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导读：目前获批的两款新冠mRNA疫苗（BNT162b2和mRNA-1273）都使用脂质纳米颗粒 （LNP） 作为递送系统，可保护 mRNA 免受体内酶降解，促进其细胞内递送，还可作为免疫刺激佐剂。LNPs在小型和大型哺乳动物中局部注射后可广泛分布于淋巴结（LN）、脾脏和肝脏。虽然LNPs向淋巴器官（例如脾脏和淋巴结）的分布有利于疫苗触发免疫反应，但其全身分布还是可能触发疫苗的反应原性（reactogenicity）。全世界大范围的接种人群已经证实了LNP递送系统的安全性和有效性，但还是会发生罕见的接种不良事件。 为更好地提升mRNA疫苗的安全性，降低全身反应性，有研究者开始尝试直接注射裸mRNA。然而既往研究表明直接递送裸mRNA很难在机体内触发有效的体液免疫反应。2024年4月2日，东京医科齿科大学医学研究所（TMDU）Satoshi Uchida 团队在Molecular Therapy【影响因子12.1】发表文章：《Carrier-free mRNA vaccine induces robust immunity against SARS-CoV-2 in mice and non-human primates without systemic reactogenicity》，他们采用一种无针的射流注射器（PYRO），利用液体压力的瞬时上升促进裸mRNA分子内化进入到皮肤细胞中，无需任何复杂的给药操作。经PYRO注射到皮肤的mRNA可快速被细胞摄取，避免酶促降解，在皮肤细胞中高效表达抗原蛋白。此外，喷射注射还回引起局部淋巴细胞浸润皮肤，可作为疫苗接种的物理佐剂。在没有递送载体的情况下，喷射注射将 mRNA 分布限制在注射部位，避免mRNA分布至全身以及由此带来的全身性炎症反应。在小鼠模型中，在皮肤喷射注射新冠裸mRNA疫苗可触发强烈的体液免疫反应，同时在淋巴结中形成生发中心并诱导CD4和CD8阳性T细胞，为机体提供有效的免疫保护。 01 裸mRNA研究背景 整体来看，裸mRNA注射遭遇极大的挑战性。在没有脂质纳米颗粒的情况下在小鼠皮内注射自复制RNA疫苗。结果发现，这种裸saRNA只能在小鼠体内触发细胞免疫反应，几乎无法诱导产生抗体。有趣的是，接种裸saRNA的小鼠随后再用抗原蛋白刺激时可诱导机体分泌特异性的抗体。在BALB/c小鼠和IFNAR1-/- C57BL/6 小鼠中，通过皮内电穿孔1 μg 编码 ZIKV 前膜和包膜 （prM-E） 糖蛋白的裸saRNA疫苗（sr-prM-E-mRNA）触发有效的体液和细胞免疫反应，从而保护小鼠免受 ZIKV 感染。然而，在野生型C57BL/6 小鼠体内，这种裸saRNA疫苗触发的ZIKV 特异性抗体滴度非常低。同时，疫苗的效力与野生型 BALB/c 或 C57BL/6 小鼠中皮内注射裸saRNA疫苗剂量呈负相关。裸sr-prM-E-mRNA ZIKV 疫苗在野生型 C57BL/6 小鼠中触发的I 型 IFN直接抑制其诱导产生有效的体液反应。 从上述研究我们可以清晰地看出来直接递送裸mRNA很难在机体内触发有效的体液免疫反应。 02 无针注射裸mRNA增强递送和免疫效率 与使用针头注射器（N&S）的手动注射相比，采用PYRO注射裸Luc mRNA在注射部位诱导的荧光蛋白表达水平高出约200倍。尽管蛋白质表达水平存在很大差异，但PYRO和针头注射后在皮肤上产生的物理外观相似，表面均显示圆形的白色气泡，只是针头注射比PYRO产生更大的气泡。在组织学上，两者注射方式的注射溶液均主要分散在真皮和皮下组织。 采用PYRO注射OVA mRNA 可成功诱导机体分泌OVA特异性的IgG血清抗体（IgG1和IgG2a），然而，针头注射OVA mRNA （9ug）后，在小鼠血清中几乎检测不到特异性的IgG血清抗体。