Cbl-b

-01-引言嵌合抗原受体（CAR）T细胞疗法是一种过继细胞疗法，自体T细胞通过基因工程表达CAR以特异性杀死肿瘤细胞。自体CD19靶向CAR-T细胞目前已获得大多数主要监管机构的批准，包括美国食品药品监督管理局（FDA）、欧洲药品管理局（EMA）和中国NMPA。这些CAR-T细胞改变了临床实践，显示出强大的抗肿瘤活性。然而，在实体瘤患者中开发具有临床实用性的CAR-T细胞仍然面临重重困难，原因在很大程度上是未知的。有许多可能的原因，包括：（1）特异性不足的靶抗原；（2） 递送不力；（3） 短持续性；（4） 效应器功能丧失；和（5）肿瘤抗原异质性。因此，有必要从过往的CAR-T临床前和临床研究中汲取经验教训，分析CAR-T细胞技术的要素和挑战，并将基础、临床和实践等方面的因素考虑在内，采取应对策略，从而使CAR-T技术能够成为可负担的治疗模式。-02-一、了解CAR-T细胞在实体瘤中失败的原因递送不力CAR T细胞研究和开发中需要回答的两个基本问题是，T细胞在静脉注射后会去哪里，以及是它们进入肿瘤的有效性。模型的临床前数据表明，很少有注射的CAR-T细胞最初进入肿瘤，注射到同基因小鼠体内的小鼠T细胞只持续几周。人体的临床试验数据表明，CAR-T细胞最初在肺部和次级淋巴器官中积累，然后在接下来的24-48小时内非常低效地转移到肿瘤中。CAR-T细胞进入肿瘤首先需要识别内皮细胞表面分泌并结合的趋化因子，内皮细胞主要位于肿瘤间质中，而不是肿瘤细胞富集区。这种最初的内皮识别之后是由选择素介导的滚动粘附，然后是整合素的牢固粘附。在趋化因子（特别是CXCL9、CXCL10、CXCL11以及CCL5）的驱动下，T细胞然后迁移到肿瘤基质中。在这里，血管周围细胞、细胞外基质蛋白和间充质基质细胞（主要是成纤维细胞）组成了屏障。一些T细胞通过间质迁移，更少的T细胞最终在肿瘤衍生趋化因子的引导下进入肿瘤细胞富集区，在那里它们可以杀死肿瘤细胞，这一过程需要与肿瘤细胞上的ICAM1结合。这一过程效率极低，导致很少的T细胞成功地与肿瘤细胞相互作用。这里存在许多缺乏效率的原因，包括趋化因子-CCR失配、粘附受体缺陷和充当屏障的细胞外基质。另一个重要但被低估的问题可能是CAR-T细胞向淋巴组织和远离实体瘤的“误导”。到目前为止，CAR T细胞的制造主要受到在B细胞白血病或淋巴瘤患者中测试CD19靶向产品的试验产生的数据指导，这些试验强调了淋巴结和/或骨髓运输、抗肿瘤活性的扩展和持久性的重要性。已知具有高水平CCR7和CD62L表达的T细胞优先运输到淋巴结或骨髓。因此，大多数当前方案的目标是产生主要具有中枢记忆细胞（CD62L高和CCR7高CD45RO+）表型的CAR-T细胞，而不是效应记忆细胞（CD 62L低和CCR7-低CD45RO++）表型，这通常不利于向肿瘤的转移。此外，应考虑另外两个注意事项。首先，冷冻保存可能会影响CD62L的表达，从而影响运输。其次，CD62L被认为通过其他机制促进抗肿瘤活性，具体而言，CD62L可能引导T细胞向某些实体瘤中存在的三级淋巴结构内的高内皮细胞微静脉运输。这些淋巴结构可能促进T细胞浸润，并改善抗肿瘤免疫反应。短持久性在涉及实体瘤患者的临床试验中，就CAR-T细胞的持久性而言，使用PCR或流式细胞术检测，迄今为止进行的几乎每一项试验都显示CAR-T细胞仅存在于血液样本中。血液中CAR T细胞DNA转录物的范围为每微克DNA103至104个拷贝，输注后仅在约一个月内检测到CAR-T细胞，峰值通常出现在10-14天。相比之下，在白血病患者中测试CD19靶向CAR-T细胞的大多数成功试验都发现，血液中有大量的CAR-T细胞，通常为每微克DNA 105-106个拷贝，其持续时间从几个月到几年不等。总之，临床前和临床研究的结果表明，静脉注射后，CAR-T细胞向肿瘤的转运效率非常低，而且大多数这种转运可能在注射后不久发生。从人类研究中获得的有限数据表明，进入实体瘤的少数CAR-T细胞具有有限的持久性，并且不会广泛增殖。效应器功能丧失CAR-T细胞的临床前研究一致发现，它们的细胞毒性活性最初很高，但随着时间的推移逐渐降低。基因组和表观基因组的变化都与这种低功能状态有关。诱发这种进行性功能减退状态的原因尚不完全清楚。可能与TME中存在的多种因素相关，包括低pH、缺氧、由于关键氨基酸和葡萄糖水平低而导致的营养缺乏、高水平的活性氧（ROS）、免疫抑制介质（如TGF-β、PGE2、腺苷和IL-10）的存在，以及与骨髓来源的抑制细胞和CD4+调节性T细胞的相互作用。T细胞内在因素包括由免疫检查点（如PD-1、CTLA4、TIM3、TIGIT和LAG3）和抑制性细胞内信号通路（如DGK、NR4A、SHP1和cbl-b）介导的“调节性关闭”。此外，还有多种表观遗传学变化。肿瘤异质性与抗原扩散与B细胞恶性肿瘤或多发性骨髓瘤不同，实体瘤中的抗原表达几乎总是较低且更异质。因此，除非CAR-T细胞诱导某种旁观者或抗原扩散效应，或靶向多种抗原，否则成功治疗的可能性很低。-03- 二、我们可以汲取的经验教训某些实体瘤患者现在可以使用过继性T细胞转移成功治疗，其中最显著的成功是黑色素瘤患者的TIL治疗。在非小细胞肺癌患者中使用TIL也取得了有希望的结果。我们可以从这些成功中学到什么，以使CAR-T细胞在实体瘤中取得更大的成功？针对淋巴结转移优化的T细胞可能不是针对实体瘤的最佳细胞与优先运输至外周位点的效应细胞或效应记忆细胞相比，CD62L和CCR7在幼稚或中央记忆T细胞上的高表达能够优先运输至次级淋巴结和骨髓。当用于开发靶向实体瘤的CAR-T细胞时，这些表型的细胞可能是次优的。实体瘤导向的CAR-T细胞被设计为靶向在实体瘤细胞表面表达的完整抗原。因此，当这些细胞进入骨髓或淋巴结时，它们将不会遇到它们的抗原，因此不会被激活以增殖或分化为效应细胞，除非肿瘤已经转移到这些位置。