CD276 x CD3 x PDL1

研究背景 近期肿瘤免疫治疗的进展正在改变肿瘤学领域，其通过激活持久的全身免疫反应来消除恶性肿瘤并抑制转移。然而，免疫抑制性的肿瘤微环境(TME)降低了肿瘤的免疫原性，导致治疗响应率不理想并削弱了疗效。最新研究表明，铁死亡这种受调控的细胞死亡机制有望作为增强肿瘤免疫原性、激活抗肿瘤免疫并选择性清除恶性细胞的策略。 Synergistic Ferroptosis–Immunotherapy Nanoplatforms: Multidimensional Engineering for Tumor Microenvironment Remodeling and Therapeutic Optimization Xiao Wei*, Yanqiu Jiang, Feiyang Chenwu, Zhi Li, Jie Wan, Zhengxi Li, Lele Zhang, Jing Wang, Mingzhu Song* Nano-Micro Letters (2026)18: 56 https://doi.org/10.1007/s40820-025-01862-6 本文亮点 1. 首次系统整合：本研究首次全面概述了纳米颗粒介导的铁死亡–免疫治疗策略在抗肿瘤中的协同潜力，突破了以往仅关注铁死亡诱导或单一纳米治疗手段的研究局限。 2. 多维纳米平台设计：建立了功能化纳米平台的先进设计原则，包括合理的材料选择、结构构型、理化调控、多功能整合及人工智能辅助设计，以克服肿瘤微环境屏障并优化铁死亡–免疫治疗的疗效。 3. 转化关注与人工智能整合：对铁死亡–免疫治疗纳米平台在临床前及临床开发中的转化障碍进行了深入分析，提出可行解决方案，同时开创性地将人工智能整合到未来纳米平台设计和肿瘤免疫治疗方向中。 内容简介 新兴的铁死亡–免疫治疗策略通过将功能化纳米平台与铁死亡诱导剂及免疫调节治疗手段相结合，在管理原发性、复发性及转移性肿瘤方面展现出显著潜力。从机制上看，铁死亡诱导不仅能够直接消灭肿瘤细胞，还能促进免疫原性细胞死亡(ICD)，引发损伤相关分子模式(DAMPs)释放，从而激活部分抗肿瘤免疫。然而，单独的铁死亡治疗由于肿瘤固有免疫原性低、免疫抑制性微环境限制以及肿瘤微环境(TME)相关的生理屏障(如缺氧、致密细胞外基质)等内在限制，无法启动强有力的系统性抗肿瘤免疫反应。为应对这些挑战，已经开发出协同策略以增强免疫细胞浸润并重建免疫监视，包括：(1) 直接增强抗肿瘤免疫；(2) 破坏免疫抑制性肿瘤微环境；(3) 重塑TME的生物物理特征。合理的纳米载体设计已成为克服生物传递屏障、优化治疗疗效的关键工具。与以往仅针对铁死亡或纳米技术的肿瘤治疗研究不同，成都大学魏枭、宋明珠等人首次系统阐述了纳米颗粒在铁死亡–免疫治疗联合策略中的协同潜力。研究提出了多维纳米平台设计原则，包括材料选择、结构构型、理化调控、多功能整合以及人工智能辅助设计，为疗效优化提供科学依据。此外，还分析了铁死亡–免疫治疗纳米平台在临床前和临床阶段的转化挑战，提出可操作的解决方案，并展望了未来肿瘤免疫治疗的发展方向。总体而言，本研究为先进纳米材料设计原则与治疗优化策略提供了系统性见解，为加速肿瘤免疫治疗的临床转化提供了路线图。 图文导读 I 铁死亡–免疫治疗纳米载体的精密设计：多维度视角 当前铁死亡–免疫治疗的进展集中在构建具有精确靶向性和可调药物释放特性的功能化纳米平台。优化抗癌纳米治疗的关键考虑因素包括：(1) 根据个体化治疗需求定制纳米载体类型和组分；(2) 战略性调控理化参数(粒径、表面电荷、形态、两亲性)以控制稳定性、体内分布和细胞摄取；(3) 在统一系统中整合多功能，包括肿瘤靶向配体、微环境响应型释放机制和成像模态(如 MRI/荧光)；(4) 人工智能辅助的智能设计，包括辅助纳米材料筛选、预测体内过程和评估纳米颗粒疗效。本节系统讨论了纳米载体的结构工程(如纳米载体分类及其优势/局限)和功能协同如何增强铁死亡诱导、分子成像精度、主动靶向效率及刺激响应行为。通过建立这些设计框架，旨在加速临床可转化的铁死亡–免疫治疗纳米药物的合理开发。 II 纳米策略驱动的铁死亡–免疫治疗协同调控机制 铁死亡–免疫治疗联合策略在肿瘤治疗中表现出协同效应，不仅可消除原发病灶，还能激活系统性免疫以抑制转移和复发。本节从纳米生物医学视角分析增强抗肿瘤免疫的关键策略，包括：(1)直接免疫激活；(2)免疫抑制性肿瘤微环境逆转；(3)肿瘤微环境关键物理特性重塑。 2.1 抗肿瘤免疫的直接增强 2.1.1 增强免疫原性细胞死亡 当前的化疗通过采用细胞毒性试剂来靶向增殖过程，其机制包括DNA片段化、细胞骨架抑制以及ATP合成阻断。蒽环类和DNA损伤剂已知可触发ICD，其特征为CRT外翻和HMGB1释放，从而促进DC成熟及后续T细胞激活。 图1. a SAS/DOX@OHS-PEG纳米调控剂的合成过程。b SAS/DOX@OHS-PEG纳米调控剂通过诱导铁死亡–焦亡来增强“冷”肿瘤免疫治疗并抑制肺转移的示意图。c 4T1细胞处理后的xCT和GPX4表达的Western blot分析。d 4T1细胞在不同处理后的形貌变化(比例尺：50 μm)，显示具有典型的大泡性细胞肿胀(红色箭头)。e 不同处理组的肿瘤生长动力学。f 流式细胞术分析肿瘤中CD11c⁺ DC浸润以及脾脏CD3⁺ T细胞中的CD4⁺/CD8⁺ T细胞群体。g UCDs的设计及其增强肿瘤富集、诱导铁死亡及实现联合治疗的功能特性。h H22肿瘤中CD4⁺、CD8⁺、CD56⁺和F4/80⁺细胞的免疫组织化学分析。 放射治疗通过电离辐射诱导的生物大分子损伤和氧化应激升高来施加局部细胞毒性作用。新兴证据表明其能够诱导ICD，并有潜力重塑免疫抑制性的TME，从而实现全身性抗肿瘤免疫或与免疫治疗产生协同作用。将铁死亡诱导与放射治疗整合于纳米治疗系统中可放大ICD介导的免疫激活。 图2. a CWP的合成及其作用机制：多功能CWP介导的增敏通过PA成像引导的放射-免疫治疗增强乳腺癌治疗效果。b CWP注射(20 mg/kg)后肿瘤负荷裸鼠的体内光声成像。c CWP ± X射线处理4T1细胞的荧光成像：线粒体损伤(JC-1)、脂质过氧化(LPO)以及DNA损伤(γ-H2AX)，并通过DAPI共染进行可视化。d 4T1细胞在不同处理条件下KEAP1、NRF2、HMOX1和GPX4表达的Western blot分析。e 淋巴结中DC成熟(CD80⁺/CD86⁺)的流式细胞术评估。f 脾脏T细胞亚群的流式细胞术分析：CTLs(CD3⁺CD4⁻CD8⁺)和辅助性T细胞(CD3⁺CD4⁺CD8⁻)。g TCPP@Hf-TK-PEG-PAMAM-FA@siHIF-1α纳米组装体的设计及其低剂量放射激活的铁死亡–免疫治疗机制。h CD4⁺/CD8⁺ T细胞浸润及i 远处肿瘤中CD8a⁺CD44⁺CD62L⁻效应记忆T细胞的定量流式细胞术分析。 SDT通过在富氧环境中经由声敏剂活化并在超声触发下产生ROS来诱导癌细胞死亡。先前研究表明SDT具有同时促进ICD和激活抗肿瘤免疫的双重能力。基于这些发现，构建了一种由H₂O₂和超声驱动的介孔锰基纳米马达(CSID@NMs)，其利用TME中过量的H₂O₂通过Mn²⁺介导的类Fenton反应进行反应。该过程同时产生用于CDT的·OH以及用于增强SDT效能的氧气，从而形成协同的铁死亡诱导机制。 