XCL1

从20世纪80年代起，医学界便开启了自然杀伤（NK）细胞疗法的临床应用探索之路。然而，在漫长的实践过程中发现，单纯依靠NK细胞疗法，恐难以达到预期的治疗效果。好在最新的研究成果带来了转机：将NK细胞疗法与其他治疗手段联合运用，有望显著提升治疗成效。 最近， 世界知名医学科学杂志《Cureus》报道了一则备受瞩目的病例。一位被诊断为卵巢癌且已全身多发性转移的患者，在接受NK细胞、WT1-DC疫苗+纳武利尤单抗的联合治疗后，体内多处肿瘤明显缩小，腹水也完全消失，病情得到了显著改善！更为惊喜的是，由于肿瘤明显缩小，患者获得了进行原发肿瘤根治性切除术的机会。 据悉，该患者目前正在与医生商讨，计划考虑进行原发肿瘤根治性切除术，力求进一步控制病情，提升生存质量。 ▲截图源自“Cureus” 一、NK细胞与DC细胞强强联合：向癌细胞发起猛攻 双侧卵巢癌伴腹膜播散及大量腹水是一种极为严重的疾病，在过往的治疗手段中，化疗几乎是唯一可行的选择。近年来，研究发现抗肿瘤免疫机制参与到了化疗的抗肿瘤过程中，这一发现使得化疗与免疫治疗的协同作用逐渐受到医学界的广泛关注。 相关研究表明，NK细胞活性较高的患者，其无进展生存期相对更长。目前，通过在体外激活和增殖NK细胞，显著提高其抗肿瘤活性，已在临床上取得了一定疗效。然而，仅依靠NK细胞单药治疗，效果仍存在局限。因此，医学界正积极探索多种改进方案，包括优化培养方法、对NK细胞进行基因改造，以及尝试将其与分子靶向药物联合使用等。 在免疫细胞的相互作用研究中，树突状细胞（DC）和自然杀伤细胞（NK）细胞之间的关系虽仍存在诸多未知，但早在1999年，《自然医学》杂志就曾报道，树突状细胞能够通过粘附体内休眠状态的NK细胞，从而激活NK细胞，增强其抗肿瘤能力。具体而言，树突状细胞在膜表面表达TNF超家族配体，可直接激活NK细胞；而树突状细胞衍生的外泌体中的TNF，也能通过与NK细胞上的TNF受体结合，实现对NK细胞的激活。同时，活化后的NK细胞也会反过来影响DC，它们通过分泌INFγ和TNFα激活DC，并且NK细胞来源的趋化因子，如CCL4、CCL5和XCL1，还能促进DC向肿瘤部位迁移。 综上所述，作为获得性免疫重要组成部分的DC细胞、作为先天性免疫关键成员的NK细胞，二者之间并不存在绝对的界限，它们之间可能存在着紧密且复杂的细胞间通讯，这种通讯在很大程度上决定了整体的抗肿瘤免疫强度。 二、WT1-DC疫苗联合NK细胞，助卵巢癌患者肿瘤灶明显缩小、腹水退散 维尔姆斯肿瘤抗原1（WT1）是一种常见的癌症抗原，在各类癌症中均呈现高表达状态，美国国家癌症研究所对其临床实用性给予了高度评价。在《Cureus》所描述的病例中，患者采用了WT1树突状细胞疫苗疗法（WT1-DC），该疗法与化疗同步开展，同时还进行了多轮NK细胞疗法。 该患者为一位30岁左右的女性，在生完二胎6个月后，突然出现腹水症状。经全面检查，确诊为 IV期子宫内膜癌 （详见图1A）。全身PET-CT检查结果提示： 癌细胞已发生全身转移，涉及双侧卵巢癌、腹膜播散、肝多发转移、肺转移、骨转移 。孕妇腹部CT扫描清晰显示出 大量腹水 （图2A）。起初，患者按照常规方案仅接受化疗，但医生评估病情后认为不容乐观，于是决定同时开展免疫细胞治疗。此后，患者接受了 化疗（紫杉醇+卡铂AUC5）+多轮WT1（是一种常见类型的癌症中的高表达）-DC（树突状细胞疫苗治疗）+高活性NK细胞 联合治疗，最终取得了显著效果，结果显示如下： 1、 全身肿瘤明显缩小 ：治疗前PET-CT显示，该患者不仅存在原发性卵巢癌病灶，同时在肝脏、肺部、腹膜等多处出现转移灶（详见下图A）。在接受NK细胞+WT1-DC疫苗+纳武单抗联合治疗的第142天，再次进行PET-CT检查，结果令人欣喜：原发性肿瘤明显缩小，肺转移灶及腹膜播散灶已消失不见，肝转移灶也显著缩小（详见图1B）。更令人振奋的是，鉴于肿瘤的明显缩小，患者计划考虑进行原发肿瘤根治性切除术。 ▼该患者治疗前后PET-CT对比 ▲图源“Cureus”，版权归原作者所有，如无意中侵犯了知识产权，请联系我们删除 注： ①图A（治疗前PET-CT影像）：可见原发性卵巢癌病灶，以及肝脏、腹膜、肺等多处转移灶（以黑色箭头标注）。 ②图B（治疗第142天PET-CT影像）：对比治疗前，该图呈现出显著的治疗效果，可见患者原发性肿瘤明显缩小，肺转移灶及腹膜播散灶消失，肝转移灶也有缩小迹象。