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ADC在癌症治疗领域取得了突破性的进展，涌现出了许多新技术、新疗法，与此同时也面临许多挑战。今天为大家解读一篇关于ADC在癌症治疗领域的最新进展的综述文章，一起学习起来。抗体偶联药物（ADC）是一种有前景的靶向癌症治疗方法，通过将抗体的精准靶向性与细胞毒性药物相结合，选择性杀伤肿瘤细胞，同时减少脱靶效应。本综述全面分析了ADC的结构组成、作用机制及临床应用，并探讨了抗体工程和连接子设计方面的技术进步，以提高疗效和安全性。文章概述了当前临床现状，重点介绍了已获批的ADC及临床试验中的候选药物，同时讨论了稳定性、半衰期和全身毒性等关键挑战。1. 前言癌症是全球第二大死因，每年导致1000万人死亡。尽管现在有多种癌症治疗方法，如化疗、免疫治疗、放疗、细胞治疗和手术，但传统化疗仍是主要治疗手段。然而，化疗的选择性差、全身毒性和耐药性等局限性不容忽视，这些限制了药物的治疗窗口和疗效。因此，研究人员持续探索减少或消除化疗脱靶副作用的方法，以显著改善患者的健康相关生活质量。ADC的概念最早由德国诺贝尔奖得主、化疗创始人Paul Ehrlich于100年前提出。他将ADC描述为“魔法子弹”，因其能特异性靶向病变细胞而不伤害健康细胞。Ehrlich设想将抗体与毒素结合以实现选择性杀伤。这一设想在多年后得以实现，即当时甲氨蝶呤被连接到针对白血病细胞的抗体上。随后，基于嵌合和人源化单克隆抗体的发展，1997年FDA批准了首个抗癌抗体利妥昔单抗，抗体的发展为ADC的发展提供了先决条件。ADC是一类靶向癌症治疗方法，通过将细胞毒性药物与抗体结合，解决了传统化疗药物缺乏特异性的问题。尽管ADC的开发不断面临新挑战，如抗体与细胞毒性药物的组合选择、临床相关靶点的确定以及连接子的类型、位置和数量等，全球研究人员也在不断努力去解决这些问题。截至2024年11月，FDA已批准15种ADCs。ADC类似于“制导导弹”，由三个关键部分组成：（1）与癌细胞表面肿瘤特异性或肿瘤相关抗原结合的单克隆抗体；（2）细胞毒性药物；（3）将抗体和药物连接的可切割或不可切割的连接子。连接子的设计需高度稳定，以确保ADC分子在通过受体介导的内吞作用进入癌细胞前不发生非预期切割。与传统化疗药物不同，ADC通过选择性释放细胞毒性药物杀伤表达靶抗原的癌细胞，同时减少对健康细胞的暴露，从而降低全身给药的脱靶效应。本文旨在强调ADC在癌症治疗领域的变革潜力，强调持续创新的必要性，并探讨ADC开发中的挑战，以充分实现其治疗前景。2. ADC技术的进展近年来，由于单克隆抗体（mAbs）的特异性以及新发现的癌症特异性或相关抗原数量的增加，mAbs在癌症治疗领域的开发日益受到重视。1997年，首个用于治疗B细胞淋巴瘤的利妥昔单抗（Rituximab）获批，标志着mAbs在癌症治疗中的扩展。随后，更多新一代抗癌mAbs如Avastin®、Cetuximab®、Rituximab®、Trastuzumab®等相继问世。mAbs结合特异性的调控尤为重要，这使其相较于其他癌症治疗方法具有显著优势。此类修饰可在抗体分子的可变域内进行，该区域包含互补决定区（CDRs），决定了抗体与相应抗原的相互作用。为了改造可变域和CDRs，需要通过靶向或随机突变生成大量变异体并进行筛选。基于抗体-抗原复合物结构知识的靶向或结构引导突变是一种更有效的方法，因为需要测试的变异体较少。通常，通过X射线晶体学获得的表位-互补位结构数据可与计算机工具结合预测合适的变异体。此外，也可采用从头计算的分子结构设计和抗体-抗原复合物对接方法替代X射线晶体学。筛选出的潜在抗体变异体随后可通过突变实验验证其效力。mAbs的人源化是抗体工程中的关键步骤，尤其在治疗靶点涉及人体时。这一过程可减少因暴露于非人源材料（如源自非人源的抗体）而可能引发的交叉反应。由于大多数抗体源自非人源，人体免疫系统可能将这些mAbs视为威胁并产生不必要的免疫反应，从而影响治疗效果。如图1所示，一种人源化抗体的方法是CDR移植技术，即将合成的非人源mAbs的CDRs移植到人源Ig分子中。这使得分子对免疫系统的“异源性”降低，同时不损害其特异性。通过应用特异性决定残基（SDR）移植，可进一步降低免疫原性。SDRs的添加保留了CDR的环结构，并可轻易从抗体-抗原复合物的3D结构中识别。图1：抗体人源化中的CDR移植和SDR移植方法通过CDR移植技术对非人源mAbs进行人源化。将非人源抗体（红色矩形所示）的CDRs移植到人源IgG框架（浅蓝色所示）中，并与人源恒定区（紫色）连接，生成免疫原性较低的完全人源化mAb。SDR移植是将非人源mAbs的SDR（黄色矩形）移植到人源IgG框架（浅蓝色所示）中，并与人源恒定区（紫色）连接。噬菌体展示技术同样可用于全人源化抗体的合成。该方法需将多个基因整合至噬菌体内构建完整文库，随后噬菌体会将基因表达为表面蛋白，这些蛋白可通过生物淘选进行筛选，并利用酶联免疫吸附试验（ELISA）进行检测。另一项从鼠源可变区序列生成人源单抗的技术，可通过整合人类种系基因库信息，采用计算生物学方法对互补决定区（CDR）及VH/VL界面附近残基进行理性设计，从而推导出鼠源可变区序列。该技术通过参照最接近的人类种系序列进行迭代替换，使抗体逐步获得人类特征，最终在保持功能活性的同时实现完全或可接受的人源化。运用此技术已成功制备出三种靶向CD25、血管内皮生长因子和TNF-⍺的全人源化单抗，分别进行了59、46和45处氨基酸替换。尽管单抗具有高度特异性和卓越靶向能力，但多数单抗本身细胞毒性不足以杀死癌细胞，但ADC可以解决这个问题，因为其细胞毒性主要来源于所载药物。目前仅有约2%的ADC分子能抵达并穿透实体瘤细胞，因此必须选择具有强效细胞毒性且能在体内保持稳定性的药物作为载荷。当前FDA批准的ADC药物载荷可分为微管蛋白抑制剂和DNA损伤剂两类。微管蛋白作为微管的核心组分在细胞有丝分裂中起关键作用，抑制该蛋白可有效阻断肿瘤细胞分裂与转移；而DNA损伤剂则通过抑制DNA复制机制、诱导DNA烷基化或双链断裂等方式发挥细胞毒性。当需要不依赖细胞周期的杀伤机制时，DNA损伤剂比主要作用于分裂期细胞的微管蛋白抑制剂更具优势。另外，ADC技术中部分实验性载荷为海洋源免疫毒素，如源自软体动物耳廓截尾海兔的单甲基奥瑞他汀E，以及来自水螅的HALT-1毒素。刺胞动物门来源的actinoporin类毒素因其稳定性与小分子量（18.5-20kDa）展现出作为免疫毒素载荷的巨大潜力，可实现更高组织穿透性与更低免疫原性。