RASGRP1

*仅供医学专业人士阅读参考KRAS基因变异在人类多种癌症类型中拥有很高的出镜率，其中G12C突变在非小细胞肺癌（NSCLC）和结直肠癌（CRC）中分别占到13%和3%的比例。KRAS在不活跃（GDP结合）和活跃（GTP结合）状态之间反复横跳，它的激活突变通常会导致其持续处于GTP结合状态，增强下游信号传导并引发不受控制的细胞生长，驱动肿瘤发生进展。近年来，KRASG12C特异性抑制剂如Sotorasib和Adagrasib已经在KRASG12C突变型NSCLC中获得加速批准，这些药物通过锁定KRASG12C在其非活跃的GDP结合状态，从而抑制RAS-MAPK信号通路，阻断肿瘤细胞的生长和存活。KRASG12C抑制剂登上临床是第一步，紧随而来的是耐药性难题。肿瘤细胞堪比狡兔三窟，即使KRAS被控制住仍有其它方法重新激活RAS-MAPK信号通路，结果导致许多患者出现疾病进展和耐药性。因此，需要有效的联合治疗方法来改善KRASG12C抑制剂的疗效。勃林格殷格翰（BI）公司的Marco H. Hofmann和Venu Thatikonda等人发现，在KRASG12C突变驱动的肺癌模型和结直肠癌模型中，靶向调节RAS活性的关键蛋白SOS1的抑制剂BI-3406，能够显著增强KRASG12C抑制剂的抗肿瘤效果，这种联合治疗策略能够更全面地抑制RAS-MAPK信号通路，并在一些已经对KRASG12C抑制剂产生耐药的模型中重新激活抗肿瘤反应。论文于近日发表在《自然·癌症》上[1]。论文首页截图联合靶向KRAS的上游调节因子、将突变型和野生型RAS保持在GDP结合的非活跃状态，能够在临床前模型中改善KRASG12C抑制剂的治疗反应，增强RAS-MAPK通路的阻断效果。基于此，KRASG12C抑制剂与SHP2抑制剂（如TNO155）的联合治疗目前正在临床试验中，而与EGFR抑制剂西妥昔单抗的联合使用已在今年六月获得批准用于治疗KRASG12C阳性结直肠癌。另一方面，勃林格殷格翰（BI）研究团队还开发了靶向KRAS通路负反馈调节中关键蛋白SOS1的抑制剂BI-3406[2]。在对KRASG12C驱动的NSCLC细胞系进行的高通量药物筛选中，研究团队发现KRASG12C抑制剂与179种小分子抑制剂联合使用能显著增强抗增殖效果。其中包括SOS1抑制剂（BI-3406）、SHP2抑制剂（例如TNO155、SHP099）、EGFR抑制剂（例如西妥昔单抗）等阻断KRAS上游信号的药物，也包括作用于KRAS下游信号的药物，如MEK抑制剂（曲美替尼）、PI3K抑制剂（BYL719）。他们利用另外14种KRASG12C驱动的人类细胞系进行体外实验，以及细胞系异种移植和患者异种移植的小鼠模型进行体外实验，证实了联合治疗的抗增殖效果，其中Adagrasib联合BI-3406、TNO155、西妥昔单抗、SHP099显示了强烈的增效作用。在NSCLC小鼠模型中，单独使用Adagrasib的肿瘤生长抑制率（TGI）在第16天时为83%，表现出早期耐药性；而与BI-3406或TNO155联合治疗的TGI在第16天分别达到106%、104%，肿瘤体积相对基线平均下降18%、13%。在结直肠癌小鼠模型中，Adagrasib单独治疗、与BI-3406联合治疗、与西妥昔单抗联合治疗的TGI在第42天达到108%、119%、121%，平均肿瘤体积下降35%、67.8%、74.4%。同样，在其他KRASG12C驱动的肿瘤小鼠模型中，与BI-3406联合治疗比单独使用Adagrasib诱导的抗肿瘤活性更强，这种效果与Adagrasib联合SHP2抑制剂或西妥昔单抗的治疗效果相似。联合治疗在非小细胞肺癌和结直肠癌异种移植模型中的疗效通过在体外和体内实验评估，研究团队发现联合使用这些抑制剂能有效降低KRAS-GTP水平，并抑制KRAS下游的MAPK信号通路活性。体外实验结果显示，Adagrasib治疗能减少GTP结合的KRAS水平，联合治疗则进一步加深了这一效果，并抑制其他RAS异构体的活性上调，表明联合治疗能通过阻断补偿性机制来增强抗肿瘤效果。在体内的肿瘤模型中，研究团队通过药效动力学生物标记物评估了单药和联合治疗对肿瘤进展的影响。在NSCLC小鼠模型中，Adagrasib联合BI-3406在4小时和48小时后引起了最显著的转录组改变，与细胞生长、存活、表皮间充质转换（EMT）、MYC靶基因以及KRAS活性上调相关的基因表达下调，并且较单药治疗相比诱导了更强的抗增殖作用。结直肠癌小鼠实验结果同样如此。既往研究提示，即使能够有效抑制肿瘤细胞增殖，如果MAPK通路活性发生反弹，可能导致KRASG12C抑制剂的耐药性。于是更深入地分析显示，在NSCLC小鼠模型中，在最后一次服药后48小时，仅在Adagrasib联合BI-3406治疗的肿瘤中观察到MAPK通路活性的持续抑制，而在单独使用Adagrasib或联合TNO155治疗的肿瘤中，则分别观察到显著和部分的MAPK活性反弹。单一药物或联合治疗对MAPK信号和其他通路的调节这些结果表明，联合使用Adagrasib和RAS-GTP的抑制剂能有效增强KRASG12C靶向治疗的效果和持久性。与单药治疗相比，联合治疗更强地抑制了RAS-MAPK通路，显著提高抗肿瘤效果。