有意思的是，针头注射OVA mRNA后，在免疫小鼠脾脏中可检测到OVA特异性的分泌IFN-γ的脾脏细胞。采用PYRO注射OVA mRNA 的免疫小鼠检测到的OVA特异性的分泌IFN-γ的脾脏细胞水平明显更高，但是，仍然要低于注射OVA mRNA-LNP的小鼠水平。此外，用PYRO注射OVA mRNA 的免疫小鼠体内检测不到IL-4（辅助性Th2相关细胞因子）分泌，但是可检测到分泌IFN-γ（辅助性Th1相关细胞因子））的CD4+和CD8+ T细胞。 上述结果说明采用PYRO注射OVA mRNA 可在小鼠体内成功诱导体液免疫和细胞免疫反应。 03 无针注射裸mRNA提供有效的免疫保护 3.1 小鼠模型 在小鼠模型（BALB/c ）中，采用两组不同剂量（10 和 30 μg）的初始-加强免疫方案（间隔三周），利用PYRO注射裸spike mRNA免疫小鼠。两个剂量组免疫小鼠体内均诱导出Spike特异性的血清 IgG，同时，30 μg 免疫组的 IgG 血清滴度要高于10μg免疫组。SARS-CoV-2病毒攻毒5天后，与免疫对照组相比，PPYRO注射裸spike mRNA免疫小鼠体内的病毒载量发生明显下降。 肺组织切片表明，与未免疫的对照组小鼠相比，PPYRO注射裸spike mRNA免疫小鼠肺部的炎症减少，肺泡塌陷没有那么明显。PPYRO注射裸spike mRNA免疫小鼠体内的spike特异性的血清 IgG高滴度水平可长久维持（加强免疫后半年），同时，可触发剂量依赖性的中和抗体滴度和分泌IFN-γ的脾脏细胞。此外，将裸spike mRNA注射缓冲液由10 mM HEPES替换为乳酸林格氏液可增强细胞免疫，因此，在后续非人灵长类研究中使用乳酸林格氏菌作为裸mRNA注射缓缓冲液。 3.2 非人灵长类模型 在食蟹猴模型中，间隔三周，采用PPYRO注射三次裸spike mRNA溶液。在食蟹猴注射时裸spike mRNA溶液体积为50μL，注射后溶液分布直径为1厘米，而在小鼠身上注射时时裸spike mRNA溶液体积为20μL，射后溶液分布直径仅为2毫米。裸spike mRNA溶液在真皮层更为广泛的分布可能会促进 mRNA 与 APC 的接触。在PYRO注射后几个小时内，真皮层水泡会随之减小，并且在 24 小时内变得几乎不可见。免疫食蟹猴均可产生高滴度的Spike特异性的血清IgG结合抗体和中和抗体。在PPYRO注射后，食蟹猴体温和体重均保持恒定，在血液中也未检测到促炎细胞因子（IL-6和IFN-γ）的释放。这些数据表明，在非人灵长类中采用PPYRO注射裸spike mRNA后可触发安全、高效的抗体反应。 04 抗原而非mRNA迁移到淋巴结 在小鼠模型中，采用PPYRO注射OVA mRNA 4h后，在注射部位同侧的腹股沟和腋窝淋巴结、肝脏及脾脏中均未检测到OVA mRNA。相反，采用皮内注射OVA mRNA LNP后，在注射部位同侧的腹股沟和腋窝淋巴结、肝脏及脾脏中均检测到OVA mRNA 存在。也就是说，采用PPYRO注射后，裸露的mRNA不会从注射部位扩散出去，而注射LNP制剂后，mRNA会迁移到淋巴结 、肝脏及脾脏。 采用PPYRO注射2ug/9ug OVA mRNA 后，在腹股沟和腋窝淋巴结、肝脏及脾脏中未检测到IL-6mRNA和IFN-βmRNA。但是，采用皮内注射9ug OVA mRNA LNP后，所以检测器官中的L-6mRNA和IFN-βmRNA随之也出现明显升高。这说明小鼠耐受裸mRNA和LNP制剂的最大剂量是不同的，采用PPYRO注射9ug裸OVA mRNA 也是可以耐受的。值得注意的是，注射2μg mRNA-LNP制剂和采用PPYRO注射9ug mRNA可提供相当的体液免疫反应，同时伴随着最小的全身炎症反应。 采用EGFP mRNA追踪抗原从注射部分到同侧腹股沟淋巴结的分布。