这类毒素通过特异性识别鞘磷脂后在细胞膜上形成孔洞，破坏离子梯度导致渗透失衡和细胞裂解。新一代ADC还采用免疫调节剂作为载荷以激活免疫系统而非直接杀伤肿瘤，包括Toll样受体（TLR）激动剂和干扰素基因刺激蛋白（STING）激动剂等，这类免疫调节型ADC被称为免疫刺激抗体偶联物（ISAC），其作为癌症免疫治疗剂可产生持久免疫记忆，展现出广阔前景。连接子是ADC技术中持续革新的关键组分，其既控制抗体与药物载荷的释放，又决定ADC整体稳定性。连接子可分为可裂解型与不可裂解型，二者各具用途：可裂解型含有化学触发结构能在特定条件下诱导释放；不可裂解型则与药物载荷结合，因此需根据靶点特性与定位选择合适的连接子。传统连接子在减少非特异性释放、优化连接子-载荷偶联、以及避免降低ADC效价（如马来酰亚胺类连接子的逆迈克尔消除反应）等方面仍需改进。最新开发的连接子包括新型酶敏感连接子、光敏感连接子和生物正交可裂解连接子，具体内容将在后文详述。3.下一代连接子化学连接子在ADC设计中起着关键作用，它稳定地将细胞毒性药物与mAb连接。约80%已获批的ADCs使用可切割连接子，以便将治疗药物递送至肿瘤部位。这些连接子设计为在细胞外和细胞内环境（如氧化还原电位、pH、谷胱甘肽浓度和特定溶酶体酶的存在）差异时被切割，从而使细胞毒性载荷在靶肿瘤细胞内或附近特异性释放。肽基序是可切割连接子的主要形式，已在临床阶段的ADCs中广泛应用。然而，这些可切割连接子的一个固有缺点是容易被细胞外酶（如丝氨酸弹性蛋白酶）切割，导致细胞毒性载荷的系统性释放，从而引发脱靶毒性。因此，理想的连接子需具备足够的稳定性，以防止细胞毒性药物在非靶组织中过早释放或引发全身毒性。同时，连接子需在结合抗体时保持偶联物的无活性、无毒性状态。研究人员一直致力于开发在循环系统中更稳定的可切割连接子。这些方法包括使用对特定蛋白酶更具选择性的肽序列，以及探索其他酶类作为释放机制。传统的可切割连接子释放方法包括质子解离、二硫键还原和蛋白水解降解（如缬氨酸-瓜氨酸（Val-Cit）-PABC连接子技术）。理想的ADC连接子需具备双重特性：一方面通过稳定的抗体偶联结构阻止药物在血液循环中提前释放，另一方面能在靶位点实现特异性触发释放。尽管多数可裂解连接子能满足第一项要求，但新型豆荚蛋白（legumain）连接子技术首次同时实现了双重要求。该专利技术由Vincerx Pharma公司开发，其创新机制在于利用豆荚蛋白——一种在预后不良的肿瘤细胞中过表达的溶酶体蛋白酶。作为高特异性的天冬酰胺内肽酶，豆荚蛋白能精准切割靶蛋白中的特定天冬酰胺残基，从而显著增强对肿瘤细胞的选择性。这种特性可大幅降低细胞毒性药物在体循环和健康细胞中的非特异性释放。为进一步扩大ADC治疗窗，该技术采用前药原理：在细胞毒性药物上连接可被豆荚蛋白切割的亲水性肽帽（又称细胞捕获剂）。当前药被肿瘤细胞内化后，肽帽被豆荚蛋白酶切除，此时药物才被激活。细胞捕获剂能有效抑制细胞膜通透性，促使药物在肿瘤细胞内滞留蓄积，从而同步提升疗效与安全性。连接子技术的另一突破是串联裂解连接子系统，其要求连续发生两次酶切反应才能释放载荷药物。这种级联反应机制确保第二次酶切必须发生在首次切割之后，从而有效降低循环过程中的药物提前释放风险和脱靶毒性。该技术灵感来源于两类前药策略：一是利用亲水性葡萄糖醛酸苷基团的前药设计，二是可被肿瘤细胞中高表达的溶酶体酶β-葡萄糖醛酸苷酶识别的连接子技术33。通过引入β-葡萄糖醛酸苷基团作为保护层，可防止二肽在循环过程中被非特异性切割。只有当ADC被内化并经历溶酶体降解后，单糖基团才会被移除，进而暴露出二肽结构供后续降解并释放细胞内载荷。大鼠实验证实，串联裂解连接子在保持血浆稳定性和耐受性方面表现优异，可显著提高ADC的治疗指数。传统ADC药物存在三大局限：抗体选择受限（必须依赖溶酶体摄取机制）、易产生耐药性（药物释放依赖肿瘤细胞内吞和溶酶体裂解等多重过程）、分子量过大影响肿瘤穿透效率。新型肿瘤微环境激活连接子（TMALIN）技术平台通过独特的酶消化特性直接解决了这些难题。该技术能在微环境中实现肿瘤细胞外裂解，使ADC的抗肿瘤活性完全不受抗体内吞能力影响，从而极大拓展了抗体选择范围。TMALIN-ADC的特殊结构可促进药物在肿瘤微环境富集，使肿瘤组织与血液中的药物浓度比显著提高，进而提升治疗指数。其独特的酶消化特性与肿瘤富集能力协同作用，可实现载荷药物在肿瘤组织的大量蓄积，产生强效旁观者效应——即使对低表达或不表达靶抗原的肿瘤也展现显著抗肿瘤效果。此外，TMALIN技术开发的ADC具有卓越的体循环稳定性，能最大限度减少非靶组织中的药物脱落，大幅降低脱靶毒性。最后，该平台构建的ADC表现出优异的溶解性和化学稳定性，彻底解决了传统ADC中马来酰亚胺连接方式导致的逆向加成反应问题，可制备高均一性（DAR=8.0）且定量精确偶联的ADC产品。除上述技术外，其他新型酶敏感连接子还采用肿瘤过表达的特异性酶（如β-半乳糖苷酶、硫酸酯酶、焦磷酸酶可裂解连接子）。光敏感连接子则通过外部可控激活机制降低脱靶风险：近红外光（NIR）响应型连接子基于七甲川花青荧光团设计，可在特定波长照射时释放药物；紫外光（λ=365 nm）触发型采用邻硝基苄基作为裂解基团，其半衰期与天然抗体相当；最新研发的双条件激活ADC需同时满足光照（λ=365 nm）和内源性N端胺反应才会裂解。此外，生物正交可裂解连接子能响应活体内进行的非干扰性化学反应。基于此开发的"无痕连接子"ADC采用双取代丙炔氧羰基（dsProc）和双取代丙炔基（dsPra）作为触发单元，在与Cu(I)-BTTAA相互作用时发生生物正交反应，实现肿瘤部位细胞外药物释放。4. 位点特异性偶联技术传统的偶联方法（第一代）利用抗体中丰富的赖氨酸或半胱氨酸残基进行偶联。而位点特异性偶联（下一代）技术则通过抗体工程实现更精确的定点偶联，从而克服异质性、高DAR（药物-抗体比率）物种清除率加快、治疗窗口变窄和稳定性差等问题。目前主要有四种位点特异性偶联方法（表1）：1. 特定氨基酸偶联：利用天然或工程化的半胱氨酸、谷氨酰胺等氨基酸残基（示例：DM1通过工程化半胱氨酸与Thio-trastuzumab在Ala114位点偶联）。2. 非天然氨基酸偶联：含生物正交反应基团的非天然氨基酸（示例：对乙酰苯丙氨酸偶联的auristatin类化合物）。3. 短肽标签偶联：通过4-6个氨基酸残基组成的短肽实现特异性偶联（示例：LPETG五肽标签介导的转肽反应）。4. 糖基化偶联：靶向CH2结构域糖链的定点偶联（示例：唾液酸糖链的点击化学偶联）。表1详细比较了这些方法的特性、适用药物、抗体类型和参考文献。