Abciximab

编译、撰写：丨麋鹿先生丨 感谢支持，点个星标⭐，关注一下吧！ 也可以私信发送【 入群 】，一起交流哦！ 本文将对重组抗体工程技术的进行概述。通过上下两篇文章讲清 抗体的基础知识 ，再细致剖析抗体工程设计时必须考量的 关键参数 。详尽论述各类抗体 工程改造方案 ，其中涵盖 人源化改造，抗体片段优化，多特异性抗体构建以及Fc融合蛋白开发 等内容。进而总结抗体工程领域的产业 最新进展和未来走向 。 一、抗体简史 关于抗体最早的记录可以追溯到 1890 年，埃米尔 · 冯 · 贝林（ Emil von Behring ）和北里柴三郎（ Shibasabura Kitasato ）的开创性工作。在他们的标志性论文中，首次证明了通过将免疫白喉的动物血清转移到患病个体身上，能够有效地治疗感染的动物。这一发现很快引起了学术界对人类疾病治疗应用前景的关注，贝林也因这项开创性的工作于 1901 年获得了诺贝尔生理学或医学奖。 1901年诺贝尔生理学或医学奖：埃米尔·冯·贝林 1900 年，现代免疫学奠基人之一保罗 · 埃尔利希 (Paul Ehrlich) 提出具有里程碑意义的 “ 侧链理论 ” ，其核心观点是：细胞表面侧链受体可与特定病原体特异性结合，这是首次提出抗体分子的理论模型，认为抗体为分支状结构，包含多个功能性位点，既能结合抗原（外源性物质），又能激活补体通路。 到 1959 年，杰拉尔德 · 埃德尔曼（ Gerald Edelman ）和罗德尼 · 波特（ Rodney Porter ）分别独自解析了抗体的分子结构，二人凭借这个重大成果在 1972 年一起获得了诺贝尔化学奖。 1973 年第一个抗体片段原子分辨率结构被解析出，之后乔治 · 克勒（ Georges Köhler ）和塞萨尔 · 米尔斯坦（ César Milstein ）在 1975 年取得了突破性的进展，开发出单克隆抗体制备技术。 1972年诺贝尔化学奖：杰拉尔德 · 埃德尔曼和 罗德尼 · 波特 早期的单克隆抗体是用杂交瘤细胞技术生产，这种技术把抗体分泌型 B 细胞和永生化的骨髓瘤细胞进行融合。得到的杂交瘤来源的抗体有鼠源特性，最初的临床研究中，显示出良好的前景。可是没多久就有人发现，但很快发现给病人治疗时会出现人抗鼠抗体（ HAMA ）的免疫反应，导致出现治疗用抗体被清除速率加快，而且伴随着一系列安全性问题。 重组蛋白生产技术的出现，解决了这个难题 ——1977 年第一个重组蛋白（人生长抑素）在大肠杆菌中成功表达。1978年，Genentech公司研发出第一种人源重组药——人胰岛素，并于1982年受FDA批注上市成为第一款重组技术的医药。自此，抗体工程技术进入快速发展期。 二、抗体结构与同种型 对于抗体结构，之前已有文章《 一文读懂：抗体结构 》进行阐述，详细可点击阅读，本文将不再赘述，仅进行简略概括。 抗体分子由抗原结合片段（ Fab ）和可结晶片段（ Fc ）组成功能单元， Fab 区特异性识别抗原， Fc 区介导免疫系统组分相互作用清除抗原。基本结构是两条重链和两条轻链折叠成的恒定区和可变区结构域（下图 ）。 IgG 的结构示意图：抗体由两条重链（蓝色）和两条轻链（绿色）组成，可变区结构放大图显示了 β 片层框架结构的带状图以及上面的互补决定区（ CDR ）环状结构。 可变区（ Fv ）赋予了抗体特异的抗原结合能力，而恒定区则主要起着结构支撑的作用。每个可变区内部含有三个高变环结构，也就是互补决定区（ CDRs ）。它们被均匀地分布在四个相对保守的框架区之间， CDRs 在抗体表面形成了特异性的抗原识别位点，由于 CDRs 的高度可变性，使得抗体可以识别几乎无限种类的抗原。 根据哺乳动物抗体恒定区结构域序列、铰链区构型和分子价态的差异，可将哺乳动物抗体分为五大类或同种型，分别是IgA、IgD、IgE、IgG和IgM，其中IgG（免疫球蛋白G）在正常人体血清中含量最多，最有治疗开发价值。 