PYRO注射裸EGFP mRNA2 4小时后在注射部位的真皮和皮下组织中观察到强烈的EGFP表达。EGFP 信号部分与 CD11c（DC细胞标记物）共定位，表明APC 中 EGFP mRNA的表达。同时，其他EGFP信号没有与CD11c信号共定位，表明其他细胞类型中也会发生GFP mRNA的摄取和表达。在腹股沟LN中，注射后24小时也检测到EGFP信号。即便在腹股沟中未检测到mRNA积累的情况下，在淋巴结中的DC细胞也会表达EGFP 。这些结果表明，在皮肤中吸收抗原 mRNA 的 DC细胞迁移到引流淋巴结，在那里，它们与 T 细胞相互作用进行抗原呈递。在PYRO注射裸mRNA后，腹股沟淋巴结会形成生发中心，引流淋巴结构上的成熟使得射流注射裸 mRNA疫苗后实现长寿命的抗体反应。 05 PYRO注射具有物理佐剂效应 诱导高水平抗原表达不足以诱导强大的免疫反应。事实上，缺乏佐剂功能的 mRNA 递送系统即使具有有效的抗原表达也无法诱导强烈的免疫反应。PYRO注射裸mRNA 24小时后在注射部位出现局部淋巴细胞浸润，显示其佐剂功能。有趣的是，PYRO注射不含mRNA的缓冲液后，也观察到类似的促炎反应。与PYRO注射相比，针头注射mRNA溶液或缓冲液未能显示出淋巴细胞浸润。这些结果表明，PYRO注射而不是mRNA的特性触发了促炎反应，这可视为一种物理性的免疫佐剂效应。而且，研究人员还发现PYRO注射位置会影响疫苗接种的免疫效果。与对侧加强免疫组相比，同侧加强免疫组诱导更高水平的OVA特异性IgG，而同侧和对侧加强免疫组触发的细胞免疫反应相当。在同一时间点，重复PYRO注射接种（仅初始免疫）并不能像初始-加强免疫一样触发有效的体液和细胞免疫反应。 06 总结 这项研究采用液体喷射注射器 PYRO注射裸mRNA在小鼠和NHP模型中触发高效的体液免疫反应和细胞免疫反应。值得注意的是，PYRO提供的液体流速（1 mL / s）比针头注射提供的液体流速（最大0.025 mL / s）快40倍以上，对皮肤组织施加了大大增强的剪切应力。这种剪切应力一方面可提升裸mRNA的递送效率，另外一方面有助于在注射部位诱导促炎反应（即使注射不包含mRNA的缓冲液）。 从安全性的角度来看，PYRO注射裸mRNA会避免mRNA的全身性分布，也不会存在LNP制剂触发的全身性的炎症反应。在PYRO注射裸mRNA后，即便引流淋巴结中没有mRNA的迁移，但是也存在EGFP阳性的APC细胞，说明在皮肤中的APC吸收抗原mRNA后迁移到引流淋巴结中，从而与淋巴结中的T细胞发生相互作用，完成抗原呈递过程，最终触发高效的体液免疫和细胞免疫反应。更加重要的是，在小鼠攻毒模型中，PYRO注射裸Spike mRNA免疫小鼠可显著降低体内病毒载量，减轻肺部的组织损伤。在未来，还需要优化 mRNA 化学修饰、免疫刺激佐剂和接种方案来提升裸mRNA疫苗的免疫效果。 参考文献  [1] Abbasi S, Matsui-Masai M, Yasui F, Hayashi A, Tockary TA, Mochida Y, Akinaga S, Kohara M, Kataoka K, Uchida S. Carrier-free mRNA vaccine induces robust immunity against SARS-CoV-2 in mice and non-human primates without systemic reactogenicity. Mol Ther. 2024 May 1;32(5):1266-1283. doi: 10.1016/j.ymthe.2024.03.022. 识别微信二维码，添加生物制品圈小编，符合条件者即可加入 生物制品微信群！ 请注明：姓名+研究方向！ 版 权 声 明 本公众号所有转载文章系出于传递更多信息之目的，且明确注明来源和作者，不希望被转载的媒体或个人可与我们联系(cbplib@163.com)，我们将立即进行删除处理。所有文章仅代表作者观点，不代表本站立场。

