UEVLD

近日，上海交通大学生命科学技术学院微生物代谢国家重点实验室邓子新团队康前进研究小组于国际权威期刊《自然·通讯》（Nature Communications）杂志上发表题为“Insertion sequence transposition inactivates CRISPR-Cas immunity”的研究论文。上海交大博士研究生盛勇和王珩瑜两位同学为该论文的共同第一作者。上海交大康前进副研究员、白林泉教授与邓子新教授为共同通讯作者。该研究还得到了林双君教授、陶美凤教授、丁伟特别研究员、唐满成特别研究员和上海农业科学院吴莹莹副研究员的大力支持。该工作首先通过综合应用生物信息学、分子生物学、遗传学和基因组学等多种技术手段，揭示了细菌如何利用插入序列（insertion sequences, ISs）在遗传防御与有益外源基因获取之间进化的权衡。在长期的生物进化长河中，CRISPR-Cas免疫系统被认为是广泛存在于细菌和古菌中的一种适应性免疫系统，可以有效保护宿主免受噬菌体和其他可移动元件的入侵。然而，从进化的角度来看，CRISPR-Cas免疫系统却是一把“双刃剑”。一方面，它可以抵御外来遗传物质的入侵，但同时也会限制有益外源基因的获取，在一定程度上阻碍了细菌在胁迫环境中的适应性进化。图1. IS元件转座至CRISPR-Cas系统为了研究细菌如何应对CRISPR-Cas免疫系统所带来的不利影响，通过对CRISPRCasdb数据库中所有的CRISPR-Cas系统进行了系统分析，发现了众多天然的CRISPR-Cas屏障被IS转座所破坏（图1），推测了这一现象可能与有益外源基因的获取相关。随后，研究人员通过一系列分子生物学与遗传学实验在实验室条件下成功模拟了CRISPR-Cas免疫系统与基因水平转移之间的进化权衡关系。实验结果表明，宿主菌株在经历抗生素胁迫的巨大压力下，IS元件通过转座至cas基因，实现宿主菌与带有protospacer序列的外源抗生素耐药质粒的凤凰涅槃以及宿主菌在抗生素存在的环境中得以永生。为了进一步研究IS转座特性，研究人员利用具有单个效应蛋白的type II (SpCas9) 与type V (FnCpf1) CRISPR-Cas系统在大肠杆菌中构建了一套高效的IS元件捕获系统（图2）。该系统能够选择性地捕获和分析转座至cas基因的IS元件，为解析IS转座至CRISPR-Cas系统及其对细菌适应性进化的影响提供了有力工具。为了进一步探索IS元件转座至cas基因的诱因，研究人员对SpCas9-HF1蛋白的RuvC与HNH结构域分别进行了单突变与组合突变，获得了三种具有不同切割能力的蛋白突变体。这些突变体包括对靶标链进行单链切割的SpCas9-HF1 (D10A)、对非靶标链进行单链切割的SpCas9-HF1 (H840A)以及仅结合，不切割的SpCas9-HF1 (D10A & H840A)。通过大量的质粒侵染实验及PCR验证，研究人员发现只有当SpCas9-HF1蛋白对染色体进行双链DNA断裂时，才会诱发IS元件转座至cas基因（图2）。图2. 基于CRISPR-Cas建立高效的IS元件捕获系统接着，研究人员基于密码子的简并性，对Cas核酸酶编码序列进行了三轮的迭代突变，使其DNA序列尽可能地规避IS元件识别的热点motif。然而，令人意想不到的是，即使对核酸酶编码序列进行了重构，仍然以IS1与IS10为主要的转座类型。通过对这两个元件的识别序列进行系统的比较分析，发现了正是由于这两个元件在靶标序列识别上呈现的巨大宽泛性潜能，才使得它们成为破坏CRISPR-Cas免疫系统的主要“武器”。