更新于：2024-05-01

FOXP3

forkhead box P3

更新于：2024-05-01

基本信息

别名

AIID、DIETER、forkhead box P3

+ [9]

简介

Transcriptional regulator which is crucial for the development and inhibitory function of regulatory T-cells (Treg) (PubMed:17377532, PubMed:21458306, PubMed:30513302, PubMed:23947341, PubMed:24354325, PubMed:24722479, PubMed:24835996, PubMed:32644293). Plays an essential role in maintaining homeostasis of the immune system by allowing the acquisition of full suppressive function and stability of the Treg lineage, and by directly modulating the expansion and function of conventional T-cells (PubMed:23169781). Can act either as a transcriptional repressor or a transcriptional activator depending on its interactions with other transcription factors, histone acetylases and deacetylases (PubMed:17377532, PubMed:21458306, PubMed:23947341, PubMed:24354325, PubMed:24722479). The suppressive activity of Treg involves the coordinate activation of many genes, including CTLA4 and TNFRSF18 by FOXP3 along with repression of genes encoding cytokines such as interleukin-2 (IL2) and interferon-gamma (IFNG) (PubMed:17377532, PubMed:21458306, PubMed:23947341, PubMed:24354325, PubMed:24722479). Inhibits cytokine production and T-cell effector function by repressing the activity of two key transcription factors, RELA and NFATC2 (PubMed:15790681). Mediates transcriptional repression of IL2 via its association with histone acetylase KAT5 and histone deacetylase HDAC7 (PubMed:17360565). Can activate the expression of TNFRSF18, IL2RA and CTLA4 and repress the expression of IL2 and IFNG via its association with transcription factor RUNX1 (PubMed:17377532). Inhibits the differentiation of IL17 producing helper T-cells (Th17) by antagonizing RORC function, leading to down-regulation of IL17 expression, favoring Treg development (PubMed:18368049). Inhibits the transcriptional activator activity of RORA (PubMed:18354202). Can repress the expression of IL2 and IFNG via its association with transcription factor IKZF4 (By similarity).

关联

项与 FOXP3 相关的药物

AZD-2373

靶点

FOXP3

作用机制

APOL1抑制剂 [+1]

在研机构

AstraZeneca PLC [+2]

原研机构

Ionis Pharmaceuticals, Inc.

在研适应症

肿瘤 [+10]

非在研适应症-

最高研发阶段临床2期

首次获批国家/地区-

首次获批日期1800-01-20

Foxp3-#32

靶点

FOXP3 x HLA-A 24

作用机制

FOXP3调节剂 [+1]

在研机构

Eureka Therapeutics, Inc.

原研机构

Eureka Therapeutics, Inc.

在研适应症

肿瘤

非在研适应症-

最高研发阶段临床前

首次获批国家/地区-

首次获批日期1800-01-20

FoxAP

靶点-

作用机制

FOXP3抑制剂

在研机构

Sapience Therapeutics, Inc.初创企业

原研机构

Sapience Therapeutics, Inc.初创企业

在研适应症

血液肿瘤 [+1]

非在研适应症-

最高研发阶段药物发现

首次获批国家/地区-

首次获批日期1800-01-20

项与 FOXP3 相关的临床试验

NCT05351047 / Completed临床1期

A Phase I, Randomized, Single-blind, Placebo-controlled Study to Assess the Safety, Tolerability and Pharmacokinetics of AZD2373 Following Multiple Ascending Dose Administration to Healthy Male Participants of Sub-Saharan West African Ancestry

This is a Phase 1 study to assess the the safety, tolerability and pharmacokinetics (PK) of AZD2373, following subcutaneous (SC) administration of multiple ascending doses (MAD) of AZD2373 in healthy male participants of sub-Saharan West African ancestry.

开始日期2022-04-04

申办/合作机构

AstraZeneca PLC

[+1]

NCT02200718 / Not yet recruiting临床1期

A Phase I Study of NeuroVax™, a Novel Therapeutic TCR Peptide Vaccine for Pediatric Multiple Sclerosis

A Phase I Study of NeuroVax™, a Novel Therapeutic TCR Peptide Vaccine for Pediatric Multiple Sclerosis to demonstrate safety & efficacy

开始日期2020-12-31

申办/合作机构

Immune Response Biopharma, Inc.

NCT04504669 / Active, not recruiting临床1期

A Phase I First-in-Human Study to Evaluate the Safety, Pharmacokinetics, Pharmacodynamics and Efficacy of AZD8701 Administered Intravenously as Monotherapy and in Combination With Durvaluamb (MEDI4736) in Participants With Advanced Solid Tumours.

The purpose of this study is to Evaluate the Safety, Tolerability, Pharmacokinetics, Pharmacodynamics, Immunogenicity and Antitumor Activity of AZD8701 Alone and in Combination with Durvalumab (MEDI4736) in Adult Subjects with Select Advanced Solid Tumors

开始日期2020-08-18

申办/合作机构

AstraZeneca PLC

100 项与 FOXP3 相关的临床结果

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100 项与 FOXP3 相关的转化医学

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0 项与 FOXP3 相关的专利（医药）

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20,534

项与 FOXP3 相关的文献（医药）

2024-12-01·Virulence

Escherichia coli and HPV16 coinfection may contribute to the development of cervical cancer.

