Lerdelimumab

肿瘤免疫是一个不断发展的研究领域，涉及肿瘤微环境中的免疫细胞。中性粒细胞胞外陷阱(NETs)是中性粒细胞衍生的胞外网状染色质结构，由组蛋白和颗粒蛋白组成。NET最初被发现是宿主对病原体的主要防御，由于它与肿瘤密切相关，越来越受到人们的关注。NET的过度形成与肿瘤生长、转移和耐药性的增加有关。此外，通过对免疫细胞的直接和/或间接影响，NETs的异常增加有利于免疫排斥和抑制T细胞介导的抗肿瘤免疫应答。近期的一项研究，首次报道了NETosis在肿瘤耐药方面的作用及其具体机制。2023.4.10在Cancer Cell IF 50.3/Q1发表了一篇文章，题为“在化疗过程中形成的中性粒细胞细胞外陷阱通过TGF-b激活赋予治疗耐药性 Neutrophil extracellular traps formed during chemotherapy confer treatment resistance via TGFb activation”作者发现了一种“化疗NETosis通路”，其中化疗诱导的NETosis是恶性肿瘤中产生化疗耐药的关键角色。为了探讨化疗如何重塑肺转移的炎症微环境，作者首先将410.4小鼠乳腺癌细胞静脉注射Balb/c小鼠，获得肺转移模型。在接受顺铂或阿霉素/环磷酰胺(A/C)化疗后，他们评估了肺转移模型中的中性粒细胞浸润水平，并观察到化疗后中性粒细胞浸润水平升高。此外，他们发现中性粒细胞耗竭改善了化疗反应。该项研究表明，化疗促进中性粒细胞细胞外陷阱(NET)的形成，降低了治疗乳腺癌肺转移的化疗疗效。NETs在癌细胞中诱导TGF-b依赖的上皮-间充质转化(EMT)， NET/ TGF-b轴的药理学靶向改善了化疗疗效。阐述了化疗诱导的炎症如何通过促进恶性肿瘤中的NETosis而赋予化疗耐药，强调了在癌症治疗中靶向炎性NETs的治疗机会。一背景中性粒细胞细胞外陷阱(NETs)由含有各种蛋白酶和整合素(ITGs)的NET-DNA支架组成，在各种压力下从中性粒细胞中释放出来，这一过程被称为NETosis。最近，已经证明NETs可以通过细胞表面DNA传感器CCDC25直接吸引肿瘤细胞，隔离循环肿瘤细胞或唤醒转移前生态位中的休眠肿瘤细胞，从而促进肿瘤转移虽然恶性肿瘤中NET的形成与放射治疗耐药之间的联系已被报道，但NETosis是否可能由化疗诱导并有助于化疗应答尚不清楚。二主要结果作者提出了一种机制，在化疗反应中，中性粒细胞浸润肿瘤微环境并形成NETs，导致肿瘤化疗耐药。化疗在肺转移灶中上调CXCL1和CXCL5，导致中性粒细胞募集。在细胞毒性药物的作用下，垂死的肿瘤细胞释放出大量的ATP，邻近肿瘤细胞上的嘌呤能受体P2RX7感知到ATP，并激活NLRP3炎症小体和caspase-1将pro-IL-1b裂解为IL-1b。由IL-1b触发，浸润的中性粒细胞在肺转移中发生NETosis。随后，NET成分ITGavb1捕获肿瘤细胞不断产生的潜伏TGF-b，并通过基质金属蛋白酶9 (MMP9)促进其激活。最后，活性TGF-b与肿瘤细胞上的TGF-bR1结合，引起上皮-间充质转化(EMT)和化疗耐药。此外,顺铂治疗后，癌细胞中CXCL5和CXCL5上调，CXCL1/5-CXCR2轴参与了化疗后将中性粒细胞招募到转移性肺中为了研究NET对化疗敏感性的贡献，作者用含有NET的条件培养基(CM)治疗乳腺癌细胞，使肿瘤细胞具有化疗耐药性。通过PAD4抑制剂或DNase I去除NETs显著改善化疗反应，表明NETosis和化疗耐药之间存在直接因果关系。在接受化疗的转移性乳腺癌患者血液样本中，血浆NET水平与转移的化疗耐药相关，提示血浆NET可作为乳腺癌化疗患者预后的生物标志物。为了研究这些观察的机制基础，作者对化疗后的癌细胞CM进行了蛋白质组细胞因子检测，结果证实了IL-1b的上调。虽然IL-1b在触发NETosis中的作用已有报道，但IL-1b在触发NETosis中的关键作用在耐药方面的报道尚属首次。IL-1b阻断后，顺铂治疗小鼠肺转移和肾脏的NETosis均减少，化疗反应和肾功能均有显著改善。有趣的是，IL-1b不是由中性粒细胞分泌的，而是由邻近的肿瘤细胞分泌的。强调了肿瘤微环境中免疫细胞、基质细胞和癌细胞之间的相互作用。