三、抗体应用领域 由于具有高特异性、 高选择性使抗体一直成为众多生物化学应用的核心工具。在过去的四十年里，抗体技术完全改变了生命科学领域，基础研究中的抗体是选择性检测和/或分离抗原的最佳工具，广泛应用于蛋白质印迹、流式细胞术、酶联免疫吸附测定（ELISA）和免疫组织化学（IHC）等平台。 抗体也成为很多诊断检测体系的重要组成部分，用来检测血液中的感染性病原、过敏原以及其他生物标志物，更重要的是，抗体的治疗潜力在肿瘤、自身免疫疾病等重大疾病的治疗中得到了充分的发挥。自90年代中期以来，治疗性抗体已经成为发展最快的药物类别之一，现在已有近百种抗体药物获批上市。 四、工程化参数——半衰期与分子量 在着手对任何治疗性蛋白执行工程化改良之前，务必全面考量目的分子所希望达成的特性以及其药理学效应。 特异性与亲和力是抗体筛选的核心指标毋庸置疑（可通过亲和力成熟等技术优化），但本文将聚焦于其他设计要素，需要说明的是高亲和力并不意味着越好——抗体分子价态所带来的亲合力（avidity）和亲和力（Affinity）共同决定了生物学活性。 药物半衰期（t 1/2 ） 属于关键的药代动力学参数，指的是血浆药物浓度降低一半所花费的时间。生物制剂的半衰期受到诸多因素影响，包含 分子量大小、电荷特性、稳定性、糖基化修饰情况、FcRn循环途径以及受体介导的内吞作用 等。 如果想延长半衰期，分子设计时就要保留Fc区，从而实现FcRn介导的循环作用。相反地，如果想要快速清除，则需要去除Fc区或者对Fc区进行突变处理来阻止FcRn结合。IgG类抗体在人体内的半衰期比较长，一般为数周，但是抗体片段的半衰期就短很多，只有数小时。 当分子量小于肾滤过阈值（约为70kDa）时，就会通过肾脏快速滤过清除 。 延长半衰期的策略可以减少给药频率并且维持/提高疗效，如：白蛋白融合或聚乙二醇（PEG）化修饰增加分子量；在Fc区CH2-CH3结构域引入突变以延长IgG抗体血浆半衰期。需要强调的是分子量同样会影响治疗性蛋白对实体瘤的渗透能力，在设计时要 兼顾最佳渗透性和最佳半衰期之间的平衡 。 五、工程化参数——Fc效应功能 如果要发挥抗体依赖的细胞毒性(ADCC)、补体依赖的细胞毒性(CDC)等免疫效应作用，那么就要保留Fc受体结合能力的Fc区（一般为人源IgG 1 Fc区）。对于Fc工程化改造来说，可以选择增强型突变提高结合力。 如果想避免激活免疫系统，就要去除Fc区或者用无/低Fc受体结合活性的Fc突变体。传统的方案用人源IgG4 Fc区，但是IgG4在体内会发生Fab臂交换，也就是IgG4分子之间的重链相换， 所以近几年开始被改良型IgG1突变体所取代 。有很多关于IgG1的突变可以完全阻止Fc受体的结合，下图列出了影响效应功能的关键氨基酸位点。 Fc效应功能工程改造。人类IgG1Fc结构域与Fcγ受体III(FcγRIII，PDB1T83)复合物的结构示意图，Fc结构域以蓝色带状示意图表示，糖基化修饰用橙色表示，FcγRIII采用透明空间填充模型。红色标记部分展示的是为了增强Fc效应功能(A)和消除与Fc受体相互作用(B)而进行工程改造的特定氨基酸残基。 六、 工程化参数—— 可生产性 可生产性包括 表达滴度、聚集倾向、长期稳定性、溶解度 等。抗体药物要走向临床，需要对工程化改造提高其大规模生产可能性，保证工程化的抗体具有 高表达量和低聚集性 。 传统研发流程常常在最后时刻才考虑可生产性问题，造成项目由于生产成本过高或者无法生产的缘由而结束 。现在行业趋向重视在 研究起始阶段就加入可开发性的考量 ，在分子设计层面提前处理掉以后生产环节可能出现的瓶颈状况，以此改进研发效率并减小后期危险。 