ISG15

【导读】感染单纯疱疹病毒1（HSV-1）后，该病毒会部署多种策略，来逃避宿主的先天免疫反应。然而，控制这种现象的机制仍然难以捉摸。在这项研究中，团队发现HSV-1通过在神经胶质瘤细胞的早期感染期间选择性地减少METTL14蛋白，导致总体m6A水平降低。 2024年9月， 复旦大学基础医学院束敏峰团队在期刊《Cell Reports》上发表了题为“HSV-1-induced N6-methyladenosine reprogramming via ICP0-mediated suppression of METTL14 potentiates oncolytic activity in glioma”的研究论文。研究结果确定了ICP0引导的m6A修饰控制抗病毒免疫反应，并表明靶向METTL14/ISG15代表了在神经胶质瘤治疗中增强oHSV-1溶瘤活性的潜在策略。 https://www.cell.com/cell-reports/fulltext/S2211-1247(24)01107-0 研究背景  01  N6-甲基腺苷（m6A）RNA 修饰是真核mRNA分子的常见特征，该复合物由METTL3、METTL14、WTAP、VIRMA和RBM15组成。IGF2BP3是一种在胚胎发育过程中高度表达的蛋白质，并且在包括多形性胶质母细胞瘤在内的各种癌症中显著上调。m6A在许多病毒的生命周期和细胞对病毒感染的反应中发挥作用。此外，宿主细胞中的m6A表观转录组在病毒感染后发生改变，导致感染增强或宿主耐药性。 溶瘤病毒疗法是一种新兴的癌症治疗方式，它使用复制病毒。溶瘤病毒（OVs）直接引起肿瘤细胞裂解，导致可溶性抗原和危险信号的释放，从而刺激抗肿瘤免疫反应。2015年美国食品和药品监督管理局（FDA）批准的第一个OV是IMLYGIC，一种用于治疗晚期黑色素瘤的转基因溶瘤HSV-1（oHSV-1）。DELYTACT是第三代oHSV-1，在肿瘤细胞中具有更强的复制能力。根据一项有19名入组患者的2期临床试验的结果，其在日本获得了有条件和限期的上市批准，用于治疗恶性神经胶质瘤，这是成人最常见和最致命的原发性脑恶性肿瘤。 在这项研究中，团队报道了早期HSV-1感染以ICP0依赖性方式选择性地诱导METTL14降解，导致总体m6A水平降低。METTL14诱导的ISG15表达增强（由IGF2BP3介导）在HSV-1感染期间促进抗病毒作用。敲除METTL14，增强了HSV-1的传播和oHSV-1在神经胶质瘤治疗中的溶瘤活性。 图形摘要 研究进展  02  METTL14诱导的ISG15表达增强促进HSV-1感染期间的抗病毒作用 METTL14过表达，导致WT HSV-1和oHSV-1的病毒基因表达在mRNA和蛋白水平上受到抑制。METTL14过表达，导致U87MG神经胶质瘤细胞中oHSV-1-EGFP复制减少。相反，使用shRNA敲低METTL14，促进了WT HSV-和oHSV-1复制。这些结果表明，METTL14减轻了HSV-1的复制。 WT METTL14过表达，适度挽救了HSV-1感染介导的ISG15抑制。METTL14突变体（K156R和K162R）不能被ICP0泛素化，显著阻断了HSV-1诱导的ISG15减少。METTL14 的过表达，显著减弱了shMETTL14诱导的病毒基因表达增强。METT14通过上调ISG15的表达，来抑制HSV-1感染。总之，HSV-1通过ICP0/METTL14/ISG15 通路，减弱抗病毒作用。 METTL14诱导的ISG15表达增强，在oHSV-1感染期间促进抗病毒作用 METTL14敲除增强了oHSV-1在胶质瘤异种移植小鼠中的抗肿瘤活性 体内研究表明，与阴性对照相比，注射METTL14敲低细胞的小鼠，表现出对肿瘤生长的显著促进。