邻近的肿瘤细胞通过嘌呤能受体P2X7 (P2RX7)对死亡肿瘤细胞释放的“危险信号”ATP做出反应，从而触发NLRP3炎症小体和caspase-1的级联激活，最终将pro-IL-1b裂解为IL-1b。在随后对NETs CM处理的410.4乳腺癌细胞的RNA测序分析中，发现TGF-b和上皮-间充质转化(EMT)相关信号通路上调。在肺组织中，只有在NETs存在的情况下，才会在癌细胞中观察到EMT特征的增加，而靶向NETs或TGF-b受体1 (TGF-bR1)则会取消这种转变。ELISA检测发现，410.4肿瘤细胞的CM中存在大量laTenTTGF-b，而中性粒细胞或含NETs的CM中则不存在。有趣的是，当混合前一种和后一种CMs时，active TGF-b的数量急剧增加，而抵消NETs则显著地取消了潜在的TGF-b激活。此外，作者揭示了NETs通过降解潜伏相关蛋白(LAP)释放活性TGF-b, LAP是潜伏- TGF-b的小潜伏复合体(SLC)形式的一部分。此外，通过使用针对主要NETs相关蛋白酶的不同抑制剂——中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)、基质金属蛋白酶9 (MMP9)、组织蛋白酶G和髓过氧化物酶(MPO)——作者发现，只有MMP9抑制剂可以消除NET诱导的TGF-b激活、化疗耐药和EMT。总之，这些发现揭示了NET相关的MMP9负责激活肿瘤细胞分泌的潜伏TGF-b，随后导致肿瘤细胞EMT和化疗耐药。为了研究靶向IL-1b/TGF-b轴的临床转化，作者将注意力转向了ITGavb1的功能，因为ITGavb1可以通过延迟相关肽-精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(LAP-RGD)结构域结合潜伏- TGF-b。他们发现ITGavb1对于激活潜伏的TGF-b至关重要，并且抵消ITGavb1可以改善化疗反应。令人惊讶的是，免疫荧光结果显示TGF-b被捕获在NET-DNA支架内，而阻断ITGavb1则阻止了捕获。NETs在化疗相关并发症的作用。急性肾损伤(AKI)是化疗的严重并发症，可导致显著的发病率和死亡率。NETs的形成已被揭示通过诱导小管坏死和损伤组织来加剧AKI，其中NET相关组蛋白被报道以TLR2/4依赖的方式引起小管损伤在顺铂诱导肾毒性的背景下，作者表明，在顺铂治疗后，NET在肾脏中形成，与肿瘤负荷无关，这表明靶向NETs除了有利于化疗疗效外，还有助于缓解化疗肾并发症。作者具有启发性的发现强调了化疗诱导炎症的“阴暗面”，并提出了一些需要进一步研究的重要问题。首先，DAMP(包括ATP)信号诱导的炎症是一把双刃剑;除了引起EMT和肿瘤细胞的化疗耐药外，它还可以通过作用于其他免疫细胞(即DC)来增强免疫应答。因此，需要更全面和深入地认识化疗诱导的炎性微环境中各种DAMPs的双重性。原发肿瘤组织中肿瘤分泌的CXCL1和CXCL5较少，而转移性肺组织中肿瘤分泌的CXCL1和CXCL5较多的原因仍有待阐明。此外，NETs/ITGavb1/MMP9/TGF-b轴的激活是否也在介导其他癌症类型的化疗耐药中发挥作用仍有待研究。更重要的是，这项有趣的工作揭示了除了受损肿瘤细胞释放的DAMPs外，NETs也应被视为肿瘤中的危险信号。更好地了解炎症的后果和肿瘤微环境中的各种危险信号将有助于合理设计抗癌疗法。三总结和思维扩展这篇文章的高光部分在于：化疗促进乳腺癌肺转移中NET的形成；NETs促进乳腺癌肺转移化疗耐药性；NETs激活潜伏的TGF-b，促进癌细胞中的EMT；NETs在化疗相关并发症的发挥作用；靶向NETs改善化疗对肺转移的疗效；发现了吗，研究肿瘤化疗耐药机制的思路又又又更新了，以上五处高光思路，处处有新意，可以通过整合公共数据库细胞系、肿瘤队列等数据，自由创作：1. 筛选化疗耐药gene signature ,预后模型、耐药预测模型构建；2.化疗相关并发症诊断和预测；3.EMT在化疗耐药中发挥的作用、异质性、及其与NETs之间的互作机制；4.改善肿瘤化疗敏感性的靶标鉴定和疗效预测；总之，化疗耐药，一直是临床上高居不下的热点之一，但是耐药机制分析往往需要做大量的基础实验，科研小白无论是精力还是财力，真的是“鸭梨山大”，能够运用纯生信来探索耐药机制的思路，真是寥寥无几，凤毛麟角，错过这一波，恐怕下一波有遥遥无期啦！看见的小伙伴，个性化的耐药机制分析等着你，赶快上车吧！封面图来源：网络倒计时三周丨PHDI 2023 制药产业数智化峰会最新议程&大咖阵容公布诺和诺德中国首届研发日——畅想没有严重慢性疾病的未来【9月6日，药时代直播间，不见不散！】点击这里，与药时代一起快乐学习！