位点特异性技术可显著提高ADC产品的均一性，DAR值波动范围从传统方法的0-8降低至精确控制的2-4。5. 前药载荷设计理想的前药载荷需具备七大特性：1. 足够的细胞毒性效力（IC50通常在pM-nM级）2. 低免疫原性3. 高血浆稳定性4. 可修饰功能基团而不影响活性5. 旁观者杀伤效应6. 适宜的水溶性7. 与靶点亚细胞定位匹配的释放特性第一代ADC药物（如甲氨蝶呤、长春碱）存在效力不足、肿瘤蓄积差等问题。表2列举了新一代候选前药：• BCL-XL抑制剂：通过稳定促凋亡蛋白BIM增强MEK抑制效果（NCT03595059）• NAMPT抑制剂：破坏NAD+代谢通路（MDA-MB-453模型中T/C比达0.13）• 海兔毒素衍生物：强效微管抑制剂（IC50 0.2-224 nM）• PROTAC分子：诱导靶蛋白降解（如HER2+细胞中BRD4降解）• 光敏偶联物：近红外光控释放（3T3/HER2细胞IC50~2.5 nM）特别值得关注的是免疫刺激型ADC（ISACs），其载荷为TLR/STING激动剂等免疫调节剂，可通过激活免疫记忆产生持久抗肿瘤效应。6. 双载荷ADC与双特异性ADC肿瘤异质性是治疗耐药和复发的主要原因。单药ADC对含不同药物敏感性细胞的异质性肿瘤效果有限。为解决这一问题，研究者开发了双药共递送策略：Yamazaki团队构建了同时携带MMAE和MMAF的ADC（图2）：• MMAE：膜渗透性微管抑制剂（杀伤靶细胞及邻近细胞）• MMAF：膜不渗透性药物（抑制外排泵克服耐药）在HER2+乳腺癌异种移植模型（混合HER2+/HER2-细胞）中，双药ADC显示完全缓解且无复发，显著优于单药ADC。除MMAF外，Mckertish与Kayser还开发了另一种双载荷ADC：通过Val-Cit连接子将曲妥珠单抗与MMAE偶联后，再经不可裂解连接子琥珀酰亚胺基-4-(N-马来酰亚胺甲基)环己烷-1-羧酸酯（SMCC）与美坦新（DM1）二次偶联形成双偶联物。该双载荷ADC在HER2高表达的SK-BR-3乳腺癌细胞和HER2低表达的DLD-1结直肠癌细胞中均展现出细胞毒效应。这些证据支持双偶联策略能对异质性肿瘤产生强细胞毒性及抗肿瘤效果，有效应对治疗抵抗和肿瘤复发问题。图2 双药ADC的制备利用mtgase介导的双功能支链连接物，制备由MMAE和MMAF组成的双药物ADC，然后与MMAE（品红圈）和MMAF（黄色三角形）进行正交点击反应。使用的连接子是谷氨酸-缬氨酸-瓜氨酸(GluValCit)-PABC连接子，该连接子在内化后提供体内稳定性和快速释放。近年来，双特异性抗体因其优于单克隆抗体的特性，在肿瘤免疫治疗及其他疾病治疗领域展现出广阔应用前景，引发了科研界的极大关注。这类抗体的核心特征在于具有两个结合位点，可分别靶向两种不同抗原或同一抗原上的不同表位。研究显示，双特异性抗体通过多种机制在癌症治疗中表现出显著疗效，包括激活免疫细胞、阻断免疫检查点、抑制炎症因子以及双重信号通路调控等作用方式。表3已对这些作用机制及相应的双特异性抗体案例进行了系统总结。表3总结了双抗ADC的四大作用机制：1. 免疫细胞激活（如PD-1/TIM-3双抗）2. 免疫检查点阻断（如PD-1/VEGF双抗）3. 炎症因子抑制（如TNF/IL-17A双抗）4. 双信号通路阻断（如EGFR/cMET双抗）显然，双特异性抗体能有效对抗癌症，并可作为潜在抗体偶联药物（ADC）进行开发，以提升单抗ADC的特异性、亲和力及内化效率。目前已有多种双特异性ADC处于研究阶段。Zong及其团队通过蛋白质反式剪接技术（BAPTS）构建了同时靶向催乳素受体（PRLR）与HER2的双特异性抗体，采用马来酰亚胺己酰基连接子搭载MMAE载荷（图3）。与HER2-ADC相比，PRLR×HER2双特异性ADC在体外实验中显示出更高的内化效率及更显著的人乳腺癌抗肿瘤活性。此外，双特异性ADC（BIO-201）通过可裂解连接子将靶向HER2与Trop-2的双特异性抗体与强效DNA拓扑异构酶I抑制剂偶联。实验证实，该ADC对共表达HER2与Trop-2的癌细胞具有增强的细胞结合力、内化效率及强效细胞毒性。在HER2或Trop-2阳性肿瘤的异种移植模型中亦观察到肿瘤消退效应，表明其相较于单抗ADC具有更广谱的肿瘤类型覆盖能力。图3 靶向人表皮生长因子受体2和PRLR的双特异性ADC的生成以MMAE为载体，通过马来酰亚胺己丙基连接体，通过片段表达、分裂内含子反式剪接和接合过程制备靶向HER2和PRLR的双特异性ADC。除乳腺癌抗原外，间质-上皮转化因子（MET）选择性酪氨酸激酶抑制剂（TKI）对携带MET基因突变的肺癌也具有疗效。针对MET的抗体偶联药物（ADC）在治疗非小细胞肺癌MET外显子14跳跃突变或MET过表达等变异类型中也显示出良好疗效。但MET基因改变仅存在于少数非小细胞肺癌患者中，加之肿瘤耐药性问题，MET靶向ADC的疗效可能受到极大限制，这促使联合治疗方案的开发成为迫切需求。研究人员将靶向MET双表位的双特异性抗体与美登素类载荷偶联，构建了双特异性METxMET ADC。该双表位ADC被证实能在中高表达MET的异种移植瘤中诱导肿瘤消退，包括对MET抑制剂存在先天或获得性耐药的模型。目前REGN5093-M114（METxMET ADC）的I/II期临床试验已在MET过表达的晚期癌症患者中启动（NCT04982224）。除靶向肿瘤治疗外，双表位METxMET ADC还可用于研究跨内体运输机制。近期研究将生物传感器与双表位METxMET抗体偶联构建可裂解型双特异性ADC，并在体外和体内实验中均观察到其内化现象。研究表明METxMET双表位抗体可内化进入分选内体，随后快速运输至循环内体，并缓慢成熟为晚期内体——这正是MET、EGFR和PRLR等ADC的作用位点。这些发现不仅为循环内体的催化活性、跨内体运输与ADC加工之间的关系提供了新见解，同时提示循环受体可作为ADC的潜在靶点，因其能高效递送ADC载荷至肿瘤细胞内。7.靶向肿瘤微环境的ADC与"旁观者效应"如前所述，传统ADC的抗体选择受限于细胞表面暴露的靶抗原——这类抗原通常在癌细胞中高表达，而在健康细胞中低表达。简言之，"旁观者效应"是指ADC释放的细胞毒性有效载荷可扩散至邻近细胞并将其杀死，即使这些细胞不表达抗体识别的靶抗原。目前处于临床前和临床开发阶段的ADC主要靶向肿瘤相关抗原（TAA）或肿瘤特异性抗原（TSA）。TAA是在肿瘤中高表达但健康组织中极少存在的蛋白质，而TSA仅存在于特定癌细胞类型中。