Tosoh Corp.

2.1 引言血友病最早在近 2000 年前的《巴比伦塔木德》中被描述为一种致命的出血性疾病，通过母系遗传。然而，直到 19 世纪早期才开始对其进行科学分析，1937 年 “抗血友病球蛋白”（凝血因子 VIII）首次被描述 。血友病 A 治疗的主要里程碑和突破总结在图 2.1 中。本章的目的是简要回顾人血浆凝血因子 VIII（FVIII）作为血友病治疗药物的历史，总结当前生产和纯化的最佳实践方法，并描述 FVIII 生产工艺开发的当前挑战和未来方向。【图 2.1：展示血友病 A 治疗中凝血因子 VIII 发展主要里程碑的时间轴。从大约 100 年首次书面提及出血性疾病（《巴比伦塔木德》）开始，历经 1840 年首次成功为血友病男孩输血、1936 年首次使用血浆治疗血友病等重要事件，到 1998 年开始人类基因治疗试验等。】2.2 凝血因子 VIII 的基因结构与功能2.2.1 基因结构与调控血友病 A 是由基因突变引起的，这些突变会降低或消除凝血因子 VIII 的活性，凝血因子 VIII 是一种参与内源性凝血途径的重要糖蛋白。凝血因子 VIII 基因位于 X 染色体上，跨度超过 180kb，由 26 个外显子组成，外显子大小从 69bp 到 3106bp 不等，内含子最大可达 32.4kb。它编码一条由 2351 个氨基酸组成的多肽链，其中包括一个 19 个氨基酸的 N 端信号肽和最终的 2332 个氨基酸的蛋白质序列。目前已发现超过 1200 种凝血因子 VIII 突变，最常见的是外显子 1 - 22 与外显子 23 - 26 的大片段倒位和易位 。这种重排会完全阻断凝血因子 VIII 蛋白质的合成，约占严重血友病 A 病例的 40%。此外，还发现了数百种点突变、缺失和插入。2.2.2 蛋白质结构与功能成熟的 300kDa 凝血因子 VIII 蛋白包含六个结构域：A1A2 - B - A3 - C1- C2 。前体蛋白经过蛋白酶切割，形成由重链和轻链组成的无活性异二聚体。可变加工的重链，分子量可达 210kDa，源自前体蛋白的氨基末端，包含 A1 - A2 - B 结构域。80kDa 的轻链源自前体蛋白的羧基末端，包含 A3 - C1 - C2 结构域。由于在前体蛋白的 B - A3 连接处以及 B 结构域内的额外切割，会形成几种不同的多肽。凝血因子 VIII 经历广泛的翻译后修饰，包括特定的蛋白酶切割、特定酪氨酸残基的硫酸化以及在特定的 N - 连接和 O - 连接位点添加寡糖 。重链和轻链分别含有四个和三个链内二硫键，并通过涉及 A1 和 A3 的铜离子复合物相互连接。B 结构域在凝血活性中没有已知功能。凝血因子 VIII 与血管性血友病因子（VWF）以紧密结合的非共价复合物形式循环。凝血因子 VIII / 血管性血友病因子复合物长 65nm，分子量达 2000kDa，是已知最大的蛋白质复合物之一。血管性血友病因子在轻链的氨基末端和羧基末端区域均与轻链结合。血管性血友病因子的存在增加了凝血因子 VIII 的循环半衰期，保护其不被降解，并掩盖了对辅因子功能重要的功能性结合位点。在凝血级联反应中，凝血因子 VIII 通过凝血酶的有限逐步蛋白酶切割而被激活，切割发生在重链和轻链上，切除 B 结构域，形成 50kDa、43kDa 和 73kDa 的多肽，并释放血管性血友病因子（图 2.2）。激活的凝血因子 VIII 作为 FIXa 介导的 FX 激活的辅因子，将凝血酶原转化为凝血酶；凝血酶将纤维蛋白原转化为纤维蛋白，从而启动血凝块的形成。完整的异二聚体结构对于凝血因子 VIII 的功能至关重要，螯合剂导致重链和轻链的解离会破坏凝血活性。【图 2.2：凝血因子 VIII 蛋白质结构，显示 FVIII 相关分子形式（a）和激活产生的片段（b）。】2.3 生产方法的演进以满足对纯化因子 VIII 不断变化的治疗需求严重血友病 A 患者会反复出现关节和软组织出血，需要进行治疗以避免永久性关节损伤、畸形和关节炎。治疗的主要手段是补充 FVIII。最初，血友病的治疗方法是输注无细胞人血浆，这种方法虽然有效，但存在感染血源性细菌和病毒疾病的严重风险。20 世纪 50 年代，人类血浆的科恩（Cohn）分级分离工艺的应用，促成了一种相当粗糙的富含 FVIII 的血浆组分的开发，其中含有抗血友病球蛋白。第一个生产突破是发现缓慢冷冻和解冻血浆的过程会产生一种浓缩的副产品，称为 “冷沉淀”，它富含 FVIII。冷沉淀彻底改变了血友病的治疗方式，它避免了全血输血的需求，减少了总输注体积，并且能够汇集多个血单位以标准化 FVIII 剂量。多年来，制造工艺的改进稳步提高了血友病治疗的质量和安全性。两种主要的纯化技术是沉淀法和色谱法，如表 2.1 所示。选择性沉淀剂包括聚乙二醇、肝素、甘氨酸和氢氧化铝，有时随后会进行酸性沉淀步骤。添加了纯化步骤以去除诸如纤维蛋白原和纤连蛋白等污染血浆蛋白。到 20 世纪 80 年代中期，使用凝胶过滤、离子交换和亲和色谱等纯化技术，使比活性提高到高达 3000 IU FVIII/mg 蛋白质。1988 年批准的首批高纯度产品，是通过凝胶过滤色谱法（FVIII - HPS/D，Biotransfusion 公司）或使用抗 FVIII 抗体的免疫亲和色谱法（Hemofil M，百特公司）生产的。