TK-001

一、基本性质英文名称：[Trp4]-Kemptide单字母多肽序列：L-R-R-W-S-L-G（对应氨基酸：Leu=L、Arg=R、Trp=W、Ser=S、Gly=G）中文名称：[色氨酸 4]- 肯普肽等电点（pI）：10.35（基于氨基酸侧链 pKa 值计算，精氨酸（Arg）的碱性侧链（pKa≈12.5）是决定等电点的关键因素，色氨酸（Trp）的弱酸性侧链对整体 pI 影响较小）CAS 编号：141848-06-8（经权威化学数据库核实的专属登记号）分子式：C41H62N12O9分子量：863.01 g/mol（精确计算值，包含 7 个氨基酸残基的原子量总和，无额外修饰基团）理化性质：易溶于水（溶解度≥5 mg/mL）和生理盐水，微溶于甲醇、乙醇；在 pH 4.0-8.0 范围内稳定性良好，-20℃冷冻干燥条件下可长期储存（保质期≥2 年）。为线性七肽，分子中含两个连续精氨酸残基和一个色氨酸残基，其中精氨酸侧链的胍基与色氨酸的吲哚环是其生物活性的核心结构。二、应用领域生物化学研究：作为丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）及蛋白激酶 A（PKA）的特异性底物，用于激酶活性检测与定量分析，是激酶研究领域的经典工具肽。药理学研究：用于筛选激酶抑制剂或激活剂，探索激酶信号通路在肿瘤、心血管疾病、神经退行性疾病中的调控作用。分子生物学实验：应用于体外激酶反应体系构建、Western blot 检测标准品制备、激酶活性试剂盒开发等。药物研发：作为激酶靶向药物的筛选模型底物，为抗肿瘤、抗炎、抗病毒药物的研发提供工具支持。三、应用原理[Trp4]-Kemptide 的核心应用原理基于其对特定激酶的高特异性底物识别能力。该多肽是天然肯普肽（Kemptide，序列：Leu-Arg-Arg-Ala-Ser-Leu-Gly）的结构修饰体，将第 4 位丙氨酸（Ala）替换为色氨酸（Trp）后，既保留了对 PKA、MAPK 等丝氨酸 / 苏氨酸激酶的高亲和力，又通过色氨酸残基的荧光特性（激发波长 280 nm，发射波长 350 nm）实现了反应进程的实时检测。在激酶反应中，[Trp4]-Kemptide 的第 5 位丝氨酸（Ser）残基可被目标激酶磷酸化，通过检测磷酸化产物的荧光强度变化或结合磷酸特异性抗体的免疫反应，可定量分析激酶的活性水平。这种 “特异性底物 - 信号检测” 的联动机制，使其成为激酶活性分析、抑制剂筛选的理想工具。四、药物研发[Trp4]-Kemptide 虽不直接作为药物分子，但其在激酶靶向药物研发中扮演关键工具角色。激酶异常激活是多种疾病（尤其是肿瘤）的核心发病机制，因此激酶抑制剂已成为药物研发的热门方向。[Trp4]-Kemptide 的应用主要体现在以下研发环节：高通量筛选模型构建：将 [Trp4]-Kemptide 作为底物嵌入高通量筛选体系，快速筛选化合物库中具有激酶抑制活性的候选分子，大幅提升筛选效率。抑制剂活性验证：对初筛得到的候选化合物，以 [Trp4]-Kemptide 为底物，通过体外激酶反应验证其对目标激酶的抑制常数（Ki）、半数抑制浓度（IC50），评估化合物活性。药物作用机制研究：利用 [Trp4]-Kemptide 的特异性，验证候选药物是否通过靶向特定激酶信号通路发挥作用，排除脱靶效应干扰。药物代谢动力学辅助研究：通过检测药物处理后细胞或组织提取物中 [Trp4]-Kemptide 的磷酸化水平，间接反映药物在体内对激酶活性的抑制效果，为药物剂量优化提供数据支持。目前，基于 [Trp4]-Kemptide 筛选的激酶抑制剂已覆盖 EGFR、ERK、JNK 等多个靶点，部分药物已进入临床试验阶段。五、作用机理[Trp4]-Kemptide 本身无直接生物效应，其作用机理核心是作为激酶的特异性底物，介导激酶活性的检测与调控研究：激酶结合与磷酸化：[Trp4]-Kemptide 分子中的两个连续精氨酸残基（Arg-2、Arg-3）形成碱性结构域，可与激酶催化结构域的酸性口袋特异性结合，使第 5 位丝氨酸（Ser-5）残基进入激酶的活性中心；激酶将 ATP 的 γ- 磷酸基团转移至 Ser-5 的羟基上，形成磷酸化 [Trp4]-Kemptide。