SAR444200

WT1在急性髓系白血病（AML）、间皮瘤、卵巢癌等血液系统与实体肿瘤中广泛异常高表达，因正常成人组织表达受限且直接参与恶性转化，被美国NCI列为优先级最高的肿瘤抗原之一；其HLA-A*02:01限制性九肽RMFPNAPYL（RL9）呈递良好、免疫原性稳健，已同时推进至肽疫苗、TCR-T与TCR-mimic（TCRm）抗体三条临床路径。为提高HLA-A2结合与T细胞致敏效率，将p1位精氨酸替换为酪氨酸的heteroclitic变体YMFPNAPYL（R1Y；YL9）被写入galinpepimut-S等疫苗配方，并在早期试验中显示良好的安全性与免疫原性——但这种"锚定优化"是否仍被临床相关的天然TCR所识别，此前缺乏原子层面的答案。这里，广西大学医学院广西特色生物医药重点实验室，解析了天然筛选的C4 TCR分别结合RL9-HLA-A*02:01与YL9-HLA-A*02:01的高分辨率晶体结构（2.2 Å与2.4 Å，PDB 9WC2与9WC3），并以差示扫描荧光法（DSF）与表面等离子共振（SPR）定量两种pHLA的热稳定性与结合动力学。C4采用经典的对角停靠模式，footprint偏向肽段中心与C端，与依赖N端p1R接触的TCRm抗体形成对照。最重要的是，R1Y替换虽保留了肽段主链构象、并将pHLA的Tm提高约5°C，却使p1Y在TCR结合时发生重定向，抹除了p1R与CDR3α E94之间的两个盐桥，重塑界面静电格局，最终令C4的亲和力从KD = 13.8 ± 1.53 μM跌至KD > 150 μM。该研究提示：增强的HLA稳定性并不自动等价于被治疗相关TCR保真识别，表位选择与结构指导的TCR工程必须同时评估这两个维度。 C4 TCR以对角方式停靠，footprint偏向肽段中心与C端 研究者首先解析了C4 TCR-RL9-HLA-A*02:01三元复合物2.2 Å晶体结构（空间群P2₁2₁2₁，Rwork/Rfree = 19.24%/23.14%，完整数据收集与精修统计见表 1）。C4以经典对角取向停靠，以约48°的交叉角跨过肽结合沟，Vα位于HLA α2螺旋上方、Vβ位于α1上方（图1 A,B）。C4-RL9-HLA-A*02:01界面的埋藏表面积约828.3 Ų，占复合物总溶剂可及表面积（约21,241.5 Ų）的3.9%。界面在肽段中心处堆积紧密，沿HLA螺旋形成互补的脊-沟结构，CDR顶端未见空间冲突，构成连续的接触面。与其他RL9结合分子的footprint比较揭示了识别模式的分野（图1C-F）。C4在肽中心化、对角停靠以及接触向中央/C端位点分布这三点上，最接近11D06（TCRm）与工程化的α72 TCR；相比之下，ESK1（TCRm）呈现明显N端偏置的footprint，接触集中于p1R/p4P，这与其对该区域改动高度敏感的已知特性一致。换言之，即便在全局层面，C4也表现出胸腺选择产生的生理性TCR特征：优先"读取"肽段中心，同时与两条HLA螺旋维持稳定接触。 表1 衍射数据收集与精修统计 界面接触由CDR3β主导，HLA α2螺旋贡献超过一半 研究者对界面的直接原子间接触（氢键H-bond、盐桥SB、范德华vdW）逐一指认并按接触区域/CDR环归类（需注意：以下百分比反映接触计数分布，而非埋藏表面积或能量贡献）。在pHLA一侧，约50.86%的接触涉及HLA α2螺旋，25.00%涉及α1螺旋，24.13%涉及肽段（图2A）。在TCR一侧，Vα与Vβ来源的接触分别占约41.18%与57.95%，其中CDR3β以约36.97%成为单一环路中贡献最大者；其余依次为CDR2β约16.80%、CDR1α约15.13%、CDR3α约15.13%、CDR2α约10.92%、CDR1β约4.20%（图2B，具体接触见Table S2）。在残基层面，α1螺旋的R65是主导性热点，与CDR3α的D95形成两个盐桥，并与CDR2β的Y48/Q50形成氢键（图2C）。沿α2螺旋（A150-E166），A150与Q155向CDR3β的Y99/A97/L98供氢键，T163/E166则与α链框架区的A29/N31/K68接触（图2D）。在肽段暴露位点中，p1R、p3F、p4P、p5N、p8Y被C4分别解读为：p1R与CDR3α的E94形成两个盐桥；p5N与p8Y分别与A97、CDR1β的D30形成氢键；p3F/p4P则与CDR3α、CDR1β、CDR3β形成多个vdW接触（图 2E）。与上述残基网络相对应，CDR1α（D27-Y32）通过A29/N31氢键接合α2的C端片段（A158-W167），并额外形成S28-E166氢键（图2F）；CDR2α主要以vdW作用堆积于α2中段（E154-E161），框架残基K68与E166形成稳定盐桥（图2G）；CDR3α（T93-Q97）架桥于肽段与α1之间，包含E94-p1R（两个盐桥）、D95-R65（盐桥）与Y96-p5N（氢键）（图2H）。在β链一侧，CDR1β（L27-A31）覆于肽段C端接触p8Y（1个氢键、4个vdW）（图2I）；CDR2β以两个氢键接合R65（图2J）；CDR3β（E94-Q97）聚焦肽段中心与α2的N端部分，与p5N及α2形成多个氢键（图2K）。由此可解释：α1主要由CDR3α/CDR2β接近，α2由CDR1α/CDR2α/CDR3β接近，而暴露的肽段位点（p1、p3-5、p8）主要由CDR3α、CDR1β与CDR3β读取，其余残基则埋于HLA沟中。 R1Y保留了肽段主链构象，却拆掉了p1R-E94的双盐桥 为评估C4对临床在用锚定修饰的耐受性，研究者进一步解析了C4 TCR-YL9-HLA-A*02:01复合物的2.4 Å晶体结构（统计见Table 1）。结构叠合显示，RL9与YL9复合物之间的肽段主链构象与HLA沟构象基本保守（图3A）。在1.0 σ轮廓的2mFo-DFc电子密度图支持下，精修模型呈现局部侧链差异：p2M有轻度重取向，而p1R/p1Y位点的改变更为显著（图3B-C）。p2M侧链仍被容纳于HLA沟内，而面向TCR一侧最突出的差异发生在肽段N端，即p1R被p1Y取代之处。直接接触比较显示，R1Y替换中和了p1微环境、重连了局部接触网络，却未实质性扰动全局停靠几何。在RL9复合物中，p1R与CDR3α的E94形成两个盐桥，提供直接的TCR-肽段静电接触；而在YL9复合物中，p1Y无法维持这些盐桥，转而主要形成vdW接触（图3D-E）。与之伴随，E94转向HLA W167，D27与HLA R170形成盐桥，E166向R170位移，从而改变了涉及S28/K68的接触（图3F）。因此，RL9支撑着更为广泛的直接TCR-肽段极性接触网络，而YL9虽保留了复合物整体架构，却削弱了稳定C4识别的局部静电作用。 YL9-HLA-A*02:01热稳定性更高，但C4的结合几乎消失 DSF结果显示，两种WT1肽-HLA复合物均呈现单一协同解折叠转变，提示制备均一。R1Y（YL9）-HLA-A*02:01显著更稳定，熔解温度Tm = 54.0 ± 0.21°C，而RL9-HLA-A*02:01为48.9 ± 0.25°C，反映p1锚定替换带来的稳定化增益（图S1）。SPR则进一步凸显了该修饰的反向效应。基于三次独立重复测量，C4 TCR与天然RL9-HLA-A*02:01结合的KD为13.8 ± 1.53 μM（图4A）；由于C4-RL9传感图呈双相结合/解离行为，采用two-state reaction模型拟合。相比之下，C4与p1修饰的YL9-HLA-A*02:01结合在重复测量中显著更弱，无法支持可靠的动力学拟合或精确KD测定，因此保守地报告为KD > 150 μM（Fig. 4B）。此外，将pHLA与C4-pHLA结构比较可见，p1R在TCR结合时被轻度下压（图4C），而p1Y被下压的程度更大（图4D），这可能解释了C4亲和力上的巨大差异。值得注意的是，这一"稳定性升高、识别下降"的背离并非C4所独有。为验证p1Y所致的亲和力差异，研究者选取工程化的α72 TCR对两种pHLA进行了平行测定（图4E-F）。α72 TCR与RL9-HLA-A*02:01结合的KD为38.77 ± 6.24 nM（三次独立重复，1:1 Langmuir模型拟合，图4E）；而与YL9-HLA-A*02:01的结合约弱140倍，KD = 5.42 ± 0.59 μM，因传感图呈双相行为而采用two-state reaction模型拟合（图4F）。综合DSF与SPR，p1替换的生物物理后果被清晰界定：pMHC支架的内在稳定性上升，但TCR接合因动力学代价而下降，由此划出了C4 TCR对锚定修饰表位的耐受边界。 总结 该研究首次在原子层面剖析了一条天然筛选的人源TCR如何识别已推进至临床的WT1表位RL9，以及这种识别如何被锚定修饰变体所扰动。高分辨率结构确立，C4以对角方式跨越HLA-A*02:01-RL9复合物，形成肽中心化的footprint，界面由CDR3α与CDR3β贡献主导，靶向肽段中央与C端残基，同时与两条HLA螺旋维持稳定接触——这一架构符合胸腺选择TCR的"生理性"停靠模式，而与ESK1这类不成比例依赖N端接触的TCRm抗体形成鲜明对照。核心洞见在于，尽管C4的接触重心落在肽段中心与C端，它对临床在用的R1Y（p1Y）锚定修饰并不宽容。R1Y虽保留肽段主链，却中和了p1微环境、破坏了E94（CDR3α）-p1R盐桥对，重连局部接触并改变界面静电；生物物理层面由此产生显著更弱的结合：C4与天然RL9-HLA-A*02:01的KD = 13.8 ± 1.53 μM，而与YL9-HLA-A*02:01的结合弱到无法可靠拟合（KD > 150 μM）。这提示，看似远离主导footprint的残基，可以充当稳定停靠几何、决定动力学可及性的"静电基石"。相对于既有认知的推进在于，p1Y替换已被广泛应用于WT1、hTERT、MUC1、POTE等多种肿瘤相关抗原，其隐含假设是"提高HLA-A2结合的同时保持T细胞特异性"；本研究以同一体系内的正交证据表明，YL9-HLA-A*02:01热稳定性确实更高（Tm 54.0 ± 0.21°C对48.9 ± 0.25°C），但C4的接合被大幅削弱，且工程化α72 TCR在YL9上同样损失约140倍亲和力——增强的pHLA稳定性并不保证每一条治疗相关的天然表位特异性TCR都能保持识别。