Gusacitinib

近日（10月28日），AI原生制药公司Formation Bio宣布成立了公司的专项基金Formation Bio Drug Development Accelerator Fund，该资金承诺规模达6亿美元。目标是在未来3至5年内收购或引进10至15个药物项目，并将它们推进至关键临床里程碑。基金的架构还有点特别，Formation Bio会通过一家全资子公司担任普通合伙人，并投入自有资金，与有限合伙人共同出资。有限合伙人包括研究基金会、机构捐赠基金、医院和慈善组织，公司未披露具体身份和各自出资额。每个获资助的药物项目被装入独立的公司实体，但共享Formation Bio已有的开发组织架构。 一个比较反直觉的事实是，虽说是AI制药，但是这公司并不是用AI去做药物发现，而是做AI临床。所谓的组织架构其实是公司的AI临床框架。 从CRO起步的AI制药公司 Formation Bio本身是一家有一定体量的公司。它最初成立于2016年，原名TrialSpark，最初以替药企执行临床试验的服务业务起步。 2021年，公司获得由Open AI的Sam Altman领投的1.5亿美元C轮融资，估值达到约10亿美元，从此，正式进入独角兽行列。2023年，TrialSpark更名为Formation Bio，商业模式也从“替药企执行临床试验”升级为“自身持有并开发药物资产”。 Formation Bio的生意逻辑其实类似于“专收废品”的Roivant Sciences，都是低价接手大药企搁置的资产，在专门的新设实体中推进开发，然后在关键节点对外授权或出售。不过有些不同的是，公司的差异在于AI驱动的临床执行能力，以及从一开始就内建的试验运营体系。 公司的AI临床体系建立在四个字“AI原生”上，这是个体系，并非是在流程中嵌入AI工具，而是从底层数据架构开始，就把AI嵌入药物开发从资产筛选到试验执行的每一个决策节点。它早期以TrialSpark起家时，就已经把临床试验的前端患者招募、电子知情同意，与后端数据管理、监查、生物统计和报告生成打通，转型为Formation Bio后，又进一步把这套能力用于自有资产开发，目标是让一个分子进入临床后，能以更短周期、更低成本跨过概念验证。 具体来说，可以拆分一个基础设施层、三大功能支柱，一个终极目标。 公司的临床AI核心 基础设施层中，ARK（AI-ready Repository of Knowledge）是Formation Bio自建的MCP网关，连接模型、工具与权限系统。它的作用是让AI智能体能够安全、可审计地访问公司内部的80多个系统，同时继承权限控制并保留审计轨迹。用户可以用自然语言查询药物数据、构建分析看板，而不需要编写代码。这意味着分析师和临床团队不必在多个系统之间切换，AI本身成为统一的操作入口。 而在功能支柱层面，首先是Drug Hunting时就借助AI。公司本身买入的就是被大药企搁置的临床阶段资产，因此选错资产或选错适应症，后面的执行速度再快也没有意义。 之前也不是没有Biotech打着“不是药物有问题，而是临床开发方向出了错”的旗号试图为某款已经被大药企放弃的药物逆天改命，但是很多都失败了。 在进入临床之前，Formation Bio会先用AI辅助判断哪些资产值得引进或收购。其系统会扫描疾病图谱、未满足临床需求、竞争格局、监管路径和商业价值，并结合知识图谱把药物机制、疾病特征与潜在适应症匹配起来。公司还会借助AI识别被大药企低估或优先级下调的“暗资产”，例如非核心管线、临床进展停滞但数据尚可的分子。随后由资深研发和临床团队进行尽调，再决定是否通过收购、授权或NewCo子公司模式推进。 