Shanghai CirCode Biomed Co. Ltd.

2026年1月19日，艾迪药业宣布其抗艾滋病2.3类改良型新药——多替拉韦/拉米夫定/替诺福韦单片复方制剂ADC205片，获准开展临床试验。该药将三种经典抗艾药物整合为每日一次、每次一片的给药方案，旨在简化HIV-1感染者的长期治疗，提升服药依从性，为中国艾滋病防治提供更便捷、更优化的治疗选择。 2026年1月23日，英矽智能宣布其潜在同类最佳口服NLRP3抑制剂ISM8969获美国FDA临床试验批准，将开展针对帕金森病的I期临床研究。 2026年1月23日，勤浩医药宣布其1类新药ERK1/2抑制剂GH55联合SHP2抑制剂GH21的临床试验申请获中国国家药监局批准。该联合疗法旨在通过上下游协同阻断MAPK信号通路，为RAS、RAF等基因突变导致的局部晚期或转移性实体瘤患者提供全新治疗选择，标志着我国在靶向耐药机制和联合用药策略方面取得重要进展。 默沙东的注射用索特西普获CDE拟纳入优先审评 2026年1月22日，南京维立志博宣布其核心产品维利信®（LBL-024）获欧盟委员会授予孤儿药资格认定，用于治疗肺外神经内分泌癌。这是该药物继获中国CDE突破性疗法认定、美国FDA孤儿药与快速通道资格后，又一重要国际监管进展。 2026年1月21日，BioNTech宣布其研发中的mRNA癌症免疫疗法BNT113获得美国FDA快速通道认定，用于治疗表达PD-L1的HPV16阳性头颈鳞状细胞癌患者。  这是全球首款进入关键临床阶段的靶向HPV16的mRNA癌症疫苗，有望为这一缺乏靶向治疗选择的患者群体提供全新的免疫治疗策略。 2026年1月22日，瑞博生物宣布其自主研发的靶向ApoC3的小干扰RNA药物RBD5044，正式获得中国国家药监局II期临床试验默示许可。  该药物为全球第二款进入临床阶段的靶向ApoC3的siRNA疗法，凭借其“单次给药、长效降脂”的潜力，有望为高甘油三酯血症患者提供更精准、便捷的治疗新选择。 2026年1月22日，拜耳旗下全资子公司BlueRock Therapeutics宣布，其在研细胞疗法OpCT-001获得美国FDA孤儿药认定，用于治疗视网膜色素变性。  该疗法基于诱导多能干细胞技术，旨在通过替换视网膜中丧失的感光细胞，为遗传性视网膜疾病患者提供一种潜在的全新治疗路径，标志着细胞治疗在眼科领域的又一重要进展。 2026年1月22日，亚虹医药宣布其自主研发的高选择性FGFR2/3双靶点抑制剂APL-2401在澳大利亚获批开展Ⅰ期临床试验，此前该药已在中国快速获批并完成首例患者给药。  该药物针对FGFR2/3基因异常的晚期实体瘤患者，有望为尿路上皮癌、胆管癌、子宫内膜癌等多种难治性肿瘤提供新的靶向治疗选择，标志着中国创新药国际化进程再进一步。 2026年1月22日，Corcept Therapeutics宣布其在研新药relacorilant联合白蛋白紫杉醇治疗铂类耐药卵巢癌的关键III期临床研究ROSELLA达到总生存期（OS）主要终点。  研究显示，联合治疗组较单用化疗组死亡风险降低35%，中位OS延长4.1个月。此前该研究已达到无进展生存期（PFS）主要终点，意味着OS与PFS双重获益已获证实，为这一难治性患者群体带来全新的治疗希望。 2026年1月23日，赛诺菲公布其新型OX40配体靶向抗体药物amlitelimab在两项全球III期临床研究——SHORE与COAST 2中的积极结果。 2026年1月26日，中国国家药品监督管理局正式批准阿斯利康的PD-L1抑制剂英飞凡®（度伐利尤单抗）联合化疗，用于错配修复缺陷（dMMR）的原发晚期或复发性子宫内膜癌的一线治疗。  这是中国首个获批用于该人群的免疫治疗方案，标志着子宫内膜癌治疗正式进入“免疫联合”新时代，为约占患者总数20%-30%的dMMR人群带来了显著的生存希望。 2026年1月26日，在刚刚落幕的第44届摩根大通医疗健康年会上，来自中国的创新企业莱芒生物向全球展示了其极具颠覆性的CAR-T疗法临床成果：仅用常规剂量千分之一的细胞数量，成功让多位系统性红斑狼疮患者实现完全缓解出院，并在复发难治性白血病/淋巴瘤治疗中达到100%完全缓解率。 外周动脉疾病（也称下肢动脉硬化闭塞症）：一种易被忽视的血管疾病挑战 2025年1月24日，中国呼吸疾病治疗领域迎来一项重要进展：葛兰素史克（GSK）旗下药物全再乐®（氟替美维吸入粉雾剂）获中国国家药监局批准，新增用于成人哮喘患者的维持治疗。 国家药监局关于暂停进口、销售和使用Sun Pharmaceutical Industries Limited重酒石酸卡巴拉汀胶囊的公告 国家药监局药审中心关于发布《多糖结合疫苗核磁共振研究的技术考虑（试行）》的通告（2026年第8号） 2026年1月21日，深圳康源久远宣布其自主研发的PEG化T细胞接合剂JY108获得美国FDA临床试验批准，用于治疗CD19阳性复发性/难治性非霍奇金淋巴瘤。  作为全球首款基于PEG技术的TCE类双特异性抗体，JY108旨在克服传统T细胞接合剂常见的细胞因子风暴与组织渗透性局限，展现出独特的临床开发潜力。 2026年1月22日，拜耳集团及其子公司BlueRock Therapeutics宣布，其在研细胞疗法OpCT-001获得美国FDA孤儿药资格认定，用于治疗视网膜色素变性。该疗法是一种基于诱导多能干细胞的再生医学产品，旨在通过替换患者视网膜中丧失的光感受细胞，恢复视力功能，为这一目前缺乏有效治疗手段的遗传性眼病患者带来新的希望。 维昇药业隆培促生长素在华获批上市 2026年1月26日，国家药品监督管理局正式批准舒立瑞®（依库珠单抗注射液）适应症扩展至6岁及以上抗AChR抗体阳性的难治性全身型重症肌无力儿童患者。这是目前中国首个且唯一获批用于该疾病儿童患者的靶向治疗，填补了长期存在的临床空白，为患儿及其家庭带来新的治疗希望。 2026年1月23日，Bausch Health Companies Inc.公布其全球III期RED-C临床研究计划的最新结果：评估无定型利福昔明固态分散体在肝硬化患者中用于预防肝性脑病的两项临床试验，尽管安全性和耐受性良好，但均未达到主要终点。这一结果表明，肝性脑病的一级预防领域仍存在显著未满足的临床需求，相关药物开发面临挑战。 2026年1月26日，国家药品监督管理局通过优先审评审批程序，附条件批准华辉安健（北京）生物科技有限公司的立贝韦塔单抗注射液（商品名：华优诺）上市，用于治疗伴有或不伴有代偿期肝硬化的慢性丁型肝炎病毒感染成年患者。这是中国首个获批用于治疗慢性丁型肝炎的药物，标志着这一长期缺乏有效治疗手段的疾病领域迎来重要突破。 2026年1月27日，德曲妥珠单抗（T-DXd）用于HER2表达子宫内膜癌辅助治疗的全球III期临床研究DESTINY-Endometrial02在中国完成首例患者给药。  