WNT1

*仅供医学专业人士阅读参考众所周知，肿瘤是异质性的。近年来，单细胞测序技术和空间基因组学的飞速发展，让我们对肿瘤的异质性有了更清晰的认知。这些进步也让科学家有机会了解肿瘤的进化、分类和耐药等问题。肿瘤的代谢，也是近年来研究的热点领域。既然肿瘤是异质性的，那么肿瘤的代谢必然也是异质性的。不过，目前科学家对于肿瘤代谢异质性的认知还比较少。加深对肿瘤代谢异质性的了解，有望催生新的癌症治疗方法。近日，由弗朗西斯·克里克研究所Mariia Yuneva和Peter Kreuzaler领衔的研究团队，在著名期刊《自然·代谢》发表一项重要研究成果[1]。他们发现，在人类和小鼠三阴性乳腺癌组织中，癌基因MYC高表达的区域，癌细胞中多种维生素转运体SLC5A6表达上调，导致癌细胞对维生素B5的摄取增加，并将其转化为辅酶A，加强三羧酸循环，促进癌细胞的增殖和生长。好消息是，限制维生素B5的摄入，会导致许多由MYC介导的代谢变化发生逆转，并导致肿瘤生长受阻。这意味着，有望从这个角度入手，开发出靶向乳腺癌代谢的抗癌药物。论文首页截图为了探索乳腺癌的代谢异质性，Yuneva团队基于由WNT1驱动的三阴性乳腺细胞系，构建了两个新的细胞系：一个是表达超生理水平MYC的WMhigh（表达红色荧光蛋白tdTomato），另一个正常表达MYC的WMlow（表达绿色荧光蛋白eGFP）。如果将两个细胞系混在一起的话，就是WMmix。在上述两个单细胞系和一个混合细胞系的基础上，他们构建了三个不同类型的乳腺癌小鼠模型。随后，他们检测了三种乳腺癌肿瘤模型的代谢物分布情况。和预期的一样，WMhigh和WMlow单细胞系形成的肿瘤代谢物分布一致性较好，而WMmix形成的肿瘤代谢物与癌细胞克隆一样出现分区情况。三种不同肿瘤模型的代谢和克隆差异在上述数据的基础上，Yuneva团队证实了他们采用的研究方法是稳健可靠的。接下来，他们就开始寻找肿瘤克隆一致性带来的代谢差异。通过对大量代谢通路进行分析，他们发现与WMhigh相关性最强的是泛酸（维生素B5，或者PA）。众所周知，泛酸是辅酶A（CoA）的前体，许多关键的代谢途径都需要辅酶A，包括著名的三羧酸循环以及脂肪酸的生物合成和氧化。因此，他们决定研究泛酸-辅酶A轴与MYC介导的新陈代谢之间的关系。WMhigh与泛酸在空间上重叠为了保险起见，在深入研究之前，Yuneva团队先研究了人体组织样本中WMhigh与泛酸的关系。他们发现，在MYC水平最高或MYC转录特征较强的患者来源异种移植模型（PDXs）中，泛酸水平较高。此外，泛酸水平高也与原发性人类乳腺癌活检组织MYC高表达区域密切相关。这些来自人体的数据，支持他们进一步研究MYC与泛酸代谢之间的联系。在人乳腺癌组织样本中，WMhigh与泛酸在空间上也是重叠的随后，他们使用了一种结合了荧光显微镜、电子显微镜和纳米级二次离子质谱（NanoSIMS）的超高分辨率质谱成像技术，证实在WMhigh区域观察到的泛酸水平升高，是由于细胞自主增加了对泛酸的摄取，然后利用泛酸合成辅酶A等下游代谢产物。成像结果从机制上讲，MYC作为一种转录调控因子，在高表达的情况下会促进多种维生素转运体SLC5A6表达增加，进而促进癌细胞对泛酸的摄取，并将泛酸转化成辅酶A，加强三羧酸循环，促进癌细胞的增殖。Yuneva团队还发现，将乳腺肿瘤细胞系4T1放在缺乏泛酸的条件下培养，它们会停止增殖；而补充辅酶A，可以恢复4T1的增殖。这说明，癌细胞需要泛酸的下游代谢产物辅酶A来维持生长。类似地，小鼠体内的研究也发现，不含泛酸的饮食会限制WMmix肿瘤的生长。泛酸对细胞系和肿瘤生长的影响总的来说，Yuneva团队这项研究发现，在乳腺癌细胞中，MYC通过直接上调转运体SLC5A6的水平，增加了肿瘤内泛酸的水平，而且这是支持MYC调节癌细胞增殖和生物合成程序所必需的。考虑到T细胞的活性也需要高水平的辅酶A，因此Yuneva推测，MYC高表达乳腺癌细胞通过增加对泛酸的吸收，一方面促进自身的增殖，另一方面也限制了免疫细胞的抗癌活性。参考文献：[1].Kreuzaler P, Inglese P, Ghanate A, et al. Vitamin B5 supports MYC oncogenic metabolism and tumor progression in breast cancer. Nat Metab. 2023. doi:10.1038/s42255-023-00915-7本文作者丨BioTalker