数据显示，在实体瘤模型中，效应器CAR-T细胞比记忆T细胞更有效。因此，使用旨在优化淋巴结运输的标准方案产生CAR-T细胞可能是实体瘤需要避免的一个关键教训。DC交互可能很重要TIL或TCR-T细胞和CAR T细胞之间的一个重要区别是前者可以被DC广泛激活，DC可以提供最佳的共刺激信号。这种共刺激可以发生在淋巴结和骨髓中。找到利用DC激活能力的方法，以增强CAR-T细胞增殖和持续的能力，是我们应该尝试从涉及TIL的试验中吸取的经验。可能不需要长期持久性普遍认为，CAR-T细胞的成功与CAR-T细胞的持久性密切相关。然而，由于多种原因，在实体瘤患者中测试CAR-T细胞的临床试验中，持久性的重要性尚未得到证实。此外，来自实体瘤模型的数据表明，CAR-T细胞的持久性与T细胞功能低下水平的增加有关。解决这一难题的方法如修饰CAR-T细胞，使其更持久，更不易发生功能低下。过去几年，使用这种方法在实体瘤患者中取得了一些令人鼓舞的成功。然而，另一种需要考虑的方法是不考虑持久性，而是使用多次给药策略给予新鲜的CAR-T细胞。随着时间的推移，注射的CAR-T细胞会耗尽，它们可以被新剂量的高活性CAR-T细胞取代。这种方法减少CAR成分的免疫原性是必要的，以避免多次给药的细胞被排斥。靶向多种肿瘤抗原很重要除了激活机制的差异外，TIL和CAR-T细胞之间的一个重要差异是，前者本质上是多克隆的，因此可能靶向不止一种抗原。任何成功治疗实体瘤患者的CAR-T细胞疗法都需要靶向多个肿瘤特异性靶点，最佳地触发某种旁观者效应或诱导抗原扩散到内源性免疫系统。例如，通过设计分泌FLT3配体的CAR-T细胞对DC的募集，以及使用4-1BB激动剂的DC激活，以促进内源性T细胞反应和抗肿瘤活性增强。-04-三、如何更好地开发CAR-T为了应对这些挑战，可以考虑通过优化两种不同的策略来向前迈进，以在实体瘤患者中取得更大的成功。策略1是该领域的当前方向，基于为血液系统恶性肿瘤患者开发的传统“记忆细胞”模式。策略2采用不同的“短命效应细胞”模式。策略1：记忆细胞模式这种方法的目标是最大限度地提高CAR-T细胞的运输和持久性，同时最大限度地降低CAR T功能低下的程度。作为策略的一部分，大剂量化疗的淋巴结清除用于增强植入。CAR-T细胞的持久性和低功能已经通过向T细胞引入特定的遗传改变（如通过CRISPR）来抑制可能的抑制因子来解决，允许T细胞“休息”，从而防止慢性刺激，或直接通过使用能够分泌细胞因子或其他蛋白质的武装CAR-T细胞来改变TME。与该策略相关的一个主要挑战是需要引入多种基因改变。在过去的几年里，许多研究已经能够使用标准的CRISPR技术敲除一个或多个基因，并且开发了许多更先进的CRISPR技术，能够以非常低的脱靶突变率进行高效的基因编辑。衍生自诱导多能干细胞（iPSC）的异基因T细胞的开发也可以提供一种替代方法，通过允许进行多种遗传改变来改善CAR-T细胞的运输和持久性。iPSC将首先使用各种CRISPR引导物进行修饰，从而能够敲低选定的基因，使细胞具有低免疫原性，然后使用能够敲低T细胞功能的选定关键抑制剂的引导物。在选择具有所有预期改变的克隆后，可以添加额外的基因来增强运输或功能。策略2：短命效应细胞模式尽管没有得到很好的研究，但一些数据支持在实体瘤小鼠模型中使用寿命更短、更像效应器T细胞的优越性。例如在对间皮素靶向CAR-T细胞的研究中发现，具有CD28–CD3ζ胞内结构域（更像效应器）的细胞比具有4-1BB–CD3z胞内结构域的细胞具有更好的抗肿瘤活性。鉴于持久性不是目标，策略2也可能使用mRNA转导的CAR T细胞。这种方法的一个明显优点是对转基因的大小没有限制，可以通过电穿孔引入一种以上的mRNA并同时表达，从而能够引入多种遗传变异。然而，使用这种方法制备的mRNA–CAR-T细胞的一个潜在限制是，与策略1中的“一次性”方法相比，必须随时间给药多剂量CAR-T细胞的成本问题。尽管患者需要再次输注，但这与化疗或免疫检查点抑制剂的给药类似，通常每4-6周给药一次，有时会持续多年。-05-结语解决CAR-T细胞疗法在实体瘤患者中的应用所面临的众多挑战是一项艰巨的任务。目前的治疗方法对实体瘤患者基本无效，其中的原因我们并没有完全理解。获得更多更好的关于CAR-T细胞在接受治疗的患者中的运输、持久性和功能的信息对于解决这些方面的问题至关重要。治疗成功的大量障碍可能需要多种免疫逃避机制的共同靶向。这些策略将包括使用CAR工程的优化，在离体T细胞扩增过程中优化条件以促进特定T细胞亚型的出现，以及操纵宿主以改变TME或刺激天然T细胞，可能需要使用所有这些方法来实现最佳结果。参考资料：1.CAR T cell therapy for patients with solid tumours: key lessons to learn and unlearn. Nat Rev Clin Oncol.2023 Oct 30公众号内回复“ADC”或扫描下方图片中的二维码免费下载《抗体偶联药物：从基础到临床》的PDF格式电子书！公众号已建立“小药说药专业交流群”微信行业交流群以及读者交流群，扫描下方小编二维码加入，入行业群请主动告知姓名、工作单位和职务。