图3. a CS-ID@NMs多功能纳米马达的示意图，展示其黏液穿透、深部肿瘤靶向、抗肿瘤效应及免疫激活能力。b 给药后12–72 h胃肠道(GITs)的离体荧光成像。c 不同处理组细胞内GSH含量定量分析。d 不同处理条件下肿瘤细胞中GPX4活性水平。e HMGB1释放和f 细胞表面CRT外翻的CLSM图像(比例尺：100 μm)。 PTT利用近红外激光诱导的热效应，通过吸光材料消融肿瘤。PTT引起的快速坏死产生TAAs，并通过ICD激活和DAMPs释放增强DC成熟。PDT作为另一种光学疗法，利用可见光下的光敏剂将氧转化为细胞毒性ROS，同时诱导肿瘤ICD。将PTT和PDT整合于统一的纳米治疗平台显示出对ICD诱导的协同增强作用。 图4. a 在COFs中整合平面/扭曲基元以实现焦亡–铁死亡启动的癌症免疫治疗。b 对照组与COF-919在不同照射后时间点的体内热成像。c 细胞内ROS生成分析。d 使用BODIPY581/591-C11探针(绿色)对4T1细胞脂质过氧化的共聚焦成像。e 正常细胞与COF-919处理细胞的线粒体超微结构生物TEM观察。f 定量免疫细胞分析：DLNs中的DCs；脾脏/DLNs中的TCM/TEM细胞；脾脏中的Tregs和MDSCs。g E. coli@Cu₂O纳米杂化体的设计，用于TME可激活的NIR-II PTT增强铁死亡/铜死亡免疫治疗。h 处理肿瘤中GPX4和DLAT表达的免疫组织化学检测。i 肿瘤引流淋巴结中脾脏CTLs(CD3⁺CD8⁺CD4⁻)、DC成熟(CD11c⁺CD80⁺CD86⁺)及活化DCs(CD11c⁺MHCII⁺)的比较分析。 此外，Ji等构建了一种肿瘤细胞膜包覆的Cu-MOF纳米颗粒(M/A@MOF@CM)，共负载米托蒽醌(MTO)和阿昔替尼(AXB)，用于协同化疗、PTT和CDT。该多模态平台通过全方位肿瘤靶向同时触发铜死亡、铁死亡和凋亡，促进DAMPs释放和ICD诱导，同时通过抑制VEGF通路抑制Tregs和MDSCs，有效清除原发/继发4T1肿瘤及肺转移。 图5. a M/A@MOF@CM纳米平台的合成方案及其在小鼠癌症模型中的治疗机制。b 水、游离MTO和M/A@MOF@CM在0.82 W cm⁻²照射12分钟下的热成像对比。c 静脉注射游离MTO与M/A@MOF@CM后肿瘤/器官的离体荧光追踪。d HMGB1易位及CRT外翻的共聚焦显微成像可视化。 Sal通过协调上调铁调节蛋白2(IRP2)和TfR1，同时下调铁蛋白，增强细胞内铁水平，从而促进铁死亡。该机制性协同使Sal与其他铁死亡诱导剂联合治疗成为增强铁死亡细胞死亡的策略。丁酸结合的PLGA纳米颗粒BU-NP@Sor/Sal通过双重机制体现了这一策略：索拉非尼(Sor)诱导system Xc⁻抑制和GSH耗竭，而Sal提升细胞内铁水平，形成协同的铁死亡–ICD轴，从而增强抗肿瘤免疫并抑制远处肿瘤生长。 图6. a M/A@MOF@CM纳米平台的合成方案及其在小鼠癌症模型中的治疗机制。b 水、游离MTO和M/A@MOF@CM在0.82 W cm⁻²照射12分钟下的热成像对比。c 静脉注射游离MTO与M/A@MOF@CM后肿瘤/器官的离体荧光追踪。d HMGB1易位及CRT外翻的共聚焦显微成像可视化。 PTT诱导的高温可增强Fenton反应动力学以提升ROS生成，同时加速GSH耗竭，从而削弱LPO清除并协同促进铁死亡和ICD。基于这一机制，先前研究开发了一种没食子酸-阿司匹林-Fe(II)配位聚合物纳米纤维(GAFs)，其中PTT介导的温度升高放大了铁死亡信号以激活抗肿瘤免疫。 图7. a GAFs通过抑制COX-2/PGE2轴实现PTT增强铁死亡–免疫治疗的机制(808 nm照射下)。b 各处理组小鼠肿瘤在5分钟照射期间的实时光热成像。c 处理细胞中ROS生成的共聚焦显微及三维强度图。d 4T1细胞在GAFs ± 激光处理下的CRT表面外翻，共聚焦成像及流式细胞术分析。e 协同策略：通过HBCiF-NPs电荷反转诱导光活化铁死亡并结合PD-L1阻断；PDT诱导的GPX4抑制/ROS积累与iFSP1增强的脂质过氧化协同作用，驱动ICD介导的抗肿瘤免疫。f 不同治疗方案下A549细胞内GSH水平。g 不同处理组的细胞外ATP水平。h 处理后A549细胞中HMGB1由核向胞质的转位及CRT表面表达的共聚焦成像。 鉴于铁蛋白作为主要铁储存蛋白的作用，有针对性地诱导铁蛋白自噬(选择性铁蛋白自噬)可释放Fe²⁺库以增强肿瘤铁死亡。基于这一机制，构建了带聚乙烯吡咯烷酮(PVP)表面修饰的四足尖刺FePd纳米结构(TFP)。 图8. a TFPs的合成方案。b 设计原理：尖刺纳米结构赋能TFPs以协同增强铁死亡–免疫治疗。c TFP注射后0–8 h 4T1肿瘤的体内PA成像。d 处理后4T1细胞的生物TEM观察，显示自噬体/自噬溶酶体(黄色箭头)。e 通过JC-1染色(CLSM)评估4T1细胞的线粒体去极化。 2.1.2 cGAS–STING信号通路激活 cGAS–STING信号轴在胞质DNA监测中起关键作用。当环鸟苷酸-腺苷酸合酶(cGAS)检测到异常的双链DNA(dsDNA)时，会催化环鸟苷酸-腺苷酸(cGAMP)的合成。该二级信使与干扰素基因刺激因子(STING)二聚体结合，引起构象变化，从而促进Tank结合激酶1(TBK1)的募集及随后的干扰素调节因子3(IRF3)磷酸化，最终驱动IFN-β的产生。该级联反应启动关键免疫应答，包括DC成熟、CD8⁺ T细胞/NK细胞激活及IFN-γ上调。铁死亡通过双重机制促进该通路：线粒体损伤释放mtDNA，同时细胞碎片提供胞质dsDNA片段，共同激活cGAS–STING信号。 金属离子通过不同机制调控该通路。Mn²⁺通过提高DNA结合敏感性并稳定cGAS–DNA复合物增强cGAS酶活，即使在亚最优DNA浓度下也能促进cGAMP生成。此外，Mn²⁺增强cGAMP与STING的结合亲和力，放大下游信号。Liang等构建了一种多功能纳米平台(HBMn-FA)，将Hemin、BSO和Mn²⁺整合于FA修饰的PLGA聚合物中。该设计实现了双重激活：(1)BSO/Hemin诱导的铁死亡产生线粒体ROS，导致mtDNA释放，并与Mn²⁺协同启动cGAS–STING信号；(2)铁死亡碎片来源的dsDNA激活DC中的cGAS–STING通路，促进抗原呈递。 图9. a TFPs的合成方案。b 设计原理：尖刺纳米结构赋能TFPs以协同增强铁死亡–免疫治疗。c TFP注射后0–8 h 4T1肿瘤的体内PA成像。d 处理后4T1细胞的生物TEM观察，显示自噬体/自噬溶酶体(黄色箭头)。e 通过JC-1染色(CLSM)评估4T1细胞的线粒体去极化。 与金属离子介导的STING激活相比，通过诱导核或线粒体DNA释放的小分子有机药物已成为cGAS–STING通路的替代激活剂。例如，Guo等开发了表面包覆没食子酸(TA)并复合Fe²⁺和SN38(7-乙基-10-羟基喜树碱)的Fe₃O₄/Gd₂O₃杂化纳米颗粒。该系统利用SN38刺激含DNA外泌体的胞吐，同时Fe²⁺介导的LPO积累诱导质膜破裂，从而协同增强外泌体释放并促进DNA片段向DC传递以激活STING通路。 图10. a FeGd-HN@TA-Fe²⁺-SN38的合成及通过GPX4/STING双通路交叉作用实现免疫铁死亡治疗的机制。