关注并星标CPHI制药在线 近日，苏州泽璟生物制药股份有限公司1类新药注射用ZG006在国内获得临床试验默示许可，拟用于治疗晚期实体瘤。       ZG006是泽璟制药及其子公司Gensun Biopharma开发的三特异性抗体药物，针对CD3及两个不同DLL3表位。ZG006的抗DLL3端与肿瘤细胞表面不同DLL3表位相结合，抗CD3端结合T细胞。通过衔接肿瘤细胞和T细胞，ZG006将T细胞拉近肿瘤细胞，从而利用T细胞特异性杀伤肿瘤细胞。       ZG006是全球首款针对DLL3表达肿瘤的三特异性抗体。临床前研究显示：在小鼠肿瘤模型上，ZG006具有显著的肿瘤抑制作用，导致显著比例的小鼠肿瘤完全消退。在非人灵长类动物中，ZG006显示出毒副作用低等良好的安全性特征。       今年4月，ZG006在美国获批临床，用于治疗小细胞肺癌和其它实体瘤。       关于DLL3及其靶向药研究进展       Delta样蛋白3(DLL3)是一种附着在细胞表面的单次跨膜蛋白。人类DLL3蛋白由619个氨基酸组成，包括Delta/Serrate/LAG-2 (DSL) 结构域、六个表皮生长因子 (EGF) 样重复序列和一个跨膜结构域三部分。       DLL3是Notch通路配体家族的成员，在Notch信号传导中发挥关键作用。Notch信号通路是高度保守的细胞间信号传导通路，涉及生长发育的多个过程，如多能祖细胞的分化、细胞凋亡、细胞增殖及细胞边界的形成等。       除Notch信号通路外，DLL3还通过抑制Notch信号通路激活P13K/Akt通路。随着DLL3表达的上调，Wnt-1和Wnt-4以及Wnt靶基因Axin-2和Lef-1的表达水平均上调，这提示DLL3参与Wnt信号通路的激活。而且，研究还发现DLL3通过调节Nrarp的循环表达来调控Notch/Wnt信号通路。       DLL3主要表达于神经或者神经内分泌肿瘤，包括小细胞肺癌（SCLC）、大细胞神经内分泌癌（LCNEC）、胃肠道神经内分泌瘤（GI-NEC）、小细胞膀胱癌（SCBC）、多形性胶质细胞瘤、转移性去势性前列腺癌、肺神经内分泌瘤。尤其是SCLC，超80%的SCLC患者存在DLL3高表达，但DLL3在正常肺癌组织及癌旁组织中不表达。而且，DLL3与肿瘤的进展相关，也与临床预后较差相关。       因此，DLL3被认为是SCLC靶向治疗中具有巨大潜力的靶点之一。目前，全球针对该靶点已研发出多款新药，详见下表。在研DLL3靶向药药物类型多样，涉及双特异性抗体、三特异性抗体、抗体偶联药物（ADC）和嵌合抗原受体T细胞疗法（CAR-T）。       Stemcentrx公司的Rovalpituzumab tesirine（Rova-T）进展最快，它是一款ADC，一端为针对DLL3的IgG1单抗，另一端偶联的是细胞毒药物吡 咯并苯二氮卓(PBD)。2016 ASCO大会上公布的一项Ia/b临床研究数据显示：Rova-T在经过3线治疗且伴有DLL3高表达的10例SCLC患者中的ORR为70%，并且至少4个人的OS超过了6个月CBR为90%。而且，安全性数据显示Rova-T安全性良好。       然而，Rova-T在后续的临床试验中却表现不佳，一线治疗、二线治疗、联合化疗、联合免疫治疗接连失败。2016年4月，艾伯维斥资58亿美元收购Stemcentrx公司。2019年，艾伯维因未观察到Rova-T的临床获益，宣布停止所有关Rova-T的开发。       在研DLL3靶向药多为双特异性抗体，作用靶点主要集中在DLL3、CD3。双抗中安进的Tarlatamab进展最快，目前已进入3期临床。2022世界肺癌大会（WCLC 2022）上公布的首 个人体临床数据显示：在中位前期治疗数为2的经治SCLC患者中，Tarlatamab达到23%的ORR和52%的DCR。37%的患者肿瘤缩小超过30%，中位缓解持续时间为13.0个月，中位OS为13.2个月。       勃林格殷格翰的BI 764532也是一款DLL3/CD3靶向双特异性抗体。已披露的研究数据显示：所有接受BI 764532治疗受试者的ORR为18%，DCR为41%。其中接受≥90μg/kg BI 764532 治疗受试者的ORR为25%，且所有受试者均观察到了肿瘤的缩小，反应持续时间久。       