Balixafortide

｜中肽生化内容团队编辑环肽药物作为一类介于传统小分子和生物大分子之间的特殊分子形态，近年来在全球创新药研发管线中的占比稳步提升。通过引入环化结构，这类药物在保留多肽高特异性和高亲和力的基础上，显著提高了对蛋白酶的稳定性和结构预限制性，从而在调节蛋白质相互作用（PPI）等难成药靶点上展现出独特的优势。随着icotrokinra的获批，环肽技术在改善药物代谢动力学性质、探索非注射给药途径等方面的实际潜力得到了更多实证。从全球环肽资产的全景分布来看，目前的研发重点正从天然产物的简单修饰转向基于噬菌体展示（phage display）技术和de novo设计的系统化开发。在研管线广泛覆盖了自身免疫、肿瘤、代谢性疾病以及抗感染等多个核心领域，体现出差异化的技术路径和商业价值。通过梳理当前的管线梯队，可以客观观察到不同研发平台在分子量控制、跨膜渗透性优化以及长效化修饰等关键指标上的真实进展，进而评估该类资产在未来医药市场中的竞争地位。1. MK‑0616（Enlicitide）图片来源：Wikipedia开发商：默沙东环肽结构特征Enlicitide（MK‑0616）是一个围绕口服吸收目标进行深度工程化改造的宏环肽，而且是非常独特的三环肽，其结构特征体现为多层次化学设计的叠加，包含如下特征：✔ 三环肽✔ 吲哚结构✔ (S)-2-甲基脯氨酸✔ 氟取代✔ 季胺结构✔ 特殊的合环结构适应症与临床✔ 高胆固醇血症（Hypercholesterolemia）临床研究：CORALreef Lipids（NCT05952856，III期）这项三期研究受试者为高胆固醇血症成年人，研究目的为评估 Enlicitide 在此人群中的 LDL‑C 降幅和安全性。✔ 杂合子家族性高胆固醇血症（Heterozygous Familial Hypercholesterolemia, HeFH）临床研究：CORALreef HeFH（NCT05952869，III期）✔ 在既有降脂治疗基础上仍需额外降低 LDL‑C 的成人临床研究：CORALreef Add‑On（NCT06450366，III期）研究对象包括正在使用他汀或其他降脂药（ezetimibe、bempedoic acid）的成年人，专门针对仍需额外降低 LDL‑C 的患者所进行的加用研究✔ 具有动脉粥样硬化性心血管事件风险的成年人（ASCVD‑risk adults）临床研究：CORALreef Outcomes（NCT06008756，III期）机理MK‑0616 的作用机理与已上市的抗体类 PCSK9 抑制剂一致，其分子能够直接与 PCSK9 的 LDL（低密度脂蛋白）受体结合域发生结合，从而阻断 PCSK9 与 LDL 受体之间的相互作用。这种结合可使 PCSK9 失去降解 LDL 受体的能力，使更多 LDL 受体得以在肝细胞表面存留并回收 LDL‑C，最终导致血浆 LDL‑C 水平下降。递送方式：口服从药代动力学层面，enlicitide已有早期临床试验提供了直接证据：在健康受试者中，口服给予 10–300 mg 的 MK‑0616 能使血浆游离 PCSK9 水平降低超过 93%。MK‑0616 的注册路径全部基于口服给药。所有临床试验采用的是 Enlicitide Decanoate 的口服片剂。这使得 MK‑0616 成为迄今推进最靠前的口服 PCSK9 抑制剂。相较于注射型 PCSK9 抗体治疗方式，口服剂型拥有更高的依从性、更低的使用门槛，并有可能将 PCSK9 抑制剂从特殊用药带入初级干预药物的层级。开发意义从行业视角看，Enlicitide 是第一个真正进入注册性阶段的口服宏环肽药物，也是第一个有机会实现口服 PCSK9 抑制的品种。这意味着大尺寸蛋白–蛋白相互作用靶点首次能够通过口服肽类药物进行调控。更重要的是，三个 LDL‑C 关键试验的成功完成与大型心血管终点试验的稳步推进共同构成了一个即将进入申报期的证据体系，使其成为未来可能改变降脂治疗模式的战略级药物。相关公开资料显示，MK‑0616 进入 Phase 3 后的进展顺利，并已被业内视为下一阶段监管申报的候选品种。2. BT5528开发商：Bicycle Therapeutics环肽结构特征BT5528 是Bicycle Therapeutics 所开发的 Bicycle® Toxin Conjugate（BTC），其本质可视为PDC（Peptide-Drug Conjugate, 多肽药物偶联物）。其受体识别模块为一个 bicyclic peptide（双环肽），能够特异性结合 EphA2，并与细胞毒素 monomethyl auristatin E（MMAE）通过可切割连接子（protease‑cleavable linker）连接。BT5528 的结构与传统 PDC 最大的不同，在于它的 “P”与“D”两部分都是肽类结构。传统 PDC 通常由一段识别肽连接一个小分子毒素，而在 BT5528 中，靶向部分本身是一个双环肽（bicyclic peptide），而毒素 MMAE 也是一个肽源性的细胞毒素。再加上中间的多肽 spacer 和可切割肽链连接子，BT5528 呈现出的是肽‑肽偶联的整体架构，而不是传统的肽‑小分子偶联。✔ 双环肽（bicyclic peptide）：靶向 EphA2✔ MMAE（monomethyl auristatin E）细胞毒素：作为载荷，与肽偶联✔ 蛋白酶可切割连接子（protease‑cleavable peptide linker）：连接肽与 MMAE 的关键结构✔ Spacer：β‑Ala‑Sar10多肽，环肽与连接子之间，用于结构衔接✔ EphA2 结合模块：双环肽本体用于识别 EphA2 高表达肿瘤环肽特征：通过1,3,5-triazinane (1,3,5-三氮杂环己烷)，与直链肽前体上的三个半胱氨酸类似物Cys((CH2)2COOH)侧链的羧基结合，从而形成双宏环的化学结构。适应症与临床✔ EphA2 高表达的晚期实体瘤临床研究：BT5528‑100（NCT04180371，I/II 期），研究对象为EphA2 高表达的既往已知类型的晚期实体瘤，包括卵巢癌、尿路/膀胱癌、非小细胞肺癌、头颈癌、三阴性乳腺癌、胃/上消化道癌等多类实体瘤。机理BT5528属于一种 Bicycle Toxin Conjugate（BTC）。其双环肽部分识别并结合肿瘤细胞表面的 EphA2。EphA2 是多种实体瘤中高表达的细胞表面受体。双环肽结构通过其特定的空间构象与 EphA2 的细胞外结构域发生高亲和力结合，使 BT5528 能够在 EphA2 高表达的肿瘤组织中实现选择性富集。当双环肽将 BT5528 锚定于 EphA2 阳性肿瘤细胞后，连接子在肿瘤环境中被蛋白酶切割，从而释放细胞毒素 MMAE ，MMAE 进入细胞后作用于微管系统，从而杀伤肿瘤细胞并递送方式BT5528 的给药方式在为静脉注射（IV）。NCT04180371 试验的给药频率为每周一次（QW）或每两周一次（Q2W）。 开发意义BT5528 通过双环肽结构实现对 EphA2 的高亲和力识别，并以可切割连接子将肽源性细胞毒素 MMAE 精准递送至肿瘤细胞。其早期临床研究显示，BT5528 在多种 EphA2 高表达的晚期实体瘤中展现了可管理的安全性和初步抗肿瘤活性。这些结果为 Bicycle Toxin Conjugate（BTC）这一新型分子形式提供了临床可行性的初步验证，体现出以合成双环肽为基础构建偶联毒素药物的潜在发展价值。3. BT8009 (Zelenectide pevedotin)图片来源：Bicycle Therapeutics开发商：Bicycle Therapeutics环肽结构特征同BT5528一样，BT8009 (Zelenectide pevedotin) 同样属于 Bicycle Therapeutics 的 Bicycle Toxin Conjugate（BTC），其靶向结构是一个高度选择性的双环肽（bicyclic peptide），用于结合 Nectin‑4（肿瘤表面黏附分子）。其机构包括如下模块：✔ 双环肽（bicyclic peptide），结合Nectin-4;✔ 用于连接肽与毒素的可切割连接子（val‑cit‑PABC）✔ 细胞毒素 MMAE（monomethyl auristatin E）适应症与临床✔ Nectin‑4 高表达的晚期实体瘤临床研究：BT8009‑100（NCT04561362，I/II 期）针对Nectin‑4 表达相关的晚期实体瘤，包括尿路上皮癌、胰腺癌、乳腺癌、非小细胞肺癌、胃癌、食管癌、头颈癌、卵巢癌等。✔ 局部晚期或转移性尿路上皮癌（la/mUC）临床研究：Duravelo‑2（NCT06225596，II/III 期），针对局部晚期或转移性尿路上皮癌的注册性研究，并作为化疗对照的比较组之一。✔ 转移性尿路上皮癌（单药与联合 pembrolizumab）临床研究：Duravelo‑1（NCT04561362 的扩展部分）机理BT8009 的受体靶向部分是一个双环肽，可选择性结合 Nectin‑4。Nectin‑4 是一种位于细胞表面的黏附分子，它在多种肿瘤组织中常见高表达，包括尿路上皮癌、肺癌、上消化道肿瘤、卵巢癌、乳腺癌以及头颈部肿瘤等。BT8009与Nectine-4结合后，可切割连接子在肿瘤微环境中被特定蛋白酶分解，释放出毒素MMAE（monomethyl auristatin E），通过抑制微管使细胞停止分裂并最终死亡。递送方式：静脉注射静脉给药，包括每周一次、每两周一次或 21 天周期的 D1+D8 给药方案。