Article

作者: Qin Zou ; Yingying Wu ; ShuaiShuai Zhang ; Shu Li ; Siyue Li ; Yan Su ; Lei Zhang ; Qian Li ; Hua Zou ; Xinyuan Zhang ; Teng Wang ; Shuang Liang ; Jun Yang ; Chunli Li

Persistent human papillomavirus HPV infection is a necessary but insufficient condition for cervical cancer. Microorganisms are crucial environmental factors in cancers susceptibility and progression, recently attracting considerable attention. This study aimed to determine the infection status and relationship between high-risk HPV (HR-HPV) and lower genital tract infectious pathogens in cervical cancer and its precursors. From a retrospective and a prospective cohort analysis, Escherichia coli (E. coli) dominated the pathogens isolated from cervical discharges, and an isolation rate uptrend has been shown recently. HPV16 and E. coli's coinfection rate gradually increased with the severity of cervical intraepithelial neoplasia. The adhesion and invasion abilities of the isolated E. coli to HPV16-positive SiHa cells were evaluated in vitro. The TCGA database and cervical tissues samples analysis showed that IL-10 was upregulated in cervical cancer. IL-10 expression levels increased in tissue samples with the severity of cervical cancer and its precursors with HPV16 and E. coli coinfection. Although no significant changes in IL-10 production were observed in the co-culture supernatant, we hypothesized that Treg immune cells in the tumour microenvironment might be responsible for the local IL-10 upregulation, according to our data showing Foxp3 upregulation and an upward trend with the cervical intraepithelial neoplasia grading to cancer and tumours with E. coli and HPV16 coinfection. Our data provide insights into the possible role of E. coli in cervical cancer progression and suggest that the application of HPV and E. coli screening programs may be an effective strategy to relieve the burden of cervical cancer and its precursor lesions.

2024-03-15·iScience

Revealing splenectomy-driven microRNA hsa-7b-5p's role in pancreatic cancer progression.

Article

作者: Liangliang Wu ; Yongjie Xie ; Bo Ni ; Peng Jin ; Bin Li ; Mingzhi Cai ; Baogui Wang ; Chengyan Wu ; Yuexiang Liang ; Xiaona Wang

Splenectomy often accompanies distal pancreatectomy for pancreatic cancer. However, debates persist on splenic function loss impact. Prior studies in mice revealed splenectomy promotes pancreatic cancer growth by altering CD4/Foxp3 and CD8/Foxp3 ratios. The effect on other immune cells remains unclear. Clinical observations indicate splenectomy induces immunosuppression, heightening recurrence and metastasis risk. Here, we established an orthotopic pancreatic cancer model with splenectomy and observed a significant increase in tumor burden. Flow cytometry revealed elevated MDSCs, CD8+PD-1high+ T cells, and reduced CD4⁺ T cells, CD8⁺ T cells, and natural killer cells in tumors. Bulk sequencing identified increased MicroRNA (miRNA) hsa-7b-5p post-splenectomy, correlating with staging and immunosuppression. Similar results were obtained in vivo by constructing a KPC-miRNA hsa-7b-5p-sh cell line. These findings suggest that splenectomy enhances the expression of miRNA hsa-7b-5p, inhibits the tumor immune microenvironment, and promotes pancreatic cancer growth.

2024-03-14·Molecular therapy. Methods & clinical development

Efficient and sustained FOXP3 locus editing in hematopoietic stem cells as a therapeutic approach for IPEX syndrome

Article

作者: Singh, Swati ; Pugliano, Cole M. ; Honaker, Yuchi ; Laird, Aidan ; DeGottardi, M. Quinn ; Lopez, Ezra ; Lachkar, Stefan ; Stoffers, Claire ; Sommer, Karen ; Khan, Iram F. ; Rawlings, David J.

Immune dysregulation, polyendocrinopathy, enteropathy, X-linked (IPEX) syndrome is a monogenic disorder caused by mutations in the FOXP3 gene, required for generation of regulatory T (T_reg) cells. Loss of T_reg cells leads to immune dysregulation characterized by multi-organ autoimmunity and early mortality. Hematopoietic stem cell (HSC) transplantation can be curative, but success is limited by autoimmune complications, donor availability and/or graft-vs.-host disease. Correction of FOXP3 in autologous HSC utilizing a homology-directed repair (HDR)-based platform may provide a safer alternative therapy. Here, we demonstrate efficient editing of FOXP3 utilizing co-delivery of Cas9 ribonucleoprotein complexes and adeno-associated viral vectors to achieve HDR rates of >40% in vitro using mobilized CD34⁺ cells from multiple donors. Using this approach to deliver either a GFP or a FOXP3 cDNA donor cassette, we demonstrate sustained bone marrow engraftment of approximately 10% of HDR-edited cells in immune-deficient recipient mice at 16 weeks post-transplant. Further, we show targeted integration of FOXP3 cDNA in CD34⁺ cells from an IPEX patient and expression of the introduced FOXP3 transcript in gene-edited primary T cells from both healthy individuals and IPEX patients. Our combined findings suggest that refinement of this approach is likely to provide future clinical benefit in IPEX.

