Resmetirom

近日，众生药业宣布其自主研发的MASH一类创新药ZSP1601片Ⅱb期临床试验达到主要终点，两个剂量组的主要疗效终点应答率均显著优于安慰剂组。具体来看，100mg组、50mg组和安慰剂组的应答率分别为64.9%、57.6%和32.5%。这一数据的含金量有多高？我们不妨从几个维度来拆解。 ZSP1601的核心竞争力集中体现在肝纤维化改善上。治疗48周后，在“纤维化改善≥1分且MASH无恶化”这个关键指标上，100mg组扣除安慰剂后的率差达到29.50%。横向比较一下，虽然不是头对头研究，但已有数据显示，已获批的Resmetirom（100mg组）在这一指标上对应的安慰剂校正率差约为11.7%。ZSP1601在这一数据上表现出了明显优势。更值得注意的是，在纤维化改善≥2分且MASH无恶化的指标上，100mg组扣除安慰剂后的率差为10.60%，说明一部分患者实现了跨越式的纤维化逆转。 在肝脏脂肪含量方面，100mg组自第12周起降低幅度即显著优于安慰剂组；治疗48周后，该组MRI-PDFF较基线相对下降≥50%的患者比例达到35.1%，而安慰剂组为0%。在肝脏酶学指标上，100mg组ALT较基线降低40.19U/L，显著优于安慰剂组的20.69U/L；AST降低19.12U/L，优于安慰剂组的11.33U/L。安全性方面，ZSP1601组与安慰剂组的不良事件和不良反应发生率相当，未发生导致死亡的不良事件。 从机制来看，ZSP1601是一款磷酸二酯酶抑制剂，同时抑制PDE1A、PDE2、PDE4B、PDE5A等多个亚型，通过升高细胞内cAMP和cGMP水平，经抗炎、抗纤维化、改善脂毒性等多条通路发挥协同效应。这一机制与当前MASH赛道的主流靶点形成差异化竞争，Resmetirom是THR-β激动剂，主要通过调节肝脏脂质代谢发挥作用；司美格鲁肽是GLP-1激动剂，通过减重和代谢调控间接改善肝脏病变。相比之下，ZSP1601对肝星状细胞的直接抑制作用使其在抗纤维化上更有针对性。 MASH在过去二十年里号称“研发黑洞”。据不完全统计，全球药企累计投入超千亿美元，超百款药物折戟。强生、默沙东、礼来等跨国药企的多条管线相继失败，默沙东的MK-3655因疗效不足终止，吉利德的ACC抑制剂Selonsertib因Ⅲ期失败退场。研发的难度很大程度上来自监管要求——FDA要求药物必须通过肝穿刺活检验证“纤维化改善且MASH不恶化”的双终点，这让临床开发成本极高、周期极长。 转折点出现在2024年3月，Madrigal的Rezdiffra（Resmetirom）正式获得FDA批准，成为40年来首个MASH药物。上市后的表现超出了很多人的预期，上市首年销售额达3.17亿美元，2025年第二季度单季攀升至2.128亿美元，全年有望突破8亿美元。到了2026年第一季度，Madrigal的净销售额已达3.113亿美元，同比增长127%；过去12个月累计销售额突破11亿美元，成功跻身“重磅炸弹”药物行列。 2025年8月，诺和诺德的司美格鲁肽获得FDA批准扩展MASH适应症。随后的几个月里，跨国药企在MASH领域的收并购动作更加密集，2025年9月，罗氏以约35亿美元收购89bio，拿下了FGF21类似物pegozafermin；GSK以20亿美元拿下FGF21激动剂efimosfermin；Madrigal则引进石药集团的口服GLP-1小分子激动剂，布局“抗纤维化+减重”的联合疗法。 中国成年人中脂肪肝的患病率相当高，MASH患者数量已超过慢性乙型肝炎，成为第一大肝病。但一个尴尬的现实是，截至目前，国内尚无任何MASH药物被正式批准上市。 ZSP1601正是在这个节骨眼上拿出了积极的Ⅱb期数据。作为全球首个完成Ⅱb期临床研究的pan-PDE抑制剂MASH新药，ZSP1601拥有First-in-Class和Best-in-Class双重标签，已获国家重大新药创制项目支持。与此同时，国内其他药企也在积极推进MASH管线：中国生物制药引进了Inventiva的拉尼兰诺（PPAR靶点，Ⅲ期）；海创药业的HP515（THR-β激动剂）Ⅱa期期中分析取得积极结果；海思科HSK31679（THR-β激动剂）纳入突破性治疗品种名单；信立泰SAL0145（siRNA药物）获批临床。中国药企正在MASH赛道上形成集团化布局，而ZSP1601是其中机制差异化最突出的代表之一。 ZSP1601的积极数据也让市场重新审视了众生药业这家公司，这家以“中药为基、创新引领”为战略定位的企业，近年来正加速从传统中成药企业向创新驱动型药企转型。