后来，又批准了另外两种产品：一种是通过离子交换色谱法纯化并采用溶剂 - 去污剂（S/D）方法进行病毒灭活的产品（FVIII THP - S/D，Biotransfusion 公司）；另一种是使用抗 VWF 单克隆抗体通过免疫亲和色谱法纯化的产品（Monoclate，阿莫尔公司）。由于这些制剂中的蛋白质纯度非常高，因此添加人白蛋白来稳定制剂，并防止在纯化过程中和冻干产品复溶后出现产品损失。2.3.1 尺寸排阻色谱法凝胶过滤或尺寸排阻色谱法根据蛋白质的分子大小进行分离，其优点是操作简便，有商业化的分离介质可供使用。它可将 FVIII 作为与 VWF 的复合物分离出来，这增加了其稳定性，但回收率较低，仅为 60 - 70%。此外，工业规模纯化所需的非常大的柱子（高达 1 米高，80 厘米直径）难以实现可重复的装填。2.3.2 离子交换色谱法离子交换色谱法（IEC）根据蛋白质的离子电荷进行分离，其优点是有坚固耐用的分离树脂可供商业购买，并且方法可靠，能够实现 100 - 300 IU/mg 的高比活性。这些树脂能够耐受氢氧化钠和其他用于在循环之间对柱子进行消毒的强化学物质处理，从而允许每个柱子多次重复使用。血浆来源制剂的离子交换色谱法可将 FVIII 作为与 VWF 的复合物分离出来。Tosoh Bioscience 公司的 Toyopearl DEAE 650M 和 Fractogel EMD TMAE 在产量、纯度和比活性之间提供了最佳平衡。这两种介质都能提供大于 80% 的高 FVIII 产量，有效去除诸如纤维蛋白原和纤连蛋白等污染血浆蛋白，含有高水平的 FVIII/VWF 复合物，并且适合工业规模生产。2.3.3 亲和色谱法亲和色谱介质基于对特定蛋白质序列的生化识别来选择性结合 FVIII。目前的商业生产方法使用固定化肝素制备高纯度的血浆源产品，如 Grifols 公司的 Alphanate，其中含有 VWF。亲和色谱法对病毒去除也很有效，因为病毒不会与亲和介质结合，很容易与血浆源蛋白质分离。这种方法的一种变体，免疫亲和色谱法，使用定制的抗 FVIII 或抗 VWF 单克隆抗体来纯化血浆源和重组 FVIII 产品。这种方法具有高度选择性，能够实现高水平的纯化。然而，用于消毒柱子以便重复使用的试剂可能会降解固定化抗体，这限制了其使用并增加了制造成本。在监管过程中，任何在加工过程中使用的单克隆抗体配体本身都必须作为生物制品进行验证。固定化抗体也可能在洗脱缓冲液中洗脱并泄漏到产品中，导致患者体内产生抗体，引发过敏反应。免疫纯化的制剂不含 VWF，因此需要添加人白蛋白来稳定 FVIII。总体而言，目前纯化血浆源 FVIII 的最佳折衷方案是离子交换色谱法，它使用最具成本效益的分离介质，通过去除大多数不需要的血浆蛋白（如纤维蛋白原和纤连蛋白）来提供高纯度，并且保留完整的 FVIII/VWF 复合物以促进蛋白质的稳定性。2.4 通过病毒灭活和去除程序确保产品安全20 世纪 80 年代初，血友病群体受到人类免疫缺陷病毒（HIV）和丙型肝炎病毒（HCV）广泛致命感染的重创，这些病毒通过受感染供体的血浆来源凝血因子传播。认识到这个严重问题后，供体筛查和检测程序发生了重大变化，同时验证了新的工艺步骤以去除或灭活血液污染物，如病毒和传染性海绵状脑病（TSE）朊病毒病原体。主要关注的血浆传播病原体包括包膜病毒，如乙型肝炎病毒（HBV）、HCV、HIV 和人类 T 淋巴细胞白血病病毒（HTLV - I）；非包膜病毒，如甲型肝炎病毒（HAV）和细小病毒 B19（B19）；以及导致变异克雅氏病（vCJD）的 TSE 病原体。制造过程必须在病毒去除和 / 或灭活的安全需求与提供高产量、合理成本和有效高纯度最终产品的需求之间取得平衡。血浆源产品的安全性依赖于三个互补的屏障：（1）供体筛查和检测；（2）使用免疫和核酸扩增技术（NAT）对单个供体血浆袋和小池进行检测；（3）制造过程中包括特定的病毒灭活 / 去除步骤 。LFB 是第一家在 1996 年对供体血浆小池进行细小病毒 B19 PCR 检测的制造商，随后将检测范围扩大到包括 HBV、HCV、HIV 和 HAV。目前的法规要求使用至少两种有效的正交病毒减少步骤来针对感染性病原体。如今，主要的病毒灭活 / 去除技术包括巴氏消毒、干热处理、溶剂 - 去污剂处理和纳滤。随着整个行业常规进行 NAT 检测，并且所有工艺都纳入了有效的病毒减少步骤，如今血浆源和重组 FVIII 产品比以往任何时候都更安全。2.4.1 巴氏消毒巴氏消毒是指加热至 60°C 并持续 10 小时，这种方法已成功用于人血浆白蛋白超过 50 年，并且在没有其他方法可用时也曾用于 FVIII 产品。然而，蛋白质在液态下对热不稳定，可能会变性并具有免疫原性。一些接受早期巴氏消毒产品治疗的血友病患者产生了针对 FVIII 的抗体，这随后抑制了后续治疗的有效性，使这些患者在出血发作时没有有效的治疗方法。如今，使用巴氏消毒的工艺试图通过添加稳定剂或保护剂（如糖类、多元醇和氨基酸）来最小化蛋白质变性。通常这些保护剂会大量添加（高达 1 kg/L），因此必须通过验证研究确保这些高浓度不会阻碍病毒灭活。在任何情况下，这些添加剂都必须在后续工艺步骤中使用渗滤或色谱法去除。