与血液系统恶性肿瘤不同，实体瘤在被称为肿瘤微环境（TME）的复杂动态生态系统中生长，其组成在不同肿瘤类型间存在显著异质性。TME作为多维度动态生态系统，在肿瘤发生发展及治疗响应中起关键作用，其核心组分包括：（1）提供结构支撑的丰富细胞外基质；（2）促进肿瘤生长侵袭的间质细胞（如癌症相关成纤维细胞CAFs）；（3）支持肿瘤血管新生的异常新生血管网络；（4）具有促瘤/抑瘤双重功能的免疫细胞。鉴于肿瘤细胞与TME的密切关联，在TME非恶性细胞上异常表达的TME相关抗原（TMA）成为实体瘤治疗的新兴靶点，与传统肿瘤抗原策略形成差异化路径。重要TMA靶点包括趋化因子/细胞因子、转录因子、代谢酶和检查点分子。这类靶标的突出优势在于其在内皮细胞/间质细胞/免疫细胞的高表达，而在健康组织中罕见或低表达。此外，TMA靶点（尤其新生血管或间质细胞表达的抗原）在全身给药时更易被ADC接触。目前多个靶向TMA的ADC已进入临床试验：针对晚期B细胞恶性肿瘤CD74的STRO-001（NCT03424603）、靶向CCR7治疗非霍奇金淋巴瘤和慢性淋巴细胞白血病的JBH492（NCT04240704）。此外，Camidanlumab tesirine（ADCT-301）正处于治疗经典霍奇金淋巴瘤（cHL）和非HL的I/II期阶段（NCT02432235）。另有靶向CD276的DS-7300、MGC018和Mirzotamab clezutoclax主要用于晚期实体瘤治疗（NCT04145622、NCT03729596和NCT03595059）。下表4汇总了当前处于临床试验阶段的TME靶向ADC概况。8. ADC的衰老调控作用癌细胞中的细胞衰老具有两大特征：一是细胞进入永久性生长停滞状态，二是分泌衰老相关分泌表型（SASP）。SASP包含细胞因子、趋化因子和生长因子等物质，可形成促炎症和促肿瘤的微环境。矛盾的是，这种SASP能通过支持周围恶性细胞、促进转移并可能降低某些疗法的疗效，从而刺激肿瘤进展。与传统化疗相比（后者可能诱导非靶向细胞衰老并促进SASP形成，ADC能将细胞毒性药物精准递送至表达特定抗原的癌细胞，而不损伤健康细胞。这种特异性不仅能降低整体毒性，还可能避免衰老细胞通过SASP引发慢性组织损伤和继发恶性肿瘤。通过将衰老限制在靶向细胞内或直接诱导细胞毒作用，ADC可减少促肿瘤微环境的形成，展现出显著治疗优势。鉴于衰老细胞会促进促肿瘤环境，ADC减少正常细胞意外衰老的能力可降低肿瘤复发风险。通过维持健康组织完整性并避免SASP相关炎症，ADCs对患者长期预后具有积极意义，可能降低癌症复发和治疗耐药风险。虽然ADC传统设计以杀死靶细胞为目标，但学界正兴起通过ADC选择性诱导癌细胞衰老的研究。该策略通过迫使肿瘤细胞进入受控衰老状态以阻断其增殖。若这些衰老癌细胞表达"衰老相关免疫配体"刺激免疫细胞识别，还可能被免疫系统清除。诱导衰老型ADC或可增强免疫监视，帮助免疫细胞识别清除这些非分裂的受损细胞。这种"诱导衰老+直接杀伤"的双重机制可实现肿瘤抑制最大化。例如，靶向细胞衰老机制相关蛋白的ADC可与免疫检查点抑制剂或SASP调节剂联用，建立"治疗性衰老"状态以提升整体疗效。ADC设计应优化以避免非预期衰老。有效载荷的合理选择、连接子稳定性和抗原靶点特异性对减少健康细胞意外衰老至关重要。通过改进ADC使其对肿瘤细胞（尤其是具有独特抗原者）具有高度特异性，可降低脱靶诱导衰老的风险。出人意料的是，衰老现象不仅影响肿瘤发展，更与抗癌治疗响应密切相关。研究表明，抗癌治疗会导致恶性和非恶性组织中衰老细胞累积，这主要源于其DNA损伤机制及全身给药方式——多数抗癌药物可引发多组织多部位的衰老反应。多种靶向治疗药物能诱导恶性和非恶性细胞早熟衰老：CDK4/6抑制剂（如帕博西尼、瑞博西尼、阿贝西尼）通过模拟p16INK4a活性引发p53依赖性细胞周期稳定停滞；泛HDAC抑制剂伏立诺他和DNA甲基转移抑制剂地西他滨则分别通过CpG甲基化调控和SA-β-gal活性等机制诱导衰老；VEGF抑制剂等抗血管生成药物在临床前模型中可诱发衰老并提升细胞因子水平，提示存在类SASP效应；甚至利妥昔单抗等非细胞毒性治疗性抗体也能促进淋巴瘤细胞衰老。因此，在设计避免慢性SASP产生的ADC时，宜选用不易诱发细胞衰老停滞的作用机制：如微管靶向剂（奥瑞他汀类、美登素类）通过破坏微管诱导凋亡而不直接造成DNA损伤，相比烷化剂或拓扑异构酶抑制剂等DNA损伤类药物更不易引发衰老；Bcl-2抑制剂等激活内源性凋亡通路的非DNA损伤类凋亡诱导剂也可在不启动衰老程序的情况下促进细胞死亡。其他避免SASP的工程技术包括：采用定点偶联策略增强靶向递送效率，通过Fc工程调控免疫系统相互作用，以及选择性使用仅在肿瘤微环境中激活的可裂解连接子。9.ADC与其他疗法的协同作用由于抗体偶联药物（ADC）具有选择性靶向癌细胞的独特特性，其可与其他癌症疗法联用以实现协同效应，这对患有复杂多病症的患者尤为显著。临床前及临床研究证实，ADC能与免疫检查点抑制剂（如抗PD-1/PD-L1疗法）、激酶抑制剂甚至低剂量化疗药物协同作用，显著增强肿瘤细胞杀伤效果。以免疫检查点抑制剂为例，当其与ADC联用时，既能通过ADC精准靶向癌细胞，又能刺激患者产生抗肿瘤免疫应答，从而帮助克服肿瘤免疫逃逸机制。最具前景的联合疗法当属ADC与免疫检查点抑制剂（PD-1或PD-L1抑制剂）的配伍应用。这类药物通过激活免疫系统识别攻击癌细胞，在缩小实体瘤体积和提高总体缓解率方面展现出显著潜力。当ADC杀死癌细胞时，肿瘤抗原释放至微环境可激活免疫系统，使肿瘤更易被免疫细胞识别，从而产生协同抗肿瘤效应。这种策略为单药治疗响应不佳的患者提供了新的希望。临床前研究显示，ADC与纳武利尤单抗联用能显著改善难治性癌症患者的预后。与传统化疗药物联用时，ADC可降低化疗剂量，从而减轻患者不良反应。部分ADC搭载的超强效细胞毒载荷使其在较低全身剂量下即可起效。此外，连接子化学和抗体工程学的创新进一步提升了ADC在循环系统中的稳定性和选择性，确保药物主要在肿瘤微环境中释放，有效降低了全身毒性。鉴于ADC能精准靶向肿瘤细胞并减少脱靶效应，其非常适合与那些存在毒性风险的其他疗法联合使用。未来，ADC与靶向治疗或免疫治疗的策略性组合，有望为传统放化疗提供一种高效低毒的替代方案，特别适合合并症患者或无法耐受传统治疗强烈毒副作用的脆弱人群。10. FDA批准的ADC药物截至2024年11月，FDA已批准了15种ADC，如表5所示，而超过164项不同阶段的ADC临床试验目前正在进行中。表6为目前正在临床阶段的部分ADC备注：根据2024年11月18日Clinicaltrials.gov数据库中的目标进行分类。