BET x p300-CBP transcription factors

感谢关注转发，欢迎学术交流 回复药渡Cyber，领取文献原文 请点击此处链接观看CyberSAR系统详细使用教程 快看版 CBP/p300是关键的表观遗传调节因子，也是治疗去势抵抗性前列腺癌和其他类型的癌症有潜力的靶点。本文报道了一种CBPD-268的发现和表征，是一种极其有效且可以口服的CBP/p300蛋白PROTAC降解剂。CBPD-268在三种雄激素受体阳性前列腺癌细胞中诱导CBP/p300降解，DC50≤0.03nM，Dmax>95%，导致癌细胞生长抑制。CBPD-268在小鼠和大叔中具有优异的口服生物利用度。口服0.3-3mg/kg的CBPD-268会导致肿瘤组织中CBP/p300持续降解，并在小鼠VCaP和22Rv1异种移植肿瘤模型中实现强抗肿瘤活性，包括VCaP肿瘤模型中的肿瘤消退。CBPD-268在小鼠和大鼠中具有良好的耐受性，并且显示治疗指数>10。综合这些结果，CBPD-268是一种有效的CBP/p300降解剂，可作为潜在的新癌症疗法。 药渡CyberSAR系统提供对CBP/p300靶点分子的深入解析，系统通过聚类结构视图和原始结构视图，展示了与靶点相关的活性分子，并以研发阶段时光轴的形式呈现了潜力Hit。此外，CyberSAR还提供了适应症和试验设计的可视化分析，帮助研发人员快速获取靶向结构信息，开拓研究思路。尽管CyberSAR在分子的初步开发中未被使用，但其在解析和优化药物分子方面显示出巨大的应用潜力。 图1.CBPD-268发现和分子优化过程 正文版 前列腺癌仍然是全球男性癌症相关死亡的主要原因。雄激素受体（AR）的激活会驱动前列腺癌发生和生长。阻断雄激素合成的阿比特龙和第二代AR拮抗剂（如恩杂鲁胺和达罗他胺）用于治疗前列腺癌，包括转移性趋势抵抗性前列腺癌（mCRPC）。虽然这些疗法可有效治疗mCRPC并提高患者生存率，但患者通常会在18个月内产生耐药性。对AR靶向治疗产生耐药性的患者，AR信号传导继续在其发展和耐药过程中发挥重要作用。mCRPC的进展主要是由于AR信号传导的改变，包括AR基因扩增、AR配体结合域（LBD）突变以及AR-V7和其他AR剪接变体（AR-SV）的表达是一些主要的耐药机制。由于目前批准的AR靶向治疗无法有效解决这些耐药机制，因此需要开发新的前列腺癌的治疗方法，特别是mCRPC。 组蛋白乙酰转移酶结合蛋白（CBP）及其密切相关的同源蛋白E1A结合蛋白（p300），通常称为CBP/p300，是AR和其他转录因子的关键转录共激活因子。CBP/p300蛋白表达增加已被证实与前列腺癌的不良治疗结果和生存期短密切相关。被认为是针对当前批准的AR靶向治疗的另一种重要的耐药机制。通过siRNA或shRNA敲低CBP/p300可有效抑制AR和AR-SV的信号传导。使用强效、选择性、可口服的CBP/p300溴结构域抑制剂CCS1477、已证明抑制CBP/p300可有效降低AR-、AR-SV-、c-Myc及其调节基因的表达，阻断AR+前列腺癌的细胞增殖细胞系，并在表达AR-SV的22Rv1肿瘤模型中实现强大的体内抗肿瘤活性。CCS1477目前正处于前列腺癌的临床II期试验中。针对CBP/p300代表了治疗前列腺癌（尤其是mCRPC）的一种新治疗策略。 CBP/p300是由多个功能结构域组成的大分子蛋白。除了溴结构域（BRD）外，CBP/p300还包括组蛋白乙酰转移酶（HAT）结构域、植物同源结构域（PHD）指结构域、核受体相互作用结构域（RID）、激酶诱导的CREB相互作用结构域（KIX）、半胱氨酸/组氨酸区域（TAZ1/CH1和TAZ2/CH3）以及干扰素反应结合结构域（IBiD）。目前已经发现了多种CBP/p300抑制剂，如溴结构域抑制剂CBP30、ICBP112、GNE-049及其类似物GNE-781、CCS147717和Y08284，以及HAT结构域抑制剂C464、A-485、B026、DS-9300和CPI-1612（如图1所示）。溴结构域抑制剂和HAT结构域抑制剂的组合可以协同抑制前列腺癌细胞的生长。此外，据报道，在溴结构域抑制剂CCS1477治疗后，去势抵抗性前列腺癌细胞系中的CBP/p300 mRNA水平在用溴结构域抑制剂治疗后显著上调。可能会影响CBP/p300溴结构域抑制剂治疗前列腺癌的疗效。因此，作者假设直接降解CBP/p300蛋白可能会导致比抑制溴结构域或HAT结构域更完全抑制其生物学活性功能，从而对前列腺癌和其他癌症更强的治疗功效。 近年来，利用蛋白水解靶向嵌合体（PROTAC）技术诱导蛋白质降解已成为一种非常具有吸引力的策略，用于开发治疗癌症的全新疗法。目前，已经由20多种PROTAC降解剂进入临床研究，并且具有广阔的临床应用前景，如ARV-110（一种雄激素受体PROTAC降解剂）和ARV-471（一种雌激素受体PROTAC降解剂）。而CBP/p300的有效PROTAC降解剂如dCBP-1、JQAD1和JET-209（图1）之前已报道过，它们都没有口服生物活性。由于PROTAC降解剂由两个小分子配体组成，通过连接子连接，因此分子量通常再800-1200，远高于传统的口服小分子。因此，设计口服活性PROTAC降解剂一直是主要的药化重点，而口服生物可利用的PROTAC降解剂近报道了非常有限数量靶标，包括AR、ER、BTK和IRAK4，出于临床开发目的，非常需要开发有效的可口服的CBP/p300 PROTAC降解剂。 本文主要报道了基于CBP/p300溴结构域抑制剂GNE-049和作者所在实验室开发的新的CRBN配体TX-16的一系列新型CBP/p300 PROTAC降解剂的设计、合成和生物学评价，发现了CBPD-286是一种异常有效且口服有效的CBP/p300降解剂。CBPD-268能够在细胞内以皮摩尔浓度诱导 CBP/p300 蛋白深度降解，并有效抑制三种AR+晚期前列腺癌细胞系的细胞生长。在小鼠和大鼠中取得了优异的口服生物利用度并表现出良好的整体药代动力学（PK）特征。口服CBPD-268可有效消除小鼠肿瘤组织中的CBP/p300蛋白，并在耐受剂量方案的前列腺癌异种移植小鼠模型中实现强大的抗肿瘤功效。 设计有效且可口服的CBP/p300降解剂 虽然许多PROTAC降解剂已被报道可用于不同的蛋白质靶标，但口服活性PROTAC降解剂仅针对少数靶标实现，包括ER、AR、BRD9、IRAK4和 BTK。要获得有效且口服有效的CBP/p300 PROTAC降解剂，需要选择合适的E3连接酶配体CBP/p300配体至关重要。 由于cereblon（CRBN）配体已成功用于口服活性PROTAC降解剂的开发，因此重点设计使用cereblon配体的口服活性PROTAC CBP/p300降解剂。在之前的研究中，开发了一种优化的cereblon配体，即TX-16，与托沙利度胺和来那度胺相比，它对cereblon具有相似的结合亲和力，并表现出良好的细胞通透性和优异的PK特性。使用TX-16，成功开发了强效且口服有效的ER和AR PROTAC降解剂，它们在不同物种之间具有理想的PK特性。因此，在本研究中采用CRBN配体TX-16来设计口服生物可利用的CBP/p300 PROTAC降解剂。 作者选择溴结构域配体GNE-049作为CBP/p300配体，用于设计有效的口服活性CBP/p300降解剂，出于以下几个考虑：（1）GNE-049是一种高效的CBP/p300 溴结构域抑制剂，对两种蛋白的IC50=1.1-1.3nM；(2) GNE-049表现出优于其他溴结构域蛋白的优异结合选择性，包括BRD4蛋白，其选择性超过3,000倍；(3) GNE-049具有优异的细胞渗透性和PK特性，包括高口服生物利用度。 设计并合成了第一组潜在的CBP/p300 PROTAC降解剂，以确定最佳接头长度（表1）。基于与CBP溴结构域和GNE049的共晶结构，四氢-2H-吡喃环中的氧暴露于溶剂中，并在合适的位置与CRBN配体TX-16通过连接子结合。为了促进潜在的CBP/p300 PROTAC降解剂的合成，用氮取代了吡喃氧，并使用所得的CBP/p300配体合成了一系列潜在的PROTAC降解剂（表1）。 为了定量测定设计的CBP/p300 PROTAC降解剂的降解效力（DC50）和效率（Dmax），作者对U2OS细胞系中的CBP和p300蛋白采用HiBiT降解测定，其中CBP或p300蛋白通过CRISPR/Cas9进行基因修饰，将HiBiT标签融合到其羧基末端，在HiBiT检测中对CBP和p300蛋白进行24小时处理，评估了所有合成化合物的降解效力和效率，如表1所示。 