乳腺癌 1. Specifications of the ACMG/AMP variant curation guidelines for the analysis of germline PALB2 sequence variants PALB2变异临床解读规范确立。PALB2是重要的乳腺癌易感基因，其变异的临床意义评估亟需标准化。研究团队制定了PALB2生殖系变异的ACMG/AMP规范化解读规则。该规范有助于优化遗传性乳腺癌的风险评估与临床管理策略。遗传性乳腺癌 | PALB2基因, 同源重组修复 | 变异分类, 临床指南 Richardson, Marcy E. · … · Couch, Fergus J. · · 2026/03/26/ 该研究由梅奥医学中心Fergus J. Couch团队完成 The American Journal of Human Genetics 原文链接：https://www.cell.com/ajhg/fulltext/S0002-9297(26)00125-4?rss=yes 2. KRT17 promotes triple negative breast cancer through activation of Wnt signaling and γδ T-cells recruitment KRT17通过Wnt信号促进三阴性乳腺癌进展。黑人女性三阴性乳腺癌死亡率较高，其分子机制尚不明确。研究发现KRT17在黑人患者中高表达，通过激活Wnt信号招募γδ T细胞驱动肿瘤转移。该研究识别出KRT17-Wnt轴是导致临床差异的关键驱动因素和治疗靶点。三阴性乳腺癌(TNBC), 种族差异 | KRT17, Wnt信号, γδ T细胞 | 转移模型, 临床样本分析 Panneer Selvam, Chermakani · … · Chakrabarti, Rumela · · 2026/03/26 该研究由宾夕法尼亚大学Rumela Chakrabarti团队完成 Communications Biology 原文链接：https://www.nature.com/articles/s42003-026-09897-0 血液肿瘤 1. Synergizing hypomethylating agents with off-the-shelf CD70-targeted chimeric antigen receptor-engineered natural killer T cells for the treatment of acute myeloid leukemia 去甲基化药物协同CD70靶向CAR-NKT细胞治疗急性髓系白血病。AML的复发和耐药是临床治疗的主要挑战。本研究发现低剂量HMA处理可上调AML细胞表面的CD70等配体，增强其对CAR-NKT细胞的敏感性。实验证明异体CAR70-NKT细胞在多种异种移植模型中表现出强大的抗肿瘤效力且安全性良好。该研究为AML提供了一种安全高效的“现货型”免疫治疗方案。急性髓系白血病(AML) | CD70, 去甲基化药物 | CAR-NKT细胞疗法 Li, Yan-Ruide · … · Yang, Lili · · 2026/03/26 该研究由加州大学洛杉矶分校Lili Yang团队完成 Leukemia 原文链接：https://www.nature.com/articles/s41375-026-02930-5 2. Genetic alterations and measurable residual disease in core binding factor acute myeloid leukemia 核心结合因子急性髓系白血病的遗传变异与微小残留病灶研究。MRD是CBF-AML的主要预后因素，但特定基因突变的独立预后价值尚不明确。本研究通过对656名患者的队列分析，发现KIT-TKD和FLT3-ITD突变与高复发风险显著相关。研究强调这些遗传变异应纳入CBF-AML的风险分层体系中。该成果完善了白血病精准预后评估模型。核心结合因子急性髓系白血病 | KIT-TKD, FLT3-ITD | 高通量测序, MRD监测 Vasseur, Loïc · … · Itzykson, Raphaël · · 2026/03/26 该研究由巴黎圣路易斯医院Raphaël Itzykson团队完成 Leukemia 原文链接：https://www.nature.com/articles/s41375-026-02900-x 3. CAR-NK cell therapy for hematologic malignancies: advances, challenges and optimization strategies CAR-NK细胞治疗血液肿瘤的进展与挑战。CAR-T疗法虽有效但存在毒副作用，寻找更安全、可现货供应的替代方案成为血液肿瘤治疗的重点。本文系统总结了CAR-NK细胞在设计优化、体内持久性提升及克服肿瘤微环境抑制等方面的最新策略。这些进展突显了CAR-NK疗法在血液肿瘤治疗中的巨大转化潜力，为未来临床应用优化提供了方向。血液恶性肿瘤 | 肿瘤免疫逃逸, 肿瘤微环境 | CAR-NK细胞疗法 Liu, Weitong · … · Cao, Xinxin · · 2026/03/26 该研究由北京协和医院曹欣欣团队完成 Molecular Cancer 原文链接：http://dx.doi.org/10.1186/s12943-026-02648-z 消化肿瘤 1. A cross-kingdom alliance driving colorectal cancer 跨界微生物协作驱动结直肠癌进展。肠道内不同界别的微生物如何相互作用并影响癌症进展尚不完全清楚。研究揭示白色念珠菌与具核梭杆菌通过Flo9-RadD结合形成跨界互动，加速结直肠癌生长。该研究证明阻断微生物协作是结直肠癌治疗的潜在新策略。结直肠癌 | 跨界相互作用, 白色念珠菌, 具核梭杆菌 | 微生物干预, 治疗策略 Lobel, Lior · Cancer Cell · 2026/03/26/ ⭐ 该研究由巴伊兰大学Lior Lobel团队完成原文链接：https://www.cell.com/cancer-cell/fulltext/S1535-6108(26)00158-3?rss=yes 2. Molecular insights into early malignant transition of hepatocellular carcinoma 揭示肝癌早期恶性转化的分子机制。肝细胞癌从癌前病变向恶性转化的基因组和免疫演化过程仍待深入研究。研究发现TERT改变预示恶性倾向，而拷贝数变异驱动了最终转化，并提出两种主要的演化路径。该成果为肝癌的早期诊断和精准干预提供了理论依据。肝细胞癌, 恶性转化 | TERT改变, 拷贝数变异(CNA) | 基因组分析, 免疫分析 Zhengtao Zhang · … · Lijian Hui · Cancer Cell · 2026/03/26 ⭐ 该研究由中国科学院分子细胞科学卓越创新中心惠利健团队完成原文链接：https://www.cell.com/cancer-cell/fulltext/S1535-6108(26)00157-1?rss=yes 3. Myofibroblast programming blocks differentiation of TLS-organizing fibroblastic reticular cells in pancreatic cancer 肌成纤维细胞阻碍胰腺癌三级淋巴结构形成。胰腺癌对免疫治疗具有强耐药性，且三级淋巴结构（TLS）在其中的形成机制不明。研究发现肌成纤维细胞通过抑制LTBR信号阻碍TLS形成，而联合抑制TGFβ可重塑成纤维细胞。该研究为增强胰腺癌免疫控制提供了新的治疗靶点。胰腺癌, 免疫耐药 | 三级淋巴结构(TLS), 肌成纤维细胞, TGFβ信号 | LTBR激动剂, 免疫治疗 Kirschstein, Elijah · … · Gunderson, Andrew J. · Cancer Cell · 2026/03/26/ ⭐ 该研究由普罗维登斯癌症研究所Andrew J. Gunderson团队完成原文链接：https://www.cell.com/cancer-cell/fulltext/S1535-6108(26)00156-X?rss=yes 4. Unleashing T cell surveillance for the eradication of quiescent persister tumor cells resistant to neoadjuvant chemotherapy 靶向CD96清除化疗耐药的静止持久癌细胞。