不同靶点临床活跃情况如图4所示。图4 不同靶点临床活跃情况11. ADC开发中的挑战及其给药后的系统稳定性  尽管抗体药物偶联物（ADC）在靶向癌症治疗中展现出巨大潜力，但其开发与应用仍面临诸多挑战。首先，选择合适的连接子以偶联有效载荷和抗体是ADC开发的关键。可裂解型与不可裂解型连接子各有优缺点，因此连接子的选择需基于抗体与有效载荷的具体化学特性。理想的连接子应仅在ADC被肿瘤细胞内化后裂解释放药物。若连接子不稳定导致药物过早释放，可能引发脱靶毒性——这是ADC技术亟需克服的主要缺陷之一。  根据抗体分子偶联药物分子的最佳数量，ADC可通过药物抗体比（Drug-to-Antibody Ratio, DAR）进行分类。DAR是影响ADC效能、稳定性和药代动力学的重要参数。理论上，高DAR的ADC因携带更多细胞毒性药物而应具有更强的效力。然而研究表明，DAR过高的ADC可能因结构庞大阻碍肾脏清除，转而通过肝脏加速清除，从而降低疗效。不同ADC的最佳DAR需根据抗体类型、有效载荷及靶向肿瘤类型综合评估，这对优化设计和提升疗效至关重要。  ADC治疗的另一个挑战是耐药性问题，其机制包括：肿瘤内异质性导致抗原表达下调、治疗诱导的靶抗原减少或丢失；靶抗原与其他细胞表面受体二聚化阻断ADC结合。针对耐药性，研究者提出双特异性ADC、联合疗法增强抗原表达、结构修饰提升肿瘤穿透性等策略，但仍需进一步探索耐药机制以开发更有效解决方案。  由于ADC的分子复杂性，其在释放有效载荷前需要穿越一系列细胞内通路，因此更容易受到细胞中多种不同耐药机制的影响，其中部分机制的特征尚未完全阐明。ADC经历复杂的细胞内运输过程，包括内吞作用、内体分选、溶酶体加工和有效载荷释放。这些复杂步骤具有高度动态性，且通常存在细胞类型特异性。尽管相关研究较少，但临床前研究往往难以捕捉细胞内加工的复杂性，导致难以准确定位ADC耐药的确切驱动因素。目前已有少量假说针对细胞内摄取和加工过程的改变进行探讨。研究表明，细胞屏障增强引发的渗透性降低和异常内体运输，以及摄取途径改变可能阻碍ADC进入细胞。研究者发现ADC通过小窝蛋白-1（CAV1）包被的囊泡进行递送，这种有别于常规网格蛋白介导途径的摄取机制可能导致摄取效率低下。此外，溶酶体pH值变化也被证实会抑制溶酶体加工并干扰有效载荷释放。除了上述关于ADC各组成要素的挑战外，大规模商业化生产ADC也是一项艰巨而复杂的任务。这种复杂性主要源于药物有效载荷的合成：这类分子来源于天然产物，具有复杂的分子结构，且由于高毒性特性必须在高度密闭的设施中进行生产。复杂的工艺自然对应着更高的生产成本。另一个障碍是传统的偶联工艺——通过抗体表面暴露的氨基酸残基（通常为赖氨酸和半胱氨酸）实现抗体组分与药物的连接。但该方法的缺陷在于药物可能随机偶联到多个潜在位点，导致偶联特异性不足并产生批次间差异。此外，有效载荷的随机偶联会导致药物-抗体比率（DAR）波动，降低产品的一致性和均一性。因此，开发应对这些挑战的创新策略已成为全球药物化学家面临的重要课题。ADC给药后的系统稳定性对治疗效果至关重要。为应对代谢稳定性（即完整性）相关的挑战，目前正在开发多种策略以增强ADC稳定性并延长其系统半衰期。系统清除机制（包括肾小球过滤和网状内皮系统摄取）会缩短ADC在血液中的有效作用时间。理想ADC应在特异性、疗效和安全性之间取得平衡，这在很大程度上取决于抗体与细胞毒性药物之间连接子的设计、化学性质和结构。连接子的选择具有关键作用。理想连接子应在循环中保持稳定，仅在到达肿瘤部位后释放药物。虽然可裂解连接子的设计目的是在肿瘤微环境中释放有效载荷，但其可能在循环中过早断裂，导致系统毒性。相比之下，非可裂解连接子由于需要在ADC内化后通过溶酶体降解抗体和连接子才能释放细胞毒性有效载荷，因此通常表现出更高的血浆稳定性。这一特性不仅能降低系统毒性，还能提供更宽的治疗窗口。抗体组分对ADC稳定性和特异性也起着关键作用。抗原特异性低的抗体可能与健康细胞发生交叉反应，导致脱靶毒性和过早清除。在免疫球蛋白类别中，IgG（尤其是IgG1）因其相较于抗体片段更长的半衰期而成为ADC设计的首选。虽然抗体片段更有利于肿瘤渗透，但由于半衰期较短，通常需要进行聚乙二醇化修饰以延长循环时间。双特异性抗体的使用也为克服肿瘤特异性、抗体吸收和加工等挑战提供了潜在解决方案。通过优化ADC设计实现延长循环时间、靶向药物释放和最小化脱靶效应，可显著提升癌症治疗效果。与此同时，药物抗体比率（DAR）是影响ADC性能的关键参数，包括其效力、稳定性和药代动力学特性。虽然较高的DAR通常意味着更强的细胞毒性药物载荷从而提升药效，但已有研究表明，与低DAR的ADC相比，DAR过高的ADC可能表现出更快的肝脏清除率、更低的耐受性和更狭窄的治疗窗口，最终可能降低治疗效果。这是由于高DAR的ADC分子结构庞大，阻碍了肾脏清除途径，转而通过肝脏代谢消除。更高的DAR还会增加ADC的疏水性，并加剧链间半胱氨酸聚集倾向。此外，高DAR会显著增加全身毒性风险，因为分布于全身的过量细胞毒性药物在杀伤靶向肿瘤细胞的同时可能损伤健康组织。本质上，DAR的升高通常与脱靶效应和毒性风险的增加相关。通过选择最佳偶联位点和在不稳定连接区域引入空间位阻等修饰手段，已被证实能有效增强ADC的稳定性。选择具有空间位阻的偶联位点可使抗体产生空间屏蔽效应，减少药物的提前释放。Fc工程改造和定点偶联技术等策略在优化ADC药代动力学方面展现出良好前景：Fc工程通过延长循环时间改善药物半衰期，而定点偶联则通过精确控制药物结合位点提升稳定性。最后，选择合适的肿瘤特异性抗原对ADC疗效至关重要。实体瘤中常用靶点包括HER2、Nectin-4和TROP2等。针对突变抗原（如特定EGFR突变）设计的ADC具有更高特异性，因为这些突变蛋白因泛素化降解机制而稳定性较低。通过工程化改造获得靶向致癌驱动突变蛋白的抗体构建ADC，可显著提高肿瘤靶向性和治疗效果，其特异性可与酪氨酸激酶抑制剂等选择性小分子药物相媲美。12. ADC的临床成功及其对现有癌症治疗的影响ADC在制药行业取得了显著的临床成功，尤其在血液系统恶性肿瘤和特定实体瘤治疗领域。相较于传统化疗，ADC能够选择性靶向并清除癌细胞，同时具有更低的全身毒性。随着FDA批准的曲妥珠单抗-美坦新偶联物（T-DM1）和维妥珠单抗（brentuximab vedotin）等ADC药物显著延长患者生存期，这类药物正日益被视为肿瘤治疗领域的变革性疗法。