关注并星标CPHI制药在线 呼吸道病毒是以呼吸道为侵入门户，在呼吸道黏膜上皮细胞中增殖，引起呼吸道局部感染或呼吸道以外组织器官病变的一类病毒，主要包括正黏病毒科（流感病毒）、副黏病毒科（副流感病毒、呼吸道合胞病毒、麻疹病毒、腮腺炎病毒、亨德拉病毒、尼帕病毒、人偏肺病毒）、冠状病毒科（SARS-CoV、MERS-CoV、2019-nCoV冠状病毒）、披膜病毒科（风疹病毒）、小RNA病毒科（鼻病毒）等不同病毒科的多种病毒。呼吸道病毒感染是全球范围内人类发病和死亡的主要原因之一，多数急性呼吸道感染是由病毒引起的。天然药物主要通过直接和间接途径发挥抗呼吸道病毒感染类疾病，直接作用是指抑制病毒的吸附和阻止病毒释放，从而保护机体细胞不受损害，间接作用则是通过免疫调节作用起到抗病毒效果。 1、抑制病毒的吸附和阻止病毒释放 血管紧张素转化酶2 (angio‐tensin-converting enzyme 2，ACE2) 是存在于宿主细胞上的一种受体，新型冠状病毒表面的刺突蛋白可以协助病毒找到宿主细胞上的 ACE2 受体并诱导病毒与受体细胞相结合，吸附宿主细胞，在酶的反应下病毒的包膜与宿主细胞融合进而入侵宿主细胞。研究发现青蒿素及其衍生物可以缠绕新冠病毒刺突蛋白的Lys353和Lys31 结合位点，从而影响其与人体ACE2受体蛋白的融合，从而阻止病毒吸附宿主细胞。高分辨质谱和ACE2生物色谱法筛选确定连花清瘟中的大黄酸、连翘苷A、连翘苷I、新绿原酸及其异构体对ACE2具有高度抑制作用。姜黄素、醉茄素A、胡椒碱、芒果苷、蒂 巴 因、小檗碱、穿心莲内酯和印楝素对SARS-CoV-2 的刺突蛋白和ACE2 受体均具有显著的结合亲和力，可以阻断刺突蛋白与ACE2 受体的结合从而抑制病毒吸附宿主细胞。中药丹参水溶性单体成分丹酚酸可通过阻止刺突蛋白六螺旋束结构形成，有效抑制新型冠状病毒的吸附。 血凝素（HA）和神经氨酸酶（NA）是流感病毒包膜上的2种糖蛋白，在流感病毒入侵宿主细胞及传播的过程中扮演着重要的角色。HA可识别并结合宿主细胞表面的唾液酸受体，使病毒粘附于宿主细胞表面、介导病毒包膜与胞内体膜融合；NA能够水解宿主细胞表面的唾液酸释放新病毒。研究发现，槲皮素可通过与流感病毒血凝素蛋白结合，竞争性抑制流感病毒血凝素与宿主细胞的唾液酸结合，抑制病毒包膜与宿主细胞膜融合，抑制病毒以胞吞形式入侵宿主细胞。发酵人参提取物可通过抑制HA、NA活性对H1N1、H3N2、H5N1、H7N9病毒起到治疗作用。穿心莲内酯磺化物可通过抑制HA活性实现抗H1N1、H3N2、乙型流感病毒（IBV）的作用。大蒜素可以用作H1N1的NA、HA、M2蛋白通道的有效多靶点抑制剂，黄芩苷可通过抑制病毒的血凝素HA2亚基活性而抑制H5N1禽流感病毒的进入。安石榴苷能抑制流感病毒的神经氨酸酶，阻止唾液酸的分解，阻断病毒释放。诃子酸和诃子林鞣酸可以抑制病毒NA蛋白的活性，破坏病毒与宿主细胞上唾液酸的结合，在感染的细胞中阻止病毒释放。 人呼吸道合胞病毒 (human respiratory syncytial virus，HRSV) 含有三种膜结合蛋白：附着蛋白(G)、融合蛋白(F)、病毒孔蛋白 (SH)。蛋白G可与宿主细胞结合，蛋白F可以融合病毒和细胞膜，使病毒核糖核蛋白能够到达细胞质。三种糖蛋白相互作用使病毒入侵宿主细胞。甘草可通过抑制病毒附着、内化减少HRSV感染，18β-甘草次酸是影响甘草抗HRSV 活性的活性成分之一。穿心莲内酯衍生物可有效抑制HRSV包膜表面糖基蛋白荧光肽的裂解，阻止病毒入侵细胞。车前草醇提液可通过与HRSV竞争结合Hep-2细胞表面的特异性受体抑制HRSV的吸附过程，同时可直接杀死病毒，发挥抗RSV作用。  