2025年年报显示，公司实现营收25.23亿元，同比增长2.24%；归母净利润2.76亿元，同比大增192.18%，实现扭亏为盈。业绩改善的原因主要有两个：一是此前年度的资产减值计提影响消退；二是核心业务板块回暖、产品结构优化。 在业务结构上，中成药仍占公司营收的半壁江山——2025年中成药营收13.22亿元，占营业收入的52.39%。这部分业务毛利率较高（69.03%），为中成药向创新药转型提供了稳定的现金流支撑，形成了“传统业务输血、创新业务拓新”的双轮驱动模式。 在创新管线上，众生药业的布局集中在代谢性疾病和呼吸系统疾病两大领域。2025年，公司流感一类创新药昂拉地韦片获批上市，这是全球首个靶向流感病毒RNA聚合酶PB2亚基的First-In-Class小分子创新药，已纳入医保。代谢领域方面，RAY1225注射液（长效GLP-1/GIP双受体激动剂）的三项Ⅲ期临床试验已完成全部参与者入组，公司已将中国区商业化权益授予齐鲁制药，合作金额包含2亿元首付款及8亿元里程碑款项。ZSP1601作为代谢管线的另一核心资产，此次Ⅱb期积极数据标志着公司进入创新成果集中兑现期。 当然，ZSP1601距离最终上市还有一段路要走。按照公司的规划，接下来将推进Ⅲ期临床试验，预计需要较长时间来完成患者入组和随访。Ⅲ期能否复制Ⅱb期的优异表现，还需要数据说话。此外，随着海外MNC和国内药企的持续入局，MASH赛道的竞争格局也在快速变化中。但无论如何，ZSP1601已经证明了一点：在这个千亿美元级别的巨大市场中，中国药企不再是旁观者。 参考信息： [1]广东众生药业股份有限公司.关于控股子公司治疗MASH一类创新药ZSP1601片IIb期临床试验初步结果的公告. [2]广东众生药业股份有限公司.2025年年度报告(公告编号: 2026-021) [3]U.S.Food and Drug Administration.FDA Approves First Treatment for Patients with Liver Scarring Due to Fatty Liver Disease. [4]U.S. Food and Drug Administration.Drugs@FDA: REZDIFFRA (resmetirom)(Application Number: 217785) [5]Novo Nordisk A/S.Wegovy® approved in the US for the treatment of MASH. [6]石药集团有限公司.关于与MADRIGAL就SYH2086订立独家授权协议的公告 [7]医药魔方.12亿美元首付款！GSK收购一款MASH新药 立即扫码加入药事纵横交流群

本文分享一篇2024年发表于 Nature Communications 的研究论文，作者团队设计了一种短效、靶向肝脏和胰腺的IL-22双特异性生物药，在多种代谢功能障碍相关脂肪性肝炎（MASH）临床前模型中取得了显著疗效，且避免了传统IL-22治疗的皮肤和肠道副作用。 文献信息 标题：Liver/pancreas-targeted interleukin-22 as a potential therapeutic for metabolic dysfunction-associated steatohepatitis 作者：Kuan Yau Wong, Danielle J. Borg, Frederik J. Steyn, Christian Fercher, Sumaira Z. Hasnain 等 期刊：Nature Communications，2024年 DOI：10.1038/s41467-024-48317-x 研究背景         代谢功能障碍相关脂肪性肝病（MASLD，旧称非酒精性脂肪性肝病NAFLD）是全球最常见的肝病，其进展形式——代谢功能障碍相关脂肪性肝炎（MASH）——可导致肝硬化、肝衰竭甚至肝癌。据统计，全球约有38%的人口患有MASLD，预计未来10年内还将增长50%。尽管临床在研药物众多，但目前仅有一款药物（Resmetirom，THR-β激动剂）获批用于MASH治疗。现有药物大多只针对MASH四大病理通路中的一条：肝脏脂肪堆积、肝脏炎症、上游代谢异常（糖耐量、胰岛素耐受）或肝纤维化。         白介素-22（IL-22）是一种具有多重代谢调节作用的细胞因子。既往研究显示，IL-22可抑制胰岛β细胞的氧化和内质网（ER）应激，减少局部胰岛炎症，恢复胰岛素分泌，改善高血糖和胰岛素抵抗。