开发意义BT8009 展示了 Bicycle Toxin Conjugate（BTC）技术在 Nectin‑4 靶向肿瘤中的应用潜力，其双环肽结构赋予药物小分子级别的组织穿透性与高度选择性的肿瘤富集能力。早期临床数据显示，BT8009 在转移性尿路上皮癌中展现出明确的抗肿瘤活性和良好耐受性，部分研究观察到高达 45% 的客观缓解率（ORR）。基于这些结果，FDA 已与开发方就其 II/III 期注册性研究达成一致，使 BT8009 成为首批可能进入加速审批路径的 BTC 类候选药物之一。4. BT7480图片来源：Biopharma PEG图片来源：WO2025125648开发商：Bicycle Therapeutics环肽结构特征BT7480 是一种由三个双环肽（bicyclic peptides）组成的分子，包括：✔ 一个双环肽靶向 Nectin‑4✔ 两个双环肽靶向 CD137（4‑1BB）（免疫细胞表面共刺激受体）三个双环肽通过一个三臂 PEG₃（branched trimeric PEG）连接子进行连接，是一个完全化学合成的多肽免疫激动剂结构。适应症与临床✔ Nectin‑4 表达相关的晚期实体瘤临床研究：NCT05163041（I/II期）研究的实体瘤包括非小细胞肺癌、尿路上皮癌、头颈鳞癌、宫颈癌、食管癌、胃癌、卵巢癌、乳腺癌等多种 Nectin‑4 阳性肿瘤机理BT7480 的出现，为多肽药物在“结构复杂性”与“机制功能性”的融合设计提供了一个清晰范式。它既不同于传统意义上仅承担识别功能的环肽，也不同于体积更大、构象受限的融合蛋白或抗体药物。BT7480 以完全化学合成的方式，将三个功能精确分区的双环肽结构域组合成一个整体分子，通过结构域分离的策略同时实现肿瘤靶向与免疫激活两个目的，其结构布局在功能逻辑上已接近、甚至重构了双抗式（bispecific）的作用模式。在分子层面，BT7480 由一个靶向 Nectin‑4 的双环肽结构域和两个靶向 CD137 的双环肽结构域构成。Nectin‑4 是多种实体瘤中高度表达的黏附分子，而 CD137（4‑1BB）则是活化 T 细胞与 NK 细胞表面的关键共刺激受体。BT7480 的设计使其能够在肿瘤细胞（Nectin‑4）与免疫细胞（CD137）之间实现空间上的共缀合（co‑ligation），从而将免疫激活信号精准定位在肿瘤局部。这种设计与传统依赖单一肽段承担全部功能的 GLP‑1/GIP 类多受体激动剂不同，而是通过物理结构域分离，使每一部分均承担清晰、独立且可控的药理任务。围绕 CD137 的激动策略，是 BT7480 的另一核心价值。CD137 作为 TNF（肿瘤坏死因子）受体家族成员，其激活需要聚合，但以往的 CD137 激动抗体由于系统性激活导致的肝毒性，长期阻碍了临床推进。BT7480 以小分子双环肽为基础，通过噬菌体展示筛选、亲和力成熟与化学优化获得能够结合 CD137 的环肽模板，再与识别 Nectin‑4 的环肽通过三臂连接子拼接，使 CD137 的聚合仅在肿瘤部位被触发，实现了肿瘤局部免疫激活而避免系统性副作用。最终形成的 BT7480 分子，实现了“靶向 + 激活”功能的物理隔离与空间耦合，为 CD137 激动剂的发展提供了新的结构途径。递送方式：静脉注射开发意义BT7480 代表了 Bicycle Therapeutics 的肿瘤定向免疫激动剂（Bicycle TICA®）平台首次进入人体研究，利用三个双环肽同时连接肿瘤细胞的 Nectin‑4 与免疫细胞的 CD137，实现精准的局部免疫激活机制。在早期临床结果中，BT7480 显示出良好的耐受性与初步抗肿瘤活性，包括未确认的部分缓解（PR）与多例超过 8 个月的长期稳定疾病（SD）。由于其机制与结构均完全不同于传统抗体和 ADC，BT7480 被视为 BTC / TICA 类药物在实体瘤免疫激活方向的重要验证性项目，并已进入持续推进的临床阶段。5. PL8177开发商：Palatin Technologies多肽结构特征PL8177 是7个氨基酸组成的环肽，其中5个氨基酸残基参加了环肽结构的构成，Glu侧链的羧基与Dap (Diaminopropionic acid) 侧链的氨基形成了侧链-侧链酰胺环化。适应症与临床✔ 活动性溃疡性结肠炎（Active Ulcerative Colitis, UC）临床研究：NCT05466890 (IIa期)，双盲、随机、安慰剂对照试验，采用口服结肠递送方案，在轻中度活动性溃疡性结肠炎患者中进行 8 周治疗，评估其安全性、PK/PD、肠黏膜愈合与临床缓解效果。机理PL8177 的作用机制属于对 melanocortin‑1 受体（MC1R）的选择性激动。在结肠局部释放后，MC1R 激动所触发的生物学效应能够调节黏膜免疫状态，使局部炎症从“损伤模式”向“修复模式”转化，并推动炎症分辨过程，而不是像传统免疫抑制剂那样抑制免疫反应本身。这一机制的实现依赖其结肠定向递送体系：Phase 1 研究显示口服 PL8177 能够在结肠局部达到有效暴露，同时几乎不进入血液循环，从而以最小系统暴露的方式降低全身不良反应风险，实现了以局部免疫调节为核心的治疗策略。递送方式：口服PL8177是一种选择性 melanocortin‑1 receptor（MC1R）激动剂，归类为 melanocortin 多肽类药物（melanocortin receptor agonist）。它采用口服结肠递送（oral colon‑delivered）体系，定向结肠递送，减少系统暴露，用于在局部发挥抗炎与组织修复相关作用，而非免疫抑制。开发意义PL8177 展示了 MC1R 激动在肠道局部炎症疾病中的新型应用路径，通过结肠定向释放实现作用部位与系统暴露的分离，从而减少传统免疫抑制剂常见的安全性问题。在活动性 UC 的 Phase 2a 研究中，PL8177 显示出显著的临床缓解、黏膜改善与优异安全性，公开数据中无治疗相关不良事件。这些结果使 PL8177 成为 MC1R 口服治疗在肠道炎症疾病领域的首个验证性成果，并促使开发者已开启与大型药企的许可与合作洽谈。6. Certepetide（CEND-1）开发商：Lisata Therapeutics多肽结构特征Certepetide 来源于 iRGD（CRGDKGPDC）序列，是一个9个氨基酸组成的环状多肽。其结构特征为通过两个半胱氨酸残基形成二硫键，构建稳定的环状构象。该序列包含典型的 RGD 基序，可与整合素（αvβ3/αvβ5）结合，并在蛋白酶裂解后暴露 C-end Rule（CendR）基序，从而获得与 neuropilin-1（NRP-1）结合的能力。这种结构赋予其“先结合整合素、再激活组织穿透通路”的双阶段功能特征。适应症与临床✔ 胰腺导管腺癌（Pancreatic Ductal Adenocarcinoma, PDAC）临床研究：ASCEND（II期，NCT05042128），在一线化疗基础上联合 certepetide，评估客观缓解率、无进展生存期等指标。已披露数据中 ORR 约45%，对照组约19%，mPFS 约7.5个月，对照组约4.7个月。✔ 胆管癌（Cholangiocarcinoma）临床研究：（NCT05628064，II期），已获得孤儿药资格认定，正在推进，用于评估其在胆道系统肿瘤中的增敏作用。✔ 晚期实体瘤临床研究：NCT03517176 （Phase 1b/2），评估 certepetide 联合化疗在晚期实体瘤中的安全性与初步疗效；NCT04958811（Phase 1b/2），在多种晚期实体瘤中评估其作为递送增强剂的作用。机理Certepetide 的作用机制属于肿瘤组织穿透增强（tumor penetration enhancer）。Certepetide 首先通过其序列中的 RGD 结构与肿瘤血管和肿瘤细胞表面的αv 整合素结合。结合后，该多肽在肿瘤微环境中被蛋白酶切割，使其C端暴露出能够与 neuropilin-1 结合的结构，从而激活一种内吞-跨细胞运输通路。该通路能够在肿瘤组织中形成类似通道的结构，显著提高共给药药物（如化疗药物）在肿瘤内部的分布和渗透深度。其核心作用并不直接杀伤肿瘤细胞，而是通过改变药物在肿瘤组织内的空间分布，提高局部有效暴露，从而增强已有治疗方案的疗效。递送方式：静脉注射Certepetide 作为辅助性多肽药物，与化疗或其他抗肿瘤药物联合使用，通过静脉给药实现全身分布，但其功能主要在肿瘤局部发挥。其作用依赖肿瘤特异性的整合素表达和NRP-1通路激活，因此具有一定的组织选择性。开发意义Certepetide 提供了一种区别于传统靶向治疗与细胞毒药物的开发路径，其核心在于通过调控肿瘤组织结构与药物分布，提高既有疗法的有效性。该策略针对实体瘤中普遍存在的药物渗透受限问题，尤其在胰腺癌等高基质、低血供肿瘤中具有明确理论基础。已有 II 期数据显示其在联合治疗中可提高缓解率并延长无进展生存期，提示该类递送增强型多肽具有成为肿瘤治疗新辅助模块的潜力。同时，该机制具有与多种治疗手段（化疗、放疗、免疫治疗）组合的兼容性，为后续联合策略提供了空间。7. Balixafortide （POL6326）开发商：Spexis（原 Polyphor）多肽结构特征Balixafortide的化学结构非常特殊，它由16个氨基酸残基组成，通过Cys2和Cys9的侧链巯基形成二硫键，与此同时，其[Ala1-Arg7]-的部分和[His16-Tyr8]的部分，通过N对N, C对C的方式进行对接环化，从而产生了肼（红色部分）和1,2-diketone（蓝色部分）的特殊结构，并赋予Balixafortide极为特殊的双环结构。适应症与临床✔ 转移性胰腺导管腺癌（PDAC）临床研究：NCT06981806（I期），联合 cosibelimab（PD-L1 抗体），用于标准治疗失败后的转移性 PDAC。