oHSV-1抑制颅内神经胶质瘤生长的能力较低。在oHSV-1治疗后，shMETTL14组的肿瘤几乎消失了。oHSV-1显著抑制METTL14和ISG15表达。METTL14敲低，强烈促进了oHSV-1复制。在正常脑组织中，未检测到病毒基因产物（ICP0）。 敲低U87MG细胞中的METTL14，显著增加了oHSV-1的溶瘤活性，其特征是肿瘤大小减小、存活时间延长和病毒基因表达增强。此外，在正常脑组织中未检测到病毒基因产物（ICP0）。这些数据表明，抑制METTL14会增强病毒复制，有助于增加oHSV-1对神经胶质瘤的抗肿瘤作用，并且敲除METTL14不会影响oHSV-1的肿瘤特异性。 抑制METTL14显著增强携带GL261衍生的神经胶质瘤异种移植物的小鼠oHSV-1的抗肿瘤活性 研究结论  03  研究结果强调了HSV-1编码的E3泛素连接酶ICP0在METTL14降解中的重要性，随后导致通过m6A依赖性途径抑制ISG15表达。这强调了oHSV-1治疗，以低METTL14表达为特征的神经胶质瘤的有效性。此外，特异性METTL14抑制剂的开发，显示出作为潜在增强剂的前景，其在神经胶质瘤治疗中与oHSV-1协同作用。 参考资料： 1.Deng, X. ∙ Su, R. ∙ Weng, H. ... RNA N(6)-methyladenosine modification in cancers: current status and perspectives Cell Res. 2018; 28:507-517 2.Huang, H. ∙ Weng, H. ∙ Sun, W. ... Recognition of RNA N(6)-methyladenosine by IGF2BP proteins enhances mRNA stability and translation Nat. Cell Biol. 2018; 20:285-295 识别微信二维码，添加生物制品圈小编，符合条件者即可加入 生物制品微信群！ 请注明：姓名+研究方向！ 版 权 声 明 本公众号所有转载文章系出于传递更多信息之目的，且明确注明来源和作者，不希望被转载的媒体或个人可与我们联系(cbplib@163.com)，我们将立即进行删除处理。所有文章仅代表作者观点，不代表本站立场。

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Model. | 计算机洞察：TBK1激酶抑制剂的QSAR建模用于增强药物发现 具体信息，请滑动下方文字 1.【知识图谱】 知识图(KG)是一种对实体及其相互关系建模的技术。知识图嵌入(KGE)将这些实体和关系转换为连续的向量空间，以促进密集和有效的表示。在化学领域，应用KG和KGE技术将异构的化学信息整合到一个连贯的、用户友好的框架中，增强了化学数据特征的表示，有利于下游任务，如化学性质预测。本文首先全面回顾了经典和当代的KGE方法，包括基于距离的模型、语义匹配模型和基于神经网络的方法。然后，我们对化学和生物化学中使用的主要数据库进行了编目，这些数据库为KGs提供了基本的化学数据。随后，我们探讨了KG和KGE在化学中的最新应用，重点是风险评估，性质预测和药物发现。最后，我们讨论了KG和KGE技术目前面临的挑战，并对其潜在的未来发展提出了展望。 链接网址：https://pubs.acs.org/doi/10.1021/acs.jcim.4c00791 DOI：https://doi.org/10.1021/acs.jcim.4c00791 2.【SARS-CoV-2】 在这里，我们使用天然质谱(native MS)探测SARS-CoV蛋白酶PLpro，该蛋白酶通过影响病毒蛋白的产生和拮抗宿主抗病毒反应在冠状病毒疾病中起关键作用。