接着，研究人员在IS元件捕获系统中，异源整合了三种修复能力不同的NHEJ（non-homologous end joining）修复系统。他们发现，尽管IS的转座频率有所下降，但转座事件仍然发生。这一结果表明，原核生物可能无法单独依靠NHEJ系统完全修复CRISPR-Cas系统引发的DNA损伤。进一步凸显了IS元件在驱动菌株对环境适应性中的重要地位。最后，研究人员通过组合大量的生物信息学工具对整个NCBI数据库中古菌、细菌与病毒中IS元件的分布进行了系统分析。结果表明，IS元件广泛存在于细菌与古菌中，且各IS家族的拷贝数存在很大差异。IS元件的广泛分布意味着它们在不同宿主中可能发挥着关键功能，通过参与宿主的适应性进化过程，从而推动宿主基因组多样性和适应性演化。为了更深入地理解IS元件在宿主进化中的作用，研究人员还探究了IS元件与其他原核生物防御系统的相互作用。有趣的是，通过系统的筛查，发现IS1与IS10转座到除了CRISPR-Cas系统以外的12种不同的防御系统中，例如限制性修饰系统与基于环状寡核苷酸的抗噬菌体信号系统等（图3）。这意味着IS元件可能通过干扰宿主的遗传防御系统，从而增加宿主获取外源有益基因的能力，并促进其自身的适应性进化。图3. IS1与IS10元件转座至多种不同的原核生物遗传防御系统迄今为止，主要发现了两种可以失活CRISPR-Cas免疫系统的机制：一类是Acr蛋白（Anti-CRISPR proteins），通过直接结合Cas蛋白来抑制Cas蛋白和crRNA组装成活性复合物，或对crRNA进行降解。另一类是噬菌体利用编码的整合酶，通过自身的attP位点与宿主基因组中的attB位点发生位点特异性重组，将基因组序列整合至宿主的CRISPR array区域，从而干扰crRNA的转录与成熟。该研究揭示了另一种高效失活CRISPR-Cas系统的机制—IS元件转座拆除的CRISPR-Cas免疫系统（图4）。这一重要发现进一步拓宽了我们对CRISPR-Cas失活机制的认知范围。图4. anti-CRISPR机制总览综上所述，这项研究表明，IS元件通过破坏宿主免疫系统，促使细菌更容易获得有益外源基因，介导了细菌遗传防御和有益外源基因获取之间的进化权衡关系，揭示了IS元件如何与宿主免疫系统相互作用，导致适应性基因的获取和整合。通过深入了解IS元件在不同环境中转座的诱因和影响因素，我们可以更好地理解细菌的遗传多样性以及其在不同环境下的定殖、生存和进化策略，并为微生物学、生物技术等相关领域的研究和应用提供重要的指导和启示。论文链接：https://www.nature.com/articles/s41467-023-39964-7会议推荐大会信息  会议名称 | 2023（第九届）肠道微生态与健康研讨会会议时间 | 2023年11月会议形式 | 线下会议地点 | 上海（定向通知）大会规模 | 800人主办单位 | 生物谷、梅斯医学联合主办 | 复旦大学微生物组中心上海交通大学生命科学技术学院上海究本科技有限公司扫码立即报名