此外，图中白色箭头所指的部位，是腹股沟区在接种树突状细胞疫苗后出现的炎症反应，这一现象提示了机体对疫苗接种产生了相应的免疫应答。 2、 肿瘤标志物与身体指标改善 ：在接受第三次NK细胞治疗后，患者体内的癌胚抗原（CEA）、糖类抗原125（CA125）水平显著回落，趋于正常范围，同时腹围也明显减小（详见图4）。而在开始DC疫苗治疗后，出现了CEA持续恢复正常，CA125却反而上升的情况。这一现象表明，在治疗过程中肿瘤性质发生了变化，可能是机体对治疗产生的复杂反应，也可能暗示肿瘤在某些方面出现了新的发展态势。 但是，由于开始使用树突状细胞（DC）疫苗后腹水仍然明显，并且血液测试中的NK活性较低，为进一步增强治疗效果，医生决定在后续治疗中，加入高活性NK细胞治疗。值得注意的是，每次注射NK细胞时，患者都会出现发热至40℃的症状，这一发热反应恰恰表明，注入体内的NK细胞引发了机体的免疫反应，意味着这些NK细胞正在体内积极发挥免疫作用，对抗肿瘤细胞。 ▼肿瘤标志物变化 ▲图源“Cureus”，版权归作者所有，如无意中侵犯了知识产权，请联系我们删除 3、 腹水显著减少 ：在接受 NK 细胞治疗前，从影像中（详见下图 A）可清晰看到，该患者存在大量腹水。而在 NK 细胞治疗过程中，腹水减少态势明显。第 56 天进行的腹部 CT 检查结果显示，相较于确诊时，患者腹水大幅减少，同时肝转移灶也有所缩小（详见下图 B）。NK 细胞治疗后腹水的明显减少，有力地证明了 NK 细胞疗法在显著抑制腹膜播散方面的积极作用。 ▼该患者NK细胞治疗前后腹部CT对比 ▲图源“Cureus”，版权归原作者所有，如无意中侵犯了知识产权，请联系我们删除 注： ①图A（确诊时腹部CT）：可见大量腹水（*），白色箭头表示肝转移。 ②图B（确诊后第56天腹部CT）：提示腹水明显减少，肝转移灶也缩小。 ▼该患者WT1-DC疫苗+NK细胞治疗后，腹围的变化 ▲图源“Cureus”，版权归原作者所有，如无意中侵犯了知识产权，请联系我们删除 4、 无严重不良反应 ：在整个治疗周期内，患者除了在注射树突状细胞（DC）疫苗或NK细胞时，会出现发热症状外，未出现其他任何严重不良反应。这不仅体现了治疗方案在安全性方面具有一定保障，也为后续治疗的顺利开展提供了有利条件。 ▼体温（BT）最大值 ▲图源“Cureus”，版权归原作者所有，如无意中侵犯了知识产权，请联系我们删除 三、小编寄语 综上，本病例中的患者在产后半年时，因腹水突然大量积聚而就医检查，最终确诊为双侧卵巢癌，且癌细胞已全身多处转移。起初，患者按照常规治疗方案仅接受化疗，但医生评估其预后不佳，于是及时调整治疗策略，开始同步进行免疫细胞治疗。该病例充分表明，无论是化疗与免疫治疗联合所产生的协同作用，还是多种细胞免疫治疗方式的联合运用，都能为那些病情严重、肿瘤状况极差且可供选择的标准治疗手段有限的患者带来显著的临床疗效。 其实，癌症作为一种高度突变的复杂疾病，很难仅靠单一治疗手段，达到理想的治疗效果。目前比较理想的治疗手段是在权威医院（手术、放化疗等）传统治疗的基础上，结合患者病情、个体情况，突变靶点、经济状况等，辅助靶向药、免疫细胞治疗（如DC疫苗、NK细胞、CAR-T、TCR-T、TIL细胞疗法）、质子治疗、电场疗法等新型治疗手段，以达到巩固传统治疗效果、降低肿瘤复发风险、提高患者生存质量、延长生存期等目的。 四、参考资料 [1]Nagai H,et al.Late-Stage Ovarian Cancer With Systemic Multiple Metastases Shows Marked Shrinkage Using a Combination of Wilms' Tumor Antigen 1 (WT1) Dendritic Cell Vaccine, Natural Killer (NK) Cell Therapy, and Nivolumab[J]. Cureus, 2024, 16(3). https://www.cureus.com/articles/239260-late-stage-ovarian-cancer-with-systemic-multiple-metastases-shows-marked-shrinkage-using-a-combination-of-wilms-tumor-antigen-1-wt1-dendritic-cell-vaccine-natural-killer-nk-cell-therapy-and-nivolumab#!/ 本文为全球肿瘤医生网原创，未经授权严禁转载