新辅助化疗虽能缩小肿瘤，但残留的静止持久细胞（PTCs）常导致复发。研究发现PTCs通过CD96+CD8+ T细胞构建免疫抑制环境，而阻断CD96可激活T细胞并清除PTCs。该研究为提高结直肠癌疗效提供了新的免疫治疗靶点。结直肠癌, 化疗耐药 | 静止持久细胞(PTCs), CD96, T细胞耗竭 | CAR-T细胞疗法, 免疫检查点阻断 Geng, Haigang · … · Zhu, Chunchao · · 2026/03/26/ 该研究由上海交通大学医学院附属仁济医院朱纯超团队完成 Developmental Cell 原文链接：https://www.cell.com/developmental-cell/fulltext/S1534-5807(26)00085-7?rss=yes 5. The NPC1/USP7/p53 axis regulates cholesterol and promotes the proliferation of hepatocellular carcinoma NPC1通过调控胆固醇代谢促进肝癌进展。肝细胞癌是全球癌症死亡的主要原因，但其分子驱动机制及胆固醇代谢紊乱在其中的作用尚不明确。研究发现NPC1通过与USP7相互作用使p53去稳定化，并经p53-SREBP2轴调节胆固醇代谢，从而促进肿瘤增殖。该发现揭示了NPC1作为肝癌治疗靶点的潜力，为干扰肿瘤代谢提供了新策略。肝细胞癌 | NPC1/USP7/p53轴, 胆固醇代谢 | 泛素化分析, 药理学激活 Deng, Ru · … · Liu, Yajie · Oncogene · 2026/03/26 原文链接：https://www.nature.com/articles/s41388-026-03739-3 6. Short-chain acyl-CoA dehydrogenase initiates mtDNA demethylation and leakage to fuel antitumor immunity in colorectal cancer ACADS通过抑制mtDNA甲基化增强结直肠癌抗肿瘤免疫。脂肪酸代谢如何调节结直肠癌中的cGAS-STING通路仍有待阐明。研究发现ACADS缺失通过抑制mtDNA泄漏下调cGAS-STING信号，而老药金丝桃素可上调ACADS表达并改善免疫微环境。该研究揭示了脂肪酸代谢与先天免疫的新联系，为结直肠癌免疫治疗提供了新靶点。结直肠癌 | ACADS, cGAS-STING通路, mtDNA甲基化 | 药物筛选, 小鼠模型 Yang, Fang · … · Miao, Hongming · Signal Transduction and Targeted Therapy · 2026/03/26 原文链接：https://www.nature.com/articles/s41392-026-02675-8 7. Smartly Assembled near-Micron RF-Responsive Agents Bridge Transarterial Embolization and Immunothermal Potentiation. 射频响应智能组装剂桥接肝癌栓塞与免疫热疗。传统肝癌治疗手段疗效有限，亟需开发能够整合多种治疗模式的新策略。研究开发了载有STING激动剂的近微米层状双氢氧化物，可智能响应微环境形成稳定栓塞并增强射频消融诱导的免疫反应。该发现为肝癌的栓塞-热消融-免疫联合治疗提供了一种极具前景的新范式。肝细胞癌 | cGAS-STING通路, 栓塞免疫热疗 | 智能自组装, 射频消融 Hu Qitao · … · Tang Zhe · · 2026/03/26 该研究由Zhejiang University Tang Zhe团队完成 Advanced science (Weinheim, Baden-Wurttemberg, Germany) 原文链接：https://doi.org/10.1002/advs.202600067 8. SMAD4 Palmitoylation Drives a Metabolic-Transcriptional Circuit to Promote Tumorigenesis and Confers Radiosensitivity in Pancreatic Cancer. SMAD4棕榈酰化驱动代谢-转录回路促进胰腺癌进展。胰腺癌中SMAD4失活与脂质代谢重塑频发，但两者间的交集机制尚不明确。研究发现ZDHHC22介导的SMAD4棕榈酰化可增强其稳定性并上调FASN，形成促进肿瘤生长的正反馈环路。该发现揭示了脂质代谢与致癌信号间的桥梁，并指出SMAD4棕榈酰化是胰腺癌的潜在治疗靶点。胰腺癌 | SMAD4棕榈酰化, FASN | 生化标记, 放射敏感性分析 Wang Yang · … · Wang Feng · · 2026/03/26 该研究由Shanghai University of Medicine & Health Sciences Wang Feng团队完成 Advanced science (Weinheim, Baden-Wurttemberg, Germany) 原文链接：https://doi.org/10.1002/advs.202519791 妇科肿瘤 1. Mirvetuximab soravtansine plus pembrolizumab in recurrent folate receptor alpha-positive uterine serous carcinoma: a phase II trial Mirvetuximab soravtansine联合帕博利珠单抗治疗叶酸受体α阳性子宫浆液性癌。免疫检查点抑制剂与抗体偶联药物在临床前具有协同作用。本研究是一项针对复发性FOLR1表达浆液性子宫内膜癌的II期临床试验，初步结果显示客观缓解率为28%。研究还发现高表达FOLR1的肿瘤相关巨噬细胞可能参与免疫编辑。该试验为难治性妇科肿瘤提供了新的联合治疗方案。子宫浆液性癌 | FOLR1, ADC药物 | II期临床试验 Porter, Rebecca L. · … · Konstantinopoulos, Panagiotis A. · · 2026/03/26 该研究由达纳-法伯癌症研究所Panagiotis A. Konstantinopoulos团队完成 Nature Communications 原文链接：https://www.nature.com/articles/s41467-026-71102-x 神经肿瘤 1. Cumulative dose of chemotherapy and survival outcomes in children with average risk medulloblastoma treated on Children's Oncology Group study ACNS0331. 适度减少化疗剂量不影响中风险髓母细胞瘤患儿预后。髓母细胞瘤患儿在获得良好生存率的同时常面临严重的长期治疗毒性。研究分析发现，长春新碱和顺铂剂量减少至少25%对患者的总生存率和无事件生存率无显著影响。这一发现表明在保证疗效的前提下，通过优化剂量减轻患儿毒性反应具有可行性。髓母细胞瘤 | 剂量强度, 分子亚型 | 临床回顾性分析, Cox比例风险模型 Wright Erin · … · de Blank Peter · · 2026/03/26 该研究由University of Cincinnati de Blank Peter团队完成 Neuro-oncology 原文链接：https://doi.org/10.1093/neuonc/noag064 泛癌种 1. Specifications of the ACMG/AMP variant curation guidelines for the analysis of germline ATM sequence variants ATM生殖系变异临床解读指南发布。ATM变异与多种癌症风险相关，但临床解读缺乏统一标准。