TRADD

TNF是诱导肠上皮细胞(IEC)死亡和实质性肠道炎症的一种致病驱动因子。如何调节IEC死亡以生理上预防肠道炎症还有待进一步研究。 2024年2月12日，中国医学科学院/北京协和医学院/南开大学曹雪涛团队在Nature Communications在线发表题为”EFHD2 suppresses intestinal inflammation by blocking i在溃疡性结肠炎患者的肠活检样本中表达降低，保护肠上皮免受TNF诱导的IEC凋亡。EFHD2抑制TNF诱导的原发性IECs和肠类器官(enteroid)的凋亡。 IECs中缺乏Efhd2的小鼠表现出过度的IEC死亡和加重的实验性结肠炎。机制上，EFHD2与Cofilin相互作用，抑制Cofilin磷酸化，从而阻断TNF受体I (TNFR1)内化，抑制IEC凋亡，从而保护肠道免受炎症。总之，该研究发现加深了对EFHD2作为膜受体运输的关键调节因子的理解，为死亡受体信号和自身炎症疾病提供了见解。 炎症性肠病(IBD)，包括克罗恩病(CD)和溃疡性结肠炎(UC)，是一组以肠道屏障破坏和严重肠道炎症反应为特征的胃肠道慢性炎症性疾病。完整的上皮和粘膜屏障共同维持肠道屏障的完整性和结肠稳态。然而，IBD患者肠上皮细胞(IEC)的过度死亡反而加重了上皮屏障的缺陷和紊乱，导致大量和持续的肠道炎症，最终推进肠道癌变。 TNF作为一种多效性的促炎细胞因子，被认为是肠上皮细胞死亡的主要驱动因素，临床上对IBD患者阻断TNF已取得临床效益。在TNF刺激下，TNFR1通常会招募TRADD和RIPK1在质膜上形成复合物Ι，介导NF-κB信号传导。一旦TNFR1复合体Ι被网格蛋白介导的内吞作用内化，RIPK1的去泛素化和降解导致复合体Ι解离并形成复合体ΙΙ，最终诱导细胞凋亡。最近的一项研究表明，ATG9A通过靶向LC3不依赖的细胞毒性复合物ΙΙa的溶酶体降解，作为TNF诱导的细胞凋亡的检查点。因此，受体内化和内体运输在TNFR1介导的细胞死亡信号的启动和终止中是必不可少的。 事实上，细胞因子、趋化因子或细胞死亡因子的免疫受体的膜易位和内体运输在各种生物过程中被证实是重要的，但在免疫反应和炎症的控制中仍被低估。另一项研究揭示了IFNAR内吞和内体分选对IFN-α和IFN-β差异激活JAK-STAT信号的时空调节机制。然而，在IECs中，TNFR1等细胞死亡受体的膜运输中是否存在抑制分子机制仍有待进一步研究。 EF-hand结构域蛋白D2(又称Swiprosin-1)是一种钙结合蛋白，具有两个保守的EF-chiral coil -coil结构域，主要参与钙信号转导、细胞骨架组装和突触形成。EFHD2在各种细胞类型中广泛表达，在神经元中表达量特别高。因此，对EFHD2病理作用的研究主要集中在行为病理学、神经系统疾病和神经退行性疾病上，强调了EFHD2在调节膜相关蛋白的膜-细胞质运输中的作用。在细胞内细菌感染时，EFHD2可以与磷酸化的IFN-γ R2相互作用，促进IFN-γ R2从高尔基体转运到巨噬细胞的细胞膜，从而促进随后的先天反应中的IFN-γ信号传导。因此，进一步探索EFHD2对膜受体转运的调控将更好地理解免疫和炎症的控制。 除免疫组织和神经组织外，Efhd2也在结肠和十二指肠中大量表达。初步实验表明，EFHD2在IECs中的表达相对较高。因此，研究人员想知道EFHD2在肠道病理过程中的潜在功能。该研究发现EFHD2是一种内源性的上皮细胞死亡抑制因子，通过抑制TNFR1的内吞作用来抑制TNF介导的死亡信号。该研究发现EFHD2可以抑制TNF诱导的原发性IEC、肠类器官(enteroids)和肠上皮细胞系的凋亡。小鼠IECs中缺乏EFHD2可引起体内更严重的实验性结肠炎肠道症状。该研究发现加深了对EFHD2作为膜受体运输的关键调节因子的理解，为死亡受体信号和自身炎症疾病提供了见解。 原文链接 https://www.nature.com/articles/s41467-024-45539-x 内容来源于网络，如有侵权，请联系删除。