该研究旨在比较德曲妥珠单抗联合或不联合放疗与标准化疗在HER2阳性患者术后的疗效与安全性，标志着这一已在晚期癌症中验证疗效的ADC疗法，正式向早期治疗领域拓展。 2026年1月27日，信达生物宣布其自主研发的抗GPRC5D/BCMA/CD3三特异性抗体IBI3003获得美国FDA快速通道资格认定，拟用于治疗既往接受过多线治疗的复发或难治性多发性骨髓瘤。 普方生物的注射用PRO1184获CDE拟纳入突破性治疗品种 诺和诺德的德谷胰岛素利拉鲁肽注射液获CDE拟纳入优先审评 卫材的仑卡奈单抗注射液（皮下注射）获CDE拟纳入优先审评 瑞阳（山东）生物的库莱韦单抗注射液获CDE拟纳入优先审评 2026年1月27日，葛兰素史克宣布其佐剂重组呼吸道合胞病毒疫苗Arexvy获欧盟委员会批准，适用范围扩展至18岁及以上的所有成年人。此前该疫苗已在欧盟获批用于60岁以上及50-59岁高风险人群。此次批准意味着欧洲所有成年人均可接种该疫苗，为预防RSV引起的下呼吸道疾病提供了更广泛的人群防护策略。 2026年1月27日，中国生物制药核心企业正大天晴宣布，其自主研发的口服乙肝核心蛋白变构调节剂TQA3605在Ⅱ期临床研究中达到主要终点。  结果显示，该药联合现有核苷（酸）类药物治疗低病毒血症慢性乙肝患者24周后，近90%患者实现HBV DNA低于检测下限，为长期面临“病毒低水平复制”困扰的患者提供了新的治疗选择。 国家药监局关于暂停进口、销售和使用Supriya Lifescience Ltd.马来酸氯苯那敏原料药的公告（2026年第14号） 2026年1月27日，尧唐生物自主研发的新型CRISPR基因编辑系统Cas12HF蛋白核心专利正式获得国家知识产权局授权。  该系统通过公司自建超高通量分子进化平台挖掘优化，兼具高编辑活性与极佳特异性，且分子尺寸更小、更适配体内递送，已应用于其临床阶段体内基因编辑药物，标志着我国在下一代基因编辑核心技术领域实现重要自主突破。 盛迪亚生物的注射用瑞康曲妥珠单抗获CDE拟纳入优先审评 2026年1月28日，强生宣布其基于DARZALEX FASPRO®（达雷妥尤单抗/透明质酸酶）的四联疗法D-VRd已获美国食品药品监督管理局（FDA）批准，用于治疗不适合自体干细胞移植（ASCT）的新诊断多发性骨髓瘤（NDMM）成人患者。这是DARZALEX FASPRO®在全球获批的第12个适应症，也是其在新诊断患者中的第5个适应症，标志着该药物在多发性骨髓瘤治疗中的基石地位进一步巩固。 2026年1月28日，勃林格殷格翰公布其口服TRPC6抑制剂apecotrep（BI 764198）用于治疗原发性局灶节段性肾小球硬化症（FSGS）的II期临床试验结果。  数据显示，20mg剂量组治疗12周后，患者蛋白尿（尿蛋白肌酐比）较安慰剂组显著降低40%。该结果已发表于《柳叶刀》，并为这款潜在“同类首创”的非免疫抑制靶向疗法进入III期临床奠定基础。 2026年1月26日，中国生物制药旗下北京泰德制药宣布，其国产首仿妥洛特罗贴剂（德瑞妥®）0.5mg/贴儿童规格正式获得国家药监局批准上市，适用人群拓展至最小6个月的婴幼儿。  这是继成人规格获批后，该产品在儿童精细化用药领域的重要进展，为支气管哮喘、喘息性支气管炎等儿童常见呼吸疾病提供了更便捷、依从性更高的透皮给药选择。 2026年1月28日，诺华公司宣布其全球首创小干扰RNA降胆固醇药物乐可为®（英克司兰钠注射液）获中国国家药监局批准，新增单药治疗成人原发性高胆固醇血症或混合型血脂异常适应症。这意味着该药在原有联合治疗方案基础上，进一步拓宽适用人群，为患者提供了一种“一年两针”的长效降脂选择，有望显著提升治疗依从性与血脂达标率。 2026年1月28日，微芯生物宣布其自主研发的多靶点小分子抗肿瘤药西奥罗尼在胰腺导管腺癌治疗中展现出突破性潜力。  II期临床数据显示，西奥罗尼联合AG化疗一线治疗患者客观缓解率达50%，中位无进展生存期达9.1个月。同时，临床前研究表明西奥罗尼与泛RAS抑制剂具有协同抗肿瘤效应，为攻克“癌王”胰腺癌提供了新的联合治疗思路。 2026年1月28日，恒瑞医药子公司山东盛迪医药收到国家药监局批准，同意其自主研发的1类创新口服小分子GLP-1受体激动剂HRS-7535片，开展用于高血压合并超重或肥胖适应症的Ⅲ期临床研究。 2026年1月27日，先为达生物研发的埃诺格鲁肽注射液单药治疗2型糖尿病的Ⅲ期临床研究（EECOH-1）成果在国际知名期刊《自然·通讯》正式发表。 国家药监局关于发布仿制药参比制剂目录（第一百零一批）的通告（2026年第3号） 国家药监局关于适用《M14:使用真实世界证据进行药品安全性评估的非干预性研究：规划、设计、分析和报告的一般原则》（2026年第16号） 国家药监局药审中心关于发布《用于术后镇痛的长效局部麻醉药临床试验技术指导原则（试行）》的通告（2026年第2号） 国家药监局药审中心关于发布《化学药品创新药晶型研究技术指导原则（试行）》的通告（2026年第10号） 国家药监局药审中心关于发布《预防用mRNA疫苗药学研究技术指导原则（试行）》的通告（2026年第12号） 2026年1月27日，Arrowhead Pharmaceuticals宣布，其创新双靶点RNA干扰（RNAi）疗法ARO-DIMER-PA的1/2a期临床试验（ARO-DIMER-PA-1001）已正式启动。该疗法是全球首个进入临床阶段的、可同时沉默PCSK9和APOC3两个关键基因的单分子RNAi药物，旨在为混合性高脂血症患者提供全新的治疗选择。 2026年1月28日，复宏汉霖宣布，其创新PD-L1抗体偶联药物（ADC）HLX43联合H药汉斯状（斯鲁利单抗）及重组抗EGFR单抗HLX07，用于晚期实体瘤治疗的临床试验申请，已获中国国家药品监督管理局（NMPA）批准。这一三药联用方案，是继HLX43分别与斯鲁利单抗、HLX07两药联合探索后的进一步升级，有望通过“免疫检查点阻断+ADC细胞毒性+EGFR靶向抑制”三重机制协同增效，为晚期实体瘤患者提供全新的治疗可能性。 新《药品管理法实施条例》2026版全文 宜联生物的注射用YL201获CDE拟纳入突破性治疗品种 康方生物的AK112注射液获CDE拟纳入突破性治疗品种 恒瑞医药的HRS-4642注射液获CDE拟纳入突破性治疗品种 盛迪医药的SHR-1918注射液获CDE拟纳入优先审评 2026年1月29日，AI制药先锋企业英矽智能宣布，提名其自主研发的口服小分子ISM0676为临床前候选化合物（PCC），这是一款靶向葡萄糖依赖性促胰岛素多肽受体（GIPR）的新型拮抗剂，旨在治疗肥胖、2型糖尿病及相关心血管疾病。从项目启动到PCC提名仅耗时14个月，合成测试分子数不足200个，充分展现了AI驱动的药物研发效率。值得注意的是，在临床前模型中，ISM0676与司美格鲁肽联用可实现31.3%的显著减重效果，同时更好地保留肌肉量，为下一代体重管理疗法带来突破性潜力。 