Olaptesed Pegol

摘要引言：非典型趋化因子受体3（ACKR3，原称CXCR7）通过其配体调控多种生物学过程，与炎症、癌症、心血管疾病（CVDs）、疼痛及神经系统疾病等多种疾病密切相关。因此，ACKR3已成为潜在的疾病治疗靶点。涵盖领域：本综述基于谷歌专利、欧洲专利局和世界知识产权组织的在线数据库，总结了2019年至2024年专利中公开的ACKR3调节剂，包括其化学结构、合成方法、活性及开发阶段等信息。专家观点：ACKR3激动剂在心血管疾病和疼痛治疗领域受到关注。WW-12源于康尼定的化学修饰，通过激活ACKR3成为新型小分子疼痛调节剂，进而促进内源性阿片肽与经典阿片受体结合。Idorsia制药公司的ACKR3拮抗剂ACT-1004–1239已显示出治疗癌症、急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征（ARDS）及多发性硬化症等自身免疫性疾病的潜力。这些临床试验结果将指导未来ACKR3调节剂的开发及适应症拓展。引言1.1 趋化因子受体趋化因子受体是G蛋白偶联受体（GPCRs）的一个亚类，GPCRs是治疗靶点最多的蛋白质家族，占美国食品药品监督管理局（FDA）批准药物的三分之一[1]。趋化因子配体又称免疫调节剂，是一类小分子（8-14 kDa）细胞因子样趋化肽，参与多个免疫系统信号通路[2]。趋化因子与细胞表面蛋白协同作用，通过靶向归巢将特定细胞亚群引导至目标解剖位置。趋化因子受体被配体激活后，主要功能是调控细胞黏附、增殖和迁移等过程，因此在发育和炎症过程中不可或缺[3-5]。CXC趋化因子受体3（CXCR3）是与炎症趋化因子相互作用最常见的趋化因子受体之一。其他受体如非典型趋化因子受体3（ACKR3）可结合稳态和炎症趋化因子，而CXCR4仅结合稳态趋化因子[6,7]。内源性趋化因子通过与G蛋白和/或抑制蛋白相互作用，使同源趋化因子受体维持活性构象，从而促进细胞内信号传导。人类中已发现20种经典受体和约50种趋化因子[8]。趋化因子与其特异性七螺旋GPCR结构的趋化因子受体结合，启动信号传导[9]。1.2 非典型趋化因子受体近年来，一类名为非典型趋化因子受体（ACKRs）的新家族成为趋化因子受体的一个小亚群，主要调控趋化因子的内化、降解和转胞吞作用[10-12]。“非典型”一词源于ACKRs缺乏或其第二细胞内环中的经典DRYLAIV基序发生改变，该基序通常是大多数G蛋白激活和信号传导所必需的[13-15]。与传统趋化因子受体不同，ACKRs不激活经典G蛋白通路，但会触发β-抑制蛋白依赖性信号传导，并通过转运或捕获趋化因子、内化降解配体来参与趋化事件，以缓解炎症过程或形成合适的趋化因子梯度。这些ACKRs包括ACKR1（DARC）、ACKR2（D6）、ACKR3（CXCR7）和ACKR4（CCRL1或CCX-CKR）[16]。与大多数趋化因子受体一样，ACKRs可结合多种配体以发挥生物学效应。ACKRs最初被描述为调控先天性和适应性免疫反应及白细胞募集，近年来相关研究的拓展揭示了其在生理学中的其他作用，包括参与心血管和淋巴管生长、胚胎发育及中枢神经系统（CNS）功能[17-21]。近期已有多篇综述聚焦ACKRs在疾病机制中的作用，包括其在细胞迁移和增殖中的功能[4,22-25]。