本研究基于ACMG/AMP框架制定了ATM变异分类的专门规范，涵盖了剪接分析和功能研究。该指南将显著提升ATM变异在临床诊断中的准确性与一致性。遗传性癌症综合征 | ATM基因, DNA损伤修复 | 变异解读指南, ACMG/AMP标准 Richardson, Marcy E. · … · Couch, Fergus J. · · 2026/03/26/ 该研究由梅奥医学中心Fergus J. Couch团队完成 The American Journal of Human Genetics 原文链接：https://www.cell.com/ajhg/fulltext/S0002-9297(26)00126-6?rss=yes 2. Cancer type-specific variation in patterns of driver alterations across 50,000 tumors 揭示五万例肿瘤中驱动突变的组织特异性。体细胞驱动突变的致癌影响受组织环境塑造，但缺乏大规模临床队列的系统评估。研究定义了448种癌症亚型的驱动模式，发现三分之一的驱动因素出现在非典型背景下。该研究强调了临床背景在精准肿瘤学中的核心地位。肿瘤异质性 | 驱动突变, HLA缺失, 新抗原 | 大规模基因组分析, 临床注释 Bandlamudi, Chaitanya · … · Berger, Michael F. · Cancer Cell · 2026/03/26/ ⭐ 该研究由纪念斯隆-凯特琳癌症中心Michael F. Berger团队完成原文链接：https://www.cell.com/cancer-cell/fulltext/S1535-6108(26)00155-8?rss=yes 3. Immunometabolic gatekeeping: How tissue metabolism conditions tumor immunity 免疫代谢门控决定组织肿瘤免疫。免疫浸润与肿瘤控制之间的联系在不同组织中差异巨大，其机制尚未解决。研究提出“免疫代谢门控”框架，认为组织代谢压力会损害免疫监视并导致肿瘤生长。该框架为癌症预防和代谢敏感型免疫治疗提供了新视角。肿瘤免疫监视 | 免疫代谢门控, 代谢压力 | 理论框架, 免疫治疗策略 Naomi Iris van den Berg · … · Samra Turajlic · Cancer Cell · 2026/03/26 ⭐ 该研究由弗朗西斯·克里克研究所Samra Turajlic团队完成原文链接：https://www.cell.com/cancer-cell/fulltext/S1535-6108(26)00114-5?rss=yes 4. Micronuclei: origins, assays, mechanisms, diseases and treatments 微核在染色体不稳定及疾病发生中具有关键作用。微核是含有核物质的胞质结构，与基因损伤和染色体不稳定性密切相关。本文综述了微核的起源、形成机制及其在癌症等疾病进展中的功能后果，并探讨了其治疗潜力。深入了解微核有助于为基因组不稳定相关疾病开发新的治疗干预手段。染色体不稳定性 | 微核形成, 基因组不稳定 | 文献综述 Duan, Hailong · … · Liu, Shuang · Signal Transduction and Targeted Therapy · 2026/03/26 原文链接：https://www.nature.com/articles/s41392-025-02538-8 5. A Single-Cell Atlas of Pan-Cancer Liver Metastasis Reveals Dynamic Cellular Programs Driving Metastatic Progression and Immune Modulation. 泛癌肝转移单细胞图谱揭示驱动转移进展的动态细胞程序。肝转移的细胞和分子景观在泛癌水平上仍缺乏清晰定义。研究通过分析46万个细胞定义了4种代表性细胞程序，揭示了从免疫活跃到免疫抑制环境的动态转变机制。该研究为理解肝转移的异质性提供了高分辨率框架，有助于制定针对微环境的治疗策略。肝转移 | 肿瘤微环境, 免疫逃逸 | 单细胞RNA测序, 泛癌分析 Tong Xinyu · … · Chen Dijun · · 2026/03/24 该研究由Nanjing University Chen Dijun团队完成 Research (Washington, D.C.) 原文链接：https://doi.org/10.34133/research.1208 6. Highly Active Cu14 Cluster Precisely Activates Autophagy Inhibitor to Amplify Cuproptosis Immunotherapy. 原子级精确铜簇介导的自噬抑制增强铜死亡免疫治疗。过渡金属催化效率低下常限制其在肿瘤治疗中的应用。研究利用Cu14团簇触发铜死亡并催化化学键断裂产生自噬抑制剂，通过阻断细胞保护性自噬来放大免疫原性细胞死亡。这种双重作用策略显著增强了抗肿瘤免疫反应，为精准金属药物开发提供了新思路。肿瘤免疫治疗 | 铜死亡, 自噬抑制 | 铜簇催化, 免疫原性细胞死亡 Zang Qiu-Xu · … · Zang Shuang-Quan · · 2026/03/26 该研究由Zhengzhou University Zang Shuang-Quan团队完成 Advanced science (Weinheim, Baden-Wurttemberg, Germany) 原文链接：https://doi.org/10.1002/advs.202517021 7. Reduced Maintenance DNA Methylation Thresholds Enable Sensitive Reporter Assays for UHRF1 and DNMT1 Inhibition. 降低维持性DNA甲基化阈值助力高效筛选UHRF1和DNMT1抑制剂。完全逆转DNA甲基化异常需要极高的抑制效率，这给药物研发带来了巨大挑战。研究发现降低UHRF1或DNMT1的冗余度可显著提高细胞对抑制剂的敏感性，并据此构建了高灵敏度的报告系统。该平台为发现新型去甲基化药物及设计表观遗传联合疗法提供了有力工具。 DNA甲基化 | UHRF1/DNMT1轴, 抑癌基因失活 | 高通量筛选, 报告基因系统 Xia Cuicui · … · Kong Xiangqian · · 2026/03/26 该研究由University of Science and Technology of China Kong Xiangqian团队完成 Advanced science (Weinheim, Baden-Wurttemberg, Germany) 原文链接：https://doi.org/10.1002/advs.202519080 8. Comprehensive Genomic and Transcriptomic Analysis to Guide Therapy for Patients with Metastatic Solid Tumors. 综合基因组和转录组分析指导转移性实体瘤的精准治疗。相比传统基因板测序，全外显子和全转录组测序在临床中的附加价值仍需明确。研究对99名晚期癌症患者进行CGTP分析，发现其识别可操作变异的比例显著高于传统方法，并成功指导了部分患者的匹配治疗。该试点研究证实了CGTP在优化晚期癌症个体化治疗方案中的临床潜力。转移性实体瘤 | 可操作基因变异 | 全外显子测序, 全转录组测序 Uzunparmak Burak · … · Meric-Bernstam Funda · · 2026/03/26 该研究由MD Anderson Cancer Center Meric-Bernstam Funda团队完成 Cancer discovery 原文链接：https://doi.org/10.1158/2159-8290.CD-25-1304 9. Bleb-based extravasation uses conserved morphodynamics but divergent calcium control 细胞血管外渗采用保守的膜泡动力学及差异化钙调控。血管外渗是发育和癌症转移的关键步骤，但其跨细胞类型的调控机制尚不明确。