Highlights： 1.LAG3受体激活机制（构象开关：埋藏-释放） 2.预测LAG3疗法疗效的生物标记物 3.LAG3功能通路的分子指示物（LAG3泛素化）用来筛选LAG3药物 4.非降解的多泛素化，正调控信号转导 免疫检查点是T细胞表面的一类抑制性受体。肿瘤通过激活这些免疫检查点，抑制T细胞的抗肿瘤功能，从而实现免疫逃逸。免疫检查点抑制剂则通过解除这种抑制作用，重新激活T细胞介导的抗肿瘤免疫应答（获2018年诺贝尔生理医学奖）。 其中，PD-1阻断抗体在多种肿瘤治疗中取得革命性突破，被誉为"药王"。在探索新一代免疫检查点药物的过程中，LAG3成为了极具潜力的靶点，并于2022年成为继PD-1和CTLA-4之后第三个获得FDA批准的免疫检查点药物，标志着免疫检查点治疗进入了新阶段。 然而，与PD-1治疗仅20-30%患者获益类似，LAG3治疗也只有部分患者响应获益。因此，如何精准识别潜在获益人群并扩大治疗获益范围，已成为当前研究的重点问题。要解决这一临床难题，首先需要深入理解LAG3免疫检查点的作用机制。 自1990年发现LAG3蛋白以来，其配体结合后如何触发LAG3受体激活的分子机制一直未能阐明。2025年3月17日，上海科技大学王皞鹏课题组、中国科学院分子细胞科学卓越创新中心许琛琦课题组、美国匹兹堡大学医学院Dario Vignali课题组、北京大学肿瘤医院孔燕课题组与百济神州沈志荣团队合作，在Cell杂志在线发表题为“Ligand-Induced Ubiquitination Unleashes LAG3 Immune Checkpoint Function by Hindering Membrane Sequestration of Signaling Motifs"的研究论文。该研究首次揭示LAG3受体激活的分子开关机制，并开发了基于功能性生物标志物的疗效预测体系，为靶向免疫检查点的精准治疗提供了新策略。 为探究LAG3的配体响应机制，研究者首先通过蛋白质谱技术对LAG3的翻译后修饰（PTM）进行系统分析，发现：LAG3受体结合其配体后，K498位点发生快速多泛素化修饰，且这一修饰在人和小鼠中高度保守。值得注意的是，该泛素化修饰不会介导LAG3的降解，反而对LAG3的功能具有关键作用。 另外，FGL1作为新发现的LAG3潜在配体，其是否为LAG3功能性配体（其结合是否可以激活LAG3功能）备受争议。该研究发现，膜结合型FGL1可以作为功能性配体触发LAG3的泛素化修饰并激活其抑制功能；相反，游离状态FGL1蛋白无法激活LAG3的泛素化。这一发现解答了领域长期争议的问题。 研究者进一步采用多种蛋白邻近标记技术，成功鉴定出Cbl蛋白家族（c-Cbl和Cbl-b）为介导LAG3泛素化的关键E3泛素连接酶。利用基因敲除技术，团队证明c-Cbl与Cbl-b具有功能冗余性，共同调控LAG3的泛素化修饰及其抑制功能。 为阐明泛素化修饰调控LAG3功能的机制，研究者对其近膜端序列进行分析，发现一个进化保守的碱性残基富集序列（basic residue-rich sequence, BRS）基序。该BRS正电基序位于介导LAG3抑制功能的关键信号元件——FSALE基序上游。后续实验证实，LAG3与其他免疫受体（如CD3ε、IgG、CD28、PD-L1和IL-7R）类似，其近膜的BRS基序会与细胞膜中的酸性磷脂相互作用，从而将关键信号元件FSALE埋藏在细胞内膜中，隔离信号转导。 当配体激活LAG3后，多泛素化修饰可破坏BRS基序与膜磷脂的结合，促使LAG3胞内信号域从细胞膜中释放，进而传递抑制性信号，最终抑制T细胞功能及抗肿瘤免疫应答。这种泛素化介导的"埋藏-释放"动态调控机制代表了一种全新的受体活化模式。研究团队进一步在MC38，B16等肿瘤模型中，证明了LAG3泛素化在抑制抗肿瘤免疫应答中的关键作用。 基于上述LAG3激活机制的发现，研究团队进一步开发了其在临床转化中的三个重要应用： 1.LAG3功能评估的分子指示物：目前已有20余种LAG3药物正在开发中，包括用于肿瘤免疫治疗的阻断抗体和用于自身免疫及炎症性疾病的激动剂。然而，目前尚缺乏直接评估这些药物对LAG3信号通路影响的方法。研究团队发现，LAG3的泛素化修饰可作为其信号活性的分子指示物。在对市场上七种LAG3阻断抗体的研究中，发现这些抗体增强IL-2产生的能力与其抑制LAG3泛素化的程度呈显著正相关（r2 = 0.79，P = 0.0013）。这表明LAG3泛素化可作为开发LAG3靶向药物的功能性指示物。 2.肿瘤患者T细胞耗竭指标：前人研究报道，LAG3的表达可以诱导TOX的表达并促进T细胞功能耗竭。临床数据分析进一步证实，功能活化的LAG3通路（LAG3+和Cbl+共表达）可进一步诱导TOX表达并促发T细胞耗竭，与患者不良预后显著相关。 3.LAG3疗效预测的生物标志物：研究团队开发了预测LAG3靶向治疗疗效的新型生物标志物。研究证实，联合检测LAG3和Cbl表达的功能性生物标志物（LAG3+Cbl+, Functionality Biomarker）较传统的单一LAG3表达生物标志物（Expression Biomarker）具有显著优势：在临床研究中，功能性生物标志物能够准确区分治疗获益人群，其表达水平在获益组较非获益组升高51.7倍（p = 0.0379）；相比之下，传统表达生物标志物仅显示6.5倍差异且无统计学意义。 综上所述，该研究首次阐明LAG3受体激活的关键机制：配体结合诱导Cbl泛素连接酶介导的非K48链连接多聚泛素化修饰，该修饰不引发LAG3降解，而是作为分子开关通过构象变化启动其免疫抑制功能。更重要的是开发了可预测LAG3治疗效果的新型生物标志物，为肿瘤免疫的精准治疗提供了新策略。 关于同写意  同写意论坛是中国新药研发行业权威的多元化交流平台，二十一年来共举办会议论坛百余期。“同写意新药英才俱乐部”基于同写意论坛而成立，早已成为众多新药英才的精神家园和中国新药思想的重要发源地之一。同写意在北京、苏州、深圳、成都设立多个管理中心负责同写意活动的运营。 尊享多重企业/机构会员特权  ● 分享庞大新药生态圈资源库； ● 同写意活动优享折扣； ● 会员专属坐席及专家交流机会； ● 同写意活动优先赞助权； ● 机构品牌活动策划与全方位推广； ● 秘书处一对一贴心服务。 