b BALB/c小鼠4T1肿瘤在注射FeGd-HN@TA-Fe²⁺-SN38(Fe/Gd剂量：5 mg/kg)与Magnevist®(Gd剂量：5 mg/kg)后的T1加权MRI成像。c 处理4T1细胞的共聚焦成像：(i)–(iv)DNA损伤(8OHdG，绿色)/核共染(DAPI，蓝色)；d 外泌体标志CD63(红色)/核酸染色(PicoGreen，绿色)；e 质膜完整性(DiO，绿色)。f 用(i)–(iv)处理细胞的条件培养基培养骨髓来源DCs(BMDCs)(DAPI核染色)。g 各组(i)–(vi)肿瘤中cGAS–STING通路蛋白(p-STING、TBK1、IRF3)的Western blot分析。h 各组(i)–(vi)肿瘤组织中IFN-β的ELISA定量。i 各组(i)–(vi)肿瘤组织中IFN-γ的ELISA定量。 2.1.3 佐剂驱动的先天免疫激活 作为疫苗的重要组成部分，免疫佐剂通过多重机制放大免疫反应的强度、广度和持久性。这些机制包括DC激活、补体系统参与以及细胞因子/趋化因子调控，共同改善癌症治疗的疗效。近期进展显示，将免疫佐剂(如TLR激动剂、铝基佐剂)与纳米递送平台整合，可在铁死亡介导的免疫治疗中提升APC效率。这种协同作用加速了T细胞驱动的抗肿瘤免疫并建立持久的免疫记忆。 值得注意的是，CpG ODNs——合成的TLR9激动剂——可诱导DC成熟，上调MHC-II表达，并刺激Th1极化及促炎细胞因子产生。基于此，Gao等使用DAPC脂质构建脂质体以包封CpG ODNs。肿瘤相关ROS触发DAPC脂质过氧化，同时诱导铁死亡并释放CpG ODNs。这种双重作用增强了DC成熟及CD8⁺ T细胞效应功能，形成自我增强的适应性免疫循环。 图11. a 靶向脂质体平台示意图，实现协同铁死亡–免疫治疗。b 治疗后血清IL-6定量。c 治疗后血清TNF-α定量。d 脾脏DC成熟分析(CD80⁺/CD86⁺比值)。e 治疗1天后肿瘤中CD8⁺ T细胞浸润(IHC成像)。f BLD构建体的合成及TME响应下Fe³⁺/Al³⁺/DHA释放机制。g 淋巴结中DC成熟(CD11c⁺CD80⁺/CD86⁺)的流式细胞术分析。h 脾脏CD8⁺/CD4⁺群体中记忆T细胞亚群(CD44⁺CD62L±)。 将铝基佐剂与CpG ODNs策略性组合，可通过提高抗原呈递效率和放大抗肿瘤免疫，实现免疫激活的协同增强。为体现这一模式，Shi等开发了包封CpG ODNs的铝磷酸盐纳米载体，并在表面包覆铁-紫草酮金属-酚网络(Alum-CpG@FeShikonin NPs)，构建原位个性化纳米疫苗。肿瘤细胞内吞后，Fe-紫草酮壳解离生成Fe²⁺和紫草酮，共同诱导铁死亡和坏死性凋亡驱动的ICD。在此过程中释放的肿瘤来源抗原被铝纳米颗粒捕获，并与CpG ODNs共同递送至专业APC，启动多阶段抗肿瘤免疫级联反应。 图12. a 通过自体肿瘤裂解物联合佐剂递送，共同诱导免疫原性铁死亡/坏死性凋亡的组合免疫治疗。b 各处理组4T1肿瘤小鼠血清IL-6水平(平均值 ± SD，n = 3)。c 各处理组血清TNF-α水平(平均值 ± SD，n = 3)。d 肿瘤引流淋巴结(TDLNs)中成熟DCs(CD11c⁺CD80⁺CD86⁺)的流式细胞术定量(n = 3)。e 远处肿瘤中M1/M2巨噬细胞极化比值(F4/80⁺CD206⁻CD86⁺/F4/80⁺CD206⁺CD86⁻)(n = 3)。f 远处肿瘤中CD3⁺CD8⁺ T细胞及Tregs(Foxp3⁺)的免疫组化染色。 2.2 破坏免疫抑制性肿瘤微环境 2.2.1 与ICB基础治疗的协同 免疫检查点通过配体–受体相互作用向免疫效应细胞传递抑制信号，从而抑制抗肿瘤免疫。虽然该机制可维持自身耐受性并防止自身免疫性组织损伤，但恶性细胞利用这些通路逃避T细胞介导的免疫监视。针对CTLA-4、PD-1或PD-L1的免疫检查点阻断(ICB)疗法通过破坏抑制性信号轴抵消这一免疫抑制，从而恢复T细胞功能并增强系统性抗肿瘤反应。铁死亡诱导与ICB的联合显示出通过互补机制的治疗协同作用。铁死亡通过促进免疫细胞浸润并将免疫惰性(“冷”)肿瘤转化为反应性(“热”)微环境，从而提升肿瘤免疫原性并改善ICB疗效。反之，ICB通过抑制免疫抑制网络并建立免疫记忆，弥补铁死亡的局限性，降低转移潜力并防止复发。 PD-1/PD-L1免疫检查点轴中，PD-1在肿瘤浸润免疫细胞上表达，PD-L1在肿瘤细胞上表达，通过促进肿瘤免疫逃逸在抑制适应性抗肿瘤免疫中起关键作用。当前治疗策略将PD-1/PD-L1抗体与铁死亡诱导剂联合使用，以同时阻断该免疫抑制通路并增强抗肿瘤免疫反应。除了传统抗体，最新研究还强调了PD-L1拮抗肽、核酸、酶以及小分子药物作为免疫检查点抑制剂的潜力。 近期进展包括一种铁死亡纳米平台(DPPA-RRPNP@Fe₂O₃)，通过将阻断PD-L1的D肽(DPPA-1)静电吸附于DMSA@Fe₂O₃纳米颗粒上构建。该系统通过铁死亡与ICB联合协同诱导ICD及T细胞活化，实现更优的肿瘤免疫治疗效果。 图13. a DPPA-RRPNP@Fe₂O₃的合成。b DPPA-RRPNP@Fe₂O₃协同ROS清除、免疫检查点阻断及化疗-铁死亡介导的抗肿瘤免疫。c 各处理组肿瘤细胞PD-L1表达的流式细胞术分析(平均值 ± SD，n = 3)。d 肿瘤浸润CD3⁺CD8⁺ T细胞定量。e 肿瘤浸润CD3⁺CD4⁺ T细胞定量。f 第31天通过荧光素酶生物发光成像检测肺转移。 平行研究探索了PD-L1 DNA适配体(Apt-PD-L1)以利用其高特异性和组织穿透能力。Zhang等将Apt-PD-L1与诱导铁死亡的纳米反应器结合，以放大TAA释放并增强免疫浸润。另一种方法将抗PD-L1脱氧核糖核酶(DZ)装载于Mn²⁺/Fe³⁺杂化金属-酚网络(DZ@TFM)中，有效沉默PD-L1并诱导铁死亡–免疫治疗。DZ@TFM处理显著下调PD-L1表达，并通过铁死亡与PTT的协同作用增强DC成熟。值得注意的是，若干有机小分子显示出对PD-1/PD-L1通路的有效阻断作用。一个代表性例子是构建半导体聚合物基金属–酚网络(PFG MPNs)，其中共同包封了铁死亡诱导剂Fe³⁺和外泌体抑制剂GW4869。该PTT活性平台靶向PD-L1外泌体分泌，从而逆转DC成熟抑制和T细胞功能障碍，同时将PTT与铁死亡诱导的ICD协同作用，增强抗肿瘤免疫。 图14. a Apt-PD-L1介导的免疫检查点阻断机制。b 肿瘤切片中PD-L1的免疫荧光染色及CD4⁺/CD8⁺ T细胞浸润的免疫组化分析。c B16F10黑色素瘤细胞中PD-L1表达的Western blot分析。d 肿瘤引流淋巴结中DC成熟(CD80⁺/CD86⁺)的定量评估。e IFN-γ预处理后LPO水平的荧光成像。f PFG MPNs设计：光热成像/治疗介导的外泌体免疫抑制缓解、铁死亡增强及免疫激活。g PFG MPNs在肿瘤中的体内NIR-II荧光成像、PA成像及热成像。h 肿瘤引流淋巴结(TDLNs)中成熟DCs(CD11c⁺CD80⁺CD86⁺)的流式细胞术分析。i 肿瘤来源外泌体中特异性PD-L1和CD63的Western blot检测。j 肿瘤引流淋巴结中GzmB⁺CD4⁺/CD8⁺ T细胞(CD3⁺门控)的流式细胞术分析。 T细胞上的CD28与DC上的B7分子相互作用，提供T细胞活化的关键共刺激信号。