INF-λ1

细胞可塑性这一概念于1958年由Briggs和King提出，他们证明了终末分化体细胞可被重编程为其他谱谱系。在这领域最先成功、获得最大成就的是山中伸弥（Shinya Yamanaka）。2006年，他用KLF4、Oct3/4、SOX2、c-Myc将小鼠成纤维细胞重编程为多能干细胞（iPSC），这一突破性研究也荣获2012诺贝尔生理学/医学奖，这4种转录因子（TF）随后也被命名为“山中因子”。肿瘤细胞重编程肿瘤细胞同样具有可逆可塑性，从本质上来说耐药性就是因此发生。而再次重编程肿瘤细胞是解决耐药的重要方向。不过人们不满足这一点，也尝试多种将肿瘤细胞进行良性转化，包括TF、小分子、microRNA（miRNA）、外泌体。癌细胞系重编程细胞黑色素瘤KLF4, Oct-3/4, c-Myc多能癌细胞（CSC）胰腺癌C/EBPαCSC肝细胞癌SOX2, c-MycCSSB细胞淋巴瘤白血病C/EBPα巨噬细胞样细胞乳腺癌TGFβ, Trametinib脂肪细胞胚胎干细胞外泌体多能胚胎干细胞皮肤癌miRNA-302s多能胚胎干细胞结直肠癌胚胎干细胞外泌体多能胚胎样干细胞转录因子比较靠谱想要将肿瘤细胞重编程为良性、或免疫功能性细胞，这涉及改变肿瘤细胞谱系，而从机制上来看使用TF比较靠谱。今年5月4日《Cancer Discover》发表的一篇文章中，来自美国斯坦福大学的Ravindra Majeti教授团队通过慢病毒将转录因子C/EBPα和PU.1转导到小鼠白血病细胞系中，生成了肿瘤重编程APC（TR-APC）。这类细胞失去了B细胞表型，获得了髓系表型，并能够提呈肿瘤相关抗原，激活CD4+/CD8+T细胞。随后在人类标本中，也将急性淋巴细胞白血病细胞（CD34+CD19+B-ALL）转化TR-APC，髓系基因（SPI、ITGAX、CEBPA9）和抗原提呈相关基因表达上调，B-ALL基因CD34表达下调。共培养后可促进自体T细胞活化。Cancer Discov. 2023 May 4;13(5):1164-1185. 7月7日，来自瑞典德隆大学的Carlos-Filipe Pereira教授研究团队发表在《Science Immunology》研究文章中进行了多种实体瘤细胞系重编程。他们将转录因子BATF3（PIB）转导到多种人体实体瘤细胞系后，使多种细胞中产生了CD45+HLA-DR+细胞群，并表达cDC1细胞标志物，以及表现出DC样形态。Sci. Immunol.8,eadd4817(2023).重编程产生cDC1样细胞免疫原性增加、共刺激分子表达升高，并能够吞噬并递呈肿瘤相关抗原（TAA）来激活CD8+T细胞；这类细胞还能产生IL-12p70、IL-29、CXCL10、TNFα多种促炎细胞因子，具有免疫功能性。在植回小鼠体内后，重编程cDC1触发了抗肿瘤免疫反应，改善了ICI疗效。Sci. Immunol.8,eadd4817(2023).随后他们还成功对患者的原始肿瘤细胞进行了重编程，同样使之获得了APC表型和功能。通过RNA-seq，他们发现重编程APC细胞增殖能力降低、有丝分裂停滞，细胞周期相关基因表达下调，似乎产生了”一次性“APC细胞，使不可控的增殖风险大大降低。这类APC细胞免疫原性增强的同时促癌性减弱，并且不需要PIB持续性表达，并且在注射到小鼠中，5个月内小鼠全部存活（而对照组全部形成肿瘤死亡），都证明了具有很高的安全性。Sci. Immunol.8,eadd4817(2023).但也需要慎重利用转录因子将肿瘤细胞重编程为良性细胞的想法非常美好，也在小鼠中观察到了积极的结果，但真正转化到临床上还面临着很多的困难。首先肿瘤细胞重编程转化率难控，最低甚至未达到0.2%，由此带来的致瘤安全隐患就是最主要的问题。而且递送过程中还需要考虑如何要提高稳定性、降低脱靶效应，这些方面也有诸多限制。癌症发生、发展过程包括众多突变、表观遗传改变，是一个非常复杂的调控网络，而TF只是网络中的一个节点，即使是TF组合也很难达到较好的预期水平。小结总的来说，重编程肿瘤细胞想法的很美好，临床前试验也看到了希望。但重编程是一个复杂、渐进、难控的过程，想要通过TF进行重编程需要综合更多机制来确保稳定性。参考资料Olga Zimmermannova et al.Restoring tumor immunogenicity with dendritic cell reprogramming.Sci. Immunol.8,eadd4817(2023).Linde MH et al. Reprogramming Cancer into Antigen-Presenting Cells as a Novel Immunotherapy. Cancer Discov. 2023 May 4;13(5):1164-1185.Gong, L., Yan, Q., Zhang, Y. et al. Cancer cell reprogramming: a promising therapy converting malignancy to benignity. Cancer Commun 39, 48 (2019).Loh YH et al. The Oct4 and Nanog transcription network regulates pluripotency in mouse embryonic stem cells. Nat Genet. 2006;38(4):431–40.Takahashi K, Yamanaka S. Induction of pluripotent stem cells from mouse embryonic and adult fibroblast cultures by defined factors. Cell. 2006;126(4):663–76.