七、抗体人源化技术 鼠源单克隆抗体的成功促使美国FDA于1986年批准第一个治疗性抗体药物OKT3（Muromonab，莫罗单抗）用于抑制肾移植排斥反应。但临床实践发现：鼠源抗体在人体内血清半衰期短、不能激活人体效应功能，并且会被患者的免疫系统识别为异源蛋白产生人抗鼠抗体（HAMA），明显地限制了其应用价值。 为减少免疫原性， 基因工程技术被用于 构建嵌合抗体——保留鼠源可变区以保持抗原特异性，同时替换为人源恒定区。该技术进一步发展为将鼠源互补决定区（CDRs）移植到人源框架区，由此诞生人源化抗体。 1996年FDA批准第一个嵌合抗体药物ReoPro（abciximab，阿昔单抗），通过靶向血小板表面受体降低心血管疾病患者血栓风险，1997年首个全人源化抗体药物Zenapax（Daclizumab，达利珠单抗）获批上市，靶向CD25分子预防器官移植排斥反应。 随着技术演进， 减少鼠源成分以降低免疫原性的研发理念促使产生了全人源抗体技术 ，其核心技术突破在于： 利用大肠杆菌表达系统高效表达分离的人源可变区基因 。目前主流的全人源单抗制备技术主要有： 噬菌体展示技术 （构建人源抗体文库并在噬菌体表面表达，筛选扩增获得目标抗体）和 携带人源抗体基因组的转基因小鼠技术 。 如下图所示，系统展现了鼠源抗体、嵌合抗体、人源化抗体和全人源抗体的结构演变路径。 抗体的渐进式人源化，该示意图呈现了从全鼠抗体（用红色结构域表示）到全人抗体（用蓝色结构域表示）的过程。 八、抗体片段化技术 相比于全长抗体，不含Fc区域的抗体片段具备许多优点。 小分子量或许能更好地渗入实体瘤组织 ； 较短的半衰期特性使其成为放射性显影剂 应用的理想选择。而且，抗体片段 没有Fc介导的效应功能 ，在那些不需要抗体同免疫系统相互作用的场景（比如信号分子或者受体阻断治疗），就有着特别的应用价值。 从20世纪初，研究者们就开始尝试用两种特定的蛋白酶对IgG进行酶切消化处理。其中一种（ 胃蛋白酶 ）是作用于 二硫键连接处的铰链区域 ，从而产生出含有两个抗原结合位点的二聚体Fab片段（也就是F(ab')2），另一种（ 木瓜蛋白酶 ）则是切割在 二硫键上方的位置得到单体Fab片段 。这两种方法在实验室小范围内确实可行，但是由于需要复杂的纯化步骤以及较高的成本，在大规模治疗性生产上却很难实现推广使用。 随着抗体工程技术的进步，研究人员尝试利用重组技术来制备抗体片段。在这个过程中，三大基础片段成了各种改良结构的构建模块： 重组Fab片段 比酶切法得到的Fab要纯净得多，并且具有明确的结构； 单链可变区片段（scFv） 是IgG最小稳定的活性部分，它是由一个可变重链结构域和一个可变轻链结构域通过一段灵活的连接肽共价相连形成的； 单域抗体（dAb） 则没有轻链，其分子量只有大约15kDa，这是目前所知的最小型的结合单元。这种类型的抗体天然地存在于骆驼科动物以及鲨鱼等软骨鱼类体内，相比传统的鼠源和人源抗体来说，它们的互补决定区（CDR）有更长的环状区域。 通过将Fabs、scFvs和dAbs与Fc结构域不同组合，其中含有或不含有Fc的情况都有，这样就可以形成多种多样的抗体片段，如下图所示是目前已有的报道中各种主要类型的抗体片段以及其结构示意图。 一些工程抗体片段 未完待续…… 参考：1. Guide to Recombinant Antibody Engineering White Paper ；absolute antibody 2. THE NOBEL PRIZE Press ▼