研究发现所有外渗细胞均依赖钙离子驱动膜泡形成，但钙源在生殖细胞与癌细胞间存在差异。该框架揭示了血管逃逸的关键瓶颈，为靶向阻断癌症转移提供了新视角。癌症转移, 血管外渗 | 钙离子信号, 膜泡形成 | 活细胞成像 Morita, Mizuki · … · Saito, Daisuke · · 2026/03/26 该研究由九州大学Saito Daisuke团队完成 Nature Communications 原文链接：http://dx.doi.org/10.1038/s41467-026-71052-4 10. SOS1: tracking the evolving path from promising to actionable therapeutic target in RAS-dependent cancers SOS1作为RAS依赖型癌症治疗靶点的研究进展。RAS突变驱动了约30%的人类癌症，但直接靶向RAS的药物易产生耐药性。本文综述了SOS1抑制剂和降解剂在多种临床前模型中的疗效及其克服耐药的潜力。该评价为开发针对广泛RAS驱动恶性肿瘤的新型联合治疗方案提供了重要指导。 RAS驱动癌症 | SOS1, RAS/MAPK通路 | 小分子抑制剂, 蛋白质降解 Luna-Ramírez, Luis · … · Baltanás, Fernando C. · · 2026/03/26 该研究由萨拉曼卡大学Baltanás Fernando C团队完成 Molecular Cancer 原文链接：http://dx.doi.org/10.1186/s12943-026-02632-7 11. Melanoma resists chemotherapy through an adaptive mitochondrial response 黑色素瘤通过增强线粒体代谢产生化疗耐药。晚期黑色素瘤常对常规治疗产生耐药，代谢重编程在其中发挥了关键驱动作用。研究发现黑色素瘤细胞在化疗压力下依赖氧化磷酸化，联合使用电子传递链抑制剂可增强疗效。该发现揭示了黑色素瘤的代谢适应机制，为克服临床耐药提供了新策略。黑色素瘤耐药 | 氧化磷酸化, 电子传递链 | 联合化疗 Zarei, Mehrdad · … · Rothermel, Luke D. · · 2026/03/26 该研究由克利夫兰医学中心Rothermel Luke D团队完成 Journal of Experimental & Clinical Cancer Research 原文链接：http://dx.doi.org/10.1186/s13046-026-03685-8 12. Ceramide disrupts TM9SF2-PGK1 axis to redirect PD-L1 trafficking and enhance antitumor immunity 神经酰胺通过干扰TM9SF2-PGK1轴增强抗肿瘤免疫。PD-L1的内体循环限制了免疫治疗的持久性，其精准分选机制尚不明确。研究发现TM9SF2招募PGK1促进PD-L1回收，而特定神经酰胺可破坏此复合物并诱导其降解。该发现揭示了内体网络中的代谢开关，为增强免疫治疗效果提供了新靶点。肿瘤免疫逃逸 | PD-L1, TM9SF2, 神经酰胺 | CRISPR筛选 Zheng, Yi · … · Dong, Ting · · 2026/03/26 该研究由山东大学董婷团队完成 Nature Communications 原文链接：http://dx.doi.org/10.1038/s41467-026-70764-x 13. Cuproptosis in inflammation and cancer: molecular mechanisms and therapeutic targets 铜死亡在炎症与癌症中的分子机制及治疗潜力。铜死亡是一种由铜过载诱导的独特细胞死亡模式，与线粒体代谢功能障碍密切相关。本文系统评述了铜平衡调节及铜死亡的关键基因网络，并探讨了其在病理状态下的作用。该综述为开发针对炎症性疾病和恶性肿瘤的新型靶向疗法提供了重要的理论参考。炎症, 癌症 | 铜死亡, 线粒体功能障碍 | 文献综述 Liu, Jingwen · … · Tang, Bufu · · 2026/03/26 该研究由南昌大学第一附属医院Tang Bufu团队完成 Molecular Cancer 原文链接：http://dx.doi.org/10.1186/s12943-026-02644-3 14. Small-molecule degraders for oncogenic KRAS^G12C and pan-KRAS mutations 针对KRAS突变的小分子降解剂开发。KRAS是癌症中常见的致癌基因，但传统共价抑制剂易产生耐药性，且现有降解剂多依赖大型PROTAC分子。研究开发了小分子降解剂DJX-A-KM，通过共价结合E3连接酶FBXO28诱导KRAS^G12C的高效降解，并可扩展至泛KRAS突变。该研究为开发针对多种KRAS突变的广谱降解剂提供了蓝图，具有重要的抗肿瘤药物研发价值。 KRAS突变肿瘤 | KRAS^G12C, FBXO28连接酶 | 蛋白质靶向降解, 小分子药物 Deng, Jianxiong · … · Li, Zhengqiu · · 2026/03/26 该研究由广州医科大学李正球团队完成 Nature Communications 原文链接：http://dx.doi.org/10.1038/s41467-026-71093-9 15. A dual role of EZH2 in regulating A-to-I RNA editing and mRNA stability through ADAR EZH2调控RNA编辑促进前列腺癌进展。RNA编辑在癌症基因调节中起重要作用，但其在肿瘤进展中的具体调控机制仍不清晰。研究发现EZH2作为ADAR1的新型互作因子，通过重塑其相互作用组和核转运，双向调节RNA编辑并稳定致癌转录本。该研究揭示了组蛋白修饰与RNA编辑两层表观遗传调控间的联系，为开发针对EZH2-ADAR1轴的癌症疗法提供了依据。前列腺癌 | EZH2, ADAR1, RNA编辑 | 免疫共沉淀, RNA测序 Yi, Yang · … · Cao, Qi · · 2026/03/26 该研究由西北大学Cao, Qi团队完成 Nature Communications 原文链接：http://dx.doi.org/10.1038/s41467-026-71207-3 声明：本文使用了AI进行翻译和总结

细胞疗法临床研究免疫疗法临床结果

2026-03-23

·Innodrugs

[专利速递260319]AN2公开ENPP1抑制剂专利

WO2026060334 背景介绍细胞外环境的稳态与信号传递对机体健康至关重要，其中一类位于细胞膜表面的酶——外核苷酸焦磷酸酶/磷酸二酯酶（ENPP）家族，扮演着不可替代的角色。该家族包含七个成员（ENPP1-7），它们通过水解细胞外的核苷酸及其衍生物，广泛参与了从核苷酸与磷脂信号传导、骨矿化，到纤维化疾病和肿瘤免疫细胞浸润等多种关键的生物学与病理生理学过程。在众多成员中，ENPP1因其独特且日益重要的功能，近年来已成为癌症、免疫和代谢性疾病领域备受瞩目的治疗靶点。 ENPP1本质上是一种II型跨膜糖蛋白，其活性结构域朝向细胞外空间。它具备两种关键的酶活性：核苷酸焦磷酸酶活性和磷酸二酯酶活性。这使得ENPP1能够高效水解多种底物，其中最经典的底物是三磷酸腺苷（ATP），其水解产物腺苷一磷酸（AMP）和焦磷酸（PPi）在调节骨矿化（抑制羟基磷灰石结晶）和嘌呤能信号传导中发挥核心作用。这一传统功能将ENPP1与一系列代谢性疾病，如婴儿期全身性动脉钙化、胰岛素抵抗和肥胖等，紧密联系在一起。然而，真正将ENPP1推向生物医学研究舞台中央的，是其新近被发现的、在先天免疫信号通路中的核心“刹车”作用。当细胞感知到细胞质内的DNA异常（通常由病原体入侵或肿瘤发生引起）时，会激活一个名为 cGAS-STING 的警报通路。cGAS酶会合成一种名为 2‘3’-环鸟苷酸-腺苷酸（cGAMP）的环状二核苷酸分子。cGAMP作为第二信使，能够结合并激活内质网上的STING蛋白，从而启动I型干扰素和大量促炎细胞因子的表达，最终激活强大的抗肿瘤或抗病毒免疫应答。 ENPP1正是这个关键免疫信使cGAMP的主要细胞外水解酶。