TQB-2930

注：本文不构成任何投资意见和建议，以官方/公司公告为准；本文仅作医疗健康相关药物介绍，非治疗方案推荐（若涉及），不代表平台立场。任何文章转载需要得到授权。 7月30日，据CDE官网显示，南京正大天晴（正大天晴子公司）申报的1类新药NTQ5082胶囊获批临床，拟用于补体参与介导的溶血性疾病，包括但不限于阵发性睡眠性血红蛋白尿症、非典型溶血性尿毒症综合征、免疫性血小板减少症和冷凝集素病等。 截图来源：CDE NTQ5082胶囊是一款补体因子B（CFB）抑制剂在研药物。此次NTQ5082胶囊获批临床，意味着这款新药即将在这些患者群体中启动临床研究。补体是一种血清蛋白质，存在于人和脊椎动物血清及组织液中，不耐热，活化后具有酶活性，可介导免疫应答和炎症反应，可被抗原抗体复合物或微生物所激活，导致病原微生物裂解或被吞噬。补体因子B是补体 旁路活化途径中的一个重要成分，又称C3激活剂前体。补体因子B分子量为93kDa，人血中浓 度约为3μM，主要在肝脏合成，也发现在眼部视网膜色素上皮细胞中有合成。2023年12月，诺华（Novartis）的补体B因子抑制剂iptacopan获得FDA批准，用于治疗阵发性睡眠性血红蛋白尿症。 截图来源：药融云全球药物研发数据库 据药融云数据库显示，南京正大天晴在2024年5月提交的1类新药NTQ5082胶囊获CDE受理，并于7月30日获批临床，为药物的后续研发注入了强劲动力。 截图来源：药融云全球药物研发数据库 今年以来，NTQ3617片是南京正大天晴今年首款获批临床的1类新药，NTQ-5082胶囊是今年第2款获批临床的1类新药。目前南京正大天晴已有3款抗肿瘤1类新药NTQ2494片、NTQ1062片、NTQ3617片处于获批临床及以上研究阶段。 截图来源：药融云中国药品审评数据库 2024年至今，正大天晴（含子公司）有26款1类新药申请并获批临床，包括19款小分子药和7款大分子药，涉及抗肿瘤、皮肤病药物、生殖泌尿系统和性激素类药物、心血管系统药物、呼吸系统药物、神经系统药物等领域。 截图来源：药融云中国药品审评数据库 在抗肿瘤领域，今年以来，正大天晴（含子公司）已有注射用TQB2930、注射用TQB2102、TQB3915片、TQB3911片等20款1类新药申请并获批临床。据药融云数据库显示，在2023年全国院内抗肿瘤药和免疫机能调节药物市场销售额超1400亿元。 END 本文为原创文章，转载请留言获取授权  近期热门资源获取 后台回复关键词“报告”，获取数十篇药融云出品独家报告 后台回复关键词“CSCO”，获取2023CSCO指南 后台回复关键词“ASCO”，获取2023ASCO分癌种摘要 后台回复关键词“2023首仿”，获取2023年首仿药物获批名单 后台回复关键词“医保”，获取2022年医保目录 联系我们，体验药融云更多专业服务 会议 合作 园区 服务 数据库 咨询 定制 服务 媒体 合作 点击阅读原文，申请药融云企业版免费试用！

摘要：双特异性抗体（bpAbs）能够结合抗原上不同且不重叠的表位。这种独特的结合模式能够实现超越单特异性和双特异性抗体（bsAbs）的新作用机制，使得bpAbs成为针对肿瘤学和传染病在内的各种疾病的有效治疗剂。双特异性结合可以带来更高的亲和力和特异性，促进拮抗作用，锁定目标构象，并导致更高高效的目标聚集。这样的抗体-目标复合物可以引发强烈的激动作用，增加免疫效应功能，或导致快速的目标下调调节和溶酶体运输。这些特性不仅对治疗性抗体具有吸引力，而且越来越多地被探索用于其他模式，如抗体-药物偶联物、T细胞接合器和嵌合抗原受体。近期在bpAb工程方面的进展使得构建越来越复杂的格式成为可能，这些格式开始在临床上展现出良好前景。 1.引言 抗体治疗在2022年美国新药批准中占据了30%的比例。在开发中的抗体中，观察到包括双特异性抗体（bsAbs）在内的高度工程化分子数量显著增加。双特异性抗体（bpAbs）是bsAbs的一个子集，对同一分子目标上的独特、不重叠的表位具有特异性。这种独特的结合模式是在30多年前建立的，它能够实现差异化的作用机制（MoAs）。在过去的十年中，随着临床试验中首次取得成功，bpAbs的治疗潜力已经变得明显。这些开创性的分子为当今临床开发中越来越多的bpAbs铺平了道路（见表1）。