入会请联系同写意秘书处  同写意创新链盟机构  （上下滑动查看更多） 三启生物 | 国通新药 | 通瑞生物 | 科济药业丨立迪生物 | 森西赛智 | 汇芯生物 | 申科生物 | 方拓生物 | 东抗生物 | 科盛达 | 依利特 | 翊曼生物丨锐拓生物丨复百澳生物丨圆因生物丨普洛斯丨华润三九丨皓阳生物丨人福医药丨广生堂药业丨澳宗生物丨妙顺生物 | 荣捷生物丨行诚生物 | 宜联生物 | 生命资本 | 恒诺康丨益诺思 | 深圳细胞谷丨佰诺达生物 | 沃臻生物 | 金仪盛世 | 朗信生物 | 亦笙科技 | 中健云康 | 九州通 | 劲帆医药 | 沙砾生物 | 裕策生物 | 同立海源 | 药明生基 | 奥浦迈 | 原启生物 | 百力司康 | 宁丹新药 | 上海细胞治疗集团 | 滨会生物 | FTA | 派真生物 | 希济生物 | 优睿赛思 | 血霁生物 | 优睿生物 | 邦耀生物 | 华大基因 | 银诺生物 | 百林科医药 | 纳微科技 | 可瑞生物 | 夏尔巴生物 | 金斯瑞蓬勃生物 | 健元医药 | 星眸生物 | 格兰科医药 | 莱羡科学仪器 | 明度智云 | 玮驰仪器 | 康源久远 | 易慕峰 | 茂行生物 | 济民可信 | 欣协生物 | 泰楚生物 | 泰澧生物 | 谱新生物 | 思鹏生物 | 领诺医药 | 宜明生物 | 爱科瑞思 | 阿思科力 | 博格隆生物 | 百吉生物  | 迈邦生物 | 多宁生物 | 万邦医药 | ASCT | 为度生物 | 比邻星创投 | 赛桥生物 | 吉美瑞生 | 荣泽生物 | 科金生物 |  汉超医药 | 康日百奥 | 汉腾生物 | 力品药业 | 安必生 | 博瑞策生物 | 中盛溯源 | 深研生物 | 东方略 | 赛赋医药 | 克睿基因 | 安润医药 | 镁伽科技 | 科锐迈德 | 和元生物 | 申基生物 |楷拓生物| 森松生命科技 | 凯理斯 | 尚德药缘 |  晟国医药 | 健新原力 | 纽福斯 | 华东医药 | 士泽生物 | 影研医疗科技 | 新格元生物 | 依生生物 | 腾迈医药 | 汉欣医药 | 恒驭生物 | 盛诺基 | 序祯达生物 | 乐纯生物 | 速石科技 | 耀海生物 | 新合生物 | 华龛生物 | 恺佧生物 | 成都凡微析 | 正帆科技 | 大橡科技 | 博雅辑因 | 因美纳 | 博雅控股集团 | 近岸蛋白 | 依科赛生物 | 利穗科技 | 东南科仪 | 倍谙基 | 辉诺医药 | 圣诺制药 | 埃格林医药 | 科镁信 | 爱思益普 | 复星医药 | 齐鲁制药 | 捷思英达丨荣昌生物丨泽璟制药丨奕安济世丨礼新医药丨维立志博丨派格生物丨赛生药业丨呈源生物丨启德医药丨双运生物丨宝船生物丨曙方医药丨澳斯康生物丨普莱医药丨维健医药丨海昶生物丨征祥医药丨智核生物丨望石智慧丨博生吉医药丨南京诺丹丨四星玻璃丨艾米能斯丨霁因生物丨普瑞康生物丨映恩生物丨康哲生物丨霍德生物丨海慈药业丨沃生生物丨睿健医药丨矩阵元丨斯微生物丨则正医药丨预立创投丨东立创新丨博安生物丨伟德杰生物丨星奕昂生物丨耀乘健康科技丨琅钰集团丨康德弘翼 | 原力生命科学丨上海科洲丨特瑞思丨药源丨健艾仕生物丨冠科美博丨微境生物丨天境生物丨合源生物丨泛生子丨创胜集团丨加科思药业丨丹诺医药丨凌科药业丨偶领生物丨凯斯艾生物丨成都圣诺丨松禾资本丨清普生物丨和其瑞丨开拓药业丨科兴制药丨玉森新药丨水木未来丨分享投资丨植德律所丨奥来恩丨乐明药业丨东曜药业丨君圣泰丨海创药业丨天汇资本丨再鼎医药丨济煜医药丨百英生物丨基石药业丨君实生物丨Sirnaomics,Inc.丨亦诺微丨博腾股份丨思路迪诊断丨艾博生物丨普瑞金生物丨未知君生物丨尚健生物丨阿诺医药丨有临医药丨赛业生物丨睿智医药丨博济医药丨晶泰科技丨药明康德丨创志科技丨奥星集团丨苏雅医药丨科贝源丨合全药业丨以岭药业丨科睿唯安丨DRG丨博瑞医药丨丽珠医药丨信立泰药业丨步长制药丨华素制药丨众生药业丨上海医药丨高博医疗集团丨药渡丨君联资本丨集萃药康丨诺思格丨精鼎医药丨百利药业丨Pfizer CentreOne丨默克中国创新中心丨奥来恩丨瑞博生物丨新通药物丨广东中润丨医普科诺丨诺唯赞丨康利华丨国信医药丨昆翎丨博纳西亚丨缔脉丨一品红丨和泽医药丨博志研新丨凯莱英医药丨汉佛莱丨英派药业丨京卫制药丨海思科药业丨宏韧医药丨开心生活科技丨哈三联丨Premier Research丨宣泰医药丨先声药业丨海金格丨普瑞盛医药丨Informa丨科特勒丨谋思医药丨HLT丨莱佛士丨辉瑞丨科林利康丨冠科生物丨科文斯丨卫信康丨龙沙（Lonza）丨美迪西丨阳光诺和丨润东医药丨勃林格殷格翰（中国）丨艾苏莱生物丨领晟医疗丨驯鹿医疗丨燃石医学丨中肽生化丨鸿运华宁丨泰格医药丨易迪希丨希麦迪丨百奥赛图丨迪纳利丨青云瑞晶丨鼎丰生科资本丨中源协和丨维亚生物丨青松医药丨中科谱研丨长风药业丨艾欣达伟丨鼎康生物丨中晟全肽丨海步医药丨勤浩医药丨奥萨医药丨太美医疗科技丨生特瑞丨东富龙丨Cytiva丨优辰实验室丨苏桥生物丨君达合创丨澎立生物丨南京澳健丨南京科默丨东阳光丨亚盛医药丨杰克森实验室丨上海科州丨三优生物丨三迭纪丨泰诺麦博丨Cell Signaling Technology丨PPC佳生丨澳斯康丨先为达丨智享生物丨锐得麦丨宜明昂科丨明济生物丨英百瑞丨六合宁远丨天津天诚丨百拓生物丨星药科技丨亓上生物丨真实生物丨引光医药丨方达医药丨高博医疗集团丨赞荣医药丨国投创新丨药明生物丨康哲药业丨高特佳投资丨普瑞基准丨臻格生物丨微谱医药丨和玉资本 | 倚锋资本