利用紫外光解离(UVPD)和变温电喷雾电离(vT ESI)对PLpro抑制剂的结合位点进行定位，揭示了抑制剂对蛋白质三级结构的稳定作用。我们比较了来自SARS-CoV-1和SARS-CoV-2的PLpro在抑制剂和ISG15相互作用方面的差异，以了解蛋白酶功能的可能差异。一个缺乏单一半胱氨酸的PLpro突变体被用来定位抑制剂结合，热力学测量显示抑制剂PR-619稳定了折叠的PLpro结构。这些结果将为进一步开发PLpro作为针对SARS-CoV-2和其他新出现的冠状病毒的治疗靶点提供信息。 链接网址：https://pubs.acs.org/doi/10.1021/acsinfecdis.4c00444 DOI：https://doi.org/10.1021/acsinfecdis.4c00444 3.【药物设计】 多药理学药物通过多种生物靶点的联合调控，在治疗复杂的人类疾病方面具有重要的价值。然而，具有两个以上靶点的多靶点药物设计具有挑战性，通常是偶然发现的。本文提出了一种结合表型发现方法的限制性片段对接(RFD)计算方法，用于合理的多药理学药物设计。通过对小胶质细胞表型的遗传和药物联合研究，我们首次发现了RIPK1、MAP4K4和ALK的三重靶标调节的新型协同效应。利用RFD方法探索三个靶口袋中的虚拟化学空间，我们确定了一种先导化合物LP-10d，它精确调节RIPK1/MAP4K4/ALK，具有低纳摩尔效价的协同小胶质保护作用。LP-10d在3xTg阿尔茨海默病小鼠模型中显示出对多种神经病理的多重药理作用。我们的研究揭示了RFD方法的潜在应用，这对进一步研究治疗复杂人类疾病的多药理学药物有价值。 链接网址：https://pubs.acs.org/doi/10.1021/acs.jmedchem.4c01731 DOI：https://doi.org/10.1021/acs.jmedchem.4c01731 4.【AlphaFold】 了解肽-蛋白相互作用的序列和结合能之间的关系是化学生物学的一个重要挑战。一个突出的例子是泛素相互作用基序(UIMs)，它是识别泛素并以弱亲和力结合单个泛素蛋白的短肽序列。虽然我们对UIMs的序列特征已经有了很好的了解，但序列与泛素结合亲和力之间的关系尚未得到充分的表征。本文将Vps27的第一个UIM作为模型系统进行研究。使用实验性丙氨酸扫描，我们能够对该UIM的每个疏水残基对泛素结合的相对贡献进行排序。这些结果与AlphaFold位移研究相关，其中AlphaFold通过将靶蛋白与两个潜在的肽配体结合来预测更强的结合物。我们证明，通过生成大量模型并使用共识约束状态AlphaFold竞争实验可以对单残基变化敏感。我们进一步表明，为了充分概括观察到的泛素结合趋势，有必要筛选包含“诱饵”结合位点的AlphaFold模型，以防止移位的肽干扰实际结合位点。总的来说，研究表明AlphaFold可以作为肽结合剂设计的强大工具，并且当使用大量模型时，AlphaFold预测可以对结合剂的单残基改变引起的非常小的能量变化敏感。 链接网址：https://pubs.acs.org/doi/10.1021/acschembio.4c00418 DOI：https://doi.org/10.1021/acschembio.4c00418 5.【抑制剂】 聚(ADP -核糖)聚合酶1 (PARP1)抑制剂通过合成致死性彻底改变了许多具有DNA修复缺陷的癌症的治疗。在多药理学概念的倡导下，最近的证据发现，通过同时扰动含溴结构域蛋白4 (BRD4)和PARP1的酶活性，可以观察到显著的协同作用，从而增加癌细胞的死亡。在这里，我们开发了一种新的化学信息学方法，结合基于结构的方法，旨在促进双PARP1-BRD4抑制剂的设计。