2026年1月29日，盟科药业宣布，其自主研发的新型苯并噻唑类抗菌药MRX-5片的新药研究申请（IND）已获美国FDA批准，将在美国开展针对脓肿分枝杆菌复合群感染引起的非空洞性肺病成人患者的IIa期临床研究。这标志着盟科药业在抗耐药菌感染这一全球公共卫生挑战领域，实现了重要的海外研发突破。此前，MRX-5已在澳大利亚完成I期临床，并于2024年获得FDA孤儿药资格认定。 2026年1月29日，环码生物宣布，其自主研发的全球首创环形RNA药物HM2002注射液获得美国FDA授予的“快速通道”资格（Fast Track Designation）。这是该药物继在中美两国共获4项临床试验批件后，在国际化开发进程中的又一重要里程碑。HM2002聚焦于缺血性心脏病，特别是慢性冠脉综合征这一临床治疗空白领域，旨在通过促进治疗性血管新生，从根本上改善心肌微循环功能。 2026年1月29日，天泽云泰宣布，其自主研发的基因治疗产品VGN-R09b获得美国食品药品监督管理局（FDA）孤儿药资格认定（ODD），用于治疗芳香族L-氨基酸脱羧酶缺乏症（AADCD）。这是继2025年11月获FDA罕见儿科疾病资格认定（RPDD）后，VGN-R09b在短期内获得的第二项FDA资格认定，标志着其在全球罕见病治疗开发进程中迈出关键一步。

全力以赴，不负所托。2025年，微谱生物科技为合作伙伴带来满满收获，实力助攻诸多国内首款、全球首创、中外双报等项目不断通关，包含单抗，双抗，ADC，干细胞（MSC、IPSC ）以及Car-T等细胞治疗产品的IND/BLA申报和商业化放行。截至目前，微谱生物科技每年新增IND申报项目200个，BLA-PSQ验证管线50个，VC研究工艺项目50个... ... 以专业之力，成就客户价值。 感谢每一位合作伙伴的信任与支持！我们谨以此篇文章回顾2025年度微谱生物科技助力客户项目成功通过IND/BLA的部分精选案例，共同见证行业的颠覆创新与突破发展。 点击左侧图片，即可跳转至相应页面 2025.1.10 环码生物自主研发的环形RNA药物——HM2002注射液顺利获得NMPA临床试验许可。这是国内首个获得NMPA临床试验许可的环形RNA生物制品，标志着中国原创生物技术在前沿生物医药领域又迈向了更高的台阶。微谱生物科技为该产品提供了专业的菌种库全套检测服务。 2025.3.6 贝思奥生物自主研发的基因治疗I类创新药BN-1001眼用注射液新增适应症糖尿病性黄斑水肿（DME）获CDE临床试验默示许可。这是继去年8月28日该款药物用于新生血管性（湿性）年龄相关性黄斑变性治疗获CDE临床试验默示许可后的又一轮关键性申报进展。微谱生物科技为该产品提供了全套细胞库检定，UPB检测，物料质控等服务。 2025.3.11 九芝堂旗下子公司九芝堂美科宣布，其自主研发的人骨髓间充质干细胞注射液正式获得国家药品监督管理局药品审评中心（CDE）临床试验默示许可。这成为全国首例获批开展干细胞治疗孤独症谱系障碍（ASD）的项目。微谱生物科技为该项目提供了专业的细胞库检定和物料质控服务。 2025.3.12 天士力开发的国内首款间充质基质细胞药物——NR-20201获NMPA批准临床试验申请（IND）。去年10月该药物刚取得了美国FDA的临床试验批准。这成为全球首款实现中美IND双报双批的MSC药物，拟用于治疗急性缺血性脑卒中。微谱生物安全服务平台为该项目提供了中美双报的全套细胞库检定服务，零发补满足FDA和CDE的申报需求。 2025.3.15 成都金唯科自主研发的针对X连锁视网膜劈裂症的基因治疗I类创新药“JWK002注射液”临床试验（IND）申请获得国家药品监督管理局药品审评中心（CDE）受理，有望成为国内首个针对X连锁视网膜劈裂症的基因治疗药物注册临床试验。微谱生物科技为该项目IND申报提供了专业的细胞库检定服务！ 2025年3月 元本生物拟用于晚期实体瘤治疗的注射用YB-01获国家药品监督管理局药品审评中心（CDE）临床试验默示许可。这是该项目继2024年12月获得美国FDA临床批准后的又一关键里程碑。微谱生物科技为其提供了中美双报的全套菌种库检定研究，助力客户产品成功通过关键节点，加速中美申报进程！ 2025.4.10 信念医药自主研发的信玖凝®（BBM-H901注射液, 通用名称：波哌达可基注射液）正式获得国家药品监督管理局（NMPA）批准，可用于中重度血友病B（先天性凝血因子IX缺乏症）成年患者的治疗。这是中国首个获批的血友病B基因治疗药物1。微谱与信念医药建立了长期稳定友好的战略合作关系并为其提供了专业服务。 2025.4.28 芳拓生物自主研发的重组腺相关病毒（rAAV）基因治疗产品FT-017同时获得了中国国家药品监督管理局（NMPA）与美国食品药品监督管理局（FDA）的临床试验许可。该疗法拟用于治疗MYBPC3基因变异相关的肥厚型心肌病（HCM）。这是中国首个针对心血管系统疾病的AAV基因治疗的临床试验。微谱生物科技为该项目提供了中美双报的UPB放行检测服务，助力客户成功通过FDA和CDE的IND申报阶段 2025.5.29 恒瑞医药子公司苏州盛迪亚生物医药有限公司自主研发的1类创新药注射用瑞康曲妥珠单抗（商品名：艾维达）获批上市。这是国内首个获批用于HER2突变NSCLC患者的中国自主研发抗体偶联药物（ADC）。微谱生物科技为该产品提供了专业的细胞库检定服务。 2025.7.31 上海优替济生自主研发的LACO-Stim®自体MSLN CAR-T细胞疗法——UCLM805获得美国食品药品监督管理局（FDA）的新药临床试验申请（IND）批准，用于治疗MSLN阳性的成人晚期实体瘤患者。微谱生物科技生物安全服务平台为该项目提供了符合美国FDA监管要求的细胞库检定服务 2025.8.5 河北森朗生物自主研发的SENL103自体T细胞注射液获CDE临床试验默认许可，拟开展治疗难治性全身型重症肌无力（rgMG）。微谱生物科技为其提供了全套细胞库检定服务，助力中国创新药加速获准IND。 2025.8.6 恒瑞-苏州盛迪亚HER2 ADC创新药注射用瑞康曲妥珠单抗联合阿得贝利单抗和化疗用于胃癌或胃食管结合部腺癌适应症获得了美国食品药品监督管理局（FDA）授予的孤儿药资格认定（ODD）。就在2025年5月，该药物刚刚通过了中国国家药品监督管理局的附条件上市批准。微谱生物科技为该ADC和PD-1联合疗法提供了专业的中美双报检测服务. 2025.8.13 启函生物自主研发的通用型双靶点CAR-T细胞产品QT-019B新药临床试验申请获得美国食品药品监督管理局（FDA）正式批准。微谱生物科技生物安全服务平台为该项目提供了全套细胞库检定和RCL检测服务，以专业研究助力中国颠覆式创新成果在美国快速迈入临床阶段 2025.8.22 血霁生物自主研发的“巨核细胞注射液”新药临床试验申请（IND）获得美国药品监督管理局（FDA）正式批准。