2.4.2 干热处理干热处理是将最终冻干在小瓶中的产品在 100°C 加热 30 分钟或在 80°C 加热 72 小时。这两种方法都未显示会使 FVIII 变性或增加其免疫原性，尽管长时间加热至 100°C（例如 2 小时）会使功能活性降低高达 50%。干热处理对包膜和非包膜病毒（HAV 和 B19）有效，尽管对细小病毒 B19 的效果可能有限。2.4.3 溶剂 / 去污剂处理溶剂 - 去污剂处理由纽约血液中心开发，是凝血因子治疗中人类病毒安全性方面最重要的突破。在室温下用 0.3% 三（正丁基）磷酸酯（TnBP）和 0.2% 胆酸钠、1% 吐温 80 或 1% 曲拉通 X - 100 处理 FVIII 溶液 6 小时，可以灭活包膜病毒，如 HIV、HBV 和 HCV。由于这些试剂对非包膜病毒（如 HAV 和细小病毒 B19）无效，因此需要第二个病毒灭活步骤。S/D 处理还会使 FVIII 与 VWF 解离，降低 FVIII 的活性。使用 S/D 处理的产品必须添加人白蛋白来稳定 FVIII，并且通常需要使用离子交换色谱法等额外的纯化步骤来去除 S/D 试剂。2.4.4 纳滤纳滤，也被称作“病毒过滤”，是基于使用具有多层孔隙结构的膜，通过尺寸排阻去除病毒。这种技术足够温和，可用于脆弱的凝血因子，能有效分离蛋白质与有包膜和无包膜病毒，并保留完整的FVIII/VWF复合物。使用15纳米滤膜的过滤可有效去除小的无包膜病毒，如甲型肝炎病毒（HAV）和猪细小病毒（PPV，一种小型耐受性强的模型病毒）。 直到最近，FVIII被认为太大，无法有效通过15纳米纤维过滤，而更大孔径的滤膜（例如35纳米）则无法去除HAV和B19。最近，一种创新方法成功地在工业规模上对FVIII进行35–15纳米的纳滤。通过首先使用氯化钙将FVIII从VWF中解离，将混合物通过35–15纳米的膜过滤，最后通过透析去除氯化钙，重新结合FVIII/VWF复合物（图2.3）。纳滤可有效去除各种病毒和传染性海绵状脑病（TSE），无论其对物理或化学处理的敏感性如何，同时保留FVIII的结构和功能完整性。这一特性使纳滤作为一种生物制品的额外安全步骤具有主要优势。 【图2.3 Factane1制造的主要步骤。 在使用35纳米和15纳米Planova1滤膜进行纳滤之前，使用氯化钙将FVIII/VWF复合物解离。】2.4.5 紫外线灭活 紫外线C（UVC）照射通过破坏核酸并阻止进一步复制来中和病毒，因此具有灭活有包膜和无包膜病毒的能力。尽管最初结果令人鼓舞，但由于紫外线能量的非特异性吸收可能导致蛋白质损伤，以及在工业规模上难以扩大，许多血浆分离者并未考虑这种方法。目前正在进行尝试，以改进技术和设备，实现均匀且可控的UVC处理，以灭活病毒而不造成显著的蛋白质损伤。据知，没有制造商正在开发用于FVIII的这种方法。 2.4.6 TSE去除方法 朊病毒（PrPsc）亲和配体正在被评估为去除TSE病原体的方法。理想情况下，这些配体将被固定在一次性使用的滤膜上，或用于重复使用的色谱介质上。然而，由于强碱处理会破坏大多数配体–基质键并破坏亲和基质，因此有必要开发新的支持材料和/或结合化学方法，使其足够坚固，以便进行清洁和潜在的柱子重复使用。2.5 细胞培养中的重组因子VIII生产20世纪80年代，血浆衍生凝血产品病毒污染和血液制品短缺的双重问题推动了重组血浆蛋白的开发，以提高安全性和供应量。在美国，首批获得批准的两个全长重组FVIII产品分别是Recombinate1（Baxter）和Kogenate1（Bayer）。重组蛋白制剂具有优势，它们是从潜在的无限来源（转化细胞系）生产的，在高度可控的无菌细胞培养系统中制造，最好不使用人或动物蛋白。从进料流中去除纤维蛋白原、纤维连接蛋白和生长因子等血浆蛋白简化了纯化方案。这些重组蛋白与选择性免疫亲和色谱方法配对，生产出比活超过4000 IU/mg的高纯度制剂。最初，由于从用于稳定最终制剂的人白蛋白中传播的小型无包膜TT病毒，导致开发了第二代产品，如Advate1、Kogenate1FS和ReFactoR1，它们用糖稳定，不含有任何人类或动物源蛋白。 提高大型复杂FVIII分子表达水平的努力导致通过删除大部分B结构域来改造重组FVIII，B结构域在凝血活性中没有已知功能，并且包含大部分糖基化位点（图2.2）。这种截短分子在生化、免疫学和功能上与全长FVIII相似；它安全有效，并且在细胞培养中以商业可行的水平表达。第一个成功的B结构域缺失的FVIII产品是ReFacto1（Pharmacia/Wyeth，现为Pfizer）。 上市超过18年后，重组FVIII产品已被证明是安全有效的。在美国、加拿大、英国和欧洲部分地区，这些产品价格较高，是首选产品。然而，由于重组产品的高成本以及大多数其他国家血浆衍生产品的生产限制，估计全球仍有80%的血友病患者无法获得有效的凝血因子治疗。此外，与血浆衍生产品相比，重组FVIII与更高的FVIII抑制剂发生率相关，相关内容在下一部分总结。2.6 血友病治疗的并发症2.6.1 既往未治疗患者（PUPs）中的抑制剂尽管FVIII输注是血友病治疗的基石，但某些血友病患者的免疫系统将外源性FVIII识别为外来蛋白，并产生抑制其体内活性的异种抗体。