这篇综述提供了bpAbs的不同格式和MoAs、当前的临床管线以及bpAbs的前景概述。 2.双特异性格式 在抗体发现和工程方面的进展使得构建日益复杂的结合不同表位结合域的bpAb格式成为可能。格式的选择取决于目标生物学和MoA。设计的关键考虑因素包括目标表位、单个结合域的数量和性质、半衰期延长和效应功能介导域的添加，以及确保所有域正确组装。后者可以在一个单一蛋白中用柔性连接链串联单个域，或者在含有结晶片段（Fc）域的bpAbs中，依赖于高达四种不同蛋白的正确配对以及相应的引导突变在重链（HCs）和轻链（LCs）中。有效的表位对很难合理预测或用抗体混合物实现。因此，有效地生成并筛选给定bpAb格式下的大量表位对矩阵是关键。除了功能性和可行性，开发性考虑在选择bpAb格式时至关重要。早期对bpAb的生物物理负债进行测试可以降低动物研究和临床试验失败的风险。同样，bpAb格式的选择可能会影响下游的制造和质量控制，因为bpAb格式复杂性可能导致不良的开发性或错误配对的副产品。 到目前为止，在临床上测试的bpAbs不仅具有多样的格式，还利用了大量不同的单个结合域（见图1）。单链抗体格式，如单域抗体（sdAbs）和单链可变片段（scFvs），特别容易在双特异性格式中配对。进入临床的前两个bpAbs，ALX-06517和BI 1034020，由串联的sdAbs组成。基于抗体片段的bpAbs通常在循环中具有短暂的半衰期，并且需要进一步的工程化以提高暴露量。如双特异性CAR-T疗法ciltacabtagene autoleucel和OriCAR-017所强调的，小尺寸使sdAbs成为嵌合抗原受体（CARs）的理想构建块。 到目前为止，在临床上测试的大多数bpAbs具有更典型的含Fc的结构，可以通过HC轴对面称性进行分类。对称的bpAbs由相同的HC或HC/LC对组成，而不对称分子由具有不同结合域的不同半部组成。四价分子MEDI4276和BAT2022是对称bpAbs的例子。具有2+2价态（每个整数表示分子中存在的相同副位点的数量）以及分别附加在重链（HC）的N-或C-末端的单链可变区（scFv）或单域抗体（sdAb）。11,12 KN060则是一个对称的双特异性抗体（bpAb），具有串联的sdAb臂和没有轻链（LC）。类似于KN060，三特异性TAVO412通过一个串联的sdAb臂实现双特异性靶向，该臂嵌入在一个更复杂的不对称格式中。不对称的双特异性抗体通常依赖于Fc突变，以促进双特异性抗体产品的纯化或指导异二聚体形成。例如，REGN5093的两个重链被设计成对蛋白表现出不同的亲和力，并允许纯化异二聚体产品。另一方面，GEN3009是一个不对称的双特异性抗体，其Fc区域的引导突变确保了两个不同的重链的正确配对。除了重链异二聚体化外，正确的轻链配对对于不对称双特异性抗体来说可能是一个挑战。在GEN3009的例子中，通过两个亲本抗体的温和体外反应实现正确的配对，这允许重链重组而不打乱原始的轻链配对。REGN5093展示了一种避免轻链配对问题的根本性策略，它由两个不同的重链与两个相同的轻链配对组成。这样的通用轻链可以直接从具有定义的轻链多样性的发现平台中获得，如REGN5093的例子，或者像anbenitamab和GR2002那样从现有的轻链中工程化改造而来。18–20 ISB 1442和SAR441236是不对称双特异性抗体的例子，它们分别通过增加额外的Fab或scFv结构域来扩展免疫球蛋白G（IgG）的结构，以实现更高的价态，甚至在SAR441236的情况下实现三价结合。也可以利用较小的不对称格式，如基于片段-Fab的zanidatmab23或基于片段-片段的TNB-73824。Zanidatamab将scFv结构域与一个完整的Fab臂配对，而TNB-738则从两个sdAb衍生其结合臂，并添加了一个惰性的LC以提高可制造性。在免疫球蛋白折叠之外，双特异性设计的ankyrin重复蛋白（DARPin），MP0274，突出了替代支架的潜力。 3.MoAs of bpAbs 3.1双特异性靶向通过亲和性增强了结合能力 与同一目标上的两个不同、不重叠的表位结合，使得双特异性抗体（bpAbs）与其它抗体相比具有独特的属性。许多双特异性抗体与其单特异性亲本抗体相比，显示出更优越的结合能力和更慢的解离速度。