计划入组 24 例，主要目标为确定最大耐受剂量（MTD）及推荐 II 期剂量（RP2D）。机理Balixafortide 的作用机制为 CXCR4 受体拮抗。CXCR4 是肿瘤细胞与肿瘤微环境中重要的趋化因子受体，与其配体 CXCL12（SDF-1）共同参与肿瘤细胞迁移、免疫逃逸及肿瘤微环境重塑。Balixafortide 通过与 CXCR4 结合，阻断 CXCL12-CXCR4 信号轴，从而干扰肿瘤细胞向转移部位的趋化迁移，并影响肿瘤相关免疫细胞的募集与分布。在免疫治疗联合策略中，该机制还可能通过改变肿瘤微环境中免疫抑制状态，提高免疫细胞浸润，从而增强免疫检查点抑制剂的疗效。递送方式：静脉注射开发意义Balixafortide 代表了一类针对肿瘤微环境趋化信号通路的多肽药物，其开发重点在于调控肿瘤细胞迁移及免疫微环境，而非直接细胞毒作用。CXCR4 作为肿瘤转移和免疫抑制的重要节点，在多种实体瘤中具有明确生物学基础。尽管其在乳腺癌 III 期研究中未取得阳性结果，但后续在胰腺癌等高度免疫抑制肿瘤中的早期探索仍在进行。当前可见临床活动主要集中在小规模早期研究，提示该项目仍处于机制验证与适应症再定位阶段。8. Rusfertide（PTG-300 / TAK-121）开发商： Protagonist Therapeutics / 武田制药多肽结构特征Rusfertide 是17个氨基酸残基组成的环肽，其中Cys6-Cys16之间形成二硫键。Rusfertide的N端经过了异戊酰基修饰。其Lys8的侧链还通过gama glutamic acid进行了棕榈酸（16碳脂肪酸）的脂化修饰。适应症与临床✔ 真性红细胞增多症（Polycythemia Vera, PV）临床研究：VERIFY（NCT05210790，III期）：rusfertide 联合标准治疗使临床应答率超过安慰剂组两倍；Takeda 公布的数据为 77.0% vs 32.9%，并达到主要终点和全部四个关键次要终点；THRIVE（NCT06033586，III期）：是一项开放标签长期延长期研究，用于评估 rusfertide 的长期安全性和疗效持续性。✔ 当前进展：rusfertide 的 NDA 已被 FDA 受理并授予 Priority Review，PDUFA 目标日期位于 2026 年第三季度。机理Rusfertide 的作用机制属于 hepcidin 模拟。其核心在于模拟内源性 hepcidin 对 ferroportin 的调控作用，降低铁从肠道和储存组织向血液循环的输出，从而减少可用于红细胞生成的铁供给，最终抑制过度红细胞生成并维持血细胞比容控制。该机制调控的是铁代谢上游环节，而不是直接抑制骨髓细胞增殖。递送方式：皮下注射开发意义Rusfertide 是当前最接近上市的环肽项目之一，其意义首先在于它验证了环肽可以作为全身性铁代谢调节药物进入后期临床并冲击上市。在真性红细胞增多症中，传统管理长期依赖放血和细胞减灭治疗，而 rusfertide 通过 hepcidin 模拟这一全新机制，从铁供给端限制红细胞生成，为疾病控制提供了新的治疗路径。

题名：Targeting the chemokine receptor CXCR4 for cancer therapies 作者：Ariana Rueda 1 2 3, Naroa Serna 2 4, Ramon Mangues 5 6 7, Antonio Villaverde 8 9 10, Ugutz Unzueta 11 12 13 14 出处：Biomark Res. 2025 May 1;13(1):68.  DOI: 10.1186/s40364-025-00778-y  摘要 C-X-C 趋化因子受体 4（CXCR4）因其在肿瘤进展和转移中表现出干细胞表型而发挥关键作用，已成为癌症治疗的重要分子生物标志物。在超过 20 种癌症中观察到其过度表达，包括实体瘤和血液系统恶性肿瘤，且通常与肿瘤的侵袭性和不良预后相关。最初作为 HIV 感染的共受体被识别，过去几十年中已发现众多针对 CXCR4 的配体和拮抗剂，包括小分子、肽和生物制剂。尽管其中只有少数用于癌症治疗，但以 CXCR4 为分子靶点的最新生物技术进展显示出显著潜力，有望彻底改变未来的癌症治疗。因此，本综述重点介绍了针对趋化因子受体 CXCR4 开发的用于癌症治疗和诊断的生物技术创新。它还探讨了新兴治疗策略的未来前景，涵盖了从阻断受体信号传导的小分子抑制剂的使用，到为将创新药物和蛋白质靶向递送至癌症干细胞而设计的前沿纳米载体，旨在实现细胞选择性的精准纳米药物。 简介 C-X-C 趋化因子受体 4 型（CXCR4），也称为 CD184，是一种膜蛋白，有助于多种细胞类型的迁移和运输的调节，尤其是免疫细胞等[1,2,3]。该蛋白在不同组织和器官中广泛表达，尽管表达程度各异，但在众多生理功能和多种病理过程中发挥着关键作用。CXCR4 具有典型的七次跨膜结构，是一种 G 蛋白偶联受体（GPCR），主要与其天然配体——基质细胞衍生因子 1（SDF-1 或 CXCL12）结合[4， 5]。这种结合会引发 CXCR4 的结构重排，从而使其被激活[6]。CXCR4 的功能形式随后与异三聚体 G 蛋白复合物的 Gαi 亚基相互作用，从而激活多种下游信号通路，包括磷脂酰肌醇 3-激酶（PI3K）通路、磷脂酶 C（PLC）通路、Janus 激酶/信号转导及转录激活因子（JAK/STAT）通路以及丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）通路[7， 8]。这些通路共同调节诸如细胞内钙离子动员、细胞黏附和迁移、干细胞归巢以及免疫反应等过程，尤其是通过刺激免疫细胞向感染和炎症部位的迁移来发挥作用[2, 9， 10， 11]（图 1）。 图1 CXCR4 在生理或病理过程中的信号传导。列出了骨髓中的造血干细胞和祖细胞（HSPCs）以及其他免疫、神经、心血管和消化系统细胞类型的 CXCR4 生理作用。还指出了 CXCR4 在炎症、感染和损伤修复中的病理作用。CXCR4/CXCL12 的相互作用、被激活的主要信号通路（即 PLC 通路、PI3K/Akt 通路、JAK/STAT 通路和 MAPK 通路），以及它们下游的细胞反应均如下图所示。 在免疫系统中，CXCR4 分布于 T 细胞和 B 细胞、树突状细胞、单核细胞以及中性粒细胞的表面[12，13,14,15]。有趣的是，CXCR4 是人类免疫缺陷病毒（HIV）在感染免疫细胞过程中所利用的共受体[16]，这在很大程度上促进了对其结构和功能的研究。在与 HIV 相关的研究中，主要致力于寻找病毒抑制剂，已鉴定出许多 CXCR4 激动剂和拮抗剂[17，18，19，20]。除了 CXCR4 的天然配体 SDF-1（CXCL12）外，最初为动员干细胞而开发的合成小分子 AMD3100（普乐沙福）[21]，也被广泛用作抗病毒药物[22]。然而，包括 Polyphemusin II 及其衍生物[23]、KRH-1636[24] 或 FC131[25] 等在内的许多其他 CXCR4 配体也已被鉴定或开发为抗病毒分子[26, 27]。尽管它们在获得性免疫缺陷综合征（艾滋病）相关药理学及其他临床领域具有医学价值，但其在其他应用方面的开发却受到了限制。 CXCR4 在其他生物学中的生理作用也已得到认可。在心血管和消化系统中，CXCR4 参与维持体内平衡、组织修复和血管生成[28，29，30，31]。然而，在神经系统中，它则与神经发育、神经炎症和神经保护有关[32，33，34，35]。CXCR4 的主要生理作用之一是参与造血，帮助造血干细胞在骨髓微环境中留存，从而持续供应各类血细胞[36，37，38，39]。当然，这一事实对组织修复、应激反应以及预防血液系统恶性肿瘤也有间接影响[40]（图 1）。 除了其生理功能外，CXCR4 信号失调与自身免疫性疾病（如类风湿性关节炎和系统性红斑狼疮）[41,42,43] 以及慢性炎症性疾病（如骨关节炎）[44] 的进展有关。有趣的是，CXCR4 也是癌症中的一个相关分子标志物，它在包括肺癌、乳腺癌、胰腺癌、卵巢癌、结直肠癌、肝癌和前列腺癌在内的 20 多种人类恶性肿瘤中过度表达，以及某些类型的白血病和淋巴瘤 [45，46，47，48]。CXCR4 过度表达通常与不良预后相关，并且常常与转移有关，这取决于 CXCL12 介导的癌症干细胞迁移和侵袭的促进作用 [49]。与健康组织相比，这些癌症中 CXCR4 的表达水平非常高，这使得该受体成为诊断的有趣标志物，同时也可能成为精准靶向和选择性递送抗肿瘤药物的潜在工具 [50，51，52]。这种方法涉及在药物或药物载体上展示特定的 CXCR4 相互作用因子，它们与 CXCR4 细胞表面的协同结合，以及随后的内体介导的细胞内化[53， 54]。鉴于在肿瘤治疗中对高选择性细胞毒性药物的需求，以提高疗效并减少副作用，CXCR4 成为通过潜在控制转移扩散和化疗耐药性来干预多种恶性肿瘤的关键靶点。本综述总结了过去几十年中为实现这些目标而采用的不同生物技术方法和治疗策略，旨在为创新的先进肿瘤治疗提供以精准为导向的药物临床干预措施。 趋化因子受体CXCR4 与癌症 癌细胞中趋化因子受体CXCR4 的过度表达主要由表观遗传机制调控，包括启动子区域的基因低甲基化和组蛋白乙酰化，后者受组蛋白乙酰转移酶（HATs）和去乙酰化酶（HDACs）控制。此外，非编码 RNA 也会上调 CXCR4 的表达，例如 miR-340-5p 可促进结直肠癌的生长和转移，miR-588 可驱动头颈部癌的肿瘤生长[55]。另外，转录因子如核因子κB（NF-κB）的直接作用也会增加 CXCR4 的表达，NF-κB 可促进乳腺癌的迁移和转移[56]，缺氧诱导因子 HIF-1α 也可促进结直肠癌的扩散[57]。