它能够将具有强免疫刺激活性的cGAMP，降解为线性形式的、活性显著降低的GpA和ApG。通过在肿瘤微环境或全身循环中“清除”cGAMP，ENPP1有效地抑制了由cGAMP-STING通路介导的抗肿瘤免疫反应。研究表明，在许多“免疫冷”肿瘤（即缺乏免疫细胞浸润的肿瘤）中，ENPP1的表达水平异常升高，这被认为是肿瘤细胞逃避免疫监视的重要机制之一。它将肿瘤微环境塑造为免疫抑制状态，帮助肿瘤细胞躲过T细胞的攻击。这一发现彻底改变了人们对ENPP1的传统认知，使其从一个代谢相关酶，跃升为连接肿瘤代谢与免疫逃逸的关键枢纽，并稳稳占据了肿瘤免疫治疗的前沿。因此，抑制ENPP1的活性，理论上可以实现“一石二鸟”的效果：一方面，减少cGAMP的降解，增强STING通路的激活，从而将“免疫冷”肿瘤转变为“免疫热”肿瘤，促进细胞毒性T细胞的浸润和功能；另一方面，通过调节ATP/腺苷水平，影响具有免疫抑制作用的腺苷信号通路，进一步改善免疫微环境。鉴于ENPP1在肿瘤免疫逃逸中的双重作用，开发高效的ENPP1抑制剂已成为极具吸引力的新药研发方向。目前，已有数款小分子ENPP1抑制剂进入临床前或早期临床研究阶段。它们被探索用于单药治疗，或与现有的免疫检查点抑制剂（如PD-1/PD-L1抗体）、化疗、放疗甚至STING激动剂等联合使用，以期产生协同抗肿瘤效应。除了癌症，ENPP1抑制剂在治疗与钙化相关的血管疾病、纤维化疾病（如肝纤维化、肺纤维化）以及某些病毒感染的潜力也正在被探索。综上所述，ENPP1作为一个多功能的胞外酶，其角色已从传统的代谢调节者扩展到肿瘤免疫治疗的关键负调控因子。针对ENPP1的药物开发，特别是高选择性、强效的小分子抑制剂，不仅有望为对现有免疫疗法无反应的癌症患者提供全新的治疗选择，也可能为一系列与核苷酸代谢失调相关的疾病开辟新的治疗途径。随着对其结构、功能和病理作用的深入理解，ENPP1靶点正从基础研究快速走向转化医学，展现出广阔的应用前景。化合物举例生物学测试 Enzymatic Assay Exogenous cGAMP Cellular Assay Procedure Thermodynamic Solubility of Compounds in PBS at pH 7.4 Metabolic Stability of Compounds in Mouse Liver S9 Fractions In vivo efficacy in syngeneic mouse model 拓展 AN2公司拥有一个新型硼基化合物管线，这些化合物具备成为同类最佳疗法的潜力。公司计划利用非股权稀释性资金推进其全球健康计划，该类资金来自公共和私营机构及基金会等渠道。其中ENPP1项目仍处于临床前阶段。需要本专利文档，请关注本公众号并私信"26060334"即可。

2026-03-23

·偶联医药

从纳米材料到免疫激活：cGAS-STING通路介导的抗癌新机制——双金属纳米反应器的临床转化潜力

摘要锰基材料是激活环鸟苷酸-腺苷酸合成酶-干扰素基因刺激因子（cGAS-STING）通路的潜力候选材料，该通路在诱导抗肿瘤免疫反应中发挥关键作用。但单一锰基材料对STING通路的激活能力有限，制约了其临床转化前景。为突破这一瓶颈，本研究开发了双金属锰钙纳米反应器（MCC），将其应用于癌症金属免疫治疗。细胞摄取MCC后，可通过生成毒性羟基自由基并引发钙离子过载，诱导线粒体与细胞损伤，进而促进线粒体DNA（mtDNA）及肿瘤相关抗原释放。释放的mtDNA与锰离子协同作用，可高效激活cGAS-STING通路，增强抗原呈递细胞（APCs）的抗原呈递能力，触发适应性免疫应答。体内实验结果显示，MCC在B16-OVA和4T1肿瘤模型中可显著抑制肿瘤生长，促进T淋巴细胞与APCs向肿瘤组织浸润，同时提升肿瘤引流淋巴结及脾脏中的免疫细胞水平。此外，MCC与程序性死亡受体1（PD-1）抑制剂联合应用时，能有效减少黑色素瘤的肺部转移。图1 MCC 纳米反应器在肿瘤微环境中分解，通过产生活性氧和升高钙离子损伤线粒体，释放 mtDNA，再联合锰离子激活 cGAS-STING 免疫通路，最终触发抗肿瘤免疫、抑制肿瘤生长与转移。一、引言免疫治疗已成为癌症治疗领域的重要突破，通过免疫检查点抑制剂（ICIs）、嵌合抗原受体T细胞（CAR-T）疗法及癌症疫苗等多种策略，系统性激活机体抗肿瘤免疫应答。尽管取得显著成效，实体瘤的免疫抑制微环境、患者个体异质性等问题仍严重制约治疗效果，甚至可能引发严重的免疫相关不良反应。环鸟苷酸-腺苷酸合成酶-干扰素基因刺激因子（cGAS-STING）通路为突破上述困境提供了极具潜力的方向，该通路可启动先天免疫应答，将“冷肿瘤”转化为“热肿瘤”。具体而言，cGAS可识别受损细胞、病毒或细菌来源的双链DNA（dsDNA），催化生成环鸟苷酸-腺苷酸（cGAMP），进而激活内质网（ER）上的STING蛋白，诱导I型干扰素（尤其是干扰素-β，IFN-β）的产生。IFN-β作为关键促炎细胞因子，可促进树突状细胞（DCs）成熟、增强其肿瘤抗原呈递能力，最终启动高效的抗肿瘤免疫反应。目前已有多款STING激动剂进入临床试验阶段，但多数为环二核苷酸（CDNs）及其衍生物，这类分子存在稳定性差、易被酶降解、因极性和阴离子特性导致细胞膜通透性不足等缺陷，限制了其临床应用广度。因此，开发非核苷酸、非CDN类STING激动剂，以拓展其治疗应用范围，已成为亟待解决的关键问题。纳米技术为克服上述挑战提供了创新思路，尤其是通过设计功能优化的纳米级STING激动剂。金属离子在调控抗肿瘤免疫中扮演着核心角色，由此衍生出“金属免疫治疗”这一新兴策略。例如，铝基化合物（如氢氧化铝、磷酸铝）是经典的疫苗佐剂，而可诱导铁死亡的铁基纳米材料也展现出触发抗肿瘤免疫的良好前景。近年来，由胞内过量铜离子引发的铜依赖性细胞死亡（铜死亡），因可通过诱导免疫原性细胞死亡（ICD）重塑肿瘤微环境，受到广泛关注。值得注意的是，由锰离子自组装形成的纳米颗粒，可使STING激活效率较单独使用CDN类激动剂大幅提升，在瘤内或静脉给药后均能产生强效的局部及全身免疫效应。然而，锰基材料主要作为STING敏化剂，仅能增强cGAS对dsDNA的识别能力，单独使用时难以充分激活STING通路。钙离子过载是金属免疫治疗与离子干扰治疗中极具潜力的干预策略。钙离子作为关键第二信使，广泛存在于细胞质及线粒体、内质网等细胞器中，在免疫调控网络中发挥核心作用。胞内钙离子过量会干扰线粒体功能、促进活性氧（ROS）生成，并触发损伤相关分子模式（DAMPs）释放，最终诱导ICD。因此，多种钙基材料（如过氧化钙、碳酸钙、磷化钙、氢化钙、硫化钙等）的抗肿瘤生长及增强免疫应答潜力已被广泛探索。其中，过氧化钙因合成简便、可水解生成氧气和过氧化氢，被称为“固态过氧化氢”，这一特性使其成为重塑肿瘤免疫抑制微环境的多功能候选载体。线粒体DNA（mtDNA）是定位于线粒体的dsDNA，在ROS或钙离子过载诱导线粒体损伤时，因缺乏组蛋白保护而被释放到胞质中。mtDNA作为激活STING通路的潜在佐剂，在改善抗肿瘤免疫应答方面展现出重要应用前景。二、实验本研究设计了一种双金属纳米反应器（MNF@CaNP/PP/CUR，简称MCC），作为传统CDN类STING激动剂的新型替代方案，应用于抗肿瘤金属免疫治疗。该反应器以二氧化锰纳米花（MNFs）为载体，负载过氧化钙纳米颗粒（CaNPs）与姜黄素（CUR，一种钙离子增强剂），表面修饰聚乙烯胺接枝聚乙二醇（PEI-g-PEG，PP）。在酸性肿瘤微环境中，部分MCC会发生解离，释放出MNFs、CaNPs和CUR，被细胞直接摄取；同时，完整的MCC也可通过内吞进入肿瘤细胞，随后在酸性溶酶体中降解。胞内CaNPs经水解释放钙离子，而CUR通过抑制肌浆网/内质网钙离子-ATP酶（SERCA2）减少钙离子外排，二者协同加剧胞内钙过载。这种效应诱导线粒体损伤、mtDNA释放及细胞凋亡。此外，MNFs将CaNP水解产生的过氧化氢与内源性过氧化氢转化为毒性羟基自由基和氧气：羟基自由基进一步加剧线粒体损伤、促进mtDNA释放，而氧气则可缓解肿瘤缺氧状态。升高的锰离子水平可促进cGAS对mtDNA的识别，从而显著增强STING通路激活，触发核因子κB（NF-κB）和干扰素调控因子3（IRF3）信号级联反应，最终转录表达促炎细胞因子（如白介素6、肿瘤坏死因子α）及I型干扰素（如IFN-β）。这些细胞因子可激活抗原呈递细胞（APCs），使其处理并呈递凋亡细胞释放的肿瘤相关抗原（TAAs）给初始T细胞，诱导细胞毒性T淋巴细胞（CTLs）生成，促进免疫细胞向肿瘤组织浸润，最终实现对肿瘤细胞的高效清除。