开发的方法不是连接药效团，而是首先确定合并的药效团(一组含酰胺的环系统)，从中进一步优先考虑菲蒽啶-6(5H)- 1。基于这一出发点，合理设计了几种小分子，其中HF4对BRD4和PARP1具有较低的微摩尔抑制活性，尤其对BRD4 BD1具有较强的抑制作用，IC50值为204 nM。此外，它通过阻止细胞周期进程和阻碍DNA损伤修复，对乳腺癌基因缺陷和熟练乳腺癌细胞系显示出强大的抗增殖作用。总的来说，我们系统的设计类铅分子的努力有可能为探索双重PARP1-BRD4抑制剂作为乳腺癌治疗的有希望的途径打开大门。此外，所开发的方法可以扩展到系统地设计针对PARP1和其他相关靶点的抑制剂。 链接网址：https://pubs.acs.org/doi/10.1021/acs.jcim.4c01421 DOI：https://doi.org/10.1021/acs.jcim.4c01421 6.【药物发现】 TBK1或TANK-binding kinase 1是一种具有丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶功能的酶。它在多种细胞过程中起着至关重要的作用，包括对病毒的先天免疫反应、细胞增殖、细胞凋亡、自噬和抗肿瘤免疫。TBK1活性失调可导致自身免疫性疾病、神经退行性疾病和癌症。由于TBK1在这些关键通路中的核心作用，它是治疗药物开发研究的一个重要焦点。在本文中，我们从CAS内容收集中探索有关TBK1及其在大量疾病和障碍中的含义的数据。随着开发高效TBK1抑制剂的需求被概述，我们专注于利用机器学习方法开发TBK1抑制的预测模型，该模型来自片段功能分析描述符。利用广泛的CAS内容收集，我们组装了一个TBK1抑制剂的训练集，并通过实验测量了IC50值。我们探索了几种结合各种分子描述符的机器学习技术，以推导和选择最佳的TBK1抑制剂QSAR模型。某些重要的结构警报，可能有助于抑制TBK1概述和讨论。本文的优点在于确定了最合适的TBK1 QSAR模型，并随后成功开发了先进的正训练数据，以促进和加强TBK1抑制剂等重要治疗靶点的药物发现，这是基于CAS内容集提供的广泛的科学信息。 链接网址：https://pubs.acs.org/doi/10.1021/acs.jcim.4c00864 DOI：https://doi.org/10.1021/acs.jcim.4c00864 上下滚动查看更多 药企动态2024年9月20日【诺和诺德】司美格鲁肽心衰适应症获欧洲监管机构推荐批准2024年9月20日【强生】疾病进展或死亡风险降低52%！强生EGFR/c-Met双抗联合化疗获批二线治疗NSCLC2024年9月19日【诺和诺德】6亿美元！诺和诺德继续进军基因医学领域！2024年9月19日【乐普生物】国产首个！乐普生物EGFR ADC拟纳入优先审评2024年9月18日【英矽智能】AI赋能药物研发的概念性验证，英矽智能TNIK抑制剂临床IIa期数据揭盲2024年9月18日【Organon】Organon以12亿美元收购Dermavant各动态具体信息，请滑动下方文字 1.【诺和诺德】 9月20日，诺和诺德宣布2.4mg Wegovy（司美格鲁肽）获欧洲药品管理局人用药品委员会（CHMP）推荐批准用于治疗肥胖相关射血分数保留型心衰（HFpEF）。该药物是第一款被推荐批准用于治疗心衰的GLP-1药物。 链接网址请戳我 2.【强生】 9月20日，强生宣布FDA已批准其EGFR/c-Met双抗Rybrevant（amivantamab-vmjw，埃万妥单抗）与标准化疗（卡铂+培美曲塞）联合治疗具有表皮生长因子受体（EGFR）外显子19缺失（ex19del）或L858R替代突变的、在接受EGFR酪氨酸激酶抑制剂（TKI）治疗期间或之后进展的局部晚期或转移性非小细胞肺癌（NSCLC）成年患者。 