此外，由于肿瘤快速生长和血管受限导致的慢性缺氧，会通过 HIF-1α 和 VEGF 刺激新生血管形成，二者均可上调 CXCR4 的表达[58]。 值得注意的是，CXCR4 过表达细胞（CXCR4+）被认为是癌症干细胞（CSCs），因为在不同癌症类型的鼠模型中，它们具有自我更新和肿瘤起始能力，而这些特性是分化后的癌细胞（CXCR4−）所不具备的[48， 59， 60]。此外，CXCR4+癌细胞表现出所有恶性特征，包括高增殖率、对常规治疗的耐药性、复发、进展以及从原发肿瘤向远处器官的扩散。 CXCR4+ 癌干细胞与肿瘤病理学 CXCR4 过度表达的细胞通过过度激活 MAPK、PI3K/Akt 和 PLC 信号通路诱导肿瘤增殖。这些通路的激活还会通过阻止细胞在常规化疗或放疗后启动细胞死亡，从而诱导耐药性和复发[47， 61]。这种效应是通过激活 JAK/STAT 通路实现的，该通路通过上调抗凋亡信号和下调细胞死亡受体的表达来促进细胞存活[60]。此外，免疫检查点（如 CTLA-4、PD-L1 等）的过度表达使癌细胞能够逃避免疫系统的攻击[62]。 CXCR4+ 癌干细胞还通过激活 Rac1 和 MMP-2/MMP-14 蛋白酶以及增强血管生成（通过触发癌细胞与内皮细胞的黏附和上调 VEGF/VEGFR）表现出肿瘤侵袭和细胞迁移能力增强[63]。这一过程赋予癌细胞内渗、进入血液循环和外渗的能力，从而有助于其在分泌 CXCL12/SDF-1（趋化因子受体 CXCR4 的配体）的器官中归巢、定植和转移[64]。 重要的是，肿瘤微环境（成纤维细胞、内皮细胞、免疫细胞）也会被 CXCR4+上皮癌细胞所扰乱。肿瘤相关基质细胞分泌的高水平 CXCL12 能够以旁分泌的方式增强细胞增殖，诱导上皮-间质转化（EMT），并增加肿瘤边缘的迁移和侵袭能力[47，61]。此外，CXCL12 分泌还能促进免疫抑制性调节性 T 细胞、肿瘤相关巨噬细胞和髓源性抑制细胞向肿瘤内浸润，从而阻断免疫系统对肿瘤的激活[64]（图 2）。 图2 CXCR4 在癌症中的作用。CXCR4 过表达的癌细胞中，由于 PLC、PI3K/Akt、JAK/STAT、MAPK、Rac1 和 MMP2/14 通路的异常激活而产生的病理下游效应。在肿瘤微环境中，肿瘤相关基质细胞分泌的高水平 CXCL12 通过激活癌细胞中的 CXCR4 信号传导、招募 CXCR4+免疫抑制细胞以及诱导上皮-间质转化（EMT）而促进肿瘤病理。在转移性微环境中，高水平的 CXCL12 诱导 CXCR4+肿瘤细胞向转移器官迁移。 CXCR4 过表达与预后 鉴于CXCR4+癌细胞所表现出的特征的机制性后果，预计其衍生的肿瘤会表现出侵袭性行为。事实上，CXCR4+肿瘤与不良预后之间存在很强的关联。这是因为与 CXCR4−肿瘤相比，CXCR4 的过表达与癌症患者的不良结局相关，包括对化疗的耐药性增加、复发风险更高、转移负荷更大以及无进展生存期和总生存期更短[45， 60]。有趣的是，在 CXCR4+癌症类型中，有一些高发且对当前治疗反应极差的实体瘤，如胰腺癌、胃癌和非小细胞肺癌[47， 60]。 CXCR4 的配体 近几十年来，已开发出多种CXCR4 特异性配体，包括受体激动剂和拮抗剂，它们各自在癌症治疗和/或靶向药物递送方面具有独特的治疗潜力（表 1）。CXCR4 激动剂，如天然配体基质细胞衍生因子 -1α（SDF-1α），在细胞迁移、组织修复和造血干细胞归巢等生物过程中发挥着关键作用。CTCE-0214 是一种合成激动剂，是 SDF-1α 肽的改良版，旨在提高其生物利用度和对 CXCR4 激活的特异性。这种合成肽已被研究，其促进组织修复和细胞迁移的效果可能优于天然配体 [65]。此外，ATI-2341 是一种肽偶联物，作为 CXCR4 的变构激动剂，通过促进 G 蛋白和β-抑制蛋白之间的偏向性信号传导来调节细胞反应，这可能导致不同的治疗效果 [66]。这些肽激动剂已在临床前试验中进行了广泛研究，特别是在干细胞动员和组织修复方面。然而，与 CXCR4 拮抗剂相比，它们的临床应用相对较少，这是由于 CXCR4 激活的复杂性和往往难以预测的影响，这可能会导致不同细胞类型和组织产生多样的甚至有时是不良的反应。因此，主要的临床进展集中在 CXCR4 拮抗剂的开发上，这些拮抗剂通过阻断其信号通路来抑制 CXCR4 的活性。鉴于 CXCR4 在癌症进展中的重要作用，这些拮抗剂作为治疗药物和靶向药物递送配体具有相当大的前景。它们包括一系列合成和天然肽、单克隆抗体、小分子和天然产物。 表1 化学趋化因子受体CXCR4 的配体 肽类 源自天然马蹄蟹蛋白的肽类是CXCR4 拮抗剂中最引人注目的。其中关键肽类之一是 T22，也称为 [Tyr5，12,Lys7]-多酚肽素 II，是从马蹄蟹中发现的抗菌肽多酚肽素 I 衍生而来的 18 氨基酸肽。它具有由两个二硫键稳定的反平行β折叠结构。该肽因其抗转移性[111]、抗菌[112]和抗 HIV 特性[81]而被广泛研究。TW70 是 T22 的改进版，经过修饰以增强其与 CXCR4 的结合亲和力和拮抗活性。它是一个 14 个残基的肽，具有 C 末端酰胺和一个二硫键，保留了反平行β折叠结构。它还包括一个 II'型β转角，在（i + 1）和（i + 2）位置分别有 D-Lys8 和 Pro9 [82]。T134 是 TW70 的变体，引入了 [L-瓜氨酸12] 并去除了 C 末端酰胺。与 TW70 或 T22 相比，该变体显示出更强的抗 HIV 活性和显著降低的细胞毒性[82， 83]。将色氨酸在 T134 位进一步替换成萘基丙氨酸，可得到一种抗 HIV 活性比原始肽高五倍的肽，即 T140 [82, 84]。有趣的是，T140 衍生肽在癌症治疗中显示出显著的前景。其中，14 个氨基酸的环状 T140 类似物 Motixafortide（也称为 TN14003、BTK140 或 BL-8040，由 BioLineRx 公司研发）已在针对多种 CXCR4 过表达肿瘤的临床前和临床试验中成功进行了评估 [85， 86]，特别是在与检查点抑制剂联合使用时 [87]。此外，对 T140 C 末端进行酰胺化（TZ14004）也提高了其在血清中的稳定性，不过这种修饰也增加了细胞毒性 [82]。最后，对 T140 的构效关系（SAR）研究确定了四个关键氨基酸（Arg2、Nal3、Tyr5 和 Arg14）对其生物活性至关重要。利用这些关键残基设计了新型环状五肽，从而开发出了生物活性与 T140 相当的低分子量 CXCR4 拮抗剂，例如 FC131 [89]。 在CXCR4 结构域模拟物中，POL6326（又名 Balixafortide，由 Spexis 公司研发）是一种口服生物利用度高的 14 氨基酸大环肽，其在治疗前列腺癌和 HER2 阴性转移性乳腺癌等实体瘤以及成像方面的潜力已得到研究[91, 92]。POL5551 是 POL6326 的一种类似物，仅有一个氨基酸不同，其疗效优于已获美国食品药品监督管理局（FDA）批准的 CXCR4 抑制剂普乐沙福。在针对胶质母细胞瘤干细胞和动员造血干细胞及祖细胞（HSPCs）的临床前模型中，POL5551 已展现出良好前景[93, 94]。 除了CXCR4 结构域模拟物之外，从多利菲明 II 设计而来的β-发夹模拟拮抗剂 POL3026（也称为 CVX15）在临床前模型中作为抗病毒疗法显示出有益效果[90]。此外，CXCL12 模拟物 CTCE-9908，一种环状 17 氨基酸肽，作为 CXCR4 抑制剂也显示出前景[95]。同样，肽 R，一种源自 CXCL12 中 Ar–Ar-X 基序的环状肽拮抗剂，在成像和药物递送应用中也展现出潜力[96]。 最后，在新型CXCR4 拮抗肽中，由礼来公司开发的环肽 LY2510924 及其类似物 LY25109249 已被研究用于治疗多种 CXCR4+ 癌症[97]。此外，其他广泛用于 CXCR4 靶向药物递送的新型肽类拮抗剂包括 FC131 的五肽线性变体 LFC131[98， 113] 以及 22 个氨基酸的肽 E5[99]。 小分子 最广为人知的CXCR4 拮抗剂之一是 AMD3100（也称为Plerixafor），这是一种由两个通过苯撑桥连接的环胺环组成的双环胺衍生物。Plerixafor已被广泛用于干细胞动员，并于 2008 年获得美国食品药品监督管理局（FDA）批准，用于非霍奇金淋巴瘤和多发性骨髓瘤患者的自体移植[22， 67， 68]。AMD3100 的另一种强效类似物是 AMD3465，它具有一个由 14 个原子组成的单大环结构。由于结构上的改进，其对 CXCR4 的亲和力比 AMD3100 高十倍，在临床前研究中主要作为治疗诊断剂进行研究[75]。此外，Burixafor（也称为 GPC-100 或 TG-0054）是另一种基于环状双环胺结构的分子，其对 CXCR4 的亲和力高于 AMD3100，在癌症治疗方面具有潜力[71， 72]。 为解决大环结构的局限性，目前正开发几种口服生物利用度高的非大环衍生物。例如X4P-001，也称为马沃瑞沙福（Mavorixafor）或 AMD-070，其结构中包含苯并咪唑和四氢喹啉基团。马沃瑞沙福在治疗 WHIM 综合征（一种罕见的免疫缺陷病）方面显示出临床前景[69]，并且还在癌症治疗方面进行研究[70]。另一个有前景的化合物是 Glycomimetics 公司开发的 GMI-1359，它能同时抑制 CXCR4 和 E-选择素，通过其双重抑制特性展现出治疗潜力[73]。 其他的小分子抑制剂包括USL311，这是一种由 Proximagen 公司开发的口服生物利用度良好的化合物，由于其芳香族和杂环结构，能选择性地与 CXCR4 结合[74， 114]。