当与抗程序性死亡受体1（aPD-1）ICIs联用时，静脉注射MCC可显著抑制黑色素瘤肺部转移，并增加肺及脾脏中免疫细胞的富集（见图1）。本研究引入了一种利用双金属纳米反应器强化mtDNA释放以激活STING通路的新型金属免疫治疗方法，为克服小分子STING激动剂的关键临床局限提供了新见解。现在设计了MCC，一种由MNF、CaNPs和CUR组成的复合纳米材料，旨在激活STING通路以增强抗肿瘤免疫治疗效果。通过一锅法合成MNFs，高分辨透射电子显微镜（HRTEM）和扫描电子显微镜（SEM）证实其为花状结构，直径约90纳米（图2a,b）。值得注意的是，MNF的合成可扩大至每批次大于3克，确保了潜在转化应用的可重复性和效率（图2c）。采用水解-沉淀法合成CaNPs，直径为5至10纳米（图2d）。MNFs独特的多孔结构使其能高效负载超小CaNPs，CaNPs通过静电相互作用吸附在MNF表面，形成MNF@CaNPs（MC）。图2 MCC的性格塑造。a）HRTEM，b）带有标注100纳米的比例条的多国期（MNF）SEM图像。c）显示单次合成中克级MNF生产的数字图像。d）CaNPs和e）MCC的100纳米尺度条的HRTEM图像。f）MCC的EDS映射，尺度条代表100纳米。g） Zeta势，h）各种配方的流体动力学尺寸。i）多国风（MNF）、红外（CUR）和中性磁流体（MCC）的紫外-可见吸收光谱。j）时间相关 O2通过数字溶解氧计测量CaNPs和MCC产生。k） H2O2由CaNPs生成，使用Amplex Red过氧化氢/过氧化物酶测定套件进行定量。l）在MCC存在下，10分钟后对氧化TMB的紫外-可见吸收光谱。以g和h表示的数据以代表性独立实验（n=3）的平均±标准差（SD）表示。为改善表面电荷和水溶性，将带正电的PEI-g-PEG（PP）吸附在MNF上，导致其形貌更粗糙（支持信息图S1）。随后，通过静电相互作用将CUR掺入MNF@CaNPs@PP复合物（MCP）中，形成最终的MCC制剂。HRTEM图像清晰显示CaNPs附着在MNF表面（图2e；支持信息图S2）。能量色散光谱（EDS）mapping进一步证实锰和钙元素在MCC中均匀分布（图2f；支持信息图S3和S4），表明CaNPs负载成功。zeta电位测量进一步证实了MCC的成功组装（图2g）：MNF表面带负电（大于-30毫伏），MC的zeta电位变为-7.9毫伏，表明带正电的CaNPs成功负载；由于PP含有氨基，MCP经PP修饰后表面带强正电，证实PP成功包覆；最终MCC呈轻微负电，这是由于掺入了带负电的CUR。动态光散射（DLS）测量显示，MNF的水合直径约265纳米（图2h）；经PP修饰后，由于PP中的PEG部分提高了水溶性，粒径略有减小。DLS测得的粒径通常大于TEM观察到的粒径，这是因为DLS测量的是溶液中的水合直径（包括表面配体和水合层），而TEM反映的是真空条件下的干态核心尺寸。紫外-可见光谱证实MCC中CUR的存在：MCC在420纳米处出现吸收峰，与CUR的吸收峰重叠（图2i）。电感耦合等离子体质谱（ICP/MS）进一步定量了各纳米颗粒制剂中钙离子和锰离子的含量（支持信息图S5）。采用数字溶解氧仪评估CaNPs、MNF和MCC的产氧能力（图2j）：CaNPs在水溶液中水解，10分钟内生成2毫克每升氧气（支持信息图S6a），而MNF单独使用时不产生氧气；在相同钙离子和锰离子浓度下，MCC生成9.5毫克每升氧气，这归因于MNF对CaNPs产生的过氧化氢的催化分解（支持信息图S6b）；额外补充过氧化氢可进一步提高氧气产量，证实MCC通过CaNPs自身供应的氧气和过氧化氢的协同作用，具有显著的产氧能力。图3 MCC通过体外实验系统评估了MCC的抗肿瘤特性，结果显示MCC对B16-OVA和4T1肿瘤细胞具有显著杀伤作用，且对脾细胞、BMDCs等正常细胞毒性较低，表现出良好的选择性；机制研究表明，MCC可被肿瘤细胞有效摄取，并通过诱导细胞内ROS生成、扰乱钙离子稳态及产生活性氧等方式，引发氧化应激与DNA损伤，从而导致肿瘤细胞死亡。进一步分析表明，CaNPs水解产生的过氧化氢具有浓度依赖性（图2k）：10微克每毫升CaNPs生成30微摩尔过氧化氢，超过肿瘤细胞中通常观察到的20微摩尔过氧化氢水平，表明CaNPs可产生大量过氧化氢，通过升高癌细胞内的氧化应激增强治疗效果。采用3,3',5,5'-四甲基联苯胺（TMB）氧化试验在体外证实，MCC的细胞毒性主要归因于羟基自由基的产生（图2l）：MCC与TMB孵育后，在652纳米处出现明显的吸收峰，表明TMB被氧化，羟基自由基生成成功。为评估MCC在肿瘤相关条件下的生物降解性，将MCC孵育在模拟肿瘤细胞外微环境（pH6.5的PBS，含0.1毫摩尔过氧化氢，37℃）中，通过TEM监测其结构完整性随时间的变化。第0天观察到的MCC清晰复合结构，在第1天和第2天逐渐碎片化，最终在第4天几乎完全解体（支持信息图S7）。这种时间依赖性降解特征表明，MCC在模拟肿瘤微环境的弱酸性和氧化条件下具有优异的生物降解性。MCC的逐步分解不仅降低了纳米材料长期积累的风险，还确保其能有效从体内清除，凸显了其良好的生物安全性。同时，通过监测生理条件（PBS，pH7.4，1微摩尔过氧化氢）和模拟肿瘤条件（PBS，pH6.5，100微摩尔过氧化氢）下MC的zeta电位，评估MCC表面CaNPs的稳定性（支持信息图S8）：MC的表面电位随时间逐渐下降，且在酸性条件下下降速度更快。这一趋势表明，在酸性肿瘤微环境中，带正电的CaNPs从MNF模板上逐步脱落，实现钙离子的可控释放。综上，这些发现表明MCC具有pH和ROS响应性降解特性，这是其体内治疗效果和良好生物相容性的基础。采用细胞计数试剂盒-8（CCK-8）测定B16-OVA和4T1细胞的活力，评估MCC的体外抗肿瘤效能（图3a,b）。在相同钙离子、锰离子和CUR浓度下，MCC诱导超过80%的细胞死亡，而MNFs、CaNPs和CaNPs+CUR单独处理的效果显著较差。MCC的强效细胞毒性源于MNF介导的内源性过氧化氢和CaNPs衍生过氧化氢的催化作用，产生大量毒性羟基自由基，诱导细胞凋亡。此外，MNF+CaNPs组的细胞毒性显著高于单独使用MNF或CaNPs，表明通过CaNPs衍生的过氧化氢和MNF介导的类芬顿催化，可协同生成羟基自由基（支持信息图S9）。单独CUR组的细胞毒性极小，而其与CaNPs联合使用时可适度降低细胞活力，表明CUR促进细胞内钙离子过载。值得注意的是，MCC诱导的细胞死亡水平最高，证实ROS介导的损伤和钙离子失调的协同作用是其强效抗肿瘤活性的关键。这些结果强调了各组分的必要性及其协同作用对实现最大治疗效果的重要性。在L929细胞和原代细胞（包括脾细胞和骨髓来源的树突状细胞（BMDCs））中的实验证实了MCC的选择性：这些细胞的活力仍高于肿瘤细胞（图3c），这可能是由于正常细胞和肿瘤细胞之间的过氧化氢水平和pH条件存在差异。通过荧光成像和流式细胞术验证了MCC的有效细胞摄取：荧光素异硫氰酸酯（FITC）标记的MCC在B16-OVA细胞中的摄取具有时间依赖性（图3d,e；支持信息图S10）。采用活性氧探针2',7'-二氯二氢荧光素二乙酸酯（DCFH-DA）检测胞内ROS生成情况，深入探究MCC的抗肿瘤作用机制（图3f-h）：荧光成像结果显示，MCC处理组产生的ROS荧光信号最为强烈，流式细胞检测结果也进一步验证该结论，证明MCC具备高效的羟基自由基生成能力；与之相比，CaNPs与CaNPs+CUR处理组仅出现微弱的ROS荧光信号，这可能是因为未包覆的CaNPs所生成的过氧化氢易发生快速分解。利用钙离子荧光探针Fluo-4 AM对细胞内钙离子含量进行检测与分析（图3i-k）：MCC处理组的胞内钙离子水平明显高于CaNPs单独处理组与MNF单独处理组，与CaNPs+CUR处理组的检测结果相近。流式细胞术分析结果（支持信息图S11）显示，单独使用CUR即可有效提升胞内钙离子水平，与CaNPs联用后该作用进一步增强；与之不同，MNF对细胞内钙离子水平无明显影响；MNF+CaNPs组的钙离子含量与CaNPs单独处理组基本一致，证明MNF不会引发钙离子代谢紊乱。值得注意的是，MCC与CaNPs+CUR均能诱导相近的高钙离子蓄积，说明胞内钙离子浓度上升主要得益于CaNPs与CUR的协同作用。为进一步明确CUR的功能，单独探究其对B16-OVA细胞的作用效果：随着CUR浓度不断提升，细胞毒性、胞内ROS水平以及钙离子蓄积量均呈现出剂量依赖性上升趋势（支持信息图S12）。