链接网址请戳我 3.【诺和诺德】 9月19日，NanoVation Therapeutics宣布，与诺和诺德达成一项多年研发合作伙伴关系，旨在共同推进针对心脏代谢性疾病和罕见病的创新基因药物（genetic medicine）的开发。该合作将NanoVation Therapeutics的专有长循环脂质纳米粒子（lcLNP）RNA递送技术与诺和诺德在心脏代谢性疾病和罕见病研发及临床转化方面的专长相结合。 链接网址请戳我 4.【乐普生物】 9月19日，CDE官网显示，乐普生物的维贝柯妥塔单抗（MRG003）拟纳入优先审评，用于治疗既往经至少二线系统化疗和PD-1/PD-L1抑制剂治疗失败的复发或转移性鼻咽癌（NPC）患者。该药物是进度最快的国产EGFR ADC。 链接网址请戳我 5.【英矽智能】9月18日，英矽智能宣布，其在研管线ISM001-055在一项IIa期临床试验中取得了积极的初步研究结果。ISM001-055是一款“全球首创”（first-in-class）小分子抑制剂，由生成式AI驱动药物发现与设计过程，靶向TNIK（Traf2/NCK相互作用激酶）用于特发性肺纤维化（IPF）治疗。此项研究不仅达到了主要研究终点即药物的安全性验证，同时达到了次要研究终点即初步疗效验证，在用力肺活量（FVC）这一评测IPF患者肺功能改善的重要指标上呈现出剂量依赖性的药效趋势。 链接网址请戳我 6.【Organon】 9月18日，Organon与Dermavant Sciences宣布，双方已签署最终协议，Organon将收购Roivant子公司Dermavant Sciences并囊获其创新疗法Vtama（tapinarof）乳膏。新闻稿表示，这一交易有助于在全球范围内实现Vtama的潜力。 链接网址请戳我 上下滚动查看更多 会议信息 2024年9月27日 上海恺默信息咨询有限公司举办OVI第四届溶瘤病毒产业发展大会 2024年10月18-20日 天津市生物医药行业协会举办中国(天津)国际生物医药产业博览会 2024年10月24-25日 E药学苑举办ChemCon 2024第四届小分子药物创新开发论坛 各会议具体详情和参会方式，请滑动下方文字 OVI第四届溶瘤病毒产业发展大会 主办方：上海恺默信息咨询有限公司 会议时间：2024年9月27日 会议地点：上海 会议主旨：直击溶瘤病毒领域核心议题：深入剖析溶瘤病毒作用机制、综合评估溶瘤病毒药物的药效与毒副作用、聚焦临床试验策略与挑战、探讨创新商业化模式 链接网址请戳我 中国(天津)国际生物医药产业博览会 主办方：天津市生物医药行业协会 会议时间：2024年10月18-20日 会议地点：天津 会议主旨：为贯彻落实“十四五”规划和 2035 年远景目标，加快建设高质量生物医药体系，加快推动我国生物医药产业创新升级，加强生物医药产业的交流与合作，提升企业品牌和认知度，博览会立足天津辐射全国，发挥京津冀协同发展区域优势定位于“国际化、品牌化、专业化”，推动生物医药行业高质量发展中的重要作用，加速优质项目市场布局，助力中国生物医药事业的发展，助推中国迈入生物医药强国行列。 链接网址请戳我 ChemCon 2024第四届小分子药物创新开发论坛 主办方：E药学苑 会议时间：2024年10月24-25日 会议地点：南京 会议主旨：作为目前药物研发领域的主流，小分子药物具有许多优势和挑战。为推动研发和产业化的发展，促进行业内的学术交流与合作，邀请近百名知名专家学者分享他们在小分子创新药、改良型新药等领域的科研成果以及独到见解。 链接网址请戳我 上下滚动查看更多 版权信息 本文内容均由小编收集于公开的各个网络平台，发布的目的仅为了方便大家一站式了解AIDD行业信息，并未对发布源头进行真实性验证。如您发现相关信息有任何版权侵扰或者信息错误，请及时联系AIDD Pro（请添加微信号sixiali_fox59）进行删改处理。 原创内容未经授权，禁止转载至其他平台。有问题可发邮件至sixiali@stonewise.cn 关注我，更多资讯早知道↓↓↓