然而，T细胞上表达的CTLA-4通过其对B7的结合亲和力高于CD28，从而竞争性抑制该过程，抑制T细胞活化并作为免疫检查点。为抵消这一免疫抑制机制，抗CTLA-4抗体被用于阻断抑制信号并增强T细胞活化，为改善铁死亡介导的免疫治疗提供协同策略。在近期研究中，抗CTLA-4抗体被整合到多功能纳米颗粒(FeCO-IR820@FeIIITA)中，该纳米颗粒由没食子酸、CO前药(FeCOPBA)、Fe³⁺离子及光敏剂IR820组成。在近红外(NIR)照射下，FeCO-IR820@FeIIITA组显示最强的绿色荧光，表明CO释放、IR820光热效应及Fe³⁺介导铁死亡共同驱动了强烈的ROS生成。 NLG919作为直接的IDO酶抑制剂，与索拉非尼共同负载于铁蛋白修饰的聚合物载体上，形成纳米治疗平台，可诱导依赖铁蛋白自噬的铁死亡。该策略促进DC成熟，增强肿瘤浸润T细胞群体并提升细胞因子分泌，有效重编程免疫抑制性TME。相比之下，吲哚昔莫(IND)通过调控犬尿氨酸(Kyn)代谢抑制IDO通路。Huang等通过Fe³⁺与酚基螯合及多巴胺聚合开发了多功能纳米平台(FIP)，该系统可自驱动释放IND，同时放大氧化应激，协同增强铁死亡与光热IDO免疫治疗。 图15. a 各处理组细胞内ROS水平的共聚焦显微成像(使用DCFH-DA探针)。b 4T1肿瘤小鼠的肿瘤生长动力学，每2天监测一次，共14天。c 七个实验组的肺脏大体形态及H&E染色切片。d FIP纳米系统设计，实现铁死亡、光热治疗及免疫激活的组合治疗。e 处理后4T1细胞的犬尿氨酸(Kyn)抑制率。f 通过ELISA定量Kyn/Trp比值。g 治疗后脾脏记忆T细胞(CD44⁺CD62L⁺)的流式细胞术分析。h 肿瘤浸润CD8⁺ T细胞的流式细胞术定量。i 肿瘤浸润Tregs(CD4⁺Foxp3⁺)的流式细胞术定量。 近期研究报道了一种创新的自放大铁死亡诱导金属有机框架(Fe³⁺-H₂BDC MOF)，可协同启动铁死亡与ICD。该双重作用系统在释放“寻找我”信号(如ATP)和“吞噬我”信号(如CRT)的同时，联合应用抗CD47抗体以中和免疫抑制信号，有效重编程TME。体外验证中，使用荧光素酶标记的4T1小鼠乳腺癌细胞，经抗CD47处理后生物发光显著下降(p < 0.01)，证实巨噬细胞吞噬能力增强。为优化治疗递送，研究人员构建了一种新型纳米平台，将高亲和力CD47抑制肽PEP20与MMP-2响应连接子整合在一起。该结构被接枝于M1巨噬细胞膜包覆的纳米颗粒上，同时负载Ce6和没食子酸(MP@CH/BSA NPs)，形成一个多模态系统，可同时实现巨噬细胞活化和T细胞刺激。 图16. a 各处理组中RAW264.7巨噬细胞介导的4T1-Luc细胞吞噬的共聚焦显微成像。b 肿瘤浸润CD3⁺CD4⁺辅助T细胞(Ths)及淋巴结中CD11c⁺CD80⁺CD86⁺成熟DCs的流式细胞术分析。c 肿瘤浸润CTLs(CD3⁺CD8⁺)的流式细胞术定量。d, e MMP-2响应的MP@CH/BSA NPs设计及体内肿瘤靶向机制。f 处理后FITC⁺PE⁺ BMDM/4T1共培养体系的流式细胞术定量。g 不同治疗方案下4T1肿瘤生长曲线。h 肿瘤切片中CD4⁺(红)与CD8⁺(绿)T细胞的免疫荧光共定位。i 治疗后4T1肿瘤小鼠血清细胞因子谱(IFN-γ/TNF-α/IL-6)热图。 B7-H3(CD276)是一种跨膜蛋白，于2001年被鉴定为B7超家族成员，在多种恶性肿瘤中表现出肿瘤特异性高表达，而在正常组织中表达极低。该免疫调节分子可抑制T细胞活化。与传统单克隆抗体不同，双特异性抗体(BiAbs)通过工程化构建将两个不同的单链可变片段结合在一起。值得注意的是，双特异性T细胞接合器可同时与T细胞上的CD3ε及肿瘤相关抗原(TAA)结合，促进效应T细胞与肿瘤细胞之间免疫突触的形成，从而触发T细胞活化、炎症性细胞因子释放及随后的肿瘤细胞裂解。基于这一机制，Fan等开发了MMP-2响应纳米颗粒(S-biAb/dEGCG@NPs)，整合抗B7-H3 × CD3双特异性抗体(BiAbs)、表没食子儿茶素没食子酸二聚体(dEGCG)及透明质酸-PLGLAG-dEGCG共轭物，以增强胶质母细胞瘤中的免疫耐受逆转和铁死亡。 图17. a S-biAb/dEGCG@NP介导的铁死亡增强型胶质母细胞瘤(GBM)免疫治疗示意图。b 各处理组U87细胞脂质过氧化水平的共聚焦成像(C11-BODIPY染色)。c 治疗后第35天原位GBM模型的MRI及H&E染色脑切片。d GBM小鼠生存曲线(n = 8)。e 脑内浸润CD3⁺/CD4⁺/CD8⁺ T细胞的流式细胞术定量。f 肿瘤浸润淋巴细胞(TILs)中CD8⁺ T细胞/Treg比例的流式细胞术分析。 2.2.2 免疫抑制性细胞群的精准调控 免疫抑制性细胞通过抑制过度免疫活化来维持免疫稳态，从而防止自身免疫疾病。然而，肿瘤相关免疫抑制性群体，包括肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)、调节性T细胞(Tregs)、髓系来源抑制细胞(MDSCs)及肿瘤相关中性粒细胞(TANs)，反而通过细胞因子介导的信号促进肿瘤进展，包括转移、血管生成及免疫逃逸。因此，针对这些免疫抑制性细胞群进行治疗性调控，以克服肿瘤免疫耐受，是增强基于铁死亡免疫治疗疗效的有前景策略。 在TME中，TAMs主要表现为促进肿瘤发生的M2极化表型。这些细胞通过多种机制增强免疫逃逸：(1)表达免疫检查点配体(如PD-L1)；(2)分泌抗炎细胞因子(IL-10)；(3)通过VEGF介导血管生成。将M2 TAMs重编程为具有肿瘤杀伤功能的M1巨噬细胞成为对抗免疫抑制并增强铁死亡-免疫治疗的潜在策略。值得注意的是，铁负荷已被证明可通过激活干扰素调节因子5通路并抑制精氨酸酶-1诱导M1极化，从而改变M1/M2平衡。基于这一铁介导的极化机制，He等设计了一种半导体聚合物纳米免疫调节剂(SINM)，其特征为Fe³⁺螯合支架和PEG化侧链。 图18. a SINM的合成方案及化学结构。b 铁介导的铁死亡与金属免疫治疗机制在还原性TME中的作用。c 时空可控SINM实现体内精准声-金属免疫治疗。d BMDM在12 h SINM/SPCN孵育+60 s声波处理后的极化分析(M1/M2)。e TAMs(F4/80⁺)中M1(iNOS⁺)/M2(CD206⁺)巨噬细胞比例。f 第10天肿瘤引流淋巴结(TDLNs)中DC成熟度(CD80⁺/CD86⁺)。g Fe3O4@CM-ADA/CB-VNP的主客体共轭合成。h FeAM肿瘤靶向策略，结合铁死亡诱导与抗肿瘤免疫激活。i 各治疗组疗后代表性肿瘤形态。j,k 治疗24 h后肿瘤组织中DC成熟度(CD86⁺/CD11c⁺)定量分析。l 肿瘤组织中M1(CD11c⁺)/M2(CD206⁺)巨噬细胞比例。 M2巨噬细胞独特的代谢特征，尤其是其可诱导一氧化氮合酶(iNOS)/NO•表达较M1低，为治疗提供了机会。在机制上，iNOS催化精氨酸生成NO•，抑制15-脂氧合酶介导的氧化反应，从而限制脂质过氧化物(LPO)积累，使M2巨噬细胞对铁死亡产生耐受性。为了利用这一脆弱性，设计了一种仿生铁死亡诱导剂(D@FMN-M)，通过包封DHA和掺铁MSNs，并表面修饰外膜囊泡。 图19. a D@FMN-M组装方案。b D@FMN-M介导的肿瘤细胞/M2-TAMs双重铁死亡诱导增强抗肿瘤免疫。