ADC相比传统疗法具有多重优势：其高特异性可最大程度减少脱靶效应，保护健康细胞并降低骨髓抑制和全身炎症等化疗常见副作用；模块化设计为优化抗体、连接子和细胞毒性载荷各组分提供了灵活性，支持高度靶向性和可定制化治疗；通过ADC技术平台，成功解决了奥瑞他汀类和美登素类等强效细胞毒素因毒性问题无法用于全身化疗的困境。这种创新策略不仅为耐药性癌症治疗带来新希望，更为满足未竟临床需求的疾病管理开辟了新途径。尽管优势显著，ADC要完全释放治疗潜力仍面临挑战：肿瘤细胞抗原表达异质性、药物耐药性问题以及循环系统内稳定性与疗效维持难题，导致部分ADC候选药物临床进展受阻。虽然更稳定的连接子设计和抗体优化技术已部分缓解这些问题，但要确保在广泛患者群体和癌症类型中维持稳定疗效，仍是亟待突破的关键瓶颈。ADC革新癌症治疗的潜力主要体现在其与其他疗法（如免疫检查点抑制剂）的协同作用，以及增强免疫介导的肿瘤细胞杀伤能力。例如，临床前模型显示ADCs与PD-1/PD-L1抑制剂的联用具有协同效应，这种联合疗法通过结合靶向细胞杀伤与免疫激活的双重优势，为治疗策略开辟了新路径。此外，针对肿瘤细胞表面两个或多个不同抗原的双特异性或多特异性ADCs的研发进展，有望进一步提升治疗特异性并降低耐药风险。随着ADC技术的持续突破，新一代ADCs将可能实现更高的精准度、更低的脱靶毒性，并在更多癌症类型中展现广泛适用性。我们认为，ADC正在成为靶向肿瘤治疗的基石，或将逐步替代传统化疗或与之形成互补。随着ADCs技术的迭代升级，将其整合至多模式癌症治疗方案中，有望显著改善患者预后，在疗效与耐受性之间实现现有疗法难以企及的平衡。总体而言，尽管ADC仍存在局限性，但其独特的作用机制与不断优化的技术设计预示着该领域将在现代肿瘤学中占据愈发重要的地位，未来数十年或将重塑癌症治疗格局。这一前景突显了持续开展ADC领域基础研究与临床开发的重要性，唯有如此方能充分释放其治疗潜力。13.结论ADC是创新性癌症治疗方式，通过将抗体部分与药物有效载荷相结合，展现出成为下一代抗癌药物的巨大潜力。与传统抗癌药物相比，其最显著优势在于具有更高的靶向特异性。目前越来越多新型双特异性和多价ADC正被快速开发，极大扩展了ADC的应用范围。尽管已有很多ADC成功上市且更多候选药物处于临床试验管线中，但该技术仍有诸多改进空间以提升疗效，例如开发创新型连接子技术、设计新型抗体结构域，以及拓展ADC的靶向能力至肿瘤微环境等领域。识别微信二维码，添加抗体圈小编，符合条件者即可加入抗体圈微信群！请注明：姓名+研究方向！本公众号所有转载文章系出于传递更多信息之目的，且明确注明来源和作者，不希望被转载的媒体或个人可与我们联系(cbplib@163.com)，我们将立即进行删除处理。所有文章仅代表作者观点，不代表本站立场。

摘要：mRNA 疗法在癌症免疫治疗中展现出巨大潜力，但面临体内递送效率低等挑战。纳米载体的出现为解决这些问题提供了可能。本文综述了脂质和聚合物纳米药物在递送 mRNA 编码的抗肿瘤疗法方面的研究进展，涵盖细胞因子和抗体免疫疗法、癌症疫苗、CAR 疗法等，探讨了直接溶瘤和肿瘤微环境重编程的应用，分析了临床转化面临的挑战，并对未来进行了展望，旨在展示 mRNA - 纳米载体联合疗法在癌症免疫治疗中的重要作用和发展前景 。一、mRNA 疗法与纳米载体的抗癌探索癌症严重威胁人类生命健康，传统治疗手段存在诸多局限，癌症免疫疗法应运而生。mRNA 疗法作为其中的新兴力量，备受关注。mRNA 是传递遗传信息的关键分子，能指导细胞合成蛋白质 。在癌症免疫治疗中，它可促使抗原呈递细胞合成肿瘤特异性或相关抗原，激活 T 细胞，引发强大的抗肿瘤免疫反应 。同时，mRNA 还能表达免疫调节因子，增强肿瘤免疫力 。不过，mRNA 疗法在临床转化中困难重重，比如在体内难以有效靶向递送、容易被内体捕获而无法逃逸、细胞内释放效率低，导致转染效率不高 。纳米技术的发展为解决这些问题带来了希望，脂质纳米颗粒（LNP）和聚合物纳米颗粒（PNP）等纳米载体可有效递送 mRNA，推动 mRNA - 基于的癌症免疫疗法从研究走向临床应用 。（原文图1，展示 mRNA - 纳米载体在癌症免疫治疗中的应用，帮助读者理解整体概念）二、mRNA 技术在细胞因子与抗体免疫疗法中的应用细胞因子递送：多种策略的探索：细胞因子是免疫调节的关键蛋白，在癌症免疫治疗中意义重大 。全身给药能激活免疫细胞，但存在剂量大、副作用严重、肿瘤组织积累少等问题；瘤内注射可减少全身暴露，增强抗肿瘤免疫反应；细胞靶向策略则通过构建嵌合蛋白提高特异性 。mRNA 技术为细胞因子递送带来新契机，能实现体内快速、高效表达，且无基因组整合风险 。多项研究表明，mRNA 编码的细胞因子疗法效果显著，如瘤内注射 mRNA 编码的 IL - 12 可抑制肿瘤生长 。然而，mRNA 易被酶降解、体内蛋白表达效率有待提高，循环 RNA（cRNA）和自我扩增 RNA（saRNA）有望解决这些问题 。抗体递送：突破传统局限：抗体是癌症治疗的重要生物制剂，但传统生产方式复杂、成本高，且存在储存稳定性差等问题 。瘤内注射重组抗体可提高肿瘤生物利用度，减少副作用 。mRNA 技术可实现体内抗体生产，避免了传统生产的诸多弊端，具有成本低、稳定性好等优势 。研究显示，mRNA 编码的抗体在多种癌症治疗中展现出良好效果，如 LNP 递送的 mRNA 编码的帕博利珠单抗能有效抑制肿瘤生长 。此外，新型抗体如多特异性抗体和蛋白水解靶向抗体（PROTABs）的研发，为 mRNA 抗体疗法开辟了新方向 。mRNA 表达助力靶向蛋白生产：mRNA 可诱导体内蛋白表达，有望取代重组细胞因子和抗体 。纳米颗粒递送系统能有效将 mRNA 递送至细胞内，增强蛋白表达 。LNP 是目前常用的递送载体，但存在肝积累问题 。为解决这一问题，研究人员开发了被动和主动靶向策略，如利用肿瘤的增强渗透和滞留效应实现被动靶向，通过修饰 LNP 使其携带靶向配体实现主动靶向 。此外，其他纳米载体如细胞外囊泡、PNP 和无机 NP 也在研究中展现出良好的递送效果 。目前，已有多项 mRNA 编码的细胞因子和抗体免疫疗法进入临床试验阶段 。（原文表 1，呈现相关临床试验信息，直观展示研究现状）三、mRNA 在癌症疫苗中的进展1.mRNA 编码肿瘤抗原：个性化治疗的希望：癌症疫苗旨在激发机体对肿瘤的免疫反应，mRNA 疫苗具有独特优势，可快速生产且能通过简单修改序列实现多种应用 。肿瘤抗原分为肿瘤相关抗原（TAA）和肿瘤特异性抗原（TSA），基于 TSA 的个性化疫苗研发正在进行中，部分已在临床试验中取得初步成功，但仍面临成本高和长期安全性评估等挑战 。2.