C225-ILS-DOX

导读：近年来，纳米医学领域研究取得显著进展，抗体偶联脂质纳米颗粒（Ab-LNP）因其强的特异性和治疗效果而成为一种有前途的靶向治疗递送策略。 2023年12月，Sanofi研发团队Sheryl Wang、Hong Wang等人在Molecular Pharmaceutics上发表题为《Unleashing the Potential: Designing Antibody-Targeted Lipid Nanoparticles for Industrial Applications with CMC Considerations and Clinical Outlook》的文章，深度分析了Ab-LNP的设计、开发、CMC考量和临床应用等多个方面，强调其在临床应用方面的巨大潜力。 前期文章我们解读了其中一部分内容：Sanofi最新综述|抗体偶联LNP(Ab-LNP)的CMC产业化考量(1)-化学偶联方法与制备，今天的文章，我们将对“Ab-LNP的产业化应用和CMC考量”部分做详细解读。 01  脂质递送系统的发展历史 脂质体（主要由磷脂组成，具脂质双层包围的液体核）作为开创性的基于脂质的纳米颗粒，被开发用于提供小分子治疗；LNP具固体核心，由磷脂、可电离脂质和胆固醇组成，二者相似的双层表面允许将脂质体中使用的抗体表面偶联技术应用至LNP。早期的研究包括来自Torchilin的开创性工作，其显示出与脂质体偶联的抗体的特异性活性，后续研究人员对Ab-LNP与针对转铁蛋白受体（TfR）、人表皮生长因子受体2（HER2）、血管内皮生长因子（VEGF）、上皮生长因子受体（EGFR）、CD44、CD133、CD105等的靶向抗体的使用进行研究。 研究人员一直致力于寻求与细胞表面受体或抗原特异性结合的抗体，以增强LNP递送的治疗有效载荷的选择性和有效性，开发能靶向广泛疾病（如癌症、遗传疾病和心血管疾病）的Ab-LNP。 大多数Ab-LNP处于研究阶段，部分（包括MM-302、MM-310、C225-ILs-Dox和MCC-465等均为抗体定向的脂质体化疗药物）已进入临床试验阶段，使用Ab-LNP选择性地递送化疗药物来增强癌细胞中的药物积累，可最大限度地减少脱靶效应、降低全身毒性并改善治疗效果。 图1 LNP开发示意图 02  Ab-LNP的设计和制备 偶联抗体显著增强LNP的特异性。多种偶联策略涉及抗体与脂质锚点的位点特异性连接，包括碳二亚胺反应、二硫键交换和Michael加成的方法。 其中碳二亚胺反应是将含羧基（-COOH）的脂质与抗体中的伯胺（-NH）偶联。二硫键交换主要基于抗体中半胱氨酸残基的巯基（−SH）与吡啶基二硫基反应性基团形成不稳定的二硫键。Michael加成法为PEG脂质的马来酰亚胺基团与部分还原抗体的巯基之间的反应。 Ab-LNP的制备方法包含一锅法（one-pot）和后修饰法（postdecoration）。一锅法在颗粒形成过程中直接结合形成配体-脂质偶联物，后修饰法包括表面偶联法和后插入法，用于将配体引入LNP的表面。 图2 Ab-LNP制备方法 03  Ab-LNP的CMC考量 CMC（化学、制造和控制）在药品开发中发挥重要作用，尤其对于Ab-LNP等复杂制剂。工艺条件的微小改变会影响颗粒的尺寸、形状、表面电荷和其他关键质量属性，进而影响其生物分布、清除率及治疗效果。还需控制从研究过渡到工业规模可能带来的可变性。因此，要求采用适当的分析方法进行过程控制和产品表征，及严格的稳定性研究。QbD被推荐用于Ab-LNP的工艺开发。Wicki等人描绘了与包裹抗EGFR抗体的脂质体阿霉素的大规模GMP生产有关的工艺流程图，以提供抗体偶联药物的开发路径参考。 图3 抗体偶联药物的生产周期 除用于药物放行的分析方法外，还需开发用于过程控制的方法，以监控、调整制备过程。下表概述了具直接或间接评估Ab-LNP潜力的重要方法。  表1 Ab-LNP的关键质量属性(上)和分析表征方法(下) 04  Ab-LNP的体内分布 Ab-LNP可通过口服、静脉注射、透皮、肌肉注射、皮下和肺部等途径给药。在细胞水平上，Ab-LNP在体内的命运是其安全性和有效性的关键决定因素。 每种LNP制剂的生物分布和组织趋向性都是独一无二的，由其固有大小、表面电荷、蛋白质电晕和脂质结构决定。在多种肿瘤模型中，EphrinA2靶向和非靶向脂质体之间的药代动力学（PK）谱相似，但EphrinA2靶向改变了肿瘤组织中的药物微分布，并导致第三、四剂后肿瘤中的药物积累增加。Kirpotin等人证明，HER2 Fab靶向与非靶向免疫脂质体在荷瘤小鼠中的生物分布和半衰期相似，但细胞内化过程存在差异，相较于非靶向免疫脂质体，靶向免疫脂质体被过表达HER2受体的癌细胞选择性内化，导致其具有更好的抗肿瘤活性。 这些不同Ab-LNP中的PK和微分布结果表明尽管颗粒的整体生物分布可能保持不变，但抗体靶向在增强脂质纳米颗粒治疗效果方面至关重要。 图4 EphA2靶向的体内机制 05  靶向LNP的临床研究进展 Ab-LNP有可能提高小分子和核酸疗法的疗效及PK，并降低脱靶效应。目前几种用于治疗实体瘤的靶向LNP候选药物处于临床试验阶段，包括携带质粒DNA的抗TfR scFv修饰脂质体（如SGT-53和SGT-94）、树突状细胞靶向脂质体疫苗Lipovaxin-MM及封装化疗药物的抗体导向脂质体（如MM-310、MM-302、C225-ILs-Dox和MCC-465）。 市售的基于纳米颗粒的药物产品稀缺，但研究人员的研究兴趣高涨，尤其是使用精确设计的Ab-LNP在体内产生CAR-T细胞来治疗恶性癌症。 06  总结 Ab-LNP靶向递送平台将抗体特异性和脂质纳米颗粒的多功能性相结合，在最大限度减少脱靶效应的同时提高了治疗效果。Ab-LNP开发的重点是优化其结构以实现靶向递送。 在肿瘤学领域，尤其在实体瘤治疗中，LNP结合抗体的能力允许其精确靶向癌细胞，从而增强治疗有效载荷向肿瘤细胞的递送。Ab-LNP在肿瘤学领域的临床转化尚未进展到后期，需进一步研究来克服配方、CMC和监管相关的挑战。在非病毒基因治疗领域，Ab-LNP可能会彻底改变核酸酶mRNA和向导RNA等基因编辑工具的递送，提高基因编辑的效率并减少脱靶效应。 Ab-LNP在基因治疗中的临床转化目前处于起步阶段，随着持续的研究创新，Ab-LNP有可能改变靶向治疗的格局，在未来的医学中发挥越来越重要的作用。 识别微信二维码，添加生物制品圈小编，符合条件者即可加入 生物制品微信群！ 请注明：姓名+研究方向！ 版 权 声 明 本公众号所有转载文章系出于传递更多信息之目的，且明确注明来源和作者，不希望被转载的媒体或个人可与我们联系(cbplib@163.com)，我们将立即进行删除处理。所有文章仅代表作者观点，不代表本站立场。