这是由于其能够通过亲和性与两个不同的表位结合在同一分子（顺式）还是不同分子（反式）上（见图2a）。与单价或双价单克隆抗体（mAbs）相比，双特异性抗体的解离可以显著变慢，使它们成为更优越的拮抗剂或反向激动剂。顺式结合形成1:1的双特异性抗体目标复合物对于这些应用很重要，以避免不必要的激动剂活性。除了表位选择外，结合域的几何排列、sdAb连接优化和亲和力调节对于实现期望的作用机制和最大化效力至关重要。Kast及其同事证明，结合域的几何形状对于HER2的双特异性和四价融合蛋白的拮抗作用至关重要，某些配置显示出激动剂活性。同样，不同的三价抗表皮生长因子受体（EGFR）IgG-纤维连接蛋白融合体的结构显示出在受体下调中不同的效力。对于基于sdAb的拮抗剂，最佳的方向和连接属性可以通过顺式亲和结合实现超高性能。最后，临床双特异性抗体ISB 1442依赖于仔细调节CD38和CD47的亲和力，以减少靶向毒性。ISB 1442的抗CD47 Fab已工程化为弱亲和力，以实现与CD47阳性红细胞的最小反应性。一个高亲和力的双特异性抗CD38臂能够实现亲和目标参与和对CD38低肿瘤细胞的高度特异性。 双特异性抗体的高亲和力和缓慢解离也适用于免疫细胞的招募。例如，Liu及其同事通过将两个针对非重叠表位的sdAbs与抗CD3 Fab融合，设计了一个抗HER2的T细胞接合双特异性抗体。与相应的单特异性亲本分子相比，所得到的构建物在HER2阳性细胞上的结合增加了30倍，并在体内在HER2低表达模型中显示出更优越的肿瘤抑制活性。同样，Rennert等人设计了一个针对C型凝集素结构域家族12成员A（CLEC12A）的双特异性桥接蛋白，该蛋白由分泌并招募抗CD19 CAR-T细胞。双特异性靶向实现的高亲和力导致增加的抗CD19 CAR-T细胞毒性。由于sdAbs的小尺寸，CAR可以直接配备双特异性抗体，正如cilta-cel9和OriCAR-017所强调的。这些CAR的高亲和力双特异性结合可以导致增强和持久的效力。 双特异性抗体能够实现双途径抑制，并可以锁定受体和外酶的构象 结合两个不重叠的表位可以为双特异性抗体解锁独特的活动。例如，通过双特异性抗体靶向低密度脂蛋白受体相关蛋白6（LRP6）实现了双途径抑制，同时阻断Wnt1和Wnt3a介导的β-catenin信号通路，显著地没有激动剂活性（见图2b）。 3.2 双特异性抗体能够实现双途径抑制，并可以锁定受体和外酶的构象 结合两个不重叠的表位可以为双特异性抗体（bpAbs）实现额外的功能。例如，通过同时靶向低密度脂蛋白受体相关蛋白6（LRP6）的双特异性抗体实现了双途径抑制，它可以同时阻断Wnt1和Wnt3a介导的β-catenin信号通路，且这种阻断没有激动剂活性（见图2b）。 另外，双特异性抗体可以通过物理上限制它们来使目标失活。针对HER2的双特异性DARPin的晶体结构，靶向I和IV亚域，揭示了两个HER2受体的结合和扭曲，阻止了与EGFR家族成员形成具有信号传导能力的二聚体。此外，针对CD38和CD73的双特异性抗体，包括临床双特异性抗体TNB-738，在锁定各自的外细胞域于催化非活性状态时，被证明作为酶抑制剂发挥作用（见图2c）。虽然单独的亲本抗体没有显示出任何活性，但针对CD73的双特异性抗体具有亚纳摩尔级的活性，并实现了超过90%的抑制。 3.3 双特异性抗体可以形成免疫复合物，导致激动作用、快速目标内化、溶酶体运输和提高的免疫效应功能 双特异性抗体的一个独特特性是它们能够通过同时结合两个非重叠的表位在反式中形成更高阶的免疫复合物。目标交联是多种作用机制的基础，包括增强的激动作用、通过Fc介导的效应功能或清除可溶性目标以及受体下调调节。 由双特异性抗体介导的聚集可以促进激动作用，特别是对于那些依赖交联以实现有效下游信号传导的受体（见图2d）。例如，肿瘤坏死因子受体超家族（TNFRSF）的成员由于其在免疫调节和细胞增殖中的作用而成为重要的治疗靶点。针对TNFRSF的单克隆抗体通常依赖于Fc受体介导的更高阶聚集，这阻碍了它们的治疗应用。杨等人最近展示了针对TNFRSF成员OX40和死亡受体5（DR5）的四价双特异性抗体实现了强大的内在激动作用，优于外在交联的亲本单克隆抗体，突出了双特异性抗体激动剂的潜力。 双特异性抗体也可能独特地定位于激活多组分受体复合物。