然而，IL-22受体（IL-22RA1）在皮肤和肠道也有高表达。临床前和临床试验中发现，长效IL-22制剂（如F-652、IL-22-Fc）会导致皮肤湿疹样病变和胃肠道功能障碍等不良事件。         为解决这一难题，研究团队设计了短效、靶向肝脏和胰腺的IL-22双特异性生物药，以期在保留治疗效益的同时，避免对皮肤和肠道的副作用。 研究方法 一、药物设计与生产 1. 融合蛋白构建 靶向策略：将人IL-22与靶向胰腺/肝脏的单链抗体可变区片段（ScFv）或GLP1受体结合蛋白融合。 变体设计：构建了 hIL-22-GLP1、hIL-22-ScFv、ScFv-hIL-22 三种形式；并通过改变连接子（G4S重复次数）优化药代动力学。 表达系统：采用CHO-S细胞瞬时转染表达，使用PEI MAX转染试剂。 纯化方法：ScFv融合蛋白用蛋白L亲和层析纯化；天然hIL-22用HisTrap Excel镍柱亲和层析 + 阴离子交换层析（HiTrap Q）纯化。 质控：HPLC-SEC分析分子量和聚集状态；Western blot鉴定蛋白；表面等离子共振（SPR）测定与IL-22RA1受体的亲和力。 二、动物实验 1. 动物与饲养条件 品系：C57BL/6 雄性小鼠，6-8周龄。 环境：12h光/暗周期，22-23℃，40-60%湿度，自由摄食饮水。 2. 疾病模型 3. 给药方案 腹腔注射（i.p.）：rmIL-22（100 ng/g）、hIL-22及融合蛋白（2.5 pmol/g），每周两次。 皮下注射（s.c.）：mIL-22-ScFv（6.25~12.5 pmol/g，每周或每两周一次）；mIL-22-Fc（6~60 μg/只，每日一次，共8周）。 三、代谢与生理指标检测 口服糖耐量试验（OGTT）：禁食5h，灌胃50mg葡萄糖，于0、15、30、60、120min测尾静脉血糖。 胰岛素耐量试验（ipITT）：禁食5h，腹腔注射0.75 U/kg胰岛素，同样时间点测血糖。 代谢笼（TSE PhenoMaster）：测定VO₂、活动度、摄食量、能量消耗。 生化检测：血清AST、ALT、甘油三酯、总脂联素及高分子量脂联素（ELISA）；胰岛素、胰岛素原（Mercodia ELISA）。 四、细胞实验 1. 细胞系 MIN6N8：小鼠胰岛β细胞瘤细胞，用于评估STAT3激活和ER应激。 HEPG2：人肝癌细胞，用于脂质堆积模型（棕榈酸200 μM处理）。 LX-2：人肝星状细胞，用于纤维化相关基因表达（TGF-β激活后加药）。 2. 处理与检测 脂质堆积：Bodipy 493/503染色，荧光强度定量或共聚焦显微镜成像。 ER应激诱导：衣霉素（tunicamycin，10 μM，6h）处理人胰岛，检测sXBP1（qRT-PCR）和胰岛素原（ELISA）。 STAT3激活：Western blot检测pSTAT3，免疫荧光染色。 蛋白质组学：HEPG2细胞处理后，进行胰酶酶解、C18脱盐、LC-MS/MS（Q Exactive Plus），数据用Proteome Discoverer 3.0 + Chimerys搜索引擎分析，DAVID进行KEGG通路富集。 五、分子生物学方法 qRT-PCR：Trizol法提取RNA，SensiFAST cDNA合成，SYBR Green定量。检测基因包括：Npy、AgRP、Pomc（下丘脑）；Grp78、Nos2、Srebp1c、Fas、Elovl6、Hmgcr（肝脏）；Col1a2、Col3a1、ActA2、Tgfβ2、Socs3（星状细胞）；Il1β、Tnfa（炎症因子）。 PCR Array：Qiagen Fatty Liver PCR Array 和 Fibrosis PCR Array，按说明书操作，数据用Qiagen GeneGlobal分析中心处理。 六、组织学与免疫染色 组织处理：肝脏、脂肪、皮肤、肠道、胰腺取材，部分OCT包埋冰冻切片，部分福尔马林固定石蜡包埋。 染色方法： H&E：一般形态 油红O（Oil Red O）：脂质定量（Visiopharm软件） Sirius Red 和 Masson‘s Trichrome：胶原/纤维化 免疫组化（IHC）：Ki67（增殖）、MPO（中性粒细胞） 免疫荧光（IF）：pSTAT3、胰岛素、胰岛素原、Reelin、GFAP（星状细胞标志物） TUNEL：凋亡检测 评分系统：NAS评分（0-8分：脂肪变0-3、气球样变0-2、小叶炎症0-3）；纤维化分期（0-4级）。 