因具备分子量小、结构简单、特异性好、稳定性高、更易于与各类融合蛋白偶联或被标记物标记等特点，纳米抗体正在成为抗体开发中一个新兴的热门领域。对于一个热门而新兴的技术领域，目前产业的推动进度、未来的发展方向始终是业界持续关注的话题。5月19日，在江苏泰州举办的首届纳米抗体药物创制国际高峰论坛上，中国科学院院士、美国科学院院士、政策专家、行业内诸多学术机构专家与企业代表等分享了他们精彩的观点，从宏观纳米抗体领域的进展，到一些重要的技术环节，再到具体临床应用，即创新药物和诊断方法的开发，以及生产工艺的商业化转移。在这些分享中，可以看到纳米抗体具有多样的探索方向，应用范围可囊括免疫疾病、脑部疾病、肿瘤、核素标记诊断。而业界对领域潜力的逐步兑现和产业链的渐趋完备也有了更多期许。扫码查看 现场精彩01直击现场主持人：叶华跃泰州医药高新技术产业园区管委会副主任大会致辞吴  翔  泰州医药高新技术产业园区党工委副书记/管委会主任抗体药产业是中国医药城产业体系中的重要板块，已经集聚了一批研发、生产和高端服务企业。纳米抗体因具备的特点广泛应用于分子影像与诊断、递送、肿瘤免疫治疗、细胞疗法等领域。在此背景下，本次高峰人才聚焦纳米抗体领域可谓恰逢其时。研讨纳米抗体的工艺、国内外研究进展及未来发展方向，必将大大推动纳米抗体领域更高质量的发展。大会致辞赵贵英 中国医药质量管理协会 书记兼常务副会长今天中国医药质量管理协会纳米抗体质量管理专业委员会宣布成立。这将对促进纳米抗体科学技术的普及与推广、推进纳米抗体产业化建设、促进中国纳米抗体领域的健康发展起到积极的作用，加强学术界、产业界、投融资界强强联合。大会致辞魏于全  中国科学院院士，生物治疗国家重点实验室(四川大学)主任近年来随着国家政策对生物医药产业的支持，中国医药市场正迎来高速发展。纳米抗体技术是新生的赛道，具有分子量小、人源化简单、稳定性高、免疫原性低、穿透力强、可用性好等优势，具备广泛的应用前景，是生物医药研究的前沿和热点。相信专委会成立将为加速我国纳米抗体药物国际进程贡献力量。也相信通过此次大会我们可以更加准确把握住产业升级变迁的机遇，加快我国纳米抗体药物的高质量发展。中国医药质量管理协会纳米抗体质量管理专业委员会成立大会揭牌仪式纳米抗体技术发展对人类的贡献与展望Bruce D.Hammock  美国科学院院士，美国加州大学戴维斯分校特聘教授、UCD综合癌症中心主任谈纳米抗体技术未来时应该先回顾过去。我们的成功可以追溯到这一领域早期的科学家，他们没有将技术独自保留，而是建立了合作和知识交流的传统。如今，全球生物医药正处于恢复期和快速增长期，抗体药物研发日趋成熟，近十年，纳米抗体作为新一代抗体药物，关于纳米抗体设计和应用的科学报道越来越多，治疗和诊断纳米抗体产品的开发将成为很有前景的商业领域。纳米抗体在诊断和治疗方面的惊人进展即将出现，而更令人兴奋的是尚未预见到的技术发展。主持人：廖明阳北京烁星生物医药科技有限公司资深副总裁科学也应该懂得谦抑李国庆 国家食品药品监督管理局原司长“谦抑”是刑法学一个重要原则，是说在穷尽其他办法之前不要轻易动用刑法手段。这个理念来思考生命科学领域，基因技术的发展已经使人类进入可以操控生命的境地，如果只重视技术的获利功能，忽视科学的认知功能的短视行为有可能给人类带来灾难。纳米抗体药物与我们一般理解的药物作用完全不同。从监管角度思考，纳米抗体尺度、形状、表面化学、粗糙度能不能准确把握？纳米颗粒与蛋白质、细胞膜、细胞、细胞器形成的纳米颗粒/生物界面如何调控？不同生物界面之间的结构与活性之间的关系究竟如何？有可能产生的生物不良后果如何控制？这些问题涉及的学科太多。我们还是要抱着“谦抑”态度，坚持伦理科学法制原则。科学原则的核心则包括基础科学的突破；技术的成熟稳定；科学严谨的临床试验。纳米抗体技术发展以及在脑中的潜在应用谢  维 东南大学生命科学与技术学院教授抗体用于治疗脑部疾病存在一些挑战：抗体及其可复制性问题，单一抗原可产生多种抗体，获得合适的抗体凭运气；抗体的特异性与可及性问题；商业化抗体没有统一标准的问题。目前业界的趋势是开发越来越小的抗体。