连接子中仅含有羰基的化合物15具有非常弱的CBP/p300降解效力 (DC50>1000nM) 和效率 (Dmax=20-44%)。然而，仅在化合物15的接头中插入一个亚甲基，得到化合物16，即可显著提高降解效力（CBP和p300的DC50分别为20nM和7.9nM）和效率（CBP和p300的Dmax=94%和87%）。将化合物16中的羰基从连接基左侧反转到连接基右侧生成了化合物17，其比16弱得多。将额外的1-4个亚甲基插入化合物16的连接基中得到了化合物18-21，其对CBP和p300的降解作用都比化合物16弱。 GNE-049与CBP复合的共晶结构表明GNE-049中的N-甲基吡唑基团位于CBP的浅疏水表面口袋上。作者设计、合成并评估了一系列N-甲基吡唑基团被各种疏水基团取代的降解剂，如表2所示。 用氢原子取代化合物16中的N-甲基吡唑基团生成化合物22，其对CBP和p300 的降解作用比16弱得多且效果较差。用溴原子取代N-甲基吡唑得到了化合物23，它是针对CBP和p300的相当有效的降解剂（针对CBP和p300，DC50分别=64nM和17nM，Dmax=84-86%）。将化合物23中的溴原子改为甲基或乙基产生化合物24和25，与化合物23相比，它们对CBP和p300的效力与化合物23相似，但基于它们的Dmax值比23更有效。用更大的烷基或其他（杂）芳基取代基进一步取代N-甲基吡唑基团得到化合物26-31，其显示DC50值为23-57nM，Dmax值为85-95%。然而，与化合物16相比，所有这些修饰均未实现降解效力的改进。 在表2中的所有这些降解剂中，化合物16仍然表现出最好的降解效力和效率。接下来，评估了化合物16在大鼠中的PK曲线，如表3所示。令人失望的是，化合物16显示出非常差的口服血浆暴露和非常高的清除率（Cl=100.4mL/min/kg）。由于化合物22在表2中的所有化合物中具有最低的分子量，因此还评估了其在大鼠中的PK，如表3所示。然而，化合物22仍然表现出非常差的口服血浆暴露和非常高的清除率（Cl=194.0mL/min/kg）。 口服暴露后，在人、大鼠和小鼠肝微粒体中测试了化合物16和22的代谢稳定性。如表3所示，化合物16和22在大鼠肝微粒体中均具有良好的代谢稳定性（T1/2>60min），这表明两个化合物的口服生物利用度较差并不是由于它们的微粒体不稳定导致的。 为了提高化合物16的降解效力以及提高口服生物利用度，接下来对连接子部分进行了进一步的修饰。已经证明PROTAC分子连接体中的酰胺基团导致细胞通透性低和ADME性质差。因此，认为从化合物16的连接子中去除酰胺基团可以显著提高其降解效力和口服生物利用度。因此，设计、合成并评估了一系列连接子中缺少酰胺基团的化合物，如表4所示。 将化合物16中的酰胺基团转化为CHCH2基团的化合物32显示CBP降解效力提高3倍(DC50＝7.1nM vs 20nM)，但CBP降解效率略有下降(Dmax＝94％ vs 85％)。与化合物16相比，化合物32在p300降解效力 (DC50=6.2nM vs 7.9 nM) 和效率 (Dmax=91% vs 87%) 方面相似。从化合物32的接头上除去一个亚甲基，得到化合物33（CBPD-268，反式构型），以及化合物34（CBPD-266，顺式构型）。虽然化合物34在降低CBP和p300蛋白水平方面不如化合物32强效和有效，但化合物33（CBPD-268）比化合物32更强效和有效。具体地，CBPD-268针对CBP实现了DC50为0.5nM的和p300的DC50为0.8nM。在HiBit测定中，针对p300的浓度为8nM，针对两种蛋白质的Dmax为100%。因此，CBPD-268是CBP和p300蛋白的高效降解剂。 通过一个更多的亚甲基延长CBPD-268中的连接子，得到化合物35，它是CBP和p300的非常弱且无效的降解剂。将CBPD-268连接子中的亚甲基从环己基右侧移至左侧生成化合物36，其在还原CBP和p300蛋白方面比CBPD-268弱得多且效果较差。最后，从CBPD-268连接子上去除亚甲基生成化合物37，其对CBP和p300蛋白的降解作用也比CBPD-268更弱且效果较差。总而言之，表4中的SAR数据表明，连接子在设计的CBP/p300 PROTAC降解剂的降解效力和效率中起着至关重要的作用。 接下来测试了CBPD-268和所有其他化合物对CBP/p300和CRBN蛋白的结合亲和力，如表4所示。CBPD-268对CBP和p300都表现出很强的结合亲和力，IC50值为11和9.5nM。虽然CBPD-268的效力比化合物35和36与CBP/p300的结合强4-5倍，显示出与化合物16、32、34和37相似的CBP/p300结合亲和力。此外，CBPD-268与所有其他化合物具有相似的CRBN结合亲和力（IC50=1.8μM）（IC50=0.9-2.8μM）。这些数据表明，CBPD-268诱导的CBP/p300降解优于其他化合物，这可能归因于CBPD-268形成了比其他化合物更稳定和更高效的三元复合物。 CBPD-268在AR+前列腺癌细胞系中的进一步评估。CBPD-268（化合物33）是HiBit降解测定中评估的所有CBP/p300降解剂中最有效的化合物。接下来，通过传统的蛋白质印迹分析评估了其降低AR+前列腺癌细胞系中CBP/p300蛋白水平的能力。 22Rv1细胞系高表达AR-V7剪接变体，对当前的AR靶向治疗具有耐药性，并已广泛用作CRPC模型。CCS1477是一种CBP/p300溴结构域抑制剂，被证明可有效抑制体内肿瘤生长。因此，首先用图2 和表5中总结的数据来表征CBPD-268在22Rv1细胞系中诱导CBP/p300蛋白降解的能力。 用CBPD-268处理22Rv1细胞4小时，获得了针对CBP的DC50=0.01nM和针对p300的DC50=0.03nM的卓越效力，以及针对CBP和p300蛋白的高降解效率，Dmax=98%。治疗24小时后，CBPD-268针对CBP/p300蛋白实现了<0.1nM的 DC50和90-95%的Dmax。CBPD-268在24小时的处理时间内也能高效降低C-Myc蛋白，能够在低至0.03nM的浓度下将C-Myc蛋白降低>95%。 接下来，评估了CBPD-268降低LNCaP和VCaP AR+前列腺癌细胞系中CBP/p300蛋白水平的能力。如上所述，LNCaP细胞系在AR配体结合结构域中具有T878A突变，并且VCaP细胞系具有AR基因扩增并因此具有非常高水平的AR蛋白。这三种AR+前列腺癌细胞系共同代表了由AR变化引起的对当前AR靶向治疗的三种主要且不同的耐药机制。CBPD-268在这三种细胞系中4小时内诱导的CBP/p300降解数据如表5所示。 与22Rv1细胞系中的结果类似，CBPD-268在LNCaP和VCaP细胞系中对CBP/p300蛋白的消耗也非常有效。在LNCaP细胞系中，对于CBP/p300蛋白，CBPD-268的DC50值为0.01-0.03nM，Dmax值为98%。在VCaP细胞系中，CBP和p300的DC50分别为0.02和<0.01nM，CBP和p300蛋白的Dmax为99％。 接下来，进行了阻断实验来研究CBPD-268诱导的CBP/p300降解机制，如图3所示。加入CBP/p300抑制剂GNE-049（10μM）或CRBN抑制剂TX-16（10μM）完全消除了CBP/p300降解。由CBPD-268诱导，表明需要CBP/p300和CRBN蛋白才能实现CBP/p300降解。 评估CBPD-268对三种AR+前列腺癌细胞系的细胞生长抑制作用 接下来，使用两种CBP/p300溴结构域抑制剂（GNE-049和CCS1477）、一种 AR PROTAC降解剂（ARV-110）和一种AR拮抗剂评估了CBPD-268在AR+ 22Rv1、LNCaP和VCaP前列腺癌细胞系中抑制细胞生长的能力（恩杂鲁胺）作为对照。数据如图4所示。 CBPD-268有效抑制所有这三种细胞系的细胞生长，在22Rv1、LNCaP和VCaP细胞系中的IC50值分别为3.7nM、10.3nM和4.6nM。相比之下，GNE-049在22Rv1、LNCaP和VCaP细胞系中的IC50值分别>1μM、7μM和>1μM，分别比CBPD-268弱>250、>650和>215倍。虽然CCS1477比GNE-049更有效，但仍比CBPD-268低40-50倍。