关注并星标CPHI制药在线       干扰素（interferon IFN）是一类重要的细胞因子，能直接参与上皮细胞的抗病毒免疫反应，介导天然免疫应答诱导 IFN 刺激基因（interferon stimulated gene，ISG）的表达，从而使机体快速建立针对病毒侵染的天然免疫防线。根据干扰素结构特点，结合受体和生物活性，人干扰素可分为3类，即Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ型干扰素，其基因分别位于人9p21-22、12q24.1和19q13.13 染色体。在人类三种类型的干扰素中，Ⅰ型干扰素主要包括 IFN-α，IFN-β等20种亚型，Ⅱ型干扰素只有 IFN-γ，Ⅲ型干扰素包括 IL-29 ( IFN-λ1) 等 4 种亚型。大多数被病毒感染的细胞都可以产生Ⅰ型干扰素，分泌的 IFN-α/β 可与邻近未被感染的细胞上的共同受体结合并启动旁分泌信号级联反应。Ⅰ型和Ⅲ型干扰素被认为是经典的抗病毒干扰素，α 型干扰素是临床治疗抗病毒的主要亚型，主要分为α-1b、α-2b、α-2a 等亚型。近期研究表明，Ⅲ型干扰素与黏膜免疫有重要的关系，而IFN-γ 也具有良好的病毒抑制特性。       干扰素抗病毒作用机制       干扰素激活分子在病毒复制周期的许多阶段表现出抗病毒活性，包括病毒进入、转录、RNA 稳定性、翻译、成熟和释放等阶段。这种作用是在抗病毒基因表达的调节下进行的。       ①病毒的附着和进入。HPSE 是一种编码乙酰肝素酶的干扰素诱导基因（ISG），HPSE 的异位表达可广泛抑制甲病毒、黄病毒、副粘病毒和诺如病毒。病毒进入是多个ISG 靶向的阶段，IFITM 蛋白质是经典的 ISG，可破坏多种包膜病毒的进入，IFITM 蛋白将病毒颗粒运输到降解溶酶体中，可有效地阻止病毒的进入。CH25H 是一种干扰素诱导酶，可将胆固醇转化为25-羟基胆固醇(25-HC)，25-HC 膜扰动功能抑制病毒进入。最近发现的靶向病毒进入的 ISG人类核受体辅激活因子 7 ( NCOA7) 可以结合液泡H + -ATP 酶，促进囊泡酸化和内吞物的降解，从而抑制通过内吞作用进入细胞的多种病毒的感染。此外，在病毒基因表达开始之前的进入后病毒过程也可以被 ISG 干扰，以及某些ISG 还能特异性地阻断病毒通过核孔复合体。       ②病毒基因组的扩增。IFI16是一种 IFN 诱导的 DNA 传感器，被证明可以干扰人类巨细胞病毒基因的转录。RBBP6 是一种泛素E3 连接酶，RBBP6可直接与埃博拉病毒 VP30 蛋白相互作用，从而阻止VP30与病毒NP 蛋白的相互作用并干扰病毒转录。干扰素能强烈诱导2-5A 寡合成酶/核糖核酸酶L系统，核糖核酸酶L被双链 RNA 激活可降解所有单链 RNA，从而抑制病毒复制。       ③病毒蛋白质的翻译。在病毒复制周期中，干扰素通过多种机制靶向病毒蛋白翻译。干扰素通过PKR 基因启动子中的 ISRE 和 GAS 刺激蛋白激酶 R( protein kinase R，PKR) 的表达，进而将翻译起始因子 eIF2-α 的51位Ser 磷酸化。eIF2-α-GTP 是启动病毒翻译所必需的。eIF-2B从每轮翻译起始后回收 eIF2-α-GDP，进行鸟嘌呤核苷酸交换，产生eIF2-α-GTP。然而，eIF-2B优先与 eIF2-α 的磷酸化形式结合。因此，eIF-2B 的细胞储备被隔离在非活性复合物 eIF2α-GDP-eIF-2B中，从而快速抑制病毒蛋白的翻译。此外，PKR 还通过调节 STAT1 的丝氨酸磷酸化和 IκB 的磷酸化，从而激活NF-κB 依赖性基因，在细胞增殖、肿瘤抑制和信号转导中发挥作用。