纳米抗体被视作潜在的解决方案。已有研究显示，纳米抗体较单克隆抗体在脑内有更好扩散。纳米抗体免疫治疗创新药物研发卢小玲  中国医药质量管理协会纳米抗体质量管理专业委员会主任委员、广西医科大学纳米抗体研究中心主任纳米抗体可以克服传统单链抗体易出现重轻链错配、铰链区需要优化、容易团聚等问题。在开发免疫治疗创新药物中应用广泛，如应用于CAR-T细胞治疗领域，可进行靶向肿瘤胞内抗原的一些研究；可用于肿瘤/DC细胞融合疫苗；可开发针对PD-1、CTLA4等成熟靶点的纳米抗体产品；还可用于开发纳米抗体双特异性T细胞激动剂。纳米抗体技术开发应用研究进展李胜华  北京纽安博生物技术有限公司总裁、首席科学家纳米抗体本身有单体、二聚体、三聚体等各种各样的技术在发展，临床应用上也很广泛，从检测到治疗。创新药物方面，全球已经有4款产品获批，包括Ablynx研发的针对aTTP的Cablivi和双特异性纳米抗体Ozoralizumab，康宁杰瑞的PD-L1纳米抗体KN-035以及传奇生物靶向BCMA的纳米抗体CAR-T。截止2021年，已经有63个纳米抗体临床研究在开展。分布上，针对肿瘤、自身免疫病和感染领域的开发最多。药物开发中也呈现多领域研究探索，已经延伸到双抗、多功能抗体、新冠病毒中和抗体、艾滋中和纳米抗体研发、放射性药物、PROTACs设计等。主持人：王满朝江苏耀海生物制药有限公司董事、总经理纳米抗体药物研发与安全性评价研究廖明阳  北京烁星生物医药科技有限公司资深副总裁、原北京军事医学研究院毒物药物研究所主任目前，国内外没有专门指定和颁布有关纳米抗体药物非临床安全性评价指导原则，评价主要参考国内外颁布的纳米和有关生物技术药物非临床评价指导原则。非临床研究的关注点分为多个部分：试验内容、特殊毒性试验、动物选择、重复毒性试验、剂量设计、指标选择、ADME、免疫毒性、免疫原性等。总结起来，纳米抗体类药物和传统抗体药物评价思路有共通点；基于MOA选择合适的毒性监测标志物；对于特定结构的纳米抗体安评仍遵循case by case原则。羊驼纳米抗体的多平台开发许  龙  上海百英生物科技股份有限公司研发总监纳米抗体应用中一个挑战是来源不易，目前主要来源还是骆驼科生物。而纳米抗体的开发，最重要的其实是第一步动物免疫，后面的开发和筛选是建立在此基础上。公司构筑的纳米抗体开发平台包括噬菌体展示平台、单B细胞平台。核素标记纳米抗体在肿瘤诊断领域的应用黄文华  上海和迈生物科技有限公司中国总经理纳米抗体开发过程中将长处与应用相结合很重要。通过核素标记纳米抗体，纳米抗体与特定肿瘤靶点结合，再利用PET显像技术，可以“看到”肿瘤，实现肿瘤诊断的可视化和诊疗一体化。企业开发了核素标记的抗PD-L1纳米抗体，临床结果验证了纳米抗体与核素结合的产品具有很好的组织渗透性，较好的专一性。并且，与普通抗体一大区别，纳米抗体在人体血象中清除很快，在影像诊断中能够提供较为干净的背景；而作为配体，纳米抗体的PK/PD与半衰期短的核素非常匹配。纳米抗体这些特性与核素进行搭配，在临床中可能成为一把非常锐利的武器。主持人：查长春上海百英生物科技股份有限公司董事长靶向GPCR纳米抗体药物开发谈静泉  南京晶准生物科技有限公司董事长GPCRs是人体内最大的药物靶点家族，几乎与所有疾病领域都有关系。目前针对GPCR靶点，小分子药物仍占绝对多数。海外高度重视GPCR抗体研发，但进展不理想，目前只有两款获批。在GPCR领域，纳米抗体最早用于GPCR结构解析。2015年首次应用于药物开发，这是个非常经典的案例。