2、抑制病毒的增殖 病毒感染特定的活细胞后，可以在病毒核酸的控制下，利用宿主细胞的能量系统、核糖体等合成病毒核酸和蛋白质，最后组装成结构完整、具有感染力的成熟病毒颗粒。冠状病毒3C 样蛋白酶(3C-like protease，3CLpro) 与木瓜蛋白酶样蛋白酶(papain-like protease，PLpro) 在病毒增殖过程能够将多肽链切割分解成病毒复制需要的片段。通过研究发现，木犀草素、β-谷甾醇、芒柄花黄素、紫檀素、蒙花苷、金丝桃苷等通过与3CLpro特异性结合，阻止3CLpro发挥作用。萝卜硫素 (SFN) 是一种缓慢结合的抑制剂，SFN与3CLpro能够发生共价反应， 形成了SFN-3CLpro复合物，从而阻断3CLpro的作用。杨梅素可以与3CLpro共价结合，阻止3CLpro发挥作用，从而抑制病毒的增殖。冬凌草甲素不仅能够抑制3CLpro 的活性，而且在高浓度下可以阻止PLpro主导的反应活动，从而阻止病毒的增殖。新橙皮苷、蛇床子素等与PLpro结合，阻止PLpro发挥作用，从而抑制病毒增殖。西北甘草异黄酮和甘草异黄酮 A可以与RNA依赖的RNA聚合酶 (RNA-dependent RNA polymerase，RdRp) 结合形成复合物，阻止RdRp发挥作用，从而抑制病毒的增殖。 核因子-κB (nuclear factor-κB，NF-κB) 信号通路可以调节流感病毒RNA合成，在病毒的复制过程中发挥重要作用。葡萄红素B能够抑制H1N1病毒在MDCK和A549细胞中的复制，并通过IκB激酶 (IκB kinase，IKK) 去磷 酸化抑制NF-κB 转入细胞核，从而降低了病毒诱导的活性氧 (reactive oxygen species，ROS)的生成。细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂p21可以直接与病毒聚合酶酸性蛋白结合，并通过破坏核糖核蛋白复合物的形成来限制IAV聚合酶活性，从而阻止病毒增殖。 免疫调节        病毒感染机体时，巨噬细胞是防御系统的第一道屏障，产生各种抗病毒因子如白细胞介素IL-1、IL-6、肿瘤坏死因子TNF⁃α等，介导机体发挥抗病毒免疫应答，进而抑制和清除体内病毒细胞。人参多糖治疗H9N2感染的鸡发现，其胚胎成纤维细胞CEF中MHC Ⅱ基因表达及细胞因子IL-2、IL-4、IL-10水平升高，表明人参多糖可通过增强体液免疫应答促进机体抗病毒活性。儿茶提取物可增强流感病毒感染小鼠的细胞免疫，还能促进特异性中和抗体产生。干扰素是细胞相互交流以预防和根除病毒感染的一种手段，分为Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型。先天性免疫细胞分泌的以IFN⁃α 与IFN⁃β 为主的Ⅰ型干扰素（IFN）介导的天然免疫机制是宿主细胞抵抗冠状病毒最重要的方式之一。研究报道，黄檗水提物通过诱导Ⅰ型干扰素（IFN⁃β）或促炎性细胞因子（IL-6、TNF⁃α）和随后刺激在宿主细胞中的抗病毒状态， 从而抑制病毒复制， 提高小鼠对甲型流感病毒H1N1、H5N2、H7N3、H9N2的感染存活率。IFN⁃γ 属于Ⅲ型干扰素，主要由Ⅰ型辅助性T细胞（Th1细胞）及自然杀伤细胞产生。研究表明，红参水提物可通过抑制HRSV诱导的小鼠树突状和巨噬细胞样细胞中炎性因子TNF⁃α、IL-6、IL-8表达和人肺上皮细培养液中活性氧的形成，降低肺病毒载量，增强干扰素IFN⁃γ分泌以及增加小鼠 HRSV感染后CD8+T细胞和CD11c+树突状细胞的数量等多种机制发挥抗HRSV作用。此外，红参水提取物可诱导甲型流感病毒H5N1感染的小鼠肺组织IFN⁃α、IFN⁃γ 产生，增强免疫从而减轻H5N1流感病毒的感染。 