BiotechJK是一个非营利性技术组织，成立于2016年，创始人为吴文哲，初心是为了解决生物制药相关技术问题，关注行业发展动态。 当下生物制药行业主题较多，但缺乏针对技术问题的深入探讨。BiotechJK在线上建立微信群讨论交流的基础上，定期组织线下技术交流活动。 交流活动汇聚广大英才，针对工作的痛点，明晰法规内的模糊条款，讨论并梳理出业内认可的共识性意见，在其基础上能梳理出行业内的指导性文件，并成立相关资料库，服务生物制药行业。  使 命  技术降低成本，科技改变生活  愿 景  行业技术标杆，标准引领全球  提 倡  创新、合作、共享、互赢 如有不同观点，可以在下方评论区发表见解 02   ——— Fab的表达 在基因工程抗体中,Fab类抗体有许多优势,如相对分子质量小、组织分布特异性强和免疫原性低等,使Fab类抗体成为近几十年来的研究热点。在已上市应用于临床的Fab片段药物及诸多临床前研究中,制备Fab的常用方法是酶消化法;在Fab的诸多表达系统,如细菌、酵母、哺乳动物细胞、昆虫和植物表达系统中,应用最为广泛的是大肠杆菌(E.coli)表达系统。 2.1 Fab的酶法生成制备 酶解法是通过特定的蛋白酶对全长的抗体分子进行水解从而获得期望的片段抗体。该方法制备片段抗体的特点是生产成本低、转化率高、工艺简便、便捷快速。目前,用于酶切抗体的酶主要包括木瓜蛋白酶、胃蛋白酶和无花果蛋白酶,其中木瓜蛋白酶消化IgG抗体是用于获得Fab最传统的方法。FDA批准并应用于临床的多数Fab类药物均是通过木瓜蛋白酶消化IgG所获得的。比如阿昔单抗(abciximab)、阿西莫单抗(arcitumomab)、响尾蛇多价免疫Fab和地高辛免疫Fab。基因工程抗体的出现使抗体生产得到了革新,但酶切法制备Fab类抗体因其独特的优越性并不会被基因工程抗体取代,尤其是非重组Fab类抗体片段的生成。 酶解法依据其使用的方法,通常可分为游离酶切和固定化酶切。游离酶切反应在溶液中完成,通过优化酶解条件可提高酶解效率;固定化酶切是通过吸附、包埋、交联和结合等方法将酶固定在一定的载体上并在有限的范围内进行催化反应。与游离酶切相比,固定化酶切可更好地控制消化过程,并有效地将酶解产物和酶分开。固定化酶切的切割程度可通过控制消化时间或过柱流速来调节;无酶抗体结合物的产生;可快速清除酶解产物中的酶,无须离子交换法来分离抗体片段;增加酶对热稳定性和自溶稳定性,有利于固定化酶的长时间维护等,使其在很多应用中逐渐取代了游离酶切。 2.2 Fab的大肠杆菌表达 大肠杆菌因其具有成本低、生长速度快、转化效率高、可在短时间内获得目标蛋白并对其进行纯化和分析,且最终蛋白产量较高等优势,可作为生成Fab的独特系统。重组Fab向E.coli 周质空间分泌需要一段15~30个氨基酸的信号肽引导。在Fab周质分泌表达中,常用的信号肽是主要外膜蛋白A(OmpA)和果胶裂解酶B(pelB)。此外,也可用相关软件从基因组中快速预测更适合目的Fab周质表达的信号肽。 除了在Fab片段前引入信号肽序列外,还可以通过改造宿主菌实现Fab的可溶性表达。有研究发现,大肠杆菌硫氧还原蛋白酶和谷胱甘肽还原酶缺陷株(trxB,gor)无硫氧还蛋白和谷胱甘肽还原酶活性,可提供一个有利于Fab正确折叠的氧化性胞质环境,功能性Fab在大肠杆菌trxB/gor突变株中可高产率表达。如Novagen公司的FA113菌株和Origami系列菌株皆为此类型突变菌,有利于Fab中二硫键的形成,且增加其可溶性,活性更高。 此外,特定培养条件可促使周质Fab在上清中的累积,其原因可能是诱导表达后周质中Fab积聚促使菌体裂解,也可能是特定的培养条件增加了大肠杆菌外膜的溶解性。上清液中的高浓度Fab是周质中Fab渗透到胞外的,因此从上清中纯化所得的Fab比从周质和裂解产物中纯化所得的Fab纯度更高。通常,不同的宿主菌、培养基、摇菌速率和通氧量,Fab的总产率及胞外渗透率有明显的不同。在分批补料葡萄糖培养基中,Fab表达总量及胞外产率最高,且与250r/min摇速的2%~17%胞外渗透率相比,150r/min的胞外渗透率高至75%;在含甘油的自诱导培养基中,250r/min条件下Fab的总产率是150r/min的5~9倍,且胞外Fab比率从10%增加至20%~90%;低通氧量会促进Fab的胞外分泌。