111

项与 FOXP3 相关的新闻（医药）

2024-04-05

·BioSpace

Precision Biologics to Present at the American Association for Cancer Research (AACR) Annual Meeting on April 8th, 2024

BETHESDA, Md., April 5, 2024 PRNewswire/ -- Precision Biologics, Inc. reports its lead monoclonal antibody, NEO-201, targets circulating human naïve regulatory T cells (Tregs) in both healthy donors and cancer patients. A poster presentation discussing this data will be presented at the American Association for Cancer Research (AACR) Annual Meeting 2024, at the San Diego Convention Center in San Diego, CA on April 8th, 2024. Poster title: The O-glycan epitope targeting anti-human carcinoma monoclonal antibody (mAb) NEO-201 can also target human regulatory T cells (Tregs) This study was performed by Drs. Atsushi Tanaka and Shimon Sakaguchi from Osaka University, Japan. Dr. Sakaguchi's group independently analyzed by flow cytometry the ability of NEO-201 to recognize naïve Tregs in peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) from healthy donors, confirming findings from Precision Biologics in PBMCs from cancer patients. Previous studies performed by Precision Biologics have shown that approximately 4.6% of CD4+ T cells express NEO-201 target antigen and that those CD4+ T cells have Tregs phenotype. In addition, in a recently published phase 1 clinical study it has been observed that NEO-201 binds to CD4+/ CD25+/, CD127-/, Foxp3+/, CD15s+ cells from PBMCs from cancer patients with solid tumors. The purpose of this study performed in Dr. Sakaguchi's laboratory was to corroborate and further characterize the phenotype of the specific subset of CD4+ T cells expressing the NEO-201 target antigen. In this study, human PBMCs were collected from 7 healthy donors (HD) at Osaka University and 6 cancer patients from Precision Biologics ongoing phase II clinical trial (Clinical Trial NCT03476681) evaluating the efficacy of the combination of NEO-201 with pembrolizumab in adults with solid tumors resistant to checkpoint inhibitors. Phenotypic analysis was conducted by flow cytometry to evaluate which fraction of CD4+ T cells is recognized by NEO-201. Flow cytometry analysis revealed that NEO-201 recognizes fraction I of CD4 T cells in both healthy donors and cancer patients. Fraction I includes naïve Tregs (nTregs) with the following phenotype: CD3+/CD4+/CD45RA+/Foxp3low cells. The percentage of nTregs in cancer patients was higher than the percentage detected in healthy donors. On the other hand, this study revealed that NEO-201 does not bind to fraction II of CD4 T cells in both healthy donors and cancer patients. Fraction II includes effector Tregs (eTregs) with the following phenotype: CD3+/CD4+/CD45RA-/Foxp3high cells. When subjected to t-cell receptor (TCR) stimulation, nTregs undergo proliferation and differentiate into eTregs, which can then infiltrate into tumor microenvironment (TME) and induce suppression of anticancer immunity. Depletion of circulating NEO-201 positive nTregs in cancer patients after NEO-201 treatment may prevent the differentiation of nTregs into eTregs, thus reducing their accumulation in the TME. This study suggests therapy with NEO-201 may reduce Treg-mediated suppression of anticancer immunity. The poster will be presented in person at the San Diego Convention Center, San Diego, CA, on Monday April 8th, 2024. Please stop by poster # 2716 at Poster Section 6, Poster Board number 7 (1.30 p.m.–5.00 p.m.). About Precision Biologics Founded in 2012, Precision Biologics, Inc. is a clinical stage biotechnology corporation focused on developing therapeutic and diagnostic products for the detection and treatment of cancer. The company's antibody drug candidates and diagnostics are designed to detect and target the tumor with minimal damage to healthy cells. Precision Biologics is uniquely positioned to create innovative therapeutics through the use of proprietary cancer vaccines, several of which have demonstrated success in human trials. By marrying this platform with today's breakthrough technologies, the company is developing antibody therapeutics that could change the way we detect and treat cancer. For more information on Precision Biologics, please visit .

临床1期AACR会议临床2期临床结果疫苗

2024-04-02

·佰傲谷BioValley

自身免疫性疾病“微环境”