凡恩世的PT217是一款DLL3/CD47靶向双抗，被开发用于治疗SCLC和其他神经内分泌癌。临床前研究显示：PT217在异种移植小鼠模型中显示出较好的肿瘤抑制活性，同时在NHP研究中也表现出良好的安全性。2022年6月，该药被FDA授予治疗SCLC的孤儿药资格认定。       HPN-328是Harpoon Therapeutics研发的一款靶向CD3、DLL3、ALB的三特异性抗体，拟用于治疗SCLC。2022年更新的临床数据显示：在≥1215ug/周剂量下，4例SCLC患者中有3例肿瘤病灶减少，ORR为25%，DCR为75%。而且，无3级CRS，未观察到剂量限制性毒性。       在研DLL3靶向CAT-T疗法中的LB2102使用了VHH抗体技术和克服肿瘤微环境抑制因素的“武装”CAR-T技术，携带着两个识别DLL3的VHH抗体片段，和一个能被肿瘤微环境中信号激活的跨膜蛋白。临床前体内研究显示，LB2102可以有效缩小肿瘤，而且外周血中的CAR-T细胞和浸润肿瘤的CAR-T细胞数目都显著提升。2022年11月，LB2102在美国获批临床。       总结       作为肿瘤，尤其是SCLC治疗潜力靶点，DLL3成为国内药企积极布局的靶点，但艾伯维却在该领域栽了不小的跟头。不过后续DLL3靶向药的研发还算顺利，多款药物取得不错数据。而且，在研DLL3靶向药药物类型多样，涉及单抗、双抗、ADC和CAR-T。期待未来DLL3靶向药可以早日获批上市，改变SCLC治疗现状。智药研习社近期课程报名来源：CPHI制药在线声明：本文仅代表作者观点，并不代表制药在线立场。本网站内容仅出于传递更多信息之目的。如需转载，请务必注明文章来源和作者。投稿邮箱：Kelly.Xiao@imsinoexpo.com▼更多制药资讯，请关注CPHI制药在线▼点击阅读原文，进入智药研习社~

关注并星标CPHI制药在线前段时间，再鼎医药宣布与宜联生物合作，根据协议，宜联生物将YL212项目，即新一代DLL3抗体偶联药物（ADC）的全球开发及商业化权益独家授予再鼎医药及其子公司。宜联生物将获得预付款和基于开发和销售的里程碑付款等。       YL212是以DLL3为靶点的ADC产品，基于宜联生物具有自主知识产权的TMALIN平台所开发。TMALIN平台为新型抗体偶联药物平台技术，其特点为利用肿瘤微环境来克服当前ADC药物所面临的挑战。目前YL212已展现出令人鼓舞的临床前数据。       DLL3靶点作用机制介绍       DLL3（Delta‐like canonical Notch ligand 3）是Notch通路配体家族的成员，在Notch信号传导中发挥关键作用。它是一种附着在细胞表面的单次跨膜蛋白，由619个氨基酸组成，包含1个DSL结构域、1个胞内结构域和6个表皮生长因子样结构域。       研究发现，DLL3在大约80%的小细胞肺癌（SCLC）和其他神经内分泌肿瘤中普遍表达，而在正常细胞中却极少表达。DLL3与Notch受体结合进而激活Notch通路，该通路与肿瘤细胞增殖、周期阻滞以及上皮间质转化有关。       除Notch信号通路外，DLL3还在其他信号通路中发挥作用。如DLL3通过抑制Notch信号通路激活P13K/Akt通路。随着DLL3表达的上调，Wnt-1和Wnt-4以及Wnt靶基因Axin-2和Lef-1的表达水平均上调，提示DLL3参与Wnt信号通路的激活。此外，研究还表明DLL3通过调节Nrarp的循环表达来调控Notch/Wnt信号通路。       靶向DLL3药物研发进展       目前靶向DLL3的药物有单/双抗、ADC、双特异性T细胞接合剂(BiTE)和CAR-T等。       DLL3部分候选药物研究进展       来源：公司官网，公开资料       在ADC药物研发方面，DLL3靶点可谓历尽曲折。艾伯维Rova-T的失败甚至为DLL3靶点的研发蒙上了一层阴影。       Rova-T的一端为靶向DLL3的IgG1单抗，另一端偶联了细胞毒药物吡咯并苯二氮卓(PBD)，这是全球首 个靶向DLL3的ADC候选药物。当初，艾伯维以58亿美元的价格收购了Stemcentrx公司，获得这款靶向DLL3的ADC药物。       在一项开放标签、单臂II期TRINITY研究中，旨在评估Rova-T在SCLC患者三线及以上治疗中的安全性和有效性。