1.3 ACKR3趋化因子受体ACKR3（别名RDCI、CMKORI、GPR159）是一种七跨膜GPCR，可被两种趋化因子肽激活：C-X-C基序趋化因子12（CXCL12，别名基质细胞衍生因子1，SDF-1；别名前B细胞生长刺激因子，PBSF）和C-X-C基序趋化因子11（CXCL11，别名ITAC、干扰素诱导T细胞α趋化因子）[7,13]。与典型GPCRs不同，ACKR3主要作为清道夫受体，不与G蛋白结合，因此无法介导信号级联反应。当配体结合时，会招募β-抑制蛋白，ACKR3-配体复合物内化，配体被溶酶体降解，受体则循环回到细胞膜（即受体再循环）[13,27-29]。尽管如此，ACKR3仍可通过β-抑制蛋白触发细胞信号传导（图1）。CXCL11或CXCL12与ACKR3转染细胞结合后，分别通过G蛋白受体激酶将β-抑制蛋白募集到细胞质囊泡或质膜上[13]。β-抑制蛋白募集后，ACKR3可触发不依赖G蛋白亚基的信号传导（也称为β-抑制蛋白偏向性细胞信号传导）[30]，包括在健康和病变细胞中下游激活蛋白激酶B（又称Akt）和细胞外信号调节激酶（ERK）[13,31-34]。除作为ACKR3配体外，CXCL11和CXCL12也是CXCR3和CXCR4的配体。由于ACKR3具有清除CXCL11和CXCL12的能力，因此与CXCR3和CXCR4间接相关，CXCR3和CXCR4可作为ACKR3的相互作用受体。另一方面，CXCR3和CXCR4作为独立受体也具有独特特性。因此，ACKR3通过清除作用调控CXCL11和CXCL12的细胞外浓度，进而影响CXCR3和CXCR4的功能。此外，有研究表明ACKR3可通过形成异二聚体或竞争参与信号传导的细胞内效应蛋白来调节CXCR4的活性。图 1：配体激活 ACKR3、CXCR4 和 CXCR3 后的下游信号通路。这些受体表达于血管内皮、B 细胞、神经元和肾上腺中。使用 创建。1.4 ACKR3及其配体CXCL12的表达谱ACKRs的主要特征之一是在免疫细胞群、血液和淋巴管内皮细胞等细胞类型中表达[35-42]。多种细胞类型均表达ACKR3，包括内皮细胞、神经元、B淋巴细胞、T淋巴细胞和血小板[48-51]。ACKR3在心血管[51]、癌症[52]和神经系统发育[53,54]等多个过程中发挥关键作用。ACKR3在肿瘤相关血管和多种癌细胞类型中表达，越来越多的证据表明其在转移形成中起作用[55-58]。此外，研究证实，在几种已知可致癌的病毒（如HHV-8[59]和EBV-HTLV-I）感染后，ACKR3表达会升高，这对细胞转化和增殖至关重要[60]。CXCL12是一种由基质细胞产生的趋化因子，在免疫监视和调控炎症反应中起作用。心脏[61]、骨骼肌[62]、肝脏[63]、大脑[64]、骨髓基质细胞、内皮细胞[65]和肾实质细胞[66]均可分泌CXCL12。它对干细胞的存活和增殖以及造血干/祖细胞归巢至骨髓至关重要[67]。除趋化特性外，CXCL12还被证实可调控肿瘤细胞的运动、增殖和存活[68]。1.5 ACKR3在疾病中的作用ACKR3在转化细胞中的表达频率高于正常细胞，且在多种人类恶性肿瘤中存在。体外实验表明，ACKR3拮抗剂可抑制表达ACKR3的细胞生长；小鼠体内研究也证实，ACKR3拮抗剂能阻止肿瘤生长和形成[69,70]。ACKR3还可作为某些基因不同的人类免疫缺陷病毒（HIV）和猴免疫缺陷病毒（SIV）的共受体，特别是X4嗜性HIV-2-ROD毒株。因此，阻断该受体可能有助于预防HIV感染[71]。近期研究表明，ACKR3可能还参与干细胞动员[72]。