c 各处理组脂质过氧化(Lipfluo⁺)流式细胞术定量。d 巨噬细胞极化分析(M1/M2)及肿瘤中CD163⁺ M2-TAMs的t-SNE映射。e 4T1肿瘤模型中DC成熟度(CD80⁺/CD86⁺)及CD4⁺/CD8⁺ T细胞谱分析。f TAMs/M0巨噬细胞/Hepa1-6细胞在Man@pSiNPs-erastin处理后的细胞活力。g 不同治疗条件下TAM亚群(Arg-1⁺/CD206⁺)浸润免疫荧光染色。 新兴证据表明，肿瘤相关中性粒细胞(TANs)在TME内自发经历铁死亡，其释放的脂质过氧化物(LPO)损伤T细胞功能并促进肿瘤进展。靶向中性粒细胞铁死亡提供了一种缓解肿瘤免疫抑制的潜在治疗策略。在此背景下，研究人员开发了双功能脂质体(LLI)，共同负载ICD诱导剂Icy7和铁死亡抑制剂Liproxstatin-1，同时在肿瘤细胞中诱导ICD并抑制中性粒细胞铁死亡，从而重编程免疫抑制性TME并建立持久抗肿瘤免疫记忆。 图20. a LLI纳米药物实现免疫原性PDT/中性粒细胞靶向免疫治疗，以增强抗PD-1®疗效并诱导远端免疫。b CD71 MFI与M2-TAM浸润的相关性。c CD8⁺ T细胞丰度。d 肿瘤中DC成熟度。e 与LLI预处理中性粒细胞共培养后，GzmB⁺CD8⁺ T细胞流式细胞术定量。f 与LLI激活中性粒细胞共培养后CD8⁺ T细胞增殖(CFSE稀释)。g 各处理组肿瘤中M1/M2-TAM比例流式细胞术定量。h 肿瘤中DC成熟度(CD80⁺/CD86⁺)流式分析。 2.3 肿瘤微环境的生物物理特征重塑 2.3.1 调控肿瘤内缺氧 缺氧是多种恶性肿瘤TME的典型特征，由血管供氧不足和快速增殖的肿瘤细胞对氧需求增加共同导致。这种缺氧状态激活缺氧诱导因子(HIF)及其下游信号通路，推动肿瘤侵袭性、进展及转移潜能，同时通过多种机制促进免疫逃逸。HIF介导的途径刺激免疫抑制性细胞因子产生，促进TAM向M2型极化并增强MDSC功能。值得注意的是，HIF-1α的稳定化使缺氧肿瘤细胞通过增强脂肪酸代谢和脂质储存抵抗铁死亡，从而减轻过氧化物对细胞膜的损伤。 新兴研究表明，肿瘤来源的外泌体携带的miR-301a可激活TAMs中的PTEN/PI3Kγ信号通路，进一步促使其分化向促肿瘤M2表型。在针对这一机制的治疗策略中，Li等设计了一种多功能纳米粒子系统(Cu2−xSe/ZIF-8@Era-PEGFA)，其结构包括硒化铜核、沸石咪唑骨架-8(ZIF-8)壳层以及erastin负载。 图21. a Cu₂₋ₓSe/ZIF-8@Era-PEG-FA的合成方案。b Cu₂₋ₓSe/ZIF-8@Era-PEG-FA通过将H₂O₂转化为O₂并消耗GSH来驱动铁死亡、重新极化TAMs并激活抗肿瘤免疫。c 各处理组细胞内O₂荧光成像(Ir(III)探针)。d 肿瘤切片中HIF-1α的免疫荧光分析。e 外泌体PD-L1 mRNA水平的qRT-PCR定量。f 肿瘤中M2-TAMs(CD206+)浸润情况。g 4T1肿瘤模型肺转移灶生物发光成像。h CMS纳米平台在触发铁死亡的同时重编程TAMs/DCs以增强抗肿瘤免疫。i H₂O₂/CMS体系中随时间变化的溶解O₂动力学(左)；不同H₂O₂浓度下CMS + H₂O₂反应(右)。j CMS处理的4T1细胞中ROS的共聚焦成像(DCFH-DA)。k 肿瘤中M1(iNOS+)/M2(CD206+)巨噬细胞比例的流式细胞术分析。l 肿瘤中CD8+ T细胞浸润分析。 2.3.2 肿瘤细胞外基质的精确调控 失调的ECM作为肿瘤微环境的关键组成部分，在恶性肿瘤中表现出典型的病理性改变。肿瘤相关ECM通过过度胶原交联以及糖蛋白/糖胺聚糖的过度生成而显著致密化。这种结构重塑具有双重致癌效应：增强的基质刚度促进肿瘤侵袭和转移，同时阻碍治疗药物的渗透并限制抗肿瘤免疫细胞的浸润，从而最终降低治疗效果。新兴研究指出，ECM重塑是一个有前景的治疗靶点，尤其考虑到胶原在ECM组成中的主导作用。策略性胶原降解可能抑制转移、改善纳米载体介导的药物递送，并增强免疫效应细胞的浸润，从而增强基于铁死亡的免疫治疗。基于这一原理，研究者开发了T-FeCo/P纳米载体—以特尔米沙坦-PEG2000修饰的Fe/Co双金属MOFs，包载组蛋白去乙酰化酶(HDAC)抑制剂泛比诺司他。这种双靶向系统有效作用于4T1细胞和癌相关成纤维细胞(CAFs)，在诱导铁死亡的同时通过胶原降解介导ECM破坏。重塑后的肿瘤微环境增强了CTL浸润和药物渗透，同时调控NF2/Hippo-YAP通路并减少MDSC募集，共同使肿瘤对铁死亡敏感。 图22. a T-FeCo/P介导的铁死亡激活与ECM重塑协同增强抗肿瘤免疫。b 4T1/CAF肿瘤中不同处理组的ROS(DCFH-DA，绿色)和脂质过氧化(LPO，C11-BODIPY，红色)共聚焦成像。c Western blot分析各处理组ECM标志物(Collagen I/α-SMA)表达。d 4T1/CAF模型中IFN-γ/CXCL12/EGF水平的热图分析(平均值 ± SD，n = 3)。e 肿瘤切片的H&E(坏死)、TUNEL(凋亡)及Masson三色染色(纤维化)(比例尺：50 μm)。f 流式细胞术定量分析肿瘤浸润CTLs(CD3+CD8+)。g 流式细胞术分析MDSCs(CD11b+Ly-6G+)浸润情况。 2.4 铁死亡–免疫治疗中的纳米药物：临床前景 尽管靶向铁死亡–免疫治疗的抗癌药物开发仍需长期探索，但在阐明铁死亡–免疫相互作用机制和纳米药物递送技术方面的关键进展显示出可喜的临床转化潜力。目前，进入临床试验的铁死亡诱导剂仍然有限。例如，Imetelstat 通过调控脂肪酸代谢促进多不饱和脂肪酸磷脂(PUFA-PL)合成，触发脂质过氧化和氧化应激，从而在急性髓系白血病(AML)细胞中诱导铁死亡。在AML患者来源异种移植模型的随机II期试验中，Imetelstat 显著降低白血病负荷并延长生存期。在临床前模型中，GPX4抑制剂 cyst(e)inase 联合免疫治疗可协同增强T细胞介导的抗肿瘤免疫，同时诱导癌细胞铁死亡。此外，零价铁纳米颗粒(ZVI-NPs)可在肺癌细胞系中引发线粒体功能障碍、氧化应激及脂质过氧化，从而触发铁死亡并重塑肿瘤微环境，实现强效抗肿瘤作。值得注意的是，多种FDA批准的药物可诱导铁死亡，从而提升抗肿瘤疗效。例如，Sorafenib 已获准用于肝癌、肾癌及甲状腺癌，其通过抑制 System Xc− 并激活铁死亡发挥作用。在乳腺癌中，拉帕替尼与溶酶体破坏剂 siramesine 联用可扰乱铁代谢并触发脂质过氧化。同样，奥曲肽(批准用于卵巢癌)可直接抑制GPX4，诱导铁死亡并增强抗肿瘤免疫。抗疟药青蒿素通过降低谷胱甘肽(GSH)水平并增加头颈癌细胞内ROS，实现铁死亡诱导及免疫激活。 III 总结与展望 近年来，将铁死亡诱导纳米平台与免疫调节剂整合的研究取得了显著进展，推动了协同铁死亡–免疫治疗策略的发展。这些方法不仅旨在消除原发肿瘤，还可激活系统性抗肿瘤免疫，从而抑制转移及复发性病灶。这类创新为未来癌症治疗建立了概念框架，并有望引发治疗模式的潜在转变，超越传统疗法。纳米材料工程的发展在推动肿瘤免疫治疗方面发挥了关键作用，其中合理的纳米载体设计已成为决定铁死亡–免疫治疗效果的重要因素。 首先，当前的纳米平台定制利用了多样化的材料组成和结构配置。铁基纳米材料占主导地位，因为其可提升细胞内铁水平，从而增强Fenton反应并产生细胞毒性活性氧(ROS)。