其次，是R&D Strategy支柱，确定资产后，Formation Bio的AI平台会进入研发策略层，帮助临床团队系统比较不同开发路径。它会从临床可行性、患者可及性和监管路径出发，评估哪些适应症更适合优先推进。平台也会基于历史试验、真实世界证据和监管先例，模拟不同试验方案的成功率与成本。平台还会辅助选择更可能读出差异的临床终点和生物标志物，预测招募速度、中心启动和数据锁库时间，并判断项目是否适合申请快速通道、突破性疗法或其他加速路径。这一层的目标不是替代科学家，而是减少经验式、拍脑袋式的决策，让团队更快在多条路径中做出取舍。这一层还有一个专用的预测模型Delphi。它的目标是在收购评估阶段就量化一个资产“在临床试验中达到主要终点的概率”，从而把“这个药值不值得买”的判断纳入统一的概率框架之中。 最后是Clinical Trials层面的支柱，进入临床试验执行层后，这套体系会把大量原本依赖人工的环节自动化。在患者招募方面，平台会分析疾病人群、竞争试验和真实世界数据，自动生成招募策略和材料；同时根据不同患者亚群，快速生成符合监管要求的预筛问卷。在中心选择与启动方面，它会结合历史表现、患者密度和试验可行性，筛选更合适的临床中心，并通过电子知情同意和数字化患者触达提高参与效率。 试验运行过程中，Formation Bio还会用风险导向监控替代部分传统现场监查，更快发现异常数据；在数据管理、医学写作和生物统计环节，平台可辅助生成方案、监查报告、不良事件报告和监管文档，并加速数据清理、分析计划执行与数据库锁库。 这一层的核心工具是Muse平台，由Formation Bio与另外两位股东OpenAI、赛诺菲联合开发，被描述为“制药行业首个此类AI应用”。它的具体工作流程是： ①先汇编疾病、患者人口学和竞争格局的深度研究； ②识别最优患者画像和招募策略，重点关注多样化人群； ③最后自动生成面向特定患者亚组的招募材料和预筛问卷，可适配不同渠道、语言和风格。原本需要跨职能团队数周甚至数月完成的工作，Muse可以在几分钟内完成初稿，再由人类专家审核。该工具已计划在赛诺菲的多发性硬化症III期临床试验中应用。 公司的最终目标是Automated Clinical Trial。在这一路线下，三层数据之前获得了相互贯通，Drug Hunting层选定资产和适应症，R&D Strategy层用Delphi和情景模拟验证开发路径、优化方案，Clinical Trials层用Muse和自动化监测执行试验。统一数据层和ARK网关确保每一层的输出可以流入下一层，而不是各自为政。 公司曾公开表示，其平台可将临床试验整体周期最多缩短约50%，这一提速主要来自试验启动、招募、文档、数据管理和运营环节。 公司目前购得和变现的资产 Formation Bio（当时仍名为TrialSpark）管线模式的起点，是2022年11月从Asana BioSciences收购的一个免疫皮肤病学资产组合。这笔交易是一个组合性收购，并随之成立了子公司Libertas Bio来持有和推进这些资产。 最具商业可见度的验证来自gusacitinib。2025年6月，Libertas Bio将这款处于III期阶段的口服双JAK/SYK抑制剂授权给赛诺菲，潜在交易总额约6.26亿美元，另加未来特许权使用费。赛诺菲同时也是Formation Bio的投资者。赛诺菲的计划是在此前未研究过的新适应症中开展一项I期研究，而非直接延续慢性手部湿疹的III期路径，虽说有点左手倒腾右手的嫌疑，但这是公司首次验证商业模式的可行性，也获得了大厂背书。 其余资产中，ASN008是一种处于II期准备阶段的外用钠通道阻滞剂，针对与特应性皮炎相关的瘙痒，以及结节性痒疹。