此外，调节该受体在志贺毒素相关溶血性尿毒综合征、心脏组织和移植肾的缺血/再灌注损伤以及减轻多发性硬化症病理方面显示出潜力。2013年Rath等人的研究表明，ACKR3参与血栓前事件[73]。后续研究发现，急性冠状动脉综合征患者的血小板表面表达更多ACKR3及其配体CXCL12[73]。另一项研究将CXCR4和ACKR3的基线水平与冠心病（CAD）患者的全因死亡率相关联，进一步支持了这一结论[74]。激活ACKR3可清除CXCL12，从而降低CXCR4活性、延长血小板存活时间、抑制血小板激活和聚集，并预防血栓形成[75-77]（见图2）。已有多项研究探讨了ACKR3激活与血小板聚集和脱颗粒调控之间的关系[78-80]。近期研究表明，在治疗与内源性阿片肽失调相关的疾病（如应激功能障碍疾病、抑郁症、慢性疼痛等）时，调节ACKR3可改变内源性阿片肽水平，并能有效治疗阿片类药物成瘾，且安全性更高[81,82]。总之，图3展示了与ACKR3失调相关的临床疾病，包括癌症[57,83-87]、自身免疫性疾病[88-91]、炎症[92-94]、感染、心血管疾病[83-96]和神经退行性疾病[97-100]。然而，目前尚未有专门针对ACKR3受体的药物获批上市。图 2：介导血小板及其功能活性的 ACKR3 信号通路。图 3：与 ACKR3 相关的疾病。ACKR3作为癌症、自身免疫性疾病、炎症性疾病及疼痛的治疗靶点2.1 癌症治疗中的ACKR3调节剂癌症是全球主要死亡原因之一。异常增殖的癌细胞与支持性微环境共同形成肿瘤。肿瘤微环境中，基质细胞与肿瘤细胞之间的异常通讯形成了由细胞、细胞外基质成分和信号分子组成的复杂网络。肿瘤生长过程中会产生多种物质，要么促进肿瘤生长（如血管生成因子，促进血管新生），要么帮助肿瘤逃避免疫系统攻击。CXCL12就是肿瘤产生的一种血管生成和免疫调节因子。在多种癌症中，CXCL12受体ACKR3的表达与疾病进展相关[101]。越来越多的证据表明，CXCL12通路的激活可能通过多种互补方式成为肿瘤对生物制剂和传统疗法产生耐药性的机制[101,102]：直接促进癌细胞的侵袭、存活及癌症干细胞和/或肿瘤起始细胞的表型维持；招募“远端基质”（骨髓来源的髓系细胞），促进免疫抑制、肿瘤复发和转移；直接或间接促进血管生成。这些过程依赖于受体和趋化因子的数量，且因癌症类型而异。肿瘤细胞的特点是增殖异常且寿命长于正常细胞。多种信号通路（包括G蛋白介导的ERK和Akt通路激活）可刺激细胞生长。ACKR3被配体激活后，通过更复杂的通路（即基于β-抑制蛋白的细胞信号传导，图1）刺激ERK和Akt，从而表现出增殖效应。使用（功能性）拮抗剂阻断ACKR3可减少肿瘤发展[69,103-105]。血管生成是肿瘤组织内新血管形成的过程，与肿瘤细胞的生长和增殖密切相关。由于血管生成为肿瘤提供充足的氧气和营养，因此对肿瘤生长至关重要。在多种血管生成刺激物质中，血管内皮生长因子（VEGF）是最著名的一种[106]。缺氧诱导因子1α（HIF-1α）和细胞因子等其他生长因子可诱导VEGF的产生。在缺氧条件下，癌组织会产生更多HIF-1α，从而增加VEGF的合成[107]。在某些癌症类型中，CXCR4、ACKR3和CXCL12的表达升高与HIF-1α产生增加相关，这与VEGF释放和血管生成呈正相关（图1），进而促进肿瘤生长[112-114]。肿瘤细胞侵袭邻近的淋巴系统和循环系统是肿瘤生长和存活的另一个重要环节。