此外，在22Rv1、LNCaP和VCaP细胞系中，CBPD-268的效力分别比ARV-110强85、12和27倍，比恩杂鲁胺强>250、750和>215倍。 在蛋白质印迹分析中，CBPD-268非常有效地诱导22Rv1细胞系中CBP/p300蛋白几乎完全耗尽，仅用4小时的处理时间，这两种蛋白的DC50为0.01-0.03nM，DC90值为<1nM（图2）。细胞生长抑制测定表明，CBPD-268在4天的处理时间内仅显示出IC50为3.7nM。为了阐明CBP/p300降解和细胞生长抑制测定中效力之间的差异，评估了22Rv1细胞生长抑制测定中使用的细胞培养基中CBPD-268的稳定性。数据表明CBPD-268在细胞培养基中不稳定；3小时后残留<50%的CBPD-268，7小时后检测到<10%的CBPD-268（表S1）。CBPD-268的细胞培养不稳定也许并不令人惊讶，因为cereblon配体部分中的戊二酰亚胺部分已被证明在细胞培养基中不稳定，这导致降解剂失活。因此，在4天的细胞生长抑制测定中，CBPD-268在这三种AR+细胞系中的细胞生长抑制效力（IC50）和效率（Imax）基本上是在其存在于细胞培养基中的几个小时内实现的。 CBPD-268的整体蛋白质组分析 CBPD-268在整体水平上的降解选择性，在VCap细胞系中对CBPD-268进行了蛋白质组分析。由于在蛋白质印迹分析中，CBPD-268在4寸VCap细胞系内以1nM浓度非常有效地几乎完全耗尽CBP/p300蛋白（图 S1），因此用1nM CBPD-268处理VCap细胞4小时进行蛋白质组分析，如图5所示。 整体蛋白质组学分析表明，CBPD-268显示出CBP/p300蛋白的深度和显著消耗，CBP和p300蛋白水平分别降低了75%和69%。其他几种蛋白质，包括NKX3-1、ZFYVE19、BUB1B、OXLD1、USHBP1和BRD2，也有适度减少。NKX3-1是AR靶基因，其表达受CBP/p300共同调控。其他蛋白减少的意义有待进一步研究。此外，GSPT1（之前报道的基于CRBN的PROTAC降解剂的新底物之一）在蛋白质组学研究中并未被CBPD-268还原，这得到了蛋白质印迹分析的进一步证实（图S1）。因此，CBPD-268仅降低了几种蛋白质的水平，其中CBP/p300蛋白质是分析的总共6535种蛋白质中降低最多的。 CBPD-268的药代动力学研究 评估了CBPD-268在大鼠和小鼠中的药代动力学（PK），如表6所示。 在大鼠中，CBPD-268静脉注射和口服给药的半衰期分别为1.9和1.3小时，稳态分布体积良好（Vss=4.9L/kg），中等清除率（Cl=34.6mL/min/kg），在3mg/kg高剂量下，口服血浆暴露的Cmax和AUC分别为220.6ng/mL和936.9h*ng/mL，并且具有优异的总体口服生物利用度 (F=67%)。 在小鼠中，CBPD-268还表现出理想的PK特性，静脉注射 (T1/2=3.4h) 和口服给药 (T1/2=3.1h) 均具有良好的半衰期，稳态分布容积适中 (Vss=1.6L/kg），清除率低（Cl=6.0mL/min/kg），3mg/kg剂量时具有良好的口服血浆暴露（Cmax=724.7ng/mL，AUC=4190.4h*ng/mL），以及口服生物利用度（F=60%）。 CBPD-268的体外DMPK和安全性分析 评估了CBPD-268在肝微粒体中的代谢稳定性、血浆稳定性、血浆蛋白结合以及对人ether-a-go-go相关基因 (hERG) 离子通道和细胞色素P450酶（CYP）的抑制，如表7所示。 CBPD-268在小鼠肝微粒体（>120min）中表现出优异的代谢稳定性，在人（T1/2=48min）、猴（T1/2=30min）、犬（T1/2=49min）和大鼠中表现出合理的代谢稳定性。T1/2=65min)肝微粒体。在人（T1/2=71min）、猴（T1/2>120min）、犬（T1/2=78min）和小鼠（T1/2>120min）血浆中具有良好的稳定性，但在大鼠血浆（T1/2=48min）中具有中等稳定性。CBPD-268在人、犬、猴和小鼠中具有高血浆蛋白结合，游离药物浓度为0.6-1.6%，这对于口服生物可利用的PROTAC分子很常见。CBPD-268在高达30μM的浓度下对hERG离子通道没有表现出任何显著的抑制作用，并且在高达10μM的浓度下，对所有评估的CYP亚型（3A4、1A2、2B6、2C9、2C19和2D6）没有显著抑制作用。 CBPD-268在VCaP和22Rv1异种移植小鼠模型中的药代动力学/药效学评估 评估了CBPD-268降低VCaP异种移植肿瘤体内CBP/p300蛋白水平的能力，如图6所示。 CBPD-268以剂量依赖性方式非常有效地诱导VCaP肿瘤组织中CBP和p300蛋白的消耗。单次口服0.3 mg/kg CBPD-268，在1、6 和 24小时时间点分别使CBP 蛋白水平降低 40%、92%和84%，并使p300蛋白减少83%、100% 和1、6 和 24小时时间点分别为99%。单次口服1mg/kg CBPD-268能够在1、6和24小时时间点分别降低CBP蛋白水90%、100%和87%，在1、6小时和24小时时间点使p300蛋白水平降低≥98%。进一步增加剂量至3、10或30mg/kg，单次口服CBPD-268可在1、6和24小时时间点分别有效降低CBP和p300蛋白水平>95%。 由于单次口服3mg/kg CBPD-268在至少24小时内可高度有效降低CBP和p300 蛋白水平，因此进一步评估了CBPD-268在延长时间点（48、72和96小时时间点）对CBP和p300蛋白的影响。数据显示，在48-96小时的时间点，单次口服3mg/kg剂量的CBPD-268，CBP和p300蛋白的水平降低60-70%，证明了其体内的长期效果。 测定不同剂量和时间点VCaP荷瘤小鼠血浆、肿瘤、肝脏和脾组织中CBPD-268的浓度，如表8所示。单次口服给予CBPD-268 0.3-3mg/kg在血浆、肿瘤、肝和脾组织中表现出剂量和时间依赖性的暴露方式。有趣的是，虽然在24小时给药0.3-3mg/kg CBPD-268的时间点肿瘤组织中的药物浓度较低，但CBP和p300蛋白在至少24小时内仍然有效耗尽，表明肿瘤组织中CBPD-268的短暂暴露足以有效降低CBP和p300蛋白的水平至少24小时。 接下来，使用图7中总结的数据评估了CBPD-268消除小鼠22Rv1异种移植肿瘤组织中CBP/p300蛋白的能力。血浆和肿瘤组织中CBPD-268的浓度也在每个时间点确定，图7中也对此进行了总结。 CBPD-268可有效降低22Rv1肿瘤组织中CBP和p300蛋白的水平 单次口服剂量1mg/kg的CBPD-268在1、6和24小时时间点分别使CBP蛋白水平降低18%、93%和86%，并使p300蛋白水平降低56%、86%和53%分别在1、6和24小时。有趣的是，1mg/kg剂量的CBPD-268在22Rv1肿瘤组织中1、6和24h时间点达到的药物浓度远低于在VCap肿瘤组织中以相同剂量获得的结果。相比之下，1mg/kg的CBPD-268在22Rv1肿瘤中的PD效应（图7）弱于在VCaP肿瘤中的PD效应（图5），这与22Rv1肿瘤组织（图7）中的药物暴露低于VCaP肿瘤组织中的药物暴露（表8）一致。。 由于CBPD-268在体外蛋白质组学研究中显示出对BRD2蛋白水平的适度降低（图5），因此评估了其对小鼠22Rv1异种移植肿瘤组织中BRD2-4蛋白的体内影响。数据（图8）显示，口服给予1和3mg/kg的CBPD-268并没有降低所检查的6和24小时时间点的22Rv1肿瘤组织中BRD2、BRD3和BRD4蛋白的水平。因此，PD数据表明，CBPD-268对CBP/p300蛋白表现出优于BRD2/3/4蛋白的体内降解选择性。 CBPD-268在VCap和22Rv1异种移植小鼠模型中的抗肿瘤功效 根据PD数据，首先评估了CBPD-268在VCaP异种移植肿瘤模型中的抗肿瘤活性，以1mg/kg和3mg/kg PO剂量在不同的方案下进行，如图9所示。 CBPD-268以每周两次1mg/kg或每周3mg/kg口服给药，在4周治疗结束时（第48天）抑制肿瘤生长81%或57%（图9A）。CBPD-268以1或3mg/kg口服给药，每周3次，在治疗结束时（第48天）分别导致31%和67%的肿瘤消退（图 9A）。由于VCaP肿瘤具有很强的侵袭性，因此之前报道的任何针对AR或AR信号传导的药物（包括AR降解剂）都无法实现肿瘤消退。