研究局限性包括：本研究仅考察了一条天然TCR对两种肽状态的体外相互作用，未直接测定C4转导T细胞对YL9的活化功能；基于已发表的TCR-pMHC功能研究（亲和力、解离速率、结合速率与配体密度均可影响CD8⁺ T细胞的应答性、细胞因子产生、细胞毒性、多功能性、增殖与抗肿瘤活性），C4-YL9亲和力的下降预计将降低抗原敏感性、提高活化阈值，即需要更高密度的YL9-HLA-A*02:01复合物才能有效激活C4阳性T细胞，但这一推论尚待实验验证。此外，需要更广泛的WT1特异性TCR谱系研究来评估p1依赖性的普遍性，并通过p1Y诱导T细胞的repertoire研究绘制交叉反应图谱；in vivo实验则需将结构/动力学参数（尤其是on-rate与dwell time）与C4工程化T细胞的持久性、表型和疗效相连接。需要强调的是，上述结果不应被解读为YL9本身无功能或不适合作为疫苗表位。Nguyen等曾直接比较针对天然RL9与heteroclitic YL9的CD8⁺ T细胞应答，显示YL9接种可诱导具功能的、能交叉识别RL9的CD8⁺ T细胞，但YL9诱导的交叉反应性T细胞与单一RL9反应性T细胞具有不同的TCR特征；更早的WT1研究亦表明，YL9类似物可改善HLA-A*02:01结合/稳定性与免疫原性，并诱导能交叉识别天然RL9、裂解WT1阳性白血病细胞的CD8⁺ T细胞应答。因此，YL9接种的结局很可能是repertoire依赖的。本研究的价值在于确立一种TCR-aware的heteroclitic疫苗设计范式：在追求HLA稳定化与抗原呈递增强的同时，必须权衡对临床相关TCR所识别的天然肿瘤表位表面的保真度；探索"保留静电特征"的锚定优化策略——既维持HLA稳定性又保留TCR识别保真度——是一个可操作的设计方向。这些原则对WT1靶向免疫治疗，以及hTERT、MUC1、POTE等其他基于肽的抗原程序中的真实表位选择、变体风险评估与结构指导的TCR工程，均具有直接的指导意义。 参考文献：Yang M, et al. 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Rosenberg团队 | 个性化新抗原TCR-T细胞治疗转移性CRC的2期临床中期结果GRATCR：使用数据高效的预训练模型生成表位特异性TCR序列T细胞激活途径：B7、LFA-3和ICAM-1塑造独特的T细胞特征Protocol | 使用病毒系统或mRNA电穿孔构建TCR原代T细胞通过个性化抗原不可知筛选方法鉴定肿瘤特异性TCR，并发现TCR靶向的新抗原表位KRAS Q61H一种快速评估过继转移的工程TCR-T细胞在体内多功能性的方法克服因突变KRAS表位的翻译后修饰导致的免疫逃逸，实现TCR-T细胞介导的抗肿瘤活性在癌症中更多的TCR治愈RAS？4个KRAS G12V TCR的综合比较分析首个获批上市的TCR-T非临床研究和临床开发路径已获批上市的免疫细胞治疗产品汇总（截止时间：2024年11月）全面的体内外验证数据：靶向HLA-A2 GPC3的小鼠TCR-人T细胞，在小鼠中有效控制人肝细胞癌，优于GPC3 CAR-T细胞高通量筛选抗原特异性的T细胞新工具：即用型HLA-I纳米颗粒评估人源TCR对抗嵌合同基因肿瘤的临床前模型，并同时对比了超生理亲和力、最优亲和力、接近不结合的NY-ESO-1 TCR功能tFold-TCR：快速准确地建模TCR-p-MHC复合物，并构建了TCRStructDB结构数据库SHM —— TCR亲和力优化系统MAGE-A4 Tecelra TCR-T疗法识别符合条件的HLA-A*02的特征Protocol | 体外/离体生成抗原特异性CTLProtocol | TIL/TCR-T细胞的一种细胞毒性检测方法全面的功能性自身抗原筛选以评估多反应性工程化TCR的交叉反应性消除经典二硫键可减轻工程化T细胞中的TCR错配靶向胰腺癌KRAS G12V的TCR-T疗法的IND研究mRNA电穿孔与慢病毒转导的HBV TCR-T细胞治疗：肝移植后复发性HBV-HCC的治疗方案从单细胞测序数据中筛选肿瘤特异性TCR、表位和HLA的整合系统从TCR组库中分析筛选癌症免疫治疗的治疗性TCRProtocol | 基于mRNA的病毒抗原特异性TCR-T细胞工程一种专一识别WT1肽-MHC分子的TCR样单域抗体的计算机设计Protocol | 筛选识别MM和AML患者骨髓中的肿瘤反应性T细胞——单细胞光流控系统新抗原的鉴定、预测、验证与TCR的鉴定PMGen：从pMHC预测到新抗原生成经改造的分泌IFNα/抗PD-L1的TCR-T细胞可增强内源性免疫，协同提升对实体瘤的治疗效果靶向KRAS G12V的TCR基因治疗用于晚期胰腺癌的单臂1/2期临床试验含CD28信号基序的嵌合CD3ζ链可增强抗原特异性IL-2分泌并促进人TCR-T细胞在体外的扩增从头设计的二硫键取代天然链间连接，以增强T细胞治疗中的TCR配对及抗肿瘤疗效从疫苗诱导的免疫记忆直接通向针对GPC3阳性肿瘤的个体化TCR-T细胞治疗的转化Procotol | 基于RNA预扩增的单细胞测序快速鉴定肿瘤反应性TCRTCR识别pHLA的预测：基于序列与基于结构的方法、优势、准确率重要会议：[2022 ASCO] TCR-T细胞疗法报告摘汇CAR-TCR峰会：Engineering A Disease-Free World.【提供idea，迸发灵感】AACR2023—TCR相关细胞治疗，为你提供idea2023ASCO—TCR相关细胞治疗，为你提供ideaAACR 2024：TCR-T细胞治疗和TCR相关治疗汇集2024 ASCO，TCR-T细胞和TCR相关治疗临床报告摘汇2024 ESMO，精选TCR-T细胞疗法重要更新2024 SITC，TCR-T细胞疗法最新内容精选(上)2024 SITC，TCR-T细胞疗法最新内容精选(中)2024 SITC，TCR-NK细胞疗法最新内容精选(下)AACR 2025，TCR相关细胞治疗摘要汇集ESMO 2025 | 1514O 针对转移性实体瘤的靶向KRAS G12V的TCR-T疗法首次人体I期研究AACR 2026—TCR、TCE、NK-TCR、自体T细胞疗法ASGCT 2026—TCR相关细胞疗法的新进展，带来新思考TCR领域前沿进展，第7届TCR疗法年度峰会ASCO 2026—TCR-T和TCE的临床试验结果汇集月总结：TCR-T细胞治疗近一个月热点（2026-07-31）往期精彩：系统回顾TCR-T细胞抗癌试验的涌现工程化TCR-T细胞免疫疗法在抗癌精准医学中的利弊癌症治疗的TCR-T细胞疗法：现状和未来应用癌症免疫治疗指南：从T细胞基础科学到临床实践临床癌症的工程化T细胞疗法——TCR-TTCR（T细胞受体）结构和功能用于治疗癌症的CD8+ T细胞受体(TCR)工程疗法的演变TCR-T免疫疗法：挑战和解决方案使用T细胞受体工程T细胞的癌症免疫治疗了解TCR亲和力、抗原特异性和交叉反应性，以改进用于癌症免疫治疗的TCR基因修饰T细胞(2022) TCR基因工程T细胞治疗癌症：当前策略、挑战和前景工程可溶性T细胞受体治疗IL-2和IL-7/IL-15浓度对T细胞扩增的影响比较IL-2与IL-7/IL-15在产生NY-ESO-1特异性T细胞方面的作用TCR-肽-MHC分子动力学模拟的现状和未来挑战抗肿瘤新抗原反应性T细胞的分子特征实体瘤免疫治疗的TCR工程T细胞TCR-肽/MHC相互作用靶向肿瘤基于深度学习的TCR-抗原结合特异性预测靶向新抗原TCR-T细胞治疗实体瘤：距离临床应用有多远肿瘤免疫治疗的工程化TCR T细胞T细胞延缓衰竭：T细胞—APCs免疫和炎症：标志物和信号转导通过RNA工程释放细胞治疗的全部潜力靶向公共新抗原的肿瘤免疫治疗快速实现个体化TCR-T细胞治疗2022年TCR-T公司融资及详情一览利用T细胞信号优化工程T细胞疗法pMHC-肿瘤特异性TCR的结构基因工程免疫细胞疗法(ICT)的未来IL-2、IL-7和IL-15对CD4+、CD8+T细胞扩增和转录组学的作用癌症细胞治疗的前景：趋势和真实世界数据中国的基因和细胞治疗(GCT)：双轨监管下的蓬勃景象中国的细胞和基因治疗：过去、现在和未来(2023)Adaptimune HLA-A*02+患者MAGE-A4+实体瘤的自体T细胞治疗：I期临床试验TCR工程T细胞（TCR-T）个性化新出现的细胞治疗免疫调节策略TCR-T细胞治疗实体瘤：最新技术与前景建立新抗原-HLA捕获文库，研究PD-1阻断治疗对新抗原靶向CD8+T细胞的应答一种新型的肿瘤自体过继细胞治疗TCR minic抗体—肿瘤免疫治疗再生元(Regeneton)对TCR-CD3和pMHC复合物的结构分析结构亲和力高的新抗原特异性CD8 T细胞优先驻留在肿瘤内并清除肿瘤基于pHLA的免疫治疗平台直接调节抗原特异性T细胞快速筛选TCR-pMHC相互作用的YAMTAD系统肿瘤过继免疫治疗：TCR-NK细胞I期临床：HLA-A*02:01 NY-ESO-1 TCR-T(TAEST16001)细胞治疗晚期软组织肉瘤患者TCR-T细胞治疗的淋巴靶向疫苗增强抗肿瘤功能并根除肿瘤TCR疗法的迭代与在研TCR治疗总结Adaptimmune的Afami-cel和ADP-A2M4CD8两款靶向MAGE-A4 TCR-T治疗实体瘤的临床数据IMA203 TCR-T临床数据获得FDA RMAT认证，并于Moderna合作开发PRAME mRNA癌症疫苗基于TCR治疗的最新临床数据一个T细胞多个肿瘤靶点：单个TCR靶向多种肿瘤相关抗原癌症-免疫循环，为肿瘤免疫治疗提供思路人CD8 T细胞配对的αβ CDR3分析TCR蛋白药Tebentafusp治疗转移性葡萄膜黑色素瘤的3年总生存期以TCR为基础的免疫疗法研究进展潜伏的播散性肿瘤细胞的免疫逃逸是由于其稀缺性，可通过T细胞免疫疗法来克服Affini-T针对如KRAS致癌驱动基因突变的TCR细胞疗法进展首款TCR-T细胞治疗产品申报上市，FDA接受治疗晚期滑膜肉瘤的afami-cel的BLA申请并优先审查TCR-T细胞疗法TSC-100和TSC-101最新I期临床展现持久疗效，100%患者无复发allo-HSCT、CAR-T和TCR-T细胞治疗策略TCR-T细胞治疗癌症的研究进展TCR工程T细胞中CD39(ENTPD1)缺失增强抗肿瘤免疫一个有意思的现象，老年人免疫学新指标？