IFIT 家族(包括人类的 IFIT1、IFIT2、IFIT3和IFIT5) 利用多种机制靶向病毒蛋白的产生，如结合 eiF3C 或 eiF3E 以抑制翻译起始。       ④病毒颗粒的组装和释放。病毒复制周期的后期包括病毒粒子组装、运输和从细胞中释放。与病毒复制周期的早期阶段相比，针对这些步骤的 ISG较少。Tetherin 是一种跨膜蛋白，可以将萌芽病毒粒子锚定到细胞表面并阻止它们释放。CNP( 2-环核苷酸-3-磷酸二酯酶) 结合Gag 并抑制 HIV-1颗粒组装。鸟苷酸结合蛋白 5( GBP5) 阻碍病毒包膜糖蛋白组装病毒粒子。另外，Ⅰ型干扰素作为抗病毒细胞因子发挥作用。IFN-α 激活 NK 细胞，进而破坏病毒和其他靶细胞，增加 B 细胞的增殖，B 细胞分泌抗病原体的抗体，通过上调表面细胞MHCⅠ类分子的表达，增强CD8+T 细胞的反应。Ⅰ型干扰素还上调 IL-12Rb，增加 MHC Ⅱ类分子的表达。IFNα-1b 可以增加单核细胞 MHCⅡ抗原的表达。炎症性干扰素信号促进和调节巨噬细胞和树突状细胞的发育、成熟和刺激能力。这些效应促进抗病毒抗体的产生，限制病毒复制以限制系统性病毒持续性。       干扰素在疾病治疗中的应用       自从干扰素产品在我国上市以来，获批的治疗适应症已扩大到几十种疾病，主要包括治疗病毒性疾病和肿瘤。干扰素在治疗皮肤科疾病方面也已得到广泛应用，包括带状疱疹、生殖器疱疹，尖锐湿疣、寻常疣、扁平疣和皮肤肿瘤等。此外，干扰素在抗炎症反应以及维持机体生理动态平衡方面也发挥着重要作用。       ①皮肤科疾病。2021年《中国尖锐湿疣临床诊疗指南》强烈推荐皮损内注射干扰素，证据等级为A ，2020 年欧洲皮肤病与性病学会发布了《生殖器传染性软疣管理指南》，将干扰素作为免疫抑制剂，2019 年《带状疱疹临床路径》中推荐干扰素作为免疫增强剂，2018 年德国颁布的《HPV 感染及其相关病变的诊疗指南》中将 IFN-α(局部用或病灶内用药)作为首选治疗方案之一。2014 年发布的《英国肛门-生殖器疱疹指南》提及有证据显示三氟胸苷单独或联合 IFN-α 可以治疗耐受性生殖器疱疹。并且，根据现有临床试验来看，IFN-α 也在实际临床应用中显示出了很好的效果。       ②抗病毒药物和免疫调节。作为广谱抗病毒药物和免疫调节剂，干扰素在临床上早已广泛用于治疗各种儿童病毒性疾病，《重组人干扰素α1b 在儿科应用的专家共识》，《手足口病诊疗指南》和《α干扰素在儿科临床合理应用专家共识》等众多指南共识明确阐明干扰素可用于小儿病毒性肺炎、手足口病、疱疹性咽峡炎和毛细支气管炎等。       ③肝病治疗。α-干扰素是治疗慢性活动性乙型肝炎的首选药物，2019 年《中国慢性乙型肝炎防治指南》推荐 PEG-IFN-α 和 IFN-α用于治疗慢性乙型肝炎。干扰素也是治疗丙型肝炎的有效药物之一，可抑制急性丙型肝炎转化为慢性丙型肝炎。       ④治疗SARS-CoV-2。干扰素吸入给药能够以更小的剂量实现高气道暴露，快速达到肺部起效浓度，减少全身副作用。我国国家卫生健康委员会发布的多版《新型冠状病毒肺炎诊疗方案》中均提出可用 IFN-α 雾化吸入进行抗病毒治疗，在新冠肺炎诊疗方案试行第八版中阐明抗病毒治疗可单独用 IFN-α，成人每次500万U或相当剂量，加入灭菌注射用水 2mL，2次/d，雾化吸入，疗程不超过 10 d。此外，IFN-α 还可与利巴韦林联合应用。       此外，干扰素能够通过抗细胞增殖，免疫调节和抑制肿瘤血管形成等方式对肿瘤生长起到抑制作用，临床主要用来治疗白血病、淋巴瘤、Kaposi肉瘤，黑色素瘤、肾癌、多发性骨髓瘤等。