例如，史等人设计了一种双特异性抗体，针对成纤维细胞生长因子受体1c（FGFR1c）的共受体β-klotho的两个不同表位。 双特异性抗体通过聚集受体增加了Fc结构域的局部浓度，从而可以提高效应功能（见图2e）。这种效应已在被单克隆抗体靶向的多价复合物中观察到，例如治疗性单克隆抗体利妥昔单抗靶向的B细胞标记CD20。双特异性抗体的结合将这种作用机制扩展到更多目标。例如，zanidatmab形成的大HER2聚集体被证明由于Fc结构域的预组织和随之而来的C1q沉积增加，导致比亲本单克隆抗体组合更强的补体依赖性细胞毒性（CDC）。这种效应在引入Fc区域增强六聚体形成的点突变的抗CD37双特异性抗体GEN3009中进一步放大。17 尽管效果不那么显著，双特异性抗体通过聚集Fc还已被证明可以通过增加与自然杀伤（NK）细胞上的FcγRIII受体的结合来提高抗体依赖性细胞介导的细胞毒性（ADCC）。 类似地，一个针对白细胞介素6（IL6）的双特异性抗体被用来增加吞噬细胞上的Fcγ受体结合，并促进可溶性目标的快速清除。被交联的受体已被证明可以迅速内化并运输到溶酶体，导致目标快速下调。 值得注意的是，交联效率及其相关效应可能取决于表位选择以及双特异性抗体：目标几何形状。快速内化和溶酶体运输使双特异性抗体成为抗体-药物偶联物（ADCs）中越来越受欢迎的构建模块，它们推动了肿瘤输送和细胞毒性有效载荷的细胞内释放，如MEDI4276、REGN5093-M114和zanidatmab zovodotin所示。与单价剂相比，双特异性抗叶酸受体α（FRα）ADC IMGN151显示出优越的有效载荷输送。由于这种效应独立于细胞表面FRα的密度，人们推测IMGN151增加的有效载荷输送是通过增强FRα阳性细胞上的结合事件而不是聚集，后者应该随着受体密度的增加而减少。然而，这两种作用机制并不是互斥的，需要进一步的研究来阐明IMGN151的作用机制。 3.4 同时结合不同的表位可以克服抗性机制 在治疗病毒感染时，一个常见挑战是找到一种广泛中和抗体（bnAb），它能够结合衣壳蛋白的保守区域并产生持久的反应。单价抗体可以针对保守区域，但容易因突变逃逸而受到选择性压力的影响。与小分子药物的疗法类似，bnAb的组合已被证明在减少单药治疗抗性方面有效，因为它降低了单一突变逃逸变体的机会。 针对严重急性呼吸综合征冠状病毒2（SARS-CoV-2）的双特异性bnAb BAT2022已被证明能够结合包括受体结合域（RBD）突变体在内的所有主要关注变体，该突变体不再被其中一个亲本抗体识别。对于HIV，三特异性bnAb SAR441236和几个临床前分子通过针对病毒衣壳蛋白上的多个表位显示出前景。 防止抗性的多价靶向在临床上对于肿瘤相关抗原（TAA）的靶向也可能有用。肿瘤细胞可以通过选择性剪接等机制消除靶向表位。有人推测，双特异性CAR-T细胞可以通过同时针对两个表位来防止肿瘤逃逸。虽然进一步的机制研究将很重要，但这对于癌症免疫疗法来说是一个有趣的前景。尽管概念上不同，Spangler等人证明了针对EGFR的三价靶向可以恢复对带有下游信号通路突变的cetuximab耐药异种移植模型的效力。最有效的三价构建物实现了必要的受体下调水平，这是仅用双价或单价构建物无法实现的。 4.治疗应用与方式 迄今为止，大多数双特异性抗体（bpAbs）已开发用于肿瘤学应用，并且随着cilta-cel的批准，首个基于bpAb的细胞疗法已获准用于复发和难治性多发性骨髓瘤。其他一些bpAbs目前正在早期临床试验中，用于血液癌症的治疗，包括ISB 1442和OriCAR-017，它们都处于治疗复发/难治性多发性骨髓瘤的I期。 对于实体瘤的治疗，许多bpAbs针对HER2，这是一种涉及包括细胞增殖在内的各种细胞功能的受体酪氨酸激酶。在20-25%的乳腺癌患者中观察到HER2的高水平过表达。使用针对非重叠结构域IV和II的临床单克隆抗体trastuzumab和pertuzumab组合靶向两个不同的HER2表位，已被证明可以显著改善治疗结果。HER2的重要性以及双重表位靶向的临床先例可能解释了包括anbenitamab和zanidatmab在内的众多针对HER2的bpAbs在研发管线中，这两种药物是临床进展最领先的针对HER2的bpAbs。