该管线似乎在2024-2025年左右陷入停滞。Sprifermin是一种FGF18药物，处于膝骨关节炎的II期临床阶段。 2025年毫无疑问是公司首次实现变现和再次密集引入的一年，该年7月29日，公司从 IMIDomics引进抗CD226抗体。Formation Bio由此获得IMIDomics的首创抗CD226单克隆抗体的全球权益。该资产已获得IND批准，Formation Bio计划首先在溃疡性结肠炎中推进，后续扩展至其他自身免疫适应症。 12月10日，公司从凌科药业引进LNK01006（BLKR201）。Formation Bio获得这款下一代CNS渗透性、高选择性TYK2抑制剂在大中华区以外的全球权益。该资产由新成立的子公司Bleecker Bio持有。Formation Bio计划于2026 年上半年启动I期临床试验，2026年6 月已在健康志愿者中完成SAD/MAD I期试验的首例给药，数据预计2027年初读出。 2026年1月29日，公司从正大丰海（CTFH）引进FHND5032（KMR301）。Formation Bio获得这款口服小分子miR-124激活剂在大中华区以外的全球权益，用于自身免疫性疾病。该资产被置于新成立的子公司Kenmare Bio之下，计划于2026年进入临床。 目前公司官网中显示活跃的管线就是BLKR201，Sprifermin，KMR301，CD226抗体倒是未见推进。 神秘的是，Formation Bio的管线变现并不止于赛诺菲。CEO Benjamine Liu 在 2026年初接受时代周刊的一次采访中透露，公司之前还有一款不明管线以略低于20亿美元的总价出售给了礼来。 参考来源： https://www.formation.bio/technology

皮肤里的抗菌肽只能靠角质形成细胞？这篇iScience要刷新认知——真皮基质细胞才是DEFB124的主力产地，而且它还能对抗金黄色葡萄球菌。 真正开启不学R语言时代！！！关注本号私信“资料”两字，免费领取＞5篇0代码云平台复现5-15分公共数据库挖掘SCI全文教程！轻松入门生信分析！秒变生信分析大神！ 新鲜出炉！今天给大家深度剖析一篇2026年9月18日发表在《iScience》上的文章，题目为：一种基质来源的β-防御素DEFB124参与皮肤对金黄色葡萄球菌的宿主防御 A stromal β-defensin, DEFB124, contributes to cutaneous host defense against Staphylococcus aureus. 本研究鉴定出人β-防御素124（DEFB124）是一种此前未被表征的抗菌肽，主要由真皮基质细胞（成纤维细胞和脂肪细胞）产生，而非传统认为的角质形成细胞；其小鼠同源物Defb25在金黄色葡萄球菌感染时被诱导，并被2型细胞因子通过IL-4受体信号抑制，重组DEFB124在体外和体内均表现出抗菌活性。 影响因子：4.5 发表期刊：iScience 团队成员合影（位于上海陆家嘴中心，可随时预约参观） 向下滑动查看更多 CNSknowall 平台 Pubmed+AI 快速提炼研究亮点·研究思路·研究结果·研究结论 研究亮点 颠覆细胞来源认知： DEFB124在皮肤中富集于基质细胞，与主要由角质形成细胞来源的多数β-防御素不同。 具备抗临床相关病原体的活性： DEFB124对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和铜绿假单胞菌均表现出抗菌活性。 连接基质免疫与特应性皮炎： 2型细胞因子抑制DEFB124表达，将基质细胞免疫与特应性皮炎联系起来。 