随着肿瘤生物学研究的发展，新的作用机制、靶点不断出现。但是在临床上不同个体对同一药物的反应存在差异，宿主、肿瘤和外在因素会影响个体对抗肿瘤药物的反应。使用伴随诊断试剂检测肿瘤患者中标志物的状态，可以为药物安全和有效性提供重要信息。2022年国家药监局发布了“与抗肿瘤药物同步研发的原研伴随诊断试剂临床试验注册审查指导原则”，对同步开发过程中抗肿瘤药物及伴随诊断试剂如何共同开展临床试验进行一般要求。接下来我们将会介绍目前研究比较热门的Claudins 18.2及其伴随诊断试剂研究进展。Claudin 18.2：肿瘤免疫治疗靶点Claudin-18蛋白分子量约26KD，有两种亚型：Claudin-18.1和Claudin-18.2。Claudin-18.1主要在肺中表达，在其他组织中鲜有表达；而Claudin-18.2在胃黏膜上皮细胞中表达，在胃癌、胰腺癌、食管癌等组织中的表达尤其高，在肺组织中却鲜有表达。二者组织特异性较高的特点，是Claudin-18.2成为治疗性靶点的分子学基础。Claudin-18.2作为一个高度特异性的细胞表面分子，在正常胃组织中仅表达于已分化的上皮细胞，不在胃干细胞表达，但在原发性胃癌、转移性胃癌、胰腺癌、食管癌、卵巢癌、肺癌等多种实体瘤中高表达，例如50%-80%的胃癌患者中存在Claudin-18.2的表达。Claudin-18.2暴露的胞外结构可与抗体结合，使其成为理想的单克隆抗体开发靶点，尤其是实体瘤免疫治疗。目前批准进入临床试验靶向Claudin-18.2的疗法主要有三类：单克隆抗体、CAR-T细胞和双特异性抗体。比如IMAB362就是一种特异靶向Claudin-18.2的人鼠嵌合IgG1单抗，能够与肿瘤细胞的Claudin-18.2第一个胞外域结合，诱导肿瘤细胞死亡。CT041是一种CAR-T细胞疗法，目前已在晚期胃腺癌或胰腺癌患者中开展临床试验。双特异抗体如Claudin 18.2/PD-L1双抗SPX-301、Claudin 18.2/CD3双抗AMG910等。Claudin 18.2：诊断试剂研究Claudin-18.2在正常组织与肿瘤组织表达差异，参与肿瘤的发生和发展，位于细胞外膜，使其成为一种选择性高的细胞谱系标记物。找到Claudin-18.2在正常组织和癌组织中表达水平的理想分界点，分析不同组织的表达水平，有望在临床上用于癌症的诊断、评估预后效果。已有研究表明Claudin-18.2可作为胰腺导管肿瘤的早期标志物。Claudin-18.2将会是伴随诊断热点。比如以其为靶点的临床试验需以组化筛查肿瘤Claudin-18.2阳性或高表达的患者为基础。并且临床数据显示免疫组化（IHC）检测阳性率高的患者治疗效果更好。因此通过精准的IHC筛查Claudin-18.2表达，能够提高药物开发效率，并指导用药及治疗。Arnold等人对Claudin-18.2抗体进行研究，依据IRS统计学方法对IHC结果进行分析，结果显示广谱抗体43-14A和特异性抗体EPR19202在392例病例上的表达存在差异，在IRS>8的病例上，43-14A表现出了更高的灵敏度。义翘神州Claudin18抗体义翘神州利用抗体开发平台的优势，获得Claudin-18.1/-18.2广谱型抗体，与市场上高品质抗体具有较好的一致性。左上：市售抗体产品在胃癌组织的免疫组化结果（抗体用量：3μg/mL）右上：市售抗体产品在胰腺癌组织的免疫组化结果（抗体用量：3μg/mL）左下：义翘神州抗体产品在胃癌组织的免疫组化结果（抗体用量：1μg/mL）右下：义翘神州抗体产品在胰腺癌组织的免疫组化结果（抗体用量：1μg/mL）结果显示，在人胃癌组织、胰腺癌组织中，义翘神州Claudin单抗（Cat：109915-MM02，1μg/mL）在部分癌细胞胞膜强度阳性表达，与市售抗体相比，阳性率高、阳性信号强、信噪比更佳、灵敏度更高。通过以上案例分享，我们知道Claudin 18.2伴随诊断试剂主要是通过免疫组化技术进行检测。在开发过程中IHC抗体原料的质量至关重要。那么，用于伴随诊断的抗体开发与常规抗体开发有何不同呢？有哪些方法可以提高抗体开发成功率呢？如何缩短时间提高效率呢？对于这些关注度比较高度话题，我们邀请义翘神州的高级技术支持杨颖老师给我们带了一场在线分享课程，欢迎大家报名参加。参考文献：1. Jian Li , Targeting claudins in cancer: diagnosis, prognosis and therapy. Am J Cancer Res 2021;11(7):3406-34242. Singh, et al. Anti-claudin 18.2 antibody as new targeted therapy for advanced gastric cancer. Journal of Hematology & Oncology3. Tanaka, et al. Claudin-18 Is an Early-Stage Marker of Pancreatic Carcinogenesis. Journal of Histochemistry & Cytochemistry4. Arnold, et al. Prognostic impact of Claudin 18.2 in gastric and esophageal adenocarcinomas. Clinical and Translational Oncology5. Qian Niu, et al. Future of targeted therapy for gastrointestinal cancer: Claudin 18.2. Oncology and Translational Medicine6. Sahin, et al. Claudin-18 splice variant 2 is a pan-cancer target suitable for therapeutic antibody development. Clin Cancer Res.7. Arnold, et al. Prognostic impact of Claudin 18.2 in gastric and esophageal adenocarcinomas. Clin Transl Oncol.识别微信二维码，添加生物制品圈小编，符合条件者即可加入疫苗微信群！请注明：姓名+研究方向！版权声明本公众号所有转载文章系出于传递更多信息之目的，且明确注明来源和作者，不希望被转载的媒体或个人可与我们联系(cbplib@163.com)，我们将立即进行删除处理。所有文章仅代表作者观点，不代表本站立场。