这标志着血霁生物使用造血干细胞分化获得的“巨核细胞注射液”成为全球首个正式获准临床试验的巨核细胞产品。微谱生物科技为该项目提供了符合FDA申报要求的制剂、物料检测及工艺相关杂质研究等服务。 2025.8.28 血霁生物自主研发的“脐带血巨核细胞注射液”新药临床试验申请（IND）获得中国食品药品监督管理局药品审核中心（CDE）正式批准，其适应症为肿瘤治疗引起的血小板减少症。微谱生物科技为该项目提供了符合CDE申报要求的生物安全和杂质研究等服务。 2025.9.2 瑞宏迪医药自主研发的细胞治疗产品——RGL-305注射液正式获得国家药品监督管理局（NMPA）临床试验默示许可，适应症为晚期恶性肿瘤。这将有望为亟需有效治疗手段的晚期恶性肿瘤患者带来高质量临床获益！微谱生物科技为该项目提供了专业的生物安全类检测系列服务。 2025.9.4 恩瑞恺诺研发的基于CD19靶点的 CAR-NK 细胞治疗药物——KN5501细胞注射液正式获得国家药品监督管理局药品审评中心（CDE）临床试验默示许可，适应症为中重度难治性系统性红斑狼疮。微谱生物科技为该项目提供了专业的生物安全类检测服务。 2025.9.12 椎元医学首发管线Ⅰ类新药——异体人成纤维细胞注射液成功获得国家药品监督管理局药品审评中心（CDE）临床试验默示许可，适应症为中重度腰椎间盘退行性病变。这是全球首个成纤维细胞治疗椎间盘退行性病变的药物申报进入GCP临床阶段，同时也是中国首个基于成纤维细胞的IND批件。微谱生物科技为该项目提供了专业的全套细胞库检定、全基因组测序、异常毒性及制剂检测等服务。 2025.11.12 杭州启函生物自主研发的通用型双靶点（CD19/BCMA）CAR-T细胞产品QT-019B的新药临床试验申请已获得国家药监局的默示许可，适应症为难治性系统性红斑狼疮（rSLE）。这是该产品继今年8月13日获得美国FDA批准IND以来的又一重大进展。微谱生物科技为该项目提供了符合NMPA和FDA申报要求的的全套细胞库检定和RCL检测服务，以专业研究助力该项目连续获得中美IND批准！ 2025.12.13 康宁杰瑞旗下产品重组人促卵泡激素注射液已成功取得国家药监局上市许可。这是首个国产水针型果纳芬生物类似药。微谱生物制品质量研究平台为该项目提供了符合NMPA申报要求的特性鉴定相关服务及药包材密封性研究服务等。 THE END 关于我们 微谱于2014年正式涉足生物制品服务领域，立足于生物医药全产业链，依托创新型自主知识产权体系构建出成熟的生物制品质量研究平台、生物安全服务平台、动物实验平台、NGS合规检测服务平台、GMP验证服务平台、药包材及生产系统研究服务平台以及药械知识产权服务平台，致力于为国内外生物药企业提供合规、专业、一体化的生物制品质量与安全研究综合解决方案。 更多推荐 点击图片 即刻阅读 01 △硬核升级！微谱生物科技重磅“资质矩阵”赋能生物药客户稳健前行 02 △ 重要通知！微谱生物科技2026年春节假期样品安排通知 03 △ 客户喜报！赛亿生物首款自研干细胞药物IND获批 更多详情 · 请联系 电话：021-3178-5055 邮箱：yiyao-marketing@weipugroup.com 长按二维码关注公众号，更多精彩等您解锁

“ 点击蓝字 关注我们 杨赟 杨赟：博士，上海环码生物医药有限公司联合创始人、董事长兼首席技术官。先后在浙江大学获得生物信息学学士学位、分子生物学和生物化学专业博士学位，在美国北卡罗莱纳大学教堂山分校和加州大学洛杉矶分校完成博士后研究工作。 拥有近20年RNA研究经历，研究高等真核生物的RNA加工和翻译调控，围绕中心法则揭示在RNA水平上扩增蛋白质多样性的分子机制并解析其生理功能，从而为相关疾病的机制研究和药物开发提供理论依据，并开展相关技术的应用转化。在RNA二级结构介导的RNA编辑和可变剪接领域，解析了RNA二级结构决定位点特异性A-to-IRNA编辑的机制，揭示了竞争性RNA互补配对结构介导mRNA互斥可变剪接的分子机制及其普适性。在环状RNA领域，首次揭示了体内环状RNA翻译的分子机制，并开发了环状RNA翻译优化体系和体外合成方法，为环状RNA药物的研发提供了理论基础和技术平台。 自2007年以来在Nat Struct Mol Biol,Nat Commun,Cell Res,Nucleic Acids Res,J Clin Invest等杂志发表研究论文近30篇，参与编撰专著2部。中科院青年创新促进会会员，曾任中科院上海营养与健康研究所副研究员。曾主持国家基金委面上项目、重大研究计划培育项目和上海市科委的项目多项，并获得上海市科技启明星、张江生命健康产业年度新锐奖等多项荣誉。 环状RNA技术及其在生物医药领域的研发进展 PPS  胡江，杨赟*  （上海环码生物医药有限公司，上海 200131） [摘要]环状核糖核酸（circRNA）是一种单链闭环RNA分子，因其高稳定性、低免疫原性及广阔应用前景而备受关注。简介天然circRNA的生物学功能，探讨circRNA在药物研发中的多样化应用，特别是在开发核酸适配体、海绵circRNA、向导circRNA、circRNA疫苗和circRNA嵌合抗原受体T细胞免疫疗法（chimeric antigen receptor T-cell immunotherapy，CAR-T）等方面的最新研究动态。同时，详细介绍circRNA的体外合成技术（包括化学合成和酶促合成），并深入分析circRNA药物开发过程中所面临挑战。展望circRNA技术的未来发展前景，强调其在疫苗开发和治疗性药物领域的巨大潜力。 环状核糖核酸（circular RNA，circRNA）是一类具有单链闭环结构的RNA分子，无游离5'末端和3'末端，因此不易被核酸外切酶降解，比线性RNA更稳定，从而在细胞内得以长时间存在。近年来，circRNA凭借其独特的结构特征和生物学特性，已逐渐成为生物医学研究和药物研发领域的热点方向之一。 早在1976年，科学家首次在植物类病毒中鉴定出circRNA的存在[1]。随后，研究人员通过电子显微镜在HeLa细胞中观察到具有圆环形态的转录本，首次报道了真核细胞中的circRNA[2]。然而，受限于当时的技术手段，仅有少量circRNA被发现，其功能及形成机制也未得到充分阐释。 随着高通量测序技术的广泛应用，研究人员在多种生物体中陆续发现了大量circRNA的存在。2013年，Nature同期发表的2篇关于circRNA的研究文章，首次揭示了其可作为一种非编码RNA，具有调控微小RNA（microRNA，miRNA）的功能[3-4]。自此，circRNA迅速成为生物医学领域的前沿研究热点。 研究显示，circRNA广泛存在于真核生物中，从人和小鼠等哺乳动物到果蝇、线虫等较低等动物以及水稻、拟南芥等植物，甚至在酵母等单细胞生物中均发现大量circRNA存在[3,5-11]。