一旦形成失活抗体，任何来源的外源性FVIII对该个体都不再有效。因此，抑制剂的产生是当今血友病治疗的主要致病和致死原因，尤其是对于更高度纯化的FVIII制剂。不产生任何FVIII基因产物的重度血友病患者比产生功能改变蛋白的轻度疾病患者更有可能产生抑制性抗体。表位作图研究表明A2和C2结构域中存在免疫原性表位。 另一个决定FVIII免疫原性的因素是VWF的存在与否。天然FVIII以与VWF紧密结合的复合物形式循环，VWF保护它免受降解，并降低其免疫原性，可能通过掩盖隐匿性表位。含有VWF的FVIII制剂对抗FVIII抗体和树突状细胞的亲和力较低，并且激活FVIII特异性T细胞的能力较弱。然而，重组FVIII制剂不含VWF，并且可能含有一定比例已失去与VWF结合能力的FVIII蛋白。据推测，这种变性的FVIII可能与重组产品诱导的最高免疫反应有关。流行病学研究和系统综述一致认为，总体而言，与重组产品相比，血浆衍生浓缩物不太可能诱导抑制剂形成。这些发现在FVIII缺陷敲除小鼠的研究中得到了证实。一些制造商正在研究将VWF添加到重组FVIII制剂中的方法，以改善治疗结果，例如在细胞培养中共同表达VWF和FVIII。2.6.2 既往治疗患者（PTPs）中的抑制剂在多次输血且病情稳定的PTPs中，抑制剂的产生相对罕见，主要由工艺修改后FVIII降解引起。在PTPs中报告的抑制剂爆发与两种经过S/D和巴氏消毒双重病毒灭活的血浆衍生FVIII浓缩物有关：荷兰的Factor VIII CPS-P[44]和比利时及德国的Octavi S/D Plus。这些爆发事件聚焦于开发能够检测到甚至非常细微的FVIII结构变化的灵敏新表征工具的必要性，这些细微变化可能会在某些血友病患者中诱导抑制剂形成。2.6.3 对FVIII失活抑制剂患者的挽救治疗对于不再对外源性FVIII产生反应的有抑制剂的血友病患者，治疗出血发作的几种策略包括：用大剂量FVIII克服抑制作用，用FVIIa或激活的凝血酶原复合物（FEIBA）绕过抑制剂阻断，以及通过血浆置换或体外免疫吸附血浆部分去除抑制剂。二十多年来，血友病患者还成功接受了纯化的血浆衍生猪FVIII（例如，HYATE:C，Speywood Pharmaceuticals/Ipsen）治疗，这种FVIII的免疫原性不高，与人类FVIII抑制剂的交叉反应性低。当20世纪90年代中期使用的更敏感的检测方法在供体动物中检测到猪病毒时，获取足够的无病毒材料以进行可靠的商业生产变得困难。病毒去除过程成本效益不高，2004年停止了血浆衍生猪FVIII的生产。 挽救治疗的另一种方法是通过定期和长期输注FVIII诱导对FVIII的免疫耐受。多年来，不同的方案使用高剂量（100–200 IU/kg）或低剂量（25–50 IU/kg）的人类FVIII，甚至猪FVIII，有或没有免疫调节剂。报告的成功率为50–70%。目前的做法倾向于每天或每周3次给予高剂量。目前没有足够的信息提供基于证据的最有效诱导免疫耐受方案的建议。2.7 新的开发策略生产治疗性FVIII的持续挑战是：（1）提高制剂中的FVIII浓度，以减少输注量；（2）增加生产能力，以满足全球的临床需求；（3）改善病毒安全性；（4）减少抑制物产生和其他副作用；以及（5）降低成本，以使安全有效的制品在发展中国家也能负担得起。目前正在采用几种方法来解决这些问题。2.7.1 正在开发的纯化方法 为了提高纯度和产量，正在开发新的纯化技术。例如，正在开发具有下一代配体的新型亲和捕获色谱介质，这些配体足够坚固，可以在多次柱清洗循环后重复使用。这些包括能够选择性结合FVIII的试剂，例如“VIIISelect”亲和基质和小肽配体。其他方法试图绕过最初的血浆冷沉淀步骤，该步骤会损失高达一半的原始FVIII活性，通过使用能够直接从混合血浆中捕获FVIII的色谱介质。正在开发单一吸附剂的混合模式或多模式色谱方法，基于与FVIII的两种或更多种正交化学相互作用来分离蛋白质。级联血浆分离过程旨在通过一系列亲和吸附剂选择性捕获蛋白质，采用一种流过式工艺，其中一个柱的流出物在经过最小处理后应用于下一个柱。然而，级联处理的挑战是减少需要高度纯化且成本高昂的“注射用水”的大量缓冲液体积。 2.7.2 转基因动物中重组FVIII的生产 在转基因哺乳动物的乳汁中表达重组蛋白，提供了一种从可再生生产来源生产生物治疗药物的安全且潜在成本高效的方法，该方法可以通过增加泌乳畜群的规模来扩大生产规模。2006年，首个转基因生产的重组蛋白治疗药物获得批准，即在转基因山羊中表达的重组人抗凝血酶（GTC Biotherapeutics），这是一个具有里程碑意义的事件，它在美国和欧洲建立了一条监管途径，为特定病原体自由动物中的蛋白表达设定了标准，并验证了一种纯化工艺。曾有报道描述转基因猪在乳汁中分泌结构正确且具有功能的重组人FVIII，但由于产量和稳定性的问题，最终停止了产品开发。在转基因小鼠的乳汁中共表达具有增强分泌和稳定性的FVIII变体以及重组VWF，但在合适的生产物种中的结果尚未报告。重组FVIII在转基因兔中成功表达，可接受的表达水平为67 mg/mL，但该项目的当前状态尚不清楚。2.8 结论曾经是一种致残和缩短寿命的遗传性疾病，血友病在许多国家已经转变为一种慢性疾病，其对偶发性出血有安全有效的治疗。过去十年的改进使得凝血因子产品无论是从人供体血浆中分离出来的，还是在细胞培养中作为重组蛋白生产的，都达到了高度的安全性。然而，由于成本和筛选合格的献血者有限，只有大约20%的血友病患者能够获得FVIII治疗，以过上充实和富有成效的生活。识别微信二维码，添加生物制品圈小编，符合条件者即可加入生物制品微信群！请注明：姓名+研究方向！版权声明本公众号所有转载文章系出于传递更多信息之目的，且明确注明来源和作者，不希望被转载的媒体或个人可与我们联系(cbplib@163.com)，我们将立即进行删除处理。所有文章仅代表作者观不本站。