七、人胰岛实验 来源：澳大利亚Tom Mandel胰岛移植项目，4例器官捐赠者。 处理：挑取胰岛，静置过夜，衣霉素（10 μM，6h）± IL-22融合蛋白（3 pmol/mL），18h后提取RNA或蛋白，ELISA检测胰岛素原。 八、统计分析 样本量：以OGTT曲线下面积变化1.5个标准差为依据进行功效分析。 检验方法：正态分布数据用单因素ANOVA + Bonferroni事后检验或双尾t检验；非正态分布用Kruskal-Wallis + Dunn’s事后检验。 软件：GraphPad Prism 9.2.0。 盲法：组织学评估实施盲法；动物饲养笼随机分配，但研究者对治疗分组不设盲（主观评估已避免）。 研究结论 重组小鼠IL-22可改善葡萄糖耐量、减轻体重，并在不改变代谢率或能量消耗的情况下诱导饱腹感         与作者既往结果一致，在高脂饮食（HFD）诱导的肥胖小鼠模型中，每周两次给予重组小鼠IL-22（rmIL-22）可降低体重并改善糖耐量（Supplementary Fig. 1a–c）。为明确代谢机制，研究采用TSE PhenoMaster系统监测代谢参数。结果显示：HFD小鼠平均每日耗氧量（VO₂）升高，但rmIL-22治疗未改变这一指标，提示rmIL-22不影响代谢率（Supplementary Fig. 1d, f）；同样，rmIL-22对小鼠日常活动也无影响（Supplementary Fig. 1g, h）。         在正常饮食（NCD）小鼠中，rmIL-22未改变食物摄入量（Supplementary Fig. 1i–k）。然而在肥胖小鼠中，rmIL-22显著降低了累积食物摄入量。机制研究发现，rmIL-22显著下调下丘脑中促进食欲的神经肽Y（NPY）和刺鼠相关肽（AgRP）基因表达，同时上调调节饱腹感的前阿片黑素皮质素（POMC）基因表达（Supplementary Fig. 1l）。这些数据表明，rmIL-22治疗可直接或间接改善大脑中调控食欲的神经通路，从而增强饱腹感，总体上减少食物摄入。 长期系统性IL-22治疗可减少肝脏脂质蓄积，但会诱发皮肤及肠道炎症反应与过度增殖         既往研究显示rmIL-22可降低体脂，这可能完全由饱腹感变化所致。为评估IL-22是否直接作用于脂肪组织，作者检测了rmIL-22治疗后脂肪细胞大小的变化（Fig. 1a）。在附睾和皮下脂肪中检测到IL-22ra1表达（Supplementary Fig. 2a），提示存在直接作用的可能。与正常饮食（NCD）相比，肥胖导致附睾和皮下脂肪细胞显著增大，而rmIL-22治疗可显著减小HFD小鼠上述脂肪组织中的脂肪细胞大小（Fig. 1b, c），但对瘦动物无影响。尽管脂肪细胞大小发生显著改变，但HFD或rmIL-22治疗均未改变空腹血清总脂联素、高分子量（HMW）或低分子量（LMW）脂联素水平（Supplementary Fig. 2b）。同样，rmIL-22显著减少了肥胖动物肝脏中的脂质积累（Fig. 1d, e）。         尽管rmIL-22在减少脂质积累方面具有良好效果，但既往使用长效IL-22（二聚化IL-22 F-652和IL-22-Fc）的研究显示其存在剂量相关的皮肤和肠道不良反应。作者通过每日给予C57BL/6小鼠递增剂量的重组小鼠IL-22-Fc（长效）持续8周，验证了这些发现（Fig. 1f）。最高剂量组动物结肠重量/长度比增加，提示炎症和/或过度增殖（Fig. 1g）。与临床数据一致，rmIL-22-Fc治疗动物在注射和非注射部位的表皮厚度和增殖均增加一倍以上（Fig. 1h, i）。此外，与PBS对照组相比，rmIL-22-Fc治疗动物表皮中性粒细胞浸润增加（Fig. 1i）。rmIL-22-Fc治疗后肝脏、胰腺外分泌部和内分泌部均未见组织学改变（Supplementary Fig. 3）。 设计肝脏/胰腺靶向IL-22双特异性生物制剂         长效IL-22融合物（如F-652）在酒精性肝炎患者中可改善MELD和Lille评分，但瘙痒是最常见的不良事件。作者假设：肝脏靶向的IL-22可能具有更高疗效和/或更佳治疗指数。为此，他们利用GLP1受体结合蛋白和单链抗体可变区片段（ScFv）作为靶向元件，设计了新型IL-22双特异性生物制剂（Supplementary Fig. 4a）。