Maridebart Cafraglutide

前 言 治疗性多肽药物因其结构精巧且具有高度特异性，能够精准结合体内特定靶点，展现出重要的治疗潜力。然而，该类药物具有分子量小、半衰期短、在体内易被快速清除等特点，为了延长其半衰期，目前常用的方式除了引入非天然氨基酸、脂肪酸链以及PEG修饰之外，还可以通过将治疗性多肽与抗体Fc段融合构建为抗体多肽融合蛋白（fusion protein）或者利用化学方式将治疗性多肽偶联至抗体构建抗体-多肽偶联药物（antibody-peptide conjugates，APC）。 上述两类药物均可借助新生儿Fc受体（FcRn）介导的回收途径延长半衰期：药物被内吞进入体内后，在酸性环境中FcRn可特异性识别并结合抗体Fc段，进而将其回收并转运至细胞表面，重新释放入血液循环，从而避免被溶酶体降解，显著延长其半衰期，减少给药频率。例如，已上市的GLP-1受体激动剂度拉糖肽便采用了Fc融合策略，并通过将肽链的第八位丙氨酸替换为甘氨酸以降低被DPP-4酶水解的风险，从而大幅提升其稳定性，使药物半衰期从数分钟显著延长至约5天[1]。 随着fusion protein与APC在肥胖等多种疾病治疗中应用的日益广泛，其体内药代动力学行为，尤其是复杂转化过程的研究需求也日益凸显。这两类药物虽然结构有差异，但在生物分析方面仍有共性，为了简化称呼，此处将两类药物统称为抗体多肽偶联药物。本文将重点介绍抗体多肽偶联药物的整合型质谱分析平台：包括免疫亲和捕获与液相色谱高分辨质谱（liquid chromatography - high resolution mass spectrometry，LC-HRMS）以及液相色谱-串联质谱（liquid chromatography tandem mass spectrometry，LC-MS/MS），可全面解析此类药物在体内动态变化过程，不仅有助于深入理解其药代动力学/药效学（PK/PD）特性，也为新型药物的设计与筛选提供关键支持。 抗体多肽偶联药物的结构 抗体多肽偶联药物结合了抗体的结构稳定性与多肽的高亲和力及治疗功能，旨在提升药物的靶向特异性、稳定性与治疗效果。从结构上看，该类药物主要由以下三个部分组成： 治疗性多肽 治疗性多肽部分的设计以预期治疗功能为核心，确保其对目标靶点具备特异性结合能力和特定的生物学效应[2]。治疗性多肽来源主要包括两类：一是通过筛选随机肽库获得，例如罗米司亭（romiplostim）（结构如图1A）中的血小板生成素（thrombopoietin，TPO）模拟肽，能以高亲和力结合并激活TPO受体；二是通过人工设计获得，如AT-02（结构如图1B）中的泛淀粉样蛋白反应肽（p5R），其作用在于引导抗体结合至不同类型的淀粉样蛋白沉积物，进而通过抗体Fc区激活免疫系统，最终清除沉积物[3]。 抗体骨架 该类药物的抗体骨架主要分为两类：一是结构完整的抗体（包括天然形式与工程化改造形式），二是经基因工程改造的抗体片段（如Fc片段、scFv等）。抗体骨架不仅显著提升了整体结构的稳定性，其本身也可承担特定的生物学功能。例如，AMG133（结构如图1C）的抗体部分即为GIPR拮抗剂，该抗体骨架在增强偶联多肽血浆稳定性的同时，其拮抗活性还与多肽协同发挥减肥作用[4]。 图1. TPO拟肽类药物罗米司亭、泛淀粉样蛋白去除 (pan-amyloid removal，PAR) 候选药物AT-02和减肥药AMG133结构[2-4] 连接子 用于抗体多肽偶联的连接子（linker）主要分为三类：柔性连接子、刚性连接子和可切割型连接子。柔性连接子应用最广，可为结构域提供柔性，有利于结构域间的相互作用与运动；刚性连接子则用于维持结构域间的相对距离；可切割连接子可在体内被特定蛋白酶水解，从而释放出游离的功能结构域，以改善嵌合蛋白的生物活性（表1）[5]。 表1. 连接子种类、功能及氨基酸序列示例[5] 抗体多肽偶联药物药代动力学 考量因素 抗体多肽偶联药物的设计旨在延长半衰期并实现靶向分布[6]，从而优化其PK/PD关系。然而，许多候选药物在早期发现与开发阶段即面临疗效不足、免疫原性增强及稳定性欠佳等挑战。其多肽结构在体内易受血浆或组织中蛋白酶水解等生物转化过程的影响，导致两个主要结果： ◼︎  其一，与单克隆抗体相比，抗体多肽偶联药物的半衰期显著缩短； ◼︎  其二，与抗体偶联药物（ADC）中通常稳定的小分子毒素不同，不稳定的多肽载荷可能在抵达靶点前便丧失活性。 