1月10日，苏州赛分科技股份有限公司（后文简称“赛分科技”）正式登陆上交所科创板，股票代码688758，发行价4.32元，募资总额为2.16亿元，成为2025开年第一家在科创板完成IPO的生物医药相关企业。首日收盘暴涨379.17%，总市值超80亿。 创建于2002年的赛分科技，业务聚焦于研发和生产用于药物分析检测和分离纯化的液相色谱材料——色谱层析介质和液相色谱柱。 上述产品贯穿药物开发生产的全过程，应用于药物研发、IND 申报、临床试验、申请上市、商业化生产等多个环节，是制药企业特别是生物药企从药物早期研发到商业化大规模生产所需要的关键核心耗材。据国家统计局发布的《战略性新兴产业分类（2018）》，赛分科技隶属于“4.1.4生物医药关键装备与原辅料制造”，系医药产业链的上游企业。 图片来源：招股书 历经近23年发展，赛分科技已成为行业内少数同时具备分析色谱及工业纯化领域研发及规模化大生产能力的企业之一，亦是国内市场的龙头企业及国际竞争中的主要参与者。 收入方面，根据招股书，该公司2021年至2023年营业收入分别为1.54亿元、2.12亿元、2.45亿元，2024年1-9月为2.18亿元，呈现持续增长势头，净利润则分别为4713.93万元、5248.57万元和5448.79万元。 在这个过程中，赛分科技获得了同华投资、国寿疌泉、华泰大健康基金、CPE源峰、复星、高瓴、国药资本、夏尔巴投资等在内的明星机构的押注。 值得注意的是，赛分科技创始人黄学英是南京大学校友，曾就读于该校化学系。作为南大校友的又一上市企业，赛分科技成色如何？其所处行业的发展前景和挑战有哪些？是否有新的趋势正在发生？针对这些问题，接下来本文将结合招股书进行深入分析。 01 创业超20年，南大校友缔造色谱技术领域龙头企业 赛分科技的创业史，就是我国色谱技术行业的发展史。 1990年，从南京大学化学系毕业后，赛分科技创始人黄学英远赴美国攻读博士学位，主攻离子色谱领域。凭借不错的科研能力，1999 年至2005年间，黄学英先后供职于美国戴安公司及美国杜邦公司研发中心，担任资深研究员和资深化学家。 彼时，全球分析色谱市场几乎被国外企业垄断，面对此景的黄学英博士决定打破这种局面，于2002年成立了美国赛分，并在2009年回国后，在苏州创立赛分科技。 不过，要想在色谱技术领域实现突破并不容易——色谱相关产品技术难度大、研发壁垒高，是一个人才密集、技术密集的行业。 针对此，黄学英博士在企业成立前后广觅人才，逐渐搭建起一支以色谱研发为核心的技术团队。其中，公司创始人黄学英博士担任色谱科学研发团队负责人，在Macromolecules、JACS、Analytical Chemistry等全球知名学术期刊上发表论文20余篇，作为发明人共申请有79项专利，其中34项已授权；毛慧明博士担任材料科学研发团队负责人；王宏宇博士为首席质量官；Mathew George博士主导体积排阻色谱柱产品线的研发和应用；杨克博士担任蛋白工程学研发团队负责人。 随着人才的持续加入，以及不断进行的研发探索与经验积累，赛分科技已掌握了微球合成技术、表面修饰技术、功能化修饰技术、核壳复合层析介质制备技术、功能生物大分子合成技术和色谱介质装填技术几大核心技术。 据招股书显示，赛分科技将上述核心技术均用于色谱产品生产的相关环节，并基于核心技术及生产工艺，构建了覆盖多种分离模式、多种性能特点的色谱产品体系。这些产品广泛应用于小分子化合物、抗体、疫苗、胰岛素、核酸、重组蛋白等不同分子量大小和空间构型的药物分子的分离纯化。 具体来说，在产品的构建上，赛分科技旗下主要有色谱柱和色谱填料，根据应用可划分为分析色谱和工业纯化两大领域。 图片来源：赛分科技官网 色谱柱产品是将微米级的固定相色谱填料运用专有技术装填在不锈钢或塑料Peek柱管中而制得，将制得的色谱柱连接到液相色谱分析仪器上，即可分离混合组分，对各种药物分子进行分析。性能优异的色谱柱具备较高的稳定重复性和较长的使用寿命，在保证更好的分辨率和准确性的同时，可以节约分离时间和成本。 根据色谱材料微球的粒径、孔径、官能团、表面修饰技术的不同，以及柱管的材质、直径和长度的不同，可制得不同规格的色谱柱。截至目前，赛分科技的色谱细分产品超过 1000 种，规格覆盖粒径1.7-10μm，孔径 80Å-2000Å，内径0.3mm到5cm。 色谱填料（又称“层析介质”）的微球粒径通常为10 微米以上，主要在药物的临床研究阶段以及工业化生产阶段用于分离纯化，实现目标成分的提取，工业纯化类色谱产品形态多为散装层析介质，便于药企大规模纯化使用，亦存在将层析介质填装至空柱管中，以预装柱产品形态供客户进行小规模的筛选和纯化。 