体内保护作用得到验证： 小鼠同源物Defb25可保护皮肤免受皮内金黄色葡萄球菌感染。 核心创新点 发现新的抗菌肽来源： 首次报道DEFB124是主要来源于真皮基质细胞（成纤维细胞、脂肪细胞）的抗菌肽，突破了抗菌肽主要来自上皮细胞和粒细胞的传统观点。 定位非经典基因簇成员： DEFB124位于20号染色体q11.1基因簇，不同于位于8p23.1的经典皮肤β-防御素（DEFB1、DEFB4、DEFB103），提示该簇防御素可能具有组织限制性表达和超出经典抗菌功能的作用。 揭示2型炎症的抑制机制： 证明IL-4/IL-13通过IL-4Rα信号抑制成纤维细胞Defb25表达，IL-4Rα敲低可部分恢复其表达，为特应性皮炎中金黄色葡萄球菌定植增多提供了基质层面的解释。 多维度技术整合： 结合临床治疗队列转录组分析、空间转录组学、单细胞RNA测序、qPCR、蛋白水平检测及体内siRNA敲低等多种手段进行验证。 研究背景 抗菌肽是屏障免疫的关键组分，传统上被认为由上皮细胞和粒细胞产生。皮肤中β-防御素主要表达于角质形成细胞和髓系细胞。人类基因组中β-防御素基因成簇分布于多条染色体，8号染色体簇（含DEFB1、DEFB4、DEFB103）是皮肤相关研究的主要焦点，而位于其他染色体簇的防御素在皮肤免疫中的作用，尤其是其细胞来源和抗菌功能，尚不明确。同时，特应性皮炎由2型免疫驱动，IL-4和IL-13升高可抑制抗菌肽产生、损害皮肤屏障，其特征之一是金黄色葡萄球菌过度生长。因此，明确非经典簇防御素在皮肤中的来源与功能，对完善皮肤宿主防御机制的理解十分必要。 研究思路 临床数据筛选： 分析接受 dupilumab、crisaborole、gusacitinib、fezakinumab 或环孢素治疗的AD患者转录组数据集，比较治疗后改善皮损与基线皮损中抗菌肽基因表达差异。 表达定位： 利用公共数据库、小鼠胚胎空间转录组、人和小鼠皮肤单细胞RNA测序，以及对人角质形成细胞、真皮成纤维细胞、前脂肪细胞和分化脂肪细胞的qPCR，确定DEFB124/Defb25的细胞来源；并通过免疫荧光（与PDGFRA、波形蛋白、黑素瘤标志物、脂联素、FABP4共染）和蛋白质印迹在蛋白水平验证。 感染与细胞因子调控： 小鼠皮内注射金黄色葡萄球菌，采用空间转录组、qPCR、ELISA和免疫荧光检测Defb25的诱导情况；皮内注射IL-17A、IL-4/IL-13、IFN-γ、IL-22，并在3T3-L1成纤维细胞中进行IL-4Rα siRNA敲低实验，解析调控机制。 结构与抗菌功能： 从UniProt获取序列，用ChimeraX构建三维模型分析疏水性、电荷等特征；用酵母表达的重组DEFB124进行抗菌试验，测定最小抑菌浓度，并用透射电镜观察细菌膜变化。 体内功能验证： 通过siRNA敲低成纤维细胞Defb25评估条件培养基抗菌能力，并在小鼠体内敲低Defb25或局部给予重组DEFB124，检测细菌负荷和病变严重程度。 研究结果 AD改善皮损中DEFB124上调： 在多种治疗队列中，DEFB124和DCD在改善皮损中一致上调，而DEFB4A和S100A家族基因一致下调。 基质细胞为主要表达来源： 单细胞测序显示成纤维细胞和周细胞是Defb25/DEFB124的主要表达群体，其次为皮脂腺细胞和髓系细胞；qPCR显示人成纤维细胞表达最高，脂肪细胞和前脂肪细胞次之，角质形成细胞几乎不表达；免疫荧光证实其与成纤维细胞标志物PDGFRA、波形蛋白共定位，炎症条件下脂肪细胞强表达，表皮基底层黑素细胞亦有表达。 