肿瘤细胞逃离循环系统和淋巴系统后，可通过这些系统扩散并在身体其他部位形成新的肿瘤，即转移。趋化因子受体因其多种功能可能调控这种转移。有研究推测，ACKR3的表达促进肿瘤细胞黏附和侵袭，从而促进转移[31]。其他研究表明，CXCR4/ACKR3激活可通过MAPK[115]和Toll样受体4/髓系分化蛋白2[116]等信号通路导致转移（图1）。关键的是，抑制这些趋化因子受体（CXCR3、CXCR4和ACKR3）与转移减少相关[117-119]。近期，多篇报道支持抗CXCL12药物（如ACKR3调节剂）作为癌症治疗中现有疗法的增敏剂的潜在用途[56]。Idorsia制药公司的Guerry P等人公开了N-[(3S,4S)-1-(环丙基甲基)-3-((1-(嘧啶-2-基)环丙基)氨基甲酰基)哌啶-4-基]-5-(2,4-二氟苯基)异噁唑-3-甲酰胺的新型晶型[120]，声称其对治疗和预防由CXCL12或CXCL11激活ACKR3引发的癌症等疾病特别有效。ACT-1004–1239也可与放疗、化疗、靶向治疗或其他疗法联合使用。该发明源于专利WO2018019929A1[121]及同行评审发表的文献。根据其发表的研究，ACT-1004–1239是通过高通量筛选和苗头化合物优化开发而来[122]。筛选得到苗头化合物3，初步的苗头化合物优化确定了以反式外消旋化合物11i为代表的新型ACKR3拮抗剂系列（图4）。该系列通过阻断CXCL11和CXCL12诱导的β-抑制蛋白募集来拮抗ACKR3。对11i的进一步构效关系（SAR）研究得到了具有高ACKR3拮抗活性和良好ADMET特性的化合物，尤其是ACT-1004–1239（28f）。该药物对ACKR3的选择性高于其同源受体CXCR4。图4提供了ACKR3拮抗剂的代表性示例。构效关系研究表明，哌啶环N-1位的取代对拮抗活性至关重要。例如，未取代的化合物27活性中等，而N-甲基（28a）、N-乙基（28b）、N-丙基（28c）和N-异丙基（28d）取代的化合物活性逐渐增强；哌啶环核心N原子上带有更多疏水取代基的化合物（28f-k）活性更高，但甲氧基乙基和乙酰基等极性基团会降低拮抗活性。ACT-1004–1239已在多项体外、临床前和临床试验中进行了广泛研究，用于治疗癌症、炎症和神经系统疾病等多种疾病[122-125]。近期，一项多功能首次人体研究评估了ACT-1004–1239的安全性、耐受性、药效学和药代动力学[126,127]。健康男性受试者接受了单次递增口服剂量的安慰剂（n=12）或ACT-1004–1239（n=36）。结果显示，在高达200 mg的最大测试剂量下，ACT-1004–1239在健康受试者中安全性和耐受性良好。通过剂量依赖性增加生理激动剂CXCL12的血浆浓度，在小鼠和人类中均证实了靶点结合[128]。因此，由于间接反应药代动力学/药效学模型能充分解释整个剂量范围内药物与CXCL12浓度的关系，建议未来临床研究采用ACT-1004–1239每日一次给药。此外，对于10 mg以上的剂量，达到最大血浆浓度的时间和终末消除半衰期为17.8至23.6小时。通过口服与静脉注射14C放射性标记的微量示踪剂ACT-1004–1239后的放射性测量，确定其绝对生物利用度为53.0%。该研究结果为进一步研究ACT-1004–1239在患者中的临床疗效，以及ACKR3拮抗作为免疫学和肿瘤学领域新型治疗方法的潜力奠定了基础。