研究团队最后关注了Adagrasib的耐药性，结果显示联合使用BI-3406能够克服其原发性耐药并重新建立肿瘤对药物的敏感性。他们在结直肠癌小鼠模型中观察到，Adagrasib治疗复发的肿瘤中MRAS和RasGRP1编码基因上调，说明可能与获得性耐药相关。在这些复发肿瘤中，Adagrasib联合BI-3406或TNO155治疗可有效诱导肿瘤退缩，联合西妥昔单抗治疗可诱导肿瘤生长停滞。NSCLC模型中观察到类似结果，Adagrasib与BI-3406联合治疗显示可以进一步下调MAPK通路的活性，且所有治疗均耐受性良好。对Adagrasib耐药的肿瘤模型对Adagrasib+SOS1抑制剂的组合敏感，机制见图f 总之，这些发现强调了在KRAS突变驱动的结直肠癌或非小细胞肺癌中采用SOS1抑制剂联合KRAS抑制剂的潜力，这种组合策略有望改善并延长患者的临床反应。参考文献：[1]https://www.nature.com/articles/s43018-024-00800-6[2]Hofmann, M. H., Gmachl, et al (2021). BI-3406, a Potent and Selective SOS1-KRAS Interaction Inhibitor, Is Effective in KRAS-Driven Cancers through Combined MEK Inhibition. Cancer discovery, 11(1), 142–157. https://doi.org/10.1158/2159-8290.CD-20-0142本文作者丨张艾迪

关注并星标CPHI制药在线   二酰基甘油激酶家族（DGK）在真核细胞中控制细胞的不同生命过程，如细胞分化、增殖、凋亡和细胞骨架重组等，能够催化二酰基甘油（DAG）转化为磷脂酸（PA），调节信号转导。       目前，在哺乳动物真核细胞中发现了α、β、δ、ε 和 ζ等10种DGK同工酶。研究发现，DGKs不仅能调节体内外抗原抗体反应，还能调节肿瘤细胞的增长和侵袭。       DGKζ作为IV型DGK家族同工酶的一种，在细胞的生命过程中发挥重要作用，主要在脑、骨骼肌、心脏和胸腺中高表达。       在T细胞中，DGKζ作为DAG信号传导的选择性负反馈调节剂，影响RasGRP和蛋白激酶Cθ的表达，限制Ras-ERK-PKC信号通路的激活，从而调控胸腺细胞和T细胞功能。       研究发现，DGKζ缺陷的小鼠细胞毒性T淋巴细胞具有增强抗病毒和抗肿瘤活性的作用，在病理性细胞中可能有抑制肿瘤细胞诱导T细胞耐受的作用。在嵌合抗原受体T细胞（CAR-T）细胞中，抑制DGKζ基因表达可以增强CAR-T细胞活性，从而达到抗肿瘤的目的。       总之，当前研究发现DGKζ过表达能调节小脑抑郁症、抑制神经元细胞增殖、调节心肌肥厚、控制心率失常和减少心力衰竭等，并且能调节骨稳态，抑制其表达能增强免疫系统作用并抑制肿瘤细胞增殖，促进肿瘤细胞凋亡和细胞周期阻滞等。       目前，全球已出现几款在研DGKζ抑制剂，如拜耳的BAY 2965501、安斯泰来的ASP1570、百济神州的BGB-30813。       BAY 2965501是一种协同ATP、高选择性、口服给药的DGKζ抑制剂，通过抑制DGKζ可减轻T细胞和NK细胞中的细胞内免疫检查点，被开发用于治疗晚期实体瘤，目前处于1期临床。值得一提的是，BAY 2965501化学结构亮相2023 AACR大会。       BAY 2965501化学结构       ASP1570是一种新型DGKζ抑制剂，具有增强DAG下游信号通路的潜力，可以激活T细胞，而不受PD-1信号通路的影响，从而增强肿瘤杀伤作用。       临床前研究表明：ASP1570可恢复被多种免疫抑制信号（PD-1、转化生长因子β、前列腺素E2和腺苷）抑制的T细胞功能，并诱导MC38（抗PD-1敏感）和B16-F1（肿瘤浸润淋巴细胞匮乏，抗PD-1不敏感）小鼠模型中的肿瘤生长抑制。       目前，ASP1570治疗局部晚期或转移性实体瘤的1/2期临床试验正在进行中。在国内，ASP1570于今年6月在国内获批临床，用于治疗局部晚期或转移性实体瘤。       BGB-30813是一种新型DGKζ抑制剂，具有增强DAG下游信号通路的潜力，可以激活T细胞，从而增强肿瘤杀伤作用。       今年6月，BGB-30813在Clinicaltrials.gov网站上注册了一项1期临床试验，旨在探索其单药以及PD-1联用治疗晚期实体瘤，计划入组289例患者。今年7月，BGB-30813在国内申报临床。       总     结DGKζ作为肿瘤药研发的潜在新靶点，当前布局企业较少，据不完全统计仅拜耳、安斯泰来和百济神州三家。新药研发是一项高风险项目，DGKζ抑制剂也不例外，在研药物最快处于2期临床，未来如何还需拭目以待。【企业推荐】智药研习社近期课程报名来源：CPHI制药在线声明：本文仅代表作者观点，并不代表制药在线立场。本网站内容仅出于传递更多信息之目的。如需转载，请务必注明文章来源和作者。投稿邮箱：Kelly.Xiao@imsinoexpo.com▼更多制药资讯，请关注CPHI制药在线▼点击阅读原文，进入智药研习社~