Western blot和HPLC SEC分析显示，人IL-22（hIL-22）与hIL-22-GLP1形成二聚体，而N端和C端融合的hIL-22-ScFv倾向于形成更高级的寡聚体（Supplementary Fig. 4b–d）。背散射分析提示ScFv-hIL-22在较高温度下易聚集，体内稳定性可能较差（Supplementary Fig. 4e, f）。         使用MIN6N8胰岛β细胞和HEPG2肝癌细胞评估双特异性药物的活性。所有融合蛋白在刺激后30分钟均可诱导STAT3磷酸化（pSTAT3），但激活程度低于天然hIL-22（Supplementary Fig. 5a, b）。融合蛋白与天然hIL-22的STAT3激活动力学存在差异：ScFv-hIL-22仅在HEPG2细胞中激活pSTAT3，在MIN6N8细胞中无作用（Supplementary Fig. 5d, h）；而hIL-22-GLP1和hIL-22-ScFv在HEPG2细胞中诱导的pSTAT3激活水平较低但更持久（Supplementary Fig. 5i, j）。         为评估体内组织特异性，作者以pSTAT3作为生物标志物（Fig. 2a）。与天然hIL-22相比，hIL-22-ScFv和hIL-22-GLP1在肠道中的pSTAT3激活均显著降低约10倍（Fig. 2b–e）。然而，hIL-22-ScFv在肝脏（约80倍）和胰腺（约10倍）的靶向性显著增强，而hIL-22-GLP1仅增强肝脏靶向，胰腺靶向与天然hIL-22相当（Fig. 2b, c, e）。在人胰岛中，hIL-22-ScFv可显著减轻衣霉素诱导的ER应激（sXBP1降低），并改善衣霉素引起的高胰岛素原水平（Fig. 2f），表明其功能与天然hIL-22相似且直接作用于胰岛。         在HFD肥胖小鼠中，hIL-22-ScFv或hIL-22-GLP1治疗2周可降低血清胰岛素原/胰岛素比值，提示β细胞负荷减轻（Fig. 2g, h）。但天然人IL-22在该时间点无显著效果，推测与79%的种属同源性及对小鼠IL-22ra1结合效率较低有关。在细胞实验中，人IL-22减轻棕榈酸诱导的ER应激效果比小鼠IL-22低约25%（Supplementary Fig. 6a）。靶向双特异性融合蛋白对胰岛素原/胰岛素比值的更大改善可能与其增强胰腺pSTAT3激活有关（Fig. 2b, e）。其中，hIL-22-ScFv是唯一显著改善空腹血糖的化合物（Fig. 2h），这与它同时增强肝脏和胰腺靶向的特性一致（Fig. 2b–e）。 IL-22-ScFv对胰腺和肝脏的双重靶向作用可增强IL-22改善代谢综合征的疗效         基于体外和体内的靶向性与疗效比较，作者选择 hIL-22-ScFv 作为先导化合物进行后续开发和临床前测试。制备了两种不同连接序列的变体（Supplementary Fig. 7a），所有变体在HEPG2和MIN6N8细胞中均保留pSTAT3激活能力（Supplementary Fig. 7e）。将连接子长度从(G4S)₁ 改为 (G4S)₃ 或 (G4S)₅ 对药代动力学无显著影响，所有变体均在8小时内基本清除（Supplementary Fig. 7b）；靶向性也未因连接子长度改变而改善（Supplementary Fig. 7c, d）。所有变体均靶向肝脏/胰腺，但(G4S)₃ 和 (G4S)₅ 变体同时靶向肠道。稳定性研究显示，hIL-22-ScFv 比天然 hIL-22 更稳定（Supplementary Fig. 8a）。表面等离子体共振证实 hIL-22-ScFv 与 IL-22RA1 受体 1:1 结合，亲和力与各变体相似（Supplementary Fig. 8b, c）。         腹腔注射先导化合物 hIL-22-ScFv 后，疗效得以保留，表现为血糖控制、肝脏脂肪变性、炎症和 ER 应激显著改善（Fig. 3a–g）。尽管空腹血糖在天然 IL-22 治疗后基本不变（Fig. 2h），但口服糖耐量改善，提示在空腹血糖变化之前整体糖处理能力已提高。hIL-22-ScFv 治疗动物还出现棕色脂肪垫增加、脂肪量轻微下降（Supplementary Fig. 6b, c），而天然 hIL-22 无此效应，表明靶向 IL-22 腹腔给药后疗效增强。HFD 动物肝脏大体可见脂肪变性，经 hIL-22-ScFv 治疗后改善（Fig. 3d）。与肝脏大体形态改变一致，hIL-22-ScFv 降低了 AST/ALT 比值，显著减少肝脏甘油三酯含量和脂质积累（Fig. 3e, h, i）。