仿生系统采用细菌膜囊泡、肿瘤细胞衍生物或巨噬细胞启发的构造，可实现增强的免疫逃逸、延长循环时间及肿瘤靶向能力。血红蛋白基载体兼具供氧(用于光动力疗法)和提供铁源(用于铁死亡诱导)的双重优势，为药物递送系统设计提供了新视角。 其次，纳米载体的结构决定了治疗性负载物的装载方式，包括疏水相互作用、π–π堆叠、电荷吸附或共价连接。关键的理化参数——如尺寸、表面电荷、形态、两亲性及光学特性——显著影响生物稳定性、体内分布、细胞内吞及最终治疗效果。对这些性质的战略性调控是优化纳米平台性能的核心策略。 第三，通过化学修饰构建的多功能纳米载体可实现：(1) 通过配体–受体相互作用的靶向递送，(2) 在特定理化条件下的刺激响应药物释放，以及 (3) 集成生物成像能力以监控治疗过程。材料选择进一步影响治疗潜力，其中活性Fenton金属基纳米材料、GSH耗竭型纳米酶及富含多不饱和脂肪酸(PUFA)的脂质体在增强铁死亡方面表现出显著优势。 最后，肿瘤微环境(TME)具有显著免疫抑制性、低氧、高抗氧化防御及致密ECM等特点，对治疗形成挑战。尽管纳米材料工程能够解决部分障碍，但全面的解决方案仍需多模式策略，以实现：(1) 放大免疫原性细胞死亡，(2) 逆转免疫抑制，(3) 重塑低氧及ECM丰富的TME特征，(4) 恢复免疫监视，(5) 加速抗原呈递细胞成熟，以及 (6) 增强肿瘤浸润免疫效应细胞群体。此类综合方法最大化了铁死亡–免疫治疗范式的治疗潜力。 作者简介 宋明珠 本文通讯作者 成都大学 高级实验师 ▍个人简介 宋明珠，高级实验师，实验中心副主任，Chiang Mai University 、University of Georgia 高级访问学者；硕士研究生创业导师, 成都青创园创业导师， “互联网+ 、挑战杯”等赛事优秀指导教师与终审评审专家，指导项目获“挑战杯”国赛-特等奖；2017年入选四川省优秀创新创业导师人才库首批入库专家；四川省科学技术厅省级创业导师库专家；四川省川商总会战略发展研究院智库专家；现任《iMeta》、《Exploration》、《Food & Medicine Homology》、《Science of Traditional Chinese Medicine》、《Nature Reviews Immune Inflammation》、《Current Medicinal Chemistry》国际学术期刊青年编委。 ▍Email：songmingzhu@cdu.edu.cn 魏枭 本文通讯作者 成都大学 特聘副研究员 ▍主要研究领域  多功能纳米药物递送系统的设计与制备及其抗肿瘤机制研究。 ▍主要研究成果 近年来在Advanced Materials等国际学术期刊上发表SCI论文10余篇，其中第一作者或通讯作者5篇且总影响因子大于60。主持四川省自然科学基金项目(青年科学基金)1项，成都大学人才工程科研启动项目1项，参研国家自然科学基金项目3项。申请中国专利2项，授权1项。2021年指导学生参加科技创新活动获奖4项，包括第十六届“挑战杯”四川省大学生课外学术科技作品竞赛分获一等奖、二等奖共2项；第十二届中国大学生服务外包创新创业大赛2项，分获西部区域赛二等奖，创业实践类全国三等奖。2022年指导学生参加2022“挑战杯”中国农业银行四川省大学生创业计划竞赛获得2项银奖。 ▍Email：weixiao@cdu.edu.cn 撰稿：《纳微快报(英文)》编辑部 编辑：《纳微快报(英文)》编辑部

免疫检查点抑制剂（ICI）的临床局限源于两重核心障碍：一方面，免疫“冷肿瘤”因突变负荷低、MHC-I表达下调，肿瘤特异性T细胞数量稀少，难以启动有效免疫应答。另一方面，肿瘤微环境（TME）中髓系细胞（如肿瘤相关巨噬细胞、髓系来源抑制细胞）高表达PD-L1等抑制分子，通过PD1/PD-L1轴诱导T细胞耗竭，形成强效免疫抑制屏障。     双特异性TCE（如CD19xCD3、BCMAxCD3）虽在血液瘤中获批应用，但其仅靶向肿瘤抗原与T细胞CD3，无法破解实体瘤的免疫抑制微环境。研究发现，髓系细胞表面的PD-L1对免疫抑制的贡献甚至超过肿瘤细胞，且T细胞激活后分泌的IFNγ会进一步上调PD-L1表达，形成“适应性抵抗”。因此，开发同时具备“T细胞重定向杀伤”与“免疫抑制解除”功能的多特异性分子，成为突破实体瘤免疫治疗瓶颈的关键方向。     近日,上海交通大学研究开发出三特异性抗体B7H3xCD3xPD-L1，通过同时靶向肿瘤抗原B7H3、T细胞CD3及免疫抑制分子PD-L1，实现“T细胞激活-髓系细胞重编程-免疫微环境重塑”三重作用，在患者来源模型及人源化小鼠中展现强效抗肿瘤活性，为实体瘤免疫治疗提供全新解决方案。 一：免疫“冷肿瘤”中存在可利用的旁观者T细胞     研究通过单细胞RNA测序分析17种癌症、300例患者的免疫细胞特征，发现卵巢癌（OV）、结直肠癌（CRC）等免疫“冷肿瘤”中，肿瘤特异性耗竭CD8⁺T细胞（CD8⁺Tₑₓ）比例虽低，但总T细胞浸润量高，且这些T细胞高表达IFNG、GZMB等功能分子，提示其为具备细胞毒性潜力的“旁观者T细胞”。      进一步实验验证：从卵巢癌、结直肠癌患者肿瘤组织中分离的T细胞，经CD3/CD28刺激后，CD8⁺T细胞中CD25（激活标志物）、Ki67（增殖标志物）及TNF的表达显著升高，而胶质母细胞瘤（GBM）来源的T细胞无明显激活，证实OV、CRC中的旁观者T细胞具备功能可及性。空间转录组分析进一步发现，这些功能T细胞的活性与PD-L1表达呈正相关，与肿瘤抗原B7H3呈负相关，提示PD-L1介导的免疫抑制是限制其功能的关键因素。 二：B7H3xCD3xPD-L1的设计与多重作用机制     基于上述发现，利用自主研发的TROY-Ig平台，设计出三特异性抗体B7H3xCD3xPD-L1，其结构与功能具有亮大创新特征：     （一）精准靶向设计:1)双价B7H3结合臂：以高亲和力靶向泛癌抗原B7H3（在卵巢癌、结直肠癌等实体瘤中高表达），确保肿瘤抗原依赖的特异性靶向，避免脱靶激活。2)单价CD3结合域：通过柔性linker嵌入重链之间，降低CD3亲和力以减少T细胞非特异性激活，仅在肿瘤微环境中通过B7H3的高亲和力结合实现局部T细胞激活。3)PD-L1结合模块：通过刚性linker融合于Fc端，同时阻断PD-L1介导的免疫抑制，并介导髓系细胞与T细胞的相互作用。4)Fc段工程改造：采用“knob-in-hole”突变促进异二聚化，同时引入L234A/L235A/P329G突变消除FcγR结合，避免抗体依赖的细胞毒性（ADCC）导致的正常细胞损伤，保留FcRn介导的半衰期延长功能。      （二）多重作用机制：1）T细胞重定向杀伤：通过B7H3与CD3的双靶向，将旁观者T细胞重定向至肿瘤细胞，不依赖MHC-I实现抗原非特异性杀伤。2)PD-L1阻断解除免疫抑制：结合肿瘤及髓系细胞表面的PD-L1，阻断PD1/PD-L1轴对T细胞的抑制，逆转T细胞耗竭。3)髓系细胞重编程：通过PD-L1结合募集髓系细胞，在IFNγ（激活T细胞分泌）作用下，将免疫抑制性巨噬细胞重编程为促炎表型，分泌IL-15等细胞因子，进一步增强T细胞活性。 