研究共纳入339例SCLC患者，其中DLL3高表达患者238例，DLL3阳性患者287例，其余52例患者的DLL3阴性或临床试验结果缺失。结果显示,在DLL3高表达、阳性和所有患者中，客观缓解率（ORR）分别为14.3%、13.2%、12.4%。所有患者的中位OS为5.6个月。       在二线治疗SCLC的III期试验中，Rova-T显示出了较低的应答率，并且在延长患者生存方面比传统化疗药物拓扑替康表现要差。此外，在一线化疗后测试Rova-T作为维持治疗的III期试验也不幸失败。于是，艾伯维在2018年停止了Rova-T的后续开发。       在DLL3靶点研发上折戟的还有安进的CAR-T药物AMG-119和IntoCell的ADC药物AR-081，它们的失败，一度使DLL3靶点研发陷入低谷。       希望的曙光       安进的另一款药物AMG 757，为DLL3靶点研发带来了希望的曙光。AMG 757是一款双特异性 T 细胞接合剂（HLE BiTE），经过优化后延长了BiTE分子的半衰期，可以将T细胞募集到SCLC细胞附近，激活T细胞杀伤肿瘤细胞。在小鼠模型中，AMG 757通过活化T细胞使得患者来源的异种移植物和原位SCLC 肿瘤显著消退，表明AMG 757有望成为靶向DLL3的新型SCLC免疫治疗药物。       在2021年欧洲肺癌大会（2021 ELCC）上，AMG 757展现了良好的疗效和安全性。研究共纳入52例复发/难治性SCLC患者。疗效方面，ORR为14%，疾病控制率(DCR)为37%。在确认部分缓解 (PR)的7例患者中，至疾病缓解的中位时间为1.8个月，在中位随访11.5个月的患者中，83%的患者的DoR大于6个月。此外，DLL3高表达者ORR更高，达到38%。       在2022年世界肺癌大会（2022 WCLC）上，AMG 757在经过2线治疗的SCLC患者中，ORR为23%，DCR为52%，37%的患者肿瘤缩小超过30%，中位缓解持续时间为13个月， 中位OS为13.2个月。       传奇生物的LB2102是一款靶向DLL3的CAR-T产品。它携带着两个识别DLL3的VHH抗体片段，和一个能被肿瘤微环境中信号激活的跨膜蛋白。临床前体内研究显示，这一疗法与传统CAR-T疗法相比，更有效地缩小肿瘤，而且外周血中的CAR-T细胞和浸润肿瘤的CAR-T细胞数目都显著提升。       总的来说，当前针对DLL3靶点的药物研发还处于早期阶段，候选药物数量不多，且适应症多集中在SCLC这一存在较大未满足需求的肿瘤领域。SCLC约占肺癌病例的15%左右，其增殖迅速，且易在早期发生广泛转移，大多数SCLC患者5年生存率仅3%。除了铂类-依托泊苷这一一线化疗方案外，几乎没有其他治疗选择，而且几乎所有患者在接受化疗治疗后不久就会复发。因此SCLC迫切需要新的治疗方案，DLL3靶点一旦验证成功，其市场空间将不可估量。       参考来源：       1. Morimoto M, Nishinakamura R, Saga Y, Kopan R. Different assemblies of notch receptors coordinate the distribution of the major bronchial Clara, ciliated and neuroendocrine cells. Development.2012;139(23):4365-73.2. https://www.acrobiosystems.cn/A4804-.html.3. Amgen WCLC 2022 Oncology Update Presentation. Retrieved August 8, 2022, from https://investors.amgen.com/static-files/7034c3a9-179f-48c6-a385-be461b67118e.       【企业推荐】智药研习社近期课程报名来源：CPHI制药在线声明：本文仅代表作者观点，并不代表制药在线立场。本网站内容仅出于传递更多信息之目的。如需转载，请务必注明文章来源和作者。投稿邮箱：Kelly.Xiao@imsinoexpo.com▼更多制药资讯，请关注CPHI制药在线▼点击阅读原文，进入智药研习社~