其他非大环抑制剂，如 IT1t（一种类似小异硫脲衍生物的分子）[76]，或含杂环的分子如 MSX-122 和 BPRCX807，目前处于临床前阶段，正在针对包括癌症治疗在内的多种治疗应用进行研究[77， 80]。 最后，正在研发的用于CXCR4 拮抗作用的其他小分子还包括 KRH-1636 [78] 及其口服生物利用度更高的衍生物 KRH-3955，它们显示出比 AMD3100 更强的抗 HIV-1 活性，使其成为抗 CXCR4 疗法的有希望的候选药物 [79]。 单克隆抗体 已开发出几种针对CXCR4 的单克隆抗体（mAbs）用于治疗，尤其是在癌症治疗方面。例如，百时美施贵宝公司开发的乌洛库普单抗（也称为 BMS-936564 或 MDX-1338），这是一种全人源化的 IgG4 单克隆抗体，在血液系统肿瘤和实体瘤的临床前模型中均显示出疗效[100]。其他例子包括辉瑞公司的 PF-06747143（一种人源化 IgG1 抗 CXCR4 抗体）[101， 102]、礼来公司的 LY2624587（一种重组人源化抗 CXCR4 单克隆抗体）[103] 以及皮埃尔法伯制药公司开发的 F50067（Hz515H7）（一种 IgG1 单克隆抗体），这些抗体主要在血液系统恶性肿瘤中进行了早期临床试验[104]。 除了传统的抗体之外，蛋白质工程的进步还促成了新型治疗性抗体衍生物的开发。例如，由Ablynx 公司开发的双表位抗 CXCR4 VHH 药物 ALX-0651 就是专门用于干细胞动员的[105]。另一个创新的例子是 AdAlta 公司开发的重组 Fc 融合蛋白 AD-214。AD-214 由两个前端与 CXCR4 结合的 AD-114 i-body 分子组成，并在尾部融合了一个 Fc 片段。在针对间质性肺病（ILD）或慢性肾病（CKD）患者的 1 期临床试验中，这种融合蛋白已显示出安全性、耐受性和良好的药代动力学特性，其应用重点在于治疗纤维化疾病[106]。 天然产物 还有一些天然产物也被确认为CXCR4 拮抗剂。在这方面，海洋来源的黄酮二聚体青霉黄酮 A（PXA）作为一种 CCR5/CXCR4 双重共受体拮抗剂，在 HIV 感染方面具有有趣的应用[107]，以及来自传统中药的各种成分，如萨可皂苷 A（SSA），已被证明具有作为 CXCR4 抑制剂的潜力[108]。 适配体和脂质 针对CXCR4 的新兴方法还包括一些适配体和脂质。一个显著的例子是 NOX-A12（也称为奥拉普替肽聚乙二醇），这是一种 Spiegelmer 适配体，可靶向 CXCR4，并主要在 CXCR4+血液系统恶性肿瘤中进行了研究[109]。最后，一种双（环胺）封端的胆固醇脂质，称为 BAT-1，已被开发用于 CXCR4 靶向药物递送系统[110]。 靶向趋化因子受体CXCR4 的癌症疗法 CXCR4 作为诊断和反应监测的分子标志物 CXCR4 在多种癌症类型中的过度表达及其通过 CXCR4/CXC12 轴在肿瘤进展中的关键作用，使这种趋化因子受体成为癌症诊断、反应评估和患者分型的有吸引力的靶点[114]。分子放射成像提供了一种非侵入性方法，其中通过正电子发射断层扫描（PET）或单光子发射计算机断层扫描（SPECT）追踪靶向放射性标记示踪剂[115， 116]（图 3A）。 图3 在癌症诊断和治疗中靶向趋化因子受体CXCR4。A 利用针对 CXCR4 的探针在正电子发射断层扫描（PET）、单光子发射计算机断层扫描（SPECT）或近红外（NIR）荧光等成像技术中将 CXCR4 作为分子标志物用于诊断和反应监测。B CXCR4 抑制剂用于癌症治疗。展示了 CXCR4 拮抗剂，包括小分子、肽、抗体和微小 RNA，以及它们潜在的治疗效果。C 靶向 CXCR4+癌细胞的药物递送。由不同材料组成的载有不同治疗有效载荷的药物载体纳米颗粒（NP）及其在 CXCR4 过表达癌细胞中的抗肿瘤效果。ADC：抗体药物偶联物 Pentixafor（CPCR4-2）是一种靶向 CXCR4 的药物，可通过 1，4，7,10-四氮杂环十二烷-1，4，7，10-四乙酸（DOTA）螯合剂标记上镓-68 同位素（68Ga-Pentixafor）。这种放射性示踪剂在血液系统癌症的正电子发射断层扫描（PET）成像诊断中被视为一项突破，因其对 CXCR4+肿瘤具有高度选择性，肝脏蓄积量极低，且成像对比度高。它已在淋巴增生性恶性肿瘤中成功进行了评估，其结果与[18F]-氟脱氧葡萄糖成像相比具有互补性或优越性[117]。68Ga-Pentixafor 还在慢性淋巴细胞白血病（CLL）[118]、非霍奇金淋巴瘤（NHL）[118， 119]、急性髓系白血病（AML）[120， 121]和多发性骨髓瘤（MM）[122，123，124，125，126]中进行了评估，其中多发性骨髓瘤是临床研究最多的。 尽管Pentixafor 在血液系统癌症中表现出色，但在实体瘤中的应用却较为有限[127，128，129]。PentixaTec 是 Pentixafor 的一种衍生物，专为锝 -99 标记（[99mTc]Tc-PentixaTec）而设计，它在 CXCR4+ 组织中也表现出选择性摄取，并在单光子发射计算机断层扫描（SPECT）成像方面取得了令人鼓舞的结果[130]。虽然其他同位素也已与 Pentixafor 或基于 Pentixafor 的肽结合[131]，但 68Ga-Pentixafor 仍是临床应用中最为重要的。 除了Pentixafor 之外，CXCR4 靶向肽 LY25109249 的衍生物也通过 DOTA 偶联（FRM001）进行了修饰，以便用镓-67/68、钇-90 和镥-177 进行放射性标记，用于放射性成像和潜在的诊疗应用。从这个意义上说，67/68Ga-FRM001 在小鼠模型中显示出较高的肿瘤摄取，但也有明显的肝脏聚集[132]。另一种基于 LY25109249 的示踪剂使用了比 DOTA 更稳定的螯合剂 1，4，7-三氮杂环壬烷-1，4，7-三乙酸（NOTA），用于标记铜-64。由此产生的 64CuNOTA-CP01 在 PET 成像中表现出 CXCR4 特异性肿瘤靶向，但肝脏聚集仍然相当明显[133]。BL01 是另一种 LY25109249 衍生物，当用镓-68 和镥-177 标记时，也显示出类似的结果[134]，但当重新设计为用氟-18（18F）标记时，采用两种不同的策略（18FBL08 和 18FBL09），在临床前模型中实现了高对比度的 PET 成像[135]。 除了基于肽的示踪剂之外，还开发了诸如苯磺酰胺衍生物之类的其他小分子作为CXCR4 靶向 PET 成像的放射性配体。这种小分子用氟-18 标记后，在小鼠模型中显示出有效的肿瘤检测效果[136]。 著名的CXCR4 拮抗剂 AMD3100 也已被用铜 -64 [137]、镓 -67 [138]、锌 -62 [139] 和锝 -99 等不同同位素进行放射性标记，用于正电子发射计算机断层扫描/单光子发射计算机断层扫描（PEC/SPECT）成像 [140]。尽管这些示踪剂显示出 CXCR4 特异性摄取，但在体内它们也在肝脏、肾脏和一些免疫器官中出现了脱靶蓄积。随后，尽管通过使用几种连接子和螯合剂（DOTA 或 NODA 衍生物）对镓 -68 标记的 AMD3100 示踪剂进行了优化以改善生物分布，但它们仍未能减少肝脏和脾脏的蓄积 [141]。 AMD3465 是 AMD3100 的优化版[142]，其作为 PET 成像用的 64Cu-AMD3465 在 CXCR4 特异性方面优于 64Cu-AMD3100，尽管它在肝脏和肾脏中仍有相当程度的摄取[143]。然而，在异种移植小鼠模型中，用于 SPECT 成像的 99mTc-AMD3465 在肝脏中的积累量较低[144]。AMD3465 还被用碳-11 标记为 N-[11C]甲基-AMD3465，在 C6 胶质瘤肿瘤模型中显示出良好的 CXCR4 选择性。重要的是，碳-11 的半衰期明显短于 64Cu 和 99mTc，这可能也有助于减轻患者的辐射负担[145]。此外，AMD3465 还被用氟-18 标记，其中最有前景的候选物是 18FMCFB（具有高 CXCR4 结合能力和选择性）[146]、18FRPS-547 和 18FRPS-5324，后者在体内与 68Ga-Pentixafor 相比，肿瘤与正常组织的比值更高[147]。 AMD3100 的环胺衍生物也已被标记上碘-131 和溴-76，其中后者（76Br-HZ270）在脑癌的正电子发射断层扫描成像中显示出高肿瘤摄取率和低背景信号，但不适用于中枢神经系统肿瘤[148]。另一种 CXCR4 拮抗剂 CuCB-Bicyclam 被标记上铜-64（64Cu-CuCB-bicyclam），在体内表现出比 64Cu-AMD3100 和 64Cu-AMD3456 更高的亲和力和特异性[149]。 除了放射性成像技术外，基于荧光的技术也在CXCR4 靶向诊断中崭露头角。例如，一种用磺化 Cy5 标记的 Pentixafor 示踪剂（MK007）已使 CXCR4 靶向荧光内镜能够检测出巴雷特食管小鼠模型中的异型增生病变[150]。在另一种方法中，CXCR4 肽拮抗剂 Balixafortide（POL6326）也已成功与荧光探针结合，用于特异性检测乳腺癌转移灶在前哨淋巴结中的情况[151]。 CXCR4 作为癌症治疗的分子靶点 CXCR4 是癌症治疗的一个颇具吸引力的靶点，因为它在肿瘤生长、转移以及塑造肿瘤微环境方面发挥着作用[152]。它还促进了癌细胞的归巢以及对远处器官的侵袭，使肿瘤细胞能够在诸如骨髓这样的保护性微环境中得以庇护和增殖[153]。