galectin-9

本文为转化医学网原创，转载请注明出处 作者：Sophia 导读： 肿瘤起始细胞（TICs）的恢复力和免疫抑制微环境是侵袭性致癌表型，导致肺腺癌 （LUAD） 患者的长期结局不令人满意。介导TICs与免疫耐受之间相互作用的分子机制尚未阐明。半乳糖凝集素-9在肿瘤发生和免疫抑制微环境中的作用仍然未知。 2024年3月25日，香港大学研究人员联合中山大学研究人员共同在《Advanced Science》上发表题为“The Dual Role of the NFATc2/galectin-9 Axis in Modulating Tumor-Initiating Cell Phenotypes and Immune Suppression in Lung Adenocarcinoma”的研究论文， 研究结果表明，半乳糖凝集素-9在TIC调节和免疫抑制中起着双重作用，并表明它是消除LUAD肿瘤恢复力和释放免疫抑制的潜在治疗靶点。 https://onlinelibrary.wiley.com/doi/full/10.1002/advs.202306059 研究背景 01 肺癌是最致命的恶性肿瘤，占全球所有癌症死亡人数的18%。尽管引入了靶向治疗，但晚期癌症的治疗失败很常见，需要新的治疗方法。耐药性和侵袭性生长特性的获得被认为是由于选择一组表现出增强的运动性、转移性、恢复力和存活率等的细胞，称为癌症干细胞或肿瘤起始细胞 （TIC）。 通过维持这种弹性的分子机制靶向TIC可能是改善治疗结果的合理策略。 研究进展 02 为了研究半乳糖凝集素-9 是否参与维持肿瘤干性，我们首先使用2种替代标记物比较了 TICs 和非TIC之间的表达，即细胞形成肿瘤球体的能力和肺癌干细胞标志物 ALDH 和 CD44 （ALDH/CD44） 的高水平共表达。与单层相比，肿瘤球体在转录本（LGALS9）和蛋白质水平上都表现出更高的半乳糖凝集素-9 水平（图 1A、B）。与ALDH/CD44共表达水平最低的非TIC亚集相比，ALDH/CD44 TIC亚集观察到类似的结果（图1C）。为了研究半乳糖凝集素-9 是否在功能上参与支持 TIC，生成了 HCC827 和 H1975 细胞的 LGALS9 敲除 （Gal9-KO） 克隆（图 1D），并通过在 H1975 细胞中过表达 LGALS9 进一步挽救了半乳糖凝集素-9 的表达。Gal9-KO导致球体形成显著抑制，但这种作用通过过表达半乳糖凝集素-9（Gal9-KO / OE）而逆转，如H1975细胞所示（图1E）。此外，对于表现出相对较低的半乳糖凝集素-9水平的A549细胞，通过基于CRISPR的SAM系统（Gal9-SAM）内源性过表达半乳糖凝集素-9导致增强的球体形成（图1D，F）。HCC827 细胞中的半乳糖凝集素-9 敲除也导致 ALDH/CD44 TIC 比例的抑制，而 A549 细胞中过表达半乳糖凝集素-9 导致 ALDH/CD44 TIC 增加（图 1G，H）。此外，为了阐明球体数量的变化是否是由于细胞增殖状态的改变，使用了 BrdU 测定， 结果表明 HCC827、H1975 和 A549 细胞的增殖速率没有因半乳糖凝集素-9 敲除或过表达而显著改变，这表明半乳糖凝集素-9 主要影响评估的 LUAD 细胞的干性而不是增殖（图1I）。 接下来，评估半乳糖凝集素-9对肿瘤转移、癌症耐药性和肿瘤发生的影响。半乳糖凝集素-9敲除的HCC827和H1975细胞显示出抑制细胞迁移的能力，以及对吉非替尼和顺铂治疗的致敏，而H1975中半乳糖凝集素-9表达的挽救逆转了这些抑制作用。相反，A549细胞中半乳糖凝集素-9的过表达促进了迁移和顺铂耐药性（图1J-N）。为了证明半乳糖凝集素-9的体内作用，使用限制稀释测定法评估肿瘤发生。具有 Gal9-KO 的 HCC827 细胞显著减少肿瘤发生，延长无肿瘤生存期，并导致肿瘤植入失败，观察 5000 个细胞 3 个月（图 1O）。相比之下， 具有Gal9-SAM的A549细胞的肿瘤发病率显著增加，TIC频率更高，无肿瘤生存期更短（图1P）。