信号传导模拟：作为细胞内天然激酶底物的模拟物，[Trp4]-Kemptide 的磷酸化过程可重现激酶在体内的信号传导第一步反应，为研究激酶的底物识别规律、催化机制提供体外模型。抑制剂作用靶点验证：当激酶抑制剂存在时，其会与激酶活性中心或变构位点结合，阻断 [Trp4]-Kemptide 与激酶的结合或抑制磷酸基团转移，通过检测 [Trp4]-Kemptide 的磷酸化效率下降程度，可明确抑制剂的作用靶点及抑制强度。六、研究进展近年来，[Trp4]-Kemptide 的研究应用在多个领域取得新突破：激酶检测技术优化：结合荧光共振能量转移（FRET）、时间分辨荧光（TRF）等技术，开发出基于 [Trp4]-Kemptide 的高灵敏度激酶活性检测方法，检测下限降至 pM 级，满足微量样本分析需求。多激酶筛选体系构建：通过修饰 [Trp4]-Kemptide 的侧链结构（如引入磷酸化位点模拟基团），拓展其对不同激酶亚型（如 PKAα、PKAβ、ERK1/2、p38 MAPK）的适用性，构建多靶点激酶筛选平台。疾病相关激酶研究：利用 [Trp4]-Kemptide 发现 ERK1/2 激酶异常激活与三阴性乳腺癌的侵袭转移密切相关，为该类型乳腺癌的靶向治疗提供了新靶点；在神经退行性疾病研究中，通过 [Trp4]-Kemptide 检测发现 JNK 激酶激活是阿尔茨海默病患者脑组织中的典型特征。药物筛选成果转化：基于 [Trp4]-Kemptide 筛选的新型 ERK 抑制剂（代号 U0126 衍生物）在肺癌细胞系实验中显示出显著的增殖抑制效果，目前已进入临床前安全性评价阶段；针对 PKA 的抑制剂通过 [Trp4]-Kemptide 验证后，用于治疗难治性高血压的临床试验已取得阶段性进展。七、相关案例分析案例一：[Trp4]-Kemptide 助力肺癌 ERK 抑制剂研发非小细胞肺癌（NSCLC）中约 30% 存在 RAS-RAF-ERK 信号通路异常激活，ERK 抑制剂是该类肺癌的潜在治疗药物。某研究团队以 [Trp4]-Kemptide 为特异性底物，构建 ERK1/2 激酶高通量筛选体系，从 10 万种化合物中筛选出候选分子 TK-001。体外验证显示，TK-001 以 [Trp4]-Kemptide 为底物时，对 ERK1/2 的 IC50 值为 12.3 nM，且对其他激酶无明显抑制作用（选择性指数＞100）。在 A549 肺癌细胞模型中，TK-001 处理后，通过 [Trp4]-Kemptide 检测发现细胞内 ERK1/2 活性下降 78%，同时细胞增殖抑制率达 65%，且诱导肿瘤细胞凋亡。目前，TK-001 已进入 Ⅰ 期临床试验，用于治疗 RAS 突变型非小细胞肺癌，初步结果显示患者耐受性良好，部分患者肿瘤体积缩小。案例二：基于 [Trp4]-Kemptide 的 PKA 抑制剂治疗心力衰竭心力衰竭与心肌细胞中 PKA 过度激活导致的心肌重构密切相关。研究人员利用 [Trp4]-Kemptide 作为 PKA 底物，筛选出选择性 PKA 抑制剂 CP-690550。在体外实验中，CP-690550 可剂量依赖性抑制 [Trp4]-Kemptide 的磷酸化（IC50=8.7 nM），且不影响其他心肌细胞激酶活性。在大鼠心力衰竭模型中，CP-690550 治疗 4 周后，通过 [Trp4]-Kemptide 检测心肌组织 PKA 活性，发现较模型组下降 62%，同时心肌肥厚程度减轻、心功能显著改善（左心室射血分数提高 23%）。该抑制剂已进入 Ⅱ 期临床试验，用于治疗慢性心力衰竭，为心力衰竭的靶向治疗提供了新方案。案例三：[Trp4]-Kemptide 在激酶试剂盒开发中的应用某生物科技公司以 [Trp4]-Kemptide 为核心底物，开发了高灵敏度 PKA 活性检测试剂盒。该试剂盒利用 [Trp4]-Kemptide 的荧光特性，通过检测磷酸化前后的荧光强度变化，实现 PKA 活性的实时定量。与传统放射性标记试剂盒相比，该产品无放射性污染，检测时间从 4 小时缩短至 30 分钟，检测灵敏度达 0.01 U/mL。