不少自身免疫病都伴有皮肤病变（简述26种自身免疫性疾病）。作为免疫系统的第一道屏障，皮肤也存在影响疾病进展的免疫微环境。人类和小鼠皮肤中的免疫细胞类型Mucosal Immunol 15, 551–561 (2022)皮肤中的先天免疫细胞群皮肤中的APC包括：肥大细胞，尤其是在肢端部位。皮肤巨噬细胞：包括胚胎来源和招募的单核细胞衍生亚群。先天淋巴细胞(ILC)：1型(如NK细胞)，2型和3型ILC都存在于皮肤中，但ILC2尤其普遍。虽然皮肤ILC与其他粘膜组织中的ILC一样，主要是局部维持和扩张的组织驻留型细胞，但它们表达独特的受体模式，并且特别依赖于IL-18和TSLP的激活和功能。Immunity. 2021 Oct 12;54(10):2305-2320.e11.真皮中的其他DC亚群包括：经典树突状细胞(cDC)：cDC1型：在人皮肤中表达CD141，在小鼠皮肤中表达CD103；cDC2型：在人皮肤中表达CD1c，在小鼠皮肤中表达CD11b。在小鼠真皮中，也有CD103- CD11b-的“双阴性”DC细胞亚群。CD123+浆细胞样DC：在健康皮肤中的含量很少，但在各种疾病的情况下可以显着增加。单核细胞来源的DC细胞(moDCs)：经典单核细胞在进入组织后经过获得II类表达分化而来。人皮肤中表达CD14,小鼠皮肤中表达CD11b和CD64。朗格汉斯细胞(LCs)：主要存在于表皮中，通过延伸其树突以捕获皮肤表面附近的抗原。最近的研究表明，LC实际上是胚胎来源的组织驻留巨噬细胞的一个子集。其特点包括：在皮肤炎症期间，骨髓来源的单核细胞有助于增强朗格汉斯细胞的免疫特性。朗格汉斯细胞已被证明可以促进皮肤中的效应和调节性T细胞反应。最近研究鉴定了两个人类皮肤中的朗格汉斯细胞亚群LC1和LC2，二者的主要分化调节途径之一是EGR1和Notch信号。LC1在炎症微环境下保持稳定，而LC2容易被激活并表现出免疫抑制分子的表达升高。皮肤淋巴细胞：皮肤也是T细胞的密集储存库，整个表皮中约含有2×10^10个。以组织驻留的记忆亚型居多。在小鼠皮肤中，Vγ5Vδ1树突状表皮T细胞（DETC）在妊娠晚期就驻留在表皮中，与朗格汉斯细胞形成稳定的相互作用并产生细胞因子，有助于角质形成细胞的稳态增殖和伤口愈合。人类表皮缺乏DETC，但含有更多的CD8+CD103+ αβ T细胞群，这些细胞可能执行类似的功能。CD4+T细胞占人和小鼠皮肤中αβ T细胞的大部分。这些细胞优先存在于真皮中，但也可以存在于表皮和皮下。具有驻留记忆表型的Tregs占健康成人皮肤CD4+T细胞群的10-30%。皮肤Tregs中可能包含相当比例的胸腺来源Tregs。真皮中还含有丰富的非经典淋巴细胞亚群：真皮γδ T细胞群(小鼠皮肤中比例较人更高）、粘膜相关的不变性T(MAIT)细胞等。在稳定状态下，少量中性粒细胞，单核细胞和αβ T细胞负责检查真皮中的病原体；在炎症刺激下，皮肤驻留DC、巨噬细胞前体细胞、中性粒细胞、T细胞等免疫细胞收到招募，在细胞外基质(ECM)中迅速积聚。γδ T细胞、MAIT细胞和CD4+ Th17细胞则是皮肤IL-17A的主要来源。不同于肠道免疫微环境，使用靶向生物制剂的IL-17与上皮完整性的损害无关。抗IL-17疗法现在是治疗银屑病的主要手段。角质形成细胞则在表皮免疫微环境中表达几种不同的模式识别受体，并在炎症时产生多种细胞因子，包括胸腺基质淋巴生成素(TSLP)、TNF和IL-33等IL-1家族成员。这些细胞因子是激活皮肤免疫细胞和免疫细胞募集到皮肤所必需的。自身免疫病的表皮免疫微环境影响皮肤炎症伴有皮肤先天免疫细胞的显着变化，包括：巨噬细胞、树突状细胞、肥大细胞和ILC显著扩张；新细胞亚群募集，例如嗜酸性粒细胞和中性粒细胞；细胞活化，导致关键表面标志物表达模式改变。在不同类型的自身免疫病中，皮肤中可能存在的APC也有所不同。接触性超敏反应(CHS)：皮肤DC细胞、肥大细胞、嗜碱性粒细胞、血液内皮细胞、抗辐射细胞或朗格汉斯细胞；移植物宿主病(GvHD)：朗格汉斯细胞或角质细胞；银屑病：皮肤DC或朗格汉斯细胞。CHS：在CHS的诱发中，真皮DC是其中最重要的APC。真皮DC捕获的半抗原被呈现给皮肤中的效应T细胞。活化的效应T细胞产生IFNγ并引起皮肤炎症。同时，角质形成细胞收到诱导产生IL-1α，从而激活位于毛细血管后小静脉周围的M2型巨噬细胞。活化的巨噬细胞产生CXCL2，促进真皮DC的积累。银屑病：近期研究发现，表皮免疫微环境(epidermal immune microenvironment)在银屑病的发展中起主导作用。银屑病真皮中，表达CD1c和CD11b的DC2s在预启动阶段迁移到病灶周围皮肤区域，迅速取代EpCAM+++++CD11c low LC细胞，并引发炎症。表皮CD141 cDC1、CD1c cDC2、CD14 moDC和BDCA2 pDC可协调银屑病炎症。CCR2+ CD11c+hi LC在银屑病表皮中释放IL-23。CD5 T细胞在银屑病表皮和真皮中产生IL-17A和TNF-α的能力增强。CD4+CD25+Foxp3+Treg被认为在维持免疫稳态和通过抑制免疫应答调节局部组织炎症方面起重要作用。在银屑病中，Treg抑制功能受损导致辅助性T17/Treg平衡改变。不过Tregs在银屑病发病机制中的确切功能仍不清楚。Cell Mol Immunol (2022)参考文献：1.Zhang, C., Merana, G.R., Harris-Tryon, T. et al. Skin immunity: dissecting the complex biology of our body’s outer barrier. Mucosal Immunol 15, 551–561 (2022). https://doi.org/10.1038/s41385-022-00505-y2.Zhou, Y., Xu, F., Chen, XY. et al. The epidermal immune microenvironment plays a dominant role in psoriasis development, as revealed by mass cytometry. Cell Mol Immunol (2022). https://doi.org/10.1038/s41423-022-00940-83.Kabashima, K., Honda, T., Ginhoux, F. et al. The immunological anatomy of the skin. Nat Rev Immunol 19, 19–30 (2019). https://doi.org/10.1038/s41577-018-0084-54.Liu X, Zhu R, Luo Y, Wang S, Zhao Y, Qiu Z, Zhang Y, Liu X, Yao X, Li X, Li W. Distinct human Langerhans cell subsets orchestrate reciprocal functions and require different developmental regulation. Immunity. 2021 Oct 12;54(10):2305-2320.e11. doi: 10.1016/j.immuni.2021.08.012. Epub 2021 Sep 10. PMID: 34508661.本周好文推荐如需转载请联系佰傲谷并在醒目位置注明出处···

