伦斯维尔在今年3月和5月进行了其他裁员。 8月2日 基因治疗公司uniQure宣布，该公司将裁员65%，总计300人，其中包括首席运营官皮埃尔·卡洛兹。 uniQure首席执行官马特•卡普斯塔在声明中表示：“我们已经采取了有针对性的措施，大幅降低运营成本，简化运营，延长现金流。”“这些行动旨在确保我们拥有实现关键里程碑和推动股价所需的资金，同时我们努力为有需要的患者提供变革性药物。” 8月2日 Vir Biotechnology宣布，该公司将裁员25%，在其运营部门裁减约140个职位。此次削减是其研发重点重大转变的一部分，该生物技术公司将放弃其在COVID-19和流感方面的工作，以及基于T细胞的病毒载体平台，转而专注于乙肝和丁肝项目，并通过与赛诺菲的交易进入癌症领域。 8月1日 Arbutus Biopharma在其第二季度财报中宣布，该公司将裁员40%，以便将资源集中在慢性乙型肝炎感染的二期临床研究上。Arbutus临时总裁兼首席执行官Michael J. McElhaugh在公告中表示：“我们做出了一个艰难的决定，即停止我们的乙型肝炎药物研究工作，并减少我们的员工人数，从而实现到2026年第四季度的预计现金流充足。” 8月1日 总部位于波士顿的HilleVax公司宣布，将裁员41人，约占其员工总数的40%。该公司在公告中表示，裁员“旨在保留现金，同时在公司探索持续开发候选疫苗的潜力时保持核心能力”。HilleVax于2021年从武田剥离出来，以继续开发其诺如病毒疫苗。 8月1日 拜耳公司在7月发布的一份预警通知中透露，该公司将在新泽西州惠帕尼总部进一步裁员70人。此次裁员将于10月底生效。今年5月，拜耳宣布将在2024年裁员约1500人，主要是取消管理职位。 *声明：本文仅是介绍医药疾病领域研究进展或简述研究概况或分享医药相关讯息，并非也不会进行治疗或诊断方案推荐，也不对相关投资构成任何建议。内容如有疏漏，欢迎沟通指出！ 阿斯利康揭示口服PROTACs设计指南，里宾斯基五规则等再添“强力盟友” 一文读懂：纳米药物的“前世今生” 告别肥胖困扰！最新临床数据及上市减肥药全盘点

*仅供医学专业人士阅读参考代谢状态好，哪哪儿都好，人体整体是这个道理，作为人体一部分的CD8+T细胞当然也不例外，但各位想必也知道，在癌症来袭时想让CD8+T细胞保持正常的代谢状态可并非易事，敌我双方围绕着代谢的争斗之激烈，都快让奇点糕脑补出“历代大规模征战XX次”的台词了。从治疗干预的角度来说，要想帮CD8+T细胞一把，就得找到对维持它们代谢稳态有重要意义的靶点。而近日，中国医学科学院基础医学研究所/北京协和医学院基础学院杜文静团队在Molecular Cell期刊上发表的最新研究成果，就证实了苹果酸酶2（Malic enzyme 2, ME2）正是对维持CD8+T细胞代谢稳态和抗肿瘤免疫功能有重要意义的关键酶[1]！该研究揭示，ME2缺失可阻断CD8+T细胞的三羧酸（TCA）循环，导致中间代谢产物富马酸（fumarate）在细胞内堆积，而富马酸会通过与ATP竞争性结合死亡关联蛋白激酶1（DAPK1），抑制DAPK1及其下游的TSC2-mTORC1通路活性，使CD8+T细胞的活化和抗肿瘤功能受损，因此ME2正常存在，才能让CD8+T细胞好好履行抗癌的职责。论文核心机制总结哺乳动物细胞内的苹果酸酶有ME1，ME2和ME3三种异构体，而ME2作为线粒体中主要存在的异构体，其功能是将TCA循环的中间产物苹果酸转化为丙酮酸（并伴随NADPH产生），对细胞代谢有重要影响，所以ME2也会影响细胞功能的方方面面。但此前围绕ME2与癌症关系开展的大量研究，基本都只在癌细胞上进行，CD8+T细胞有点被冷遇了。开展本次研究的杜文静教授团队，已经对ME2及苹果酸酶代谢途径的领域开展过大量探索[2-3]，这回就把焦点转到了CD8+T细胞身上，实验第一步是条件性敲除各类T细胞的ME2，这不影响T细胞正常的发育过程和外周T细胞稳态，但在结直肠癌模型小鼠身上，敲除ME2则会显著加速肿瘤生长、缩短小鼠生存时间，且浸润到肿瘤的T细胞数量明显减少。细分肿瘤中T细胞亚群的话，数量显著下降且功能减退的正是CD8+T细胞，细胞实验也明确证实，敲除ME2会使CD8+T细胞的增殖标志物Ki-67、激活标志物（CD25/44/69）和细胞因子表达减少；来自人类黑色素瘤患者的单细胞测序数据也显示，肿瘤浸润CD8+T细胞的ME2表达水平，与多个CD8+T细胞的细胞毒性功能相关基因表达正相关。以上的一系列实验和数据，足以证实ME2对维持CD8+T细胞介导的抗肿瘤免疫应答至关重要，原因肯定也和ME2参与影响的代谢功能有关，首先就是线粒体氧化磷酸化（OXPHOS）速率的下降，同时ATP和NADH的生成减少；接下来借助代谢流分析，研究者们发现ME2缺失直接阻断了CD8+T细胞的TCA循环，导致上游代谢产物堆积、下游代谢产物减少。研究者们用水平有变的各种代谢产物处理CD8+T细胞，发现仅有上游代谢产物之一的富马酸，会起到类似敲除ME2一样全面抑制CD8+T细胞的作用；而富马酸的直接结合对象就是DAPK1，且属于与ATP的竞争性结合，由此抑制DAPK1的激酶活性，再影响下游的TSC2-mTORC1信号通路，导致CD8+T细胞的活化、效应功能和抗肿瘤活性全面受损。敲除ME2会导致TCA循环中断，积聚的富马酸则结合DAPK1来抑制CD8+T细胞研究者们表示，本次研究揭示的ME2、富马酸及DAPK1对CD8+T细胞功能的影响都是此前未知的，有助于更好地了解影响CD8+T细胞的代谢物质，看来代谢研究真是个大舞台，类似的惊喜可能还有很多，就等研究来~参考文献：[1]Zhang Z, Yang Y, Chen Y, et al. Malic enzyme 2 maintains metabolic state and anti-tumor immunity of CD8+ T cells[J]. Molecular Cell, 2024.[2]Zhao M, Yao P, Mao Y, et al. Malic enzyme 2 maintains protein stability of mutant p53 through 2-hydroxyglutarate[J]. Nature Metabolism, 2022, 4(2): 225-238.[3]Li W, Kou J, Zhang Z, et al. Cellular redox homeostasis maintained by malic enzyme 2 is essential for MYC-driven T cell lymphomagenesis[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences, 2023, 120(23): e2217869120.本文作者丨谭硕