因此，CBPD268在VCaP肿瘤模型中能够高度有效地抑制肿瘤生长，并且能够实现肿瘤消退。重要的，小鼠对CBPD-268治疗的耐受性良好，并且在整个实验期间，所有给药组的体重减轻了不到7%（图9B）。 进一步在VCaP异种移植肿瘤模型中评估了较低剂量（0.3mg/kg），但每天、一周五次的CBPD-268的抗肿瘤活性，如图10所示。口服0.3mg/kgCBPD-268，每周五次，持续4周，在治疗结束时抑制肿瘤生长84%（图10A）。重要的是CBPD-268具有良好的耐受性，在整个实验过程中小鼠体重减轻不超过最大体重减轻的8%（图10B）。 受CBPD-268在VCaP肿瘤模型中强大的抗肿瘤活性的启发，进一步确定了其在22Rv1异种移植肿瘤模型中的抗肿瘤活性，该模型具有非常高水平的AR-V7变异表达并且对其他AR靶向药物具有耐药性，如图11所示。 治疗结束时，每周3次口服CBPD-268 1mg/kg和3mg/kg，持续3周，分别抑制22Rv1肿瘤生长54%和83%。治疗结束时，口服CBPD-268 0.3mg/kg和1mg/kg，每周5次，持续3周，分别抑制肿瘤生长56%和75%。重要的是，在整个实验期间，与载体对照组相比，CBPD-268治疗组没有引起任何显著的体重减轻（图11B）。 CBPD-268对具有免疫能力的雄性和雌性BALB/c小鼠的毒性研究 进一步评估了CBPD-268在免疫能力正常的雄性和雌性BALB/c小鼠中的潜在毒性，如图12所示。由于CBPD-268每周两次给药可高效抑制肿瘤生长，因此以3-30mg/kg每周两次测试CBPD-268，持续5-6周。 CBDP-268在3和10mg/kg剂量水平下均未在雄性和雌性小鼠中诱导体重减轻或其他毒性迹象（图12）。用30mg/kg CBPD-268治疗的雄性和雌性小鼠在实验期间经历了适度（<5%）的体重减轻。因此，在免疫功能正常的雄性和雌性BABL/c小鼠中，CBPD-268在比其高效剂量高10倍的剂量下具有良好的耐受性。 CBPD-268在免疫活性SD大鼠中的组织分布和毒性研究 PK数据显示，CBPD-268在大鼠中表现出优异的PK特性和高口服生物利用度（表6）。根据3mg/kg和10mg/kg剂量评估了其在大鼠血浆、肾、肝、脾和心脏中的组织分布，如表9所示。 CBPD-268在血浆和其他组织中表现出剂量依赖性暴露，并且在肾脏、肝脏、脾脏和心脏中的暴露量比在血浆中高得多，表明CBPD-268在大鼠中具有良好的组织分布特征。 研究了CBPD-268是否能够有效减少大鼠细胞中的CBP和p300蛋白。数据表明，CBPD-268在诱导CBP和p300蛋白降解方面非常有效，DC50值分别为0.1nM和0.3nM（图S3）。 评估了CBPD-268在免疫活性SD大鼠中的潜在毒性，口服剂量为1-10mg/kg，每周两次，持续5周，如图13所示。 CBPD-268在整个实验过程中没有导致动物体重减轻。相反，1-10mg/kg治疗组的体重在所有治疗组中均继续增加，与载体对照组相似。在大鼠毒性研究治疗结束时，从每只大鼠收集了血液样本进行全血细胞计数（CBC）和血液化学分析，所得数据总结于图S4和S5中。 CBPD-268以1-10mg/kg口服剂量，每周两次，持续5周，并没有引起血小板、白细胞、红细胞、中性粒细胞、嗜碱性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞和血小板的CBC计数的任何显著变化。嗜酸性粒细胞，并且肌酐、总蛋白、钙、丙氨酸氨基转移酶、碱性磷酸酶、血尿素氮、总胆红素和白蛋白的水平也没有显著改变，除了葡萄糖水平在10mg/kg治疗组中显著降低（P=0.014）。总而言之，CBPD-268在SD大鼠中具有良好的耐受性，口服剂量为1-10mg/kg，每周两次，持续5周，并且在整个实验期间没有诱导任何毒性迹象。 总结 在本研究中，试图开发一种特别有效且口服有效的CBP/p300降解剂。从强效选择性CBP/p300溴结构域抑制剂GNE-049和具有优化ADME和PK特性的新型cereblon配体TX-16开始，设计、合成并评估了一系列具有不同接头的潜在CBP/p300 PROTAC降解剂。SAR研究表明，连接子在降解效力和口服生物利用度方面起着至关重要的作用。发现了CBPD-268作为一种异常有效、有效且口服有效的CBP/p300降解剂。CBPD-268在小鼠和大鼠中表现出优异的口服生物利用度。此外，CBPD-268具有良好的血浆和微粒体稳定性以及对CYP和hERG 抑制的耐受性。CBPD-268单次口服0.3-3mg/kg即可非常有效地诱导肿瘤组织中CBP和p300蛋白的消耗。口服CBPD-268在VCaP和22Rv1前列腺癌异种移植模型中均具有很强的抗肿瘤活性，并且能够在VCaP肿瘤模型中实现肿瘤消退。CBPD-268被发现在小鼠和大鼠中具有良好的耐受性，并且显示出>10的治疗指数。综上所述，CBPD-268是一种非常有前途且口服有效的CBP/p300降解剂，值得作为治疗AR阳性人类前列腺癌和其他癌症（包括血液恶性肿瘤和其他实体瘤）的新型治疗剂进行广泛研究。 文献来源 https://doi.org/10.1021/acs.jmedchem.3c02124 请点击此处链接观看CyberSAR系统详细使用教程 1.药渡CyberSAR结合药物设计思想，挖掘了文献及专利报道的活性的结构，通过CyberSAR以方便快速获得研发人员兴趣靶向结构，以供开拓思路，就CREB-binding protein/Histone acetyltransferase p300（Homo sapiens）举例如下： 2.在靶点界面选中“化学空间”选项标签下级联“聚类结构视图”选项卡，可以将CyberSAR平台收录的文献和专利具有关于CBP/p300相关实验测试活性的分子以“母核结构聚类”的形式展示。其中绿色字体高亮的为文献报道的体外酶、细胞活性测试实验中IC50<1000nM的活性分子结构、具体实验、实验结果及实验来源。 3.在靶点界面选中“化学空间”选项标签下级联“原始结构视图”选项卡，可以将CyberSAR平台收录的文献具有关于CBP/p300相关实验测试活性的分子以“研发阶段时光轴”的形式展示。其中绿色字体高亮的“数据挖掘”即为潜力Hit。 登录方式 CyberSAR在电脑浏览器端登录网址： https://cyber.pharmacodia.com/，欢迎猛烈试用。 请点击此处链接观看CyberSAR系统详细使用教程 如需进一步沟通，请扫码添加微信联系药渡赵博士或药渡CyberSAR沟通群。

01 前言 英国，是全球生命科学研究进展较快的国家之一。在全球COVID-19大流行期间，英国国内生物技术公司和制药公司表现了很高程度的产出，如牛津-阿斯利康疫苗的开发。且随着相关政策的出台，英国政府希望进一步巩固其在生命科学领域全球领导者的地位。2012年~2021年期间，其国内的生命科学公司获得了近9%的股权投资（相当于107亿英镑），是欧洲生命科学投资的主要集中地[1]。本文将从英国制药行业和生物技术行业出发，综合考虑其股权投融资情况和核心业务布局，对其30强公司进行研究分析。 02 英国“生物&制药”行业概况 生物技术公司，侧重于通过DNA等活体来制造产品，往往活跃于基因疗法和疫苗等领域，当然也可用于农业、环境等领域的产品开发，如转基因作物、生物燃料等，著名的生物技术公司如Oxford Nanopore、Moderna、Immunocore和BioNTech等。 制药公司，侧重于通过化学物质及原材料进行药物研发，在规模和范围上往往比生物技术公司大得多，如Novartis、Johnson & Johnson等。 生物制药公司，顾名思义，即兼顾生物技术和化学技术来制造药品，如GSK、Johnson & Johnson、Pfizer、Astrazeneca、Bayer等。 目前，英国活跃着1057家高增长的生命科学公司，兼顾该领域创新能力及募集到的股权投资，排序前30强榜单，列表如下。注：由下表可看出，对于生物制药领域产生积极影响的学科领域也纳入到统计当中。 表1-1英国生物技术/制药公司-30强 03 英国“生物&制药”30强公司/逐一分析 3.1 Artios Pharma 3.1.1 融资情况介绍 Artios Pharma总部位于剑桥Babraham研究所，成立于2015年，研究方向为靶向DNA损伤应答（DDR）途径的开创性癌症治疗方法，该公司于2021年入选Business Cloud Med Tech 50高增长榜单。