干扰素也可用于治疗多发性硬化症等自身免疫性疾病。       干扰素是我国第一个投放市场的基因工程药物，自1986年美国FDA及1989 年我国SFDA 批准投放市场以来，干扰素的治疗适应症逐年扩大，目前国际上批准的治疗适应证已有数十种，取得了重要的社会效益和良好的经济效益。作为机体免疫调节和抗病毒物质，干扰素一直受到人们的关注，干扰素的基础和临床研究已取得了较大进展。根据国家药品监督管理局网站公示，我国目前批准干扰素相关产品有92个，型别包括 α-1b、α-2a、α-2b和 γ，以及长效干扰素 PEG-IFN-α2b。剂型包括注射液、滴眼液、阴道泡腾片、乳膏、软膏、凝胶、喷雾剂和栓剂。PEG-IFN-α2a、PEG-IFN-α2b、IFNα-1b、IFNα-2a 和 IFNα-2b 等已进入了 2020 版国家医保目录，这一举措显著降低了老百姓的看病成本， 切实保障了人民健康。       参考资料       [1]郑丽舒,段招军,罗迪贤,陈宏翔,邓启文,侯云德.干扰素的发展历史、现状与展望[J].皮肤科学通报,2021,38(06):479-484+1.       [2]庞立丽,段招军,罗迪贤,陈宏翔,邓启文,侯云德.干扰素作用机制的研究进展[J].皮肤科学通报,2021,38(06):485-491+2.       [3]金丽,苏强,周建华,马忠仁.Ⅰ型和Ⅲ型干扰素抗病毒作用机制的研究进展[J].中国生物制品学杂志,2021,34(04):481-486.      智药研习社近期课程报名来源：CPHI制药在线声明：本文仅代表作者观点，并不代表制药在线立场。本网站内容仅出于传递更多信息之目的。如需转载，请务必注明文章来源和作者。投稿邮箱：Kelly.Xiao@imsinoexpo.com▼更多制药资讯，请关注CPHI制药在线▼点击阅读原文，进入智药研习社~

关注并星标CPHI制药在线近日，全国各地托幼机构、中小学陆续开学，由诺如病毒感染导致的病毒性胃肠炎进入高发期，而话题"广东诺如病毒进入高发期"一度冲上微博热搜榜首，引发网友热议。       诺如病毒 (norovirus，NoV) 亦称诺瓦克病毒，是引起全球散发性胃肠炎和暴发性急性胃肠炎的主要病原体之一。NoV 发生感染时，可以在小肠上皮细胞内复制，上皮细胞分泌功能受损，小肠消化吸收面积减小，引起消化不良和腹泻。经漏泵机制作用，水和离子由上皮下毛细血管扩散至肠腔内，引起腹泻的发生。此外，NoV 感染机体后，B细胞介导体液免疫反应，同时发生由Th1细胞介导的细胞免疫反应。由于人体对不同基因型的NoV 没有完善的交叉保护作用，所以 NoV 感染后，机体无法形成永 久性免疫，再加上 NoV 的变异或重组发生，会使得 NoV 反复感染机体。      迄今为止，还没有批准用于治疗用途的抗NoV药物或疫苗，唯一完成临床试验的候选药物是硝唑尼特 (nitazoxanide，NTZ)。NTZ能够抑制多种RNA和DNA病毒，包括呼吸道合胞病毒 (RSV)、冠状病毒、轮状病毒 (RV)、乙型肝炎病毒 (HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)、登革热病毒 (DENV) 和人类免疫缺陷病毒(HIV) 等，目前FDA批准用于治疗贾第虫 (Giardia)和隐孢子虫 (Crytosporidium)的感染。NTZ已被证实在治疗NoV胃肠炎中有一定疗效，它能够抑制Norwalk复制子。       抗NoV相关靶点药物目前，抗NoV药物的设计主要集中在阻断病毒复制的各个环节，如作用于受体细胞膜上的病毒吸附和侵入抑制剂、基于蛋白酶结合口袋设计的蛋白酶抑制剂以及阻断RNA合成的聚合酶抑制剂。