因此，系统开展血浆稳定性及体内药代动力学研究，以深入解析此类药物的生物转化过程至关重要。 抗体多肽偶联药物的生物 分析挑战 抗体多肽偶联药物生物分析的挑战主要来自于： 1 早期研发中，抗肽抗体（anti-peptide antibody）不易获取，传统的金标准方法的开发受限，需要质谱平台互补解决； 2 监测治疗性多肽的稳定性至关重要，需通过全面表征以明确其具体的降解位点； 3 总抗体分析时替代肽段的检测方法较为成熟，而完整APC的替代肽段方法存在可选的特征肽段极少、灵敏度优化难度大、多肽链中常引入非天然氨基酸及酶切空间位阻等多重挑战； 4 生物样品体积小，待测物浓度低等因素增加了生物分析的难度。 因此，亟需整合型的质谱生物分析平台来应对该类药物的生物分析挑战。 抗体多肽偶联药物整合型质谱 生物分析平台 抗体多肽偶联药物的生物分析需要对总抗体（total antibody）、完整APC（intact APC）、游离多肽（free peptide）和生物转化进行研究，并贯穿研究的各个阶段，单一平台无法全面表征，需要综合性的生物分析手段。 配体结合分析（ligand binding assay，LBA）是大分子定量研究领域的“金标准”，具有高灵敏度、高通量等优势，而对于APC的分析，面临所需的抗多肽抗体难获取、多肽部分空间位阻大等挑战。当无法获得关键试剂时，可以使用替代方法进行监测。随着质谱技术在大分子领域的发展，其在定量分析和结构表征方面的应用也越来越广泛。基于整合型质谱分析平台的抗体多肽偶联药物的定量和生物转化研究流程如图2所示。作为替代方法，LC-HRMS可用于开展以下研究：完整APC的定量分析、生物转化研究以及代谢产物分析。基于LC-MS/MS的替代肽段定量方法可用于分析完整APC与总抗体，不仅具备高灵敏度和高特异性，也避免了对抗多肽抗体的依赖，有助于缩短方法开发周期。 图2. 基于整合型质谱分析平台的抗体多肽偶联药物的定量和生物转化研究流程 抗体多肽偶联药物的稳定性 和PK样品生物分析案例分享 抗体多肽偶联药物的血浆稳定性是核心问题，其多肽部分的体内转化（如蛋白酶水解）直接影响疗效。本部分将分享两个基于质谱分析平台的关键案例：一是稳定性实验样品中的转化研究；二是体内样品的定量分析。 1 APC稳定性及生物转化研究 LC-HRMS 抗体多肽偶联药物在进行稳定性研究时，多肽部分的生物转化可以通过LC-HRMS监测，该方法不仅可以提供非常丰富的精确分子量信息，而且即使缺乏特异性抗肽抗体，仍可以用来定量生物样品中的intact APC。我们以上市药物度拉糖肽（dulaglutide）在小鼠血浆中的稳定性研究为例，如图3所示。随着孵育时间延长，dulaglutide（分子量62561 Da）的峰强度逐渐降低，同时依次出现了分子量分别为62366 Da（G2E3）、62172 Da（G2E3+G2E3）和59436 Da（K28G29）的峰。通过其序列信息，判断其断裂位点如下：K28G29源于肽链K28与G29之间的酰胺键断裂；G2E3则由肽链G2与E3之间的酰胺键水解生成；而G2E3+G2E3则对应两条肽链均发生了G2E3位点的水解（图3和图4）。 图3. LC-HRMS研究dulaglutide的血浆稳定性及生物转化 图4. Dulaglutide单链的氨基酸序列和结构示意图 *下划线分别是Fc和GLP-1部分的替代肽段 2 In Vivo PK样品的多域替代肽段分析 LC-MS/MS 该方法基于酶解产生的多域替代肽段（surrogate peptide），实现对抗体多肽偶联药物不同组分的精准定量。如表2所示，通过监测dulaglutide中intact APC的替代肽段（HGE）与total antibody的替代肽段（VVS）的浓度比值（HGE/VVS），可反映多肽在体内的脱落情况，当该比值随时间下降时即提示多肽部分发生脱落。图5展示了HGE和VVS替代肽段在0.1-100 μg/mL浓度范围内的LLOQ色谱图及标准曲线，两者均表现出良好的线性关系。 表2. Dulaglutide多域替代肽段分析策略 图5. HGE和VVS肽段的LLOQ（0.1 μg/mL）图谱和标准曲线 综上所述，针对不同分析物与复杂的分析需求，药明康德DMPK建立了整合型质谱生物分析平台应用于抗体多肽偶联药物的研究，包括基于免疫亲和捕获的LC-HRMS，以及超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）。