靶向并阻断 CXCR4 可以破坏这些过程，从而阻止肿瘤进展，降低对化疗的耐药性，并支持免疫疗法，使其成为抗癌策略开发中的重要焦点[47， 60， 154]（图 3B）。由于 CXCR4 在超过 20 种癌症类型中过度表达，已开发出多种拮抗剂，主要是小分子、肽和抗体来靶向该受体，其中许多已进入临床试验（表 2）。在本节中，将讨论最具有临床意义的实例，以及旨在破坏 CXCR4/CXCL12 轴的其他治疗策略。 表2 针对癌症中 CXCR4 的治疗干预措施（临床试验） 小分子 CXCR4 最广泛研究的小分子拮抗剂之一是 AMD3100，也称为普乐沙福（商品名Mozobil）。2008 年，美国食品药品监督管理局（FDA）批准其用于治疗因干细胞采集困难而难以将造血干细胞祖细胞（HSPCs）动员至外周血的患者。在此意义上，AMD3100 与粒细胞集落刺激因子（G-CSF）联合使用，以增强淋巴瘤或多发性骨髓瘤患者 [155， 156] 以及患有淋巴瘤或实体瘤的儿童 [157， 158] 自体移植时 HSPCs 的动员。 普乐沙福也是一种化疗增敏剂，因其在干细胞动员中的作用，可使急性髓系白血病（AML）[159, 160]、慢性淋巴细胞白血病（CLL）[161]、多发性骨髓瘤（MM）[162， 163]和骨髓增生异常综合征（MDS）[164]等血液系统恶性肿瘤中的癌细胞更多地暴露于化疗药物。它也在实体瘤中进行探索，通常与抗 PD1 的 Cemiplimab 等免疫检查点抑制剂联合使用，已在转移性胰腺癌患者中进入 2 期临床试验（NCT04177810）。此外，普乐沙福能够穿过血脑屏障，在与抗 VEGF 治疗联合使用时，在高级别胶质瘤患者中已显示出安全性[165]。目前，它还在胶质母细胞瘤（GBM）患者中与标准的替莫唑胺放化疗联合使用，进行 2 期临床试验（NCT03746080）。总体而言，普乐沙福是研究最多的 CXCR4 拮抗剂，有超过 150 项注册临床试验，其主要治疗重点在于血液系统癌症。 马沃瑞沙福（X4P-001，AMD070）是另一种口服生物利用度高的 CXCR4 拮抗剂，可增强 CD8+细胞浸润，并减少肿瘤微环境中的免疫抑制细胞。它已在晚期肾细胞癌（RCC）患者中与免疫检查点抑制剂（ICI）如纳武利尤单抗联合使用进行了测试[70]，以及与阿昔替尼联合使用[166]，显示出可管理的安全性特征和潜在的抗肿瘤活性。因此，未来这可能会成为一种三联疗法。马沃瑞沙福在与依鲁替尼（激酶抑制剂）联合用于华氏巨球蛋白血症患者[167]以及与帕博利珠单抗（抗 PD-1）联合用于黑色素瘤患者[168]时也已被证明具有临床安全性。最近，马沃瑞沙福已获美国食品药品监督管理局（FDA）批准，以 Xalremdi 为商品名用于治疗 WHIM 综合征[169]。 布里克索福（GPC-100，TG-0054）是另一种可生物利用的 CXCR4 拮抗剂，可动员小鼠和健康患者的造血干细胞（HSCs）[71]。在一项 2 期试点研究中，布里克索福联合粒细胞集落刺激因子（G-CSF）成功地将非霍奇金淋巴瘤（NHL）、霍奇金淋巴瘤（HL）和多发性骨髓瘤（MM）患者的造血干细胞动员到外周血中[170]。一种新型的与β肾上腺素能阻滞剂普萘洛尔和 G-CSF 的联合用药方案显示出比标准的泊沙索福加 G-CSF 治疗更强的造血干细胞动员效果[171]。这种三联疗法正在多发性骨髓瘤患者中进行的一项 2 期临床试验（NCT05561751）中接受研究。 由GlycoMimetics 公司研发的 GMI-1359 是一种 CXCR4 和 E-选择素的双重抑制剂，在急性髓系白血病（AML）中能促进白血病细胞向外周血动员，并延长了 PDX 模型中的生存期[19]，在多发性骨髓瘤（MM）的临床前模型中也有类似效果[172]。此外，GMI-1359 在骨转移中表现出抗转移活性，并且比单独使用 CXCR4 拮抗剂 CTCE-9980 更有效地使癌细胞对多西他赛敏感[73]。重要的是，GMI-1359 在人体中使用是安全的（NCT02931214），并且在 HR+转移性乳腺癌患者中显示出了靶向效果（NCT04197999）。 最终，由普罗西米根公司研发的USL311 单独使用以及与洛莫司汀联合使用，在晚期实体瘤和复发性胶质母细胞瘤患者中开展的 1/2 期临床试验因商业策略（而非安全性问题）而终止（NCT02765165）。 肽类物质 肽类物质是癌症治疗中另一类有前景的CXCR4 拮抗剂。其中，Motixafortide（BL-8040）是临床进展最为显著的产品之一，它是一种长效的 CXCR4 拮抗剂，作为单一疗法即可诱导 CD34+细胞动员[173]。该药物已获美国食品药品监督管理局（FDA）批准，以 Aphexda 为商品名，与粒细胞集落刺激因子（G-CSF）联合用于多发性骨髓瘤（MM）患者的造血干细胞动员及后续自体移植。在 GENESIS 三期临床试验中，该产品表现出良好的安全性[174]。除了用于干细胞动员外，Motixafortide 还正在与阿糖胞苷联合用于复发/难治性急性髓系白血病（AML）[175]，以及与奈拉滨联合用于复发/难治性 T 细胞急性淋巴细胞白血病和淋巴母细胞淋巴瘤[176]的联合疗法中进行探索。此外，Motixafortide 还正在与 PD-1 抑制剂帕博利珠单抗和化疗联合，作为转移性胰腺导管腺癌（PDAC）二线治疗进行评估[87， 177]。目前，一项类似的 2 期研究也在进行中，旨在评估其与 PD-1 抑制剂西米普利单抗及化疗联合使用在胰腺导管腺癌患者中的疗效（NCT04543071）。最后，莫替沙芬肽正与那他珠单抗联合用于镰状细胞病的基因治疗中，作为干细胞动员剂接受测试[178]。 另一种肽类拮抗剂LY2510924（礼来公司）已进入针对实体瘤患者的多项临床试验。该肽最初在一项 1 期剂量递增研究中显示出安全的 CD34+动员作用[179]，但在小细胞肺癌中与化疗（卡铂/依托泊苷）联合使用[180]或在转移性肾细胞癌中与舒尼替尼联合使用[181]时，未能显示出显著的疗效改善。最近的一项 1 期研究证实，LY2510924 与度伐利尤单抗联合用于晚期难治性实体瘤是安全的[182]，尽管没有进一步的研究。在血液系统癌症中，临床前研究显示，LY2510924 作为单药治疗急性髓系白血病（AML）时，其抗白血病活性优于 AMD3100，并且与化疗联合使用时具有协同抗肿瘤作用，通过有效动员白血病细胞、诱导髓样分化和阻断促存活信号[183]。最后，LY2510924 也安全地与伊达比星/阿糖胞苷联合用于复发/难治性 AML 患者[184]。 由Spexis 公司研发的巴利沙福肽（POL6326）是一种肽类拮抗剂，在与艾立布林联合用于 HER2 阴性转移性乳腺癌时显示出良好的安全性[92]。然而，这种组合并未增强艾立布林的疗效[185]。另一方面，巴利沙福肽作为单药治疗能够诱导健康个体[186， 187]和血液系统疾病患者（NCT01413568）[188]的造血干细胞动员。此外，在前列腺癌骨转移的小鼠模型中，巴利沙福肽增强了多西他赛的抗肿瘤活性[189]。 最后，CTCE-9908 是一种 CXCL12 类似物，能强烈阻断 CXCR4/CXCL12 轴，从而在包括骨肉瘤和黑色素瘤[190]、食管癌[95]、乳腺癌[191， 192]和前列腺癌[193， 194]在内的多种临床前模型中抑制肿瘤生长和转移。该肽被 TCM 生物技术公司重新命名为 PTX-9908，已进入人体研究阶段，用于治疗肝癌。在此背景下，一项 1/2 期临床试验正在评估 PTX-9908 在经导管动脉化疗栓塞术（TRACE）后预防不可切除肝细胞癌患者肿瘤复发的效果（NCT03812874）。此外，TCM 生物技术公司还在研究其与免疫检查点抑制剂联合使用的情况。 抗体 针对CXCR4 的单克隆抗体（mAbs）在实体瘤和血液系统恶性肿瘤中均显示出良好的效果，其通过阻断 CXCR4/CXCL12 轴并诱导癌细胞凋亡发挥作用。 乌洛库普单抗（BMS-936564）由百时美施贵宝公司研发，是一种全人源 IgG4 单克隆抗 CXCR4 抗体。临床前研究显示，该抗体在几种血液系统癌症（急性髓系白血病、非霍奇金淋巴瘤和多发性骨髓瘤）中具有抗肿瘤作用[195]，其通过一种不依赖半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶的机制激活细胞凋亡，该机制涉及活性氧（ROS）的产生[100]。乌洛库普单抗与来那度胺和硼替佐米联合使用时，在复发/难治性多发性骨髓瘤患者中表现出较高的缓解率，包括那些经过大量前期治疗的患者[196]。此外，乌洛库普单抗与依鲁替尼联合使用在患有突变型华氏巨球蛋白血症的患者中也被证明是安全的[197]。然而，一项与阿糖胞苷联合用于急性髓系白血病患者的 1/2 期试验因入组缓慢和业务目标变更而终止（NCT02305563）。同样，另一项针对胰腺癌和小细胞肺癌患者的试验也因疗效不佳而终止（NCT02472977）。 LY2624587 是礼来公司开发的另一种全人源化单克隆抗体，在血液系统恶性肿瘤的临床前模型中可促进细胞凋亡[103]。该抗体通过受体内化使细胞表面的 CXCR4 下调，尽管在动物模型和人体研究中对造血干细胞的动员作用较弱，尤其是与它的肽类类似物 LY2510924 相比[103， 198]。 辉瑞公司的PF-06747143 是一种人源化 IgG1 CXCR4 抗体，在非霍奇金淋巴瘤（NHL）、急性髓系白血病（AML）和多发性骨髓瘤（MM）的临床前模型中表现出强大的抗肿瘤活性[20， 101]。此外，在多发性骨髓瘤模型中与硼替佐米联合使用，在化疗耐药的急性髓系白血病患者来源的异种移植（PDX）模型中与柔红霉素和阿糖胞苷联合使用时，PF-06747143 均显示出强大的协同作用[101]。