此外，由于免疫调节因子具有提高宿主免疫力以抵御病毒感染的能力，因此也是一类潜在的抗病毒药物。  01吸附和侵入抑制剂NoV无包膜，其附着在细胞表面并与宿主表面的受体识别、结合是进入宿主细胞的第一步，也是病毒发挥感染的限速步骤。根据NoV通过组织血型抗原（HBGAs）受体吸附侵袭和感染宿主这一原理，可以设计阻断病毒和HBGAs相互作用的抗NoV药物。基于酶联免疫吸附测定法，发现人乳寡糖中的2'-岩藻糖基乳糖和3'-岩藻糖基乳糖在浓度 5.5～30.2 mmol·L-1下能够抑制 GII.10 NoV VLPs 与 HBGAs 的结合。随后，2'-岩藻糖基乳糖被证实还可以抑制GII.17和GI.1 VLPs与HBGAs的结合， IC50值分别是13～20和38～50 mmol·L-1。以类似的方式，柠檬酸也被证明可以与NoV GII.10 VLPs结合导致其形态结构的改变，从而阻止VLP-HBGA结合。       单克隆抗体或纳米抗体的被动免疫疗法是另一种预防NoV附着和侵入的抗病毒策略。在黑猩猩模型中，单克隆抗体D8能够阻止Norwalk感染。但到目前为止，产生的单克隆抗体的交叉基因型活性有限，这使得它们对抗原多样的NoV的抗病毒效果不佳。而纳米抗体能够通过与衣壳P结构域相互作用而对VLPs产生广泛的中和活性，且它对特定抗原具有高度亲和力，其中很好的NoV纳米抗体是Nb-85，它可阻止GII.1、GII.2、GII.4、GII.12、GII.17和G1.11 VLPs与HBGAs的结合。       02聚合酶抑制剂RNA依赖性RNA聚合酶 (RdRp) 对病毒的复制至关重要，是极具吸引力的抗病毒靶点。靶向RdRp的抗病毒药物一般分为核苷类似物与非核苷类抑制剂。核苷类似物 (NAs) 作为天然底物的类似物，通过发挥竞争性抑制作用和链终止作用来抑制RNA合成从而发挥抗病毒作用。由于NAs结合在高度保守的RdRp 活性位点，所以与非核苷抑制剂相比，它们通常表现出广谱抗病毒活性。利巴韦林(Ribavirin)是首批在体外和细胞水平上被鉴定为具有 NoV 抑制活性的小分子抑制剂之一。研究报道，利巴韦林在HG23细胞中可有效抑制NoV RNA的复制及蛋白的表达，EC50为40μmol/L，并且I型干扰素和利巴韦林联合运用表现出对NoV复制的累加抑制效应。此外，利巴韦林已被证实可有效降低由常见变异型免疫缺陷诱发的NoV感染。法匹拉韦(favipiravir，T-705)最初是针对流感病毒而开发，后来被证明可作为其他 RNA 病毒的小分子抑制剂。体外实验证明，T-705对人诺如病毒具有比利巴韦林更有效的抗病毒活性，且抗病毒作用温和。2'-C-甲基胞苷（2CM-C）以及前药伐洛他滨( NM283)，最初是针对丙型肝炎病毒（HCV）聚合酶而开发的，之后发现2CM-C可以抑制鼠诺如病毒的复制。此外，近些年也报导了一些新型的NoV聚合酶抑制剂，如CMX521、CID-57930781、CID-44396095和CHEMBL167790等。       非核苷抑制剂 (non-nucleoside inhibitors，NNIs) 通常表现出窄谱抗病毒活性，其与病毒聚合酶上的变构位点结合，以防止转录所需的构象变化。苏拉明 (suramin) 作为抗寄生虫药物，是一个对称的聚阴离子萘基脲，它能够有效地对抗HIV和HBV。研究表明，苏拉明能够在体外有效地抑制人和小鼠的NoV 聚合酶，IC50 值分别为24.6和70.0 nmol·L-1。同样，作为苏拉明衍生物，NF023也可抑制人和小鼠的NoV RdRp，IC50分别为71.5和200 nmol·L-1。