导读：腹主动脉瘤（AAA）是一种进行性血管疾病，表现为人体主动脉的腹部段发生扩张或膨隆。在美国每年约有 15,000 人因破裂而死亡。普遍认为，AAA是一种炎症疾病，典型特征是主动脉壁透壁浸润，此过程伴随各种淋巴细胞释放基质金属蛋白酶 （MMP） 和促炎细胞因子（TNF-α，IFN-γ，IL-6, IL-12, IL-23等），从而降解细胞外基质降解，加速动脉瘤扩张。此外，浸润的炎症细胞还会产生大量的活性氧 （ROS），从而放大氧化应激。氧化应激与腹主动脉瘤 （AAA） 的发病机制和进展有关。然而，由于抗氧化剂在全身给药后在 AAA局部无法达到足够的水平，抗氧化疗法目前未有在临床实验中成功的。 锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)，也称为SOD2 ，是细胞三种类型的超氧化物歧化酶之一。主要存在于线粒体中，在调节氧化应激以防止线粒体损伤方面起着关键作用。近日，Christine T N Pham等人在BioRxiv上发表预印本文章：Systemic delivery of murine SOD2 mRNA to experimental abdominal aortic aneurysm mitigates expansion and rupture，他们采用包被透明质酸 （HA）的阳离子两亲性肽p5RHH自组装纳米颗粒复合物向腹主动脉瘤小鼠模型递送SOD2 mRNA，过表达超氧化物歧化酶，成功缓解腹主动脉瘤扩增，并在很大程度上防止了其破裂。 01  腹动脉瘤（AAA）疾病简介 在 AAA 组织中，消除ROS的酶如过氧化氢酶、超氧化物歧化酶 （SOD）和谷胱甘肽还原酶相对缺乏，氧化剂和抗氧化剂比例失衡，从而产生过量的ROS，使得炎症循环得以维系，从而激活 MMP 并诱导细胞凋亡。有研究表明通过胃肠外给药方式注射过氧化氢酶或使用基因工程小鼠模型过表达过氧化氢酶，可保护小鼠免受CaCl 2 诱导的AAA的侵害。在这两种方法中，过氧化氢酶要么CaCl 2 诱导之前通过泵连续输注，要么通过基因工程从出生起就过表达，这两种方法都很难进行临床转化。 NF-κB信号通路控制涉及多种细胞反应的基因表达，包括免疫和炎症。NF-κB在促进MMP表达和AAA发生中的作用已得到充分证实，抑制NF-κB信号通路可缓解腹主动脉瘤。2022年，约翰·科克伦退伍军人医疗中心与华盛顿大学医学院风湿病科医学系的Christine T N Pham等人开发了一种透明质酸（HA）包被的阳离子两亲性肽p5RHH siRNA 纳米颗粒（NP），通过敲低不同 NF-κB 亚基（p50 /p65）的表达来缓解 AAA 进展。 本篇文章中，研究人员利用多肽纳米颗粒复合物包封SOD2 mRNA，证实了超氧化物歧化酶在小鼠体内的表达和对腹动脉瘤的缓解疗效。 02  构建腹主动脉瘤小鼠模型 小鼠肾下腹主动脉瞬时猪弹性蛋白酶灌注可在第14天导致动脉瘤扩张，引起主动脉直径 （AD）增加约70%，伴随着弹性纤维的碎裂和MMP活性的增加。在弹性蛋白酶诱导的AAA小鼠模型中，氧化应激反应的表征包括iNOS水平升高，硝基酪氨酸水平升高（ROS/NO产生标记分子），大量的凋亡/ TUNEL + 细胞。 03  研究HA-SOD2 mRNA NP的制备 2020年，Christine T N Pham等人将WNT16 mRNA（1100nt）与包被有透明质酸 （HA）的阳离子两亲性肽p5RHH混合，形成了65nm的纳米颗粒，将肽-WNT16 mRNA 纳米复合物递送至人软骨外植体可拮抗经典的 β-catenin/WNT3a 信号传导，从引起润滑素生成增加和软骨细胞凋亡减少。