Emricasan

1.1 ◆ NAFLD定义与现状 非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）是一种脂肪在肝细胞内过度沉积导致的慢性肝病，已成为全球慢性肝病的主要病因，中国发病率上升。非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）是肝细胞内脂肪过度沉积所导致的慢性肝病，已成为全球范围内慢性肝病的主要病因，且在中国亦呈现出发病率不断上升的趋势。 1.2 ◆ NASH发展与风险 非酒精性脂肪性肝炎（NASH）是NAFLD的亚型，可能导致肝纤维化、肝硬化，增加肝脏相关死亡风险。非酒精性脂肪性肝炎（NASH）作为NAFLD的进展性亚型，可进一步引发肝纤维化、肝硬化及其相关并发症，从而显著增加肝脏相关死亡的风险。 2.1 ◆ 代谢靶向治疗药物 近年来，随着对NAFLD发病机制的深入研究，针对脂肪堆积和损伤通路的新药研发取得了显著进展。代谢靶向治疗药物通过调节PPAR等靶点，减少肝脏脂肪堆积，改善代谢应激。尽管取得进展，药物的安全性仍需考量。这些新药根据治疗靶向的不同，可分为四大类。第一类是代谢靶向治疗药物，旨在减少肝脏脂肪堆积及代谢应激，包括过氧化物酶体增殖物激活受体激动剂、法尼酯X受体激动剂、脂肪从头合成抑制剂、肠促胰素和纤维母细胞生长因子等。 2.1.1 ◆ PPAR激动剂概述 过氧化物酶体增殖物激活受体（PPAR）是核受体超家族的一员，它参与脂质代谢的调节。PPAR有三种亚型：PPARα、PPARβ/δ和PPARγ，它们共享一个配体结合区域，但各亚型对配体的敏感性和组织分布有所不同。研究表明，PPAR激动剂在治疗非酒精性脂肪肝病（NAFLD）中有潜力。 2.1.2 ◆ PPAR激动剂临床试验 如Elafibranor和Saroglitazar正在进行临床试验。Elafibranor（GFT-505）不仅能改善血脂和肝脏脂肪含量，还能在短期内显著降低代谢综合征患者的肝酶水平，改善胰岛素抵抗，这为它在NASH治疗中的应用提供了有力证据。Saroglitazar在降低NAFLD患者肝酶水平方面显示出潜力，目前正处于III期临床研究阶段。 2.1.3 ◆ PPAR调节剂与新药研发 还有多种新型PPAR调节剂和激动剂正在临床试验中探索其疗效和安全性。如Pemafibrate、K-877、HPP-593等目前在临床试验中进行探索。 2.2 ◆ 肠道胆汁酸与脂肪代谢 2.2.1 ◆ FXR靶点的作用与药物 FXR，即法尼醇X受体，在胆固醇和三酰甘油的代谢中扮演着重要角色。FXR靶点的作用与药物如奥贝胆酸等正在进行临床试验。FLINT研究显示，FXR激动剂奥贝胆酸能有效改善肝脏组织学，降低肝纤维化评分、肝酶水平以及患者的BMI指数。 2.2.2 ◆ 肠道菌群调节和新药研发 肠道菌群调节剂通过调节肠肝循环，影响脂肪代谢，为NAFLD治疗提供了新思路。例如，细菌脂多糖（LPS）的抗体IMM-124e，能够减少LPS和细菌产物从胃肠进入肝脏，从而降低库普弗细胞的激活程度，进一步改善NASH患者的胰岛素敏感性。 2.3 ◆ 氧化应激与炎症药物 2.3.1 ◆ 抗氧化剂和相关药物 抗氧化剂如维生素E在中和氧化应激方面具有潜在效果。PIVENS研究显示，维生素E每日800IU的治疗在96周后能有效改善NASH的组织学。 2.3.2 ◆ 来自凋亡与免疫调节的干预 免疫调节剂通过中和氧化应激和炎症对NASH治疗具有潜在效果，但需进一步临床验证。例如，氨来呫诺通过抑制激酶表达，减少了脂肪变性和炎症因子在肝脏中的表达。 2.3.3 ◆ 调节剂临床研究进展 相关药物正在临床试验中。如Emricasan，在IIb期试验中以探究其对NASH的缓解情况。 2.4 ◆ 胃肠道靶向药物的开发 2.4.1 ◆ 减肥药与疗效 减肥药如奥利司他在减少脂肪吸收和降低体重方面带来一定疗效，同时还能降低肝酶水平和肝脏脂肪含量。 