基于scRNA-Seq的多个TCR的T细胞比例高通过高效生成靶向多个肿瘤抗原的单表位的TCR-T细胞来增强抗肿瘤反应抗原-脂质体(Lips)”武装“肿瘤与”通用“TCR-T细胞联合治疗，显著增强抗肿瘤效果使用TCR疗法治疗实体瘤的全面解决方案全球首款TCR-T细胞疗法TECELRA®（afami-cel）获批上市，首个获批的实体瘤工程细胞疗法全球首款TCR-T细胞疗法TECELRA®（afami-cel），标价为72.7万美元，推荐剂量2.68-10×10^9通过弱TCR交叉反应对高度丰富的自身抗原进行CTL介导的自身免疫的解构TCR-T细胞疗法：开发方法、临床前评估以及对监管挑战的展望TCR-T在急性髓系白血病（AML）中的应用与挑战以及新兴策略TRAIT：TCR-抗原相互作用的综合数据库TCR mRNA的瞬时T细胞疗法治疗晚期难治性MSI高直肠癌患者TCR-T在血液系统恶性肿瘤治疗的临床试验、挑战和变化基于诊断性肿瘤活检的高通量TCR发现平台，用于个性化的新抗原特异性TCR-T细胞癌症治疗利用TCR-T细胞治疗的力量：癌症免疫治疗的新时代TCR-T细胞疗法治疗实体瘤：挑战与新兴解决方案Mal-ID：机器学习BCR和TCR序列进行疾病诊断IMA203的1期临床试验：自体T细胞疗法治疗HLA-A*02+患者的PRAME+晚期实体瘤用于定量CAR-T和TCR-T细胞产品中载体拷贝数的ddPCR检测方法THLANet：一个用于预测免疫治疗中TCR-pHLA结合的深度学习框架IFNγ表达与CTL中增强的细胞毒性之间的关系LAG-3/TCR双特异性抗体，LAG-3与TCR的空间接近性介导对T细胞活化和自身免疫反应的抑制重庆医科大学 | TCR-T细胞治疗技术实现KRAS-G12V/D恶性肿瘤的精准治疗突破Adaptimmune以5500万美元（预付款）将细胞治疗资产出售给美国WorldMeds，计划裁员62%通过生物素右旋糖酐掺入制备pMHC和TCR的dextramers，检测和监测抗原特异性T细胞或抗原呈递过程T细胞衔接器(TCE)：在肿瘤学及其他领域的扩展前景SAR444200，新型抗GPC3纳米抗体TCE，用于治疗GPC3阳性实体瘤的鉴定与非临床表征TCR的亲和力：affinity、avidity和functional avidity如何影响TCR-T细胞的抗肿瘤反应靶向NY-ESO-1治疗在NSCLC中的应用：lete-cel的前景与挑战癌症细胞疗法：全球临床试验趋势与新兴方向Captain T Cell融资2000万欧元，推进TCR-T进入临床阶段，并拓展体内T细胞治疗基于结构的分析揭示HLA-A*11:01呈递的KRAS G12突变体中，G12D具有由肽段长度决定的免疫原性优势解析人TCR-CD3复合物的静息态与pHLA配体结合态淋巴细胞耗竭性化疗，通过增强抗原呈递提高新抗原靶向T细胞治疗的效果TCR-T细胞疗法的临床前研究和临床试验以及挑战与机遇ADAPT，AI设计靶向pMHC的特异性TCR与TCR-mimic抗体，小规模克隆筛选可成功获得靶向pHLA复合物的精准免疫治疗的最新进展——TCR、TCRm以及从头设计的蛋白结合剂pHLA复合物是致病和疾病进展的核心驱动因素In vivo CAR-T细胞治疗多发性骨髓瘤的临床研究进展（基于ESO-T01的临床试验），为in vivo TCR-T提供新的范式TCR-T细胞治疗：进展、挑战与未来展望对结构扰动到能量学的深度映射，实现了TCR的精准设计肽段识别图谱（PRP）解析TCR特异性，并助力发现疾病相关抗原AI设计TCR，利用融合物理模拟-AI方法对内源性TCR进行工程化改造，使其识别肿瘤新抗原1.5万字！基于新抗原的TCR-T疗法在实体瘤中的应用靶向FOXM1的TCR-T细胞治疗非小细胞肺癌为TCR-T疗法注入新生：增强策略拓展实体瘤精准治疗的普适性Slide-Go Tags，揭示表达新抗原的肿瘤细胞与同源T细胞的空间共定位mRNA-LNP治疗：LNPs在体内编辑产生沉默IL-6的CAR-T细胞，降低CRS风险肺靶向和肝靶向LNPs的结构差异，及其在mRNA递送中的应用（附视频）肿瘤疫苗的前景与挑战——架起troubled water桥梁mRNA肿瘤疫苗(HPV16 BNT113)最新一线治疗数据和前期研究解析肿瘤mRNA疫苗的研究进展：机遇与挑战并存CAR-T或TCR-T望而却步？特异性CAR或TCR mRNA-纳米颗粒-T细胞的重复输注可消退疾病对mRNA疫苗免疫原性评估：mRNA疫苗在胃肠道肿瘤患者中诱导新抗原特异性T细胞反应mRNA疫苗的递送载体LNP和给药途径NY-ESO-1为靶点治疗实体瘤的肿瘤疫苗个性化新抗原肿瘤疫苗接种LNP共递送mRNA和siRNA，生成PD-1敲低的TCR-T细胞膜融合纳米颗粒的HLA多肽寻址通用(HAUL)TCR-T细胞治疗实体瘤JPM2024，BioNTech肿瘤治疗领域的更新和预期，mRNA癌症疫苗可能成为肿瘤学的下一个切实转变全球首款RSV mRNA疫苗获批上市BioNTech ASCO 2024 data瑞金医院KRAS G12V mRNA肿瘤疫苗联合PD-1单抗治疗晚期实体瘤临床获益治疗过程 | 个性化mRNA疫苗联合PD-1抑制剂治疗ESCC患者基于mRNA的定制APC可引发强烈的CD8+和CD4+T细胞反应，并有效诱导功能性抗原特异性CTL反应采用原子沉积技术制备的无脂质、耐热mRNA疫苗生信学习：Cell Ranger ATAC处理10×单细胞上游笔记从fastq文件到bam文件到rmats进行可变剪接分析病毒载体：慢病毒载体概况解析慢病毒载体和逆转录病毒载体年度总结：2024年度总结2025年度总结小憩：CD8+T细胞 & CD4+T细胞辅助性T细胞和细胞毒性T细胞 & γδ T细胞Dendritic Cells(DC) & DC组织特异性人类白细胞抗原(HLA)基因分型技术HLA分型小知识-为什么会见到HLA-Cw4这种奇怪的命名方式三代金标准？HLA分型真正的危险：看错了，还以为自己看清了

T细胞免疫治疗是一种颇具前景的癌症免疫疗法，主要基于CAR和TCR改造的T细胞。相较于CAR-T细胞，TCR-T细胞在实体瘤治疗中具有显著优势：既能识别细胞表面表达的抗原，也能识别胞内来源的抗原；同时，由于TCR沿用了T细胞正常的生理激活结构，其不良反应风险更低。这里，中南大学湘雅医学院和南华大学衡阳医学院研究团队，旨在综述与TCR相关的新颖癌症治疗靶点，以拓展TCR-T细胞治疗的应用范围，重点介绍患者个体中新抗原及新TCR的鉴定方法，并探讨当前TCR-T细胞治疗面临的主要挑战，提出有望提升其安全性和有效性的潜在解决方案。最后，梳理了上述研究方向的最新临床进展，为未来TCR-T细胞治疗的深入发展提供新思路。 1 引言 介绍了TCR-T疗法的历史起源、TCR对新抗原的靶向识别及其预测算法、杀伤性细胞的作用机制、TCR-T细胞的构建方法、新型TCR-T细胞类型，以及当前临床应用面临的主要挑战。作为一种应对晚期难治性实体瘤的创新治疗策略，TCR-T疗法未来将在更多实体瘤的治疗中发挥更加重要的作用。 2 背景 肿瘤免疫编辑是免疫系统调控肿瘤生长并塑造肿瘤免疫原性的过程，通常包括清除、平衡和逃逸三个阶段。免疫逃逸是恶性肿瘤发生发展的重要原因之一，例如肿瘤干细胞（CSCs）通常具有免疫逃逸特征。部分免疫逃逸机制可通过肿瘤免疫治疗予以逆转，例如利用肿瘤疫苗优化抗原呈递；通过过继转移TIL及TCR-T来增强抗肿瘤T细胞数量；以及应用免疫检查点抑制剂（ICBs），其中肿瘤突变负荷（TMB）等因素与肿瘤预后密切相关。肿瘤免疫治疗已被证实为癌症患者的有效治疗手段，并被公认为癌症治疗的第四大支柱，在多种肿瘤中展现出明确疗效。该领域涵盖非特异性免疫治疗，如细胞因子IL-2、基于抗体的肿瘤免疫治疗、靶向ICBs以及针对肿瘤新抗原的个体化过继性细胞免疫治疗（ACT）。ACT与ICBs的成功应用，是肿瘤免疫治疗发展中的重要里程碑，例如CTLA-4抑制剂与PD-L1抑制剂。此外，先进生物材料与药物递送系统亦显著提升了免疫治疗效果，同时降低了毒性副作用。ACT包括自体TIL疗法、抗原特异性的内源性T细胞（ETC）疗法、TCR-T疗法以及CAR-T疗法；其中，TCR-T与CAR-T通过基因修饰技术赋予T淋巴细胞特异性识别肿瘤抗原的能力。CAR-T疗法借助单链可变区片段（scFv）构成的CAR直接识别肿瘤细胞表面抗原，不受MHC分子限制；目前第二代CAR-T在胞内结构域中整合了共刺激分子信号结构域，可进一步促进T细胞活化、增殖及效应功能。尽管CAR-T在恶性血液系统肿瘤中已展现出明确疗效，但因缺乏真正肿瘤特异性抗原、CAR-T细胞转运效率低、肿瘤浸润能力差以及治疗相关毒性等问题，其在实体瘤治疗中的应用仍受限于仅靶向肿瘤细胞表面蛋白这一策略。相较传统CAR-T细胞，TCR-T细胞对触发T细胞活化的肿瘤表位密度更为敏感，且能更有效地穿透实体瘤组织内部，因而可在不良反应更少的前提下，高灵敏度识别更广泛范围的低丰度胞内抗原，从而增强对肿瘤细胞的识别与杀伤能力，并延长T细胞在体内的存续时间。目前，TCR-T免疫治疗已在胰腺癌、肝癌、黑色素瘤、滑膜肉瘤、结直肠癌、食管癌、肺癌及多发性骨髓瘤等多种实体瘤中取得良好疗效。 3 TCR-T疗法发展中的重要历史事件 1982年，Dr. Rosenberg及其同事证实，IL-12激活的杀伤细胞（LAKs）的肿瘤杀伤能力比常规NK细胞和CTLs高出50-100倍。 1986年，瑞士巴塞尔免疫学研究所的Dr. Steinmetz首次提出TCR-T疗法概念，并通过将抗原特异性TCR基因转入另一T细胞，成功实现了抗原特异性的TCR转导。在TCR研究热潮之后，Rosenberg团队在晚期转移性结肠癌动物模型中证实了环磷酰胺、TIL与IL-2联合疗法的有效性。 1990年，Rosenberg团队开发出利用逆转录病毒进行TCR基因转导的方法，显著提高了TCR转导效率。 1999年，Clay等人发现，将TCR基因转导入黑色素瘤患者的外周血淋巴细胞，可产生针对肿瘤的细胞毒性T细胞。 