开发企业首先筛选出GPCR拮抗剂，然后解析结构，进行结构改造，继而获得工业界首个抗体类GPCR激动剂。这里的启示在于，高难度靶点用常规思路不一定得到理想的结果，需要开拓的思路。纳米抗体在GPCR的应用还包括通过ADCC/CDC途径间接调控。别构调控，作为药物发现辅助工具。整体看来，纳米抗体在GPCR领域的应用是多种多样的。纳米抗体的工艺开发、技术转移与商业化生产左  涛  耀海生物技术（北京）有限公司执行总经理纳米抗体药物真正作为商业化品种进行产业化，需要有商业化基础的工艺，包括足够的产量，合适的成本和高标准的质量。在CMC开发和商业化过程中，必然存在工艺转移，需要聚焦的是，不仅是产品的实现，最重要的是知识的过程转移。而工艺转移是否成功，主要取决于工艺转移的团队，以及投入到转移上面的资源。复杂项目，需要被转移方的高层提供足够的支持和资源，同时要成立专门的项目组处理其中的复杂工作，以保证工艺转移充分完整。商业化生产仅仅是一个节点，商业化生产之前还有很多工作要做，其中比较重要的是工艺的表征和工艺的验证。02精彩花絮03项目路演5月20日上午，备受瞩目的项目路演活动在泰州万怡酒店圆满举办，精选近十个纳米抗体领域优质项目围绕项目背景、项目进展、合作及融资需求等方面进行了详细阐述。通过现场路演推介和洽谈对接，部分项目已经与多家企业、投资方建立初步的合作及融资意向。04基地参观为加速纳米抗体的深入研究及大规模稳定的生产，大会特别组织耀海生物微生物表达CDMO产业化基地及百英生物羊驼基地考察与交流。耀海生物微生物表达CDMO产业化基地*左右滑动查看更多耀海生物微生物表达CDMO产业化基地总建筑面积约10000平方米。投资约2亿元，平台建有三条原液生产线、一条预灌封制剂生产线、一个现代化的质量检测与研究中心。业务范围包括重组蛋白/多肽、纳米抗体、重组新型疫苗和重组质粒及RNA药物等技术领域的研究实验及GMP（良好生产规范）生产服务，覆盖从临床前到商业化生产的不同需求。百英生物羊驼基地*左右滑动查看更多百英生物的羊驼基地占地30余亩，育有300余只羊驼，所有信息档案电子化、数据化、可追溯。免疫分别建库，保证高丰度、高库容，可保证独特序列交付。配套有纳米抗体人源化和亲和力成熟等抗体工程改造服务，可提供抗体药物的一站式筛选服务。尽管以上只是撷取了一部分“干货”，但已经集合了相当丰富的内容，展示出纳米抗体多层次、多方向的探索与推进，预示着该领域正驶向发展的快车道。更多的研究进展、更多的临床转化，对于业界而言或许恰是一针“强心剂”。END

在各种人类疾病的治疗应用中，核酸药物蕴藏巨大的潜力。由于核酸分子相对较大，带负电荷，将其递送进入靶标细胞或者组织的效率很低，递送技术成为限制核酸药物临床转化的主要难题。经过多年的发展，研究员已经开发出多种用来进行体内核酸药物递送的平台技术，例如，病毒载体，化学合成纳米载体（LNPs）等，然而，现有的这些技术还远远不够完善，面临诸多痛点，例如，免疫原性和毒性问题，质量控制，高昂的成本，无法递送穿过特殊的生理屏障（血脑屏障）。最近，细胞分泌到胞外的囊泡（EVs），例如，外泌体（exsomes）开始逐渐成为一种非常有前景的核酸药物递送载体。这些分泌的 EVs 直径在 40-150nm，有着良好的生物相容性，天然镶嵌跨膜或者膜结合型蛋白。这些蛋白能够延长 EVs 在血液中的循环，促进组织靶向性的递送，增强细胞对包封进外泌体内涵物的摄取。