感染诱导与细胞因子调控： 金黄色葡萄球菌皮内感染后，Defb25 mRNA和蛋白水平升高，空间转录组显示其表达区域在真皮 compartment 扩展，而Defb1、Defb2、Defb14主要局限于表皮；IL-17A显著上调Defb25，IL-4/IL-13下调其表达，IL-4Rα敲低可部分逆转这种抑制。 结构与抗菌活性： DEFB124具有两亲性表面、35%疏水残基比例、GRAVY评分-0.6、净电荷+1.5等β-防御素特征；重组DEFB124对金黄色葡萄球菌A113、USA300及AD临床分离株的最小抑菌浓度均为64 μM，对大肠杆菌为64 μM，对铜绿假单胞菌为32 μM，透射电镜显示其导致细菌膜破坏和类中间体结构形成；乱序对照肽无抗菌活性。 体内保护作用： 敲低成纤维细胞Defb25后，条件培养基抗菌能力下降，细菌生长增加；小鼠体内敲低Defb25可升高金黄色葡萄球菌负荷、加重病变；局部给予重组DEFB124可降低细菌负荷、减轻感染严重程度。 研究结论与讨论 本研究将DEFB124/Defb25确立为一种主要表达于皮肤基质细胞（成纤维细胞、脂肪细胞）的保守β-防御素，扩展了皮肤防御素的已知范畴，揭示基质细胞是皮肤抗菌防御的重要来源，表明皮肤抗菌防御涉及表皮与真皮区域的协同贡献。AD改善皮损中DEFB124上调可能反映组织修复中抗菌肽产生的恢复，或有效治疗后2型细胞因子抑制的解除，这与dupilumab阻断IL-4Rα信号的机制一致。DEFB124对革兰阴性菌的活性相对增强，可能与其氨基酸组成（脯氨酸含量较高、阳离子性较弱）带来的结构适应性有关。此外，DEFB124治疗与感染皮肤中S100A8等免疫相关基因表达升高相关，提示其可能除直接抗菌外还影响局部免疫反应。研究局限性包括：未采用Defb25基因敲除模型；未能完全明确表达Defb25的精确成纤维细胞亚群；DEFB124/Defb25的下游信号机制和潜在免疫调节功能仍待进一步研究。 具体研究结果  1. AD改善病灶中DEFB124表达升高 为鉴定可能参与AD消退的抗菌肽（AMPs），我们分析了已发表的临床研究中的转录组数据集（bulk RNA-seq或微阵列），其中AD患者接受了外用药物克立硼罗24、口服药物gusacitinib（ASN002）25或系统性生物制剂（包括度普利尤单抗26、环孢素26和fezakinumab27）治疗（图1A；表S1）。我们重点关注了关键AMP基因家族——防御素、cathelicidin、S100A蛋白和RNases的表达谱。我们将治疗后改善的病灶与基线（治疗前）皮肤样本进行了比较。 在这些AMPs中，DEFB124和dermcidin（DCD）在所有治疗组中均一致上调，提示其可能是与病灶改善相关的潜在特征（图1B，左）。相比之下，DEFB4A和S100A家族基因在改善病灶中相较于基线均一致下调（图1B，右）。 为评估DEFB124的基线组织分布，我们查询了Genevestigator数据库28，该数据库汇集了来自数千份人类样本的标准化转录组数据。如图S1A所示，DEFB124在多种组织中表达，包括睾丸、肺、鼻腔组织和结肠，并在皮肤（n = 2,383）中具有可检测且一致的表达，相对于其他上皮组织处于中至高水平范围。综上所述，这些发现表明DEFB124转录本在皮肤中持续表达，并可能代表一种与AD消退相关的AMP。 2. DEFB124在人皮肤中主要由基质细胞表达 为将这些发现置于进化背景中，我们接下来检测了小鼠β-防御素25（Defb25），即人DEFB124的推定直系同源物，其依据是哺乳动物β-防御素基因簇内保守的共线性（即跨物种基因顺序的保留）和序列相似性（图S1B）29。序列比对显示约71%的一致性，包括保守的半胱氨酸残基以及成熟肽区域的高度相似性（图S2A）。