HA是一种天然存在且高度生物相容性的线性多糖，是细胞外基质（ECM）的主要成分，以高浓度存在于滑液和透明软骨中，并与软骨细胞上表达的表面受体CD44结合。具有 HA 涂层的 脂质纳米颗粒将通过与 CD44 的相互作用增强细胞摄取。 在早期成功的基础上，他们购买了商业化的SOD2 mRNA，其序列中携带线粒体定位肽。然后，将1 μg SOD2 mRNA 和 10 μmol p5RHH 肽在 37°C 下混合 40 分钟制备 p5RHH-SOD2 mRNA NP，在电镜下可观察到，直径为50-55 nm 的自组装的、稳定均匀的脂质纳米颗粒。HA包被的p5RHH-SOD2 mRNA NP很容易被骨髓来源的巨噬细胞吸收。HA-SOD2 mRNA NP转染RAW 264.7细胞后，在线粒体中检测到SOD2的过表达。裂解转染的 RAW 264.7 细胞，WB同样证实SOD2的过表达。 04  HA-SOD2 mRNA NP缓解腹主动脉瘤 在第0天用弹性蛋白酶灌注小鼠，并在弹性蛋白酶灌注后第5天，第8天和第11天给静脉注射HBSS缓冲液或HA-SOD2 mRNA NP。在共聚焦显微镜下，静脉注射HA-SOD2 mRNA NP的小鼠组织中可观察到SOD2 表达增强，同时抑制主动脉壁组织中的硝基酪氨酸水平，相反，HBSS对SOD2或硝基酪氨酸的表达没有影响。SOD2 mRNA 递送显着缓解了腹主动脉瘤进展，静脉注射HA-SOD2 mRNA NP的小鼠主动脉直径 （AD）约为0.57 ± 0.02 mm，而对照组注射HBSS的小鼠主动脉直径 （AD）约为0.79 ± 0.02 mm。腹主动脉瘤缓解伴随着iNOS + 细胞、MMP 活性和TUNEL + 细胞显著减少。 05  HA-SOD2 mRNA NP稳定性研究 制备不同批次的HA-SOD2 mRNA NP ，在 4°C 下冷藏 1 至 4 周，检测NP 的大小、zeta 电位和多分散性，发现HA-SOD2 mRNA NP可稳定存在。将储存4 周的HA-SOD2 mRNA NP 转染RAW 264.7 细胞，可观察到SOD2 的强烈线粒体过表达。更重要的是，体内结果显示，注射储存4 周的HA-SOD2 mRNA NP同样可缓解腹主动脉瘤进展，抑制氧化应激反应，iNOS +细胞 、MMP 活性 和TUNEL + 细胞表现出显著减少。  06  HA-SOD2 mRNA NP抑制腹主动脉瘤破裂 在小鼠中，将弹性蛋白酶在腹外膜周围注射到腹主动脉上，然后在第 0、3、5、7、10、13 天全身注射 TGFβ 阻断抗体，引起腹主动脉显着增大和55%血管破裂。HA-SOD2 mRNA NP给药不仅延迟了血管破裂的发生（直到第11天），而且显着保护小鼠免于猝死（治疗组小鼠存活率87.5%，未治疗小鼠的存活率为45%）。同时，在HA-SOD2 mRNA NP还可缓解AAA进展，显著抑制了硝基酪氨酸的水平，硝基酪氨酸是氧化应激相关病理的标志物。此外，HA-SOD2 mRNA NP处理还减轻了80%存活动物的AAA生长进展，同时伴随着iNOS+细胞，TUNEL +细胞和原位MMP活性的显着降低。最后，SOD2的过表达显著抑制了硝基酪氨酸的水平，硝基酪氨酸是氧化应激相关病理的标志物。 07  AAA破裂TGF β 阻断模型的蛋白质组学 研究人员为进一步找到SOD2过表达相关的蛋白和代谢途径，通过无偏倚的质谱蛋白质组学和高维生物信息，获得HA-SOD2 mRNA NP处理的小鼠与未处理小鼠相比的完整蛋白质组分析数据。进行主成分分析（PCA）以评估样品分布，并根据其蛋白质丰度/表达谱区分未处理的样品与处理的样品。