2000年，Kranz团队发现TCR CDR的突变可增强TCR与抗原的结合亲和力，为构建亲和力增强型工程化TCR-T细胞奠定了基础，从而推动TCR-T疗法向临床应用迈进。 2001年，Mark Davis提出MHC共刺激配体对T细胞识别激活具有必要性，为新型T细胞的开发奠定了理论基础。 2002年，Rosenberg等人构建出第一代高亲和力基因工程TCR-T细胞，首次展示了靶向gp100的TCR-T细胞对黑色素瘤患者的潜在治疗价值。 2006年，Rosenberg等人在《科学》杂志发表研究成果：利用电穿孔技术，将来自异基因供者（外周血单个核细胞，PBMC）及TIL的TCR-T细胞靶向MART-1抗原；随后，Morgan等人首次将其应用于转移性黑色素瘤患者，观察到ORR达12%。 2008年，Rosenberg团队开展了TCR疗法在非黑色素瘤实体瘤中的首项临床试验。 2009年，Johnson等人利用转基因小鼠获得特异性强、亲和力高的TCR，标志着以肿瘤相关抗原（TAA）为靶点的TCR-T治疗方案迈向标准化的重要一步。同年， Parkhurst等人在转移性结直肠癌患者中开展了靶向癌胚抗原（CEA）的TCR-T细胞治疗临床试验。 2011年，Robbins等人首次证实，基于NY-ESO-1的TCR-T细胞疗法可成为黑色素瘤与滑膜肉瘤的一种新型有效治疗手段。 2013年，Morgan团队与Carl June团队在靶向MAGE-A3的TCR修饰型TCR-T细胞临床试验中，观察到难以预测的神经系统及心血管系统交叉毒性，由此引发对靶向MAGE-A家族TCR-T疗法的安全警示。 2019年，Rosenberg等人报道了针对转移性结直肠癌中共有的p53 R175H突变特异性TCR的治疗策略，凸显了共有新抗原在临床应用中的价值。同年，Rosenberg团队评估了TIL联合非清髓性化疗及IL-2治疗晚期转移性黑色素瘤患者的疗效。该研究首次系统证实了自体TIL疗法在晚期黑色素瘤患者中具有显著疗效与良好安全性，成为该领域的重要里程碑。 2022年，Kim等人报道了靶向p53 R175H突变的TCR-T细胞疗法在乳腺癌患者中的首项临床疗效，表明TCR-T细胞疗法在实体瘤中具有广阔潜力，并为携带p53突变的癌症患者提供了全新治疗选择。 2024年2月，美国FDA授予Amtagvi（lifileucel）加速批准，这是全球首个获批的TIL疗法，用于治疗对PD-1抑制剂耐药的晚期黑色素瘤患者。 2024年8月，美国FDA批准TECELRA（afami-cel）上市，用于治疗既往接受过化疗的某些HLA类型的成人晚期MAGE-A4+滑液肉瘤，这是全球首个获批上市的TCR-T细胞疗法，也是细胞疗法在实体瘤癌症中使用的重要里程碑。 4 TCR结构及TCR抗原识别的分子机制 理解TCR与同源肿瘤抗原之间的相互作用，是阐明T细胞抗肿瘤免疫的关键，而后者正是阐明TCR与p-MHC分子相互作用的基础。TCR是一种天然抗原受体，表达于所有T细胞表面，可识别肿瘤细胞表面的肿瘤抗原，并激活T细胞以启动抗肿瘤应答。如图1所示，TCR由6种不同的受体亚基复合物组成，例如CD3（ε、γ、δ和ζ），其α链与β链之间通过二硫键相连。共受体CD8αβ和CD4可结合MHC分子，并在胞内与Src家族激酶Lck结合；在受体活化过程中，Lck催化TCR磷酸化，从而增强TCR对抗原的敏感性。TCR胞内结构域极短，缺乏重要的胞内结构域；TCR-CD3复合物则通过TCR与p-MHC结合后引发的构象变化，以及共受体CD4或CD8锚定的Lck介导的CD3活化，在质膜上架起HLA-I/肽识别与T细胞活化之间的信号通路桥梁。最终，各亚基胞内区酪氨酸活化基序（ITAM）发生磷酸化，从而激活TCR。ITAM磷酸化可激活ZAP70，后者继而活化接头蛋白LAT，形成协同信号复合体，为下游信号分子的募集提供平台。此外，能与共刺激或共抑制受体（如CD28、CD40L、PD-1和CTLA-4）结合的保守MHC基序，可通过触发二酰甘油（DAG）等生化信号，放大或抑制TCR信号。TCR链的可变区又称互补决定区，包含CDR1环、CDR2环及居中的CDR3环，主导TCR对肽段识别的精细特异性。 ●图1 TCR包括α链和β链，以及CD3γ、CD3δ、CD3ε和CD3ζ；T细胞表面的CD4或CD8分子作为共受体也参与结合pMHC分子，从而增强TCR与pMHC复合物的结合亲和力，并提高T细胞对抗原刺激的敏感性。在TCR-CD3复合物、共受体及细胞因子的协同作用下，识别抗原的T细胞被激活，并通过克隆增殖产生大量效应细胞。T细胞对肿瘤抗原的识别：（A）CD8⁺细胞毒性T细胞通路：CD8⁺ T淋巴细胞表面具有克隆型TCR，可扫描肿瘤细胞表面由MHC-I分子呈递的突变肽段；特异性结合触发穿孔素与颗粒酶的极化分泌，诱导靶向性恶性细胞凋亡。（B）CD4⁺辅助性T细胞通路：CD4⁺ T细胞表达的TCR识别由MHC-II分子呈递的同源抗原；该相互作用驱动免疫调节性细胞因子的释放，从而增强并协调持久的抗肿瘤免疫应答。 CAR由scFv和胞内信号结构域组成。与传统TCR-T细胞不同，后者仅能识别由pMHC分子呈递的肽类抗原，而CAR-T细胞可直接识别细胞表面多种抗原，包括各类受体与配体。这种广泛的识别能力使CAR-T细胞即使在抗原密度较低的情况下也能触发细胞毒效应。然而，这种强烈的活化信号亦易导致T细胞迅速耗竭，限制CAR-T细胞的持续活化，进而削弱对肿瘤的长期控制效果。CAR的胞内信号结构域通常包含CD3ζ链及共刺激分子（如CD28或4–1BB），可在抗原结合后迅速启动T细胞活化及细胞毒功能。为提升CAR-T细胞的敏感性与持久性，新一代CAR设计已整合共刺激分子，以增强T细胞的存活能力与增殖潜力。由于其直接、高效的活化机制，CAR-T细胞疗法在B细胞恶性肿瘤中疗效显著；但在实体瘤中的应用仍受限，尽管目前多项研究正着力攻克这一难题。此外，CAR-T疗法尚面临多重挑战，包括靶抗原引发的高强度活化、T细胞耗竭、制备工艺复杂，以及个体化治疗流程繁琐等问题。 5 T细胞活化及杀伤靶细胞的分子机制 Doherty与Zinkernagel于1974年首次发现免疫细胞通过TCR与p-MHC相互作用识别胞内蛋白的机制。配体诱导的TCR受体复合物结构改变通常是TCR信号传导的起始事件，并触发快速形成致密、类似牛心结构的免疫突触（IS）。IS由TCR、共受体、共刺激受体、整合素及其他跨膜受体组成；在接受活化信号后，上述受体迅速分离，形成三个同心区室，即中心、外周与远端超分子活化复合体（cSMAC）。cSMAC富含TCR相关信号转导蛋白，可维持TCR信号稳定性，兼具信号转导与降解双重功能。增强cSMAC强度可提升对弱肽刺激的信号转导效率。IS可能参与放大并协调TCR信号传导、基因表达变化，以及靶向分泌性杀伤靶细胞的过程。此外，TCR受体复合物的跨膜（TM）结构域进化保守，呈紧凑而精确的八螺旋束构型，可能在连接胞外（EC）与胞质结构域中发挥关键作用。ZAP70蛋白酪氨酸激酶（PTK）将活化的TCR与其下游信号通路偶联，IL-2等细胞因子亦可诱导信号传导。随着信号启动，肌动蛋白与微管细胞骨架迅速向突触极化。当T细胞的微管组织中心（中心体：MTOC）极化至突触后，微管相关颗粒随之迁移至cSMAC突触同一位置，在质膜处锚定并释放其内容物。此时，在中心体及质膜网格蛋白协助下，穿孔素、颗粒酶、FasL等细胞溶解效应蛋白被释放至免疫突触，从而杀伤靶细胞；而TCR信号强度与抗原结合亲和力则共同决定分泌颗粒自TCR活化后抵达分泌区域所需的时间。 6 优化TCR与靶抗原的亲和力 TCR对于维持T细胞数量及反应性至关重要。T细胞的细胞毒活性高度依赖于TCR亲和力，高亲和力TCR比低亲和力TCR更能加速T细胞分化。天然TCR与表位结合的亲和力受胸腺阳性或阴性选择调控，通常表现为相对较低的亲和力，其解离常数（Kd）多在μM级别，范围为1μM-500μM。胸腺细胞的阳性选择导致大多数天然TCR仅具低亲和力。通常，高亲和力TCR（Kd≥2.5nM）对肿瘤的识别能力优于低亲和力TCR。在生理范围内设计并构建高亲和力TCR，是提升TCR-T疗法疗效的根本途径。提高TCR亲和力的方法多种多样，例如在DMF4和DMF5 TCR（特异性识别MART-1表位）的CDR中引入氨基酸序列突变，即可获得亲和力覆盖mM至pM范围的TCR。然而，若进一步提升TCR亲和力（Kd<1μM），则可能引发多种不良效应，包括基因表达与信号传导受损、脱靶肿瘤识别、不可预测的交叉反应毒性，以及因过度刺激所致的T细胞耗竭。相比之下，低至中等亲和力的TCR通常具有更佳的免疫耐受性。它们解离更快，使单个pMHC复合物得以持续暴露于TCR，从而支持T细胞对呈递抗原的靶细胞进行“扫描—清除”。该机制可避免T细胞过早耗竭，进而维持对肿瘤细胞的持久识别能力。 7 TCR-T疗法的靶向抗原 理想的靶抗原需兼具免疫原性、肿瘤相关表型、在肿瘤干细胞上的表达以及被抗原呈递细胞呈递等特性。可靠、安全且有效的靶抗原筛选，是TCR-T细胞治疗成功的关键。目前的靶抗原主要分为两大类：肿瘤特异性抗原（TSA）和肿瘤相关抗原（TAA）。图2展示了若干对TSA与TAA；其中，TSA通常仅在特定时期内针对某一种肿瘤具有特异性，而TAA则是当前TCR-T细胞研究的主要抗原靶点。 TAAs通常在癌组织中高表达，而在正常组织中表达较低，其中包括组织分化抗原（TDAs）和癌症生殖系抗原（CGAs）。这类抗原具有广泛共享、易于识别与验证的优势；但表达这些抗原的恶性肿瘤种类有限，且靶向TAAs可能因潜在的肿瘤调控毒性（如与无关蛋白发生交叉反应）而导致不可预知的死亡，这在一定程度上限制了TAAs的临床应用。TDAs包括常见的MART-1、gp100（首个被确认的TDA）以及癌胚抗原（CEA）。相较于TDA，CGAs发生脱靶效应的可能性更低。CGA家族亦称癌症-睾丸抗原（CTAs），包含百余种成员蛋白，其中大多数属于X染色体上的多基因家族。它们常在肺癌、乳腺癌、结直肠癌、膀胱癌及黑色素瘤等上皮性肿瘤中异常表达，而在正常组织中仅限于胎儿组织或缺乏HLA-I表达的生殖细胞。CGAs已被广泛研究，作为多个TCR-T疗法及癌症疫苗临床试验中的热门候选靶点，并已鉴定出一类独特的X连锁CT抗原基因家族。