总体而言，这些结果表明半乳糖凝集素-9在支持LUAD的TIC表型中起着功能作用。 半乳糖凝集素-9支持肺腺癌的TIC表型。 研究结果 03 本研究探讨了半乳糖凝集素-9 在 LUAD 的 TIC 调节和免疫调节中的潜在作用。结果表明，半乳糖凝集素-9支持LUAD的TIC特性。患者来源的类器官和匹配的外周血单核细胞的共培养表明，肿瘤分泌的半乳糖凝集素-9抑制T细胞毒性并诱导调节性T细胞（Tregs）。 临床上， 半乳糖凝集素-9 在人 LUAD 中上调。半乳糖凝集素-9 的高表达预示着较差的无复发生存期，并与高水平的 Treg 浸润相关。LGALS9 是编码半乳糖凝集素-9 的基因，通过计算机模拟预测和荧光素酶报告基因测定被发现受活化 T 细胞 2 核因子 （NFATc2） 的转录调节，NFATc2 是一种先前报道的 TIC 调节因子。 总体而言，结果表明NFATc2/半乳糖凝集素-9轴在TIC调节和免疫抑制中起着双重作用。 参考资料： https://onlinelibrary.wiley.com/doi/full/10.1002/advs.202306059 注：本文旨在介绍医学研究进展，不能作为治疗方案参考。如需获得健康指导，请至正规医院就诊。 热门·直播/活动 🕓 线上｜03月28日 ▶Twist全外显子组测序应用新篇章 🕓 上海｜03月28日-30日 ▶2024（第二届）合成生物学与生物医学健康大会参会指南公布！ 🕓 上海｜06月14日-16日 ▶ 第六届上海国际癌症大会将于6月14-16日在上海举办，学科交叉，共同推进肿瘤研究与诊治多模态！ 🕓 北京｜09月20日-21日 ▶ 第五届单细胞技术应用研讨会暨空间组学前沿研讨会欢迎您的参与！ 点击对应文字 查看详情

人体会产生能够自然寻找并摧毁癌细胞的细胞，即自然杀伤（NK）细胞，它们是一类特殊的免疫细胞，可在第一时间发现并启动机体免疫防御机制，以杀死癌细胞，是公认的第一道抗癌防线。而且与过继性T细胞疗法相比，具有 更便宜、更安全、更快速 等优点。 安德森癌症中心NK细胞生物学家Katayoun表示“我们可以利用一位捐赠者，生产数百剂疫苗，真正降低了治疗成本，能够治疗更多的患者” 。 目前NK细胞的培养技术在中国、美国、日本等国都已非常成熟，关于NK细胞治疗实体瘤和血液肿瘤的多项临床研究正在如火如荼地进行中。NK细胞疗法也有望成为继CAR-T之后的新一代抗癌主角！ 天生的抗癌战士：NK细胞 NK细胞誉为“天然免疫的核心细胞”，属于 人体第三类淋巴细胞 ，约占淋巴细胞循环总数的5%~15%，也是对抗癌细胞的天生战士。 NK细胞：构建抗癌第一道防线 一方面， NK细胞会在全身血管内巡逻 ，时刻行使 免疫监视功能 ，它们能利用表面的内源性受体，第一时间发现并识别“异己”（如癌细胞、衰老细胞、感染细胞、细菌、病毒等），是 医学界公认的抵抗感染，癌症和自身免疫性疾病的第一道防线 。 另一方面，NK细胞的抗癌方式与T细胞类似，是通过 释放穿孔素和颗粒酶 ，来 杀死癌细胞 。但不同的是，NK细胞无需“别人通风报信”（即抗原递呈过程）就可完成激活，从而迅速地杀死癌变/病变细胞，这意味着 NK细胞疗法可能是一种“现成的”抗癌疗法 。 癌症患者何为要补充NK细胞？ 既然人体中天然存在NK细胞，为何还要进行外源性补充呢？主要原因如下： 1、肿瘤的生长，可能会 阻碍NK细胞在骨髓内的分化及成熟 。 2、身体中残存的NK细胞，可能会因癌细胞的侵害， 降低原有的“战斗力” ，普遍存在无法有效识别并杀灭癌细胞的情况。 综上，通过外源性补充，增强癌症患者体内NK细胞的数量、提高其杀伤能力，有助于提高治疗效果， 是治疗实体瘤和血液恶性肿瘤的一种极具潜力的方法 。下面全球肿瘤医生网小编帮大家简单盘点一下NK细胞在恶性肿瘤领域的一些亮眼成绩，以供癌友们参考。 想寻求NK细胞疗法、CAR-NK细胞疗法或其他国内外治疗新技术帮助的患者，可先将病历、近期病理检查结果等，提交至全球肿瘤医生网医学部，进行初步评估。 