临床研究免疫疗法细胞疗法

2024-03-28

·生物制品圈

Moderna:IL-12 mRNA-LNP蛋白替代疗法抗瘤作用机制

导读：2020年，Moderna研究团队在Clinical Cancer Research（1区, 影响因子11.5）发表文章：《Intratumoral IL-12 mRNA Therapy Promotes TH1 Transformation of the Tumor Microenvironment》。研究者开发了一种IL-12 mRNA-LNP瘤内注射制剂，用于治疗实体瘤，在细胞、多种小鼠模型和肿瘤患者立体培养物中证实了IL-12 mRNA-LNP具有强效的抗肿瘤活性。上篇文章，菌菌对IL-12 mRNA-LNP的序列特征和体内外验证结果进行了详细解读：【耀文解读】Moderna:IL-12 mRNA-LNP蛋白替代疗法序列设计与验证、【耀文解读】一文读懂|IL-12 mRNA蛋白替代疗法实体瘤研究进展。今天，我们将继续剖析其抗肿瘤作用机制，包括同源肿瘤小鼠模型、人源异种移植小鼠模型和患者肿瘤切除样品。01背景介绍MEDI1191是Moderna与阿斯利康联合开发的一款IL-12 mRNA-LNP药物。MEDI1191的序列特征为：优化后的人源IL-12b 和 IL-12a 序列通过多肽连接，并且在IL-12 mRNA的3′ UTR 中掺入了一个 miR122 结合位点，以抑制肝细胞中IL-12的产生，而不影响癌细胞的水平。研究人员先后将IL-12 mRNA-LNP转化结直肠MC38肿瘤细胞、以及负荷不同肿瘤（A20、MC38-S 和 MC38-R）的小鼠模型，验证了IL-12的抗肿瘤活性。另一点需注意的是，由于人源IL12p70在小鼠体内没有生物学活性，因此研究者设计了小鼠(m) IL12 mRNA用于小鼠模型。紧接着，研究者剖析了MEDI1191抗肿瘤的作用机制，结果见下文所述：02IL-12mRNA-LNP的抗肿瘤机制研究2.1 CD8+T细胞对于mIL-12 mRNA最佳抗肿瘤活性是必需的在MC38-R荷瘤小鼠中，给药 7 天后，mIL-12 mRNA 诱导肿瘤浸润 CD8+T细胞呈剂量依赖性增加。mIL-12 mRNA 不会改变肿瘤 FoxP3-CD4+细胞或 FoxP3+ CD4+（Treg）细胞数量。因此，在单剂量 0.05 μg 或 0.5 μg mIL-12 mRNA 后 7 天，观察到 CD8+T细胞与 Treg 细胞比例呈剂量依赖性增加。为了进一步研究 mIL-12 mRNA 对 MC38-R TME 的影响，转录组数据显示，给药后 7 天与 T 细胞谱系丰度相关的转录产物显著增加。与免疫系统完整的小鼠相比，CD8+T细胞耗竭显著降低了mIL-12 mRNA 在MC38-R荷瘤小鼠中的抗肿瘤活性。mIL-12 mRNA 仍然延迟 CD8+T细胞耗竭耗竭小鼠中的肿瘤生长，但 mIL-12 mRNA无法诱导任何的CR。相反，CD4+T 细胞耗竭对mIL-12 mRNA 抗肿瘤活性没有影响。这些数据表明，CD8 +T 细胞依赖性适应性免疫是 mIL-12 mRNA 在MC38-R荷瘤小鼠模型中发挥最佳抗肿瘤活性所必需的。2.2 mIL-12 mRNA 抗肿瘤免疫依赖于IFNγIL-12 的许多已知作用都依赖于激活的 NK 和 T 细胞释放的IFNγ。在注射mIL-12 mRNA 24小时内，激活的NK和NKT细胞（激活标记物CD69增加百分比）呈现剂量依赖性，相反，没有观察到MC38-R 肿瘤内 CD4 +或 CD8+T 细胞的早期激活。给药后7天，肿瘤中的NK细胞数量没有变化，相反，NKT细胞数量出现轻微但显著的增加。MC38-R 荷瘤小鼠中，给药后 24 小时内肿瘤 NK 激活，肿瘤和血浆 IFNγ 水平呈剂量依赖性增加。在 A20 荷瘤小鼠中也观察到类似的 IFNγ 水平的剂量依赖性增加。为了更直接地确定 IFNγ 在 mIL-12 mRNA 抗肿瘤免疫反应中的作用，在给予单次瘤内剂量的 mIL-12 mRNA 之前，用 IFNγ 阻断抗体治疗 MC38-R 荷瘤小鼠。阻断 IFNγ 完全消除了该模型中 mIL-12 mRNA 的抗肿瘤活性。