体外与体内 mRNA 疫苗接种：各有优劣：树突状细胞（DC）在癌症免疫中至关重要，是 mRNA 癌症疫苗的常用递送载体 。体外 DC 疫苗通过转染 mRNA 编码的 TAA 来激活免疫反应，但存在激活宿主免疫能力不足、成本高和技术复杂等问题 。因此，直接 RNA 递送系统受到关注，LNP 是其中的代表。多项临床前和临床试验正在开展，LNP 不仅能有效递送 mRNA，还具有内在佐剂信号，可增强免疫反应 。（原文表 2，展示使用脂质纳米递送系统的 mRNA 疫苗临床试验情况，使读者更清晰地了解研究进展）3.DC 靶向 mRNA 疫苗：增强免疫效果的新途径：将 mRNA 疫苗靶向递送至富含免疫细胞的组织，能诱导更持久的抗肿瘤免疫，减少全身不良反应 。DC 作为强大的抗原呈递细胞，是靶向 mRNA 递送的重要靶点 。多种研究尝试通过修饰纳米颗粒，使其携带靶向 DC 的配体，如抗体或小分子，以实现更高效的靶向递送 。此外，还可通过调整 LNP 的组成，使其自发地将 RNA - 脂质复合物重定向至 DC 所在的次级淋巴器官和骨髓，避免肝脏和肺部的非特异性积累 。4.LNP 组成与给药途径：影响疫苗效果的关键因素：LNP 的组成对其性能至关重要，第一代阳离子 LNP 虽有较高的 mRNA 结合和转导效率，但存在肝损伤等问题 。现代 LNP 通常包含可电离脂质、胆固醇、辅助磷脂和聚乙二醇化脂质，这些成分共同影响 LNP 的生物活性、生物降解性和结构稳定性 。给药途径也显著影响抗原递送的效果和持续时间，静脉注射可使 LNP 在淋巴结积累，但也会导致肝脏积累；目前，大多数晚期 mRNA 癌症疫苗采用肌肉注射，因为皮肤和肌肉中的常驻抗原呈递细胞可有效摄取和处理 mRNA 编码的肿瘤抗原 。四、基于mRNA 的细胞疗法：创新与突破CAR-T 细胞疗法：现状与挑战：CAR - T 细胞疗法在癌症免疫治疗中取得了显著成效，但传统的体外生产方式成本高昂、流程复杂，且存在严重的不良反应，如细胞因子释放综合征（CRS）、免疫效应细胞相关神经毒性综合征（ICANS）和脱靶毒性等 。此外，病毒载体的使用还存在插入致癌风险，限制了其广泛应用 。mRNA-纳米载体在 CAR-T 细胞生成中的应用：mRNA 技术为 CAR - T 细胞的生成带来了新的希望，具有安全性高、可扩展性强和灵活性好等优势 。通过电穿孔或 LNP 等纳米载体，可将 CAR 编码的 mRNA 递送至 T 细胞内 。研究发现，LNP 介导的 mRNA 递送能有效提高 CAR - T 细胞的生成效率，降低细胞毒性 。此外，还可对 LNP 进行修饰，使其共递送 CAR 编码的 mRNA 和其他调节分子，如 PD - 1 靶向的小干扰 RNA，以克服 CAR - T 细胞的耐药性 。（原文图 4，展示 CAR - 编码 mRNA - 纳米载体工程和 CAR-T 细胞生成方法，帮助读者理解技术流程）体内CAR-T细胞生成：未来的发展方向：体内 CAR - T 细胞生成技术是近年来的研究热点，它可避免体外生产的诸多弊端，降低成本，提高安全性和疗效 。通过直接在患者体内重编程 T 细胞，可减少淋巴细胞清除方案带来的并发症，同时利用完整的免疫系统增强对肿瘤抗原的免疫反应 。多种纳米平台已被开发用于实现体内 T 细胞的高效转染，如基于聚合物的纳米颗粒和具有组织特异性靶向能力的 LNP 等 。超越CAR-T 细胞：CAR-NK 和 CAR-M 细胞的探索：CAR - T 细胞的毒性和开发通用型同种异体 CAR - T 细胞的困难促使人们探索其他 CAR 工程免疫细胞，CAR - NK 细胞和 CAR - 单核细胞 / 巨噬细胞（CAR - M）受到了广泛关注 。CAR - NK 细胞具有细胞毒性强、不良反应小等优势，mRNA 纳米载体可有效用于其体外和体内的生成 。CAR - M 细胞则可通过重编程单核细胞 / 巨噬细胞，增强其浸润和重塑肿瘤微环境的能力，不过其增殖能力有限，需要多次输注 。纳米载体介导的 mRNA 递送为降低 CAR - M 疗法的成本和复杂性提供了可能 。五、纳米颗粒工程在直接溶瘤和细胞重编程中的应用基于 NP 的 mRNA 递送介导直接溶瘤：mRNA 疗法不仅可用于癌症疫苗，还能通过触发肿瘤细胞自我毁灭来实现直接溶瘤 。阳离子和可电离的 LNP 作为安全、低免疫原性的非病毒递送系统，被用于将编码有毒细胞内蛋白的 mRNA 递送至肿瘤细胞 。例如，Nakashima 等人使用装载诱导型半胱天冬酶 - 9（iC9）mRNA 的阳离子 LNP，在体外实验中对 HER2+ SKBR3 和三阴性乳腺癌 MDA - MB231 细胞展现出强大的抗肿瘤活性 。Gu 等人则利用 LNP 系统将编码 TNF 相关凋亡诱导配体（TRAIL）的 mRNA 与 SARS - CoV - 2 刺突受体结合域（RBD）联合递送至结肠癌组织，显著抑制了肿瘤生长 。不过，这些疗法在安全性和疗效方面仍需进一步的临床评估。（可结合相关研究的示意图，直观展示 mRNA-LNP 诱导肿瘤细胞凋亡的机制）基于 NP 的 mRNA 递送介导 TME 重编程及其与直接肿瘤细胞死亡的联合应用：肿瘤微环境（TME）中的细胞对肿瘤的发展和免疫逃逸起着关键作用 ，因此对 TME 进行重编程是癌症治疗的重要策略。通过纳米颗粒递送 mRNA，可以调节 TME 中的细胞功能，使其向抗肿瘤表型转变 。比如，Kong 等人使用装载 p53 编码 mRNA 的氧化还原响应性脂质 - 聚合物杂化纳米颗粒，不仅抑制了肿瘤生长，还使 p53 缺陷的肝癌和非小细胞肺癌对 mTOR 抑制剂敏感 。Zhang 等人设计的靶向聚合物纳米颗粒可将编码干扰素调节因子 5（IRF5）及其激活激酶 IKKβ 的 mRNA 递送至肿瘤相关巨噬细胞（TAM），将其重编程为具有强大促炎和细胞毒性的 M1 表型 。此外，同时递送能诱导肿瘤细胞死亡和 TME 重编程的 mRNA，可产生协同抗肿瘤效应 。例如，Li 等人开发的装载 gasdermin N 末端结构域编码 mRNA 的可电离阳离子 LNP，通过诱导肿瘤细胞焦亡，引发免疫原性细胞死亡，有效抑制了肿瘤生长，且与抗 PD - 1 免疫疗法联合使用时效果更显著 。（原文图 5，展示 mRNA - 纳米颗粒在直接溶瘤和 TME 重编程中的作用机制，辅助读者理解）六、总结与展望mRNA-纳米载体技术在癌症免疫治疗中取得了显著进展，为多种治疗策略提供了支持 ，包括细胞因子和抗体免疫疗法、癌症疫苗、CAR - 工程免疫细胞疗法以及直接溶瘤和 TME 重编程等。通过精确控制 mRNA 的表达位置、持续时间和免疫原性，纳米载体能够显著提升免疫治疗的效果 。