新型NK疗法-SNK01，让晚期铂类耐药的非小细胞肺癌患者重燃希望 2022年世界肺癌大会上，公布了“ SNK01（一款离体扩增的自体NK细胞）联合派姆单抗（Pembrolizuma），治疗非小细胞肺癌 为期2年的随访数据”。 本次研究共纳入20例（13例男性，7例女性） 既往接受一线铂类药物治疗失败 的 非小细胞肺癌（NSCLC） 患者，且PD-L1肿瘤比例评分≥1%。患者入组后，随机分为三组，即 派姆单抗单药治疗组 （6例）、 派姆单抗+SNK01低剂量组 （2×109个细胞）、 派姆单抗+SNK01高剂量组 （4×109个细胞）。 1、 总生存期（OS） ：联合治疗组的2年总生存期为 58.3% ，而派姆单抗单药组的总生存期仅为 16.7% ，显然， 联合治疗组的生存率较单药组提高了41.6% （详见图1a）！在联合治疗组中，低剂量SNK01组的2年生存率为 50% ，高剂量SNK01组为 66.7% （详见图1b）。 ▲图源“WILEY Online Library”，版权归原作者所有，如无意中侵犯了知识产权，请联系我们删除 2、 无进展生存期（PFS） ： 派姆单抗联合SNK01组的中位PFS，比派姆单抗单药治疗组更长 （详见图2a）。此外，在联合治疗组中，低剂量SNK01组（2×109个细胞/剂量）的2年PFS率为 16.7% ，高剂量SNK01组（4×109个细胞/剂量）的2年PFS率为 33.3% （详见图2b）。 ▲图源“WILEY Online Library”，版权归原作者所有，如无意中侵犯了知识产权，请联系我们删除 综上，对于一线铂类治疗失败的NSCLC患者，派姆单抗联合SNK01治疗效果，优于派姆单抗单药治疗。 NK细胞治疗肝癌后，肿瘤显著缩小，胸腹水完全消失，生存期超4年 知名杂志《Oncotargets and Therapy（肿瘤靶点和治疗）》上，报道了一例“ 晚期肝细胞癌患者接受NK细胞治疗后，令人惊喜的变化 ”。 这位59岁曾有慢性乙型肝炎病毒（HBV）病史的男性患者，于2016年6月确诊 晚期弥漫性肝细胞癌（HCC），T3N1M1（TNM分期为IV期） ，既往接受过 经导管动脉化疗栓塞术（TACE）、腹膜穿刺手术、顺铂 等治疗效果不佳。该患者在2017年3月~2018年7月间，接受了 17个疗程的NK细胞治疗 ，每疗程包括两次回输，每月进行一次。值得一提的是，他 在NK细胞治疗期间，并未接受其他治疗 。经过17个月的NK细胞治疗，该患者的治疗效果令人惊喜！主要变化如下： 1、 肿瘤标志物 ：肿瘤标志物[包括 甲胎蛋白（AFP）、癌胚抗原（CEA）、碳水化合物抗原19-9（CA19-9）、CA15-3 等]水平，是 肝癌进展的敏感标志物 。该患者在NK细胞输注过程中， 除AFP外，其他所有肿瘤标志物水平均有所改善 （详见下表）。 ▲数据源自“OncoTargets and Therapy” 2、 生活质量 ：患者的 生活质量明显提高 。EORTC QLQ-C30显示，功能维度和健康维度得分从治疗前（≤20），增加到80左右；症状维度得分从治疗前60，下降到≤10（详见下图）。 ▲图源“Dovepress”，版权归原作者所有，如无意中侵犯了知识产权，请联系我们删除 3、 影像学变化 ：CT扫描示，经过6个疗程的NK细胞治疗后，患者的 腹水和胸水明显减少 ；17个疗程后， 右肝叶的多个肿瘤尺寸显著缩小 。 图3 NK细胞治疗前后的CT扫描结果 ▲图源“Dovepress”，版权归原作者所有，如无意中侵犯了知识产权，请联系我们删除 注： 图A1~A5：CT扫描示，6个疗程后，患者胸腔积液完全消失； 图B1~B5：CT扫描示，6个疗程后，患者腹水几乎完全消失； 图C1~C5：CT扫描示，17个疗程后，患者肝右叶多个肿瘤尺寸缩小。 值得一提的是，迄今为止，该患者的 生存时间已超过48个月（即4年） ！ 不过该患者在NK细胞 治疗早期 ，多个肝癌病灶仍缓慢生长。 经过多个周期的NK细胞治疗后， 治疗1年时 患者 全身状况改善，肝功能正常，生活质量提高 。 