近期研究发现，TAAs与源自肠道菌群物种的表位之间存在高度结构同源性。这一发现提示，可利用肠道菌群诱导产生具有抗癌效应的T细胞，从而为预防性癌症疫苗的研发提供全新视角与策略。 新抗原（NeoAgs）是指仅存在于癌细胞中、具有癌症特异性的突变或抗原，通常源于肿瘤细胞基因组中的错义突变（NSMs），例如单核苷酸变异（SNVs）。这类抗原通常具有高度免疫原性，在正常组织中不表达，不受中枢耐受机制影响；由此激活的肿瘤特异性T细胞（TAS）可通过精准靶向癌细胞，在抗肿瘤免疫应答中发挥主导作用。以TSA为靶点的个体化TCR-T细胞免疫治疗，在晚期转移性实体瘤的治疗中展现出巨大潜力。TSAs多为随机发生的、患者个体特异的、非选择性的旁观者突变，通常不具备共享性，因而成为癌症疫苗与TCR-T细胞疗法的理想靶标。SNVs是多种实体瘤中最主要的突变形式，其衍生的新抗原已进入个性化癌症疫苗临床试验等应用阶段。目前关于新抗原的研究主要集中于错义SNV及小片段插入/缺失突变。此外，由病毒基因整合入宿主细胞基因组所诱导产生的癌症，其相关抗原在正常细胞中不表达，针对此类抗原的免疫治疗既安全又具潜在疗效，例如HPV相关癌症。2021年，美国FDA授予Lion TCR生物制药公司开发的LioCyx-M004快速通道资格，用于治疗HBV相关肝细胞癌（HCC）。此外，非外显子序列或异常RNA剪接亦可产生新抗原，提示T细胞对基因组完整性的监视范围可能需延伸至内含子区域。此类TSAs在任何正常体细胞中均不表达，从而显著扩大了候选肿瘤抗原的整体库。 与随机发生的“乘客突变”不同，“驱动突变”源自频繁发生突变的驱动基因，对肿瘤恶性表型至关重要，且可在不同患者间共享，因而被称为“公共新抗原”，例如TP53、KRAS、BRAF或PIK3CA等。这类高度优选、共享的肿瘤特异性表位，常包含相对常见的、受特定HLA限制的突变多肽，可作为多肽靶标，用于制备“现货型”TCR试剂，从而绕过个体化免疫治疗，以可负担的成本为大多数患者提供服务。针对极具前景的p53新抗原，该团队深入研究了识别由HLA-A2限制性致癌基因驱动突变p53（R175H）所产生新表位的寡克隆TCRs，并成功解析出4种特异性识别p53 R175H的TCR（编号：38–10、12–6、1a2和6–11）；其中前3种TCR通过与R175H突变位点形成广泛相互作用，实现对p53新抗原的广谱识别；而TCR 6–11则凭借其在结合过程中突变体脱溶剂化所需能量较低这一特性，优先识别p53突变体。 ●图2 肿瘤抗原的鉴定是TCR-T细胞治疗的关键决定因素。更理想的TCR-T细胞靶抗原是TSA，这类抗原主要为基因突变产物，仅存在于肿瘤细胞中，而在正常细胞和组织中不表达，因而成为TCR-T细胞治疗的理想靶点。然而，由基因突变产生的抗原肽免疫原性相对较弱，难以筛选出高亲和力TCR；且TSA大多具有个体化特征，在特定时间点仅限于个别肿瘤。（A）CGA：在正常体细胞组织中处于沉默状态，但在多种肿瘤中因全基因组DNA去甲基化而发生转录再激活（如MAGE-A10、MAGE-A4、PRAME、NY-ESO-1）。它们本质上具有肿瘤特异性，但突变负荷较低，限制了新生表位的形成，且仍受中枢免疫耐受调控。（B）TSA：单核苷酸变异或插入/缺失突变可产生真正具有肿瘤特异性的表位（如突变型KRAS G12D/V、P53 R175H、BRAF V600E）。每个病变均不存在于生殖系中，因而能激发强烈且患者特异性的T细胞识别，构成个性化癌症疫苗与过继性T细胞治疗的核心靶标谱。（C）TDA：如MART-1与gp100等谱系限制性蛋白，既在正常黑色素细胞中表达，也在黑色素瘤细胞中表达。其“自身”属性易导致靶向正常组织的脱靶毒性及对健康组织的交叉反应，因此作为免疫治疗靶点使用时，需进行严格的亲和力优化或采用条件性调控策略。（D）病毒抗原：致癌病毒——包括HPV（E6/E7）、HBV（HBx）、EBV（LMP1/2）、HCV（core、NS3）以及MCPyV（LT-Ag）——将外源遗传物质整合入宿主基因组，并在感染所致的恶性肿瘤中强制性表达。由此产生的病毒表位属非自身成分，具有高度免疫原性，可作为预防性与治疗性疫苗策略的共有靶点，同时具备病原体特异性。 8 基于NGS和免疫肽组学的新抗原预测方法 准确识别肿瘤新抗原是TCR-T疗法面临的主要挑战；优化新抗原预测算法的准确性，并深入理解新抗原表位及其特异性识别的TCR在性质上的差异，是新抗原疫苗及相关靶向新抗原的胞质T细胞疗法研发中的优先方向。获取并构建针对TSA且脱靶毒性低的TCR，是个性化肿瘤免疫治疗的核心重点；而从患者血液或肿瘤组织中鉴定出靶向性的肿瘤特异性新抗原，则是构建靶向新抗原的TCR-T、合成新抗原相关疫苗的关键步骤，也是TCR-T疗法的主要工作流程。 由Coulie等人提出的cDNA文库筛选法是首个新抗原鉴定方法，但操作繁琐、耗时费力，不适用于高突变负荷肿瘤。下一代测序技术（NGS）包括全外显子组测序（WES）、全基因组测序（WGS）以及RNA测序（RNA-seq）。其中，WES是鉴定候选新抗原的标准策略，而RNA-seq目前已被广泛用作预测候选新抗原的实用策略。通常将NGS数据与计算机化的HLA预测相结合，以预测潜在的肿瘤非经典分子（NSM），但该方法预测出的多肽数量庞大，且对非经典抗原的检出能力有限。例如，整合NGS与机器学习可高效识别肿瘤特异性TCRs，用于个体化癌症免疫治疗，凸显了整合多组学数据与先进计算方法在提升新抗原及TCR预测准确性方面的潜力。 呈现在MHC分子表面的肽被称为免疫肽组，而免疫肽组学则利用质谱技术（MS）直接检测HLA结合肽，尤其适用于源自替代开放阅读框、新型外显子-外显子连接区、内含子序列以及长链非编码RNA的非常规蛋白序列。MS可无偏倚地验证HLA I类分子所呈递的表位，因而被视为一种极具前景的HLA表位预测工具。免疫肽组学技术与先进建模方法相结合，显著提升了MHC分子结合肽的预测能力，缩小了新抗原候选范围，从而在蛋白质水平上为新抗原鉴定提供了“金标准”。然而，MS本身也存在局限性：其检测受限于肽段丰度、仪器灵敏度及肿瘤样本量；依赖于肿瘤细胞中HLA的表达水平；因质谱图谱解析困难可能遗漏部分靶向表位；且对由HLA II类分子呈递的肽段所对应的新抗原候选物识别难度更大。随着Orbitrap质谱分析仪的发展，质谱技术的准确性、灵敏度、分辨率和检测速度均得到提升。单一识别策略往往存在缺陷，整合多组学数据并采用AI等先进机器学习预测算法，有助于更可靠地预测新抗原；计算机预测可有效弥补基于质谱的新抗原预测之不足。Finton等人开发了高灵敏度且操作简便的ARTEMIS平台。将免疫肽组学与RNA-seq或WGS数据相结合，可识别肿瘤特异性突变，并构建肿瘤突变基因（TMG）及抗原肽文库，用于后续筛选自体TIL或外周血T细胞。 9 新抗原免疫原性预测流程与算法 尽管存在HLA呈递，大多数候选新抗原仍无法诱导T细胞免疫应答；因此，开发能够准确识别具有免疫原性的新抗原的算法或筛选工具，是推进个体化TCR-T疗法的前提。然而，在T细胞表位预测工具中同时整合TCR识别与免疫原性评估仍具挑战性。计算机预测流程是一套基于WES、RNA-seq及免疫肽组学数据的变异检出流程，其预测能力取决于预测算法本身的准确性。目前仅有极少数算法能准确预测候选肽段的免疫原性。若将多组学数据与计算机预测相结合，并纳入非锚定位点（如P4–P6位）、抗原肽长度、芳香族氨基酸侧链、p-HLA复合物稳定性、pHLA结合亲和力、肽段长度及结合差异等参数，则可提升免疫原性预测的准确性。例如，有研究证实，基于深度学习的方法可有效从WES数据中预测具有免疫原性的新抗原，凸显了AI在提升新抗原预测精度方面的潜力。AI在新抗原突变识别、蛋白酶体切割位点预测、TAP转运效率评估、p-MHC结合亲和力分析以及新抗原免疫原性预测等方面均具备优势。当前基于AI模型的算法预测精度较高，可作为互补预测器整合至新抗原优先级排序流程中。基于机器学习（ML）算法构建的预测模型，可将肿瘤测序数据、生物信息学算法与肿瘤表位免疫原性鉴定整合进新抗原识别工作流，涵盖体细胞突变检出、MHC分型、p-HLA结合亲和力评估、TCR-pMHC结合预测以及候选新抗原免疫原性预测等环节；该类模型能够识别组织学数据的多维特征，提取关键信息以提升预测性能，并对扩展抗原肽的光谱数据进行建模训练。MHC-II分子α链与β链的高度多态性及其特异性的分子结构，导致其结合肽段的多样性更高，预测过程因而比HLA-I更为复杂。 10 避免TCR-T疗法的交叉反应和脱靶反应 脱靶效应和器官特异性毒性限制了高亲和力TCR修饰的新生抗原特异性TCR-T细胞在临床上的应用。例如，靶向MAGE-A3高亲和力TCR的工程化T细胞曾导致受试者发生严重且致死性的心肌损伤。每个T细胞可识别大量抗原肽，而所呈递的非自身肽中约1/3在TCR识别层面与自身肽无法区分。除依赖计算机算法进行初步粗筛外，还需开展更深入的免疫学筛选，以排除交叉反应性，尤其对于经亲和力增强改造的TCR-T细胞，更须在临床前阶段对其潜在的交叉反应及脱靶效应予以审慎评估。常用筛选方法包括cDNA文库法、pMHC多聚体鉴定法、串联微基因（TMG）法、3D建模工具，以及基于“A与B”逻辑门的交叉反应性肽预测策略。TCR-T疗法中的逻辑门是指通过工程化手段构建的调控机制，使T细胞仅在特定抗原识别模式下被激活，例如执行“与”（AND）、“或”（OR）或“非”（NOT）等逻辑运算。此外，肿瘤靶向超抗原（TTS）可通过工程化设计，将超抗原强大的免疫刺激能力与TAA或TSA的靶向性相结合，从而提升其在肿瘤免疫治疗中的靶向精度与疗效。 11 新抗原特异性TCR的分离及转导至T细胞 如图3所示，目前抗原特异性TCR-T细胞的工作流程包括：①采集患者的外周血或肿瘤组织，并分离出抗原特异性T细胞；②针对患者个体化开展肿瘤新抗原的测序、筛选、鉴定与制备，并通过添加CD3/CD28磁珠及IL-2激活T细胞；③采用病毒或其他方法将TCR基因导入已激活的T细胞；④在体外持续扩增携带特异性TCR的T细胞（即TCR-T细胞），直至达到所需数量；⑤在输注TCR-T细胞前，对接受过放疗的患者经静脉回输足量的TCR-T细胞。当前抗原特异性T细胞的分离与富集，首先依据肿瘤测序结果识别肿瘤突变，再通过构建TMG串联体并转染抗原提呈细胞（APC），或向APC中加入肽段脉冲刺激，以模拟新表位在天然HLA分子上的加工与呈递过程。