ACT-1004–1239的合成根据其发表的研究，ACT-1004–1239的合成流程如方案1所示[122]。简要来说，市售的1-叔丁基3-乙基4-氧代哌啶-1,3-二甲酸酯与手性助剂（S）-(-)-α-甲基苄胺在含催化量对甲苯磺酸的甲苯中回流反应，形成烯胺Y1。烯胺在四氢呋喃（THF）中，于-20°C下经硼氢化钠（NaBH4）和三氟乙酸还原，得到Y2。在乙醇中，钯催化剂存在下用氢气（H2）氢化，裂解4-α-甲基苄胺，得到顺式伯胺Y3。Y3与5-(2,4-二氟苯基)-异噁唑-3-羧酸酰化，得到顺式-(3R,4S)-和顺式-(3S,4R)-4-{[5-(2,4-二氟苯基)-异噁唑-3-羰基]-氨基}-哌啶-1,3-二甲酸酯1-叔丁基酯3-乙酯Y4（比例6:1）。经乙醇钠在乙醇和乙酸乙酯中处理发生差向异构化生成反式-β-氨基酯后，通过手性色谱法获得纯（3S,4S）-非对映异构体Y5。在四氢呋喃/水混合液中用氢氧化钠（NaOH）水解酯基，得到Y6。Y6在HATU催化下与1-嘧啶-2-基-环丙胺进行酰胺键合成，得到二酰胺Y7。用盐酸（HCl）在1,4-二氧六环中脱除N-Boc保护基，得到哌啶27。随后在还原胺化条件下与环丙基甲醛烷基化，得到ACT-1004–1239（28f）。类似物也按照该公开流程合成。乳腺癌是女性中最常见的癌症类型[129]。越来越多的数据表明，癌症干细胞样细胞（CSCs）是预后不良的主要原因。这些细胞对多种应激条件具有抵抗力，被认为与肿瘤的发生、复发和治疗耐药性相关。乳腺癌组织中通常存在大量基质，表明含有癌症相关成纤维细胞（CAFs）的肿瘤微环境在乳腺癌发展中至关重要。因此，靶向肿瘤微环境或CSC生态位以清除CSCs是治疗乳腺癌的一种有前景的治疗策略。Chemocentric公司的Gotoh N等人（专利WO 2020/123582 A1）声称，衔接蛋白FRS2β的异常表达对于富含细胞因子的CSC生态位形成和维持有利于肿瘤生长的环境至关重要[130]。研究证实，ACKR3对于维持CSCs的干细胞特性和致瘤性是必需的[131]。申请人的研究表明，一部分腔上皮细胞表达FRS2β蛋白，其激活会导致胰岛素样生长因子I（IGFI）和CXCL12等细胞因子的释放。CSCs出现在癌前微环境后，在IGFI存在下可自我更新，并在CXCL12激活的基质细胞（最终发展为CAFs）的帮助下生成肿瘤细胞。CSCs和肿瘤细胞自身也可产生IGFI和CXCL12，促进快速生长和癌变。另一方面，在缺乏FRS2β的情况下，细胞因子水平保持较低，无法形成合适的癌前微环境，即使CSCs出现也无法增殖。基于这些发现，推测FRS2β是乳腺癌预防的潜在靶点。他们还证实，靶向IGFI和CXCL12的联合疗法可有效预防早期肿瘤发生。因此，建议通过单独使用ACKR3抑制剂或与其他治疗药物联合使用，可有效减轻这种表达带来的有害影响。他们声称，可通过给予ACKR3抑制剂治疗FRS2β异常表达的癌症患者。此外，他们强调需要预防表达FRS2β的癌前细胞转化为癌症，其中一种方法是向表达FRS2β的癌前细胞患者给予ACKR3抑制剂。发明人公开了一系列具有通式结构（I）和（II）的ACKR3抑制剂（图5(a)），并提供了各类别的代表性示例（图5(b)）。部分选自这些化合物或组合物的ACKR3抑制剂已在PCT公开号WO2010/054006中披露。