上述结果说明，CUR能够以剂量依赖的方式加剧氧化应激反应与钙离子过载，当其与CaNPs共同作用于MCC体系时，可发挥协同抗肿瘤效应。肿瘤缺氧状态主要由肿瘤细胞快速增殖与无氧糖酵解引发，常会降低抗肿瘤药物的治疗效果，并抑制免疫细胞向肿瘤部位浸润。利用氧气特异性探针RDPP对MCC处理后的B16-OVA细胞内氧气含量进行检测（图3l-n）：结果显示，MCC可显著提高细胞内氧气浓度，该结果与前期溶解氧测定结果完全吻合。活/死细胞染色实验进一步证实，MCC对肿瘤细胞的杀伤效果显著优于其他各处理组（图3o）。通过8-羟基-2'-脱氧鸟苷（8-OHdG）检测试剂盒分析羟基自由基引发的DNA氧化损伤程度（图3p）：MCC处理组引发的DNA损伤水平在所有组别中达到最高，与胞内高水平ROS的检测结果相互印证。 cGAS-STING通路在调控先天免疫以及连接先天免疫与适应性免疫过程中起到关键作用。当线粒体发生损伤时，线粒体DNA会释放至细胞质中，作为激活cGAS-STING通路的核心双链DNA信号分子。为直观观测线粒体DNA的释放行为，采用双链DNA染料PicoGreen与线粒体荧光探针MitoTracker Red进行共定位荧光染色（图4a）：对照组中，PicoGreen荧光信号主要集中在细胞核内，核外仅存在极少的荧光信号，这部分信号大概率来源于非线粒体核酸片段；CaNPs处理组中双链DNA与线粒体的共定位程度较低，说明线粒体仅出现轻微损伤；与之相比，CaNPs+CUR处理组的共定位现象更为明显，代表线粒体DNA泄漏量有所增加；MNF处理组可观测到大量分布于核外的双链DNA信号，说明线粒体受损程度更为严重；尤为关键的是，MCC处理组的双链DNA荧光信号与线粒体完全分离，部分信号甚至出现在细胞边缘以外，证明线粒体DNA发生了大量释放。上述结果表明，不同处理组中线粒体结构完整性逐步受损，线粒体DNA释放量随之增加，也印证了我们的实验猜想：MCC可造成最显著的线粒体损伤，并通过大量释放线粒体DNA高效激活cGAS-STING通路。图4 体外激活cGAS-STING通路和BMDCs。a）用PicoGreen（dsDNA，绿色）和MitoTracker Red（线粒体，红色）染色的B16-OVA细胞共焦图像。黄色箭头表示线粒体DNA的释放。比例杆：10微米。通过荧光显微镜观察B16-OVA细胞中b） TFAM（mtDNA释放标记物）和c） STING蛋白的荧光图像（比例条：100微米）。d）对B16-OVA细胞中参与cGAS-STING信号通路的关键蛋白进行Western blot分析，包括p65、IRF3、STING及其磷酸化形式。通过流式细胞术测量的BMDC中e，f）CD11cCD86细胞，g，h）CD11cCD80细胞，i，j）CD11cMHC-II细胞的代表性点图和定量。ELISA定量促炎细胞因子、k）IFN-β、l）TNF-α和m）骨髓直流培养基中的IL-6。f、h、j–m的数据以平均±标准差（n = 3，代表性独立实验）表示，并通过单向方差分析与Tukey多重比较检验进行评估。“NS”表示无显著差异，p < 0.05，p < 0.01，p < 0.001，p< 0.0001 。为进一步挖掘并验证MCC的免疫激活潜能，我们借助Transwell共培养模型，系统考察其诱导树突状细胞（DC）成熟及促炎微环境形成的能力（支持信息图S14）。实验中，我们先以不同浓度的各纳米制剂作用于B16-OVA细胞，随后离心收集含肿瘤裂解物及释放的DAMPs的条件培养基，将其转移至Transwell上室，与下室的骨髓来源树突状细胞（BMDCs）进行间接共培养。结果显示，经MCC处理的条件培养基，能显著上调BMDCs表面共刺激分子CD86、CD80以及抗原呈递关键分子MHC-II的表达水平（图4e-j），有力证明MCC可有效促进DC的成熟进程。值得注意的是，单独使用MNF处理也能观察到一定程度的DC成熟诱导效应，这主要源于肿瘤细胞凋亡过程中释放的DAMPs、细胞因子及线粒体DNA所产生的驱动作用。为严谨排除上室残留纳米颗粒直接接触并激活BMDCs的干扰，我们对收集到的条件培养基进行了高速离心处理，以彻底去除肿瘤细胞碎片及未被内化的纳米颗粒。后续流式细胞术分析（支持信息图S15）证实，经纯化后的“纯肿瘤细胞上清液”几乎无法诱导DC的直接成熟，这充分表明，我们所观察到的免疫激活现象，主要是由肿瘤细胞来源的危险信号所介导，而非纳米颗粒本身的直接刺激。干扰素-β（IFN-β）作为cGAS-STING通路激活的核心下游标志物，其分泌水平被重点检测。分析发现，在B16-OVA细胞与BMDCs的共培养体系中，以及单独培养的B16-OVA细胞中，MNF和MCC处理组的IFN-β含量均出现显著升高（图4k；支持信息图S16），这一现象很可能与锰离子对cGAS受体的敏化作用密切相关。与此同时，促炎细胞因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白介素-6（IL-6）的释放也在MNF和MCC处理后呈现显著上调趋势（图4l,m），这些数据共同证实，MCC能够强效激活先天免疫反应，构建出利于抗肿瘤的免疫微环境。受限于体外实验的充分证据，我们进一步构建B16-OVA黑色素瘤小鼠模型，开展体内抗肿瘤效应的验证研究。实验采取肿瘤内注射给药方式，每两天给药一次（图5a）。肿瘤生长动态监测结果表明，CaNPs、CaNPs+CUR及MNF单一组分均表现出一定的抑瘤效果，但MCC治疗组展现出最优的肿瘤生长抑制能力，抑制率最高可达85%（图5b）。对终期小鼠肿瘤重量的称量分析进一步印证了这一优势，MCC处理组的肿瘤负荷显著低于其他各组（图5c）。从形态上看，MCC治疗组小鼠的肿瘤结节明显更小，单肿瘤生长曲线也清晰显示其生长速度更为缓慢，这与肿瘤体积及重量的降低趋势完全吻合（图5d,e）。分析认为，MCC之所以能发挥强效抗肿瘤作用，核心在于其介导的大量羟基自由基生成及钙离子过载反应，有效诱导了肿瘤细胞的凋亡。为深入探究MCC在体内的细胞分布特征，我们对经罗丹明B异硫氰酸酯（RITC）标记的MCC进行肿瘤内注射，并通过流式细胞术分析荷瘤小鼠的肿瘤组织单细胞悬液（支持信息图S17）。结果显示，MCC主要被肿瘤细胞摄取，占比约60%，其次为肿瘤相关巨噬细胞和树突状细胞，在T细胞中也有少量检测到。肿瘤细胞对MCC的高摄取率，与其通过cGAS-STING通路释放肿瘤相关抗原及炎性细胞因子的机制密切相关。而巨噬细胞和DCs对MCC的摄取，则进一步凸显了该纳米制剂在重塑肿瘤微环境、调控先天免疫细胞功能方面的巨大潜力。众所周知，抗原呈递细胞（如DCs）的有效浸润是STING通路被充分激活的前提，而这对于启动全面的抗肿瘤免疫反应至关重要。图5 黑色素瘤模型中的体内抗肿瘤疗效及免疫反应。(a）B16-OVA黑色素瘤小鼠治疗方案。(b–d）肿瘤生长曲线、肿瘤重量及个体肿瘤生长情况。(e）分离肿瘤的代表性图像（比例尺：2 cm）。(f–g）TDLN中DC和巨噬细胞活化及抗原呈递的流式定量。（h–i）脾脏及肿瘤组织中CD4⁺、CD8⁺ T细胞等免疫细胞的流式分析。（j）血清TNF-α、IL-6、IFN-β和IFN-γ水平（ELISA）。数据以平均值 ± SD 表示，采用单因素方差分析（ANOVA）进行统计。NS表示无显著差异，*p < 0.05，**p < 0.01，***p < 0.001，****p < 0.0001。我们进一步开展体内实验，探究MCC经全身给药后对黑色素瘤的治疗效果（图6a）：与空白对照组小鼠相比，MCC处理组小鼠的肿瘤生长受到明显抑制，肿瘤体积与重量均显著降低（图6b-e）。通过对肿瘤引流淋巴结、脾脏以及肿瘤组织进行系统分析，进一步评价静脉注射MCC后引发的体内抗肿瘤免疫应答：结果显示，MCC处理组小鼠体内抗原呈递细胞的活化水平与抗原呈递效率均得到显著提升（图6f,g）。值得关注的是，MCC可显著促进脾脏中辅助性T细胞、细胞毒性T淋巴细胞与效应记忆T细胞的富集，同时增强肿瘤组织中巨噬细胞、树突状细胞、CD4阳性T细胞与CD8阳性T细胞的浸润水平（图6h,i）。此外，流式细胞术检测结果表明，MCC处理组小鼠脾脏内CD3阳性T细胞中调节性T细胞的比例明显下降（支持信息图S24）。免疫抑制性调节性T细胞的减少说明，MCC不仅能够有效激活正向免疫应答，还可缓解机体整体的免疫抑制状态，进而构建更有利于抗肿瘤的免疫微环境。为全面评价MCC经全身给药后的生物安全性，我们收集小鼠心脏、肝脏、肺脏与肾脏等主要脏器进行组织病理学分析：苏木精-伊红染色结果显示，与对照组相比，MCC处理组小鼠各脏器均未出现明显的组织损伤、炎性浸润或形态结构异常（支持信息图S25）。