随后，将患者自体TIL或外周血淋巴细胞（PBL）与上述经改造的APC共培养，在抗原特异性的体外刺激（IVS）条件下，并联合阻断CTLA-4等共抑制信号受体，从而筛选出能响应抗原的T细胞。此外，癌症疫苗接种亦可选择性扩增针对靶抗原具有特异性的T细胞。 ●图3 抗原特异性TCR-T细胞的工作流程。 腺病毒是最早用于基因转移的病毒载体，但其感染效率较低，且在T细胞增殖过程中容易丢失。目前常用的是慢病毒（LV）载体，但其可能引发插入突变及肿瘤转化。为此，Bryant等人开发了塞内卡病毒（SVV）复制子，该载体具有更大的外源基因装载容量和更强的分泌能力。腺相关病毒（AAV）也是一种安全且理想的载体，而载体工程可提升AAV的转导效率。 包括mRNA电穿孔、非病毒型“睡美人”（SB）逆转座子系统、无需病毒载体的CRISPR-Cas9基因组靶向系统以及同源定向修复（HDR）等在内的非病毒基因编辑方法，凭借其操作简便、成本低廉等优势，为TCR-T疗法的广泛应用开辟了道路。此外，将含向导RNA的CRISPR-Cas9核糖核蛋白（RNP）复合物与腺相关病毒6型联用，可实现内源性TCR被外源性TCR所替换。 “睡美人”转座子系统能提供反向末端重复序列，使外源基因稳定整合至靶细胞基因组中，并实现持续表达；而小环状DNA及mRNA技术的应用，进一步优化了该SB转座子系统，但其转染效率仍受限于DNA固有的细胞毒性。CRISPR-Cas9技术依赖短RNA序列，体外合成便捷，可同时靶向多个基因组位点并实现位点特异性突变，因而成为未来治疗性基因工程的首选策略；其安全性与可行性已在多项临床试验中得到验证。 12 基于TCR的新型生物制剂 新型T细胞（例如多种形式的偶联型TCR）利用TCR信号亚基的结合亲和力，与其它药物及寡核苷酸蛋白相偶联，具备完善的生产体系、简便稳定的合成工艺以及高产率，作为靶向抗肿瘤制剂具有广泛的临床应用前景，并为肿瘤精准免疫治疗开辟了新思路。这类新型TCR疗法将特异性抗原肽识别能力与抗体的优良特性相结合，已成为极具潜力的癌症治疗靶点；但抗原呈递密度低、MHC下调限制、潜在交叉反应性、可靶向治疗靶点数量有限以及肿瘤免疫逃逸等因素，也可能在一定程度上影响其临床疗效。共刺激信号对TCR活化至关重要，而新型嵌合共刺激受体则将抑制性受体的胞外结构域与共刺激蛋白的胞内结构域相连接，不仅可增强TCR信号传导，还能促进活性细胞因子分泌、推动效应T细胞增殖并提升其效应功能。近年来，研究人员在TCR工程化改造及新型T细胞疗法开发方面取得了显著进展。例如，针对KRAS G12D新抗原设计的高亲和力TCR可显著增强T细胞识别能力，同时降低脱靶毒性。通过基因编辑技术设计与修饰的高亲和力TCR，已大幅提高T细胞识别肿瘤抗原的能力，并有效减少脱靶毒性。目前，“逻辑门”策略主要应用于CAR-T细胞治疗，但类似原理亦可拓展至TCR-T细胞，以降低交叉反应性。具体而言，新型Syn-Notch逻辑门T细胞可借助Syn-Notch受体，高效区分抗原靶标与正常组织，从而避免脱靶毒性。上述新型T细胞融合了CAR-T与TCR-T细胞疗法的优势，既整合多种抗体片段，又充分利用内源性TCR信号机制，且不受HLA限制。然而，这些新型疗法的安全性与有效性仍有待更多临床试验进一步验证。 13 免疫抑制性肿瘤微环境与免疫逃逸 肿瘤微环境（TME）具有复杂的免疫抑制机制，不仅富集骨髓来源的抑制性细胞（MDSC）、癌相关成纤维细胞（CAF）以及具有免疫抑制功能的肿瘤相关巨噬细胞（TAM）等亚群，还通过免疫检查点介导的共抑制信号通路及TME中免疫抑制因子表达上调等方式，最终导致肿瘤免疫逃逸和恶性进展。如何使效应T细胞在实体瘤的免疫抑制性微环境中维持其杀伤功能，并克服该微环境所诱导的效应T细胞凋亡、免疫抑制及增殖障碍，是TCR-T疗法治疗实体瘤面临的主要挑战。靶向免疫抑制性TME中T细胞抑制性受体PD-1的抗体已获美国FDA批准。此外，促进表位扩散亦有助于应对肿瘤细胞异质性带来的影响。溶瘤病毒（OV）Talimogene laherparepvec（T-VEC）已获FDA批准用于不可切除的皮肤、皮下及淋巴结黑色素瘤。此外，靶向TME、改善肿瘤内普遍存在的缺氧与酸性条件，或表达抗性修饰型细胞因子（如IL-12、IL-7、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子GM-CSF等），亦可缓解免疫抑制性TME。靶向TME以发挥免疫逃逸调控作用的效应分子（如黏着斑激酶FAK）也在一定程度上逆转了该免疫抑制性微环境。 14 TCR-T疗法的耐药性 T细胞耐受性是指T细胞无法发挥其抗肿瘤能力（功能障碍/失能），或当TCR足以识别抗原时，T细胞仍无法发生克隆扩增，甚至无法启动自噬等脱离衰老状态的程序。肿瘤耐受微环境的具体机制包括原发性与获得性耐受机制；肿瘤细胞靶抗原表达水平低或呈异质性，是导致TCR-T疗法原发性耐受的主要原因。肿瘤细胞表达Fas配体（FasL），诱导肿瘤反应性T淋巴细胞死亡，是获得性耐受的重要机制；当前关于耐受的研究主要集中于继发性（获得性）药物耐受。肿瘤细胞中抗原表达密度影响瘤内T细胞的活化；免疫压力促使HLA阴性肿瘤细胞被正向选择，从而削弱有效的T细胞免疫应答；HLA基因的表观遗传沉默可与免疫抑制机制的形成产生协同作用，导致细胞表面p-MHC复合物丰度下降，进而引发肿瘤细胞的免疫逃逸。“免疫致敏”治疗通过靶向免疫抑制分子或抗凋亡分子，逆转免疫系统的负向调控；治疗的关键在于选择在致癌机制中起核心作用、可促进凋亡且不影响淋巴细胞功能的药物。 15 T细胞的持久性与浸润能力差 ACT的疗效关键取决于经基因工程改造的T细胞在体内的扩增能力、存活状态及抗肿瘤活性。实体瘤中的肿瘤间质会阻碍T细胞浸润，成为ACT靶向杀伤肿瘤细胞的主要障碍。效应T细胞属于终末分化的T细胞，通常在体内存续时间较短，往往需要多次输注。为提高输注的TCR-T细胞在体内的持久性，可通过清淋化疗清除患者体内已有的淋巴细胞，从而为外源性T细胞的扩增创造有利微环境，进而提升ACT治疗的客观缓解率。然而，淋巴细胞清除可能加剧免疫抑制，甚至引发MDSC增多、血栓性微血管病（TMA）等并发症。此外，维持并增强T细胞信号传导亦有助于延长TCR-T疗法的持续疗效，例如将ACT与新抗原疫苗联用、对TCR共刺激结构域进行改造，以及联合使用CTLA-4等免疫检查点抑制剂。 16 TCR的错配 转导TCR基因后的每个T细胞均表达2条内源性TCR链和2条外源性TCR链，其细胞表面所表达的TCR组成可能包括正确配对的内源性（α/β）与外源性（α′/β′）TCR异源二聚体，以及错配的异源二聚体（α/β′和α′/β）。此类错配不仅削弱外源性TCR在细胞表面的表达，还会竞争性结合CD3分子，导致T细胞功能低下，并可能诱发自身反应性T细胞生成——这是阻碍TCR-T细胞临床开发的主要挑战之一，也是GVHD发生发展的重要因素。通过恰当的结构修饰，可提升TCR在体内的功能与存续能力，并避免链间错配。例如，将TCR的人源恒定区替换为小鼠来源的恒定区（即TCR的小鼠化改造），不仅能提高TCR在T细胞表面的表达水平、增强细胞因子分泌能力，还可促进工程化TCR链之间的优先配对。 17 非特异性细胞脱靶毒性 “脱靶毒性”和“交叉反应性”是指TCR识别正常组织细胞表面表达的相同或不同抗原的现象。在临床试验中，与TAA相关的脱靶毒性报道更为频繁；而新抗原仅由肿瘤组织特异性表达、且多为胞内来源抗原，其交叉反应性发生率较低，这正是TCR-T疗法的一项优势。从自体TCR文库中筛选特异性TCR，对于降低脱靶毒性至关重要。新抗原仅在肿瘤组织中表达，其交叉反应性发生率低，这也是TCR-T疗法的优势之一。从自体来源中分离TCR，可最大程度提升TCR的选择性，并同步降低交叉反应性及脱靶反应。Hellman等开发了一种基于结构指导的新策略，以增强TCR特异性，该策略在一定程度上消除了TCR对表位的交叉识别。 18 展望 对于冷肿瘤及晚期转移性实体瘤，标准化且安全的靶向新抗原特异性TCR-T疗法展现出广阔的应用前景，相关临床试验所占比例逐年上升。尽管基因工程技术在优化T细胞方面的应用已取得显著进展——例如降低毒性风险、改善T细胞命运（如联合溶瘤病毒或放疗）、增强T细胞活性与持久性（如联合ICBs、细胞因子或肿瘤疫苗），但TCR-T疗法的普适性、适用性及安全性仍不尽如人意。目前，制备好的T细胞富集操作仅能在少数专业肿瘤治疗中心开展。与此同时，HLA分子的多态性（例如常用HLA等位基因HLA-A*02仅存在于27%的患者中）、部分肿瘤突变负荷（TMB）偏低、内源性TCR干扰、输入T细胞的体内存续能力不足、肿瘤耐受性、新型T细胞的安全性等问题，在不同程度上制约着TCR-T的临床应用。当前TCR-T治疗的标准流程是：从患者血液中分离、克隆并验证靶向新抗原的特异性TCR。此外，临床试验中观察到的TCR-T相关不良反应也表明，其安全性仍有待进一步提升。再者，这种高度个体化的TCR-T疗法，受限于高昂成本、复杂的生产工艺、安全性顾虑以及不同人群间HLA分子的高度多态性，距离在临床实践中广泛应用尚有很长一段路要走。 值得注意的是，借助基于日益完善的临床与生物学数据库信息的AI算法，这种个性化治疗策略可得到显著提升。然而，由于当前特异性抗原预测算法本身较为复杂，如何简化这类复杂的特异性抗原预测算法及TCR-T构建流程，开发并验证能够预测具有免疫原性新抗原肽的AI算法，克服肿瘤诱导的免疫耐受状态，并利用多组学数据（基因组学、转录组学、蛋白质组学、单细胞测序等）激发更广泛、更强烈的多克隆免疫应答，仍是亟待突破的难题，可能制约TCR-T疗法向临床转化的进程。此外，新抗原鉴定所需的时间与成本、疗法在广泛人群中的适用性，以及其与免疫检查点抑制剂、肿瘤疫苗和STING（干扰素基因刺激因子）激动剂联用时的疗效，均为个性化TCR-T疗法在实体瘤中广泛应用所面临的紧迫挑战。 未来，应更加关注已建立的TCR文库，这些文库可为患者提供经抗原HLA配型、由患者预先筛选并制备好的TCR序列。新抗原质谱数据量的增加，显著提升了新抗原预测方法的准确性。新抗原疫苗给药便捷，且毒性相对较低。