图 4：ACKR3 拮抗剂：(a) 经高通量筛选（HTS）及后续构效关系（SARs）研究开发的 ACT-1004–1239（28f）；(b) 具有 N-1 - 哌啶环核心的 ACT-1004–1239 衍生物。A1的合成方案2概述了合成A类化合物（如化合物A1）的流程。简要来说，2-溴-4-异丙基苯胺（X1）与1,2,3-丙三醇环化，得到喹啉X2。X2在布赫瓦尔德条件下与1-叔丁基1,4-二氮杂环庚烷-1-羧酸酯（X3）偶联，形成中间体X4。经盐酸处理后，得到盐酸盐形式的X5。随后，X5在碱存在下与4-氯甲基-2-苯基噻唑（X6）烷基化，得到目标化合物A1。类似物也采用相同流程合成。B1的合成B类化合物（如化合物B1）的合成可按照方案3进行[132]。简要来说，4-氟苯胺与市售的2-异氰基乙酸乙酯在乙酸钠存在下，用亚硝酸钠环化反应，合成1-(4-氟苯基)-1H-1,2,4-三唑-3-羧酸乙酯（X7）。X7的酯基经氢氧化钠水解，得到相应的羧酸X8。X8在二甲基甲酰胺（DMF）存在下与草酰氯反应，生成1-(4-氟苯基)-1H-1,2,4-三唑-3-碳酰氯（X9）。X9随后与胺X10反应，得到目标化合物B1。方案 1：ACT-1004–1239 的合成路线。试剂与反应条件：(a) 对甲苯磺酸，甲苯，回流，18 小时；(b) 硼氢化钠（NaBH₄），三氟乙酸，四氢呋喃（THF），−18°C，1 小时；(c) 20% 氢氧化钯 / 碳（Pd (OH)₂/C），氢气（H₂），甲醇（MeOH），室温，18 小时；(d) 5-(2,4 - 二氟苯基)- 异噁唑 - 3 - 羧酸，三丙基磷酸酐（T3P），二氯甲烷（DCM），三乙胺（TEA），室温，18 小时；(e) 乙醇钠（NaOEt），乙醇（EtOH），乙酸乙酯（EtOAc），室温，2 小时，手性色谱法；(f) 1N 氢氧化钠水溶液，四氢呋喃（THF），室温，8 小时；2N 盐酸，室温，30 分钟；(g) 1 - 嘧啶 - 2 - 基 - 环丙胺，O-(7 - 氮杂苯并三唑 - 1 - 基)-N,N,N',N'- 四甲基脲六氟磷酸盐（HATU），二异丙基乙胺（DIPEA），二甲基甲酰胺（DMF），室温，18 小时；(h) 4N 盐酸 / 1,4 - 二氧六环溶液，甲醇（MeOH），室温，1 小时；碳酸氢钠水溶液，二氯甲烷（DCM）；(i) 环丙基甲醛，三乙酰氧基硼氢化钠（NaBH (OAc)₃），乙酸（AcOH），二氯甲烷（DCM），室温，24 小时。图 5：具有 1,4 - 二氮杂环庚烷和吡咯烷核心的 ACKR3 拮抗剂的通用结构 (a) 代表性示例 A1–16 和 B1–B3 (b) 来源于专利 WO 2020/123582 A1。2.2 急性肺损伤治疗中的ACKR3调节剂Pouzol等人研究了ACKR3在急性呼吸窘迫综合征（ARDS）中的作用，ARDS是急性肺损伤（ALI）的一种更严重且可能致命的形式[123]。研究发现，吸入脂多糖（LPS）的小鼠出现呼吸功能障碍和肺部炎症——这是急性肺损伤/ARDS的两个重要病理标志。吸入LPS导致免疫细胞浸润到支气管肺泡区域，包括CXCR3+和CXCR4+细胞。用ACT-1004–1239抑制ACKR3可减少CXCR3+和CXCR4+白细胞向支气管肺泡灌洗液的浸润，并升高血浆中CXCL11和CXCL12的水平，而不改变其组织水平。此外，ACKR3拮抗活性还可降低血管通透性和炎症细胞浸润。ACT-1004–1239具有广泛的作用机制，是一种有前景的新型治疗药物，可靶向人类急性肺损伤/ARDS病理的关键问题环节。