CAR-T (Chimeric Antigen Receptor T-Cell Immunotherapy)，即嵌合抗原受体T细胞免疫疗法。该疗法是一种出现了很多年但近几年才被改良，并使用到临床中的新型细胞疗法。在急性白血病和非霍奇金淋巴瘤的治疗上有着显著的疗效，被认为是最有前景的肿瘤治疗方式之一。正如所有的技术一样，CAR-T技术也经历一个漫长的演化过程，正是在这一系列的演化过程中，CAR-T技术逐渐走向成熟。 这种新的治疗策略的关键之处在于识别靶细胞的被称作嵌合抗原受体（chimeric antigen receptor, CAR）的人工受体，而且在经过基因修饰后，病人T细胞能够表达这种CAR。在人体临床试验中，科学家们通过一种类似透析的过程提取出病人体内的一些T细胞，然后在实验室对它们进行基因修饰，将编码这种CAR的基因导入，这样这些T细胞就能够表达这种新的受体。这些经过基因修饰的T细胞在实验室进行增殖，随后将它们灌注回病人体内。这些T细胞利用它们表达的CAR受体结合到靶细胞表面上的分子，而这种结合触发一种内部信号产生，接着这种内部信号如此强效地激活这些T细胞以至于它们快速地摧毁靶细胞。 近年来，CAR-T免疫疗法除了被用来治疗急性白血病和非霍奇金淋巴瘤之外，经改进后，也被用来治疗实体瘤、自身免疫疾病、HIV感染和心脏病等疾病，具有更广阔的应用空间。基于此，针对CAR-T 细胞疗法取得的最新进展，小编进行一番盘点！ 1.Nature：临床试验表明靶向GD2的CAR-T 细胞有望治疗弥漫性中线胶质瘤 doi:10.1038/s41586-024-08171-9 在一项新的研究中，一种免疫细胞疗法缩小了儿童的脑瘤，恢复了神经功能，而且对于参加斯坦福大学医学院开展的一项临床试验的一名受试者来说，还消除了一种通常被认为无法治愈的脑癌的所有可检测到的痕迹。这项临床试验是称为CAR-T细胞的工程化免疫细胞治疗实体瘤的首批成功案例之一，为罹患致命脑瘤和脊髓肿瘤的儿童带来了希望，其中包括一种称为弥漫性内生性桥脑胶质瘤（diffuse intrinsic pontine glioma, DIPG）的癌症。 第10号患者的治疗效果及相关结果 2024年10月，这种CAR-T细胞免疫疗法获得了美国食品药品管理局（FDA）颁发的再生医学高级疗法称号，这使得作者能够进入FDA审批程序的快速跟踪版本。 在接受CAR-T细胞治疗的11名参与者中，有9人从中获益。9人在因疾病导致的残疾方面取得了功能性改善。4人的肿瘤体积缩小了一半以上。这四名参与者中有一人获得了完全反应，这意味着他的肿瘤从脑扫描中消失了。虽然现在说他是否已经痊愈还为时过早，但他在确诊四年后依然健康。 论文共同通讯作者兼论文第一作者、斯坦福大学医学院小儿神经肿瘤学教授Michelle Monje博士说，“这是一种普遍致命的疾病，而我们已经找到了一种疗法，可以使肿瘤明显缩小，临床症状明显改善。虽然如何为每位患者优化治疗还有很长的路要走，但有一位患者获得了完全反应，这非常令人兴奋。我希望他已经痊愈了。” 这临床试验中使用的 CAR-T 细胞疗法是斯坦福大学医学院开发的。2018年，Monje团队已发现，DIPG和其他弥漫中线胶质瘤肿瘤细胞会产生大量名为GD2的表面标志物。Mackall团队已设计出靶向GD2的CAR-T细胞，其中GD2也存在于其他一些癌症上。他们发现，在动物模型中，靶向GD2的CAR-T细胞可以根除DIPG肿瘤。 这项新的研究报告了正在进行的一项临床试验的首批13名入选患者的情况，该试验对患有DIPG或脊髓弥漫性中线胶质瘤的患者开放。这些参与者的年龄中位数为15岁，肿瘤确诊时间中位数为参加试验前5个月。其中 10 人患有 DIPG，3 人患有脊髓弥漫性中线胶质瘤。(两名参与者的肿瘤进展太快，以至于在接受CAR-T细胞治疗之前就失去了参加研究的资格）。 2.Nature：重大进展！首批临床试验表明配备IL-15的 GPC3-CAR T 细胞有望更有效治疗实体瘤 doi:10.1038/s41586-024-08261-8 在一项新的研究中，来自贝勒医学院和德克萨斯儿童癌症中心的研究人员报告了针对表达glypican-3 (GPC3)的实体瘤的新型免疫疗法的首批人体1期临床试验结果。他们测试了用白细胞介素-15（IL-15）蛋白增强的嵌合抗原受体（CAR）T细胞。相关研究结果近期发表在Nature期刊上，论文标题为“Interleukin-15-armoured GPC3 CAR T cells for patients with solid cancers”。 GPC3表达评估：免疫组织化学法检测GPC3表达 尽管在一些血液恶性肿瘤中取得了巨大成功，CAR-T细胞对实体瘤患者的疗效有限。临床前研究表明，添加有助于T细胞存活和增殖的IL-15可以提高基于CAR-T细胞的免疫疗法的效果。 在这些临床试验中，这些作者在肝细胞癌（HCC）成人患者（NCT02905188）和表达GPC3的实体瘤（包括HCC）儿童患者（NCT02932956）中测试了共表达IL-15的GPC3特异性CAR-T细胞（下称GPC3-CAR T 细胞）。第一批患者单独接受了 GPC3-CAR T 细胞治疗。他们发现，GPC3-CAR T 细胞是安全的，细胞增殖峰值出现在输注后两周；但没有观察到客观的抗肿瘤反应。 配备IL-15的GPC3-CAR T细胞在第二组患者中进行了评估，这些患者再次包括患有GPC3表达实体瘤的成人（NCT05103631）和儿童（NCT04377932）。参加这些试验的患者的 CAR T 细胞扩增明显增加，33%（4/12）的受试者出现客观抗肿瘤反应，66%（8/12）的受试者病情稳定至少 4 周。接受配备IL-15的GPC3-CAR T细胞治疗的患者发生细胞因子释放综合征的几率较高，不过这种综合征可通过IL-1/IL-6阻断得到控制，或通过激活可诱导的caspase 9安全开关迅速得到改善。 与非应答者相比，应答者的肿瘤浸润GPC3-CAR T细胞显示出 SWI/SNF 表观遗传调节因子的抑制、FOS 和 JUN 家族成员以及 I 型干扰素信号相关基因的上调。这些结果表明，IL-15 能提高患者 GPC3 CAR T 细胞的增殖、瘤内存活率和抗肿瘤活性。 