其他显著的肿瘤学靶点也在用bpAbs进行研究，包括通过REGN5093 (-M114)和IMGN151分别针对间充质上皮转换因子(MET)和FRα。 大多数临床bpAbs作为裸抗体发挥作用，用于治疗病毒感染，通过相应的受体抑制或促进细胞信号传导，或者如TNB-738,24通过抑制酶活性。bpAbs被用作ADCs11,23,56的一部分进行有效载荷输送，因为它们独特的作用机制促进了内化和溶酶体运输。目前有六种双特异性ADC正在进行临床评估，其中三种也作为裸bpAbs进行研究。此外，bpAbs的高亲和力和选择性使其成为工程化高效T细胞招募剂和CARs的理想选择。 4.1 ALX-0651 Ablynx的ALX-0651是一种靶向CXCR4的双特异性串联单域抗体，是首个用于GPCRs的生物制剂，据我们所知，也是首个进入临床试验的双特异性抗体（2011年）。虽然构成ALX-0651的单个单域抗体显示出中和拮抗活性，但双特异性ALX-0651不仅展现了更高的亲和力，还显示出对CXCR4的反向激动活性。临床前数据表明ALX-0651在阻断CXCR4介导的病毒进入以及诱导快速干细胞动员方面是有效的。 4.2 BI 1034020 BI 1034020是由Ablynx和Boehringer Ingelheim开发的半衰期延长的双特异性串联单域抗体。这种双特异性抗体靶向大脑中淀粉样蛋白（Aβ）的两个独立表位，旨在用于阿尔茨海默病的治疗。BI 1034020的I期研究于2013年开始，但在发生与药物相关的严重不良事件后被终止。 4.3 MEDI4276 由MedImmune开发的针对HER2的抗体药物偶联物MEDI4276于2015年进入临床。MEDI4276由一个四价双特异性抗体组成，基于曲妥珠单抗的scFv靶向域IV，N端融合到mAb 39S的重链上，靶向域II。这种双特异性抗体向HER2过表达的肿瘤细胞输送四个位点特异性结合的tubulysin有效载荷，其中ADC被内化并运输到溶酶体释放细胞毒素。与曲妥珠单抗和帕妥珠单抗的组合不同，MEDI4276可以交联受体，从而实现快速内化和通过将HER2从循环重定向到溶酶体降解，有效地进行细胞质输送。在异种移植肿瘤模型中，MEDI4276显示出对HER2低肿瘤以及对ado-trastuzumab emtansine耐药的肿瘤具有高效力，从而满足了一个高度未满足的医疗需求。在I期剂量递增研究中，MEDI4276在HER2阳性的乳腺癌和胃癌中显示出临床活性，但最终由于不利的毒性特性而被终止。 4.4 Ciltacabtagene autoleucel Ciltacabtagene autoleucel（cilta-cel）据我们所知，是迄今为止唯一获批的基于双特异性抗体的疗法。最初由Legend Biotech开发为LCAR-B38M，cilta-cel是一种第二代自体CAR-T疗法，其特点是具有两个靶向B细胞成熟抗原（BCMA）不同表位的单域抗体的双特异性外细胞域。双特异性靶向实现了比单特异性构建更高的亲和力结合和优越的疗效。基于CARTITUDE-1 Ib/II期研究（NCT03548207），cilta-cel在2022年获得批准，该研究表明其具有深度和持久的反应以及可管理的安全特性。整体响应率为97.9%，甚至高于初始I期研究（NCT03090659）观察到的87.8%。有趣的是，cilta-cel的批准仅在idecabtagene vicleucel（ide-cel）获批后1年，后者是一种具有单特异性BCMA靶向的类似CAR-T疗法。虽然应该谨慎比较各自的临床试验，但双特异性cilta-cel似乎在反应率和反应持续时间上都优于单特异性ide-cel。 4.5 Zanidatamab and zanidatamab zovodotin 源自Zymeworks专有的Azymetric Fc平台，双特异性抗体zanidatmab（ZW25）结合了一个靶向HER2域IV的单链可变区（scFv）和识别域II的Fab臂。Zanidatamab跨式结合两个HER2分子，引起细胞膜上独特的受体重组。除了快速内化和下调外，Fc结构域的聚集引发了强烈的补体依赖性细胞毒性（CDC），这在曲妥珠单抗、帕妥珠单抗或它们的组合中均未观察到。