健康小鼠胚胎的空间转录组学将Defb25定位至包括皮肤在内的多种组织的基质区域（图S2B）。一致地，成年小鼠和人皮肤的单细胞RNA测序（scRNA-seq）鉴定成纤维细胞和周细胞为主要的Defb25/DEFB124表达群体，其次是皮脂腺细胞和髓系细胞（图1C和S2C）。 与人β-防御素的小鼠直系同源物Defb14（人β-防御素3的直系同源物）、Defb1（β-防御素1）和Defb2（β-防御素2）的直接比较揭示了与Defb25不同的表达模式。虽然这些已确立的防御素主要在角质形成细胞中表达，但Defb25主要在成纤维细胞中检测到（图S3A和S3B）。 为进一步确认DEFB124在人皮肤各细胞类型中的相对表达，我们对从人角质形成细胞、真皮成纤维细胞、基质前脂肪细胞和分化脂肪细胞中分离的RNA进行了qPCR。DEFB124表达在成纤维细胞中最高，其次是脂肪细胞和前脂肪细胞，而角质形成细胞表现出极低至缺失的表达。相比之下，DEFB1表达在角质形成细胞中最高（图1D和S4）。 为在蛋白质水平上实验验证这些发现，我们在人成纤维细胞样前脂肪细胞系中进行了western blot分析。检测到约5.2 kDa的清晰条带，与成熟DEFB124肽的预测分子量一致（图S2D）。人真皮的免疫荧光分析进一步证实了DEFB124在成纤维细胞中的表达，表现为其与经典成纤维细胞标志物PDGFRA和vimentin的共定位（图1E和S3C，上）。此外，在表皮基底层中检测到DEFB124阳性细胞。与MELAN-A的共免疫染色鉴定这些细胞为黑素细胞（图S3C，下）。 在人真皮中，使用脂肪细胞标志物adiponectin和FABP4进行免疫染色，揭示在炎症条件下脂肪细胞中DEFB124的强表达（图1F和S3C，中）。 综上所述，这些发现确立了DEFB124/Defb25为一种保守的β-防御素，主要由皮肤中的基质细胞群体表达。 3. 金黄色葡萄球菌感染诱导Defb25，而2型细胞因子通过Il4-Rα抑制其表达 β-防御素在金黄色葡萄球菌感染期间的宿主防御中发挥重要作用，而金黄色葡萄球菌在AD皮肤上表现出增强的存活能力，穿透真皮，并参与疾病发病机制17,22,23,30。为评估Defb25表达是否受金黄色葡萄球菌攻击调控，我们对小鼠背侧皮肤进行了金黄色葡萄球菌皮内注射，并在指定时间点收集组织进行分析（图2A和S5A）。空间转录组分析显示，与溶剂对照相比，金黄色葡萄球菌处理的皮肤中Defb25表达区域扩大（图2E）。与Defb25不同，其他小鼠β-防御素（Defb14、Defb2和Defb1）显示不同的空间表达模式（图2E），与其主要的上皮定位一致。qPCR证实感染后Defb25 mRNA显著上调（图2A和S5A）。感染皮肤的免疫荧光染色和ELISA进一步验证了蛋白表达增加（图2C和2D）。感染后，Defb25蛋白表达水平与Defb14（β-防御素3直系同源物）相当（图S4B）。Defb25诱导在感染后早期（6小时）和后期（72小时）时间点均可检测到（图S5A），表明对细菌攻击的持续应答。 我们接下来研究了细胞因子介导的Defb25调控。体内细胞因子给药证明IL-17A显著增加小鼠皮肤中Defb25表达（图3B），与其在抗微生物防御途径中的作用一致。IFNγ处理显示Defb25呈适度上升趋势（图3D，左下），并且经典IFNγ靶基因Stat1的强烈诱导证实了有效的通路激活。IL-22已被证明可诱导上皮细胞中防御素表达。然而，当我们检测Defb25 mRNA水平时，未观察到小鼠IL-22皮内注射后其表达发生显著变化（图3E）。 