综合运用全扫描和多域替代肽段分析，能够定量监测intact APC的药物浓度并判断多肽部分的断裂位点，同时通过替代肽段的比值分析追踪intact APC与total antibody的随时间变化规律，从而精准、全面地揭示抗体多肽偶联药物的复杂转化过程，深化对其临床前及临床研究中PK/PD特性的理解。 结 语 抗体多肽偶联药物的治疗优势来源于多肽与抗体功能的协同与互补，随着融合技术方法与化学偶联方法的不断创新，抗体多肽偶联药物的结构日益复杂，这对生物分析技术提出了更高要求。 药明康德DMPK凭借丰富的抗体多肽偶联药物生物分析经验，已成功搭建抗体类药物整合性生物分析平台，涵盖LBA、LC-MS/MS及LC-HRMS等体系，能够通过多维度、一体化的分析策略，完成该类药物的药代动力学与代谢转化评价。我们储备了充足的生物分析关键试剂库，开发了多种内部方法包，以缩短方法开发周期；并通过引入自动化技术，显著提升了免疫亲和捕获的效率与精密度。目前，药明康德DMPK已成功支持十余个抗体多肽融合蛋白及APC研发项目，为创新药物的研发与成功申报提供坚实的保障。 参考文献： [1]Kang L, Camacho RC, Li W, et al. Simultaneous Catabolite Identification and Quantitation of Large Therapeutic Protein at the Intact Level by Immunoaffinity Capture Liquid Chromatography-High-Resolution Mass Spectrometry. Anal Chem. 2017;89(11):6065-6075.  [2] Shimamoto G, Gegg C, Boone T, Quéva C. Peptibodies: A flexible alternative format to antibodies. MAbs. 2012;4(5):586-591.  [3]Nguyen O, Kamna D, Masri A. New therapies to treat cardiac amyloidosis. Curr Opin Cardiol. 2025;40(2):98-106.  [4]Lu SC, Chen M, Atangan L, et al. GIPR antagonist antibodies conjugated to GLP-1 peptide are bispecific molecules that decrease weight in obese mice and monkeys. Cell Rep Med. 2021;2(5):100263. [5]Chen X, Zaro JL, Shen WC. Fusion protein linkers: property, design and functionality. Adv Drug Deliv Rev. 2013;65(10):1357-1369.  [6]Camacho RC, You S, D'Aquino KE, et al. Conjugation of a peptide to an antibody engineered with free cysteines dramatically improves half-life and activity. MAbs. 2020;12(1):1794687.  （下滑查看更多） 作者：何勇静、曲栗、李陟昱、邢丽丽 编辑：富罗娜·克里木、钱卉娟 设计：张莹莹 推荐阅读 药明康德DMPK 依托在中国（上海、苏州、南京和南通）和美国（新泽西）的研发中心，提供从早期筛选、临床前开发、到临床研究阶段的综合型药代动力学服务，助力您快速推进药物研发流程。拥有上千人的研发团队，服务超1600家全球客户，具有超过十五年的新药申报经验，已成功支持超过1700个新药临床研究申请（IND）。  免责声明：药明康德DMPK团队专注于分享药物代谢与药代动力学相关领域进展和研究经验总结。本文仅作信息交流之目的，文中观点不代表药明康德立场，亦不代表药明康德支持或反对文中观点。本文也不是治疗方案推荐。如需获得治疗方案指导，请前往正规医院就诊。 版权说明：本文来自药明康德DMPK团队，欢迎个人转发至朋友圈，谢绝媒体或机构未经授权以任何形式转载至其他平台。转载授权请在「药明康德DMPK」微信公众号回复“转载”，获取转载须知。 喜欢本文就 点赞  在看 吧