3.Cell Stem Cell：利用脑瘤类器官可以准确地模拟胶质母细胞瘤患者对CAR-T细胞治疗的反应 doi:10.1016/j.stem.2024.11.010 胶质母细胞瘤（GBM）是成年人中最常见、最具侵袭性的癌性脑瘤。GBM患者在确诊后通常只能活12～18个月。尽管进行了数十年的研究，但目前还没有已知的GBM治愈方法，而且批准的治疗方法——如手术、放疗和化疗——在延长预期寿命方面效果有限。 在一项新的研究中，来自宾夕法尼亚大学的研究人员首次使用利用源自GBM患者的肿瘤构建的可在实验室生长的类器官来实时准确地模拟患者对CAR-T细胞治疗的反应。这种类器官对治疗的反应反映了患者大脑中实际肿瘤的反应。也就是说，如果肿瘤衍生的类器官在治疗后缩小，患者的实际肿瘤也会缩小。相关研究结果于2024年12月9日在线发表在Cell Stem Cell期刊上，论文标题为“Patient-derived glioblastoma organoids as real-time avatars for assessing responses to clinical CAR-T cell therapy”。 论文共同通讯作者、宾夕法尼亚大学佩雷尔曼医学院神经科学教授Hongjun Song博士说，“很难衡量GBM患者对治疗的反应，因为我们不能定期对大脑进行活检，而且很难基于核磁共振成像（MRI）从治疗相关的炎症中分辨出肿瘤生长。这些类器官非常准确地反映了个体大脑中发生的事情，我们希望它们将来可以用来‘了解’每名患者体内明显复杂的肿瘤，并快速确定哪种疗法对他们的个性化医疗最有效。” 一种称为CAR-T细胞疗法的治疗方法涉及对源自患者的T细胞进行重编程，以发现并摧毁体内特定类型的癌细胞。虽然这种疗法已被美国食品药品管理局（FDA）批准用于对抗几种血液癌症，但是科学家们一直在努力改造免疫细胞，以便成功地寻找和杀死实体瘤，比如GBM。近期的研究已表明，靶向两种脑瘤相关蛋白（而非一种）的CAR-T细胞疗法可能是减少复发性GBM患者实体瘤生长的一种有前景的策略。 论文共同通讯作者、宾夕法尼亚大学佩雷尔曼医学院神经科学教授Guo-li Ming博士说，“GBM治疗如此困难的原因之一是这种肿瘤非常复杂，由几种不同类型的癌细胞、免疫细胞、血管和其他组织组成。通过利用患者实际肿瘤的微小部分而不是一种癌细胞培养出类器官，我们可以反映肿瘤在患者体内的存在方式，以及肿瘤生长的‘微环境’，这是现有的其他GBM模型所无法反映的。” 4.Cell子刊：我国科学家发现米替福新可以让衰竭的CAR-T细胞返老还童，提高它们治疗实体瘤的疗效 doi:10.1016/j.xcrm.2024.101869 为了克服T细胞衰竭，已经提出了各种策略，包括操纵参与T细胞衰竭的基因。TOX、NR4A、BATF、SNX9、CBLB、TGFBR2、ARID1A和REGNASE-1以及ROQUIN-1已被报道可诱导T细胞衰竭。敲除这些基因可以增强T细胞功能。此外，c-JUN、LTBR、IL-7或CCL19已被证明可以减轻CAR-T细胞衰竭，而且它们在多种研究中的过表达可以增强肿瘤消除能力。然而，CAR-T疗法治疗实体瘤的临床疗效仍然有限。此外，尽管ICB在治疗癌症患者方面取得了显著的临床成功，但只有一部分患者在治疗后获得了完全缓解。因此，发现有效的靶点和药物来克服目前治疗的局限性是非常可取的。 在一项新的研究中，来自中国科学院、中国科学院大学、北京中医药大学、北京干细胞与再生医学研究院、中国人民解放军总医院和深圳大学的研究人员开发出一个使用原代人类T细胞的功能性筛选平台，以鉴定能够使衰竭的T细胞恢复青春并提高其疗效的化合物。相关研究结果发表在2024年12月17日的Cell Reports Medicine期刊上，论文标题为“Miltefosine reinvigorates exhausted T cells by targeting their bioenergetic state”。 利用这个平台，这些作者对美国食品药品管理局（FDA）批准的药物进行了筛选，并发现以前用作治疗利什曼病的抗寄生虫药物的小分子米替福新（miltefosine）可以增强衰竭的CAR-T细胞的疗效。 鉴于PD-1/PD-L1阻断是增强衰竭的T细胞功效的机制和成功策略，这些作者测试了米替福新对功能低下的CAR-T细胞的影响是否依赖于PD-1/PD-L1通路。为了测试这一点，他们构建出敲除PDCD1基因（编码PD-1）的CAR-T细胞，发现米替福新仍然可以增强它们的效应功能。正如预期的那样，由于CAR-T细胞缺乏PD-1表达，抗PD-1抗体无法增强其效应功能。 5.Cell：科学家识别出能帮助癌细胞躲避CAR-T细胞免疫疗法的特殊蛋白 doi:10.1016/j.cell.2024.11.007 嵌合抗原受体（CAR）-T细胞免疫疗法治疗后B细胞恶性肿瘤患者的疾病长期持久缓解仍然不尽如人意，通常是由于患者机体的抗原逃逸所导致的，恶性B细胞转化和致癌生长依赖于有效的ATP合成，尽管其背后的潜在机制研究人员并不清楚。 近日，一篇发表在国际杂志Cell上题为“YTHDF2 promotes ATP synthesis and immune evasion in B cell malignancies”的研究报告中，来自希望之城贝克曼研究所等机构的科学家们通过研究找到了能帮助癌细胞躲避CAR-T细胞疗法的关键罪魁祸首，CAR-T细胞疗法能利用宿主机体的免疫系统寻找并杀死肿瘤细胞，这种疗法通常用于某些类型的白血病和淋巴瘤（诸如血液癌症），然而，一些狡猾的癌细胞已经学会了如何躲避宿主机体的免疫系统避免被破坏，相关研究结果有望帮助开发出更为个体化的疗法来改善癌症患者的生存情况。 文章中，研究者发现，名为YTHDF2的特殊蛋白在促进血液癌症的发生过程中扮演着重要角色，随后他们开发出了能靶向作用并抑制YTHDF2蛋白的新型药用化合物CCI-38，其能减少侵袭性血液癌症的生长，这种方法或能改善成功癌症疗法的可能性。