2.4.2 ◆ 肠道菌群调节剂的作用 通过调节菌群改善代谢方式。例如，粪便移植可用于调节肠道菌群，提升胰岛素敏感性。 2.5 ◆ 抗纤维化药物的突破 2.5.1 ◆ 抗纤维化药物种类及临床试验 抗纤维化药物如Simtuzumab和Gal-3抑制剂正在进行临床试验。这些药物可有效缓解NASH患者的纤维化进程。 2.5.2 ◆ 靶向肝纤维化药物的潜力 针对肝纤维化的药物有较大的临床试验潜力。目前，多种抗纤维化药物正在进行不同阶段的临床研究，以评估其对肝纤维化的治疗效果。 3.1 ◆ 药物研发挑战与期待 尽管新药研发取得进展，但单一药物难以应对复杂病症，联合治疗方案或为未来研究重点。临床医生在处理此类患者时，应强调生活方式调整和体重控制。 3.2 ◆ 临床应用建议与探索 强调生活方式调整和体重控制，同时积极治疗代谢综合征组分为应对NAFLD/NASH患者管理的关键。目前，尚无药物获得批准用于NAFLD/NASH治疗。

坏死性凋亡（necroptosis）是一种由RIPK1-RIPK3-MLKL级联驱动的、高度炎症性的程序性细胞死亡形式，在感染性休克、炎症性肠病、神经退行性疾病及肿瘤微环境等多种病理情境中被过度激活。与凋亡不同，坏死性凋亡终以质膜破裂（plasma membrane rupture, PMR）告终，胞内损伤相关模式分子（DAMPs）如HMGB1、IL-1β等大量外泄，放大局部乃至全身炎症。尽管近年发现NINJ1是焦亡、凋亡和铁死亡中PMR的共同执行者，其在坏死性凋亡中却并非必需，使得MLKL激活之后究竟如何精准、快速地“撕破”质膜成为领域内亟待填补的空白，也限制了针对坏死性凋亡相关疾病的靶向干预策略。 美国德克萨斯州达拉斯市西南医学中心内科系Ayaz Najafov等研究人员通过全基因组CRISPR筛选锁定SIGLEC12为坏死性凋亡PMR的专属介导者，继而结合基因编辑、活细胞成像、生化和质谱手段阐明其被TMPRSS4剪切激活、与MLKL协同诱导质膜破裂的分子链条，并揭示相关突变在癌症及人群中的功能影响。相关内容以“SIGLEC12 mediates plasma membrane rupture during necroptotic cell death”为题发表在《Nature》上。 【关键结论】 1. SIGLEC12是坏死性凋亡中PMR的关键介导因子 敲除SIGLEC12显著抑制坏死性凋亡诱导的PMR，但不影响上游信号（如RIPK1、RIPK3、MLKL的激活）。 SIGLEC12缺失导致细胞出现“气球样”膨胀形态，说明细胞死亡受阻于PMR阶段。 2. SIGLEC12与MLKL协同作用 SIGLEC12在坏死性凋亡过程中与MLKL相互作用，并形成胞质点状聚集和纤维结构。 SIGLEC12在坏死性凋亡中被去磷酸化，并发生剪切，产生一个约20 kDa的活性片段。 3. SIGLEC12的剪切与激活由TMPRSS4介导 跨膜丝氨酸蛋白酶 TMPRSS4 与SIGLEC12相互作用，并在其胞外区剪切，生成活性片段。 该剪切事件是SIGLEC12诱导PMR的关键激活步骤。 抑制TMPRSS4可阻止SIGLEC12剪切和PMR。 4. SIGLEC12的功能具有物种特异性 在小鼠细胞中敲除Siglec12不影响PMR。 人类SIGLEC12因突变已失去唾液酸结合能力，可能演化出新的功能，即调控坏死性凋亡。 5. SIGLEC12突变与人类疾病相关 癌症相关突变（Ser458Phe） 和人群中常见突变（Arg528Trp） 会抑制TMPRSS4对SIGLEC12的剪切，降低其诱导PMR的能力。 这些突变可能使癌细胞逃避坏死性凋亡，从而促进肿瘤进展。 