血管内皮生长因子（Vascular endothelial growth factor，VEGF）过表达直接抑制免疫效应细胞和活化免疫抑制细胞，而肿瘤血管结构异常可以防止免疫细胞浸润。因此，肿瘤血管结构和VEGF/VEGFR有助于形成TME的免疫抑制特征。VEGF的四个抑制机制VEGF诱导TME免疫抑制的机制至少包括以下四个不同的方面。1. VEGF可以抑制树突状细胞（DC）成熟和抗原呈递。DC是专业和最强大的抗原呈递细胞（APC），可以激活T细胞并增强免疫反应。早在1998年，科学家就发现VEGF通过与DC表面上的受体整合来抑制DC成熟。且可以抑制单核细胞分化为DC。此外，VEGF可以上调PD-L1在DC上的表达，抑制DC抗原呈递功能并抑制T细胞活化。2. TME中过量的VEGF直接抑制CTL效应功能。VEGF对分化为CD8+和CD4 + T细胞的造血祖细胞具有抑制作用，这有助于肿瘤相关的免疫缺陷。TME中产生的VEGF可以增强PD-1和其他检查点的表达。3. VEGF水平过高可以促进免疫抑制细胞的募集。在肾细胞癌（RCC）患者观察到VEGF表达与肿瘤浸润调节性T细胞（Tregs）的频率呈正相关。4. VEGF促进粘附分子和趋化因子表达，导致肿瘤脉管结构异常，可导致TME缺氧和低pH状况，随后形成选择性免疫细胞屏障，减少不同免疫细胞的浸润。Nat Rev Clin Oncol (2018)VEGF/VEGFR阻断，导致血管正常化，有助于免疫细胞（尤其CTL）浸润。PD-(L)1阻断和VEGF阻断，可以共同抑制免疫检查点的免疫抑制作用，二者可以产生协同作用。ASCO2023：康方AK112 ORR达到55%和75%；单抗联用也有 33-60% 的ORR，取得一定进展。具体见下文。ASCO2023 VEGF+PD-(L)1部分数据1. anti-VEGF/VEGFR和PD-(L)1单抗联用1.1Rapid Abstract Session 8509Pembrolizumab and ramucirumab neoadjuvant therapy for PD-L1-positive stage IB-IIIA lung cancer (EAST ENERGY).Pembrolizumab联合Eli Lilly公司 anti-VEGFR2雷莫芦单抗（Ramucirumab）治疗1B-IIIA期肺癌（NCT04040361）2019 年 7 月至 2022年 4 月期间，共招募了 24 名符合条件的患者，中位年龄为 75 岁（范围为 50-78）;18例患者为男性。12例患者组织学亚型为腺癌，临床分期分别为IB 1例、IIA 4例、IIB9例和 IIIA 10例。PD-L1在9名患者中为50%（37.5%）。对三位病理学家进行盲法独立中心评价MPR（主要病理缓解）为50.0%（90%置信区间，31.9-68.1%）;因此，达到了主要终点。达到MPR的12例患者中有6例表现出病理完全缓解。1例患者在新辅助治疗前出现肺炎，1例患者在新辅助治疗后出现疾病进展。在方案治疗期间，24例患者中有9例（37.5%）发生3级不良事件（AE）。3例患者术后出现3级不良事件并发症，包括术后血肿、肺瘘、术中动脉损伤等。方案治疗相关的免疫相关不良事件分别为3例、2例和2例甲状腺功能障碍、急性肾小管间质性肾炎和肝功能障碍;然而，没有观察到3级或高AE。21例患者实现了R0切除术，1例患者接受了R1切除术。