2017 年，Sushrut Kamerkar 等人利用传统批量电转的方式（bulk electroporation,BEP）将靶向 Kras 突变基因的 siRNA 或者 shRNA 包封进 CD47 介导的外泌体中，与脂质体相（Liposomes）比，CD47 能够抑制单核细胞的吞噬作用，使得外泌体在血液循环中的滞留时间增长，从而提升外泌体在小鼠胰腺癌模型中的治疗效果。尽管外泌体作为核酸递送载体有着非常多的优势，但是，外泌体的大规模生产存在技术挑战，这极大限制了外泌体的体内应用。首先，只有极其少数的细胞类型才能分泌足够多的可用于临床转化的外泌体。第二，为产生临床级别剂量的外泌体，通常需要数天培养大量的细胞，紧接着进行外泌体纯化，最后将核酸药物包封进外泌体。这一过程中，还存在诸多难点需要优化，例如，如何高效包封特定的 RNA?如何增强细胞分泌外体的能力？如何设计靶向性的外泌体？如何诱导外泌体中的内含物快速释放到细胞质中?有些科学家采用基因工程的手段，优化分泌体生产过程。2018 年，Ryosuke Kojima 等人利用合成生物学的方法，对底盘细胞基因组进行工程化改造，增强涉及外泌体生成和分泌的一系列基因的表达，成功提升底盘细胞外泌体分泌能力、包封 mRNA 效率以及递送效率。Qiyu Wang 等人利用逮捕素结构域的蛋白 1（ARRDC1）介导的微囊泡（ARMMs）包封 RNA。转录反式激活因子蛋白（Tat）能特异性结合携带反式激活反应元件茎环结构的 RNA(TAR)，将 Tat 多肽和 ARRDC1 C 末端融合，目标 mRNA 5'末端融合 TAR，利用 Tat 短肽和 TAR 之间高亲和力的结合，从而将 TAR-mRNA 包封进 ARMMs 微囊泡中。此外，有人还提出设想，采用病毒载体系统在体内转染细胞，将其转化为治疗性外泌体的生产工厂。或者，也可以采用类似于 CART 细胞疗法的做法，在体外转染免疫细胞，将其转化为产生外泌体的母体细胞群体。虽然安全性将是一个问题，但是这种方法可以避开目前体外外泌体生产和批次变化问题。图 1：利用基因工程手段优化提升分泌生产。还有一些人采用非基因工程的手段，增强外泌体的产量。2019 年，吉林大学生命科学学院滕乐生教授与美国俄亥俄州立大学 L. James Lee 教授、德州大学安德森癌症中心 Betty Y. S. Kim 教授共同在 Nature Biomedical Engineering 发表封面文章：Large-scale generation of functional mRNA encapsulating exosomes via cellular nanoporation。他们采用细胞纳米穿孔（cellular nanoporation,CNP）生物芯片刺激细胞产生和释放含有 mRNA/siRNA/microRNA 的外泌体。CNP 系统由纳米孔道微阵列构成，每一个孔道直径在 500nm。在芯片表面培养单层细胞。瞬时电压能够让 buffer 缓冲液中的质粒进入到附着与芯片表面的细胞中，随后，细胞会分泌大量内含从质粒 DNA 中转录而来的 mRNA 的外泌体，与批量电转的方式相比，CNP 系统能够产生多达 50 倍的外泌体和超过 103 倍的外泌体内含物 mRNA，甚至是对一些外泌体分泌本底水平低的细胞也是如此。图 2：细胞纳米穿孔 CNP 系统能够产生大量包封有 mRNA 的外泌体。胶原蛋白的不可逆流失引起的皮肤萎缩是皮肤老化的一个标志。从护肤品或者药物（抗氧化剂，维甲酸酯，肽）到医美设备（激光治疗和合成皮肤填充剂），人们尝试各种办法企图恢复皮肤中损失的胶原蛋白。胶原蛋白能够维持皮肤的强度、紧实度和弹性，然而，这些现有的技术都无法实现内源性胶原蛋白的长期补充替代。