肝脏 ER 应激标志物 Grp78 和氧化应激标志物 Nos2 表达也显著降低（Fig. 3g）。伴随细胞应激下降，脂质代谢关键酶基因（Elovl6、Srebp1c、Fas、Hmgcr）在 hIL-22-ScFv 治疗的 HFD 动物中下调，而天然 hIL-22 治疗无此变化（Fig. 3f）。 通过皮下注射IL-22-ScFv维持对肝脏和胰腺的靶向作用         考虑到人体给药途径，作者验证了IL-22-ScFv皮下给药的可行性。重组mIL-22-ScFv皮下注射（12.5 pmol/g）达到与腹腔有效剂量（2.5 pmol/g）相同的血药峰值浓度（约8 ng/mL）（Supplementary Fig. 8d）。即使高剂量（400 pmol/g）皮下给药，靶向性依然保持：肝脏和胰腺可见pSTAT3激活，而肾、心、肺、脾和肠道染色可忽略；仅在注射部位表皮观察到少量pSTAT3，非注射部位皮肤无（Supplementary Fig. 8e）。         肥胖动物每周或每两周皮下给予mIL-22-ScFv（12.5或6.25 pmol/g）可有效改善高血糖和肝脏脂质堆积（Supplementary Fig. 9a），且不改变体重、脂肪量或棕色脂肪（Supplementary Fig. 9b）。其中6.25 pmol/g（每周或每两周）持续降低高血糖，而12.5 pmol/g组部分动物仍存在糖不耐受（Supplementary Fig. 9c）。较低剂量（6.25 pmol/g）在减少肝脏脂质、降低炎症因子（Il1β、Tnfα）和脂肪酸合酶（Fas）表达方面优于高剂量（Supplementary Fig. 9d, e）。         为评估长期皮肤和肠道效应，将肥胖动物治疗8周。mIL-22-Fc（长效对照）导致小肠绒毛长度增加、Ki67阳性细胞增多、表皮增厚（注射及非注射部位）及注射部位凋亡增加；而mIL-22-ScFv无上述改变（Supplementary Fig. 10a–f）。PCR阵列显示，hIL-22-ScFv上调肝脏Socs3和Pck2，下调炎症相关基因（Casp3、Ifnγ、Il6）及促纤维化基因B2m和Pdk4（Fig. 4a; Supplementary Fig. 11a）。 与长效IL-22相比，靶向IL-22-ScFv在减轻肝纤维化方面更具疗效         作者进一步评估IL-22-ScFv在多个MASH模型中能否阻止纤维化进展。首先采用胆碱缺乏、L-氨基酸定义的高脂饮食（CDAHFD）模型，小鼠在持续CDAHFD喂养的同时接受mIL-22-ScFv或mIL-22-Fc治疗5周（Fig. 4b）。两组均未见体重、空腹血糖或胰腺/肝脏重量变化（Supplementary Fig. 11b）。mIL-22-ScFv治疗组脂滴大小显著减小，NAS评分和纤维化评分显著降低，而mIL-22-Fc仅对少数小鼠有轻微（无统计学意义）改善（Fig. 4c, d）。Sirius Red和Masson‘s Trichrome染色证实mIL-22-ScFv减少纤维化，伴随促纤维化胶原基因（Col1a2、Col3a1）表达下调（Fig. 4e, f）。mIL-22-ScFv的摩尔剂量仅为mIL-22-Fc的十分之一，疗效却更优，可能与其增强的肝脏靶向性和/或不同的药代动力学特征有关。PCR阵列显示mIL-22-ScFv显著下调CDAHFD激活的多种促纤维化和炎症通路基因（Supplementary Fig. 11c, d）。         随后在HFD联合硫代乙酰胺（HFD/TAA）模型中，H&E、Sirius Red和Masson’s Trichrome染色证实存在严重弥漫性纤维化、炎症和胶原沉积（Fig. 4g）。mIL-22-ScFv显著减轻纤维化，而mIL-22-Fc无效（Fig. 4h）；微阵列分析显示mIL-22-ScFv降低促纤维化/炎症基因Mmp3、Tgfb2和Timp4（Supplementary Fig. 11g）。此外，mIL-22-Fc使肝脏重量增加约30%，提示炎症和/或过度增殖，而mIL-22-ScFv无此效应（Supplementary Fig. 11f）。 胰腺和肝脏IL-22RA1信号通路均为IL-22-ScFv治疗改善代谢状态所必需         为解析IL-22-ScFv的组织特异性作用，作者构建了胰岛β细胞特异性IL-22ra1敲除小鼠（IL-22ra1^(βcell–/–)）。