苏拉明的另两个衍生物，NAF2和PPNDS也被证明能够抑制人诺如病毒 RdRp，IC50值分别为14和0.45 μmol·L-1，PPNDS还可抑制鼠诺如病毒 RdRp，IC50为0.88 μmol·L-1。尽管苏拉明及其衍生物的抑酶活性较好，但这些化合物细胞通透性差，因此它们细胞水平的抗病毒效力大大降低，EC50仅为0.3 μmol·L-1。为进一步提高这些化合物的抗NoV活性，已有科学家开始尝试通过脂质体输送苏拉明来改善其细胞通透性。除苏拉明及其衍生物外，最近几年一些其他非核苷抑制剂也被发现具有抗NoV的功效，如化合物JTK-109、TMC-647055、Beclabuvir和AC-1858，能有效抑制不同种属 NoV。       03蛋白酶抑制剂NoV 蛋白酶在非结构性多元蛋白前体加工过程起着重要的作用，对底物的特异性识别与切割是病毒复制过程中必不可少的过程，因此合成与 NoV 蛋白酶竞争性结合的拟肽抑制剂是设计 NoV 蛋白酶抑制剂的基本策略。芦平曲韦 (rupintrivir) 是第一代NoV蛋白酶抑制剂，最初是作为抗人鼻病毒抑制剂开发的。芦平曲韦对其他小核糖核酸病毒、冠状病毒和杯状病毒具有广谱抗病毒活性。其余的 NoV 蛋白酶抑制剂可分为过渡态模拟物和过渡态抑制剂。其中，过渡态模拟物包括α-羟基膦酸盐，它在低微摩尔浓度下能够有效地抑制 Norwalk 复制子。第一类过渡态抑制剂是一系列肽基醛，其结构含有谷氨酰胺替代物，此后，更多的衍生物被开发出来，如二肽基醛类、三肽基醛类、α-酮基酰胺肽类、α-酮杂环类、亚硫酸氢盐加合物类以及双亚硫酸盐加合物的酯或氨基甲酸酯前药。与最初的肽基醛抑制剂相比，这些衍生物都显示出同等或更高水平的抗病毒活性。       为了改善药物膜渗透性差、口服生物利用度低及抑制活性较差等问题，研究者们对大环抑制剂进行了一系列研究。大环抑制剂是基于醛类抑制剂结构改造而来，主要包括三唑类、恶二唑类和恶唑烷酮类，大环抑制剂在体内和体外同样表现出较好的 NoV抑制作用。       04作用于宿主因子的化合物随着直接抗病毒药物临床应用的增加，耐药问题日益突出，尤其是具有低耐药屏障的非核苷抑制剂和蛋白酶抑制剂。与直接抗病毒药相比，靶向宿主的抗病毒药物通常具有更高的耐药屏障，并且该类药物可以靶向与病毒直接相互作用或辅助病毒复制的关键蛋白，具有较好的抗病毒效力，成为治疗NoV感染的重要类型。       去泛素酶(deubiquitinase，DUB)是一类参与调节泛素-蛋白酶体系统的酶，对病毒复制十分重要。小分子抑制剂WP1130 是一种选择性 DUB 抑制剂，它在病毒复制水平上表现出对鼠诺如病毒和人诺如病毒的显著抗病毒活性，缺点是溶解度不高。之后，研究人员筛选了31个WP1130衍生物希望在体外保留WP1130的抗病毒活性，同时增强水溶性，改善药物特性。其中化合物7具有与WP1130 相似的广谱抗病毒能力，在稳定表达NoV复制子的 HG23细胞中EC50为3. 37 μmol/L，且相比WP1130，细胞毒 性更低，水溶性增强。此       热休克蛋白( heat-shock protein，HSP) Hsp90和Hsp70是在病毒复制中具有重要作用的热休克蛋白家族成员。研究表明，鼠诺如病毒-1和人诺如病毒衣壳蛋白的稳定性与Hsp90 活性密切相关。研究发现热应激对小鼠巨噬细胞RAW264. 7 细胞系中鼠诺如病毒的复制有促进作用，使用Hsp90抑制剂KNK437和Hsp70抑制剂17-AGG 抑制了鼠诺如病毒基因组复制和病毒颗粒的产生。