刺激负责合成胶原蛋白的成纤维细胞是短期控制皮肤老化的有效方法。然而，随着成纤维细胞的衰老，它们会逐渐丧失增殖和合成胶原蛋白的能力。因此，胶原蛋白的长期替代补充是抗衰老治疗过程中的挑战所在。2023 年，中国医学科学院阜外医院兰峰教授和北京大学深圳研究院的 Andrew S. Lee 教授合作团队采用细胞纳米穿孔（cellular nanoporation,CNP）系统生产包封 COL1A1-mRNA（编码细胞外基质 I 型α胶原蛋白）的外泌体，在光老化小鼠模型中（光照引起真皮层组织中胶原蛋白的耗尽），诱导胶原蛋白形成，并减少皮肤皱纹的形成。而且，他们还发现采用微针阵列皮内递送包封 COL1A1-mRNA 的外泌体，能够使得外泌体在真皮层的分布变得更加均匀，延长胶原蛋白的合成时间。总之，这项研究充分证实分泌体介导的 COL1A1-mRNA 的皮内递送可能成为治疗光老化皮肤的一种有效的蛋白替代疗法。图 3：在 UV-光老化小鼠模型中，采用分泌体递送 COL1A1-mRNA，能够减少真皮层皱纹形成。虽然有一些采用外泌体递送载体的临床试验正在进行，但到目前为止，外泌体市场化的前景并不是很明朗。这其中有一部分原因可能是因为外泌体大规模生产和纯化工艺的不足，还有一部分原因是目前大部分研究聚焦在在开发新的外泌体系统，并通过体外和动物模型以证明其新型外泌体递送系统的潜力，而很少有研究者将精力放在了解或者攻克外泌体临床转化应用过程中所亟待解决的难题上。在大多数外泌体的研究中，研究人员都是通过 100,000×g 的超速离心和 0.22μm 过滤器从细胞上清液中提取外泌体。通过这种方法得到的外泌体随后被用于各种研究，包括体内评估。然而，这种方法是繁琐的，会产生异源的外泌体群体，给临床转化应用带来巨大的挑战。此外，外泌体在体内的半衰期不到 48h，使用外泌体进行治疗递送载体时就需要多次重复给药。但是，无论如何，有一个事实是清楚的：作为一种独特的递送载体，外泌体与 LNPs 和病毒载体有着显著的差异，这将可能改变基因细胞治疗领域未来的发展轨迹。参考文献Nature| Exosomes Facilitate Therapeutic Targeting of Oncogenic Kras in Pancreatic CancerNature Communication| Designer exosomes produced by implanted cells intracerebrally deliver therapeutic cargo for Parkinson’s disease treatment.Nature Communication| ARMMs as a versatile platform for intracellular delivery of macromolecules.Nature Biomedical engineering| Intradermally delivered mRNA-encapsulating extracellular vesicles for collagen-replacement therapy在抗体圈微信公众号回复“JPM23”可下载60 家药企PPT合集。识别微信二维码，添加生物制品圈小编，符合条件者即可加入生物制品微信群！请注明：姓名+研究方向！版权声明本公众号所有转载文章系出于传递更多信息之目的，且明确注明来源和作者，不希望被转载的媒体或个人可与我们联系(cbplib@163.com)，我们将立即进行删除处理。所有文章仅代表作者观点，不代表本站立场。