与 Ulocuplumab 等其他单克隆抗体不同，该抗体除了能动员恶性血液细胞外，还具有双重效应机制，包括抗体依赖性细胞毒性（ADCC）和补体依赖性细胞毒性（CDC）。PF-06747143 在一项针对急性髓系白血病患者的 1 期试验中进行了评估，试验中该抗体作为单药治疗或与化疗联合使用（NCT02954653），但由于战略业务优先级的原因，该研究已终止。 另一种IgG1 抗 CXCR4 抗体 F50067（Hz515H7）也因在急性髓系白血病（AML）和多发性骨髓瘤（MM）的临床前抗肿瘤活性而进入 1 期临床试验。与 PF-06747143 类似，F50067 除了能促进造血细胞动员外，还通过抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用（ADCC）和补体依赖性细胞毒作用（CDC）发挥抗肿瘤作用[199]。遗憾的是，由于血小板减少等血液学毒性，F50067 单药治疗或与来那度胺和地塞米松联合治疗复发/难治性 MM 患者的临床研究已终止[104]。 除了传统抗体外，还探索了一种类似ALX-0651 的双表位抗体，这种抗体被认为是一种纳米抗体。尽管其在临床前具有潜力，但在临床试验（NCT01374503）中，ALX-0651 并未改善标准治疗方案的效果。 基于寡核苷酸的药物 已发现多种调节CXCR4 表达的微小 RNA（miRNA）在癌症治疗方面具有潜力[200]。其中一些包括 miR-146，它通过下调 CXCR4 抑制结直肠癌细胞（CRC）的增殖[201]。此外，miR-193-5p 在 CRC 中起着肿瘤抑制因子的作用[202]，与 5-氟尿嘧啶（5-FU）和奥沙利铂联合使用时，能增强对 CXCR4 的抑制作用，降低化疗耐药性[203]。在乳腺癌干细胞中，miR-139 的过表达通过降低 CXCR4 水平减少干细胞归巢和侵袭[204]。同样，miR-613 的过表达通过靶向 CXCR4 抑制骨肉瘤的生长和肺转移[205]。这些事实表明，调节 CXCR4 的 miRNA 可用于抑制多种癌症的转移和肿瘤进展。然而，尽管已发现许多靶向 CXCR4 的肿瘤抑制或致癌 miRNA[200]，但其临床应用主要受到寡核苷酸在血液中降解和脱靶毒性的影响[206]。这些挑战同样适用于其他基于寡核苷酸的治疗药物，如干扰 RNA（RNA 干扰）或小干扰 RNA（siRNA）。因此，目前的研究重点在于开发合适的纳米载体或其他先进的递送系统，以提高其稳定性和细胞靶向特异性[207]。 CXCR4+ 细胞的靶向药物递送 癌症治疗越来越注重开发创新疗法，以选择性地靶向肿瘤细胞，旨在最大程度减少传统化疗中因药物在非靶细胞中蓄积而产生的严重副作用。在此背景下，针对趋化因子受体CXCR4 的创新纳米医学工具展现出巨大潜力，能够选择性地清除受体过度表达的癌细胞，从而限制疾病进展和肿瘤扩散，同时将副作用降至最低。尽管目前尚无获美国食品药品监督管理局（FDA）批准的针对 CXCR4 的癌症靶向药物递送系统，但鉴于其在革新癌症治疗方面的巨大潜力，科学界正在为此付出巨大努力。 随着纳米生物技术的最新进展，过去几十年中已开发出多种非病毒载体，这些载体采用脂质、聚合物、无机物、金属或蛋白质基材料，旨在将不同类型的附着或封装药物选择性地递送至CXCR4+细胞（图 3C）。递送的分子目录包括大量细胞毒性、抗有丝分裂和抗血管生成药物，以及小干扰核酸、光热分子甚至用于放射治疗的放射性同位素。此外，许多这些方法还报告了双重效应，即 CXCR4/CXCL12 信号的特异性阻断与选择性递送的治疗分子的作用协同发挥作用（表 3）。鉴于在临床前研究中观察到的有希望的结果，最成功的方法预计将在不久的将来进入早期临床试验。 表3 CXCR4 靶向药物递送系统 靶向CXCR4 脂质纳米颗粒 已有多款脂质体在其表面装饰了CXCR4 特异性肽激动剂和拮抗剂，以选择性地将封装的抗肿瘤分子递送至 CXCR4+癌细胞。在一种方法中，pH 敏感型纳米脂质体通过共价键与 CXCR4 的天然配体 SDF1α 蛋白质结合，将海洋来源的药物耶西毒素封装并靶向递送至 CXCR4+前列腺癌和腺癌细胞[208]。同样，封装了阿霉素且表面装饰有 CXCR4 拮抗剂环肽 R 的脂质体，在黑色素瘤小鼠模型中显著降低了阿霉素的有效剂量和肺转移[209]。 在此基础上进一步拓展，另一种创新配方将三种药物组合在一起，包括血管生成抑制剂索拉非尼、降低缺氧的全氟己烷以及免疫激活剂PLX3397，封装在单个 CXCR4 靶向脂质体中，并用 LFC131 肽进行功能化处理。这种策略通过三种分子在 CXCR4+患者来源的肝癌异种移植模型中的协同作用，成功克服了索拉非尼耐药性[210]。 著名的CXCR4 拮抗剂 AMD3100（普乐沙福）也被广泛用于 CXCR4 靶向脂质体的表面修饰。一项研究采用 AMD3100 修饰的脂质体来递送 VEGF siRNA，在肝细胞癌模型中实现了有效的抗血管生成治疗[211]。在另一种方法中，具有光热特性的疏水分子 IR780 被封装在 AMD3100 修饰的脂质体中。在近红外激光照射下，该系统在乳腺癌小鼠模型中实现了显著的抗肿瘤和抗转移效果[212]。在这两种情况下，AMD3100 都发挥了双重作用，既促进了治疗分子的细胞内递送，又同时阻断了 CXCR4 信号传导，从而增强了治疗效果。 此外，CXCR4 双环四胺配体 BAT1 已用于将阿霉素靶向递送至 CXCR4+慢性淋巴细胞白血病模型，表现出类似的双重作用机制[213]。在一种诊疗一体化的方法中，具有超声造影特性的脂质纳米泡与 CXCR4 拮抗剂 AMD070 和化疗药物紫杉醇偶联。这些纳米泡为超声引导下的肿瘤成像和靶向药物递送提供了双重功能[214]。 最后，通过一种创新技术，将M1 巨噬细胞膜来源的囊泡与结合了 SDF-1 类似物的脂质体相结合，开发出了 CXCR4 靶向的杂合纳米囊泡。随后，将锰和阿霉素负载到生成的杂合纳米囊泡中，展示了靶向药物递送和 M0 巨噬细胞向 M1 巨噬细胞重编程的双重功能。这种创新方法在结肠癌和乳腺癌的小鼠模型中表现出强大的肿瘤抑制活性[215]。 CXCR4 靶向聚合物纳米粒子 不同类型的聚合物材料已被用于开发CXCR4 靶向纳米粒子，其中聚乳酸 - 羟基乙酸共聚物（PLGA）衍生的载体是研究最为广泛的。一种方法是利用 CXCR4 拮抗剂 LFC131 五肽修饰包裹阿霉素的 PLGA 纳米粒子表面，从而实现对乳腺癌和肺癌细胞的靶向药物递送[98， 216]。该肽还用于将表阿霉素靶向递送至肝细胞异种移植模型，使用的是类似的 PLGA-TPGS 纳米粒子[217]。 在此基础上进一步推进，开发了一种策略，即利用LFC131 修饰的聚乙二醇 - 聚乳酸 - 羟基乙酸共聚物纳米颗粒，用于联合递送抗血管生成药物索拉非尼和甲孕酮。这种组合在肝癌异种移植模型中产生了协同效应，因为甲孕酮诱导的 CXCR4 下调以及 LFC131 对 CXCR4 的阻断，抵消了长期使用索拉非尼后观察到的 CXCR4 的上调和激活[218]。类似的方法使用 CTCE 肽修饰的聚乙二醇 - 聚乳酸 - 羟基乙酸共聚物纳米颗粒，用于联合递送索拉非尼和 MEK 抑制剂 AZD6244，旨在预防肝细胞癌动物模型中的索拉非尼耐药性[219， 220]。这些纳米颗粒后来被改造用于递送 p53 mRNA，以诱导肝细胞癌细胞中的 p53 基因表达并减少免疫抑制[221]。此外，CXCR4 拮抗剂 AMD3100 也被纳入聚乳酸 - 羟基乙酸共聚物纳米颗粒中，用于将索拉非尼[222]或 siRNA 分子[223]靶向递送至癌细胞。 其他聚合物材料也得到了探索。例如，CXCR4 拮抗肽 E5 已用于将 PEG-PE 共聚物纳米颗粒[99， 224]或 DSPE-mPEG2000 胶束[225]靶向递送至 CXCR4+癌细胞。这些系统通过结合 CXCR4 信号传导的阻断与封装阿霉素的靶向递送，在乳腺癌和急性髓系白血病（AML）的小鼠模型中显著延长了生存期。最近，设计了用 CXCR4 选择性肽 T22 修饰的还原响应型二硫键交联聚合物胶束，用于靶向共递送 BCL-2 抑制剂维奈克拉和 FLT3 抑制剂索拉非尼。这种双重抑制剂策略显示出强大的协同作用，在 FLT3-ITD AML 的小鼠模型中显著延长了生存期[226]。 LFC131 肽也被用于修饰 PAMAM 树枝状大分子[227]或壳聚糖纳米粒子[113]，以将封装的阿霉素或多西他赛靶向递送至 CXCR4+癌细胞。此外，AMD3100 被掺入葡聚糖纳米凝胶纳米粒子中，用于选择性递送阿霉素，在原位乳腺癌模型中增强抗转移效果[228]。有趣的是，最近开发出了完全由 AMD3100 衍生的聚阳离子材料，当与抗肿瘤 siRNA[229]或微小 RNA 分子[230]偶联时，可同时抑制 CXCR4 并递送治疗性 RNA，提供协同的双重作用疗法。 最后，采用了一种创新的方法，对CXCR4 特异性 PET 显像剂 68Ga-Pentixafor 进行了改造，使其能够结合不同的α和β发射体，包括镥-177（177Lu-Pentixather）和钇-90（90Y-Pentixather），从而首次实现了针对 CXCR4 的内放射治疗。该疗法与常规化疗及自体干细胞移植相结合，在晚期多发性骨髓瘤患者中取得了显著疗效[231]。最近，还开发了一种含镥-177 并封装 KRAS 膜结合阻断分子 C19 的树状大分子纳米放射载体，用于 CXCR4+胰腺癌细胞的双靶向放射和化疗[232]。 CXCR4 靶向无机纳米粒子 利用无机材料实现CXCR4 靶向的方法仍相对较少有人探索。