Artios Pharma在五轮融资中获得了2.45亿英镑的股权投资，投资者包括Arix Bioscience、CRT Pioneer Fund、Pfizer Venture Investments和SV Health Investors等。 3.1.2 主营业务详细介绍 Artios Pharma主营业务研究方向为DDR领域的药物发现，如合成致死。科学创始人Niall Martin博士和Graeme Smith博士是PARP抑制剂(现在由阿斯利康销售为Lynparza®(olaparib))的发明者，且在KuDOS进行了一些DDR领域成功的药物开发。公司当前的研究方向是以单一抑制剂的临床使用为开发目标，以克服对现有DDR靶向治疗药物的获得性和药物抵抗，并进一步通过药物组合来增强现有靶向疗法。现阶段Artios Pharma药物研发管线主要分布于已进入临床的ART0380（ATR Inhibitor）、ART4215（POLθ inhibitor）。 3.2 F2G 3.2.1 融资情况介绍 F2G，1998年成立于曼彻斯特索尔福德，是一家全球领先的生物技术公司，致力于开发真菌领域危及生命的疾病的治疗方法，如orotomide类新型抗真菌药物的开发。F2G的投资方包括5Y Capital、Advent Life Sciences、Sofinnova Partners和Novo Holdings。截止2022年8月，该公司共获得了10轮2.06亿英镑的股权投资，同时该公司还获得了4笔大额创新拨款，总额共计333万英镑。 3.2.2 主营业务详细介绍 目前，抗真菌药物的全球市场价值超过60亿美元，由于易感免疫功能受损患者人数的逐年增加，市场每年都在持续增长。 F2G主营业务是发现与开发难以治疗的、耐药的致病病原体的药物和治疗方案。公司已经发现并开发了一种全新的抗真菌药物orotomides，orotomides具有独特的作用机制，可选择性地靶向真菌DHODH酶，该位点是更倾向于上游位点的的嘧啶生物合成途径中的一种关键酶，区别于目前市场上的其他抗真菌药物。 3.3 Quell Therapeutics 3.3.1 融资情况介绍 Quell Therapeutics，是一家处于早期创业阶段的生物制药公司，通过开发Treg细胞疗法用于一些疾病的治疗如器官排斥、自身免疫性疾病和炎症性疾病。自2019年从伦敦大学学院和伦敦国王学院分拆出来后，已分三轮获得1.78亿英镑的股权融资，投资者包括Syncona Partners、UCL Technology Fund、Future Fund Breakthrough和SV Health investors等。也是凭借2021年投资方面的卓越表现，Quell Therapeutics将未来的发展目标锁定为细胞治疗领域的世界领导者。 3.3.2 主营业务详细介绍 Quell Therapeutics专注于Treg领域研发，通过使Treg能够以抗原特异性的方式靶向，将其定向到体内的特定目标，从而形成靶向聚集。这些体外工程Treg可以引入到患者体内，从而平衡一些不必要的免疫应答，以治疗自身免疫性疾病和炎症性疾病。 另，通过智慧芽新药情报库查询，该公司当前已有多个项目进入到临床前和临床阶段，最高阶临床II期，适应症指向肝病、肝衰竭、肝移植排斥反应。 3.4 Touchlight 3.4.1 融资情况介绍 Touchlight，是一家DNA领域研发公司，总部位于伦敦。通过开发一种新型的DNA复制技术，以适用于疫苗的生产。自2008年成立以来，凭借业务方面的快速增长，Touchlight已成功入选德勤2021年高速成长企业50强排行榜，这家生命科学公司已通过11次融资获得了1.47亿英镑的股权投资，投资者包括Downing、Novator Partners和Bridford Investments；同时，还通过FP7获得了13.2万英镑的创新拨款，并寻求海外项目开发。 3.4.2 主营业务详细介绍 Touchlight的平台技术是dbDNA&酶制造工艺，即通过开发一种新型的DNA合成载体，以达DNA制造过程中的快速、大规模、高纯度。 dbDNA以其原理图结构命名，是一种最小的线性双链共价封闭DNA结构，可以编码长、复杂或不稳定的DNA序列，且具有强表达谱。传统上的DNA制造源自大肠杆菌发酵，Touchlight还通过使用体外酶促工艺用于DNA的合成制造。 3.5 bit.bio 3.5.1 融资情况介绍 bit.bio成立于2016年，总部位于剑桥，研究领域为基因重组和人类干细胞技术，旨在寻求开发新一代创新药物。该公司从剑桥大学分拆至今，已在6轮融资中获得了1.41亿英镑的股权投资，投资者包括Foresite Capital、Metaplanet、National Resilience、Puhua Capital和腾讯。同时，还获得了2项创新资助，价值38万英镑。 3.5.2 主营业务详细介绍 bit.bio已经向市场发布了多个ioCells研发产品，用于临床研究和药物发现，重点深耕神经细胞、免疫细胞等领域。其ioWild型细胞是源于健康供体的易于使用的功能性ipsc，可以在短时间内应用于基础研究和药物发现等试验。ioDisease模型细胞则是一系列经工程改造的、精准重编程的人类ipsc衍生细胞，其可以通过配对来辅助研究者对数据进行分析。 3.6 MiroBio 3.6.1 融资情况介绍 MiroBio成立于2018年，总部位于牛津，是一家免疫领域药物开发公司，旨在治疗自身免疫性疾病和炎症性疾病。MiroBio已通过五轮融资筹集了1.33亿英镑的股权融资，投资者包括Advent Life Sciences和Medicxi Ventures。在2022年6月的一次股权融资中，MiroBio获得了8000万英镑的资金，用于支持进一步的研发。另，该公司当前已被吉利德收购。 3.6.2 主营业务详细介绍 MiroBio公司的主打产品为MB272，该产品是一款免疫抑制受体B和T淋巴细胞衰减（BTLA）方向的选择性激动剂，当前处于I期临床阶段。另，公司的I-ReSToRE平台还在积极的应用于针对免疫抑制受体的激动剂抗体方向的开发，适应症领域锚定炎症疾病；同时，该平台还可以识别和开发利用抑制性信号网络的治疗方案，以恢复免疫系统。自吉利德收购后，该公司未来几年将大力推进平台上的其他项目，如PD-1激动剂MB151等[7]。 3.7 Pulmocide 3.7.1 融资情况介绍 Pulmocide，成立于2007年，是一家总部位于伦敦的生物制药公司，研究方向为呼吸道疾病和感染的可吸入药物。该公司的开发成果包括一种新的抗曲霉菌药物PC945，拟用于曲霉菌、囊性纤维化和哮喘的治疗以及COVID-19相关的肺损伤。Pulmocide迄今已在七轮融资中获得了1.28亿英镑的股权投资，投资者包括F-Prime Capital Partners、IP Group、Johnson and Johnson Innovation、SV Health investors、Touchstone Innovations和Cystic Fibrosis Foundation。 3.7.2 主营业务详细介绍 Pulmocide，致力于呼吸道感染疾病的药物研发，公司当前主推的品种为PC945。据官网介绍，PC945是唯一一种专门用于吸入治疗曲霉菌的抗真菌药物。它的设计目的是提供较高的局部药物浓度，并确保较长的作用时间和较小的全身暴露量。在英国，PC945已在“特需”的基础上用于对多种抗真菌疗法标准护理(SOC)无反应的患者，并取得了显著的效果。截至2021年1月，在接受治疗的11名患者中，有9名患者观察到积极的临床结果。2022年，PC945已作为抗真菌联合用药方案启动治疗成人侵袭性肺曲霉病的III期临床[9]。 进一步通过智慧芽新药情报库查询，PC945（Opelconazole）临床进展见下图，同时公司另一个品种PC-786，临床用于呼吸道合胞体病毒感染的治疗已进入到临床II期。 3.8 Crescendo Biologics 3.8.1 融资情况介绍 Crescendo Biologics，成立于2007年，是一家位于剑桥的肿瘤免疫研发公司，该公司掌握的生物技术可以将人类抗体碎片化，以用于药品制造。