随着治疗的继续推进，在 治疗1年零4个月后 ，患者 病情逐渐稳定、AFP显著下降、肿瘤负荷明显减轻、身体指标保持在正常水平、生活质量明显改善 。 这表明 NK细胞治疗虽会诱导肿瘤免疫反应，但可能需要一定时间，方可产生足够的免疫反应，来促进癌组织的消退 。 高度难治性霍奇金淋巴瘤，经AFM13-NK治疗后，获得完全缓解 2023年9月， AFM13（靶向激活NK细胞的双特异抗体）与AlloNK® （即AFM13/AB-101） 获美国FDA授予的快速通道指定 ，用于 复发/难治性（r/r）霍奇金淋巴瘤（HL） 的治疗，该产品也有望成为首个获批上市的NK细胞疗法。 2022年美国癌症研究学会（AACR）上，曾报道过AFM13-NK治疗高度难治性霍奇金淋巴瘤的惊艳案例。这例入组的患者为37岁男性，既往接受过包括HDC/ASCT（大剂量化疗/自体干细胞移植）、CAR-T、派姆单抗、GDP（顺铂、吉西他滨、地塞米松）、ABVD（长春花碱、博莱霉素、阿霉素、氮烯咪胺）在内的10线治疗，效果均不理想。治疗前影像学显示患者出现大面积弥漫性病变，骨骼及肺部也有病灶。幸运的是，该患者在入组接受AFM13-NK治疗后，居然奇迹地出现了 完全缓解（CR） （详见下图）！ ▲图源“AFFIMED”，版权归原作者所有，如无意中侵犯了知识产权，请联系我们删除 现货型NK细胞产品-FT516和FT596，剑指B细胞淋巴瘤 FT516和FT596是两款由 诱导多能干细胞（iPSC）衍生的“现成的”NK细胞产品 ，用于治疗 B细胞淋巴瘤 ，其中期临床研究展现出令人满意的疗效，且耐受性良好。 FT516 采用新型高亲和力、不可裂解的 CD16（hnCD16）Fc受体 设计，旨在最大限度地发挥抗体依赖性细胞毒性（ADCC），通过该机制，NK细胞可识别、结合并杀死抗体包被的癌细胞。 研究显示，入组的11例患者中，经多剂量FT516治疗后，有 8例患者实现了客观缓解（ORR） ，其中 6例患者实现了完全缓解（CR） 。这8例获得ORR缓解的患者中，有5例病情持续缓解， 中位缓解时间为5.2个月 。 FT596 FT596包含 hnCD16 Fc受体、靶向CD19的CAR （旨在实现癌细胞的多抗原靶向）、 白细胞介素（IL）-15受体 融合，以增强NK细胞的存活及活性。 FT596的1期临床研究（NCT04245722），在20例可评估疗效的患者中，有12例（60%）患者确诊侵袭性B细胞淋巴瘤、10例对既往治疗耐药、7例既往接受过自体CD19靶向的CAR-T细胞治疗。将这些患者分为两组，即FT596单药治疗组、联合治疗组（FT596+利妥昔单抗）。 结果显示：FT596单剂量第2和第3递增队列中（n=14）， 10例（71%）患者获得了客观缓解（ORR）；7例（50%）患者获得完全缓解（CR） 。既往未接受过CD19-CAR-T治疗的患者（n=10）中，有8例（80%）获得客观缓解；既往接受CD19-CAR-T治疗的患者（n=4）中，有2例（50%）经联合治疗，获得完全缓解（CR）。 温馨提示 癌症作为一种狡猾且高度突变的复杂性疾病，很难依靠单一疗法达到预期的治疗效果。理想的癌症治疗是 依托于权威医院及权威专家的规范诊断 ，在 传统治疗（手术、放化疗）的基础上 ，辅助 靶向药、免疫治疗、细胞治疗 等新型治疗手段，以巩固治疗效果、预防癌症复发、提高患者的生存质量、尽可能的延长生存期。 截至目前，手术、放化疗的三大中流砥柱地位无法撼动，但这三大传统方式也有一定的局限性，比如无法给所有癌症患者带来治愈的希望。 因此，细胞治疗、靶向药、免疫治疗等新兴疗法相继问世，以弥补传统治疗手段的不足。其中细胞免疫疗法（包括NK细胞、DC细胞等），一方面可 作为术后的辅助治疗手段 ， 更适合刚做完手术的早期或中期癌症患者 ，以增强机体免疫力、杀死术后残留的癌细胞、维持治疗效果、抑制肿瘤复发。另一方面，还可 与化疗、PD1抑制剂、靶向药等其它疗法联合应用 ，以 增加抗癌疗效 。 