在为数不多的报道策略中，有一个例子是开发了载有阿霉素的介孔二氧化硅纳米粒子（MSM），其表面用 CXCR4 特异性 T22 类似肽进行封端。这些纳米粒子被设计成能够选择性地内化并释放药物到 CXCR4+ B 细胞非霍奇金淋巴瘤中，显示出有效的药物递送和肿瘤靶向效果[233]。最近，通过将 CXCR4 特异性 E5 肽与透明质酸结合，开发了一种双靶向系统，用于制备载有柔红霉素的普鲁士蓝纳米粒子。该系统同时靶向 CXCR4 和 CD44 受体，在急性髓系白血病异种移植模型中显著抑制了白血病原始细胞的增殖和转移扩散[234]。 CXCR4 靶向抗体药物偶联物 CXCR4 特异性抗体及其衍生物不仅用于受体阻断疗法，还用于以抗体 - 药物偶联物（ADC）的形式靶向递送抗肿瘤分子。与此相关，首个 CXCR4 靶向 ADC 是通过肟键连接将 CXCR4 特异性 IgG 与微管抑制剂奥瑞司他汀偶联而开发的。该 ADC 在体外和体内均能选择性地消除 CXCR4 过表达的转移细胞，在肺转移癌模型中实现了肿瘤生长的完全抑制，同时对骨髓中非靶向的 CXCR4+造血细胞仅产生轻微影响[235]。 进一步优化了与抗CXCR4 抗体偶联的奥瑞斯汀抗体药物偶联物（ADC），重点在于降低其亲和力，以保护造血干细胞和祖细胞（HSPCs），同时保持对肿瘤细胞的选择性细胞毒性。这种方法在实体瘤异种移植模型中成功消除了 CXCR4 阳性癌细胞，产生了强大的抗肿瘤效果，同时将正常 CXCR4 阳性组织中的白细胞增多和毒性降至最低[236]。 在另一种方法中，抗CXCR4 抗体被连接到金纳米粒子上，旨在实现针对 CXCR4+乳腺癌细胞的肿瘤选择性放射治疗。生成的抗体 - 金纳米复合物选择性地内化到肿瘤细胞中，在电离辐射下通过氧化应激和 DNA 损伤增强放射敏感性，从而在体内显著抑制肿瘤生长[237]。同样，用抗 CXCR4 抗体修饰的超顺磁性铁纳米颗粒被用于靶向磁热疗，体外实验中实现了细胞活力的完全丧失，尤其是当与额外的非靶向磁性颗粒结合以增加总铁负载时[238]。另一种创新方法涉及使用抗 CXCR4 抗体修饰载有阿霉素的量子点纳米颗粒。这种策略允许在体外将药物靶向递送并受 pH 值控制释放到 CXCR4+骨髓瘤细胞中，提供了一种精准的药物递送机制[239]。 最后，一种新颖的策略将抗CXCR4 抗体的单链可变片段（ScFv）与一种 RNA 结合的鱼精蛋白肽融合，以静电方式将极化 miRNA 的巨噬细胞耦合。这些纳米复合物通过 CXCR4 拮抗作用靶向肿瘤细胞，并通过 miR-127 递送靶向巨噬细胞，从而调节肿瘤微环境。在三阴性乳腺癌的小鼠模型中，该策略成功地将 CXCR4+巨噬细胞极化为 M1 抑瘤表型，提供了双重靶向治疗效果[240]。 CXCR4 靶向蛋白纳米颗粒 尽管抗体是用于受体靶向的最广泛使用的蛋白质载体，但在过去几十年中，也成功开发了其他基于蛋白质的纳米载体，与传统抗体相比具有显著优势。其中一种主要策略是使用模块化蛋白质在一个多肽中实现多种功能，包括靶向功能。在此背景下，通过二价阳离子配位自组装的病毒模拟纳米颗粒得以开发，能够多价展示CXCR4 靶向肽配体 T22，从而增强受体选择性和在靶细胞中的内化能力[54， 241， 242]。随后，类似于抗体药物偶联物（ADCs）的方法，这种多价纳米载体（T22-GFP-H6）及其人源化版本（T22-HSNBT-H6）被化学偶联到不同的抗肿瘤药物上，包括寡氟尿苷（5-FdU）[111， 243]、寡胞嘧啶（5-AraC）[244] 或单甲基奥瑞他汀 E（MMAE）[245，246，247，248]。这些纳米缀合物静脉给药后，能够选择性地靶向 CXCR4+ 癌细胞，诱导其选择性耗竭，并使结直肠癌模型中已形成的转移灶消退[111]，同时在急性髓系白血病（AML）[244， 245]和弥漫性大 B 细胞淋巴瘤（DLBCL）[247]的小鼠模型中有效阻断肿瘤扩散。 在此技术基础上，将生物中性的绿色荧光蛋白（GFP）或高稳定性纳米球（HSNBT）支架替换为具有生物活性的结构域，从而构建出具有内在治疗作用的纳米载体，这些纳米载体在受体介导的内吞作用下直接发挥其生物作用。从这个意义上说，该系统中包含的活性蛋白包括促凋亡结构域[249]、昆虫毒液[250]以及细菌[251， 252]或植物毒素[253]。其中，携带铜绿假单胞菌外毒素（T22-PE24-H6）或白喉棒状杆菌外毒素（T22-DITOX-H6）催化结构域的纳米颗粒通过气泡素介导的细胞焦亡，对 CXCR4+ 细胞表现出最强且最具有选择性的破坏作用[251， 252， 254， 255， 256, 257， 258， 259， 260， 261， 262]。 基于这些文献，另一组研究人员探索了在CXCR4+ 黑色素瘤小鼠模型中使用 T22-PE24-H6 纳米毒素诱导肿瘤选择性及气泡素介导的免疫原性细胞死亡，当与抗 PD-1 免疫检查点抑制剂疗法联合使用时，产生了显著的协同作用[263]。随后，研究人员进一步拓展了免疫治疗策略，开发了包含气泡素 D（GSDMD）或混合谱系激酶结构域样蛋白（MLKL）等炎症蛋白的 CXCR4 靶向免疫刺激纳米颗粒，以诱导肿瘤选择性焦亡细胞死亡并随后激活免疫系统。因此，在体内给予 T22-GSDMD-H6 或 T22-MLKL-H6 纳米颗粒可显著诱导淋巴细胞浸润并缩小肿瘤体积，且未出现相关毒性[264]。 模块化肽纳米载体也经过了工程改造，以整合源自SDF-1 的肽用于 CXCR4 靶向以及多精氨酸结构域用于 RNA 的静电凝聚，旨在将干扰 RNA 靶向递送至 CXCR4+细胞。该系统成功地将抗 VEGFA siRNA 递送至 CXCR4+内皮细胞和胶质母细胞瘤细胞，减少了 VEGF 分泌并抑制了内皮细胞迁移，验证了这一策略作为有前景的抗血管生成疗法的可行性[265]。 最后，牛血清白蛋白（BSA）也被用作靶向药物递送至 CXCR4+ 细胞的蛋白质载体。在这种情况下，首先使用双功能连接剂将 CXCR4 拮抗剂 AMD3100 化学偶联到 BSA 上，然后通过生物矿化过程生成载有紫杉醇的纳米颗粒。所得的 BSA-PTX 纳米颗粒选择性地内化到 CXCR4+ 卵巢癌细胞中，在体内显示出优异的生物分布，并通过双重药物递送和 CXCR4 阻断机制显著抑制肿瘤生长和转移[266]。 结论与未来展望 CXCR4 已成为癌症治疗中一个引人注目的分子靶点，这是由于其在多种肿瘤中过度表达，并且与不良预后和癌症干细胞表型密切相关。为了治疗用途，已开发出众多阻断和靶向该受体的工具（表 1），其中大多数最初是因其在 HIV 感染中的作用而被发现的。在过去十年中，许多这些靶向策略已被重新用于癌症治疗，为临床干预开辟了新的可能性。 鉴于CXCR4 在超过 20 种不同类型的肿瘤中过度表达，此前已鉴定出的许多分子如今已通过抑制 CXCR4 应用于癌症的诊断和治疗。这些疗法已显示出非常有前景的结果，从而促成了众多临床试验（表 2），尤其是在与标准化疗联合使用时。然而，尽管针对 CXCR4 的治疗改善了 CXCR4 阳性癌症的预后，但针对 CXCR4 信号传导的小分子抑制剂和抗体尚未进入癌症治疗市场。从这个意义上说，临床试验中观察到的有限活性和高毒性总体上阻碍了它们的临床转化。 在此背景下，识别有效的分子标记以区分肿瘤细胞和健康细胞对于开发精准癌症疗法至关重要。因此，将药物靶向递送至癌细胞有可能彻底改变癌症医学的未来，通过提高药物在癌组织中的选择性摄取，从而提高治疗效果，同时将全身副作用降至最低。在此背景下，过去十年中出现了众多生物技术方法，旨在将创新疗法选择性地递送至CXCR4+癌细胞。其有效载荷包括细胞毒性、抗有丝分裂或抗血管生成剂、小干扰核酸、光热分子，甚至用于放射治疗的放射性同位素（表 3）。因此，通过将这些强效药物集中在 CXCR4 过度表达的肿瘤细胞中，研究人员旨在最大限度地提高治疗效果，同时减少对健康组织的附带损害。另一种有前景的策略涉及开发双特异性或多特异性药物，例如抗体或纳米颗粒，它们可以同时靶向多个标志物，包括 CXCR4 和其他癌症干细胞标志物。这种策略能够为解决癌症干细胞的可塑性问题提供一种更全面的方法，因为如果仅针对一种标志物，它们可能会逃避治疗。例如，像针对结直肠癌中 LGR5 和 EGFR 的双特异性抗体，有可能通过更好地控制癌症干细胞群体并阻止肿瘤进展来改善治疗效果。 总的来说，尽管许多这些靶向递送策略仍处于临床前阶段，但其令人鼓舞的结果表明，其中一些生物技术创新可能很快就会进入临床试验。从这个意义上说，针对CXCR4 高表达患者（不论肿瘤类型）开展的篮式临床试验可能会进一步加快这些疗法的应用。此类试验将有选择地招募 CXCR4+癌症患者，从而提高积极反应的可能性，同时将全身毒性风险降至最低。在这种情况下，精准医疗将在推进 CXCR4 靶向疗法方面发挥关键作用。为此，诸如 Pentixafor 这样的放射性示踪剂等成像剂将大有用处，它们能够检测肿瘤和转移灶中的 CXCR4 表达，从而识别最有可能从这些疗法中获益的患者，并监测其对治疗的反应。因此，通过将这些诊断工具与靶向药物递送系统相结合，有望提高 CXCR4 靶向治疗的疗效和安全性，最终改善治疗效果。                                END                                 译文仅供参考，欢迎批评指正。 声明：① 本公众号旨在促进核药相关人士更全面的了解国内外核素诊疗相关信息，不对任何药品和诊疗项目作推荐，如需了解具体疾病诊疗信息，请咨询当地医生。 ②免责声明：因文中相关信息产生的任何直接或间接损失，核药文献公众号不承担任何责任。 ③版权声明：文献版权归英文原版作者所有，翻译仅供学习交流，不做任何商业用途。如涉及侵权，请联系公众号管理员处理。