Crescendo Biologics是Babraham研究所的分支机构，曾获得13.8万英镑的政府创新拨款，并在8轮股权融资中获得了1.25亿英镑的投资，投资者包括Astellas Venture Management、Avlar Bioventures、IP Group、Sofinnova Partners、Takeda Ventures和UK Innovation & Science Seed Fund。2020年，Crescendo Biologics入选Pharma Times Alantra Pharma Fast 50榜单以及带动英国经济的1000家公司榜单。 3.8.2 主营业务详细介绍 Crescendo Biologics开发的平台Humabody®，主要为一个转基因小鼠平台，该平台可产生100％的人源VH结构域中心，以用于药物的开发。与传统IgG比较，该平台所产生的分子经选择可形成靶向，并呈现更优的生物学特征，从而可提供更优的治疗方案。同时，该平台的产出也不仅限于肿瘤领域，同时辐射其他相关疾病领域[11]。 进一步通过智慧芽新药情报库查询，Crescendo Biologics当前已有多款品种进入到临床和临床前阶段，适应症大比例还是聚焦于肿瘤。 3.9 OMass 3.9.1 融资情况介绍 OMass成立于2016年，总部位于牛津同时在诺丁汉设有实验室，通过开发国产化的质谱设备来辅助药物发现。自分拆于牛津大学后，通过四轮融资筹集了1.23亿英镑的股权投资，同时还从Innovate UK获得了46.2万英镑的拨款。该公司投资者包括GV、Oxford Science Enterprises、Syncona Partners和Sanofi Ventures。 3.9.2 主营业务详细介绍 OMass主营业务的开发平台主要为OdyssION™，该平台是以非变性质谱技术为核心，并集成最新的生化技术、非变性质谱、定制化学，从而获得在最原始状态下对应的蛋白质作用数据，从而提供更为准确、更为高效的药物开发。平台所提供的非变形质谱是一种使蛋白质相互作用保持在气相中的技术，可用于研究完整蛋白质、非共价蛋白质-蛋白质和蛋白质-配体复合物的生物学状态。基于该平台技术，OMass已进行了多个靶点的药物研发和开发[13]。 3.10 Evox Therapeutics 3.10.1 融资情况介绍 Evox Therapeutics，成立于2016年，同样是来自牛津大学的一家公司，通过囊泡包裹药物来达到递送和治疗疾病的目的，2021年进入到榜单“Business Cloud Med Tech 50”中。迄今已获得1.15亿英镑的股权投资，涉及三轮融资，投资者包括GV、Oxford Science Enterprises、Oxford University Innovation和Borealis Ventures。另，该公司还获得了比尔盖茨基金会&英国政府方面的创新资金资助，总价值82.7万英镑。 3.10.2主营业务详细介绍 Evox Therapeutics在疾病领域主要锚定的是先天性代谢缺陷疾病（IEM），如尿素循环障碍(UCED)，一种因参与尿素产生的酶或线粒体转运蛋白的缺乏而导致血液中氨的毒性水平积聚的遗传疾病。该公司开发的平台DeliverEX，可以对外泌体进行修饰，从而形成递送药物的目的[15-16]。 3.11 CellCentric 3.11.1 融资情况介绍 CellCentric，成立于2003年，源于剑桥大学，并在剑桥、牛津和曼彻斯特都设有办事处，以开发癌症疗法为研发方向。Inobrodib是公司研发的一种小分子药物，是一种CBP抑制剂和p300抑制剂，目前该药物最高研发阶段为临床II期，用于血液瘤和实体瘤的治疗。该公司共获得4项创新资助，价值245万英镑，并通过16轮融资获得了1.13亿英镑的股权投资，包括5Y Capital、Avlar Bioventures、Nesta Impact Investments、Takeda Ventures和UK Innovation & Science Seed Fund。 3.11.2主营业务详细介绍 CellCentric公司开发的药物Inobrodib（CCS1477），作为一种选择性小分子溴结构域抑制剂，是所在领域的FIC品种；凭借p300和CBP的双重作用，具备表观遗传和细胞信号转导的双重特点。P300和CBP作为转录共激活因子，可触发与肿瘤进展相关的某些基因的表达，如c-Myc、AR和IRF4，从而关联重要信号蛋白的乙酰化、泛素化等生物学功能[18-19]。 3.12 Cambridge Epigenetix 3.12.1 融资情况介绍 Cambridge Epigenetix，成立于2012年，源自剑桥，该公司的核心技术为基因组测序技术。截止目前，Cambridge Epigenetix已在七轮融资中获得了1.08亿英镑的股权融资，以及价值87.8万英镑的创新资助，该公司的投资者包括GV、University of Cambridge Enterprise Fund和Syncona Partners。 3.12.2主营业务详细介绍 Cambridge Epigenetix公司开发的平台技术主要应用于测序和计算，以从DNA中获得更多的信息，且同时不会增加实验室的相关研究工作量。SingleShot平台和软件的开发目标是帮助描绘出癌症和其他疾病背后的驱动因素，并以图片的形式呈现，进而追溯到一个人的生活方式、饮食、年龄和环境暴露带来的变化。测序试剂盒，将是Cambridge Epigenetix公司未来应用于市场的主要产品形式。 进一步通过智慧芽新药情报库查询，Cambridge Epigenetix在药物领域的布局，将靶标选定在了BRD4/p300-CBP方向，且已有项目进入到临床前阶段[21-22]。 3.13 Quotient Sciences 3.13.1 融资情况介绍 Quotient Sciences，成立于1990年，从事药物开发，同时帮助行业其他药企更快、更有效的进行药物开发；2021年2月，该公司收购制药公司Arcinova。截至2022年8月，Quotient Sciences在两轮融资中获得了总计1.07亿英镑的股权投资，且入选Pharma Times Alantra Pharma Fast 50榜单。 3.13.2主营业务详细介绍 Quotient Sciences的主营业务是CDMO和CRO，通过在整个药物开发过程中各个环节的提速来推进项目，如提供处方筛选、处方开发、首次人体试验以及临床和商业制造服务，简化了药物开发过程，从而完成从候选药物到商业化的全链条服务，同时可以对不同的项目形成针对性的服务[24]。 3.14 OriBiotech 3.14.1 融资情况介绍 OriBiotech，成立于2015年，研发方向为细胞和基因治疗方法的开发，截止2022年8月，OriBiotech已经获得了5轮股权融资，价值1.04亿英镑，投资方包括Amadeus Capital Partners、Kindred Capital VC、Octopus Ventures、Chimera investment、Northpond Ventures和Novalis LifeSciences等；同时还获得了价值34.7万英镑的创新基金支持。 3.14.2主营业务详细介绍 OriBiotech公司开发的研发平台，可实现CGT制造的封闭化、自动化、数字化和标准化。该平台可将研究者、开发者、合同方串联在一起，实现临床前发掘、临床试验、商业化的高效结合，形成一站式服务。公司新平台还有望通过软硬件的结合来实现CGT制造的完全自动化，从而提效[26]。 3.15 MISSION Therapeutics 3.15.1 融资情况介绍 MISSION Therapeutics，成立于2011年，源自剑桥，药物开发方向为阻滞肿瘤细胞的生长和增殖，尤其是DUB药物的发现与开发。截止2022年8月，该公司已经通过Innovate UK和Michael J. Fox基金会获得了445万英镑资助。另，通过4轮融资获得了9800万英镑的股权投资，投资者包括Pfizer Venture Investments、Roche Venture Fund和Sofinnova Partners。 3.15.2主营业务详细介绍 Mission Therapeutics公司的研发管线主要针对去泛素化酶，锚定靶点主要是USP4、USP7、USP30和UCHL1，其中的USP30抑制剂项目（MTX652）主要聚焦线粒体相关疾病、帕金森症以及外周疾病，如：肾纤维化等疾病，当前处于I期临床。