三：B7H3xCD3xPD-L1在多模型中展现强效抗肿瘤活性     在SKOV3（卵巢癌细胞）与PBMC共培养体系中，B7H3xCD3xPD-L1诱导的肿瘤细胞死亡率显著高于双特异性抗体B7H3xCD3，EC₅₀从691.5ng/mL降至94.5ng/mL，且在低效应细胞/靶细胞（E:T）比例下仍有效。     在卵巢癌、结直肠癌等患者来源肿瘤悬液（PDTS）模型中，B7H3xCD3xPD-L1处理后，CD8⁺T细胞中CD25⁺、Ki67⁺细胞比例提升3-5倍，GZMB、IFNγ分泌增加，肿瘤细胞死亡率提升40%-60%，且效果优于B7H3xCD3联合PD-L1抗体。     在保留TME空间结构的患者来源肿瘤碎片（PDTF）模型中，B7H3xCD3xPD-L1处理后，T细胞向肿瘤细胞迁移距离缩短，CD3⁺GZMB⁺功能T细胞比例增加2倍，肿瘤细胞比例降低50%，证实其在生理微环境中的活性。     在PBMC重编程的NOG小鼠SKOV3移植瘤模型中，B7H3xCD3xPD-L1处理组肿瘤体积较对照组缩小90%，12只小鼠中11只实现肿瘤近完全清除，且无明显体重下降及肝肾功能异常。进一步在A375（黑色素瘤）、Detroit562（头颈部鳞癌）模型中，B7H3xCD3xPD-L1同样显著抑制肿瘤生长，证实其广谱抗肿瘤活性。      转录组分析显示，B7H3xCD3xPD-L1处理后，肿瘤组织中T细胞激活（CD3E、CD8A）、细胞毒性（IFNG、GZMB、PRF1）及记忆T细胞（TCF7、IL7R）相关基因显著上调，髓系细胞中促炎因子（CXCL9、CXCL10）及抗原呈递基因（HLA-DRA、TAP1）表达增加，证实其对免疫微环境的重塑作用。 四：IFNγ-IL-15轴介导的免疫增强正反馈环路     机制研究揭示，B7H3xCD3xPD-L1通过以下正反馈环路放大抗肿瘤免疫：B7H3与CD3双靶向激活T细胞，分泌大量IFNγ。而IFNγ作用于髓系细胞，诱导其从免疫抑制表型（高表达CD163、IL10）向促炎表型（高表达CXCL9、IL15）转化，IL-15进一步激活T细胞的增殖与细胞毒性。同时IL-15通过IL-15Rα/IL-2Rβ受体复合物激活T细胞，上调CD25、GZMB表达，同时促进记忆T细胞形成，维持长期抗肿瘤免疫。     阻断实验证实，中和IFNγ或IL-15可显著削弱B7H3xCD3xPD-L1的抗肿瘤效应，而补充重组IL-15可恢复PD-L1阻断髓系细胞后的杀伤功能，明确IFNγ-IL-15轴是其核心作用通路。 五：机器学习模型预测患者响应，助力精准治疗     为实现临床转化，研究团队基于33例患者PDTS模型的细胞毒性数据与转录组特征，开发机器学习预测模型：模型识别出T细胞浸润量（CD3D、CD8A）、髓系细胞PD-L1表达、B7H3⁺肿瘤细胞比例为核心预测指标。而通过5折交叉验证，模型AUC达0.94，可准确区分响应者与非响应者。      将模型应用于TCGA泛癌数据，预测卵巢癌、结直肠癌等“冷肿瘤”中约40%-60%患者可能受益于B7H3xCD3xPD-L1治疗，且ICIs非响应患者中约30%被预测为潜在响应者，为临床患者分层提供依据。 总结思考     本研究通过“临床问题识别-分子设计-机制解析-模型验证-预测体系建立”的完整链条，开发出三特异性抗体B7H3xCD3xPD-L1。其创新之处在于：不仅通过B7H3-CD3重定向旁观者T细胞杀伤肿瘤，更通过PD-L1结合重编程髓系细胞，激活IFNγ-IL-15正反馈环路，重塑免疫微环境。      在患者来源模型与动物模型中的强效活性，及机器学习预测模型的建立，为实体瘤免疫治疗提供了从基础研究到临床转化的完整解决方案，有望彻底改变“冷肿瘤”患者的治疗格局。     Yang, C., Guo, S., Ye, K. et al. A trispecific antibody engaging T cells with tumour and myeloid cells augments antitumour immunity. Nat. Biomed. Eng (2025). https://doi.org/10.1038/s41551-025-01569-4

点击蓝字 关注我们 特别福利：通过平台指定基因检测公司进行基因检测并成功入组临床的患者，基因检测费用可以全额退款（限额5000元），具体请咨询平台医生（联系方式见文末）。 新 药 临 床 “一个新的药物就是一个新的希望！！！”                                     ------引言 温馨提示 更多新药免费临床试验信息，请访问下方网站： www.onc123.com/cpy.html 网站内可以直接按病种检索，无需爬楼梯！ 小细胞肺癌新药研发进展 ▷DLL3双抗领域：最受瞩目的无疑是全球首个获批上市的 塔拉妥单抗（Tarlatamab），凭借近40%的客观缓解率和超过13个月的中位总生存期，它已成为许多患者心中的“金标准”；人气最高的DLL3双抗药物可能是已上市的“塔拉妥单抗”。 ▷DLL3 ADC领域：人气最高的是大名鼎鼎的ZL-1310，凭借超高有效率和入脑效果，成为DLL3 ADC的标杆！ ▷B7H3 ADC领域：第一三共（Daiichi Sankyo）的 DS-7300a 更是未上市先爆火，其在多线耐药患者中展现的持久疾病控制能力，让无数人翘首以盼 最强组合 MK-6070联合DS-7300a，DLL3/CD3联合B7H3 ADC，力压塔拉妥！达成80%超高缓解率 两者联合形成“T细胞重定向+精准细胞毒杀伤”的双重打击机制：MK-6070激活免疫系统对DLL3+肿瘤细胞进行识别与清除，而DS-7300a则通过B7-H3靶向递送强效载荷，覆盖更广谱的肿瘤细胞亚群，同时潜在调节免疫微环境，协同增强抗肿瘤效应。 MK-6070药物信息 MK-6070（曾用名：HPN328）最初由Harpoon Therapeutics公司开发，该公司成立于2015年，专注于免疫肿瘤学领域，专长于开发T细胞接合器。2024年1月，默沙东（MSD）以约6.8亿美元收购了Harpoon Therapeutics，从而获得了包括MK-6070在内的一系列在研疗法。2024年8月，默沙东与第一三共（Daiichi Sankyo）达成合作协议，双方将在全球范围内（日本除外）共同开发和商业化MK-6070，默沙东将获得1.7亿美元的预付款，并保留该药物在日本的独家权益。作用靶点 MK-6070是一种三特异性T细胞接合器，同时靶向三个关键靶点： DLL3（Delta样配体3）：Notch信号通路的抑制性配体，在小细胞肺癌（SCLC）和其他神经内分泌肿瘤中高度表达，而在正常组织中表达极少，是理想的肿瘤治疗靶点 CD3：T细胞表面的受体，用于激活和招募T细胞 白蛋白：用于延长药物半衰期，提高药代动力学稳定性作用机制 MK-6070通过以下机制发挥抗肿瘤作用：1. 三重靶向设计 抗DLL3抗体：特异性结合肿瘤细胞表面的DLL3抗原，实现精准靶向 抗CD3抗体：与T细胞表面的CD3受体结合，激活T细胞并诱导其杀伤功能 抗白蛋白抗体：与血液中的白蛋白结合，显著延长药物半衰期（中位半衰期约71小时）2. T细胞介导的免疫杀伤 通过CD3结合域募集并激活患者自身的T细胞 引导T细胞靠近表达DLL3的肿瘤细胞 激活的T细胞释放细胞毒性物质，特异性杀死肿瘤细胞3. 半衰期延长技术 白蛋白结合域设计使药物在体内循环时间显著延长 实现更持久的药物暴露，减少给药频率 提高肿瘤组织的药物浓度，增强抗肿瘤活性技术优势1. 