双特异性HER2结合在体内异种移植模型中显示出比曲妥珠单抗和帕妥珠单抗组合更优越的抗肿瘤活性。Zanidatamab在患有不同HER2表达水平的各种肿瘤的患者中显示出安全性。Zanidatamab目前正在进行多项临床试验，包括乳腺癌的II期试验（NCT04224272）和晚期胃食管腺癌的III期试验（NCT05152147）。Zanidatamab还在探索用于输送细胞毒性微管抑制剂。57 这种双特异性ADC，zanidatmab zovodotin（ZW49），已被证明是免疫原性细胞死亡标志的强诱导剂，并且在一系列HER2表达水平的乳腺癌和胃癌患者来源的异种移植模型中表现出高度活性。目前正在进行I期临床试验（NCT03821233）。 4.6 MP0274 由Molecular Partners开发的MP0274通过DARPins实现双特异性HER2靶向，DARPins是可像串珠一样串联的替代支架。四价MP0274分子分别包含一个DARPin，用于靶向HER2的域I和域IV，以及两个用于延长半衰期的人类血清白蛋白结合域。与基于IgG的抗HER2双特异性抗体类似，MP0274交联HER2受体，导致在各种HER2阳性细胞系和小鼠模型中与曲妥珠单抗和帕妥珠单抗组合相当的抗肿瘤活性。然而，MP0274可能通过稳定AKT调节的叉头转录因子FOX03a导致诱导凋亡来展现独特的作用机制。在HER2阳性实体瘤患者的I期研究中，MP0274显示出良好的暴露和有利的安全性。一位既往接受过曲妥珠单抗和帕妥珠单抗治疗的转移性乳腺癌患者对MP0274显示出持续反应，确立了临床概念验证。回顾性生物标志物分析显示，这位患者是唯一一个携带HER2阳性、PI3K野生型遗传特征的患者，并且接受了最高剂量水平的治疗，表明患者选择可以在良好的MP0274暴露下实现更高的反应率。 4.7 Anbenitamab and JSKN003 Alphamab Oncology基于曲妥珠单抗和帕妥珠单抗设计了一种靶向HER2的双特异性抗体anbenitamab（KN026）。通过组合使用旋钮进入孔和静电引导突变，实现了相应重链的异二聚体Fc配对。基于对HER2相互作用残基的结构阐明，工程化了一个可以与曲妥珠单抗和帕妥珠单抗重链分别有效配对的通用轻链。结果得到的双特异性抗体anbenitamab在多种HER2水平不同的肿瘤细胞系中显示出比曲妥珠单抗和帕妥珠单抗组合更优越的抗肿瘤活性，并在小鼠模型中显示出相当的活性。初步特性表明，anbenitamab保留了亲本单克隆抗体观察到的ADCC和抗体依赖性细胞吞噬作用（ADCP），同时结合HER2的两个不同表位。Anbenitamab于2018年进入临床，并在至少接受过一线治疗（包括曲妥珠单抗）的晚期转移性乳腺癌患者中显示出良好的安全性。Anbenitamab在包括HER2表达晚期胃癌和胃食管结合部癌患者的第二项临床试验中耐受性良好。基于有希望的初步活性，anbenitamab目前正在进行多项临床试验的评估，包括作为HER2阳性晚期或转移性胃癌二线治疗的两项注册研究（NCT05427383）和作为HER2阳性复发或转移乳腺癌一线治疗的研究（NCT05838066），均与化疗联合使用。将anbenitamab结合到拓扑异构酶I抑制剂上得到的双特异性抗HER2 ADC JSKN003，目前正在进行针对晚期实体瘤的第一项人体I期研究中。 4.8 Additional HER2-targeted bpAbs MBS301、BCD-147、TQB2930和KM257是四个基于曲妥珠单抗和帕妥珠单抗的额外临床阶段的抗HER2双特异性抗体。MBS301结合了曲妥珠单抗和帕妥珠单抗的半抗体，这些半抗体在工程化的CHO细胞系中分别产生，并通过旋钮进入孔突变在体外异二聚体化。从Fc结构域去除岩藻糖可以增强ADCC活性，结合双特异性靶向，在不同HER2水平的肿瘤细胞系以及小鼠模型中产生强大的活性。目前正在进行一项I期临床研究(NCT03842085)，评估MBS301用于治疗HER2阳性复发或转移性恶性实体瘤。 4.9 SAR441236 由于HIV的高度病毒遗传多样性，鉴定和发展有效的广泛中和抗体(bnAbs)一直是一个挑战。大分子和小分子单一药物疗法在很大程度上失败了，因为选择性压力增加了突变逃逸变体的机会。