1.2 Poster Session 4526A phase I/II study to evaluate the safety, pharmacodynamics, and efficacy of entinostat in combination with atezolizumab and bevacizumab in patients with renal cell carcinoma.共招募31名患者（NCT03024437，Phase 1 18例，Phase 2 13例）。Phase2分为2个队列：队列A（之前未使用PD-1或PD-L1抑制剂治疗）和队列B（之前至少一次使用PD-1或PD-L1抑制剂治疗转移性疾病）。Phase1已完成以下DLT：dl1高血压，dl2脑病和低钠血症，dl3肺炎和瘙痒。Dl3被确定为推荐的II期剂量。最常见的治疗相关毒性是血小板减少症、低磷血症、蛋白尿、腹泻、疲乏和中性粒细胞减少。共观察到21个3级事件。队列A：ORR分别为60%（CI 32.3-83.7），中位PFS为13.7个月（CI 8.7-21.3）队列B：ORR分别为33%（CI 32.3-83.7），中位PFS为9.8个月（CI 8.7-21.3）2. VEGF/PD-(L）1双抗2.1 Poster Session 9087 （康方生物AK112/ivonescimab）Phase II results of ivonescimab (AK112/ SMT112), a novel PD-1/VEGF bispecific, in combination with chemotherapy for first line treatment of advanced or metastatic nonsmall cell lung cancer (NSCLC) without actionable genomic alterations (AGA) in EGFR/ALK.评估ivonescimab联合化疗一线治疗鳞状（SCC）或非鳞状 NSCLC患者的有效性和安全性（NCT04736823）。结果：135例晚期或转移性NSCLC患者接受ivonescimab联合化疗，其中63例为SCC，72例为非SCC。鳞状细胞癌患者ORR为75%，中位DOR为15.4月，95%DCR，9-mo PFS和OS率分别为67%和93%。非鳞状细胞癌患者ORR为55%，没有达到DOR，100%DCR，9-mo PFS率和OS率分别为61%和81%。最常见的治疗相关不良事件（TRAEs）≥ 10%是鼻衄，蛋白尿，皮疹，淀粉酶升高，贫血，ALT增加，输注相关反应，AST增加，瘙痒，食欲下降和WBC下降。3 级 TRAE 发生在 28.1% 的 TRAE 中，6.7%导致停药。2.2 Poster Session 2535 （宜明昂科IMM2510 PD-L1和VEGF双特异性融合蛋白）Preliminary results of a phase I dose escalation study of IMM2510, a PD-L1 and VEGF bispecific fusion protein, in patients with advanced tumors.结果：截至 2022 年 12 月 15 日，22 名病人接受了 8 个剂量水平 （0.007 mg/kg-10.0 mg/kg） 的 IMM2510，中位年龄为 55.5 岁，没有观察到DLT。最常见的TRAE（20%）是输液相关反应（IRR）（63.6%），腹泻（22.7%），贫血（22.7%）。17 个可评估的病人，在对先前治疗具有 IO 耐药性的持续肺鳞状细胞癌患者中，以 3.0 mg/kg 治疗 24 周后观察到 1 例确诊的 PR。此外，4例SD（1例卵巢浆液性癌为0.1mg/kg，1例宫颈鳞状细胞癌为3.0mg/kg，1例恶性胸膜间皮瘤为6.0mg/kg，1例乳腺浸润性导管癌为10.0mg/kg）。在截止日期之后，另一名10.0mg / kg的NSCLC患者在治疗9周后获得了PR，并正在进行研究。2.3 Poster Session 2536 (普米斯生物, PM8002 PD-L1 /VEGF-A双抗）Phase Ib/IIa safety and efficacy of PM8002, a bispecific antibody targeting PD-L1 andVEGF-A, as a monotherapy in patients with advanced solid tumors.