针对不同的应用场景，赛分科技自主开发了应用于mRNA核酸药物、多抗药物等前沿领域的创新层析介质，产品种类已超过100种。 得益于产品的持续打磨，赛分科技在全球分析色谱领域已积累超5000家客户，与包括罗氏、辉瑞、礼来、甘李药业、正大天晴、齐鲁制药、再生元、Moderna 等国际大型医药集团、生物制药公司以及创新药企业建立了良好的业务合作关系，并与 Agilent、Sigma-Aldrich等行业国际巨头保持长期稳定合作。 在提供关键的分析及分离纯化耗材的同时，赛分科技也积极参与到生物制药企业的质检体系建立及下游纯化工艺开发中。招股书显示，该公司已经与信达生物、甘李药业、复宏汉霖、齐鲁制药、国药中生和通化安睿特等国内医药企业建立了良好的合作关系。 业务持续向上的过程中，赛分科技逐渐成为国内色谱技术领域的龙头企业。最引人注目的事件便是2021年11月，赛分科技宣布完成超5亿元人民币D轮融资，引进了重量级战略投资人CPE源峰、高瓴创投、国药资本和夏尔巴投资，以及科兴控股、甘李药业等产业投资人。 最终，历经20余年创业长跑后，正式等来了上市敲钟时刻。 02 年均收入增速超20%的秘密是啥？ 尽管从整个收入体量来看，赛分科技目前还处于数亿级别，但其收入增速很快，近三年年收入平均增速超20%。 究竟是什么原因撑起较高的年均增速的？ 细化来看，在业务结构上，赛分科技的业务收入主要由分析色谱和工业纯化两大业务板块构成，另外还有一部分服务收入，占比一直在1%左右。 其中，分析色谱的收入在2021年至2023年间分别为 9373.22万元、11030.23万元、11519.67万元，2024年上半年为5663.20 万元，总体金额虽呈上升趋势，但涨幅并不高。 从占主营业务收入可以看到，分析色谱收入比重正呈现下滑趋势，上述时间期里占比分别为60.67%、52.14%、47.22%和37.29%。 增长的核心来自工业纯化收入。 在2021年至2023年间，赛分科技的工业纯化收入分别为 5838.09 万元、9800.23万元、12564.06万元，2024年上半年为9369.65 万元，起势非常快，其占主营业务收入的比重分别为37.79%、46.32%、51.51%和61.70%，上升趋势明显。 数据来源：招股书 动脉网制图 背后原因有二。一是2021年开始，赛分科技扬州公司填料生产线正式投产，工业纯化填料产能明显提升，能够满足更多客户的工业纯化填料需求；二是下游端生物医药企业需求持续释放。 以2023年度为例，赛分科技工业纯化板块收入增长主要系离子交换填料、硅胶基质填料、其他类型填料（主要为疏水填料）销售增长所致。 据招股书披露，赛分科技重点战略客户甘李药业、通化安睿特在2023年度产能扩张，加大了相关产品的购买：甘李药业持续复购离子交换填料及硅胶基质填料，用于多个处于临床阶段以及商业化生产阶段的胰岛素项目以及其子公司甘李药业山东有限公司的扩产；主要研发及生产人血白蛋白产品的通化安睿特在当年复购离子交换填料，以用于其临床阶段样本生产以及厂房扩产验证。 另外，如果将业务类型划分为境外和境内收入亦可发现，境内收入正成为驱动赛分科技业绩增长的重要动力。 招股书显示，赛分科技在2021年至2023年，以及2024年上半年间，境外收入占比分别为 35.20%、33.30%、30.86%和25.11%，下降明显；与之对应，境内收入占比由64.80%上涨至74.89%。 这与行业的大背景有关。近年，国家对生物安全的高度重视和复杂的国际关系促使国内制药企业对于生产的核心耗材供应能力提出了较高的要求，海外企业由于国际贸易摩擦影响，全球供应链受阻，药企客户出于对供应链安全和原材料供货稳定性考虑，对于寻求性价比更高的国产色谱供应商的需求强烈，我国色谱行业迎来了国产化机遇，赛分科技因此受益。 以色谱介质市场为例，根据前瞻产业研究院数据，2023年我国色谱介质市场规模为112亿元，预计于2026年达到203 亿元，2023年到2026年期间年均复合增长率为21.92%。2023 年中国生物药色谱介质市场规模为73亿元，随着我国在生物药领域的研发投入的不断增加，国际重磅生物药专利的到期，未来5年我国生物药色谱介质市场仍将保持高速增长，预计于2026年达到132亿元，2023-2026 年期间年均复合增长率为21.83%。 图片来源：招股书 此外，在赛分科技增长最强势的工业纯化业务中，目前也主要为国内客户，进而凸显了其境内业务增长的势头。 综上，工业纯化收入或境内业务的不错表现，持续推动了赛分科技超20%的年均收入增速。 03 国外企业占据主流+本土色谱厂商崛起，未来仍存不小挑战 在高速成长的过程中，赛分科技依然面临不小挑战。 一方面，在市场占有率上，我国色谱介质市场仍是国外企业占主流，其中，Cytiva、Thermo Fisher、Tosoh 等国际主流厂商的市场占有率超过50%。而招股书透露的数据显示，2023年赛分科技在国内分析色谱市场的占有率仅有约5.16%，工业纯化（色谱介质）市场占有率约为 1.02%，生物大分子色谱介质市场占有率约为 1.20%，与行业内起步较早的海外龙头企业相比仍存在较大差距。 