全球创新药市场中国企业占了超50%，随着相关企业收入的增加，近期政策的支持也在不断落地。在当下环境下，药企的机遇主要由几个部分：1、政策层面，围绕市场化定价与支付端创新的政策框架，为创新药的研发、上市及商业化提供了良好的环境；2、市场层面，国内巨大的需求和前期孕育的药品走向前台，海外药品专利密集到期让他们利润在未来失去保护后遇到断崖式下跌，为国内创新药企业孵化出海叩开BD大门；3、技术层面，AI 等前沿技术的应用，正不断革新创新药研发的模式和效率，简单说就是研发模式变了，AI从研发到仿真大大缩短新药的研发周期，但是这个环节对于国内外的大药企都是站在一个起跑线上。 几个美股里创新药企业业绩预期 1. 礼来，Q4营收192.9亿美元（+43%）Mounjaro和Zepbound两款减肥药合计销售116亿美元（占总营收60%+）；2026年营收指引800-830亿美元（超预期777亿），EPS指引33.5-35美元（超预期33.08）； 2. 安进，Q4营收98.7亿美元（+9%），2026年营收指引370-384亿美元，并计划启动Maritide三期临床； 3. 辉瑞（PFE），2025年剔除新冠药品影响后，核心业绩增长6%，2026年业绩指引与2025年营收接近，但是受到新冠药品影响背景下，2026营收也是增长的； 创新药BD和王冠 创新药BD的收入是分节点渐进式推进的，并非拿到预付款就拿到了全部，一款新药，消耗掉药企大量资金和时间，后续还有验证及开发新产品的投入用来让企业保持活力，有一个环节出问题，或者品种出问题，计提损失非常高。据统计，创新药从靶点发现到最终获批上市的成功率仅为 0.02%，这意味着大部分的研发投入可能无法获得回报。 这个环节有多难，看一下恒瑞医药的例子，2023年7月31日‌，恒瑞医药通过合作伙伴首次向FDA提交“双艾”组合的生物制品许可申请（BLA），截止到2025年底，恒瑞医药陆续在两年半时间里两次提交被拒。今年2月2日，恒瑞医药发布公告，宣布公司收到美国FDA的《确认函》，公司重新提交的注射用卡瑞利珠单抗联合甲磺酸阿帕替尼片用于不可切除或转移性肝细胞癌患者的一线治疗的生物制品许可申请，获得FDA受理，根据美国PDUFA法案，FDA对该药品的目标审评日期为2026年7月23日，可以这样理解，恒瑞医药如期获得FDA批准，这个周期也走了三年，这还不算药品立项，研发，临床试验周期。 部分创新药企业BD在2026付款情况 1. 百利天恒，BL-B01D1 授权 BMS（84 亿美元），2026 里程碑，2.5 亿美元（≈18 亿元），上半年到账（已锁定）；2026 年预计增加收入100%； 2. 科伦药业，SKB264 授权默克（93 亿美元），2026 里程碑，3 亿美元（≈21 亿元），下半年到账；2026 年净利润预计增加15%~20%； 3. 荣昌生物，RC148 授权艾伯维（56 亿美元），2026 里程碑，6.5 亿美元（≈46 亿元），1 季度已到账（首付款）；维迪西妥单抗授权 Seagen（26 亿美元）2026 里程碑，3~4 亿美元（≈21~28 亿元）；2026 年收入预计增加 30%~40%，净利润增加20%； 4. 恒瑞医药，SHR-A1811 等授权 GSK（125 亿美元），2026 里程碑，3~5 亿美元（≈21~35 亿元）；2026 年创新药收入增加25%，净利润增加15%~20%； 5. 百济神州，泽布替尼 / 替雷利珠海外分成 + BD ，2026里程碑，2~3 亿美元（≈14~21 亿元）；2026 年总收入20%~25%； 6. 诺诚健华，奥布替尼 / ICP-488 海外授权，2026 里程碑，1~2 亿美元（≈7~14 亿元）；2026 年收入增加30%~40%，净利润增加15%； 7. 君实生物，特瑞普利单抗授权 Coherus，2026 里程碑1~1.5 亿美元（≈7~10 亿元）；2026 年收入增加20%~30%； 9. 华东医药，GLP-1/ADC 海外授权，2026 里程碑，0.3~0.5 亿美元（≈2~3.5 亿元）；2026 年净利润 + 8%~12%； 10. 艾力斯，伏美替尼海外授权，2026 里程碑，0.2~0.3 亿美元（≈1.4~2 亿元），2026 年净利润 + 10%~15%。