由于 NK 细胞激活有可能导致 IFNγ 释放和肿瘤细胞细胞毒性，因此，在 MC38-R 模型中研究了 NK 和 NKT 细胞耗竭对 mIL-12 mRNA 诱导的 IFNγ 表达和抗肿瘤活性的影响。用抗 NK1.1 消除 NK 和 NKT 细胞导致小鼠外周 IFNγ 对 mIL-12 mRNA 的反应小幅但显著降低。然而，NK细胞和NKT细胞的消耗对该模型中的mIL-12 mRNA抗肿瘤活性没有统计学上的显著影响。MC38-R 荷瘤小鼠给药后 7 天，mIL-12 mRNA 诱导 TH1 TME 转化，表现为TH1 免疫反应基因上调，成熟DC细胞的早期增加（包括 CD103+ 和 CD8 + 交叉呈递 DC 亚群）以及与 DC 丰度和抗原呈递相关的基因表达增加。重要的是，对照 mRNA 不会诱导非特异性 DC 激活。对 MC38-R 肿瘤转录组数据的其他通路分析揭示了 mIL-12 mRNA 给药后 7 天 TME 转化的广泛程度，涉及T细胞和NK细胞激活基因、细胞因子和趋化因子、补体因子以及与细胞外基质（ECM）调节和脂质代谢相关的基因表达增加。给药后 7 天，MC38-R 肿瘤转录组的广泛变化与 mIL-12 mRNA 在该时间点诱导的肿瘤生长的显著抑制密切相关。2.3 mIL-12 mRNA 与PD-L1阻断剂联用，增强抗肿瘤效果IFNγ 是肿瘤和骨髓细胞上 PD-L1 表达的有效诱导剂。因此，研究者试图确定肿瘤内 mIL-12 mRNA 是否会在同源小鼠肿瘤模型的肿瘤微环境中诱导 PD-L1 表达。事实上，给药后 7 天，mIL-12 mRNA会使得MC38-R 肿瘤中免疫浸润细胞的 PD-L1 表达增加。流式细胞术分析显示，肿瘤浸润性 CD11b+骨髓细胞和 CD11b+Ly6C hi单核细胞上的 PD-L1 表达增加，但是，在任何时间点均未检测到 MC38-R 肿瘤细胞上的PD-L1 表达发生显著变化。在肿瘤总 CD11b +骨髓细胞中，低剂量 mIL-12 mRNA 仅在给药后 24 小时和给药后 72 小时诱导 PD-L1，并且这些细胞上的 PD-L1 水平在药后 7 天已恢复至基线。相反，0.05和0.5μg mIL-12 mRNA均增加了肿瘤中Ly6Chi单核细胞上的PD-L1表达，并且这种增加从给药后24小时持续到7天。CD11b +骨髓区室包括中性粒细胞、单核细胞、巨噬细胞、MDSC 和一些 DC。与其他 CD11b + 骨髓细胞群体相比，Ly6Chi 单核细胞/mMDSC 亚群上的 PD-L1 表达更持久，这可能反映了 mMDSC 更强的抑制功能。在 MC38-R 荷瘤小鼠的血液中，给药 24 小时后，mIL-12 mRNA 也会诱导 Ly6Chi 单核细胞上的 PD-L1 表达，并且这种对 PD-L1 的诱导表达在 IFNγ- 阻断抗体存在下会被显著抑制。由于 PD-L1 与 PD-1 的相互作用可以抑制抗肿瘤免疫，因此在携带已建立的 MC38-R 肿瘤的动物中研究了 PD-L1 阻断剂对 mIL-12 mRNA 抗肿瘤活性的影响。与单独使用相同剂量的 mIL-12 mRNA 相比，PD-L1阻断剂与单剂量 0.5 或 5 μg mIL-12 mRNA 的联用可显著改善总体存活率并增加了 CR 小鼠数量。此外，与单剂量 mIL-12 mRNA +抗 PD-L1 组合相比，每周三剂 mIL-12 mRNA +抗 PD-L1 组合的生存率改善趋势不显著。与抗 PD-L1 +单剂量 mIL-12 mRNA 组合（8/15 CR，80%）相比，抗 PD-L1 +三剂 mIL-12 mRNA 组合也导致更多 CR（12/15 CR，80%）。接下来，研究者对抗 PD-L1 增强 MC38-R 荷瘤小鼠 mIL-12 mRNA 抗肿瘤活性的机制。通过用 MC38 免疫显性逆转录病毒抗原肽 p15E 重新攻击脾细胞来量化脾肿瘤肽反应性 T 细胞的频率。给药后 7 天，单独的 mIL-12 mRNA 扩增了脾脏中的肿瘤反应性 T 细胞，但与 mIL-12 mRNA 单一疗法治疗的动物相比，抗 PD-L1 与 mIL-12 mRNA 联合并没有进一步扩增这些细胞。然而，与单独使用抗 PD-L1或 mIL-12 治疗相比，mIL-12 mRNA 与抗 PD-L1 组合确实显著增加了浸润肿瘤的 CD8+T细胞数量。