使用bnAbs组合的临床前和临床研究表明，通过靶向多个表位，可以提高疗效。Sanofi正在进行I期临床开发的SAR441236(NCT03705169)，由一个双特异性交叉双变量Ig样(CODV-Ig)臂与具有第三种独特特异性的Fab臂配对，使其成为一种三特异性bnAb。临床前体内数据表明，三特异性bnAb在减少病毒载量和预防感染方面更有效，在非人灵长类动物(NHP)的猴/人免疫缺陷病毒(SHIV)病毒挑战模型中。 4.10 GEN3009 Genmab结合了他们的专有DuoBody和HexaBody技术，设计了GEN3009，这是一种靶向CD37的双特异性抗体，具有增强的Fc介导的六聚体化。这种双特异性抗体包含互补的Fc突变，指导体外控制的Fab臂交换反应中的异二聚体化，并通过E430G突变增强六聚体化。由于双表位靶向，局部Fc结构域密度的增加，结合增强的六聚体化，在B细胞淋巴瘤细胞系以及慢性淋巴细胞白血病患者的样本中，与单一亲本单克隆抗体或组合相比，产生了更优越的CDC。Fc结构域聚集进一步增加了ADCC和ADCP，导致在几种细胞系衍生的异种移植模型以及非霍奇金淋巴瘤患者的异种移植中产生强大的抗肿瘤活性。GEN3009已在复发或难治性B细胞非霍奇金淋巴瘤患者中进行了首次人体试验(NCT04358458)，但由于战略原因，最近已停止进一步的临床开发。 4.11 REGN5093 和REGN5093-M114 Regeneron的双特异性抗MET通用轻链抗体REGN5093，已作为抗体(NCT04077099)和作为ADC(NCT04982224)进入临床。源自Regeneron的专有VelocImmune平台，REGN5093有效地抑制配体独立的MET和HGF诱导的信号传导。DaSilva等人表明，REGN5093创建了具有2:2化学计量比的抗体-受体复合物，与创建1:2复合物的单价抗体形成对比。这些更大的复合物可能导致与REGN5093相关的MET降解，作为bpAb:受体复合物回收效率降低和溶酶体运输增强的产物。Regeneron进一步利用了REGN5093的这一特性，通过将专有的细胞毒素maytansinoid有效载荷结合到REGN5093-M114中。这种分子在MET依赖性和非MET依赖性肿瘤模型中都显示出疗效，进一步证明了双特异性ADC方法的效用。 4.12 OriCAR-017 Oricell的双特异性GPRC5D靶向CAR-T细胞疗法OriCAR-017，已进入临床，用于治疗复发和难治性多发性骨髓瘤(NCT05016778)。类似于cilta-cel，OriCAR-017 CAR包含串联的sdAbs，靶向GPRC5D上的两个不同表位。作者推测，双特异性靶向增加了他们的CAR-T细胞疗法的特异性和亲和力，从而提高了疗效。已报告有利的I期安全性和有效性数据，并支持OriCAR-017的进一步开发。 4.13 SARS-CoV-2 neutralizing bpAbs 几项研究表明，通过要求多个同时发生的突变，bpAbs极大地减少了突变逃逸的发生率。与通常限制通过抑制RBD-ACE2界面来发挥传统阻断作用的单价结合剂不同，顺式结合的bpAb显示出阻断和构象变化，而反式结合的双特异性结合则展示了阻断和多聚化。目前临床进展最领先的针对SARS-CoV-2的bpAb，BAT2022，已完成I期安全性和耐受性研究（NCT05518695）。BAT2022是一个对称的2+2 Fc-含有分子，由一个sdAb分子与HC的C-末端连接。BAT2022作为一种广谱中和抗体，针对多种SARS-CoV-2亚变体保持了其有效性，展示了作为治疗性抗体的效用。 4.14 ISB 1442 Ichnos Sciences的ISB 1442是一种基于专有BEAT 2.0（基于TCR的双特异性抗体结合）平台的双特异性bpAb。ISB 1442在一个串联Fab臂上以高亲和力结合两个不同的CD38表位，并将此与低亲和力的CD47 Fab臂相结合，以阻断巨噬细胞上的信号调节蛋白α（SIRPα）。低CD47亲和力旨在防止对红细胞的靶向毒性，同时在高亲和力双特异性CD38臂的引导下，实现强大的抗肿瘤活性。结合增强效应功能的Fc突变，ISB 1442不仅影响ADCP，还表现出ADCC和CDC。临床前数据表明，与单一靶向药物相比，这种复杂的MoA可能具有增加的疗效和安全性。