这些发现对Fab的小规模生产有实际意义,且Fab胞外分泌对培养条件的依赖为Fab表达的控制和定位提供了有效途径。 2.3 Fab的其他表达系统 由于原核表达缺少真核转录后的蛋白修饰过程,酵母、昆虫和植物细胞表达系统的转录后加工修饰体系与哺乳动物细胞不完全相同,且表达的蛋白在糖链的结构和组分上与哺乳动物表达系统表达的蛋白有所差异。杆状病毒昆虫表达系统可有效表达Fab抗体片段,由于昆虫系统的糖基化方式与人类不同,临床治疗性抗体表达通常不建议采用此类方法。 无细胞系统也可产生功能性Fab抗体片段。无细胞蛋白质合成系统是一种以外源mRNA或DNA为模板的体外翻译系统,通过向细胞抽提物的酶系中补充底物和能源物质来合成蛋白质。与传统的体内重组表达系统相比,体外无细胞合成系统更简便、更快、更易操控,且可提供一个合适、可控且稳定的氧化还原电势辅助功能性Fab的表达。但该系统最具挑战的是轻、重链二硫键的形成及Fab的折叠;后者可通过使用谷胱甘肽氧化还原缓冲液、纯化氧化还原酶及添加分子伴侣等解决。无细胞系统表达Fab具有可扩展性和提升空间,可使得Fab产率优化,这将会是一个有前景的Fab生成方法。 抗体片段Fab在细胞质中合成并运输到周质腔,因此蛋白翻译后的折叠、转运过程及宿主细胞本身均会对其产生影响。不同抗体片段在表达过程中同时也受到抗体序列影响,这可能与其主要影响目标蛋白的合成和折叠有关。通常,新生多肽有两种去向;折叠与聚集,往往低温有利于蛋白折叠的进行。在培养基中加入0.4mol/L蔗糖后,在非常低的异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(0.02~0.03mmol/L)诱导时可以增加抗体的表达量。 当在一种表达系统中效果欠佳时,可考虑采用以下方法: ① 尝试使用不同的载体系统、标签和融合蛋白;② 将此表达系统导入不同的宿主菌中表达;③ 如果目的基因的编码序列含大肠杆菌的稀有密码子较多,可同时表达氨基酸的tRNA基因;④ 共表达分子伴侣或折叠酶,有时可提高抗体的可溶表达。 03   ——— F(ab')2 的制备表达 与单价抗原结合活性片段Fab相比,F(ab')2 是双价抗原结合活性片段,表观亲和力比Fab高;因其分子量较全长IgG分子减少了1/3(约100kDa),而对肿瘤的穿透能力较强,免疫原性降低,同时在肿瘤部位滞留时间较长,在实验动物体内的半衰期也比Fab长;由于片段抗体F(ab')2 缺乏恒定区,减少了与表达Fc受体的细胞发生非特异性结合的机会,因此在免疫诊断、医学影像和临床治疗方面有着重要的应用价值。 F(ab')2 片段可用胃蛋白酶酶解的方法制备,但其效率较低。随着分子生物学技术迅速发展,适合于双特异性抗体的构建模式同样适用于F(ab')2 双价片段抗体的表达制备。此外,还有如下方法,① 抗体片段的化学偶联;② 用短肽接头构建双价抗体片段;③ 亮氨酸拉链聚合;④ 表达免疫球蛋白的绞链区等。 抗体片段的化学偶联制备是指应用化学试剂[如邻苯二马来酰亚胺(O -PDM)、二硫代硝基苯甲酸(DTNB)和N-琥珀酰-3-(2-吡啶二巯基)丙酸盐(SPDP)等化学偶联剂],通过氧化还原反应将表达纯化的抗体片段Fab通过二硫键或硫醚键连成一个双价F(ab')2 分子。Carter等报道用大肠杆菌(E. coli)表达人源化HuMab4D5-8抗体Fab片段,之后用化学偶联法获得双价的F(ab')2 分子,产量可达2g/L,这一方法虽然引入外源性的化学偶联剂,但70%的产物以双价的抗体片段形式存在。 采用短肽接头构建双价抗体片段是将2个Fab的重链基因串联之后与相应轻链基因在宿主细胞中共表达,产生线型的F(ab')2,即L-F(ab')2。