作为USP30抑制剂开发的绝对领头羊，目前已在USP30领域布局了大量的IP[28]。 3.16 Ellipses Pharma 3.16.1 融资情况介绍 Ellipses Pharma，成立于2015年，是一家总部位于伦敦的药物开发公司，专注于癌症治疗。该公司通过收购一定的创新资产，来加速其在临床开发过程中的业务。迄今为止，该公司已经通过4轮融资筹集了9790万英镑的股权投资，具体信息暂未披露。 3.16.2主营业务详细介绍 Ellipses Pharma，当前已在药物研发领域布局多个靶点，具体如FLT3、AURX、RET、TOP1、AR等。值得关注的是，科伦药业控股子公司科伦博泰于2021年3月与Ellipses Pharma达成区域授权合作协议，科伦博泰将创新小分子肿瘤靶向RET激酶抑制剂项目欧美等区域权利有偿独家授权给Ellipses Pharma[30]。 3.17 TauRx Pharmaceuticals 3.17.1 融资情况介绍 TauRx制药，成立于2002年，药物开发方向为阿尔茨海默及其他神经退行性疾病的治疗，重点专注于TAIs药物的开发。截止2022年8月，TauRx Pharmaceuticals已经获得了8800万英镑的股权投资。 3.17.2主营业务详细介绍 TauRx Pharmaceuticals公司开发的tau蛋白聚集抑制剂甲磺酸氢甲硫堇，当前已进入到临床III期。有报道称该项研究在598名从轻度认知障碍（MCI）至中度阿尔茨海默病（AD）患者中比较了甲磺酸氢甲硫堇（16mg/日）与安慰剂的疗效对比，初步数据显示在完成第一阶段后，接受16mg/天剂量的受试者整体认知能力评分（ADAS-cog11）提高了约1.3个单位，基本功能评分（ADCS-ADL）下降了1个单位[32]。 3.18 Oxford Nanoimaging 3.18.1 融资情况介绍 Oxford Nanoimaging，成立于2016年，源自牛津大学，以设计、开发和制造超分辨率显微镜为研发方向，其成像仪方向旗舰产品已被阿斯利康、伦敦帝国理工和哈佛大学等主要机构使用。2019年，该公司入选英国增长最快的100家企业榜单。并通过五轮融资筹集了8410万英镑的股权资金，以及两笔Horizon 2020和Innovate UK资助，共计28.4万英镑。 3.18.2主营业务详细介绍 Oxford Nanoimaging公司生产的最新产品超分辨荧光显微镜，历经8年时间研发而成，是一种新型的、唯一的无需校准、无需光学平台、超小型台式超分辨显微镜。该公司制造出的FRET显微镜是全球第一台大视野单分子FRET显微镜，分辨率近20nm，且操作简单、安全，适用于单分子示踪、活细胞成像、3D成像等研究[34]。 3.19 PsiOxus Therapeutics 3.19.1 融资情况介绍 PsiOxus Therapeutics，成立于2006年，源自伯明翰大学和伦敦帝国理工，专注于肿瘤药物开发。2010年，收购了药物开发公司Hybrid Biosystems。PsiOxus Therapeutics在7轮融资中筹集价值8080万英镑的股权投资，投资者包括Invesco、Mercia Fund Managers和SR One，同时该公司还获得了两项创新资助，总价值195万英镑。 3.19.2主营业务详细介绍 PsiOxus Therapeutics已更名为Akamis Bio，公司通过T-SIGn®平台来发现与开发肿瘤药物，本质即通过自身的免疫系统来识别、攻击和清除自身的癌细胞。Akamis Bio的T-SIGn®药物管线仍在增长当中，2个临床阶段项目NG-350A和NG-641为主要研发工作，且目前已有数百名患者接受了单药治疗和检查点抑制剂联合治疗[36]。 3.20 MiNA Therapeutics 3.20.1 融资情况介绍 MiNA Therapeutics，成立于2014年，方向为肿瘤治疗，并专注于RNA领域。2017年，这家总部位于伦敦的创新公司入选英国增长最快的100家企业。截止2022年8月，MiNA Therapeutics在8轮融资中获得了7890万英镑的股权投资，投资方包括aMoon Fund、Eli Lilly & Co、Sosei等。另，该公司还从Innovate UK获得了21.8万英镑的资助拨款。 3.20.2主营业务详细介绍 MiNA Therapeutics，主营业务为通过基因激活的固有机制，恢复患者细胞的正常功能，从而用于疾病（如肿瘤）的治疗。公司通过在RNA领域的研发积累，正在构建一个成梯次的药物研发管线，适应症指向肿瘤和其他遗传性疾病。在药物开发的同时，还在积极的推进公司在RNA领域的技术建设。MiNA Therapeutics开发的MTL-CEBPA，即通过使用RNA激活机制将C/EBP-α蛋白恢复到正常水平来减少对骨髓细胞的免疫抑制[38-39]。 3.21 Beckley Psytech 3.21.1 融资情况介绍 Beckley Psytech，成立于2018年，研发方向为使用药物来助力心理健康创新疗法的目的。该公司迄今已通过3轮融资筹集了7500万英镑的股权投资，投资者包括Adage Capital Management、Bail Capital、Bicycle Day Ventures和Delphi Ventures。 3.21.2主营业务详细介绍 Beckley Psytech公司致力于通过迷幻药物来解决神经、精神疾病的治疗。目前，公司的项目BPL-003已完成I期临床研究。BPL-003，是一种5-甲氧基-N、N-二甲基色胺（5-MeO-DMT）类药物，为一种鼻内制剂，临床用于抵抗性抑郁症和酒精使用障碍的治疗[41]。 3.22 AviadoBio 3.22.1 融资情况介绍 AviadoBio，成立于2019年，致力于神经退行性疾病的基因治疗，具体指向FTD和ALS，这部分工作源自伦敦国王学院和英国痴呆症研究所总部。AviadoBio在两轮融资中总共筹集了7220万英镑的股权投资。 3.22.2主营业务详细介绍 AviadoBio公司在研品种主要为AVB-101，属一种AAV基因疗法，用于治疗因颗粒蛋白前体基因突变导致的额颞叶痴呆。AVB-101旨在通过在整个中枢神经系统中传递相关基因的功能拷贝，以恢复正常的颗粒蛋白前体水平来减缓或阻止疾病进展。同时，AviadoBio认为AVB-101开发的适应症ALS和FTD在遗传驱动、疾病机制和病理学方面具有高度相似性，可协同品种的开发[43]。 3.23 Osler Diagnostics 3.23.1 融资情况介绍 Osler Diagnostics，成立于2016年，总部位于牛津，研发方向为手持诊断设备的开发。其部分医疗设备可用于快速检测疾病及相关的生物标志物，待经监管批准，将使快速诊断测试成为可能。通过Innovate UK等6项官方资助已获得212万英镑资金，同时还获得了4轮融资总计7040万英镑，投资者包括Oxford Science Enterprises、Bio-Rad Laboratories等。 3.23.2主营业务详细介绍 Osler Diagnostics的核心业务之一，便是公司平台开发的Osler Origin，可认为是一个“便携式实验室”。目前，市场可用的便携式诊断仪存在测试菜单和性能受限等问题，而Osler Origin具备显著的改进，可助力其在全球所有重要的医疗保健机构中提供广泛的、高效的便携式诊断[45]。 3.24 Congenica 3.24.1 融资情况介绍 Congenica，成立于2012年，总部位于剑桥，方向为通过AI技术、自动化技术、基因组分析工具等来对疾病进行治疗方案的个性化定制，也因此入选多项高增长榜单。该公司已获得创新资助等4项拨款共计357万英镑，同时通过8轮融资获得了6780万英镑的股权投资，投资方包括Amadeus Capital Partners、Cambridge Innovation Capital和Downing。 3.24.2主营业务详细介绍 Congenica公司通过自动化、可扩展以及相关数据的集成，助力繁琐的工作流程变得更加流畅。公司平台模块可满足不同样本量需求，同时快速分析基因包，全外显子组和全基因组测序数据；还可以根据需要与第三方系统整合，形成流畅的数据处理方案，快速出具报告；并通过Congenica Express、Auto-ACMG等实现不同类型变异的自动解读，提高分析通量；再，通过访问大量精选的基因、变异和参考数据库等，自动识别可靠来源的相关证据[47]。 