引言 肺组织驻留记忆 (tissue-resident memory，TRM) CD8+ T 细胞在对抗流感病毒再感染的“异亚型免疫（heterosubtypic immunity）”中起着关键作用。然而，TRM 细胞如何在肺部进行监视、对感染做出反应并与其他细胞相互作用仍未解决。呼吸道感染流感病毒 (influenza virus  IAV) 仍然是全球健康关注的问题。虽然已经有疫苗来对抗季节性流感，但病毒的抗原漂移能力需要每年重新配制疫苗以达到最高效力。 大多数当前的流感疫苗旨在诱导保护性抗体，但这些疫苗靶向高度可变的表面血凝素 (hemagglutinin HA)，容易发生抗原漂移和转换（antigenic drift and shift）。这些疫苗对流感特异性 CD8+ T 细胞的诱导效果较差。然而，来自小鼠、灵长类动物和人类的研究表明，靶向保守流感蛋白（如核蛋白）的记忆 CD8+ T 细胞可以提供超越抗体结合表面 HA 的跨型免疫。在流感感染后，初始 CD8+ T 细胞在肺引流淋巴结中被激活并增殖，然后重新进入循环系统。一些已激活的 CD8+ T 细胞留在循环系统中，而另一些则迁移到肺部。在病毒清除后，一些肺部 CD8+ T 细胞形成驻留记忆细胞群，而其他 T 细胞则会短暂地监视肺部，然后返回循环系统。TRM 细胞稳定地留在组织中，具有独特的表型和功能特征。 近日，来自Iowa大学的John T. Harty 团队在Immunity上发表题为Dynamic landscapes and protective immunity coordinated by influenza-specific lung-resident memory CD8+ T cells revealed by intravital imaging 的文章。这篇文章研究了肺组织驻留记忆 CD8+ T 细胞在对抗流感病毒再感染中的作用及其动态行为。通过一系列实验，作者揭示了TRM细胞在肺部的监视行为、对感染的反应以及与其他细胞的相互作用。 作者使用Thy1.2小鼠和Thy1.1-EGFP转基因T细胞小鼠。将Thy1.1+ EGFP+转基因T细胞（OT-I细胞，特异性识别Ova257–264表位）和Thy1.1+EGFP- T细胞（P14细胞，特异性识别GP33–41表位）转移到Thy1.2小鼠体内。随后用OVA或GP33负载的树突状细胞进行静脉注射，1周后用PR8病毒感染小鼠。 利用激光扫描双光子显微镜对小鼠肺部的记忆CD8+ T细胞进行成像。为减少循环T细胞，使用低剂量的抗Thy1.1抗体。活体成像显示，肺部CD103+ TRM细胞在静息状态下以较低速度（约5 µm/min）巡逻，并在重新感染时显著减慢速度和聚集。研究还发现，这些细胞在重新感染时会在抗原特异性依赖下聚集在IAV感染的细胞附近，并与CCR2+单核细胞紧密相邻，显示出显著的抗原特异性反应。肺部TRM细胞通过产生IFN-γ从而介导炎性单核细胞的招募，对髓样细胞的流入进行调控，从而在早期提供保护性免疫。 利用RNA测序对纯化的肺部CD103+ TRM细胞和脾脏的P14细胞进行基因表达分析。基因表达分析显示，CD103+ TRM细胞表达多种调控髓样细胞生物学的因子，包括CXCR6、Gzmb、Csf1、Xcl-1和Ccl1，这些基因的高表达表明其处于高度效应状态。这些基因的表达使得肺部TRM细胞能够在重新感染时迅速响应，并通过调控局部的免疫环境提供保护。 模式图（Credit: Immunity） 总之，这项研究揭示了肺部驻留记忆CD8+ T细胞在对抗流感病毒中的关键作用。研究表明，这些细胞在重新感染时能够迅速响应，通过产生IFN-γ和调控髓样细胞的流入，提供早期的保护性免疫。这些发现为理解肺部TRM细胞在病毒感染中的作用提供了重要的见解，并可能为开发更有效的流感疫苗提供参考。 参考文献 https://doi.org/10.1016/j.immuni.2024.06.016 责编|探索君 排版|探索君 文章来源|“BioArt” End 往期精选 围观 一文读透细胞死亡(Cell Death) | 24年Cell重磅综述（长文收藏版） 热文 Cell | 是什么决定了细胞的大小？ 热文 Nature | 2024年值得关注的七项技术 热文 Nature | 自身免疫性疾病能被治愈吗？科学家们终于看到了希望 热文 CRISPR技术进化史 | 24年Cell综述