如果您对目前的治疗方案不满意，或想寻求NK细胞疗法等国内外其他抗癌新技术的帮助，可提交资料至全球肿瘤医生网医学部，详细评估病情。 参考资料 [1]Park HJ,et al.Two-year efficacy of SNK01 plus pembrolizumab for non-small cell lung cancer:Expanded observations from a phase I/IIa randomized controlled trial. Thorac Cancer. 2022 Jul;13(14):2050-2056. https://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1111/1759-7714.14523 [2]Hong G,et al.Progression-free survival of a patient with advanced hepatocellular carcinoma treated with adoptive cell therapy using natural killer cells: a case report[J]. OncoTargets and therapy,2022:255-266. https://www.dovepress.com/progression-free-survival-of-a-patient-with-advanced-hepatocellular-ca-peer-reviewed-fulltext-article-OTT [3]https://ir.fatetherapeutics.com/news-releases/news-release-details/fate-therapeutics-announces-positive-interim-clinical-data-its [4]https://www.affimed.com/affimed-receives-fda-fast-track-designation-for-afm13-in-combination-with-allonk-for-the-treatment-of-patients-with-relapsed-or-refractory-hodgkin-lymphoma/#:~:text=Mannheim%2C%20Germany%2C%20September%2012%2C,combination%20of%20its%20innate%20cell

本文为转化医学网原创，转载请注明出处 作者：Sophia 导读： 酪氨酸激酶抑制剂 （TKI） 在晚期结直肠癌（CRC）的靶向治疗中至关重要。安罗替尼是一种多靶点TKI，先前已在先前的研究中被证明具有治疗益处。环状RNA（circRNA）与CRC的进展有关，其独特的结构稳定性可作为有前途的生物标志物。然而，在靶向治疗时代，与circRNA相关的详细分子机制和特异性生物标志物仍然模糊不清。 2024年3月21日，上海交通大学医学院附属瑞金医院普外科赵任等研究团队在《Molecular Cancer》上发表题为“CircHAS2 activates CCNE2 to promote cell proliferation and sensitizes the response of colorectal cancer to anlotinib”的研究论文，我们的结果表明， circHAS2水平高的CRC患者与不良预后有关。安罗替尼（anlotinib）调节的circHAS2在体外和体内通过细胞周期抑制CRC细胞增殖。从机制上讲，circHAS2 充当 miR-1244 激活 CCNE2 驱动的细胞增殖的海绵，并破坏 p53 和 USP10 的结合，增加 p53 向泛素降解的核输出，并通过 p21 进一步激活 CCNE2。 