在人体内，circRNA种类繁多，数量达数十万种，凸显了其在分子和细胞生物学层面上的多样性与复杂性。 近年来，随着对circRNA翻译机制研究的深入[12]及体外合成技术的发展[13-14]，其作为一种新型信使RNA（messager RNA，mRNA）药物开发平台受到广泛关注。本文将从circRNA的生物学功能切入，系统阐述circRNA技术的研究进展、应用及挑战。 1 circRNA 的生物学功能 circRNA因缺乏5'末端和3'末端，无法通过经典的帽依赖性翻译机制产生蛋白质，因而长期被认为是一种非编码RNA，其主要生物学功能包括：1）作为miRNA的分子海绵；2）作为RNA结合蛋白的分子海绵；3）形成具有功能活性的RNA-蛋白复合物。然而，越来越多的研究表明，circRNA可以通过非帽依赖性翻译方式产生蛋白质，这进一步拓展了其在细胞生物学中的功能多样性（见图1）。 1.1 miRNA海绵 circRNA通过互补配对吸附miRNA并中和其活性，从而影响mRNA翻译和降解。例如ciRS-7上有超过70个miR-7的结合位点，能够高效且特异地结合miR-7，并通过此方式调控miR-7下游靶基因的表达。这种机制在细胞内形成了一种复杂的调控网络，广泛影响多种生物学过程，如细胞增殖、分化和凋亡等。此外，ciRS-7还可以通过吸附miR-7来调控神经元的发育和功能，显示出其在神经系统中的重要作用[15]。 1.2 RNA结合蛋白海绵 与miRNA海绵类似，circRNA通过吸附特定蛋白调控其功能，进而影响mRNA剪接、稳定性、翻译及分子信号传导。例如，肌盲（muscleblind，MBL）蛋白可以与circMbl结合，形成一种反馈调控机制，影响MBL基因的表达和功能[15]。 1.3 功能性RNA-蛋白复合物 circRNA不仅可通过作为蛋白质海绵来调节信号通路，还能通过直接与特定蛋白质结合，改变其功能或定位，从而形成具有特定生物学功能的circRNA-蛋白复合物。以细胞核内的调控机制为例，circRNA可通过与U1核微小核糖核蛋白颗粒（small nuclear ribonucleoprotein particle，U1 snRNP）、RNA聚合酶Ⅱ以及基因启动子区域的相互作用来调控基因的转录。此外，circEIF3J和circPAIP2已被证实可促进其亲本基因的转录，进一步凸显了circRNA在基因表达调控中的重要作用[16]。 1.4 编码蛋白 除了作为非编码RNA发挥调控功能外，circRNA还展现出编码蛋白质的潜力。研究表明，circRNA能够采用非帽依赖的机制进行翻译，通过内部核糖体进入位点（internal ribosome entry site，IRES）序列或N6-甲基腺苷（N6-methyladenosine，m6A）RNA修饰等元件招募核糖体启动circRNA翻译。例如，circZNF609、circE7以及其他circRNAs上的m6A修饰能够促进其自身的翻译过程[17-18]。这种翻译机制在细胞内形成了一种新的蛋白质生成途径，为细胞提供了额外的蛋白质多样性。circRNA的生物学功能研究不仅有助于加深对生物体内RNA调控和功能的理解，也为利用circRNA技术开发新型治疗药物提供了理论基础。 2 circRNA 技术的应用 随着对circRNA功能和作用机制研究的不断深入，该领域已逐步从基础科学研究拓展至产业应用，尤其在药物研发方面展现出巨大潜力（见图2）。在药物研发过程中，circRNA主要分为非编码RNA和编码RNA两个研究方向。 在非编码RNA的应用领域，circRNA不仅可作为核酸适配体（aptamers）调节细胞内信号传导，还能充当miRNA或蛋白质的分子海绵，调控相应分子的功能，并作为向导RNA（guide RNA）在基因编辑中发挥重要作用。 在编码RNA的应用领域，circRNA能够编码具有不同功能的蛋白，因而在疫苗开发、在体嵌合抗原受体T细胞免疫疗法（chimeric antigen receptor T-cell immunotherapy，CAR-T）、再生医学以及蛋白替代疗法等领域具有巨大潜力和广阔应用前景。 2.1 circRNA适配体 适配体是在细胞内表达的由短链DNA或RNA分子组成的结构，具有结合特定靶标分子并调节细胞内信号传导过程的能力[19]。然而，RNA适配体应用面临的主要挑战是难以将其持续稳定地表达至足够高的浓度以发挥有效作用[20]。circRNA的高稳定性为基于RNA适配体的应用提供了切实可行的解决方案。例如，通过Tornado系统表达的circRNA荧光传感器在活细胞中结合小分子时，其荧光强度比线性RNA高近200倍[21]。通过将核因子κB（nuclear factor-kappa B，NF-κB）适配体构建成circRNA，在抑制NF-κB信号通路方面，其比具有相同结构的线性RNA更有效[22]。此外，研究人员将S-腺苷甲硫氨酸（S-adenosylmethionine，SAM）和西兰花荧光（Broccoli）适配体嵌入circRNA结构，构建了一种高灵敏度的代谢物生物传感器，能够持续动态检测细胞内SAM水平变化[21]，展示了circRNA适配体在调节细胞内信号传导方面的应用潜力。 2.2 海绵circRNA circRNA可作为细胞内miRNA的海绵，通过吸附特定的miRNA，抑制其对靶mRNA的调控作用，该机制被称为竞争性内源RNA（competing endogenous RNA，ceRNA）调控模式。通过体外合成或体内表达含有与miRNA部分互补结合位点的稳定circRNA，可有效降低疾病相关miRNA的活性，显示出一定的治疗潜力。例如，针对丙型肝炎病毒的miRNA-122设计的circRNA海绵，比现有的锁核酸（locked nucleic acid，LNA）反义寡核苷酸更有效地抑制病毒蛋白产生[23]。在设计circRNA海绵时，需要注意的是，完全互补的miRNA结合位点可能会引发真核翻译起始因子2C2（eukaryotic translationinitiation factor 2C subunit 2，EIF2C2；又称argonaute2，Ago2）介导的海绵降解，因此设计时应避免使用完全互补的结合位点[24]。circRNA还可通过工程化设计特定RNA结合位点，实现对特定蛋白质的吸附并调节其活性。例如，异质核核糖核蛋白L（heterogeneous nuclear ribonucleoprotein L，hnRNPL）通过与mRNA前体中的CA重复序列结合来调节剪接过程，而携带这些CA重复序列的circRNA能够显著降低hnRNPL在细胞核内的分布，影响其剪接功能[25]。