趋化因子系统参与调节细胞迁移、粘附、定位和细胞间相互作用，作用于肿瘤细胞和免疫细胞调节二者细胞活动，高度参与肿瘤的发展过程。根据肿瘤发生过程中所处的阶段、免疫细胞的活化状态、效应与调控反应间的平衡以及趋化因子受体在效应靶细胞和调节性靶细胞上的相对表达，趋化因子会表现出促肿瘤和抗肿瘤两种效应，甚至同一趋化因子作用于不同细胞，具有两种截然相反的效应。 一、促瘤趋化因子 1. CCL2：通过CCL2-CCR2轴募集肿瘤相关免疫抑制细胞；介导肿瘤与肿瘤相关巨噬细胞（TAM）相互作用，提高肿瘤干细胞特性、转移能力和治疗抵抗。 2. CXCL1/CXCL8：通过CXCL1/CXCL8-CXCR2轴募集肿瘤相关免疫抑制细胞。 3. CXCL12：通过CXCR4-CXCL12轴促进TAM分化为血管周围TAM细胞，提高血管通透性，使肿瘤细胞向血管内浸润；实体瘤增加骨髓基质细胞中CXCL12的表达，导致表达CXCR4的髓样细胞积聚，影响免疫细胞的发育成熟，CXCR4-CXCL12轴参与Treg向骨髓的迁移。 4. CCR4：在肿瘤微环境（TME）中募集调节性T细胞（Treg）。 5. CCR6：促进Treg细胞在TME原位增殖。 6. CCR8：在TME内DC细胞附近募集Treg，并通过抗原识别使Treg具有免疫抑制作用；通过CCR8-CCL1轴增加Foxp3表达维持Treg细胞的免疫抑制能力。 7. CCR4+Th2、CCR6+Th17、CXCR3+Th1、CXCR5+Tfh，以上4类趋化因子受体分别在不同细胞中的表达，与Treg抑制功能有一定相关性。 二、抗瘤趋化因子 1. XCL1：通过XCL1-XCR1轴介导cDC1细胞向肿瘤募集，促进cDC1与CD8+T细胞相互作用，促使T细胞扩增和获得效应器功能。 2. CXCL11：其表达与髓源性抑制细胞（MDSCs）的丰度和CD8+T细胞浸润程度成反比。 3. CCR7：介导cDC1和cDC2细胞从肿瘤向TDLN迁移，启动T细胞的效应功能。 4.  CCL21：介导T细胞和DC细胞向肿瘤引流淋巴结（TDLN）募集，其表达减少会影响免疫细胞群定位，最终可能导致T细胞活性降低。 5. CX3CR1：CD8+T细胞接收到CX3CR1信号才能发挥抗肿瘤作用。 三、双效趋化因子 1. CCR5：CCR5-CCL5轴介导cDC1向肿瘤募集，能同时募集Treg细胞和CD8+T细胞；调控TAM表型和功能，介导肿瘤与TAM相互作用，提高肿瘤肝细胞性、转移能力、治疗抵抗 2. CXCR3：CXCR3-CXCL9/CXCL10轴也能同时募集Treg和CD8+T细胞；使干细胞样TCF-1+细胞向cDC1细胞募集、在TME中重激活和通过接触IL-2获得效应器功能；调控免疫效应细胞在肿瘤附近的定位。 四、药物开发 一些趋化因子的研究进入了临床阶段，但总体而言疗效不显著。 1. CXCR3-CXCL9/10/11：IFN-γ是该趋化因子轴的主要驱动因素，联用可以增加效应细胞浸润；瘤内注射CXCL9/10/11等配体或者表达配体的溶瘤病毒，增加效应细胞浸润。 3. CXCR4：使用其拮抗剂 AMD3100， BL-8040可以促进肿瘤的T细胞浸润。 4. CCR4-CCL22/17：用于阻断该轴介导的Treg募集的策略，包括阻断抗体、siRNAs和拮抗剂： （1）CCR4抗体：mogamulizumab (KW-0761)是一种人源化、糖工程IgG1κ单克隆抗体，通过ADCC靶向表达CCR4的细胞。临床试验结果显示它可以消除淋巴瘤中Treg的积累。 （2）CCR4小分子抑制剂：FLX475和RPT193，FLX475联合派姆单抗治疗晚期或转移性癌症的1/2期临床试验(NCT03674567)最近已经完成，但尚未被报道；此外GSK 的(GSK2239633) 和AstraZeneca的(AZD-1678，AZD-2098) 也是CCR4的小分子抑制剂。 