3.25 Genomics 3.25.1 融资情况介绍 Genomics，成立于2014年，源自牛津大学，研发方向为基因组序列数据开发分析。截止2022年8月，该公司已在7轮融资中筹集了价值6620万英镑的股权投资，投资方包括F-Prime Capital Partners、Invesco、IP Group、Oxford Science Enterprises。 3.25.2主营业务详细介绍 Genomics公司开发的PHM工具，可针对广泛的健康状况数据来采取早期的干预措施。PHM工具通过使用多基因风险评分和综合风险工具来帮助改变风险分层，以在10秒内推断出常见疾病的预测，将这些看不见的风险变成看得见的风险，从而助力卫生系统部署有针对性的行为、医疗预防及筛查干预[49]。 3.26 AMO Pharma 3.26.1 融资情况介绍 AMO，成立于2014年，是一家生物制药公司，以尚未有治疗方案的罕见病和遗传性疾病为主要开发方向，如脆性X染色体综合征。公司经4轮融资已获得了6280万英镑的股权投资。 3.26.2主营业务详细介绍 AMO Pharma，致力于罕见病、遗传性疾病的治疗，目前开发的药物品种主要有3个，分别为用于治疗费伦-麦克德米德综合征的AMO-01、用于治疗先天性肌强直性营养不良的AMO-02，和用于治疗Rett综合征的AMO-04。AMO Pharma正在推进一种全新的药物开发模式，以解决共同影响全球数百万人的疾病困扰[51]。 3.27 Microbiotica 3.27.1融资情况介绍 Microbiotica，成立于2016年，研发方向为利用人类微生物研究成果来开发疾病的治疗方法，迄今已在4轮融资中获得6200万英镑的股权投资，且大部分用于临床试验1b的研究，以及管线的扩充。Microbiotica的投资者包括IP Group、Cambridge Innovation Capital、Flerie Invest和腾讯。 3.27.2主营业务详细介绍 Microbiotica主营业务的推进，依托于基于微生物组的疗法、生物标志物和靶点的开发。公司通过威康桑格研究所(Wellcome Sanger Institute)十多年来开发的转化技术克服了人类肠道细菌相关的精确表征，同时正在将这些能力产业化、平台化，以创建全球领先的微生物组培养收集和参考基因组数据库、生物信息学和机器学习技术，以及创新型的个性化细菌库。上述能力助力了该公司具有全面分析大型临床数据集的独特方法，同时识别与患者表型相关的特定细菌表征。该公司目前的重点适应症治疗领域是免疫肿瘤和溃疡性结肠炎[53]。 3.28 NeRRE Therapeutics 3.28.1融资情况介绍 NeRRE Therapeutics，成立于2012年，研发方向为使用神经激肽拮抗剂治疗咳嗽等过敏行慢性疾病。截止2022年8月，NeRRe Therapeutics已经在4轮融资中获得了6050万英镑的股权投资，投资者包括Advent Life Sciences、forbidden Capital Partners、Novo Holdings和SR One。 3.28.2主营业务详细介绍 NeRRe Therapeutics公司推进的主要品种为orvepitant，为FIC神经激肽-1（NK-1）受体拮抗剂，适应症为特发性肺纤维化(IPF)引起的慢性咳嗽，当前已进入临床II期。IPF是一种罕见的、进行性的、致命的间质性肺疾病，其中咳嗽是主要的和令人痛苦的特征，严重降低患者的生活质量，是疾病严重程度增加的标志。2b期研究(VOLCANO-2)表明，每天一次30mg的orvepitant可快速和持续地改善几个临床相关的患者报告结果(PRO)的咳嗽负担评估，为orvepitant作为慢性咳嗽治疗的益处提供了一个明确的概念证明[55-56]。 3.29 Storm Therapeutics 3.29.1 融资情况介绍 Storm Therapeutics，成立于2015年，源自剑桥，研发方向为RNA领域的小分子抗肿瘤药物开发。现已在6轮融资中获得了6040万英镑的股权投资，投资方包括Cambridge Innovation Capital、Pfizer Venture Investments、University of Cambridge Enterprise Fund。同时，该公司还获得了政府创新资助总计70万英镑。 3.29.2主营业务详细介绍 STORM Therapeutics公司在其药物发现和RNA分析平台的基础上，识别并发现了一些新的靶点和小分子药物，推出了其独特的药物研发管线，并重点侧重于开发抑制RNA修饰酶(RME)的新型疗法以应用于肿瘤及其它适应症。STORM的METTL3抑制剂(STC-15)当前已进入临床I期，是RNA修饰酶抑制剂领域的FIC品种。基于公司在RNA修饰酶领域的开发基础和经验，将深耕于此并积极探索相关适应症开发的可能[58]。 3.30 Synthace 3.30.1 融资情况介绍 Synthace，成立于2011年，是一家软件公司，其研发方向为创建世界上第一个基于云的实验平台。该公司通过自动化高通量实验、构建复杂的数据集来帮助研究者更快的进行创新工作。截止2022年8月，Synthace已经从Innovate UK获得了3笔拨款，总额为502万英镑；此外还有7笔股权融资，总价值为6010万英镑，投资方包括Amadeus Capital Partners、Outsized Ventures、Sofinnova Partners等。 3.30.2主营业务详细介绍 Synthace通过推出其基于云的自动化平台Antha，助力研究人员能够使用图形界面规划和设计实验，无需配备特定的编码技能。平台允许用户建立复杂的协议，同时在多个设备之间形成共享。自动化平台Antha可以实现通过模拟程序来识别未来工作流程中的潜在问题，并努力通过远程控制来进行试验及药物发现。在大量数据形成的基础上，共建信息科学和生物医学的高效互动，从而使研究人员有更多的时间来进行创造性的工作[60]。 04 阶段小结 综上，即为英国本土在一定股权融资基础上，其生物技术公司&制药公司30强企业的总体概述。 30强的排序是以近年来融资金额为基础，其中的制药公司数量占比较高，且大都是一些初创型生物制药公司，一般配备少量的FIC品种或一些特殊疾病领域的品种，其价值主要以估值体现。 另一大类生物技术公司，主要是依托其公司在某一生物技术领域的强实力来推动、助力产业界的发展，同时依托项目和品种来夯实自身独有的技术平台，以期形成某一技术领域的独角兽。 还有一类公司，是依托生物、医药在开发过程中工具的强辅助，来实现公司及其平台价值的体现，如上述的质谱技术、显微镜、成像仪技术等。 故，不论是哪种类型的生物技术&制药公司，能够获得资本的青睐，势必在某一领域形成一定的垄断，亦或某一品种存在一定的领头羊进度，并具备独角兽企业的潜力和特征。 关于这30家公司药物管线详情list请关注“智慧芽新药科讯”微信公众号，后台回复“TOP30”即可获取对应excel表原文件。下面为该表的部分截图。 参考资料： 1.https://www.beauhurst.com/blog/biotech-pharma-companies-uk/ 2.https://www.artios.com/science/pipeline/ 3.https://f2g.com/ 4.https://quell-tx.com/science/ 5.https://www.touchlight.com/platform-technology/dbdna-markets/ 6.https://www.bit.bio/iowild-type 7.https://www.shangyexinzhi.com/article/5079634.html 8.https://synapse.zhihuiya.com/organization/7ae75f47cda282b0788df08deea83e21 9.https://pulmocide.com/product/pc945/ 10.https://synapse.zhihuiya.com/organization/b02c0ab9f962068a13664a8dd0aab24b 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