此外还发现KNK437和17-AGG 可以降低鼠诺如病毒感染细胞中 IL-1β、IL-10和TNF-α mRNA的表达水平，提示Hsp90 和Hsp70 抑制剂可以作为潜在的宿主导向的NoV 抑制剂，发挥抗NoV功能。       免疫调节剂干扰素( interferon, IFN)在抵御病毒感染中起着重要作用。研究表明，I型和II 型 IFNs 及其受体能够预防小鼠和人感染 NoV。最近的研究发现III型 IFNs (IFN-λ)也有抗 NoV 感染的作用，IFN-λ可以诱导细胞表达许多由I型和II型IFNs诱导表达的相同基因。然而，与I型和II型IFNs不同的是，单剂量的IFN-λ (1 μg) 可预防和清除小鼠持续的鼠诺如病毒感染并且 IFN-λ 可靶向非造血细胞和肠上皮细胞。在鼠诺如病毒传播模型中，内源性IFN-λ可阻止感染急性CW3 鼠诺如病毒的小鼠的病毒传播，不仅如此，IFN-λ还可防止小鼠肠道CW3复制、炎症和抗体反应。这些研究表明，IFN-λ不仅具有治疗 NoV 感染的潜力，而且 IFN-λ 的预防性用药还可以预防NoV的传播。       免疫调节剂Toll 样受体 (Toll-like receptor，TLR) 激动剂具有抗 NoV 作用。这类化合物已作为疫 苗佐剂使用多年，能够抑制其他病毒如HIV和HBV的复制。TLR激动剂能够诱导先天免疫反应并刺激IFNs的产生，已知其在体外对鼠诺如病毒和人诺如病毒具有抑制作用。其中，几种TLR7激动剂显示出对鼠诺如病毒感染的有效抑制作用，包括 R-848、GS-9620、Gardiquimod和 R-837。       作为引起全球病毒性胃肠炎和腹泻的最主要病原体， NoV 在人群的流行和感染越来越频繁，受到越来越多的关注和重视。目前，还未见获批准上市的抗 NoV 药物。临床上治疗 NoV 感染的方法主要是通过补充电解质缓解病毒感染后引发的腹泻症状。因此，为了应对 NoV在全球范围内的广泛传播，开发针对 NoV 感染的有效抑制剂及其他疗法迫在眉睫。庆幸的是，近年来，针对 NoV 生活周期的各个环节，寻找潜在的抗病毒靶点和有效的抗 NoV 化合物正在有条不紊的展开。小分子抑制剂特别是针对病毒蛋白酶和病毒RdRp 的抑制剂在抵御 NoV 感染的药物研发中发展迅速。此外，宿主导向的抗病毒疗法因其耐药性低、抗病毒活性强以及对宿主伤害较小等优点，日益发展为开发新型抗 NoV 药物的重要方向。深入研究 NoV 的生活特性、完善 NoV 的复制机制、建立有效且简便的 NoV 体外和体内感染模型以及高通量药物筛选模型，是药物开发中的关键突破点，将有助于抗 NoV 感染药物的快速发现。       参考资料       [1]张磊,段梦兰,池杨. 诺如来袭，如何应对[N]. 健康报,2023-02-17(004).       [2]董悦,展鹏,刘新泳.抗诺如病毒药物及其疫 苗研究新进展[J].药学学报,2020,55(04):640-651.DOI:10.16438/j.0513-4870.2019-0783.       [3]王丽丹,岑山.抗诺如病毒药物研究进展[J].中华实验和临床病毒学杂志,2022,(第5期).       作者简介：小泥沙，食品科技工作者，现就职于国内某大型药物研发公司，从事营养食品及功能性食品的开发与研究。智药研习社3月直播讲座报名智药研习社3月线下研习会报名来源：CPHI制药在线声明：本文仅代表作者观点，并不代表制药在线立场。本网站内容仅出于传递更多信息之目的。如需转载，请务必注明文章来源和作者。投稿邮箱：Kelly.Xiao@imsinoexpo.com▼更多制药资讯，请关注CPHI制药在线▼点击阅读原文，进入智药研习社~