https://molecular-cancer.biomedcentral.com/articles/10.1186/s12943-024-01971-7 研究背景 01 在新发结直肠癌患者中，20%的患者在诊断时有转移性疾病，25%的局限性疾病患者会发生转移。靶向治疗，如多靶点 TKI，对于治疗晚期结直肠癌很重要。在42种具有临床前抗肿瘤功效的TKIs中，只有部分患者对药物敏感。为了解决靶向治疗临床转化的困境， 研究人员一直在探索ncRNA在耐药机制和生物标志物中的作用。 受体酪氨酸激酶（RTK）是跨膜糖蛋白，在血管生成中起重要作用，酪氨酸激酶抑制剂（TKIs）已成功用于治疗各种实体瘤。安罗替尼是一种新型口服小分子TKI，通过靶向VEGFR1/2/3、c-Kit、PDGFR-α、FGFR1、FGFR2和FGFR3抑制多种实体瘤的血管生成和肿瘤细胞增殖。与其他抗血管生成药物相比，安罗替尼具有广泛的抗癌作用。 正在进行的临床试验正在研究其在胃肠道肿瘤中的疗效，并进一步关注其在辅助治疗中的潜力。 研究结果 02 我们的研究结果表明，安罗替尼对高 circHAS2 水平的 CRC 患者具有特异性益处。一项临床研究（ALTER-C001）表明，安罗替尼联合XELOX方案用于一线治疗和维持治疗，对转移性CRC患者有适度的获益。基于我们的临床前数据，我们在瑞金医院（ClinicalTrials.gov 注册号：NCT05262335）启动了一项临床试验，以评估安罗替尼联合XELOX方案在晚期胃肠道肿瘤患者中的疗效和安全性。CircHAS2 表达水平被用作分层标准，以探索晚期 CRC 患者的治疗反应（图 8A）。利用包含 70 个 CRC 标本的组织样本库，52.9% 的CRC病例表现出高 circHAS2 水平（图 8B）。在基于安罗替尼的化疗之前、期间和之后进行非侵入性成像和血清肿瘤标志物评估，以评估治疗反应（图 8C）。 目前，14例已接受治疗的晚期结直肠癌患者，7例被归类为circHAS2高表达。已经汇编了患者的临床信息和基因突变细节。值得注意的是，计算机断层扫描显示 A 组队列的原发肿瘤大小显著减少（图 8D） 。与低表达circHAS2的B组队列相比，A组表现出更高的肿瘤缓解率，疾病控制率（DCR）为100.0%，总缓解率（ORR）为57.1%（图8E）。所有级别治疗中出现的不良事件 （TEAE） 的总发生率为 71.4% （10/14），≥ 3 级 TEAE 的总发生率为 28.5%。主要事件包括中性粒细胞计数减少（14.2%）、血小板计数减少（14.2%）、手足皮肤反应（14.2%）和高血压（7.1%）。 值得注意的是，血清肿瘤标志物CEA、CA125和CA19-9的减少与CRC的良好预后密切相关，特别是在特定的A组患者中，与良好的预后一致（图8F）。从这个意义上说，我们初步的PDO和PDX模型显示出很强的治疗反应性，可以作为人类状况的强大代理。鉴于肿瘤负荷的减少与患者的生存预后密切相关，我们的初步临床反应可能预示着有利的长期生存结果。 基于circHAS2表达的安罗替尼治疗的临床反应 研究结论 03 综上所述， 本研究揭示了安罗替尼对结直肠癌的抑制作用。CircHAS2 不仅通过传统的 ceRNA 机制上调 CCNE2，而且还破坏 USP10 和 p53 之间的结合，从而增加 CCNE2 的表达。 这可以为安罗替尼调节的circHAS2在抑制CRC增殖中的双向调节作用提供全面的概况。circHAS2 高表达的患者对安罗替尼更敏感，使其成为靶向治疗的潜在分子生物标志物。 参考资料： https://molecular-cancer.biomedcentral.com/articles/10.1186/s12943-024-01971-7 注：本文旨在介绍医学研究进展，不能作为治疗方案参考。如需获得健康指导，请至正规医院就诊。 热门·直播/活动 🕓 上海｜06月14日-16日 ▶ 第六届上海国际癌症大会将于6月14-16日在上海举办，学科交叉，共同推进肿瘤研究与诊治多模态！ 🕓 北京｜09月20日-21日 ▶ 第五届单细胞技术应用研讨会暨空间组学前沿研讨会欢迎您的参与！ 点击对应文字 查看详情