另一方面，国产替代大趋势下，我国本土色谱厂商的竞争激烈程度加剧，本土色谱厂商均在争取抓住良好机遇，实现对进口填料厂商的替代，导入下游药企客户的工业纯化供应链进而抢占市场份额，未来将会有更多的竞争者参与该领域，本土色谱厂商之间的市场竞争将更加激烈。 需要注意的是，海外供应链恢复稳定后，国产化替代进程或将面临境外厂商竞争阻力。招股书特别提到，Cytiva、Thermo Fisher 等境外厂商基于中国医药下游市场较为良好的发展前景和市场空间，对中国市场的重视度进一步提升，在市场推广、参加招投标次数、商业谈判、供货周期保障等客户开拓及维系等方面有所重视和加强，因此，境内厂商或将面临境外厂商维持国内市场主导地位的竞争导致的国产化替代进程的市场竞争阻力。 全球工业纯化领域主要参与厂商在产品种类、基质类型、孔结构、高端产品等维度的覆盖情况 图片来源：招股书 面对挑战，赛分科技以期通过此次上市融资，实现全资子公司扬州赛分在现有产能基础上新建“20万升/年生物医药分离纯化用辅料”项目，从而大幅提升工业纯化填料产能。 同时，赛分科技亦在持续加速相关产品的研发和布局，包括耐碱硅胶体积排阻色谱填料和色谱柱、基于 PSDVB 大孔微球的层析介质、新一代耐碱高载量亲和层析介质、新一代高流速高强度低反压的琼脂糖基球、用于疫苗工业纯化的层析介质、纯化填料装柱工艺等，以期在后续市场推出更多新产品。 04 南大校友创业天团，已在医疗领域斩获9个IPO 在此次赛分科技IPO的同时，南京大学校友倪劲松创立的拨康视云、南京大学校友吴永谦创立的药捷安康皆在上个月递表港交所。可见，南大校友创业天团正在密集收获IPO。 动脉网梳理后发现，在医疗创新领域，由南京大学校友创立的医疗企业已经斩获9个IPO，分别为恒瑞医药、仟源医药、金斯瑞、中旗股份、药石科技、艾迪药业、传奇生物、和誉医药、赛分科技。 与此同时，南京大学校友创立的医疗企业在一级市场亦颇受青睐。仅近两年，包括博奥明赛、晶捷生物、镁信健康、汉欣医药、蓝纳成生物、君隽未来、湾岛细胞等十数家校友企业完成新一轮融资。 有意思的是，在医疗投资圈，不乏南京大学校友的身影。比如博远资本创始合伙人陈鹏辉积极布局医疗和生物技术相关领域，专注挖掘出真正的“生物医药创新者”；朗盛投资合伙人李佳全面负责公司医疗大健康领域的风险投资等；周春芳作为创始合伙人所在的毅达资本也将医疗健康作为重点布局的方向。 除了在资本端获得足够支持外，南京大学创业者们还能获得南京大学各类生物医药领域校友会的资源支持，如南京大学科创投资校友会生物医药专委会、南京大学生物医药行业校友会等。 以成立于2017年的南京大学生物医药行业校友会为例。该校友会聚集了2600多名成员，包含了9位院士、10余位上市公司创始人、上百家创业企业家、知名投资人及专家学者，并在南京成立创业创新中心、专营公司，无偿为南京大学校友提供融资创投、论坛交流、园区招商、技术培训、资源对接、人才招聘等产融服务。 近年来，“校友经济”正成为地区创新发展的驱动力之一，各个高校亦都重视毕业校友的创新创业工作，并培植“校友经济”土壤，推动更多创新成果成功落地。 得益于此，未来将有更多学术大咖走出校园，将医疗创新创业的火种不断延续。 如果您认同文章中的观点、信息，或想进一步讨论，请与我们联系；也可加入动脉网行业社群，结交更多志同道合的好友。 近 期 推 荐 声明：动脉网所刊载内容之知识产权为动脉网及相关权利人专属所有或持有。未经许可，禁止进行转载、摘编、复制及建立镜像等任何使用。 动脉网，未来医疗服务平台

▲点击图片，了解详情 作者：黄仲平 今日，赛分科技（688758）正式登陆科创板，发行4998万股，发行后总股本约4.16亿股，发行价4.32元/股，开盘涨幅超5倍。 在生物医药产业链这个万亿级别的市场中，医药市场所占比例并非大头，上游的研发才是真正的大市场。CXO首先得到了飞跃，而在CXO的更上游，是各类耗材和原料。在产业链不断完善的局面下，近两年来，这类处于上游的上游企业，正在逐渐走上时代的舞台。赛分科技便是这类企业之一。 1 专注色谱材料 近年来生物医药的大跨越发展，为上下游产业带来了巨大的机遇。 赛分科技致力于研发和生产用于药物分析检测和分离纯化的液相色谱材料。核心产品为应用于生物大分子药物及小分子化学药物分析检测和分离纯化的色谱柱和色谱填料。该类产品贯穿药物开发生产的全过程，应用于药物研发、IND申报、临床试验、申请上市、商业化生产等多个环节，是制药企业特别是生物药企从药物早期研发到商业化大规模生产所需要的关键核心耗材。 2021-2023年，赛分科技总营收分别为1.55亿元、2.13亿元和2.45亿元；净利润分别为2162.02万元、4820.24万元和5415.39万元。 其主要产品为色谱柱和色谱填料，根据应用可划分为分析色谱和工业纯化两大领域。 分析色谱材料的微球粒径通常为10微米及以下，主要用于药物的研发分析、质量控制和小量样品的制备，实现对不同组分的分离。根据色谱材料微球的粒径、孔径、官能团、表面修饰技术的不同，以及柱管的材质、直径和长度的不同，可制得不同规格的色谱柱，以满足不同药物分子的分离需求。 2021-2023年，赛分科技的分析色谱业务板块营收分别为9373.22万元、1.1亿元和1.15亿元。 工业纯化色谱填料（又称“层析介质”）的微球粒径通常为10微米以上，主要在药物的临床研究阶段以及工业化生产阶段用于分离纯化，实现目标成分的提取，工业纯化类色谱产品形态多为散装层析介质，便于药企大规模纯化使用。