因此，ISB 1442目前正在进行针对复发/难治性多发性骨髓瘤患者的I/II期临床研究（NCT05427812）。4.15 TNB-738 Ancora Biotech的TNB-738是一种由两个源自Teneobio的专有转基因UniRat平台的sdAbs组成的非对称抗CD38 bpAb，它们以高亲和力结合不同的CD38表位。TNB-738使用旋钮进入孔突变来实现重链配对，一个完全沉默的IgG4 Fc来消除效应功能，以及在一个臂上添加惰性的kappa LC和CH1以提高可制造性。目前正在健康志愿者中进行I期剂量递增（NCT05215912），TNB-738通过酶抑制发挥作用。4.16 IMGN151 Immunogen的下一代FRα ADC已进入临床（NCT05527184），紧随其第一代FRα ADC mirvetuximab-soravtansine之后，该药物于2022年获得美国食品药品监督管理局（FDA）的加速批准。IMGN151包含一个scFv臂和一个mirvetuximab Fab臂，每个臂结合FRα的独特且不重叠的表位。IMGN151的双特异性靶向模式增强了在FRα阳性细胞上的结合事件，从而在高、中、低FRα表达的细胞系中实现了更优越的有效载荷输送。与mirvetuximab soravtansine相比，由bpAb增加的输送结合更有效的链接-有效载荷，可能使IMGN151能够面向更广泛的患者群体。5.总结 从单价单克隆抗体的组合中演化而来，双特异性抗体已证明其临床安全性和有效性，并且首个基于双特异性抗体的疗法已于2022年获得FDA批准。临床管线中的双特异性抗体基于多样的格式，除了存在Fc结构域以提供稳定性和效应功能外，没有明显的趋势。最终，生物学决定了双特异性抗体的设计。与传统的单克隆抗体、双特异性抗体，甚至是针对不同表位的单克隆抗体组合相比，双特异性抗体提供了独特的作用机制，使它们成为针对多种适应症的有吸引力的治疗剂。双特异性结合所实现的亲和性能够实现高度选择性的肿瘤靶向，如双特异性抗体ISB 1442所展示的特性，这些特性还可以使T细胞接合器或CAR-T细胞等治疗方式受益，正如双特异性CAR-T疗法cilta-cel的临床成功所突出的。目前正在临床测试的大多数双特异性抗体已被证明能够影响肿瘤相关抗原（TAA）的聚集，以改善受体激动作用、效应功能和/或有效的内化和溶酶体运输。除了治疗性单克隆抗体外，这种作用机制特别适合于通过六种目前正在临床评估的ADCs来改善向肿瘤的有效载荷输送。除了亲和结合和受体聚集外，双特异性抗体已被用于其他作用机制，如双途径抑制、多组分目标的刺激，或者像针对CD38的双特异性抗体TNB-738那样，锁定目标处于酶促非活性状态。在传染病领域，双特异性抗体有希望解锁具有增加反应持久性、对多样病毒景观更广泛有效的广泛中和抗体，并可能大大限制突变逃逸变体的出现。该领域正从双特异性转向三特异性以及更高级，以解决一些最具挑战性的人类疾病，如HIV和SARS-CoV-2。 正如临床中越来越多的双特异性抗体所见证的，双特异性抗体对于靶向治疗具有巨大的潜力。当前的临床双特异性抗体格局显示出对靶向HER2的药剂和依赖于受体聚集的相关作用机制的聚焦。HER2的突出地位可能由曲妥珠单抗和帕妥珠单抗的组合治疗的临床先例所解释。然而，随着新技术使更复杂的结构工程化变得更加可行，我们预计双特异性抗体的靶点和适应症的数量将大幅增加。以前在临床上用传统抗体未能成功的靶点，可能因双特异性抗体的独特作用机制而变得可行，同时可能会出现特别适用于双特异性抗体的新靶点。正如SAR441236和临床前研究所强调的，三特异性或更高价的结构可以扩大双特异性抗体的效果，甚至解锁新的作用机制。由首个双特异性抗体治疗的批准验证，双特异性抗体的临床管线正在迅速扩展，并将激励对这一类独特抗体的更多研究，以充分利用双特异性抗体在靶向治疗中的潜力。 识别微信二维码，添加生物制品圈小编，符合条件者即可加入 生物制品微信群！ 请注明：姓名+研究方向！ 版 权 声 明 本公众号所有转载文章系出于传递更多信息之目的，且明确注明来源和作者，不希望被转载的媒体或个人可与我们联系(cbplib@163.com)，我们将立即进行删除处理。所有文章仅代表作者观点，不代表本站立场。