长链非编码RNA如DNA损伤激活的非编码RNA（non-coding RNA activated by DNAdamage，NORAD）通过其序列中含有的多个Pumilio家族（Pumiliofamily member，PUM）反应元件（Pumilio response elements，PREs）来阻止PUM蛋白与细胞周期调控因子的mRNA结合，而工程化circRNA能够模拟NORAD的功能，通过吸附PUM蛋白来维持基因组稳定性[26]。 circRNA海绵不仅能针对病理性积累的miRNA进行中和，还能调节细胞内RNA结合蛋白的活性，为相关疾病的治疗提供新方向，也显示了其作为治疗工具的潜力。 2.3 向导circRNA 在基因编辑领域，向导RNA（guide RNA）作为序列定位元件，在编辑效率和精准性方面起至关重要的作用。将向导RNA改造为circRNA可显著提高其编辑效率和精准性。2022年，Biotechnology同期发表的2项研究表明，通过向导circRNA招募RNA特异性腺苷脱氨酶1（adenosine deaminase acting on RNA1，ADAR1），可在体外和体内实现高效且可编程的腺苷到肌酐（adenosine to inosine，A-I）RNA编辑。由于向导circRNA的特殊结构，其可避免核酸外切酶的切割，显著提升体外和体内编辑的效率和精准性，并基本消除了双链RNA区域内目标转录本上的脱靶编辑问题[27-28]。 此外，向导circRNA亦可应用于成簇规律间隔短回文重复序列及其相关蛋白9（clustered regularly interspaced short palindromic repeats-associated protein9，CRISPR-Cas9）基因编辑系统。研究表明，在人源胚胎肾细胞（HEK）293细胞模型中使用向导circRNA相较于线性向导RNA能够减少脱靶效应，但伴随编辑效率有所下降[29]。值得关注的是，通过在向导circRNA中引入连接子（linker）序列，其在大肠埃希菌中的编辑效率相较于天然的线性向导RNA提高了2倍[30]。因此，通过优化向导circRNA的结构设计，不仅可提高编辑效率，还能降低脱靶风险，为基因编辑提供更为精准的“导航系统”，在遗传性疾病治疗领域具有广阔的应用前景。 2.4 circRNA疫苗 circRNA具备编码抗原蛋白的能力，因此可用于开发相应疫苗。2022年，Cell期刊首次报道circRNA新型冠状病毒疫苗的研究成果。研究人员采用IRES序列和编码刺突蛋白的受体结合结构域（receptor binding domain，RBD）序列制备circRNA，并通过脂质纳米颗粒（lipid nanoparticle，LNP）包被circRNA，成功开发针对新型冠状病毒感染（COVID-19）毒株的circRNA疫苗。在小鼠模型中，该疫苗以10和50μg的剂量免疫后，相较于mRNA疫苗，可诱导更高比例的中和抗体与显著的辅助性T细胞1（T helper cell1，Th1）偏斜免疫反应。在猴子模型中开展的进一步攻毒实验显示，免疫组的肺部病毒载量、肺损伤程度和肺部浸润性炎症细胞数量均显著降低。此外，针对COVID-19德尔塔（Delta）变体和奥密克戎BA1（Omicron BA1）变体的circRNA疫苗实验进一步证实了疫苗的广谱活性与高稳定性[31-32]。 另一个研究团队基于Ⅱ类自剪接内含子技术制备了一种COVID-19 circRNA疫苗。在小鼠免疫实验中，该疫苗能引发强烈的RBD特异性记忆B细胞反应和辅助性T细胞1/2（T helper cell type1/type2，Th1/Th2）细胞免疫反应。与线性mRNA疫苗免疫的小鼠相比，使用circRNA疫苗免疫的小鼠血清免疫球蛋白G（immunoglobulin G，IgG）滴度高了10倍。此外，该circRNA疫苗对严重急性呼吸综合征冠状病毒2（severe acute respiratory syndrome coronavirus 2，SARS-CoV-2）假病毒展现出良好的中和活性，并能有效阻断野生型、Delta、Omicron3种RBD突变体与293T细胞上的人类血管紧张素转化酶2（human angiotensin-converting enzyme2，hACE2）受体的结合[33]。 circRNA在猴痘病毒疫苗开发中亦取得重要突破。中国科学院武汉病毒研究所联合上海环码生物医药有限公司（以下简称“环码生物”）及中国科学技术大学研究团队成功制备了针对猴痘病毒的混合circRNA疫苗，研究选取了A29L、A35R、B6R、M1R4种猴痘病毒抗原，通过体外合成相应的circRNA，并采用经典的商业化LNP包封工艺制成疫苗。实验结果显示，同时含4种抗原的混合circRNA疫苗可在小鼠体内诱导针对4种抗原的血清结合抗体，且中和抗体滴度较高，尤以M1R抗原对应的免疫应答最为显著。攻毒实验显示，经circRNA疫苗免疫的小鼠展现出良好的免疫保护效果，病毒载量显著降低，尤其是混合疫苗组（同时含有4种抗原）。综上所述，该疫苗在小鼠体内触发了强烈的体液免疫和细胞免疫反应，可有效保护小鼠免受猴痘病毒攻击[34]。 2.5 在体circRNA CAR-T CAR-T细胞疗法作为新型的癌症治疗手段，通过改造患者自身的T细胞来识别并攻击肿瘤细胞，被视作癌症治疗领域的革命性突破。然而，该疗法仍面临生产成本高昂、临床合规性限制和潜在二次致癌风险等挑战。为提高CAR-T细胞疗法的可及性和安全性，研究人员正探索创新技术与方法。其中，利用mRNA技术在体内生成CAR-T细胞的策略，有望降低治疗成本并提高患者的临床接受度。值得关注的是，circRNA凭借其独特的生物学特性，在该领域亦显示出巨大的应用潜力。 北京大学与环码生物研究团队联合开发了一种新型拟心磷脂磷酰胺（cardiolipin-mimetic phosphoramide，CAMP）LNP，其在T细胞的靶向性方面展现出显著优势，该LNP的形态、高刚性和核心化学结构（哌嗪中心基团）可能是其对T细胞具有偏好趋向性的关键。该研究团队利用这种特制LNP，成功递送了编码针对衰老和炎症相关抗原——尿激酶型纤溶酶原激活剂受体（urokinase-type plasminogen activator receptor，uPAR）的CARcircRNA，有效减轻了与uPAR相关的肝纤维化和类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis，RA）症状，展现了circRNA在在体CAR-T领域的应用前景[35]。 此外，复旦大学章旭耀研究员联合美国宾夕法尼亚大学华先欣教授基于置换内含子-外显子（permuted intron-exon，PIE）技术制备抗CD19（anti-CD19）CAR circRNA，并通过电转技术将circRNA转导至T细胞，从而制备出anti-CD19 CAR-T细胞。研究结果表明，将上述经改造的CAR-T细胞注射至相关肿瘤模型小鼠体内，能够有效抑制肿瘤的生长[36]。 