尽管其本身无法直接克服免疫抑制性的TME，但与免疫治疗联用时，可扩增患者体内已存在的新抗原特异性T细胞群，并诱导更广泛的新抗原特异性T细胞应答，从而增强肿瘤特异性T细胞反应、维持T细胞长期存续，并抑制肿瘤复发。与此同时，分离并克隆多种识别突变新抗原的TCR，是TCR-T疗法未来的重要发展方向，例如多价TCR-T——通过向同一患者输注多种单特异性TCR-T细胞，拓展TCR-T疗法的杀伤范围。 总之，寻找和开发TCR的道路依然充满挑战，深入解析已知TCR序列，并发展与应用AI算法等高效工具，是未来实现精准TCR-T细胞疗法的重要环节。 参考文献： Sheila Spada., et al. (2026). International Review of Cell and Molecular Biology, Volume 402: Advances in biomedical engineering - Part A. Hu, Q., et al. (2025). Application of adoptive cell therapy in malignant melanoma. Journal of Translational Medicine, 23, 102. Yang, M., et al. (2024). The intratumoral landscape of T cell receptor repertoire in esophageal squamous cell carcinoma. Journal of Translational Medicine, 22, 1069. 上线工具： TCRshows小程序 专题回顾： Human TCR [TRAV TRAJ]、[TRBV TRBJ]序列汇总 全面认识TCR-T细胞治疗：(1)TCR-T细胞的定义与抗原递呈 全面认识TCR-T细胞治疗：(2)TCR结构及其对pMHC的识别 全面认识TCR-T细胞治疗：(3)TCR-T细胞治疗靶抗原的选择 全面认识TCR-T细胞治疗：(4)TCR-T细胞治疗流程及影响因素 全面认识TCR-T细胞治疗：(5)TCR-T细胞临床试验及存在的问题 全面认识TCR-T细胞治疗：(6)TCR-T细胞治疗研究进展 全面认识T细胞免疫 全面认识T细胞亲和力及其测定 治疗癌症的TCR-T细胞：方法、数据和挑战——上 治疗癌症的TCR-T细胞：方法、数据和挑战——中 治疗癌症的TCR-T细胞：方法、数据和挑战——下 基因工程T细胞：增强持久性和抗肿瘤功能 基因工程T细胞：克服免疫抑制的肿瘤微环境 癌症治疗有前途的靶点——新抗原：(上) 新抗原的来源 癌症治疗有前途的靶点——新抗原：(中) 新抗原的鉴定、预测和验证 癌症治疗有前途的靶点——新抗原：(下)-1 基于新抗原的治疗策略 癌症治疗有前途的靶点——新抗原：(下)-2 临床应用面临的挑战机遇，及展望 过继细胞治疗(ACT)：TCR-T的挑战和新技术 过继细胞治疗(ACT)：ACTs使用的基因转导技术及局限性 肿瘤新抗原TCR-T细胞的全流程：筛选、设计到临床(上) 肿瘤新抗原TCR-T细胞的全流程：筛选、设计到临床(下) 优化过继免疫治疗(上)：识别、鉴定和获取TCR-T细胞和p-MHC 优化过继免疫治疗(中)：TCR-T细胞的应用及限制因素 优化过继免疫治疗(下)：TCR-T联合治疗和TCR衍生产品 TCR疗法行业研究报告2024版 T细胞肿瘤免疫疗法的进展：从基本机制到临床前景（上） T细胞肿瘤免疫疗法的进展：从基本机制到临床前景（下） 方法笔记： 一种靶向***（靶点）的TCR获得方法 TCR抗原表位发现策略：从TCR到抗原表位 TCR克隆策略：从已知抗原表位到特异性TCR 工程化外源TCRs以增强安全性、功能性和可行性 一种治疗鼻咽癌的脂质LMP2-mRNA疫苗 T细胞受体(TCR)的结构和生物学特性 T细胞受体(TCR)链的合成与重排 T细胞抗原以及抗原特异性T细胞的发现 Jurkat报告系统结合微流控技术高通量筛选功能性新抗原特异性TCRs mRNA编码CARs或TCRs，即CAR或TCR-mRNA工程T细胞 基因工程TCR-T细胞产生和应用 免疫治疗中的人源化小鼠模型 TCRmodel2：使用深度学习对TCR识别进行高分辨率建模，精度优于AlphaFold DeepAIR：有效整合序列和3D结构以实现TCR分析 NY-ESO-1 TCR-T临床：实验模型设计和方法细节 质谱鉴定的胰腺导管腺癌(PDAC)天然表位的工程化TCR-T细胞治疗 开发设计有效的个性化新抗原肿瘤疫苗 发现患者和肿瘤类型间共有新抗原的HLA-新表位 肿瘤免疫治疗：pMHC限制性抗体(TCRm)的获得策略 7种基于TCR疗法的分子结构 TCR候选药物的发现及其安全性和有效性 TCR-T细胞疗法的优化，以表现出优越的抗肿瘤疗效 新抗原TCR-T细胞免疫治疗的当前进展与挑战 构建具有增强抗原特异性功能的优势TCR，为优化TCR提供通用平台 新鉴定肽的WT1特异性TCRs对急性髓系白血病和卵巢癌具有抗肿瘤反应性 乳腺癌热点突变ESR1在外源性肽脉冲和内源性抗原处理后TCR识别的不一致 T2细胞的作用：抗原呈递、刺激T细胞、细胞治疗的靶向/评估等 使用CD3ζ增强TCR表达水平和抗原特异性T细胞功能 HLA-A3限制性KRAS G12V特异性TCR的鉴定和结构特征 NeoTCR：实验支持的功能性新抗原特异性TCR序列的免疫信息数据库 个性化TCR-T治疗，抗原/HLA不可知，通过单细胞测序和自体类器官应用确定PDAC患者肿瘤反应性TCR 肿瘤精准靶向免疫治疗的关键：TCR抗原筛选技术 健康donors PBMC抗原特异性T细胞的分析与开发（附方法） 大规模平行文库合成和筛选发现肿瘤反应性TCR——RootPath高通量、个性化TCR发现技术 CAR'TCR-T细胞共表达CD33-CAR和dNPM1-TCR作为AML双靶点治疗的优势 一种新型的IL-21R工程TCR-T细胞抗肝细胞癌 Protocol | 肿瘤浸润性T细胞单细胞RNA-seq数据集中进行TCR功能筛选 Protocol | 从健康供体中诱导新抗原反应性T细胞 为TCR-T细胞治疗筛选MAGE-A4+、HLA-A*02+的合格患者(以afami-cel和uza-cel为例) 使用肿瘤类器官共培养系统鉴定和验证来自TIL的肿瘤特异性TCR 靶向肿瘤驱动突变基因PIK3CA的TCR-T细胞抗肿瘤免疫治疗技术的研发 Steven A. Rosenberg团队 | 个性化新抗原TCR-T细胞治疗转移性CRC的2期临床中期结果 GRATCR：使用数据高效的预训练模型生成表位特异性TCR序列 T细胞激活途径：B7、LFA-3和ICAM-1塑造独特的T细胞特征 Protocol | 使用病毒系统或mRNA电穿孔构建TCR原代T细胞 通过个性化抗原不可知筛选方法鉴定肿瘤特异性TCR，并发现TCR靶向的新抗原表位KRAS Q61H 一种快速评估过继转移的工程TCR-T细胞在体内多功能性的方法 克服因突变KRAS表位的翻译后修饰导致的免疫逃逸，实现TCR-T细胞介导的抗肿瘤活性 在癌症中更多的TCR治愈RAS？4个KRAS G12V TCR的综合比较分析 首个获批上市的TCR-T非临床研究和临床开发路径 已获批上市的免疫细胞治疗产品汇总（截止时间：2024年11月） 全面的体内外验证数据：靶向HLA-A2 GPC3的小鼠TCR-人T细胞，在小鼠中有效控制人肝细胞癌，优于GPC3 CAR-T细胞 高通量筛选抗原特异性的T细胞新工具：即用型HLA-I纳米颗粒 评估人源TCR对抗嵌合同基因肿瘤的临床前模型，并同时对比了超生理亲和力、最优亲和力、接近不结合的NY-ESO-1 TCR功能 tFold-TCR：快速准确地建模TCR-p-MHC复合物，并构建了TCRStructDB结构数据库 SHM —— TCR亲和力优化系统 MAGE-A4 Tecelra TCR-T疗法识别符合条件的HLA-A*02的特征 Protocol | 体外/离体生成抗原特异性CTL Protocol | TIL/TCR-T细胞的一种细胞毒性检测方法 全面的功能性自身抗原筛选以评估多反应性工程化TCR的交叉反应性 消除经典二硫键可减轻工程化T细胞中的TCR错配 靶向胰腺癌KRAS G12V的TCR-T疗法的IND研究 mRNA电穿孔与慢病毒转导的HBV TCR-T细胞治疗：肝移植后复发性HBV-HCC的治疗方案 从单细胞测序数据中筛选肿瘤特异性TCR、表位和HLA的整合系统 从TCR组库中分析筛选癌症免疫治疗的治疗性TCR Protocol | 基于mRNA的病毒抗原特异性TCR-T细胞工程 一种专一识别WT1肽-MHC分子的TCR样单域抗体的计算机设计 Protocol | 筛选识别MM和AML患者骨髓中的肿瘤反应性T细胞——单细胞光流控系统 新抗原的鉴定、预测、验证与TCR的鉴定 PMGen：从pMHC预测到新抗原生成 经改造的分泌IFNα/抗PD-L1的TCR-T细胞可增强内源性免疫，协同提升对实体瘤的治疗效果 靶向KRAS G12V的TCR基因治疗用于晚期胰腺癌的单臂1/2期临床试验 含CD28信号基序的嵌合CD3ζ链可增强抗原特异性IL-2分泌并促进人TCR-T细胞在体外的扩增 从头设计的二硫键取代天然链间连接，以增强T细胞治疗中的TCR配对及抗肿瘤疗效 重要会议： [2022 ASCO] TCR-T细胞疗法报告摘汇 CAR-TCR峰会：Engineering A Disease-Free World.