然而，该技术在临床转化过程中仍面临诸多挑战，例如 mRNA - 纳米载体的免疫原性问题，尤其是在多次输注后可能引发的不良反应；目前对纳米载体靶向特定人体器官和细胞的最佳属性了解有限，需要进一步研究和优化；此外，mRNA 疗法在克服实体瘤的免疫抑制和异质性方面仍有待突破 ，且大多数 mRNA 制剂需要冷链运输，增加了成本和物流难度 。展望未来，人工智能和机器学习技术的发展有望推动个性化癌症免疫治疗的进步，例如通过预测新抗原特异性 TCR 来设计更有效的免疫疗法 。同时，拓展 mRNA 编码免疫调节剂在其他细胞群体中的应用，如 B 细胞、先天样 T 细胞等，以及开发针对肿瘤基质细胞的纳米载体，将为癌症治疗带来新的机遇 。此外，提高 mRNA 制剂的稳定性，减少对冷链的依赖，也是未来研究的重要方向 。总体而言，mRNA - 纳米载体技术具有巨大的潜力，随着技术的不断完善，有望为癌症免疫治疗带来革命性的突破 。识别微信二维码，添加生物制品圈小编，符合条件者即可加入生物制品微信群！请注明：姓名+研究方向！版权声明本公众号所有转载文章系出于传递更多信息之目的，且明确注明来源和作者，不希望被转载的媒体或个人可与我们联系(cbplib@163.com)，我们将立即进行删除处理。所有文章仅代表作者观不本站。

文章探讨前列腺癌治疗现状及挑战，着重分析 mRNA 疫苗在前列腺癌治疗中的应用，涵盖抗原选择、临床试验、优化策略等方面，指出其虽面临挑战，但具有潜力。前列腺癌概述与治疗现状疾病特征与分期：在英国男性中，前列腺癌是常见癌症。其发展从前列腺上皮内瘤变（PIN）到高级别 PIN（HG - PIN），最终形成腺癌并转移。疾病分为局限性、局部晚期和转移性三个阶段，不同阶段的生存率差异显著，转移性前列腺癌 5 年生存率约 30%。现有治疗手段：治疗方法包括免疫疗法、放疗、激素疗法、手术和化疗。局限性或局部晚期前列腺癌的一线治疗是根治性前列腺切除术或放疗，转移性前列腺癌通常采用化疗。不同治疗方法各有优劣，如根治性前列腺切除术虽可治愈部分患者，但存在勃起功能障碍和尿失禁等副作用；化疗药物多西他赛可延长患者生存期，但也有一定不良反应 。前列腺癌中的抗原肿瘤相关抗原（TAA）：TAA 在癌细胞中高表达，在正常细胞中低表达，是癌症疫苗的潜在靶点。常见的前列腺癌 TAA 包括 PSMA、PSCA、PSA 等。与单价疫苗相比，多价疫苗能引发更广泛的免疫反应，如 CV9103 疫苗编码多种抗原，在临床试验中展现出一定优势。其他抗原性基因：p53、PTEN 和 SPOP 等基因在前列腺癌中易发生突变。突变的 p53 在肿瘤细胞中常过表达，可作为选择性癌症治疗的靶点；PTEN 突变会导致 PI3K - AKT 通路激活，促进肿瘤生长；SPOP 也是前列腺癌中的高频突变基因。这些突变抗原相较于野生型抗原，在肿瘤细胞中特异性高，有望成为更有效的治疗靶点，但目前用于临床还面临诸多挑战。癌症抗原设计的未来方向：通过下一代测序（NGS）等技术可发现肿瘤特异性的新抗原。基于 MHC 多表位抗原构建疫苗，能提高免疫原性，利用生物信息学方法可预测 MHC 结合表位，设计更有效的表位疫苗。前列腺癌疫苗临床试验肽癌症疫苗：由 TSA/TAA 的氨基酸序列组成，能刺激免疫系统攻击癌细胞。但肽疫苗在激活 CD8 T 细胞免疫反应的同时，会激活大量 CD4 T 细胞，可能影响抗肿瘤效果。短肽半衰期短，合成长肽（SLPs）虽能诱导 CD4 和 CD8 T 细胞免疫反应，但临床效果不佳。目前可通过生物信息学方法设计 SLPs 疫苗以改善疗效。树突状细胞疫苗（DC 疫苗）：DC 细胞是强大的抗原呈递细胞，DC 疫苗通过收集患者的未成熟 DC 细胞，加载肿瘤相关抗原后回输患者体内激活免疫反应。Sipuleucel - T 是首个获批的前列腺癌 DC 疫苗，可延长患者生存期。DC 疫苗与其他疗法联合使用，如与免疫检查点抑制剂联合，可能提高治疗效果 。mRNA 疫苗：与 DNA 疫苗相比，mRNA 疫苗具有蛋白表达速度快、安全性高、能触发强烈的体液和细胞免疫等优势。但部分前列腺癌 mRNA 疫苗临床试验结果不理想，如 CV9104 疫苗，可能与未修饰 mRNA 免疫原性不足、注射途径等因素有关。在 COVID - 19 疫苗中，mRNA 疫苗展现出高疗效和良好安全性，为其在癌症治疗中的应用提供了借鉴。mRNA 疫苗与其他传统疫苗比较：以 COVID - 19 疫苗为例，mRNA 疫苗（如 BNT162b2 和 mRNA - 1273）在预防 COVID - 19 方面疗效优于灭活疫苗（CoronaVac）、腺病毒疫苗（Ad26.COV2.S）和重组蛋白疫苗（Covovax），且安全性良好。mRNA 疫苗的未来前景：mRNA 疫苗可编码患者特异性基因，结合免疫检查点抑制剂等免疫疗法，有望提高疗效，目前多项相关临床试验正在进行中。提高 mRNA 疫苗效率的策略优化 5’ Cap 策略：5’ Cap 结构影响 mRNA 的翻译效率和免疫原性。Cap 1 和 Cap 2 结构（具有 2’ - O - 甲基化）能提高翻译效率、减少免疫激活。CleanCap 技术可直接生成 Cap 1 结构，提高 capping 效率，减少免疫反应，其中 CleanCap M6 可进一步提高蛋白表达。优化 5’和 3’ UTR 策略：5’ UTR 负责启动蛋白翻译，3’ UTR 调节 mRNA 稳定性。使用 α 和 β 珠蛋白序列作为 UTR，添加 Kozak 序列，可提高 mRNA 稳定性和翻译效率。优化 poly（A）策略：poly（A）位于 mRNA 3’端，影响 mRNA 半衰期和翻译效率。设计 DNA 模板序列时添加固定长度的 poly（A），可控制其长度和提高重复性。IVT - mRNA 纯化：纯化 IVT mRNA 可去除杂质，尤其是 dsRNA，避免激活先天免疫反应。常用的纯化方法有 HPLC、纤维素吸附和 Rnase III 酶降解等。未来展望：前列腺癌的治疗仍具挑战，常需联合疗法。开发 mRNA 疫苗需考虑抗原选择、mRNA 设计优化以及合适的递送途径。未来需进一步研究如何增强 mRNA 疫苗刺激 CTL 免疫反应的能力，以提高治疗效果。识别微信二维码，添加生物制品圈小编，符合条件者即可加入生物制品微信群！请注明：姓名+研究方向！版权声明本公众号所有转载文章系出于传递更多信息之目的，且明确注明来源和作者，不希望被转载的媒体或个人可与我们联系(cbplib@163.com)，我们将立即进行删除处理。所有文章仅代表作者观不本站。