赛分科技的层析介质产品体系已超过100种。 2021-2023年，赛分科技的工业纯化板块业务营收分别为5838.09万元、9800.23万元和1.26亿元。 产能方面，赛分科技的扬州生产基地于2021年正式投产，一期工程年产达24760升，单批次产能达500升，是国内色谱介质行业具有大规模量产能力的少数企业之一。 作为一个生物医药上游极为细分的一个领域，这个市场能达到怎样的规模呢？ 2 成长空间巨大 要了解赛分科技所处行业的市场规模，首先要了解生物医药产业链的成本占比。 生物药生产包括上游发酵及下游工业纯化。下游纯化环节在整个生物药生产中占据主要生产成本，以单抗为例，下游分离纯化环节占据总生产成本的65%以上。下游分离纯化主要涉及收获、层析捕获、低PH病毒灭活及深层过滤、层析、除病毒过滤、浓缩超滤、无菌过滤等环节，层析是整个下游纯化工艺的核心环节，层析使用的设备及耗材主要为层析系统和色谱填料。 生物药分离纯化流程示意图，来源：招股书 根据前瞻产业研究院数据，2023年，色谱介质市场方面，中国生物药色谱介质市场规模约为73亿元，未来5年我国生物药色谱介质市场仍将保持高速增长，预计于2026年达到132亿元；同期，在色谱柱市场方面，中国色谱柱产量达到19.8万根，占全球色谱柱产量比例为4.6%，中国色谱柱市场规模达到16.2亿元，未来随着下游领域的需求驱动以及进口替代趋势的进一步增强，2025年中国色谱柱产量预计达到22.9万根，中国色谱柱市场规模预计达到20.7亿元。 赛分科技所处行业的竞争格局又是如何？ 长期以来，全球色谱柱和色谱填料大部分市场被大型跨国科技公司所占据，海外的大型公司由于进入该领域较早，其产品技术优势和应用成熟度较高，在高端市场优势尤为明显。 全球范围内主流的分析色谱企业为Thermo Fisher、Agilent、Tosoh和Waters等，这些跨国巨头可以提供包括设备、仪器、试剂、耗材和实验室整体解决方案的一整套生物技术研究开发的工具服务，在产品性能、渠道、客户粘性等方面具有较大的优势，全球的市场份额占比较高。 在工业纯化领域，由于技术壁垒较高且需要企业具有规模化生产能力，因此行业集中度较高，Cytiva、Merck KGaA、Thermo Fisher、Tosoh和Bio-Rad等海外企业占据了全球工业纯化填料的主要市场份额，形成了寡头垄断局面。 赛分科技凭借20余年的深耕，在分析色谱领域拥有全面的分析色谱品类布局和丰富的可选粒径、孔径维度，产品覆盖度处于行业领先水平；在工业纯化产品方面，基质种类、孔结构、高端产品等均实现了全面的布局，产品覆盖度达到了同等甚至优于同行业公司的水平。 赛分科技近年营收组成，来源：招股书 这其中，在复合模式色谱柱领域，赛分科技是国际上少有的可以实现生产体积排阻+疏水复合模式色谱柱的企业，自主研发的Biomix系列双抗错配色谱柱已经作为关键技术型耗材，广泛应用于双特异性抗体项目的研发中。 并且，赛分科技还是行业内少数同时具备分析色谱及工业纯化领域研发及规模化大生产能力的企业之一。 其在全球分析色谱领域客户超过5000家，与包括罗氏、辉瑞、礼来、甘李药业、正大天晴、齐鲁制药、再生元、Moderna等国际大型医药集团、生物制药公司以及创新药企业建立了良好的业务合作关系，并与Agilent、Sigma-Aldrich等行业国际巨头保持长期稳定合作。 2023年，赛分科技国内分析色谱市场占有率约为5.16%，工业纯化（色谱介质）市场占有率约为1.02%，生物大分子色谱介质市场占有率约为1.20%。从市占率数据看，虽然与海外龙头企业相比仍存在较大差距，但从另一个角度也说明，国产替代的空间巨大。 3 结语 色谱柱作为液相色谱的心脏，对色谱仪器的应用起到决定性作用，而纯化填料作为生物药生产下游最重要的耗材之一，对生物药质量及生产效率至关重要。在轰轰烈烈的国产化替代浪潮之下，赛分科技登陆资本市场后，或许将大有可为。后续发展如何，贝壳社还将持续关注。 参考资料： 1、赛分科技招股书 2、《色谱填料企业赛分科技科创板IPO过会高瓴复星创富国药二期等投了》，科创板日报，2024-1-12 3、《过会7个月后色谱填料企业赛分科技科创板IPO注册生效盈利能力等被重点问询》，科创板日报，2024-8-23 关于贝壳社 贝壳社是国内领先的医健创新创业服务平台，为医健创业者提供全路径创业服务。通过产业空间运营、创业教育、投资孵化、数字化赋能、企业价值增长等服务体系，给医健创业企业提供产业空间、人才战略培养、投融资、产业生态资源、数字化转型等服务。同时，贝壳社布局澳洲，帮助国内生物医药企业加速走向海外；成立“泰格-泰珑-贝壳社企业经营服务中心”为企业成长提供全生命周期的增值服务，提高企业运营效率，加快企业成长发展。我们深度链接政府、科研院所、临床机构、投资机构、第三方服务商、CXO等行业资源，致力于赋能医疗健康创业公司成长，推动创新技术造福人类生命健康。 往 期 推 荐 1 复星医药：能否踏上复兴征途？ 2 CNS新药即将迎来大爆发时代 _ 3 越来越多Biotech发起“独立宣言” _ *声明：本文仅为作者观点，不构成任何投资建议，且非治疗方案推荐。 投稿请添加小助手：bioclub666