Jianjun Chen博士说道，我们相信，利用CCI-38来靶向作用YTHDF2或能显著提高CAR-T细胞疗法对血液癌症细胞的治疗有效性。 目前治疗血液癌症的挑战之一是一种称之为“抗原逃逸”（antigen escape）的现象，这些疗法的一个关键靶点就是癌细胞上发现的名为CD19的蛋白。然而，在28%-68%的病例中，癌细胞会降低或失去CD19标志物，从而使得疗法的疗效降低，尽管研究人员正在研究能靶向作用多种组分的策略，但仍有近一半的患者会受到这一问题的影响。YTHDF2能开启帮助癌细胞产生稳定能量来源的基因的表达，从而促进细胞生长和扩散的能力，此外，这一蛋白还能通过降低在正常情况下诱发免疫系统检测并攻击癌症的抗原生物标志物的存在，从而帮助癌细胞隐藏自身，最后，在小鼠研究中，过量的YTHDF2就好像狼人（werewolf）的咬伤一样能将血细胞从健康状态转变为癌变状态。 研究者指出，减少对后续疗法的需求或能改善患者的长期生存情况并能减少疾病复发，同时还能减少疗法的副作用和医疗费用。揭示YTHDF2功能背后的生物学基础或能帮助研究人员开发出新型策略来预防肿瘤细胞躲避免疫监视，这或许有望帮助开发新型个体化疗法，从而治疗那些机体血液癌症对初期疗法没有反应或对基于T细胞的免疫疗法有初步反应后复发的癌症患者。 6.Nat Biomed Eng：通过工程化改造T细胞或能帮助癌症患者克服对CAR-T细胞疗法的耐受性 doi:10.1038/s41551-024-0128 对嵌合抗原受体（CAR）T细胞疗法耐药的发生往往通过多种机制，最明显的就是抗原丢失和肿瘤诱导的免疫抑制。近日，一篇发表在国际杂志Nature Biomedical Engineering上题为“Leucine zipper-based immunomagnetic purification of CAR T cells displaying multiple receptors”的研究报告中，来自纪念斯隆凯特琳癌症研究中心等机构的科学家们通过研究开发出了一种新方法，其或能为T细胞添加功能从而帮其克服嵌合抗原受体T细胞疗法（CAR-T细胞疗法）耐药的机制。 设计出基于亮氨酸拉链的细胞分拣系统 如今，CAR-T细胞疗法已经彻底改变了癌症的治疗，同时为一些血液癌症患者也提供了强有力的治疗选择，然而没有一种疗法是完美的，一些患者对CAR-T细胞疗法产生了一定的耐药性。Scott E. James教授说道，从历史上来看，在这一领域，人们试图克服肿瘤用来躲避免疫疗法攻击的个体化策略，由于当前的载体系统的DNA包装能力有限，因此对T细胞进行工程化修饰从而对多种策略抵抗一直面临着巨大挑战；这项研究中，我们开发出了一种新方法，其能促进对T细胞中的多种特征进行编码，旨在同时克服多种肿瘤逃逸机制。 通过联合研究后，研究人员设计了一种能利用双载体方法来将遗传信息容量加倍的系统，其能同时靶向作用多个抗原；同时这一系统还允许使用开关受体，其能将来自癌细胞的负信号转化为正信号，从而减少T细胞的耗竭，而T细胞耗竭是肿瘤逃逸的另一种机制；这种方法如今已经在高达四种抗原和三种开关受体中进行了相关测试，展现出了更好的抗肿瘤活性，即T细胞增殖地更多且寿命也更长，研究人员将其命名为zip-分拣系统（zip-sorting），其能为构建和比较新型细胞疗法提供一种强大的方法。 7.Nat Commun：科学家开发出工程化改造的CAR-NK细胞，或有望治疗人类急性髓性白血病 doi:10.1038/s41467-024-52388-1 目前人类中存在着多种形式的血液癌症，其统称为白血病（leukemia），急性髓性白血病（AML，acute myeloid leukemia）就是其中一种常见的白血病形式，其主要特征表现为患者机体早期血液细胞前体（即干细胞和由干细胞所发育而成的前体细胞）的降解。尽管这类白血病患者接受了强化的化疗，但也仅有20%-50%的患者在诊断和治疗后能存活5年时间，让患者疾病状况变得更加复杂的是，这些强化疗法会对其机体造血干细胞产生破坏性的影响，因此这往往也与患者机体较为严重的副作用存在关联，这就是为何目前研究人员迫切需要开发新型疗法的原因。 近日，一篇发表在国际杂志Nature Communications上题为“CRISPR/Cas9 editing of NKG2A improves the efficacy of primary CD33-directed chimeric antigen receptor natural killer cells”的研究报告中，来自法兰克福歌德大学等机构的科学家们通过研究对CAR-NK细胞进行成功话改造，或有望作为对抗人类白血病的另一种替代方法。研究者解释道，免疫疗法能利用宿主机体免疫系统的天然力量来对抗恶性白血病细胞，作为这一疗法的一部分，癌细胞能被机体免疫系统中诸如T细胞的杀伤性细胞所识别，比如，T细胞表面有一种锁状结构，而癌细胞表面的相应结构就好像钥匙一样能插入其中，从技术角度来讲，T细胞的锁称之为“抗原受体”，而钥匙则称之为“抗原”。 如果钥匙在锁里，也就是说，如果抗原和抗体结合的话，T细胞就会杀死细胞，如今，研究人员就能定制抗原受体，从而使其能意识到一种特定的肿瘤特征；为此，研究人员从患者血液中纯化出T细胞，并利用遗传工程化技术插入所谓的嵌合抗原受体（CAR），其能结合多种蛋白质的特性，从而以一种特殊的方式使这种攻击针对特定肿瘤进行优化。配备了嵌合抗原受体的T细胞（CAR-T细胞）如今已经成功用于人类白血病的治疗，而另一种目前正在使用的杀伤性细胞就是所谓的自然杀伤性细胞（NK细胞），其并不是通过某些抗原来识别恶性细胞，而是依赖于其它表面的异常，如果再额外添加嵌合抗原受体的话，其就能以两种方式来对抗癌细胞，CAR-NK细胞的另一个优点在于迄今为止其几乎不会在临床研究中引起任何副作用。 