2.6 circRNA药物的临床研究 2024年9月，环码生物在circRNA药物研发领域取得了突破性进展。该公司与上海交通大学附属瑞金医院心脏外科赵强教授合作，成功开展了全球首个circRNA药物HM2002注射液的首次人体研究。该项具有里程碑意义的研究者发起的探索性研究（investigator-initiated trial，IIT），旨在评估HM2002注射液在冠状动脉旁路移植术（coronary artery bypass grafting，CABG）手术中的可行性与安全性，并重点监测其治疗反应。2025年1月，HM2002注射液成为首个获得国家药品监督管理局（National Medical Products Administration，NMPA）新药临床试验申请（investigational new drug，IND）批准用于治疗缺血性心脏病的药物。这一进展标志着circRNA类药物正式迈入人体临床试验的新阶段，为该领域后续的研发奠定了坚实的基础。 2024年10月，RiboX Therapeutics公司宣布其研发的circRNA药物RXRG001获美国食品药品监督管理局（Foodand Drug Administration，FDA）IND批准。RXRG001通过将功能性circRNA递送到患者体内，旨在替代或补充缺失或功能异常的基因。该药物展现出潜在的稳定性和持久性及较低免疫原性，使其成为具有吸引力的治疗选择。 3 circRNA 的体外合成 circRNA在治疗领域的应用与发展，得益于体外合成技术的持续创新和方法的不断优化。目前，circRNA的体外合成主要分为化学合成和酶促合成两大类。其中，酶促合成又可进一步细分为蛋白连接酶合成、自剪接核酶合成和发夹状核酶合成等方法。 3.1 化学合成法 circRNA的化学合成技术主要基于磷酰胺化学和固相合成方法，以核苷三磷酸酯衍生物作为合成的起始原料。该方法能够实现3'，5'-磷酸二酯键的连接，并有效去除保护性基团，从而避免副反应的产生。然而，目前化学合成技术仅能合成长度为70~80个核苷酸的circRNA，这限制了其在长片段circRNA合成中的应用潜力[14]。 3.2 酶促连接法 酶促连接法合成circRNA通常涉及体外转录（in vitro transcription，IVT）反应制备前体线性RNA。该步骤需要DNA模板、适宜的反应缓冲液及噬菌体RNA聚合酶的共同作用。由于成本相对较低且能够合成较长的RNA分子，酶促连接法已成为目前主流的体外RNA合成技术。在完成体外转录后，通过使用T4 RNA连接酶（T4 RNA ligase，T4 Rnl）或核酶催化的反应，可将线性RNA前体转化为circRNA。 3.2.1 T4连接酶法T4连接酶家族包括T4 DNA连接酶（T4 DNAligase，T4 Dnl）、T4 Rnl 1和T4 Rnl 2，能够促使线性RNA前体的3'-OH受体区域与5'单磷酸供体区域连接，其在催化RNA连接反应中发挥关键作用。因此，在IVT反应中或反应结束后，需使前体RNA的5'末端形成单磷酸结构。T4 Dnl主要用于双链DNA或DNA/RNA杂交链的连接，而T4 Rnl 1和T4 Rnl 2则更适用于单链RNA或双链RNA的连接[14]。 为提高酶法连接的效率，通常会设计夹板序列与前体RNA的5'末端和3'末端形成配对，或将前体RNA的5'末端和3'末端设计成配对结构，以拉近2个末端的距离，从而提高T4连接酶的连接效率。 3.2.2 核酶法核酶法制备circRNA主要依赖于Ⅰ型和Ⅱ型内含子的自剪接反应，或发夹核酶（hairpin ribozyme，HPR）切割前体RNA形成中间体的5'-OH和2'，3'-环状磷酸盐的自发连接反应。核酶法仅需核酸分子自身参与，无需额外的蛋白催化，因而比较适合于工艺放大。 Ⅰ型内含子自剪接系统（见图3）是目前体外合成circRNA的常用技术。基于Ⅰ型内含子自剪接特性改造的体外合成系统被称为PIE法，仅需鸟苷三磷酸（guanosine triphosphate，GTP）和镁离子（Mg2+）即可实现RNA的环化。在PIE法中，通常采用源自鱼腥草（Anabaena）tRNA Leu基因或T4噬菌体的胸苷酸合成酶（thymidylate synthase，TS）基因的Ⅰ型内含子序列，这2种Ⅰ型内含子均被证实能够高效促进RNA环化。与化学合成法和T4连接酶法相比，PIE法更适合于较大片段线性RNA前体的环化，且其反应条件和纯化过程相对简单。因此，PIE法已成为目前研究最广泛和使用最多的RNA环化技术。PIE法的局限性：前体RNA的长度和复杂二级结构导致不同RNA序列的成环效率存在显著差异；外源外显子序列的引入可能改变circRNA的二级结构，这对circRNA的活性和免疫原性会产生不利影响[14,37-38]。 当前采用Ⅰ型内含子自剪接系统的公司有Orna公司的鱼腥草来源的Ⅰ型内含子自剪接系统，科瑞迈德公司的T4td基因来源的I型内含子自剪接系统Clean-PIE。 Ⅱ型自剪接内含子设计改造后通过反向剪接（见图3），把外显子末端的5'剪接位点与该外显子上游的3'剪接位点相连接，从而形成circRNA。与Ⅰ型内含子不同，Ⅱ型内含子催化的反向剪接不需要额外的GTP辅助，就能够实现线性RNA的环化[14]。环码生物研发团队通过对破伤风杆菌表层蛋白（Clostridium tetani surface layer protein）来源的Ⅱ型自剪接内含子的不同结构域进行精确分割，构建了一系列包含特定外显子和2个分割内含子的环化系统[33]。Ⅱ型内含子的自剪接过程仅需适量Mg2+即可进行，因其在IVT条件下即可完成线性RNA的环化，故非常适合工艺放大[39-41]。然而，关于Ⅱ型自剪接内含子的研究相对较少，目前仅有少数研究团队采用该技术进行circRNA制备。 HPR能够利用单链环状DNA作为模板，通过滚圈（rolling circle）反应和自剪切机制合成circRNA。在这一过程中，携带HPR的线性RNA前体折叠成2种具有切割活性的构象，对前体RNA进行切割，生成RNA中间体的5'-OH基团和2'，3'-环状磷酸盐，然后通过自发连接反应形成circRNA。该方法适用于高效制备较短的circRNA分子。然而，该方法也存在一定局限性：HPR催化的裂解和连接反应处于动态平衡状态，可能导致生成的circRNA稳定性不足；由于生成的circRNA中含有HPR的部分序列，可能对circRNA的功能产生不利影响[39]。 综合来看，基于自剪接核酶技术的circRNA合成方法，无论是采用Ⅰ型还是Ⅱ型内含子自剪接系统，均凭借其反应条件简便、合成长度无限制及产物稳定性高等显著优势，在科研领域和工业生产中得到广泛应用（见表1）。 4 circRNA 成药性挑战 在circRNA药物开发进程中，制备工艺、体内递送和质量标准这3个关键领域所面临的技术难题和科研障碍尤为突出。