特别是，在给药后 7 天，在用 0.5 μg mIL-12 mRNA 加抗 PD-L1 治疗的 8 只动物中，有 4 只在完全坏死的肿瘤核心周围检测到密集的 CD8+ 免疫浸润。在大多数具有 mIL-12 mRNA +抗 PD-L1 的 CR 动物中，在动物的另一侧再次植入 MC38-R 细胞后，没有观察到肿瘤生长。总之，这些数据表明，PD-L1 阻断增强了 CD8 +T 细胞向 MC38-R 肿瘤的募集，以及 CD8 +T 细胞介导的 mIL-12 mRNA 响应的肿瘤裂解。B16F10-AP3 模型是一种具有最小免疫浸润的 PD-L1 阻断抗性黑色素瘤肿瘤模型。在此模型中，单剂量的 mIL-12 mRNA 转化了 TME，激活 NK 细胞和 DC，增加 CD8+T 细胞浸润和 CD8 +T 细胞与 Treg 的比率，诱导 IFNγ 释放，并另外增加肿瘤、骨髓和细胞上的 PD-L1 表达。在B16F10-AP3 模型中，与对照 mRNA 相比，注射单剂量 0.5 μg mIL-12 mRNA 显著提高小鼠存活率。与 mIL-12 mRNA 相比，注射mIL-12 mRNA +抗 PD-L1 对小鼠存活率和 CR 数量有着非常明显的增加趋势。然而，在 B16F10-AP3 模型中，无论是单独的 mIL-12 mRNA 还是 mIL-12 mRNA+αPD-L1 组合都不能扩增脾肿瘤肽反应性 T 细胞（Trp2 或 p15E 肽），这表明相比在MC38-R 荷瘤小鼠中， mIL-12 mRNA 在B16F10-AP3小鼠模型中诱导抗肿瘤免疫的效率较低。2.4 膜结合型mIL-12 mRNA抗肿瘤活性在MC38-S 双侧肿瘤小鼠中，注射单独使用肿瘤内 mIL-12 mRNA 或者与抗 PD-L1 联合使用，可以促进远端未治疗肿瘤的消退。与注射同种型抗体+ 5 μg 对照 mRNA 治疗的小鼠比，单次注射 0.5 μg 较低剂量的 mIL-12 mRNA 可诱导 3/20 只动物中治疗和远端肿瘤发生完全消退（双侧 CR），并显著提高总体存活率。与 0.5 μg mIL-12 mRNA 相比，较高的 5 μg mIL-12 mRNA 剂量可显著诱导更高的总生存率和更多数量的 CR。相比之下，与单独使用相同剂量的 mIL-12 mRNA 相比，注射αPD-L1 抗体+0.5 或 5 μg mIL-12 mRNA 的组合显著改善小鼠总体存活率。在同源荷瘤小鼠中，瘤内注射mIL-12 mRNA会诱导局部肿瘤mIL-12p70表达，并且外周mIL-12p70会有所增加。为了研究局部IL-12p70单独驱动远端肿瘤部位消退的能力，我们使用编码膜结合型mIL-12p70的mRNA来限制外周mIL-12p70的分泌。相对于分泌型IL-12mRNA，膜结合型mIL-12-mRNA编码的12p70释放到Hela细胞培养物上清液中的量非常低，并且同样会刺激共培养的小鼠 CD8 +T 细胞的 IFNγ 释放。在携带双侧 MC38-S 肿瘤的小鼠中，通过瘤内递送栓系 mIL-12 mRNA，导致 4/20 只小鼠接受治疗的肿瘤和远端肿瘤完全消退（双侧 CR）。与用分泌型 mIL-12 mRNA 处理的动物相比，在注射膜结合型mIL-12 mRNA 小鼠中，检测到循环 mIL-12p70 的增幅最小，同时，血浆中IFNγ诱导也大大降低。这些数据表明，在循环 mIL-12p70 水平不增加的情况下，局部肿瘤 mIL-12p70 表达可以诱导远端肿瘤部位的消退。2.5 MEDI1191在PDX模型中编码分泌人L12p70MEDI1191 编码人源L12p70 蛋白，诱导人单核细胞来源的巨噬细胞和 16 种人肿瘤细胞系中剂量依赖性的 hIL-12p70 释放。体外肿瘤细胞系之间分泌释放的hIL-12p70 产量差异显著，而来自不同供体的单核细胞来源的巨噬细胞之间的 hIL-12p70 产量非常一致。在人CD8+T细胞 IFNγ 释放测定中，MEDI1191编码的hIL-12p70 活性与重组异二聚体 hIL-12p70 的活性相当。