【提供idea，迸发灵感】 AACR2023—TCR相关细胞治疗，为你提供idea 2023ASCO—TCR相关细胞治疗，为你提供idea AACR 2024：TCR-T细胞治疗和TCR相关治疗汇集 2024 ASCO，TCR-T细胞和TCR相关治疗临床报告摘汇 2024 ESMO，精选TCR-T细胞疗法重要更新 2024 SITC，TCR-T细胞疗法最新内容精选(上) 2024 SITC，TCR-T细胞疗法最新内容精选(中) 2024 SITC，TCR-NK细胞疗法最新内容精选(下) AACR 2025，TCR相关细胞治疗摘要汇集 ESMO 2025 | 1514O 针对转移性实体瘤的靶向KRAS G12V的TCR-T疗法首次人体I期研究 AACR 2026—TCR、TCE、NK-TCR、自体T细胞疗法 ASGCT 2026—TCR相关细胞疗法的新进展，带来新思考 TCR领域前沿进展，第7届TCR疗法年度峰会 ASCO 2026—TCR-T和TCE的临床试验结果汇集 往期精彩： 系统回顾TCR-T细胞抗癌试验的涌现 工程化TCR-T细胞免疫疗法在抗癌精准医学中的利弊 癌症治疗的TCR-T细胞疗法：现状和未来应用 癌症免疫治疗指南：从T细胞基础科学到临床实践 临床癌症的工程化T细胞疗法——TCR-T TCR（T细胞受体）结构和功能用于治疗癌症的CD8+ T细胞受体(TCR)工程疗法的演变TCR-T免疫疗法：挑战和解决方案使用T细胞受体工程T细胞的癌症免疫治疗了解TCR亲和力、抗原特异性和交叉反应性，以改进用于癌症免疫治疗的TCR基因修饰T细胞(2022) TCR基因工程T细胞治疗癌症：当前策略、挑战和前景 工程可溶性T细胞受体治疗 IL-2和IL-7/IL-15浓度对T细胞扩增的影响 比较IL-2与IL-7/IL-15在产生NY-ESO-1特异性T细胞方面的作用 TCR-肽-MHC分子动力学模拟的现状和未来挑战 抗肿瘤新抗原反应性T细胞的分子特征 实体瘤免疫治疗的TCR工程T细胞 TCR-肽/MHC相互作用靶向肿瘤 基于深度学习的TCR-抗原结合特异性预测 靶向新抗原TCR-T细胞治疗实体瘤：距离临床应用有多远 肿瘤免疫治疗的工程化TCR T细胞 T细胞延缓衰竭：T细胞—APCs 免疫和炎症：标志物和信号转导 通过RNA工程释放细胞治疗的全部潜力 靶向公共新抗原的肿瘤免疫治疗 快速实现个体化TCR-T细胞治疗 2022年TCR-T公司融资及详情一览 利用T细胞信号优化工程T细胞疗法 pMHC-肿瘤特异性TCR的结构 基因工程免疫细胞疗法(ICT)的未来 IL-2、IL-7和IL-15对CD4+、CD8+T细胞扩增和转录组学的作用 癌症细胞治疗的前景：趋势和真实世界数据 中国的基因和细胞治疗(GCT)：双轨监管下的蓬勃景象 中国的细胞和基因治疗：过去、现在和未来 (2023)Adaptimune HLA-A*02+患者MAGE-A4+实体瘤的自体T细胞治疗：I期临床试验 TCR工程T细胞（TCR-T）个性化 新出现的细胞治疗免疫调节策略 TCR-T细胞治疗实体瘤：最新技术与前景 建立新抗原-HLA捕获文库，研究PD-1阻断治疗对新抗原靶向CD8+T细胞的应答 一种新型的肿瘤自体过继细胞治疗 TCR minic抗体—肿瘤免疫治疗 再生元(Regeneton)对TCR-CD3和pMHC复合物的结构分析 结构亲和力高的新抗原特异性CD8 T细胞优先驻留在肿瘤内并清除肿瘤 基于pHLA的免疫治疗平台直接调节抗原特异性T细胞 快速筛选TCR-pMHC相互作用的YAMTAD系统 肿瘤过继免疫治疗：TCR-NK细胞 I期临床：HLA-A*02:01 NY-ESO-1 TCR-T(TAEST16001)细胞治疗晚期软组织肉瘤患者 TCR-T细胞治疗的淋巴靶向疫苗增强抗肿瘤功能并根除肿瘤 TCR疗法的迭代与在研TCR治疗总结 Adaptimmune的Afami-cel和ADP-A2M4CD8两款靶向MAGE-A4 TCR-T治疗实体瘤的临床数据 IMA203 TCR-T临床数据获得FDA RMAT认证，并于Moderna合作开发PRAME mRNA癌症疫苗 基于TCR治疗的最新临床数据 一个T细胞多个肿瘤靶点：单个TCR靶向多种肿瘤相关抗原 癌症-免疫循环，为肿瘤免疫治疗提供思路 人CD8 T细胞配对的αβ CDR3分析 TCR蛋白药Tebentafusp治疗转移性葡萄膜黑色素瘤的3年总生存期 以TCR为基础的免疫疗法研究进展 潜伏的播散性肿瘤细胞的免疫逃逸是由于其稀缺性，可通过T细胞免疫疗法来克服 Affini-T针对如KRAS致癌驱动基因突变的TCR细胞疗法进展 首款TCR-T细胞治疗产品申报上市，FDA接受治疗晚期滑膜肉瘤的afami-cel的BLA申请并优先审查 TCR-T细胞疗法TSC-100和TSC-101最新I期临床展现持久疗效，100%患者无复发 allo-HSCT、CAR-T和TCR-T细胞治疗策略 TCR-T细胞治疗癌症的研究进展 TCR工程T细胞中CD39(ENTPD1)缺失增强抗肿瘤免疫 一个有意思的现象，老年人免疫学新指标？基于scRNA-Seq的多个TCR的T细胞比例高 通过高效生成靶向多个肿瘤抗原的单表位的TCR-T细胞来增强抗肿瘤反应 抗原-脂质体(Lips)”武装“肿瘤与”通用“TCR-T细胞联合治疗，显著增强抗肿瘤效果 使用TCR疗法治疗实体瘤的全面解决方案 全球首款TCR-T细胞疗法TECELRA®（afami-cel）获批上市，首个获批的实体瘤工程细胞疗法 全球首款TCR-T细胞疗法TECELRA®（afami-cel），标价为72.7万美元，推荐剂量2.68-10×10^9 通过弱TCR交叉反应对高度丰富的自身抗原进行CTL介导的自身免疫的解构 TCR-T细胞疗法：开发方法、临床前评估以及对监管挑战的展望 TCR-T在急性髓系白血病（AML）中的应用与挑战以及新兴策略 TRAIT：TCR-抗原相互作用的综合数据库 TCR mRNA的瞬时T细胞疗法治疗晚期难治性MSI高直肠癌患者 TCR-T在血液系统恶性肿瘤治疗的临床试验、挑战和变化 基于诊断性肿瘤活检的高通量TCR发现平台，用于个性化的新抗原特异性TCR-T细胞癌症治疗 利用TCR-T细胞治疗的力量：癌症免疫治疗的新时代 TCR-T细胞疗法治疗实体瘤：挑战与新兴解决方案 Mal-ID：机器学习BCR和TCR序列进行疾病诊断 IMA203的1期临床试验：自体T细胞疗法治疗HLA-A*02+患者的PRAME+晚期实体瘤 用于定量CAR-T和TCR-T细胞产品中载体拷贝数的ddPCR检测方法 THLANet：一个用于预测免疫治疗中TCR-pHLA结合的深度学习框架 IFNγ表达与CTL中增强的细胞毒性之间的关系 LAG-3/TCR双特异性抗体，LAG-3与TCR的空间接近性介导对T细胞活化和自身免疫反应的抑制 重庆医科大学 | TCR-T细胞治疗技术实现KRAS-G12V/D恶性肿瘤的精准治疗突破 Adaptimmune以5500万美元（预付款）将细胞治疗资产出售给美国WorldMeds，计划裁员62% 通过生物素右旋糖酐掺入制备pMHC和TCR的dextramers，检测和监测抗原特异性T细胞或抗原呈递过程 T细胞衔接器(TCE)：在肿瘤学及其他领域的扩展前景 SAR444200，新型抗GPC3纳米抗体TCE，用于治疗GPC3阳性实体瘤的鉴定与非临床表征 TCR的亲和力：affinity、avidity和functional avidity如何影响TCR-T细胞的抗肿瘤反应 靶向NY-ESO-1治疗在NSCLC中的应用：lete-cel的前景与挑战 癌症细胞疗法：全球临床试验趋势与新兴方向 Captain T Cell融资2000万欧元，推进TCR-T进入临床阶段，并拓展体内T细胞治疗 基于结构的分析揭示HLA-A*11:01呈递的KRAS G12突变体中，G12D具有由肽段长度决定的免疫原性优势 解析人TCR-CD3复合物的静息态与pHLA配体结合态 淋巴细胞耗竭性化疗，通过增强抗原呈递提高新抗原靶向T细胞治疗的效果 TCR-T细胞疗法的临床前研究和临床试验以及挑战与机遇 ADAPT，AI设计靶向pMHC的特异性TCR与TCR-mimic抗体，小规模克隆筛选可成功获得 靶向pHLA复合物的精准免疫治疗的最新进展——TCR、TCRm以及从头设计的蛋白结合剂 pHLA复合物是致病和疾病进展的核心驱动因素 In vivo CAR-T细胞治疗多发性骨髓瘤的临床研究进展（基于ESO-T01的临床试验），为in vivo TCR-T提供新的范式 TCR-T细胞治疗：进展、挑战与未来展望 对结构扰动到能量学的深度映射，实现了TCR的精准设计 肽段识别图谱（PRP）解析TCR特异性，并助力发现疾病相关抗原 AI设计TCR，利用融合物理模拟-AI方法对内源性TCR进行工程化改造，使其识别肿瘤新抗原 mRNA-LNP治疗： LNPs在体内编辑产生沉默IL-6的CAR-T细胞，降低CRS风险 肺靶向和肝靶向LNPs的结构差异，及其在mRNA递送中的应用（附视频） 肿瘤疫苗的前景与挑战——架起troubled water桥梁 mRNA肿瘤疫苗(HPV16 BNT113)最新一线治疗数据和前期研究解析 肿瘤mRNA疫苗的研究进展：机遇与挑战并存 CAR-T或TCR-T望而却步？特异性CAR或TCR mRNA-纳米颗粒-T细胞的重复输注可消退疾病 对mRNA疫苗免疫原性评估：mRNA疫苗在胃肠道肿瘤患者中诱导新抗原特异性T细胞反应 mRNA疫苗的递送载体LNP和给药途径 NY-ESO-1为靶点治疗实体瘤的肿瘤疫苗 个性化新抗原肿瘤疫苗接种 LNP共递送mRNA和siRNA，生成PD-1敲低的TCR-T细胞 膜融合纳米颗粒的HLA多肽寻址通用(HAUL)TCR-T细胞治疗实体瘤 JPM2024，BioNTech肿瘤治疗领域的更新和预期，mRNA癌症疫苗可能成为肿瘤学的下一个切实转变 全球首款RSV mRNA疫苗获批上市 BioNTech ASCO 2024 data 瑞金医院KRAS G12V mRNA肿瘤疫苗联合PD-1单抗治疗晚期实体瘤临床获益 治疗过程 | 个性化mRNA疫苗联合PD-1抑制剂治疗ESCC患者 基于mRNA的定制APC可引发强烈的CD8+和CD4+T细胞反应，并有效诱导功能性抗原特异性CTL反应 采用原子沉积技术制备的无脂质、耐热mRNA疫苗 生信学习： Cell Ranger ATAC处理10×单细胞上游笔记 从fastq文件到bam文件到rmats进行可变剪接分析 病毒载体： 慢病毒载体概况 解析慢病毒载体和逆转录病毒载体 年度总结： 2024年度总结 2025年度总结 小憩： CD8+T细胞 & CD4+T细胞 辅助性T细胞和细胞毒性T细胞 & γδ T细胞 Dendritic Cells(DC) & DC组织特异性 人类白细胞抗原(HLA)基因分型技术 HLA分型小知识-为什么会见到HLA-Cw4这种奇怪的命名方式 三代金标准？HLA分型真正的危险：看错了，还以为自己看清了