2.3 多发性硬化症（MS）治疗中的ACKR3调节剂多发性硬化症（MS）是一种中枢神经系统（CNS）慢性自身免疫性脱髓鞘疾病，可导致多种神经功能障碍。目前，用于治疗多发性硬化症等脱髓鞘疾病的药物主要为免疫调节或抗炎药物。有研究表明，靶向ACKR3可能是治疗脱髓鞘疾病的一种有效策略[28,134-136]，可改善髓鞘修复并减少白细胞浸润，促进髓鞘形成和免疫调节。在由髓鞘少突胶质细胞糖蛋白（MOG）诱导的实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）和双环己酮草酰二腙（cuprizone）诱导的脱髓鞘小鼠模型中，评估了ACT-1004–1239的作用。给予ACT-1004–1239（10-100 mg/kg，每日两次，口服）以剂量依赖性方式显著降低MOG诱导的EAE模型的疾病临床评分，并提高存活率。即使在最高研究剂量（100 mg/kg，每日两次）下，ACT-1004–1239也显著降低了血浆神经丝轻链浓度、免疫细胞向中枢神经系统的浸润以及疾病发作时间。ACT-1004–1239治疗后，血浆CXCL12水平呈剂量依赖性增加，这与累积疾病评分降低相关。此外，在双环己酮草酰二腙模型中，ACT-1004–1239治疗改善了体内髓鞘形成，并显著增加了成熟成髓鞘少突胶质细胞的数量。体外实验中，ACT-1004–1239促进少突胶质前体细胞（OPCs）成熟为成髓鞘少突胶质细胞。这些发现支持了ACT-1004–1239近期的研究结果，即其具有双重作用机制，通过减少神经炎症发挥免疫调节作用，并通过加速髓鞘修复发挥促髓鞘形成作用[137]。Huynh等人近期研究了ACT-1004–1239的吸收、代谢和排泄[127]。结果显示，细胞色素P450 3A4（CYP3A4）是ACT-1004–1239代谢的主要途径（占消除的≥25%）。为解决这一问题，在健康男性受试者中，使用强效CYP3A4抑制剂伊曲康唑研究了单次10 mg剂量ACT-1004–1239的药代动力学（临床试验编号NCT05549531）[138]。结果表明，ACT-1004–1239属于中度敏感的CYP3A4底物；如果同时给予CYP3A4抑制剂，未来临床研究应予以考虑。还研究了ACT-1004–1239与鞘氨醇1-磷酸（S1P1）受体调节剂联合使用对预防或治疗同时涉及ACKR3及其配体和S1P1的疾病的作用。Pouzol等人声称，ACKR3拮抗剂ACT-1004–1239与S1P1受体调节剂联合使用可能具有协同作用，S1P1受体调节剂是临床上已确立的用于治疗自身免疫性或脱髓鞘疾病（包括多发性硬化症）的药物[139]。此外，ACT-1004–1239与S1P1受体调节剂联合使用可能允许降低相应S1P1受体调节剂的剂量，甚至可能降至单独使用时的最佳有效剂量以下，从而潜在地减轻某些安全性风险。已研究了多种S1P1调节剂，如芬戈莫德、波内西莫德、森奈莫德、西波莫德、奥扎尼莫德和埃特拉西莫德。例如，在蛋白脂质蛋白（PLP）诱导的EAE模型中，ACT-1004–1239与已获批的多发性硬化症免疫调节治疗药物西波莫德联合使用，协同降低了EAE的严重程度[137]。方案 2：具有 1,4 - 二氮杂环庚烷结构的 ACKR3 拮抗剂 A1 的合成路线。