结果：截至2023年2月3日，已入组263例既往接受过0-4线系统治疗的晚期实体瘤患者（1mg/kg Q2W [n=1]、10mg/kg Q2W [n =1]、20mg/kg Q2W [n=190]、20mg/kg Q3W [n=4]、30mg/kg Q2W [n=4]、30mg/kg Q3W [n=52]和45mg/kg Q3W [n=11]）。在263名入组患者中，211名已完成首次疗效评估。总体ORR为15.2%（32/211），其中32例PR（20例确诊PR），根据RECIST 1.1，DCR为75.4%（159/211）。25例宫颈癌患者的ORR为28%（7/25）26例肾细胞癌患者的ORR为26.9%（7/26）26例铂类耐药卵巢癌患者的ORR为15.4%（4/26）27例NSCLC（EGFR突变）患者的ORR为18.5%（5/27）任何级别的 TRAE 发生在68.8% 的患者 （181/263），其中 18.3% ≥3 级 （48/263）。最常见的TRAES是蛋白尿（17.5%），高甘油三酯血症（11.4%），天冬氨酸氨基转移酶（9.9%），丙氨酸氨基转移酶升高（9.5%），低白蛋白血症（8.7%）和γ-谷氨酰转移酶水平升高（6.8%）。临床试验信息：ChiCTR2000040552。2.4 Poster Session 2589（华奥泰生物，HB0025，PD-1 / VEGF双抗）Safety and efficacy of HB0025, an anti-PD-1/VEGF bispecific antibody fusion protein, in patients with advanced solid tumors: Preliminary results from an FIH trial.截至 2022 年 8 月 30 日，来自高加索和蒙古人的 30 名 病人（包括 8 名男性和 22 名女性）接受了 HB0025，剂量为 0.01 mg/kg （n = 1）、0.03 mg/kg （n=2）、0.1 mg/kg（n=1）、0.3 mg/kg（n=1）、1.0 mg/kg （n=3）、3.0 mg/kg （n=7）， 6.0mg/kg （n = 7）， 10.0mg/kg（n = 5）和12.0mg/kg（n = 3）Q2W。总体而言，中位年龄为55岁，先前治疗的中位线为4岁。在剂量为3mg/kg Q2W的22个可评估的pts中，ORR为9.1%（2/22），DcR 50%(11/22)。在 2 名应答者中，1例结直肠癌 CR超过 36 周，既往治疗未使用免疫检查点抑制剂 （ICI） 或贝伐珠单抗，1例非小细胞肺癌超过 18 周的 PR （NSCLC） 病人，其肿瘤消退率为 60.2%，既往 ICI 失败。直到提交之日，CR和PR 病人的治疗仍在继续。治疗相关不良事件（TRAEs）发生在83.3%的PTS中。3级TRAE的发生率为20%[6/30]，治疗相关SAE的发生率为13.3%[4/30]。参考资料Fukumura D, Kloepper J, Amoozgar Z, Duda DG, Jain RK. Enhancing cancer immunotherapy using antiangiogenics: Opportunities and challenges. Nat Rev Clin Oncol (2018) 15(5):325–40. doi: 10.1038/nrclinonc.2018.29Li L, Wen Q and Ding R (2022) Therapeutic targeting of VEGF and/or TGF-b to enhance anti-PD-(L)1 therapy: The evidence from clinical trials. Front. Oncol. 12:905520. doi: 10.3389/fonc.2022.905520ASCO 2023摘要