同时，小鼠体重在整个治疗周期内保持平稳（支持信息图S26），进一步证明MCC具备良好的体内安全性。综上所述，以上结果充分证明，MCC不仅能够通过局部注射抑制肿瘤生长并强化抗肿瘤免疫效应，还可通过全身给药途径发挥高效的黑色素瘤治疗作用，具备极高的临床转化潜力。图6 MCC在黑色素瘤模型中的体内抗肿瘤作用及免疫反应。a）治疗方案。b）肿瘤生长曲线，c）肿瘤重量，d）单个肿瘤生长曲线，e）分离肿瘤的代表性图像（比例尺：2 cm）。f–g）TDLN中DC和巨噬细胞的流式定量。h）脾脏中CD4⁺/CD8⁺ T细胞及效应记忆T细胞比例。i）肿瘤组织中免疫细胞（巨噬细胞、DC、CD4⁺ T细胞和CD8⁺ T细胞）定量。数据为平均值 ± SD（n = 5），未配对Student’s t检验；*p < 0.05，**p < 0.01，***p < 0.001，****p < 0.0001。免疫检查点抑制剂是目前临床肿瘤免疫治疗的重要药物，已有多种类型获得美国食品药品监督管理局批准应用。但这类疗法仅对部分患者和部分肿瘤类型有效，对多数确诊时已发生转移的癌症患者，治疗仍面临巨大挑战。为探究MCC在转移性肿瘤治疗中的应用价值，我们向7周龄C57BL/6小鼠静脉注射B16-OVA细胞，构建黑色素瘤肺转移模型。按照实验方案，对小鼠进行尾静脉注射MCC与腹腔注射aPD-1联合治疗（图7a）。第15天时处死小鼠并摘取肺组织，在体视镜下统计肺表面转移结节数量。成像与统计结果显示，对照组小鼠肺部出现广泛转移灶；单独使用MCC或aPD-1均可在一定程度抑制肺部转移；而二者联合给药时抑制效果最为突出，肺表面仅见极少量转移灶（图7b；支持信息图S27）。这种增强的抗转移作用，与肺部免疫细胞浸润水平提高密切相关。流式细胞术分析表明，单独使用MCC或aPD-1可适度提高抗原呈递细胞与T细胞的浸润水平，而联合治疗表现出明显协同效应，使上述免疫细胞浸润达到最高水平（图7c-f）。对脾脏的免疫分析进一步显示，MCC组与MCC+aPD-1组中T细胞及效应记忆T细胞比例均明显上升，其中联合治疗组提升最为显著，说明其免疫激活效应更强（图7g-j）。H&E染色组织学分析也印证了上述结果：对照组肺部转移灶密集，而MCC与aPD-1联合处理组转移灶显著减少，与肺表面转移结节计数结果一致（图7k）。以上结果表明，MCC与免疫检查点抑制剂联合使用可高效抑制黑色素瘤肺转移，二者发挥显著协同作用，有效提升抗肿瘤免疫治疗效果。图7 MCC联合抗PD-1抑制黑色素瘤肺转移。a）肺转移模型治疗方案。b）肺表面转移结节数量统计。流式细胞术分析肺组织中c、d）巨噬细胞以及e）CD4 T细胞、f）CD8 T细胞；脾脏中g）CD3⁺CD4⁺ T细胞、h）CD3⁺CD8⁺ T细胞、i）效应记忆CD4 T细胞和j）效应记忆CD8 T细胞。k）肺组织H&E染色显示转移灶（比例尺100 μm）。数据以平均值±SD（n=4）表示，单因素方差分析（Tukey检验）。NS，无显著差异；*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001，****p<0.0001。为进一步评估MCC的抗肿瘤谱及对免疫反应的激活能力，我们采用4T1细胞构建了原位乳腺癌模型，具体将其接种至6周龄BAL/c小鼠背部皮下。待肿瘤体积增长至50至100立方毫米时，实施每两天一次的注射给药方案，实验于第21天结束并对小鼠进行安乐处死（图8a）。肿瘤生长动态监测结果表明，虽然CaNPs、CaNPs+CUR及MNF单一制剂均表现出一定的抑瘤作用，但MCC治疗组的抑制效果最为显著，肿瘤生长抑制率约达49%（图8b）。这一数据与肿瘤重量分析结果高度吻合，MCC处理组的肿瘤负荷明显低于其他组别（图8c）。对剥离肿瘤的实物拍照及单肿瘤生长曲线的进一步分析，也确凿证明了MCC在抑制肿瘤增殖方面的优势更为突出（图8d，e）。图8 MCC在乳腺癌模型中的体内抗肿瘤作用。a）4T1荷瘤小鼠治疗方案。b）肿瘤生长曲线，c）肿瘤重量，d）分离肿瘤照片（比例尺2 cm），e）单个肿瘤生长曲线。f–h）脾脏和肿瘤组织免疫细胞的定量分析。数据以平均值±SD表示（n=4–5），单因素方差分析（Tukey检验）。NS，无显著差异；*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001，****p<0.0001。不过，MCC在乳腺癌模型中的治疗效果略低于黑色素瘤模型，这可能与乳腺癌自身的特性密切相关，例如肿瘤免疫原性更低、免疫抑制微环境更为显著、代谢环境不利于免疫激活，同时具备更强的免疫逃逸能力，这些因素均显著增加了治疗难度。为验证MCC是否仍可有效触发强烈的抗肿瘤免疫应答，我们对相关组织内的免疫细胞亚群进行了系统分析。肿瘤引流淋巴结的流式细胞术结果显示，MCC处理组中树突状细胞、巨噬细胞等抗原呈递细胞的活化比例显著提升，与黑色素瘤模型中的实验结果保持一致。同时，在MCC处理小鼠的脾脏中，辅助性T细胞、细胞毒性T淋巴细胞以及效应记忆T细胞比例均明显上升，说明机体适应性免疫应答得到有效增强。此外，MCC还可显著促进免疫细胞向肿瘤组织内部浸润，这也是其能够有效抑制乳腺癌生长的重要原因。上述结果充分证明，MCC不仅对黑色素瘤具有良好治疗效果，同时也可通过调控抗肿瘤免疫反应，在乳腺癌治疗中展现出可观的应用前景。三、结论本研究成功构建了一种基于MNF的双金属纳米反应器，旨在通过激活cGAS‑STING通路实现高效的抗肿瘤金属免疫治疗。体系中引入的CaNPs可持续提供过氧化氢与氧气，显著提升了MNF产氧与生成羟基自由基的能力。同时，CUR与CaNPs释放的钙离子协同作用，大幅提高细胞内钙离子浓度。钙离子过载与强毒性羟基自由基共同作用，有效诱导肿瘤细胞凋亡、造成线粒体损伤并促进线粒体DNA大量释放，在锰离子的辅助下强效激活cGAS‑STING信号通路。体内实验结果证实，MCC可显著抑制黑色素瘤与乳腺癌的增殖，并触发强烈的全身性抗肿瘤免疫应答。此外，MCC与aPD‑1抗体联合使用时，可显著抑制黑色素瘤的肺部转移，充分体现了锰‑钙双金属纳米反应器在肿瘤免疫治疗领域的巨大应用潜力。同时，MCC制备工艺简便且具备良好的规模化合成前景，进一步凸显了其作为新型锰基免疫治疗制剂的临床转化价值。参考文献 Bimetallic Nanoreactor Activates cGAS-STING Pathway via mtDNA Release for Cancer Metalloimmunotherapy 原文链接 https://doi.org/10.1002/adfm.202518279 如需获取更多关于锰-钙双金属纳米反应器的研究信息，欢迎相关科研工作者与我们进一步交流与合作。电话:022-86386788 企业官网:http://biocoupling.com 邮箱：info@biocoupling.com 关于我们天津偶联生物医药技术有限公司（Tianjin Coupling Biomedical Technology Co.,Ltd 简称：偶联生物），是一家集研发、生产、技术服务及销售为一体的生物高科技企业，公司坐落于天津市津南区双港产业园区。偶联生物自成立以来与驻津高校紧密合作，一直致力于纳米医学的基础研究，始终坚持自主创新,将研发作为推动企业持续发展的核心驱动力。在国家鼓励基础学科科技创新的背景下，公司面向医疗健康领域，积极推动临床医学-分子生物学-纳米医学-转化医学相结合的多学科交叉系统性研究。同时公司致力于建设具有历史使命的前沿学科交叉研究机构，开展多种疾病的诊疗医学研究，并协助多个科研团队开展IIT研究，在医药研发领域具有丰富的经验。版权及免责声明「偶联生物医药」公众号推送的内容来源于原创或根据公开资料整理编辑，欢迎个人转发至朋友圈。媒体或机构如需转载，请完整注明：本文转载自天津偶联生物医药技术有限公司；作者栏请填写：偶联生物医药；并插入偶联生物医药公众号链接。本公众号的目的在于分享行业相关知识、传递最新医药资讯。如有侵权，请在留言栏及时告知，我们将及时删除相关信息。本公众号推送的文章中的观点不代表偶联生物医药的立场，也不是治疗方案的推荐。如需获得诊断或治疗方面的指导，请前往正规医院就诊。编辑：Jp.Mu | 校审：Biocoupling

免疫疗法细胞疗法抗体药物偶联物

100 项与 STING激动剂(Sutro Biopharma) 相关的药物交易

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