相比之下，AD特征的2型细胞因子具有相反效应，体内IL-4/IL-13给药显示小鼠皮肤中Defb25表达水平降低（图3B）。与这一观察一致，用IL-4和IL-13处理3T3-L1成纤维细胞显著抑制Defb25表达（图3F）。 为确定这种抑制是否通过IL-4受体α（IL-4Rα）信号传导介导，我们在细胞因子刺激前将成纤维细胞转染了IL-4Rα siRNA（图3G–3I）。IL-4Rα敲低在IL-4/IL-13存在下部分恢复了Defb25表达（图3H），显著减弱了抑制作用（图3I）。这些数据表明，2型细胞因子介导的Defb25抑制至少部分依赖于IL-4Rα信号传导。 综上所述，这些发现确立了Defb25在皮肤感染期间受到动态调控。Defb25在金黄色葡萄球菌攻击后被强烈诱导，并受IL-17A驱动的炎症信号促进，支持其作为基质抗微生物效应物的作用。相比之下，AD特征的2型细胞因子通过IL-4Rα信号抑制Defb25表达。这些发现提示，细菌感染诱导Defb25作为真皮宿主防御的一部分，而2型炎症抑制这一应答，可能有助于金黄色葡萄球菌在AD皮肤中的增强持续存在。 4. DEFB124显示防御素样结构特征和抗微生物活性 在证明Defb25在金黄色葡萄球菌感染期间被诱导并受炎症细胞因子调控后（图2和3），我们接下来研究了DEFB124是否具有与直接抗微生物效应物一致的结构和功能特性。 为探索其结构特性，我们从UniProt31检索了DEFB124肽序列，并使用ChimeraX32生成3D模型，将其与已知防御素进行比较。建模揭示了双亲性表面，具有明显的疏水和亲水区域，这是β-防御素的特征（图4A）。定量特征支持这种相似性：疏水比例（35%）和总平均亲水性（GRAVY）评分（-0.6），其范围从-2（亲水性）到+2（疏水性），表明整体双亲性特征，与强效AMP DEFB103密切匹配。静电表面分析显示DEFB124携带温和的净正电荷（+1.5），与阳离子AMP特性一致，但低于DEFB103（图S5C）。最后，氨基酸组成分析突出显示了疏性和柔性残基的富集，以及皮肤表达防御素相当的半胱氨酸含量（图S5D）。综上所述，这些特征表明DEFB124具有功能性抗微生物肽的结构和生化标志。 我们接下来使用在酵母（毕赤酵母）中表达的成熟DEFB124肽的重组形式来评估其抗微生物活性。重组DEFB124以剂量依赖性方式对金黄色葡萄球菌A113显示抗微生物活性，最低抑菌浓度（MIC）为64 μM（图4B）。用重组DEFB124处理的金黄色葡萄球菌的透射电子显微镜（TEM）揭示膜破坏和中间体样结构的出现，表明膜靶向活性（图4C）。 抗微生物活性进一步针对金黄色葡萄球菌USA300（图5A；MIC = 64 μM）和AD来源的金黄色葡萄球菌临床分离株（图5B；MIC = 64 μM）得到证实。还观察到对革兰阴性病原体大肠杆菌（E. coli）（图5C；MIC = 64 μM）的活性，在32 μM时细菌生长显著减少，以及对铜绿假单胞菌（P. aeruginosa）（图5D和S6A；MIC = 32 μM）的活性。用含有与DEFB124相同氨基酸组成但序列改变的乱序肽未观察到抗微生物活性（图5A）。与DEFB103的比较分析显示，DEFB124相对于DEFB103对金黄色葡萄球菌AD1表现出中等活性（MIC = 8 μM；图5B），同时对革兰阴性菌大肠杆菌显示出略高的效力（图5C）。此外，与cathelicidin（LL-37）的比较显示对铜绿假单胞菌的效力相似（图5D），尽管DEFB124对金黄色葡萄球菌的活性仍较低（数据未显示）。 综上所述，这些发现证明DEFB124对革兰阳性金黄色葡萄球菌表现出序列特异性抗微生物活性，并对革兰阴性菌表现出相对增强的活性，部分与已确立的AMPs相当。