HFD喂养12周后，野生型（IL-22ra1^(fl/fl)）小鼠经mIL-22-ScFv治疗可改善高血糖；而β细胞敲除小鼠接受相同治疗后，高血糖和胰岛素原/胰岛素比值均无改善，证实β细胞的IL-22ra1信号对血糖控制至关重要（Fig. 5a）。进一步构建肝细胞特异性IL-22ra1敲除小鼠（IL-22ra1^(Hep–/–)）。在HFD喂养下，mIL-22-ScFv仍能减少β细胞敲除小鼠的肝脏脂质积累，但在肝细胞敲除小鼠中该效应消失。这些数据表明，减少脂肪变性独立于β细胞功能和血糖控制的改变，而肝脏IL-22RA1信号是IL-22-ScFv驱动肝脏改善所必需的（Fig. 5b–e）。 IL-22-ScFv在MASH中的多模式效应         作者假设IL-22可直接影响肝细胞脂质储存。用棕榈酸处理HEPG2细胞可剂量依赖性诱导脂质积累（Supplementary Fig. 12a）。hIL-22-ScFv处理含脂质的HEPG2细胞后，Bodipy染色显示脂质储存显著减少（Fig. 5f, g）。基因表达分析发现CPT1a和ACACA基因有轻微但显著的升高（Supplementary Fig. 12b）。为解析整体变化，对含脂质HEPG2细胞进行质谱蛋白质组学分析，共鉴定出5480个高置信度蛋白，其中250个差异表达蛋白（p<0.05）。DAVID生物信息学分析（KEGG通路富集）显示，36%的差异表达蛋白直接参与代谢通路，同时内质网功能相关通路也显著上调。这些数据表明IL-22-ScFv对代谢通路产生复杂调控，这可能是其减少肝细胞脂质储存的机制之一（Fig. 5h）。         hIL-22-ScFv在体内显著减轻纤维化，且其及所有变体均可激活LX2人星状细胞中的pSTAT3，提示可直接靶向星状细胞（Supplementary Fig. 12d）。在CDAHFD动物中，单次脉冲给予mIL-22-ScFv（400 pmol/g），免疫荧光染色显示pStat3与星状细胞标志物GFAP和Reelin共定位，证实了体内直接靶向（Fig. 5i）。hIL-22-ScFv直接处理可降低LX2细胞中ACTA2、COL1A3、TGFβ2的表达，并增加SOCS3（Fig. 5j），提示其可诱导星状细胞衰老和抗炎通路。综上，IL-22-ScFv的抗纤维化效应是通过同时作用于含脂质的肝细胞、星状细胞和胰腺β细胞实现的。 研究讨论 1. MASH治疗的现状与IL-22的多重优势         全球约38%的人口患有MASLD，预计未来10年将增长50%。尽管发病率高且病情严重，目前获批的MASH治疗药物极为匮乏，且多数在研药物仅针对MASH四大病理通路中的一条。本研究在多种MASH临床前模型中证明，靶向胰腺和肝脏的IL-22可同时调控多条通路：改善β细胞功能及胰岛素质量（降低胰岛素原）以减轻高血糖；减少肝细胞ER应激、炎症和氧化应激；减少肝脏脂肪堆积；以及减轻肝纤维化。 2. 系统IL-22的副作用与本研究的靶向策略         IL-22RA1不仅在胰岛、肝细胞表达，也在黏膜上皮细胞、表皮细胞高表达。系统给予IL-22（尤其是长效剂型，如IL-22-Fc）具有引起皮肤和肠道过度增殖的潜在风险，这一点已在临床试验中得到证实。本研究通过将IL-22与单链抗体片段（ScFv）融合，成功实现了肝脏和胰腺的优先靶向。与天然IL-22及IL-22-Fc相比，IL-22-ScFv在肠道中的Stat3激活降至可忽略水平，在皮肤中仅注射部位有微弱激活，且未引起小肠绒毛长度增加或表皮增厚。因此，该靶向策略有效降低了皮肤和肠道的过度增殖风险。 3. IL-22对体重和摄食的影响         在肥胖小鼠中，天然IL-22可降低体重，这与其增加饱腹感、减少摄食有关（通过下调下丘脑NPY/AgRP、上调POMC），而非改变代谢率或能量消耗。然而，靶向IL-22-ScFv皮下给药时并未引起体重下降，尽管仍能改善胰岛素质量。这表明靶向IL-22带来的代谢改善独立于体重变化，这一特性在临床转化中可能更具优势。 4. 抗纤维化作用的机制与优势         在CDAHFD和HFD/TAA两种MASH纤维化模型中，IL-22-ScFv均显著减轻纤维化，且效果优于摩尔剂量高10倍的长效IL-22-Fc。机制上，IL-22-ScFv可直接作用于肝星状细胞，通过STAT3和SOCS3激活诱导星状细胞衰老，并下调ACTA2、COL1A3、TGFβ2等促纤维化基因。此外，IL-22-ScFv还可减轻肝细胞ER应激和氧化应激，上调SOCS3（JAK/STAT通路的负调控因子），从而降低肝脏炎症。