视黄酸诱导基因1样受体（RLRs）信号通路在抗病毒免疫的过程中发挥着重要作用。当16HBE细胞被H1N1 病毒感染后，炎症因子IL-4、IFN⁃γ、RLRs通路相关因子RIG-Ⅰ、IFN⁃β 启动子刺激物⁃1（IPS-1）、IRF-7、IRF-3、NF⁃κB水平均升高，穿心莲内酯干预后上述因子水平均降低，提示穿心莲内酯可通过降低其信号因子来影响RLRs信号通路。研究发现，连翘酯苷A可通过降低小鼠肺部免疫细胞的RLRs信号通路相关蛋白RIG-Ⅰ、MAVS、NF?κBp65表达，降低Th 1/Th 2和Th 17/Treg比例，从而减轻甲型流感病毒FM1株在小鼠肺部引起的炎症反应。 Toll样受体（TLRs）信号通路也是和呼吸道病毒相关的天然免疫主要信号通路之一， TLRs可以激活 NF⁃κB等转录因子，促进多种与免疫有关的细胞因子及趋化因子的分泌从而引起炎症反应。玉叶金花水提物能抑制感染流感病毒A/FM1/47（H1N1）小鼠血清TNF⁃α、IL⁃6、 IL-1β过表达及肺组织中TLR7、MyD88、NF⁃Κb mRNA及蛋白表达，提示玉叶金花可通过降低TLR7介导的MyD88依赖的信号转导通路活化抑制 NF⁃κB活性，从而减轻炎症风暴， 发挥抗流感病毒作用。研究发现，栀子苷通过影响TLR3/TRIF信号通路，降低炎性细胞因子IL-6、TNF⁃α 表达，促进抗病毒因子IFN⁃β 合成，保护A/FM/1/4（H1N1）建立的流感病毒性肺炎小鼠引起的病毒性肺损伤。黄芩苷可通过抑制TLR4/NF⁃κB信号转导途径，降低下游细胞因子IL-6 水平来发挥抑制 HRSV 感染的作用。 参考文献：       [1]王剑,张萍萍,于健,等.天然药物抗呼吸道病毒活性成分及其作用机制研究进展[J].药学学报,2024,59(04):853-865. [2]杜正彩,郝二伟,韦棪婷,等.中国-东盟传统药用植物抗呼吸道常见病毒研究进展[J].中成药,2022,44(11):3579-3587. 作者简介： 小米虫，药品质量研究工作者，长期致力于药品质量研究及药品分析方法验证工作，现就职于国内某大型药物研发公司，从事药品检验分析及分析方法验证。 END 【智药研习社直播预告】 来源：CPHI制药在线 声明：本文仅代表作者观点，并不代表制药在线立场。本网站内容仅出于传递更多信息之目的。如需转载，请务必注明文章来源和作者。 投稿邮箱：Kelly.Xiao@imsinoexpo.com ▼更多制药资讯，请关注CPHI制药在线▼ 点击阅读原文，进入智药研习社~

引言传统1 型树突状细胞（cDC1）是抗肿瘤免疫中必不可少的抗原呈递DC亚群。抑制B细胞淋巴瘤9和B细胞淋巴瘤9样蛋白（BCL9/BCL9L）可抑制肿瘤生长并增强对癌症的免疫反应。然而，致癌性BCL9/BCL9L是否损害肿瘤中的抗原呈递仍不完全清楚。2024年5月29日，复旦大学朱棣及王明伟共同通讯在Signal Transduction and Targeted Therapy 发表题为“Targeting BCL9/BCL9L enhances antigen presentation by promoting conventional type 1 dendritic cell (cDC1) activation and tumor infiltration”的研究论文，本研究表明靶向BCL9/BCL9L通过刺激cDC1 激活和浸润到肿瘤中来增强抗原呈递。用新型抑制剂hsBCL9z96或BCL9/BCL9L敲除小鼠抑制BCL9/BCL9L可显著延缓肿瘤生长并促进抗肿瘤CD8+ T细胞应答。机制上，靶向BCL9/BCL9L促进了肿瘤中的抗原呈递。这是由于XCL1-XCR1轴增加cDC1激活和肿瘤浸润。重要的是，使用单细胞转录组学分析，研究发现Bcl9/Bcl9l缺陷的cDC1在通过NF-κB/IRF1信号传导激活和抗原呈递方面优于野生型（WT）cDC1。