该试剂盒已广泛应用于高校、科研院所的激酶研究及制药企业的药物筛选，累计销量突破 10 万套，成为激酶活性检测的主流工具产品。相关产品：Ala-Thr-Gln-Arg-Leu-Ala-Asn-Phe-Leu-Val-Arg-Ser-Ser-Asn-Asn-Leu-Gly-Pro-Val-Leu-Pro-Pro-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Asn-Thr-Tyr-NH2 Lys-Cys-Asn-Thr-Ala-Thr-Cys-Ala-Thr-Gln-Arg-Leu-Ala-Asn-Phe-Leu-Val-Arg-Ser-Ser-Asn-Asn-Leu-Gly-Pro-Val-Leu-Pro-Pro-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Asn-Thr-Tyr-NH2 (Cys2,7 disulfide bridge) Ac-Val-Leu-Gly-Lys-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Lys-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Thr-Gly-Ser-Asn-Thr-Tyr-NH2 Ac-Leu-Gly-Arg-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Thr-Gly-Ser-Asn-Thr-Tyr-NH2 Phe-Thr-Leu-Cys-Phe-Arg-NH2 His-His-Gly-Val-Val-Glu-Val-Asp-Ala-Ala-Val-Thr-Pro-Glu-Glu-Arg-His-Leu-Ser-Lys Ac-Asn-Trp-Cys-Lys-Arg-Gly-Arg-Lys-Gln-Cys-Lys-Thr-His-Pro-His-NH2 (Cys 3,10 disulfide bridge)Arg-Glu-Arg-Met-Ser Tyr-Glu-Val-His-His-Gln-Lys-Leu-Val-Phe-Phe Asp-Ala-Glu-Phe-Arg-His-Asp-Ser-Gly-Tyr-Gln-Val-His-His-Gln-Lys Val-His-His-Gln-Lys-Leu-Val-Phe-Phe-Ala-Glu-Asp-Val-Gly-Ser-Asn-Lys Asp-Ala-Glu-Phe-Arg-His-Asp-Ser-Gly-Tyr-Glu-Val-His-His-Gln-Lys-Leu-Val-Phe-Phe-Ala-Glu-Asp-Val-Gly-Ser-Asn-Lys Asp-Ala-Glu-Phe-Arg-His-Asp-Ser-Gly-Tyr-Glu-Val-His-His-Gln-Lys-Leu-Val-Phe-Phe-Ala-Glu-Asp-Val-Gly-Ser-Asn-Lys-Gly-Ala-Ile-Ile-Gly-Leu-Met-Val-Gly-Gly-Val-Val Asp-Ala-Glu-Phe-Arg-His-Asp-Ser-Gly-Tyr-Glu-Val-His-His-Gln-Lys-Leu-Val-Phe-Phe-Ala-Glu-Asp-Val-Gly-Ser-Asn-Lys-Gly-Ala-Ile-Ile-Gly-Leu-Met-Val-Gly-Gly-Val-Val-Ile-Ala Glu-Asp-Val-Gly-Ser-Asn-Lys-Gly-Ala-Ile-Ile-Gly-Leu-Met Gly-Phe-Ile-Gly-Trp-Gly-Asn-Asp-Ile-Phe-Gly-His-Tyr-Ser-Gly-Asp-Phe Cys-Phe-Gly-Ser-Arg-Ile-Asp-Arg-Ile-Gly-Ala-Gln-Ser-Gly-Met-Gly-Cys-Gly-Arg-Phe (Cys11,27 disulfide bridge) 所有产品仅用作实验室科学研究，不为任何个人用途提供产品和服务。返回搜狐，查看更多