5. CCL2-CCR2：阻断CCL2-CCR2，可以抑制MDSCs的浸润： （1）抗CCR2抗体：MLN1202，治疗骨转移（NCT01015560）。 （2）CCR2小分子抑制剂：PF-04136309，联合白蛋白-紫杉醇/吉西他滨治疗中期静态PDA患者的1b期试验显示，外周血中炎症性单核细胞(IM)减少，而没有在骨髓中积累。但与标准化疗相比，CCR2抑制也会导致肺毒性增加。在另一项1b期试验中PF-04136309和叶酸，不同的标准化疗方案（边缘可切除和局部晚期胰腺癌），是安全的，减少单核细胞从骨髓，TAM浸润原发肿瘤，导致高于预期的客观反应率（49%）。 （3）CCR2拮抗剂：CCX872 ，用于治疗胰腺癌，总生存率提高（18个月时29%Vs18.6%）。 6. CCR5：CCR5拮抗剂Maraviroc，在体外模型中将巨噬细胞重新极化为免疫活性表型。目前还在招募的临床试验是卒中后认知障碍：NCT04966429 Safety and Efficacy of Maraviroc in Post-stroke Cognitive Impairment Phase2 7. CXCR1/CXCR2-CXCL8：阻断该轴，抑制肿瘤生长： （1）CXCR1/2抑制剂：Reparixin是一种临床级抑制剂，可在体外抑制乳腺癌的生长。 （2）CXCR1/2的小分子拮抗剂：包括SCH479833和SCH527123，在乳腺癌、CRC、自发性结肠癌肝转移和黑色素瘤的异种移植模型中具有抗肿瘤活性。 （3）CXCL8阻断抗体：ABX-CXCL8，在异种移植模型中抑制黑色素瘤的生长。 总体如麻省总医院Andrew D. Luster教授所言，趋化因子和趋化因子受体很难作为治疗靶点进行开发... Even if chemokines and chemokine receptors represent difficult therapeutic targets, they might help todissect cellular components critical for induction and maintenance of pro- and anti-tumorigenic immune cell states. 参考文献 Hanahan, D. et al. Hallmarks of cancer: the next generation. Cell. 2011; 144: 646-674. Hua, Y. et al. Tumors vs. chronic wounds: an immune cell’sperspective. Front. Immunol.    2019; 10: 2178.  Villablanca et al, Tumor-mediated liver X receptor-alpha activation inhibits CC chemokine receptor-7expression on dendritic cells and dampens antitumor responses. Nat. Med.  2010; 16: 98–105. Binnewies, M. et al, Unleashing type-2 dendritic cells to drive protective antitumor CD4(+)    T cell immunity. Cell. 2019; 177: 556–571.e16. Griffith, J.W. et al. Chemokines and chemokinereceptors: positioning cells for host defense    and immunity. Annu. Rev. 2014; 32: 659-702. Karan Kohli et al，Key chemokines direct migration of immune cells in solid tumors，Cancer Gene Ther . 2022;29(1):10-21. 本周好文推荐 如需转载请联系佰傲谷并在醒目位置注明出处 · · · · · · · ·