关键词TL1A；研究进展；炎症性肠病TL1A，全称TNF配体相关分子1A，也称为血管内皮生长抑制因子（VEGI）和肿瘤坏死因子超家族成员15（TNFSF15），是人类第9号染色体的TNFSF15基因编码的蛋白质。作为一种2型跨膜蛋白，TL1A与TNF家族的其他成员类似，形成由β夹心组成的稳定非共价同源三聚体结构。TL1A最初以膜结合形式（mTL1A）存在，随后在金属蛋白酶切割作用下，以可溶性蛋白（sTL1A）释放行使功能。TL1A的作用机制TL1A主要由内皮细胞表达，如脐静脉内皮细胞(HUVECs)、单核细胞、巨噬细胞、树突状细胞（DC）、T 细胞、软骨细胞和滑膜成纤维细胞，其中HUVECs表达量最高。TL1A的表达可在TNF-α、IL-1和PMA等促炎细胞因子的刺激下进行上调，其中巨噬细胞中过表达TL1A能促进TNF-α和IL-1β的分泌，免疫复合物刺激单核细胞增加对TL1A的分泌，以增强T细胞的免疫反应。TL1A激活并促进DC的迁移，加剧炎症反应。研究表明，TL1A能够促进肿瘤细胞的凋亡，抑制血管内皮细胞生长、刺激淋巴内皮生长、T细胞活化及促进树突状细胞成熟，在维持血管、淋巴管稳态和控制炎性反应等方面发挥重要的作用。此外，TL1A还可通过抑制血管生成进而抑制肿瘤生长。死亡受体3（DR3）是TL1A在血管内皮细胞和淋巴内皮细胞的唯一受体，参与细胞凋亡过程和免疫反应，刺激细胞因子如IL-25，IL-33的产生。TL1A通过结合DR3，会激活TRADD、TRAF2、RIP及c-IAP1等蛋白形成信号复合体进而打开下游信号通路，对适应性免疫细胞产生多种作用，增加自然杀伤细胞（NK细胞）中干扰素γ（IFN-γ）的产生以及NK细胞对靶细胞的细胞毒性，影响辅助性T细胞、调节性T细胞、B细胞等不同免疫细胞的活化、增殖、分化。此外，TL1A和DR3还可共同刺激ILC2产生IL-5和IL-13，参与过敏性肺部炎症的发展过程。ILC3是调节肠道免疫的关键蛋白，DR3信号通路的激活可导致ILC3功能失活，引起肠道炎症。TL1A/DR3信号通路在自身免疫和炎症性疾病中发挥关键作用，抑制TL1A有望用于治疗自身免疫性疾病和炎症性疾病。全球多款在研，最快进入3期临床目前全球已研发出几款在研TL1A抑制剂，如PRA023、RVT-3101、TEV-48574和AMG 966，其中前几款均是TL1A靶向单抗，仅AMG 966是一款TNFα/TL1A靶向双抗。全球部分在研TL1A抑制剂资料来源：药渡数据库RVT-3101RVT-3101（研发代号：PF-06480605）是一款TL1A靶向全人源单克隆抗体，通过抑制TL1A靶向炎症和纤维化途径，目前其针对UC的临床试验已进入3期阶段，针对CD的临床试验处于2期阶段。2023年6月，Roivant Sciences宣布RVT-3101在治疗UC的2b期临床试验中获得积极长期结果：接受3期临床试验预期剂量治疗的患者，在56周时临床缓解率达到36%，比14周（29%）时进一步提升。获得内镜改善的患者比例在56周时达到50%，比14周（36%）时也有大幅度提高。RVT-3101最初由辉瑞开发。2022年12月，辉瑞宣布与Roivant Sciences成立一家名为Vant的新公司，专门聚焦于RVT-3101的开发和商业化。据协议，Vant拥有RVT-3101在美国和日本的商业权利，辉瑞拥有Vant 25%的股权，在美国和日本以外地区享有RVT-3101商业权利，并在公司董事会中拥有代表权。近日，据《华尔街日报》报道，Roivant Sciences或将向罗氏出售RVT-3101，交易价值可能超过70亿美元。PRA023PRA023是Prometheus Biosciences开发的一种IgG1人源化单克隆抗体，能有效结合和中和TL1A的活性三聚体形式和非活性单体形式，以实现更稳定的靶标结合，被开发用于治疗溃疡性结肠炎（UC）、克罗恩病（CD）和系统性硬化症相关的间质性肺部疾病（SSc-ILD）。