HA-SOD2 mRNA NP治疗组小鼠主动脉平均AD为3.25-3.30mm，为治疗组NT1和NT2的平均AD为4.00-4.50mm，并表现出局部出血，提示即将破裂。Plex（pleckstrin）、Trpc6（瞬时受体电位通道6）、Rasa3（Ras p21 蛋白激活剂3）和Alox12（花生四烯酸12-脂氧合酶）的高检测可能预示着动脉瘤破裂的风险，而 SOD2 的过表达持续下调这些通路，可能保护动物免受动脉瘤破裂和猝死。随后对源自 AAA 蛋白质组的显着富集通路的分析表明，HA-SOD2 mRNA NP 会通过调节microRNA（miR）17-5p（抑制细胞凋亡）和 miR 181a-5p（通过 STAT3 信号通路调节血管炎症/内皮细胞衰老）来调节细胞应激反应。此外，HA-SOD2 mRNA NP 会抑制血小板活化/聚集途径（Csk，Lyn，Arrb1，Plek）、细胞粘附（Isg15，Lyn）和 MAPK1/3 信号传导途径（Rasa3，Csk，Arrb1） 。 AAA的形成和发展通常伴随着线粒体功能障碍和氧化应激。大部分ROS（约90%）是在线粒体氧化磷酸化过程中产生的副产物。ROS的过量产生会导致线粒体功能障碍和细胞死亡。在TGFβ阻断AAA破裂模型中，与氧化磷酸化、脂质代谢、柠檬酸三羧酸（TCA）循环和呼吸电子传递相关的途径显着富集。HA-SOD2 mRNA NP处理后，观察到氧化磷酸化系统的关键蛋白质成分（Ndufa9，Cyc1，Uqcr10，Sdhb/c）表达增强，柠檬酸TCA/呼吸电子传递系统的Etfa/b、Suclg1、Cox6a1表达增强，脂肪酸/脂质代谢途径中 Slc25a1、Acadm、Hadha/b、Acaa2的表达增强，相反，与转录/翻译和中性粒细胞脱颗粒相关的蛋白质表达减少。 08  总结 腹主动脉瘤 （AAA） 是一种主要见于 65 岁或以上男性的疾病。AAA破裂的死亡率大于80%。然而，目前尚无针对 AAA 的选择性或分子靶向疗法。尽管氧化应激与 AAA 的发生和发展有关，但由于向 AAA 部位输送足够水平的抗氧化剂受到限制，抗氧化治疗一直不成功。 这项工作使用基于肽的纳米递送平台，成功向体内递送了SOD2 mRNA，增强动脉瘤组织中 SOD2 的表达水平，从而减轻 AAA 的进展并在很大程度上防止破裂。注射HA-SOD2 mRNA NP小鼠的无偏倚蛋白质组学分析揭示了与炎症、血小板活性以及氧化磷酸化相关的通路富集，证实了 SOD2 在维持血管氧化还原平衡中的作用。总之，基于纳米颗粒递送系统的SOD2增强疗法为AAA的非手术治疗提供了一种非常有前景的方法。 参考文献  1)Induction of WNT16 via Peptide-mRNA Nanoparticle-Based Delivery Maintains Cartilage Homeostasis 2)eptide-siRNA nanoparticles targeting NF-κB p50 mitigate experimental abdominal aortic aneurysm progression and rupture 3)Systemic delivery of murine SOD2 mRNA to experimental abdominal aortic aneurysm mitigates expansion and rupture 识别微信二维码，添加生物制品圈小编，符合条件者即可加入 生物制品微信群！ 请注明：姓名+研究方向！ 版 权 声 明 本公众号所有转载文章系出于传递更多信息之目的，且明确注明来源和作者，不希望被转载的媒体或个人可与我们联系(cbplib@163.com)，我们将立即进行删除处理。所有文章仅代表作者观点，不代表本站立场。