诊断试剂抗体免疫疗法疫苗细胞疗法

2021-04-10

·CPhI制药在线

抗体 - 从TJ-CD4B获FDA批准1期临床看热门靶点Claudin18.2的研发概况

2021年3月30日，天境生物与韩国ABL Bio公司共同宣布，双方合作开发的靶向Claudin18.2和4-1BB的双特异性抗体TJ-CD4B（又称ABL111）获美国FDA批准开展1期临床研究。 TJ-CD4B是一款同时靶向肿瘤抗原密蛋白18剪切体2（Claudin18.2）和T细胞共刺激分子4-1BB的创新双特异性抗体，其中Claudin18.2在多癌种特别是胃癌和胰腺癌中高度特异表达。TJ-CD4B与这两个靶点特异结合后，可增加淋巴细胞肿瘤浸润并增强肿瘤免疫应答。临床前研究表明，即便在Claudin18.2低表达的情况下，TJ-CD4B仍能与肿瘤细胞结合，并产生优于其它4-1BB单克隆抗体的免疫活性，使其有望适用于更为广泛的患者群体。此外，TJ-CD4B还具有独特的4-1BB结合表位，使其仅在与Claudin18.2结合时才会激活T细胞。这一特性能避免因4-1BB广泛表达而过度激活T细胞所引起的肝毒性和降低全身免疫反应风险。此次在美国获批的是一项多中心的1期剂量爬坡试验，将评估TJ-CD4B治疗晚期或转移性实体瘤患者的安全性、耐受性、药代动力学和药效学。此外，天境生物还计划于今年内在中国开展TJ-CD4B治疗胃癌、食管胃交界腺癌、食管腺癌和胰管腺癌患者的相关剂量爬坡研究。 Claudins是一个蛋白质家族，其作用是维持控制细胞间分子交换的紧密连接。广泛分布于胃、胰腺和肺组织，可用于诊断和治疗。Claudin18.2亚型是一种胃特异性亚型，自从研究者们发现Claudin18.2是一种高度选择性的分子，并且只在癌细胞中广泛表达，它就成为一种理想的靶点。 Claudin18.2通常埋藏在胃粘膜中，正常组织中的单克隆抗体基本上接触不到，恶性肿瘤的发生会导致紧密连接的破坏，使肿瘤细胞表面的Claudin18.2表位暴露出来，成为特定的靶点。因此，Claudin18.2赋予靶向治疗的特异性。最近发现在胰腺癌、食管癌和肺癌中的表达也显示了诊断和治疗其他肿瘤的潜力。 Claudin18.2靶向治疗的现状正是Claudin18.2 在多个癌组织中的表达呈高度选择性，以及在特定癌种如胃癌、胰腺癌等患者中呈高阳性率，使得围绕 Claudin18.2 开发的靶向治疗、肿瘤免疫治疗具有较广的潜在获益人群和较低的毒性，因而该靶点引起了诸多国内外药企的关注。目前为止，国际国内近20家药企布局了Claudin18.2靶向药物的开发，大部分在研项目属于单靶点抗体药物，近期Claudin18.2双抗药物也迎来振奋人心的新进展。此外国内还有南京圣和、瑞阳生物、昆药集团、天广实、健信生物、凡恩世等均有布局。Claudin18.2双特异性抗体药物研发也喜讯不断。2020年7月1日，国家药品监督管理局药品审批中心（CDE）受理安进/百济神州的AMG 910临床试验申请。AMG910是一款CD3/claudin18.2双特异性抗体。目前处于I期临床，主要目的是评价AMG910在claudin18.2阳性的胃癌或胃食管交界处癌成人受试者中的安全性和耐受性。 SPX-301是Sparx公司开发的一款同时靶向claudin18.2和PD-L1的双特异抗体药物，采用Sparx公司具有自主知识产权的SMARTOPTM模式构建，并且利用其LEMMAbTM噬菌体展示技术分段优化。这是目前为止全球首个claudin18.2/PD-L1双特异抗体。目前处在临床前阶段。临床前研究小鼠接种实验表明，SPX-301能有效地抑制稳定表达Claudin18.2的MC38肿瘤生长，且具有统计学显著（p=0.01）。 CLDN18.2是一个很有前途的靶点，不仅选择性高，而且在人群患病率方面也很有潜力，是胃部肿瘤靶向治疗的理想补充。新型抗体zolbtuximab，无论是单药治疗还是联合化疗，都显示出显著的优越疗效和安全性。CLDN18.2CAR-T细胞治疗最近以其优异的表现探索了另一种可能性。该策略将进展到第三阶段临床试验，当与其他疗法相结合时，将可能进一步的提升疗效。随着分子结构和临床试验的不断完善，抗CLDN18.2治疗将在未来带来更多惊喜。参考资料： 1. Evaluation and reflection on Claudin18.2 targeting therapy in advanced gastric cancer. Chin J Cancer Res. 2020 Apr; 32(2): 263-270. 2. clinicaltrials.gov. 3.Janku, F., Yap, T. A., & Meric-Bernstam, F. (2018). Targeting the PI3K pathway in cancer: are we making headway? Nature Reviews Clinical Oncology. doi:10.1038/nrclinonc.2018.28 . 4.各公司官网。