结合其经典β-防御素结构特征，包括双亲性、阳离子表面特性和保守的半胱氨酸结构，这些结果支持DEFB124在针对临床相关皮肤病原体的宿主防御中的功能作用。 5. Defb25在金黄色葡萄球菌皮肤感染期间促进皮肤抗菌防御 在证明重组DEFB124对金黄色葡萄球菌表现出直接抗微生物活性后，我们接下来探究内源性Defb25是否促进成纤维细胞介导的抗菌防御。3T3-L1成纤维细胞被转染针对Defb25的siRNA（两个单独siRNA和一个混合组合）（图6A）。24小时后，qPCR证实Defb25的有效敲低，而cathelicidin抗微生物肽（Camp）——一个来自无关基因家族的AMP——的表达未受影响（图6B）。蛋白质水平的降低通过免疫荧光染色得到验证（图6C）。 为确定Defb25耗竭的功能后果，将siRNA处理的成纤维细胞的条件培养基转移至金黄色葡萄球菌A113培养物中。来自对照成纤维细胞的上清液抑制细菌生长，而Defb25敲低显著削弱了这种抗微生物效应（图6D）。通过菌落形成单位（CFU）计数和光密度测量对细菌负荷的定量进一步证实，与对照相比，暴露于Defb25缺陷上清液的培养物中细菌生长增加（图S6B和S6C），支持成纤维细胞来源的Defb25对抗菌活性的功能性贡献。 为进一步评估内源性Defb25在体内对抗菌防御的贡献，小鼠在感染金黄色葡萄球菌前接受Defb25靶向siRNA皮内处理（图7A）。与阴性对照siRNA处理的动物相比，Defb25敲低提高了感染皮肤中金黄色葡萄球菌负荷并增加了病灶严重程度，表现为病灶大小和CFU定量的变化（图7B–7E）。这些发现支持内源性Defb25对皮肤金黄色葡萄球菌感染的保护作用。 与这些发现一致，局部使用重组DEFB124治疗减少了体内金黄色葡萄球菌负荷并减轻了感染严重程度，进一步支持该β-防御素在皮肤中的抗微生物功能（图S6D–S6G）。综上所述，这些发现证明DEFB124在体内作为有效的抗微生物效应物发挥作用，减少皮肤中金黄色葡萄球菌负荷并减轻感染严重程度。 总结 本研究鉴定出DEFB124是一种此前未被表征的、主要由真皮基质细胞产生的皮肤β-防御素，其小鼠同源物Defb25在金黄色葡萄球菌感染时被诱导、受IL-17A促进并被2型细胞因子经IL-4Rα信号抑制，重组DEFB124具有剂量依赖性抗菌活性并在体内降低细菌负荷、减轻感染严重程度，从而扩展了皮肤防御素家族并揭示基质细胞是皮肤抗菌防御的重要来源。 更多结果和补充图表: PMID：42707141 DOI：10.1016/j.isci.2026.117306 不想做实验，没数据，还想要快速发表文章，没问题的！公共数据库就是我们的数据宝藏！没思路不用担心，作为专业的生信团队，我们很乐意为您效劳，提供研究路线设计和数据挖掘分析，扫码联系我们吧！ 长按二维码关注我们，用最短的时间和最高的效率学习更多数据分析方法! 扫描上方二维码或登录平台官网后添加CNSknowall客服微信咨询！官网地址：https://cnsknowall.comCNSknowall：24年最新问世的遥遥领先的颠覆性科研数据（0代码生信+统计学）分析平台，同时含有机制图模块（原创3000多素材和机制图模板）+AI一键生成高质量比国自然标书初稿+汉化版Pubmed融合Deepseek高效筛选目标文献同时一键提炼全文核心创新点+SCI文献例句/语料检索模块+全文翻译+文献求助+图片查重+期刊查询+OPenAI官方GPT接口，＞500款CNS级别图表皆可一秒内一键出图，登录即秒变数据分析大神，体验前所未有的便捷数据分析之旅，开启科研天骄之路！ 可向下滑动发掘更多科研秘籍!