这些挑战不仅直接影响药物的有效性和安全性，而且对于其商业化进程和临床应用的实现构成重要障碍。 4.1 circRNA药物的制备工艺 circRNA药物的生产涉及一系列精细且复杂的步骤，共同确保药物的质量和有效性。circRNA药物的制备过程始于利用质粒模板通过体外转录合成线性RNA分子。该过程包括质粒的获取、处理和纯化，具体涉及发酵、细菌收获、裂解、澄清、超滤和色谱纯化等步骤，以确保质粒的高纯度和超螺旋结构[31]。随后，通过体外转录合成线性RNA分子，并利用脱氧核糖核酸酶Ⅰ（deoxyribonucleaseⅠ，DNaseⅠ）去除DNA模板，再进行超滤纯化。关键的RNA环化步骤主要通过内含子剪接法或T4 RNA连接酶法实现，其中内含子剪接法因无需额外酶而更受青睐。最终，circRNA被封装在如LNP之类的递送系统中，经过填充和封盖后，形成最终的产品。 在circRNA药物的生产过程中，对杂质的严格控制对于确保药物的安全性和有效性至关重要。杂质主要包括未环化的线性RNA前体分子、内含子序列、酶及其他副产品。这些杂质可能引发不必要的免疫反应，影响药物的免疫原性和药效，甚至触发强烈的先天免疫反应，导致不良后果。因此，优化制备工艺以降低这些杂质的水平，对于减少免疫原性风险及提高药物的活性、安全性和可靠性至关重要。 为了实现上述目标，需对生产过程中产生的各类杂质实施精确检测和控制。线性RNA前体分子的检测通常借助高效液相色谱（high-performance liquid chromatography，HPLC）或核糖核酸酶R（ribonucleaseR，RNase R）消化法[30]，但因其与circRNA分子的相对分子质量相近，致使分离和检测变得复杂。此外，当使用T4RNA连接酶法时，还需通过酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）来检测和去除残留的T4RNA连接酶。同时，双链RNA（double-stranded RNA，dsRNA）的含量也需通过特定的抗原-抗体结合方法进行测定，以评估其可能引起的免疫刺激[42]。这些检测步骤对于识别和降低生产过程中的潜在风险至关重要，确保最终药物的质量符合监管要求，避免患者受不良反应的影响。 然而，由于circRNA技术是近年来发展起来的新兴技术，当前的工艺生产和检测分析主要沿用已有的仪器设备和试剂耗材，但部分设备和耗材并不适合circRNA的检测。例如，dsRNA是IVT过程中易产生的杂质，也是circRNA产品的重要质控指标。然而，目前尚未开发出适用于大规模生产的dsRNA高效去除工艺，仅能通过控制IVT反应条件以减少dsRNA生成。同时，现有分析手段主要是基于抗体的ELISA检测，该方法具有一定的序列和长度偏好性。因此，需要产业界上下游从仪器设备和试剂耗材等不同维度出发，共同推动整个产业技术水平的提升，开发出安全有效且患者可负担的circRNA药物。 4.2 circRNA药物的递送 circRNA作为新兴治疗手段，虽具有高稳定性和低免疫原性等优点，但在递送方面仍面临多重挑战。目前，LNPs是应用最广泛且高效的circRNA递送工具，具有成本低、规模化生产等优势。然而，当需要将circRNA递送至肝脏以外的组织时，LNPs的递送效果会受到极大限制，因其天然具有肝脏积累的倾向[43]。 其他递送系统也可用于circRNA的递送，但各有优缺点。例如，外泌体具有良好的生物相容性和低免疫原性，但细胞来源的外泌体具有高度异质性，其内容物和功能取决于亲本细胞，这使得分离纯化后缺乏标准化表征方法与可行质量控制体系。病毒样颗粒虽然转染效率高、靶向性好，但生产成本高、免疫原性强，且存在病毒基因组整合至宿主细胞基因组的潜在风险。此外，基于不同递送方式的circRNA药代动力学特征和生物分布尚不明确，增加了确定最佳剂量和给药方案的难度。因此，通过进一步的研究和技术开发以克服上述挑战，进而充分发挥circRNA在疾病治疗中的应用潜力[44]。 4.3circRNA药物的质量标准 circRNA技术正迅速成为研发焦点之一，吸引众多企业布局，为该领域注入创新活力，加速推动前沿成果转化。然而，不同机构采用多样化的技术平台和生产工艺，导致circRNA产品质量参差不齐。这种不一致性给产品的生物活性和安全性评估带来挑战，也对行业的标准化和质量控制提出更高要求。因此，构建一套科学统一的质量标准规范对促进整个行业规范化发展至关重要。 circRNA药物质量标准的建立是一个复杂过程，涉及多个关键方面：确保高效的环化效率、严格控制关键残留杂质、制定明确的质量属性与标准、精确的粒径质量控制以及应对独特的测试项目和检测方法的挑战。这些标准的制定需要参考国际和国家监管机构技术指南，如世界卫生组织（WorldHealthOrganization，WHO）、美国药典（UnitedStatesPharmacopeia，USP），及NMPA药品评审中心（CenterforDrugEvaluation，CDE）发布的技术指南，以此保障circRNA药物的安全性、有效性和生产工艺的一致性[44]。 此外，色谱技术（尤其是尺寸排阻色谱和反相色谱）在circRNA的纯化和质量检测中发挥关键作用，有助于分离并分析circRNA中nicked RNA和前体线性RNA等杂质，从而确保最终产品的质量[44]。 5 结语与展望 circRNA技术在制药行业的前景备受期待，尽管目前仍面临诸多挑战。这类独特的circRNA分子因其在细胞内的稳定性和持久的生物活性，在疫苗开发和治疗药物领域展现出巨大潜力。 在技术和应用创新方面，circRNA疫苗相较于mRNA疫苗，展现出更优的稳定性和更低的免疫原性，尤其在COVID-19疫苗的研发中显示出巨大发展潜力，有望成为未来应对新型重大传染病的强有力工具。在治疗性应用领域，circRNA在蛋白替代、再生医学、癌症免疫疗法和自身免疫性疾病治疗等方面具有广泛的应用前景。 尽管circRNA技术的工业化生产流程已初步构建，但仍需克服一系列挑战，包括高效生产工艺的开发和递送系统的优化。未来研究将聚焦于提高前体RNA的环化效率和表达水平、改进circRNA的靶向递送技术，并探索circRNA的新用途，以进一步挖掘其治疗潜力。 随着环码生物和RiboX Therapeutics公司的circRNA新药临床许可获批，预示着circRNA药物正式进入临床阶段。技术进步将促使全球监管机构更新指南并建立国际或国家参考标准，这对于确保circRNA药物的质量控制标准化和推动整个行业的发展具有重要意义。 参考文献 [1] Sanger H L, Klotz G, Riesner D, et al. 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