这些多细胞、多通路的综合作用是IL-22-ScFv抗纤维化效果显著的原因。 5. 对MASH四大通路的全面调控及临床意义         目前MASH临床试验的药物大多只靶向四大通路之一：肝脏脂肪堆积、肝脏炎症、上游代谢异常（糖耐量/胰岛素耐受）、纤维化。本研究表明，IL-22-ScFv可同时调控这四条通路，因此具有覆盖更广泛MASH患者的潜力——从早期脂肪肝到晚期的纤维化阶段，以及不同复杂病因的患者。通过靶向递送IL-22，既能增强对胰腺和肝脏的保护作用，又能避免皮肤和肠道的副作用。因此，靶向IL-22疗法是一种极具前景的MASH治疗新策略。 点击上方蓝字 关注我们 这里是研之有理 专注医学核心期刊文献深度解析，为临床医师、医学生、科研工作者筛选前沿成果、拆解研究逻辑、提炼实用结论。每天5分钟，高效吸收期刊精华，助力学术积累与临床实践。 【精品精读系列4-6月特辑】 聚焦肝病、肿瘤、消化道疾病及代谢性疾病的基础与临床研究，深度拆解 CNS、《J Hepatology》等顶刊最新成果，解码代谢-肿瘤跨界机制、消化道癌新靶点及肝病诊疗突破。每期解析论文设计逻辑与技术创新，附赠科研思维拓展彩蛋。99期计划再次起航，助你紧跟前沿、提升科研能力！关注【研之有理】解锁更多顶刊精读干货！ **研之有理为感谢长读用户的不离不弃，欢迎加入医学科技交流群 本期期刊精华已送达～ 若觉得内容对你的学术研究或临床工作有启发，欢迎点赞、留言，或者转发给身边的伙伴，让优质文献惠及更多医学人！下期将聚焦「医学科技前沿」，记得星标关注，不错过前沿干货～ ---往期精品合集（点击图片可查看）--- ---往期热点合集--- science advance IF=11.7丨鉴定一种靶向 ACSL4 抑制剂，以治疗铁死亡相关疾病 Nature Metabolism (IF=19.2)|人类肠道微生物芳香族氨基酸及其相关代谢物通过肠道免疫控制预防肥胖 Nature Communications（IF=15.7）|通过抑制FXR破坏胆汁酸代谢会导致YAP激活诱导的肝细胞癌 Redox Biology IF=10.7丨色氨酸代谢产物3-羟基邻氨基苯甲酸(3-HAA)通过抑制铁死亡缓解支气管肺发育不良 Mol Cell（14.5）| OPA1通过增强线粒体 ROS 和抑制综合应激反应来促进铁死亡 science advance IF=13.6丨脂肪酸过氧化和 cGAS-STING 激活抑制 ACLY 克服癌症免疫治疗耐药性 Journal of Hepatology（IF=26.8）|人肝星状细胞的多模式分析确定了MASLD的新治疗靶点 Journal of Hepatology（IF=26.8）|通过调节肝脏昼夜节律钟来恢复 TGF-β 信号传导从而改善纤维化 Nature Metabolism（IF=19.2）丨骨骼肌中 Kdm2a 的抑制改善肥胖中的代谢活性 Cancer Res（IF=12.8）｜莲心碱通过 AMPK-HIF-1α 重编程代谢，重塑免疫微环境并增强肝细胞癌的免疫治疗 ---研之有理·福利区--- ① 【研之有理·医学科技交流群】入群即享：随时提出科研疑问获取权威指导，提前知晓周 / 月推文规划以合理安排学习时间，还能享受点对点文献服务，按需索取特定文献或指定小编解读方向，更可直接对接小编团队反馈需求建议，助力内容持续优化升级…… 新年福利放送！快来看看你的科研伙伴新的一年有什么新变化吧！ ② 《医学科技创新前沿洞察白皮书》：关注医学前沿，包括铁死亡、肥胖防控、肝癌治疗等领域，精选高IF文章，深度解析研究机制。只需9.9元就可帮您快速掌握医学最新研究成果，扩展科研范围！ 《医学科技创新前沿洞察白皮书》重磅发布！300+页顶刊研究精华，帮你抢占医学科研与临床转化先机！ ③ 《研之有理·科研学习指南 2026版》：一款适用于科研人员的工具书，涵盖基础医学与生物学领域核心内容，既有实验技术实操指导，也含知识科普与实用工具推荐，助您科研之路顺畅无忧~ 科研人必藏！200 + 页实验 & 分析指南，从 PCR 到顶刊绘图全搞定 ⚠️⚠️⚠️ 本文内容基于已发表的学术文献进行整理、解析与翻译，仅用于学术交流、知识科普与学习分享，不涉及任何商业用途。文献原文版权归原作者及出版期刊所有，本公众号对原文内容进行严谨解读。未经授权，禁止任何个人或机构擅自复制、转载、篡改本文用于商业行为，如需引用请注明来源。如有版权异议，请联系后台，我们将第一时间处理。 END~ 点击蓝字 关注我们