研究共同证明，靶向BCL9/BCL9L在肿瘤衍生抗原的cDC1调节抗原呈递以及CD8+ T细胞活化和肿瘤浸润中起着至关重要的作用。靶向BCL9/BCL9L调节cDC1功能并直接协调最佳抗肿瘤免疫所需的正反馈回路可以作为对抗免疫抑制和增强癌症免疫治疗的潜在策略。抗原呈递对于抗肿瘤反应是必不可少的。为了引起有效的抗肿瘤CD8+ T细胞反应，抗原呈递必须在两个主要事件中成功：首先，肿瘤抗原被抗原呈递细胞（APC）捕获，加工成肽片段，并呈递在具有主要组织相容性复合物 I类（MHC-I） 或人类白细胞抗原 I类 （HLA-I）的APC上，以引发 CD8+ T 细胞。其次，活化的CD8+ T细胞识别APC直接呈递的肿瘤抗原，然后杀死肿瘤细胞。传统的1型树突状细胞（cDC1）被认为是将肿瘤抗原呈递到 MHC-I 上以引发CD8+ T细胞的优势 DC 亚群。先前的研究表明，BATF3−/− 选择性缺乏cDC1的小鼠表现出交叉呈递缺陷并损害抗肿瘤免疫。在人类癌症中，越来越多的证据表明，瘤内cDC1与癌症免疫治疗的预后和反应改善有关。然而，DC在肿瘤微环境(TME)内往往功能失调、不成熟甚至具有免疫抑制作用，缺乏用于交叉引物的抗原提呈能力。此外，cDC1罕见，因为TME通过各种机制将cDC1排除出肿瘤。因此，旨在增强抗原呈递的方法可能因此促进抗肿瘤免疫，并改善癌症免疫治疗。Wnt/β-catenin 信号转导不仅在调节肿瘤致癌作用中至关重要，而且在许多恶性肿瘤中也有利于免疫侵袭。越来越多的研究报道了Wnt/β-catenin信号通路调节DC功能。启动期间CD11c+DC中β-连环蛋白的丢失减弱了肿瘤诱导的记忆CD8+ T细胞反应抑制。CD11c+ DCs中LDL受体相关蛋白5/6（LRP5/6）的缺失可抑制肿瘤生长，抗肿瘤反应升高。DC中β-连环蛋白或组成型活性糖原合酶激酶3β（GSK3β）的下调也增强了DC的功能。此外，Wnt1促进了cDCs中CC/CXC趋化因子的转录沉默，诱导了肺腺癌的免疫耐药性。此外，活跃的Wnt/β-catenin信号通路抑制CCL4和CCL5向肿瘤募集的 CD103+ DC。靶向BCL9/BCL9L使肿瘤对免疫检查点阻断疗法敏感（Credit: Signal Transduction and Targeted Therapy）B细胞淋巴瘤9和B细胞淋巴瘤9样（BCL9/BCL9L）作为 β-连环蛋白的转录共激活因子，在 Wnt/β-连环蛋白信号通路中至关重要。BCL9/BCL9L表达在各种人类癌症中升高，并与癌症患者的不良预后相关。之前的研究报道了抑制BCL9/BCL9L通过多种机制促进抗肿瘤反应。cDC1已被公认为在CD8+ T 细胞启动和癌症免疫治疗的交叉呈递中发挥重要作用。然而，靶向 BCL9/BCL9L 是否控制抗原呈递，尤其是抗肿瘤免疫中cDC1的抗原呈递仍不完全清楚。该研究报告了BCL9/BCL9L的抑制或耗竭显著抑制了肿瘤生长并增强了抗肿瘤反应。有趣的是，靶向BCL9/BCL9L以增强cDC1的抗原呈递能力并促进cDC1和CD8+ T细胞浸润到肿瘤中，这强调了这种方法在增强cDC1介导的抗肿瘤免疫方面的关键作用。研究旨在改善抗原呈递的疗法可能受益于与BCL9抑制剂的联合使用。原文链接https://doi.org/10.1038/s41392-024-01838-9责编|探索君排版|探索君文章来源|“iNature”End往期精选围观一文读透细胞死亡(Cell Death) | 24年Cell重磅综述（长文收藏版）热文Cell | 是什么决定了细胞的大小？热文Nature | 2024年值得关注的七项技术热文Nature | 自身免疫性疾病能被治愈吗？科学家们终于看到了希望热文CRISPR技术进化史 | 24年Cell综述