2023年4月，默沙东与Prometheus Biosciences达成最终协议。据协议，默沙东将通过其子公司以每股200美元的价格现金收购Prometheus Biosciences，对应收购总价约为108亿美元。2022年12月，Prometheus Biosciences宣布PRAO23治疗CD和UC的两项2期临床研究ARTEMIS-UC和ARTEMIS-CD取得积极结果。ARTEMIS-UC研究旨在评估PRA023对常规或先进治疗失败的中重度活动性UC患者的疗效和安全性。数据显示：接受12周治疗后，PRA023组临床缓解率为26.5%（vs安慰剂组的1.5%），内窥镜检查改善率为36.8%（vs安慰剂组的6.0%）。而且，与安慰剂组相比，PRA023组临床响应率提高了近44%（22.4% vs 66.2%）。APOLLO-CD 是一项为期12周的开放标签2a期研究，旨在评估对常规或生物治疗失败的中重度活动性CD患者的安全性和有效性。数据显示，49.1%的患者实现缓解（vs 安慰剂组的16%），26.0%的患者实现内窥镜反应（vs 安慰剂组的12%），而且在治疗第一周就观察到显著疗效。安全性方面，PRA023 表现出良好的耐受性，无SAE以及药物相关AE。TEV-48574TEV-48574是梯瓦开发的一款TL1A靶向靶向单抗，2022年其针对哮喘的临床试验错失主要终点，今年其针对UC和CD的2期临床试验已进入启动。此外，梯瓦还在开发该药物的皮下注射剂型。AMG 966AMG 966是安进开发的一种双特异性异种免疫球蛋白分子，可结合肿瘤坏死因子α (TNFα) 和TL1A。此前在Frontiersin Immunology期刊发表的数据显示：在健康志愿者的首次人体临床研究中，AMG966治疗组中54名受试者中有53名（98.1%）可产生抗药抗体（ADA）。TL1A是肠道炎症的关键介质，可通过Th1和Th17等细胞增加其受体DR3的表达，以促进炎症，同时还可直接激活成纤维细胞，调节纤维化通路。目前，全球药企已研发出几款在研TL1A抑制剂，它们多被开发用于治疗炎症性肠病。研发进度上，RVT-3101进展最快，目前已进入3期临床。据Grand Viewer Research 报告，2018年炎症性肠病整体市场规模为159亿美元，预计2026年将增长到224亿美元，年复合增长率为4.4%。TL1A作为炎症性肠病药物研发的新靶点，未来值得期待。END👇关注药渡数据媒体矩阵

2022年8月2日维泰瑞隆完成了2亿美金B轮融资，基于RIPK1的多款产品是其目前进展最快的管线。维泰瑞隆官网在此之前，5月2日，德纳利(DNLI）与 赛诺菲(Sanofi）合作开发的用于治疗肌萎缩侧索硬化症（ALS）的SAR443820（DNL788）开始了Ⅱ期临床研究。SAR443820 是RIPK1的中枢神经系统 (CNS) 渗透性小分子抑制剂。RIPK1是炎症和死亡信号传递的重要介质，是神经退行性疾病、自身免疫性疾病和炎症等多种疾病治疗的有效靶点之一。RIPK1简介RIPK1是人类疾病中对刺激做出反应的调节因子，它能够在细胞生存与死亡之间做出决定，参与调控细胞炎症、凋亡、坏死过程。通路：在TNFα的刺激下，RIPK1与TRADD、TNFR1死亡结构域结合，迅速被招募到复合体1（Complex 1）中，通过泛素化、磷酸化等一系列PTM，激活下游NF-κB的生存或者死亡信号。RIPK1蛋白结构分为三个部分：C端死亡域：介导与其他含有死亡结构域的蛋白质，如FADD，TNFR1和Fas的同源二聚和异源二聚。N端激酶域：末端激酶结构域介导反式蛋白的自磷酸化以促进其自身的激活。中间域：包含RIP同型相互作用基序（RHIM）。功能：RIPK1具有双向作用：一方面，RIPK1作为结构支架，能够促进NF-κB通路激活，促进细胞生存、抑制凋亡；而另一方面作为激酶，可以促进细胞死亡和炎症。相关疾病RIPK1及其调控基因突变会导致多种疾病，包括自身免疫疾病、自体炎症、神经退行性疾病等。以下基因直接参与调控RIPK1活性，在自身免疫和自体炎症中发生突变。