左图: MEDI1191诱导16种人肿瘤细胞系中剂量依赖性的 hIL-12p70 释放右图: 用重组重组异二聚体hIL-12p70或者源自MEDI1191转染Hela细胞上清中的hIL-12p70刺激人CD8+T细胞，测定IFNγ分泌水平在ME12057黑色素瘤和HN5111 HNSCC（头颈鳞状细胞癌）PDX 模型中，瘤内 MEDI1191诱导肿瘤和血浆 hIL-12p70 浓度呈剂量依赖性增加。在所有四种 PDX 模型（2种黑色素瘤模型ME12057/ME12058和2种头颈鳞状细胞癌HN5111/HN5116）中，0.5 μg MEDI1191 给药6 小时后，肿瘤或血浆 hIL-12p70 水平没有观察到显著差异，给药24 小时后，HN5116 HNSCC 荷瘤小鼠肿瘤和血浆中的 hIL-12p70 水平显著低于其他模型。2.6 MEDI1191改变肿瘤微环境收集手术切除后的患者肿瘤新鲜样本进行振动切片，并在存在 MEDI1191 或对照 mRNA 的情况下在空气/介质界面处进行体外培养。在所有测试患者肿瘤切片培养物中，MEDI1191 编码释放的hIL-12p70呈现剂量依赖性。同时，MEDI1191 还诱导剂量依赖性分泌IFNγ 和 CXCL10 。虽然 MEDI1191 诱导每个测试患者肿瘤释放 hIL-12p70，但患者肿瘤切片之间的 IFNγ 和 CXCL10 释放变化更大。对来自接受过治疗的结直肠腺癌(CRC)、结直肠肝转移(CRLM)和子宫内膜癌(UCEC)患者的离体培养肿瘤切片上清液中的IL-12p70 (A)、IFNγ(B)和CXCL10(C)进行定量。对振动切片后立即固定的患者肿瘤切片中的 NK 细胞和 T 细胞密度通过 IHC 进行定量。未观察到患者肿瘤切片 IFNγ 释放与T 细胞浸润基线之间的相关性。然而，患者肿瘤切片急性IFNγ释放和NK细胞浸润基线之间呈现正相关。用 MEDI1191 处理的患者肿瘤切片的 NanoString 转录组分析显示，与对照 mRNA 处理的肿瘤切片相比，TH1 反应基因的表达显著增加。值得注意的是，在 MEDI1191 治疗的患者肿瘤切片和 mIL-12 mRNA 治疗的 MC38-R 肿瘤中，IFNG、STAT1 和 GBP2 表达均上调。03总结在多种肿瘤模型中，单次瘤内剂量的鼠源IL-12 mRNA诱导肿瘤消退。这既是 CD8 +T 细胞依赖性的，也是IFNγ依赖性的，并且与特征TH1免疫反应基因的上调相关，从而与TH1 TME转化相关。在PD-L1耐药模型中，PD-L1阻断增强了小鼠 IL-12 mRNA诱导的抗肿瘤免疫。小鼠IL-12 mRNA 也驱动未注射的远端病变消退，抗 PD-L1增强了这种反应。在循环 IL-12 没有增加的情况下，编码膜系小鼠IL-12的mRNA的瘤内递送诱导了未经治疗的病变的消退，支持了局部 IL-12 可以诱导针对远端病变的全身抗肿瘤免疫反应的假设。最后，他们还发现在离体患者肿瘤切片培养中，人IL-12 mRNA （MEDI1191）诱导剂量依赖性 IL-12 产生、IFNγ表达和TH1 TME 转化。总之，这项研究为MEDI1191 (IL-12 mRNA-LNP) 的开发提供了支持，使其可作为一种潜在的新型治疗方法，无论是单独使用还是与PD-L1/PD-1 检查点抑制剂联合使用，用于治疗浅表和深层实体瘤。参考文献：Hewitt SL, Bailey D, Zielinski J, et al. Intratumoral IL12 mRNA Therapy Promotes TH1 Transformation of the Tumor Microenvironment. Clin Cancer Res. 2020 Dec 1;26(23):6284-6298. doi: 10.1158/1078-0432.CCR-20-047.识别微信二维码，添加生物制品圈小编，符合条件者即可加入生物制品微信群！请注明：姓名+研究方向！版权声明本公众号所有转载文章系出于传递更多信息之目的，且明确注明来源和作者，不希望被转载的媒体或个人可与我们联系(cbplib@163.com)，我们将立即进行删除处理。所有文章仅代表作者观点，不代表本站立场。

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