结构创新性 全球首个进入临床的CD3/DLL3/白蛋白三特异性抗体 相比双特异性抗体，增加了白蛋白结合域，实现半衰期延长 整个分子约50kDa，具有良好的组织穿透能力2. 靶点特异性 DLL3在超过80%的SCLC肿瘤细胞中高表达，正常组织表达极低 实现肿瘤组织富集，减少对正常组织的毒性 为"无靶可打"的小细胞肺癌提供了新的治疗靶点3. 联合治疗潜力 可与PD-L1抑制剂（如阿替利珠单抗）联合使用 可与B7-H3 ADC药物（如DS-7300a）联合，形成"免疫攻击+精准杀伤"的双重机制 联合治疗可覆盖更广泛的肿瘤细胞亚群，降低耐药风险前期临床试验数据I/II期临床研究（NCT04471727） 研究设计：开放标签、多中心、剂量递增和剂量扩展研究，评估MK-6070单药或联合治疗的安全性、耐受性和有效性。 患者特征： 截至2024年1月5日，共纳入86名患者（14个队列） 小细胞肺癌（SCLC）患者54例（63%），其他神经内分泌肿瘤（NEC）32例（37%） 中位既往治疗线数为3线（范围1-7线） 100%患者既往接受过铂类化疗，96%患者既往接受过PD-1/PD-L1治疗 57%患者有脑转移病史 疗效数据： SCLC患者：确认的客观缓解率（ORR）为50%（12/24），其中1例达到完全缓解（CR） 其他NEC患者（NEPC除外）：确认的ORR为44%（4/9），其中1例CR 脑转移患者：ORR为37%，颅外客观缓解率（EC-ORR）为52%，疾病控制率（DCR）为78% 无脑转移患者：ORR和EC-ORR均为19%，DCR为48% 颅内疗效：伴有脑转移的SCLC患者，颅内客观缓解率达52% 安全性数据： 患者耐受性良好，未达到最大耐受剂量（MTD） 主要不良反应为1-2级，包括发热、乏力、恶心 细胞因子释放综合征（CRS）发生率：脑转移组64%，无脑转移组57% 免疫效应细胞相关神经毒性综合征（ICANS）仅发生在有脑转移的患者中（3例1级，1例2级） 未观察到剂量限制性神经毒性或间质性肺病（ILD） 药代动力学： 呈线性药代动力学特征，暴露量随剂量增加而增加 中位半衰期为71小时，相对较长的半衰期有利于维持有效血药浓度 给药后24小时内观察到细胞因子短暂增加和T细胞活化Ib/II期联合治疗研究 研究设计：评估MK-6070联合Ifinatamab Deruxtecan（I-DXd，DS-7300a）在复发/难治性广泛期小细胞肺癌患者中的安全性和有效性。 初步数据： 在32例可评估患者中，客观缓解率（ORR）达43.8%（14/32），其中3例达到完全缓解（CR） 疾病控制率（DCR）为78.1%（25/32） 中位无进展生存期（mPFS）为5.2个月，显著优于传统二线化疗的2-3个月 8例患者缓解持续时间（DoR）已超过6个月，中位DoR尚未达到适应症范围 MK-6070主要针对以下适应症： 小细胞肺癌（SCLC）：广泛期小细胞肺癌，一线含铂化疗失败后的患者 神经内分泌肿瘤（NEC）：包括前列腺神经内分泌肿瘤（NEPC）、小细胞膀胱癌、转移性去势抵抗性前列腺癌等 其他DLL3表达相关的晚期癌症研发进展 2022年3月：获得美国FDA授予治疗小细胞肺癌的孤儿药资格 2024年1月：默沙东收购Harpoon Therapeutics，获得MK-6070 2024年8月：默沙东与第一三共达成合作协议，共同开发MK-6070 2025年2月：在中国获得临床试验默示许可，拟开发治疗小细胞肺癌 2025年10月：启动Ib/II期临床研究，评估MK-6070联合I-DXd的安全性和有效性临床意义 MK-6070作为全球首个进入临床的CD3/DLL3/白蛋白三特异性抗体，为小细胞肺癌这一难治性肿瘤提供了新的治疗选择。其在脑转移患者中表现出的良好疗效（颅内ORR达52%）尤为值得关注，为这一传统治疗困难的群体带来了新的希望。随着临床研究的深入，MK-6070有望成为小细胞肺癌治疗领域的重要突破。 DS-7300a药物信息 2025年10月，国家药品监督管理局药品审评中心（CDE）官网公布： 第一三共/默沙东研发的抗 B7-H3 ADC Ifinatamab Deruxtecan (I-DXd, DS-7300a)被纳入突破性治疗品种名单，本次适应症为用于治疗在含铂化疗期间或之后出现疾病进展的广泛期小细胞肺癌成人患者。 B7-H3（CD276）是B7免疫共刺激分子家族成员，在多种实体瘤中过度表达且与不良预后相关，大约65%的小细胞肺癌中存在B7-H3高表达，但在正常组织中表达有限，使其成为有吸引力的ADC靶点。 2025WCLC大会口头公布了 I-Dxd在广泛期小细胞肺癌（ES-SCLC）中的 II 期研究数据（IDeate-Lung01）。结果显示： BICR评估的 137 例既往接受过治疗的 ES-SCLC 患者中，确认的总客观缓解率（ORR） 为 48.2%，疾病控制率（DCR） 为 87.6%，中位无进展生存期（PFS）为 4.9 个月，中位总生存期（OS）为 10.3 个月。 *其中二线治疗群体， ORR 为 56.3%，DCR 为 96.9%，中位 PFS 为 5.6 个月，中位 OS为 12.0 个月。 *三线及以上群体，ORR 为 45.7%，DCR 为 84.8%。 *脑转移患者（n=65），ORR 为 46.2%。 新药免费临床 标题：一项在复发性/难治性广泛期小细胞肺癌受试者中评价MK-6070和Ifinatamab Deruxtecan(I-DXd) 安全性和有效性的Ib/II期、开放性临床研究 关键入组要求： 目标患者： 仅一线含铂失败的广泛期小细胞肺癌 年龄无上限 经组织学或细胞学确诊的广泛期SCLC（任何T、N、M1a/b/c） 排除： 胸腔积液、心包积液或需要反复引流操作的腹水 软脑膜转移 间质性肺炎 半年内肺部放疗＞30gy 开放中心： 上海、北京、江苏、四川、浙江、福建 我们的优势 最后，我们强烈建议选择我们的渠道进行临床报名，相比其他招募渠道，我们有更完整的临床项目库，我们了解病情、了解各个招募项目的入排要求、更了解项目之间的合理搭配，能让患者大大增加连续入组的成功率！通过我们报名的临床，入组成功率更高、获益更大! 欢迎在其他渠道报名失败的患者和家属联系我们！ 目前有肺癌、肝癌、肾癌、胃癌、肠癌、胰腺癌、妇瘤、泌尿肿瘤、血液肿瘤......等几乎涵盖所有癌种的临床试验正在招募患者！ 而且每一个在我们这里报名的患者，通过平台进行基因检测并成功入组患者，全额退还基因检测费用。 平台福利 福利一、免费基因检测（限初诊或耐药肿瘤患者，生活能自理且有意愿参加临床试验） 免费基因检测 长按左侧二维码报名 福利二、半价团购基因检测（无限制条件），咨询报名电话：18024087280  微信：18024087280 福利三、免费临床试验入组 免费临床试验入组 长按左侧二维码报名 基 因         免费基因检测咨询       18024087280        （微信手机同号）          长按上方二维码咨询 肿 瘤         免费临床试验入组咨询       13022079715        （微信手机同号）          长按上方二维码咨询 #临床试验 #ADC #抗体药物 #小细胞肺癌 #DLL3 #B7H3 #202512