【主要内容】 图1：SIGLEC12是坏死性凋亡的介导因子 利用全基因组CRISPR-Cas9敲除文库在表达活性MLKL的HEK293细胞中进行筛选，唯一显著富集的“存活”基因是编码跨膜蛋白的SIGLEC12；二次验证显示，无论是用组成性激活的MLKLQ356A突变体，还是用TNF+SM-164+emricasan（TSE）或TRAIL+SM-164+emricasan（TRAIL+SE）诱导坏死性凋亡，敲除或敲低SIGLEC12都能显著抑制CellToxGreen和LDH升高，而对ATP下降无影响，证明其作用于MLKL下游、专司质膜破裂。结构域示意图和序列比对进一步揭示SIGLEC12与已知的PMR执行者NINJ1共享一段高度相似的“NISI”基序，提示二者可能具有功能同源性。 图2：SIGLEC12介导MLKL下游的质膜破裂 在HT-29、Jurkat、A549-RIPK3等多种人源细胞中，SIGLEC12缺失完全阻断TSE或TRAIL+SE诱导的CellToxGreen信号和LDH释放，却不影响RIPK1、RIPK3和MLKL的磷酸化及MLKL寡聚，说明上游坏死小体信号正常；因无法破裂，细胞在光镜和电镜下呈现典型的“气球样”膨胀。与此一致，胞质蛋白HMGB1以及促炎细胞因子IL-1β、IL-8、CXCL1、TNF的释放均显著减少，重现了NINJ1在其他死亡方式中的PMR缺陷表型，从而确立SIGLEC12是坏死性凋亡中专用的“膜破执行者”。 图3：SIGLEC12在坏死性凋亡中的调控机制 比较四种程序性死亡方式发现，SIGLEC12仅对TSE诱导的坏死性凋亡必需，对外源性/内源性凋亡、焦亡、铁死亡均无显著影响；活细胞成像和免疫荧光显示，SIGLEC12在坏死性凋亡早期形成胞质点状聚集并转位至质膜，且在人类结肠肿瘤活检组织中可检测到点状信号，而正常黏膜几乎缺如。电镜下SIGLEC12纤维清晰可见，与NINJ1在焦亡中的纤维类似。免疫共沉淀和质谱磷酸化图谱表明，SIGLEC12选择性结合激活型MLKL而不结合RIPK1/RIPK3，MLKL抑制剂necrosulfonamide可阻断二者相互作用；同时SIGLEC12在Thr519、Ser532/S539、Thr555位点发生显著去磷酸化，但拟似去磷酸化的4A突变体并不能自发诱导PMR，提示去磷酸化是必要但不充分步骤。 图4：SIGLEC12被TMPRSS4剪切激活以诱导PMR 全长SIGLEC12过表达不引起细胞死亡，而在坏死性凋亡进程中TMPRSS4将其胞外段于Arg410处剪切，释放一条含NISI基序的约20 kDa片段；模拟该剪切的ΔN（22-410 aa）构建体单独表达即可形成点状和纤维结构，并足以在不依赖MLKL的情况下诱导PMR。共转染和蛋白酶失活突变实验证实，TMPRSS4野生型而非S387A催化死突变可高效剪切SIGLEC12并促进细胞死亡，剪切可被Arg410Ala突变或广谱蛋白酶抑制剂阻断。临床数据进一步显示，TCGA中最常见的SIGLEC12癌症突变S458F（位于NISI基序）以及人群常见突变R528W均显著削弱TMPRSS4介导的剪切，提示这些变异可能通过抑制PMR赋予癌细胞生存优势或改变个体对炎症性疾病的易感性。 【全文总结】 本研究通过全基因组CRISPR筛选发现，SIGLEC12是坏死性凋亡中质膜破裂（PMR）的关键介导因子，其在与MLKL相互作用后，被TMPRSS4剪切激活，形成纤维结构诱导细胞破裂；该过程具有人类特异性，且SIGLEC12的癌症相关突变和人群中常见突变可削弱其功能，提示其在调控炎症性细胞死亡及疾病易感性中的重要作用。 「BioMed科技」关注生物医药×化学材料交叉前沿研究进展！交流、合作，请添加杨主编微信！ 原文链接： https://www.nature.com/articles/s41586-025-09741-1 来源：BioMed科技声明：仅代表作者个人观点，作者水平有限，如有不科学之处，请在下方留言指正！