8.Nat Immunol：CAR-T记忆细胞或能增强癌症疗法的疗效 doi:10.1038/s41590-024-02034-1 尽管嵌合抗原受体（CAR）T细胞能有效抵御B谱系恶性肿瘤，但CAR后患者疾病复发很常见，且对其它肿瘤的治疗疗效非常有限，这些挑战或能通过合理的操控来控制CAR-T细胞的功能来解决。 近日，一篇发表在国际杂志Nature Immunology上题为“Antigen experience history directs distinct functional states of CD8+ CAR T cells during the antileukemia response”的研究报告中，来自科罗拉多大学安舒茨医学院等机构的科学家们通过研究发现，一些用于抵御癌症和其它疾病的CAR-T细胞或携带着过去与细菌、病毒和其它抗原相遇时的记忆，而这一研究发现或能促使科学家们以更精准且靶向性的方式来制造细胞。 抗原经历史或能指导小鼠机体CAR-T细胞体外功能的多个方面 文章中，研究人员重点研究了CAR-T细胞，其是一种能抵御癌症，尤其是白血病和淋巴瘤的有效疗法，作为一种免疫细胞类型，T细胞能从患者血液中移除，随后进行修饰来靶向作用癌症并被重新输注回患者体内。如今，研究人员发现，其中一些细胞具有长期持久性的记忆，他们发现，即使经过大量改造过程将CAR插入到细胞中，过去与抗原接触过的CAR-T细胞的行为也与从未接触过抗原的细胞不同。 医学博士Terry Fry说道，与大多数药物不同，CAR-T细胞的产品并不统一，我们知道变异会存在，但这种变异的本质或许才刚刚开始被理解；而令人惊讶的是，过去与抗原的相互作用在细胞上或许留下了持久的印记。研究者发现，那些此前有抗原经历的“记忆细胞”或能快速杀死癌细胞但也会很快发生耗竭，且繁殖较慢，这或许就为潜在的复发打开了大门。与此同时，研究人员发现了一些有利的抗病能力，比如先天性细胞强大的扩张和对耗竭的耐受，其也并没有抗原经历；通过对两种细胞类型进行直接地比较后，研究人员就能识别出调节并改善细胞功能的特定基因靶点，他们发现，先天性细胞能通过靶向作用诸如RUNX2等基因来被特异性地增强，而相比记忆细胞而言，这些细胞的寿命也更长且繁殖速度更快。 9.Sciene子刊：免疫突触脂筏的分子动力学影响CAR-T细胞的癌细胞杀伤行为 doi:10.1126/sciadv.adq8114 在一项新的研究中，来自贝勒医学院、德克萨斯儿童癌症中心、休斯顿卫理公会医院和德克萨斯儿童医院的研究人员研究了CAR-T细胞与癌细胞结合的免疫突触的分子动力学如何影响抗癌活性。为此，他们针对两种最常见的CAR-T细胞如何杀死癌症提出了新见解。 相关研究结果发表在2025年1月10日的Science Advances期刊上，论文标题为“Molecular dynamics at immune synapse lipid rafts influence the cytolytic behavior of CAR T cells”。 单个CAR-T细胞杀伤靶细胞的动力学 在这项研究中，这些作者旨在了解具有不同信号结构域的CAR-T细胞如何在分子和细胞水平上发挥作用，为设计以最大限度地提高CAR-T细胞抗肿瘤活性的CAR分子奠定基础。 论文通讯作者、贝勒医学院和德克萨斯儿童癌症中心的儿科血液学和肿瘤学教授Nabil Ahmed博士说，“我们观察了两种不同类型的CAR-T细胞。第一种是CD28.ζ-CART细胞，它们就像短跑运动员，快速有效地杀死癌细胞，但它们的活性是短暂的。第二种是4-1BB.ζ-CART细胞，它们就像马拉松赛跑运动员，在很长一段时间内持续杀死癌细胞。” 10.Cancer Immunol Res：揭秘TBK1分子或许是克服肿瘤对CAR-T细胞疗法耐受性的关键 doi:10.1158/2326-6066.CIR-23-1011 如今，科学家们需要新的治疗性策略来改善嵌合抗原受体（CAR）T细胞治疗人类实体瘤的疗效，多种肿瘤微环境因素被认为能促进实体瘤对CAR-T细胞疗法的耐受性，而且使用临床相关生物样本来识别和分析这些因素的适当模型系统往往是有限的。 近日，一篇发表在国际杂志Cancer Immunology Research上题为“TBK1 Targeting Is Identified as a Therapeutic Strategy to Enhance CAR T-Cell Efficacy Using Patient-Derived Organotypic Tumor Spheroids”的研究报告中，来自麻省总医院等机构的科学家们通过研究识别出了TBK1分子或能作为克服CAR-T细胞疗法耐受性的关键。 那么到底是哪些因素促进了实体瘤对CAR-T细胞疗法的耐受性呢？尽管CAR-T细胞疗法被证明能有效治疗血液癌症患者，但由于包括肿瘤微环境在内的多种因素的影响，其在实体瘤治疗中的疗效却受到了限制；为此，研究人员利用一种特殊的肿瘤3D微流控模型来研究CAR-T细胞疗法耐受性背后的机制，CAR-T细胞被设计能靶向作用B7-H3（实体瘤中的一种常见抗原）。 尽管目前有多重不同的肿瘤3D模型可用，但其能忠实地再现肿瘤微环境中关键因素的能力却非常有限；研究人员利用患者机体衍生的器官型肿瘤球状体（PDOTS，patient-derived organotypic tumor spheroids），其是一种能复制肿瘤微环境关键特征的微生理性3D模型，能促使研究人员分析肿瘤和免疫细胞之间的相互作用。结果发现，当CAR-T细胞与靶向细胞首次相遇后，其表面的抑制性受体的表达就会增加，从而就会引起功能障碍并限制其有效性。（生物谷 Bioon.com）