在L-F(ab')2 中,位于C末端的抗原结合位点与抗原的结合受到空间位阻的影响较大,表观亲和力介于F(ab')2和Fab之间。通常,可用5肽RTVAA、7肽RTVAAPS、10肽RTVAAPSVFI(缺乏柔韧性)或者(Gly4Ser)3 将Fab的重链基因串联后,和表达的轻链体外蛋白复性而获得L-F(ab')2,这一过程也可用来F(ab')2 体外的组装。 采用亮氨酸拉链聚合构建双价抗体片段可通过修饰Fos或Jun型亮氨酸拉链,在其两端分别加上一个Cys,然后将Fos或Jun的N末端与Fab的C 末端相融合而形成F(ab')2。二聚化结构域(dimerization domain)能促使蛋白质亚基之间装配成功能性二聚体。有报道显示,通过表达具有亮氨酸拉链聚合序列Fab段,之后将分别制备的针对不同靶点的Fab段体外混合,可生成双特异性二聚体形式的F(ab')2 片段,通常也可通过引入互补的杵臼结构(knobs into holes)修饰CH3界面来提高二聚化形成。研究显示,通过亮氨酸拉链连接抗体片段Fab其效率较高。 表达免疫球蛋白的绞链区构建双价抗体片段即通过在重链的Fd的羧基端加上小肽(CPP)3 的编码序列,模拟天然免疫球蛋白的绞链区来制备双价抗体片段F(ab')2。由于天然免疫球蛋白重链CH1的C 末端和CH2的N 末端交界处有1~2个Cys残基,它们可以两两氧化生成二硫键将2条重链紧密地共价结合在一起。这样,在重链Fd的3'端连接上小肽(CPP)3 的编码序列,富含Cys而且相邻的两个Cys之间由Pro隔开,使这部分肽链充分伸展但不能自由旋转和弯曲,不易形成链内二硫键,并且使Cys残基不易被其他氨基酸残基所遮掩,活性基团(—SH)充分暴露。片段抗体在表达过程中提高了重链间二硫键的形成的概率,提高了表达产物中F(ab')2 的含量。早在2002年,我国协和医科大学也报道了通过在CH1基因的末端添加一段二聚化结构的编码序列的方法,实现了从细菌周质腔隙中提取可溶性抗CD20嵌合F(ab')2 抗体分子;该分子具有天然三维立体结构,不需要进行变性复性,经蛋白G和Sephacyl S200 -HR分子筛两步分离纯化,纯度可达90%以上。 美妥昔单抗是鼠源F(ab')2 片段抗体,通过胃蛋白酶酶解的方法制备。将其与放射性元素131I标记,所制备的“利卡汀”用于原发肝癌的免疫靶向治疗。“利卡汀”可特异性地与肝癌细胞膜上的HAb18G/CD147抗原结合,将其荷载的放射性碘输送到肿瘤部位,从而产生抗肿瘤作用。该片段抗体F(ab')2 在临床应用中显示了良好的前景,同时也是全球第一个运用单抗进行核素标记实施靶向治疗原发性肝癌的分子靶向药物。一项纳入106例肝癌患者的多中心Ⅱ期临床研究结果显示,经过1~2个疗程“利卡汀”治疗后,患者21个月生存率为44.54%。其中73例患者完成了2个疗程的治疗,6例(8.22%)部分缓解(PR),14例(19.18%)完全缓解(CR),43例(58.90%)稳定(SD)。一项纳入60例经过肝移植手术后的Ⅲ期/Ⅳ期肝癌患者的利卡汀临床试验研究显示,患者一年内复发率显著降低,降低了30.4%,生存率提高了20.6%。同时“利卡汀”联合经导管肝动脉栓塞化疗术(transcatheter arterial chemoembolization,TACE)治疗原发性肝癌具有更显著的疗效,一项纳入148名肝癌患者的临床试验结果显示,与单独TACE治疗相比,利卡汀联合TACE治疗可有效延长患者的总体中位生存期。 关注更多内容请加入公众号 BiotechJK，欢迎志同道合的人一起加入 为您分享行业最新动态 共同讨论生物制药相关专业知识 公众号有相关专业讨论群（BiotechJK、BiotechJK2） 微信加我（wuwz92）审核入群，交流或商务合作  请备注：姓名 公司 职能/意向 吴文哲