TNFAIP3：编码A20，通过调节RIPK1、TRFF6、NEMO等关键信号的泛素化，限制TLR和TNF诱导的炎症反应。IKBKG：编码的NEMO是IKKα、IKKβ组成的支架亚单位，在NF-κB通路的激活中起关键作用。TNIP1：编码的ABIN1与线性泛素链结合，与A20相互作用，通过NF-κB通路调节先天免疫反应。TNIP1突变会造成炎症反应，通过抑制RIPK1能够减轻炎症反应而不影响宿主正常免疫功能。OTULIN：是一种M1泛素链的去泛素化酶，OTULIN突变患者会有强烈的炎症特性，最终会激活细胞程序性坏死。LUBAC复合体：由HOIP、HOIL1、Sharpin组成，LOF和HOIP、HOIL1亚型突变会出现免疫缺陷和自身免疫炎症性疾病。基因突变造成的疾病：IBD：炎症性肠病A20表达升高和减少都与IBD相关，同时ATG16L1也是IBD危险因素。银屑病：银屑病中TNFAIP3和A20蛋白水平的降低可能与疾病严重程度降低相关，同时也可作为预测TNF治疗疗效临床标志物。RA：类风湿关节炎患者TNFAIP3表达降低。MS：多发性硬化症TNFAIP3高表达。SLE：系统性红斑狼疮存在TNFAIP3和TNIP1的多个独立的核苷酸多态性。介于RIPK1在细胞凋亡中的作用，神经退行性疾病也与RIPK1高度相关：ALS：脊髓侧索硬化症FTD：额颞叶痴呆存在OPTN、TBK1两个基因LOF (loss-of-function) 突变。OPTN缺失或功能减弱，导致RIPK1降解减少；TBK1单倍剂量不足，导致RIPK1过度激活。AD：阿尔兹海默病观察到RIPK1/RIPK3-MLKL激活增加，可能引起AD中的神经炎。RIPK1可能控制多种神经退行性疾病和衰老相关的神经炎性通路。PD：帕金森LRRK2表达上调，通过RIPK1依赖机制导致细胞凋亡。多种疾病都与RIPK1激酶属性的异常激活相关，因此RIPK1抑制剂就成为人类疾病治疗中的开发靶点。药物研发进展RIPK1抑制剂已进入人体临床试验，用于神经退行性疾病、自身免疫病、溃疡性结肠炎、类风湿等疾病治疗。相比TNFα抑制剂，RIPK1在CNS中的安全性高、参与更广泛的促炎症活性、各药物研发时间表GSK'772是第一个进入Ⅰa期临床研究的RIPK1激酶抑制剂，在溃疡性结肠炎、类风湿关节炎、银屑病的Ⅱ期临床完成后，目前正在进行更高剂量的银屑病临床试验。DNL104是第一款能够透过血脑屏障的RIPK1抑制剂，试验中展示出在CNS中抑制RIPK1具有很高的安全性。随后DNLI公司进行了DNL747、DNL758、DNL788开发。小结RIPK1抑制剂在患者身上的临床试验仍处于早期阶段，开发选择性、高效和安全的RIPK1小分子抑制剂，并可靠地衡量RIPK1激酶抑制的临床疗效和患者分层仍然是未来临床发展面临的关键挑战。参考资料https://www.globenewswire.com/news-release/2022/05/02/2433539/0/en/Denali-Therapeutics-Announces-Achievement-of-RIPK1-Milestone-for-Phase-2-Clinical-Trial-Initiation-in-ALS-by-Sanofi.htmlYuan J et al. Necroptosis and RIPK1-mediated neuroinflammation in CNS diseases. Nat Rev Neurosci. 2019 Jan;20(1):19-33. Zhang X et al. RIPK1 can mediate apoptosis in addition to necroptosis during embryonic development. Cell Death Dis. 2019 Mar 13;10(3):245. https://denalitherapeutics.com/investors/press-release?id=626