试剂与反应条件：(a) (i) 甲磺酸，3 - 硝基苯磺酸钠盐（1:1），硫酸亚铁；室温→135°C，135°C 反应 3 小时，135°C→室温；(ii) 氢氧化钠，水；(b) 叔丁醇钾，钯 (2+) 1,3 - 双 [2,6 - 二异丙基苯基]-1,2 - 二脱氢 - 1λ⁵- 咪唑 -1 - 甲基 - 1H - 咪唑二氯化物，1,2 - 二甲氧基乙烷；室温→60°C，60°C 反应过夜，60°C→室温；(c) 盐酸，甲醇，1,4 - 二氧六环；室温反应 1 小时；(d) 碳酸铯（Cs₂CO₃），二甲基甲酰胺（DMF）；室温→60°C，60°C 反应 3 小时，60°C→室温。方案 3：具有吡咯烷核心的 ACKR3 拮抗剂 B1 的合成路线。试剂与反应条件：(a) 乙酸钠，亚硝酸钠，盐酸，甲醇，水；0°C 反应 30 分钟，室温反应 2 小时；(b) 氢氧化钠，盐酸，水；室温→50°C，50°C→室温，室温反应 15 分钟；(c) 草酰氯，二甲基甲酰胺（DMF），1,2 - 二氯乙烷；室温→60°C，60°C 反应 5 分钟；(d) 二异丙基乙胺（DIPEA），二氯甲烷（CH₂Cl₂），室温反应 10 分钟。3. 炎症性和神经退行性疾病治疗中的ACKR3调节剂Riemens等人公开了具有（4-哌啶基甲基）甲酰胺部分的式C化合物，可作为ACKR3拮抗剂[140]。这些物质在治疗与ACKR3受体功能障碍相关的癌症、HIV-1感染以及多种炎症和自身免疫性疾病方面具有潜在应用。式（C）化合物是ACKR3的拮抗剂，可直接结合ACKR3并竞争性抑制参考ACKR3结合化合物CXCL12的结合。例如，式C的ACKR3拮抗剂可直接结合ACKR3，并在使用Alexa Fluor 647（AF647）荧光标记的趋化因子CXCL12进行的置换试验中，能够置换荧光标记的趋化因子CXCL12的结合。他们声称，通过置换试验测量，ACKR3拮抗剂的pKi优选在5.0至9.0之间。图6提供了通过放射性配体结合研究确定的pKi>7.0的最具活性的拮抗剂。化合物C1、C12和作为参考化学物质的ACT-1004–1239（详见WO2018/019929）已用于额外实验。在单剂量药代动力学研究中，向小鼠腹腔内注射30 mg/kg的化合物。小鼠给药后在不同时间点处死（每个时间点n=3）。如表1所示，这些结果表明化合物C1和C12的药代动力学特征优于参考化合物。随后，通过体外微粒体稳定性实验研究了化合物的代谢稳定性。将小鼠肝微粒体（来源于雄性CD-I小鼠的S9肝组分）与NADPH再生系统和10 µM药物共同孵育15、30或60分钟。如表1所示，这些结果表明化合物C1和C12相对稳定，半衰期分别为2-4小时和>10小时。在目标结合试验中，给予小鼠30 mg/kg剂量的化合物C1和C12，药物C12表现出与参考药物相当的优异目标结合能力（见表1）。发明人还声称，这些化合物结构复杂性低，由于不存在手性中心，无需额外步骤或昂贵的对映纯试剂即可更高效地合成。方案 4：C12 的合成路线。试剂与反应条件：(a) 三乙胺（TEA），四氢呋喃（THF），室温；(b) 三乙酰氧基硼氢化钠（NaB (OAc)₃），室温，过夜；(c) 甲醇（MeOH）。图 6：具有 4 - 哌啶基甲基核心的高活性 ACKR3 拮抗剂的代表性示例（专利 WO2023/166190 A1）。C12的合成最具前景的ACKR3拮抗剂之一C12按照发明人报道的方法合成[141]。简要来说，5-(2,4-二氟苯基)-N-(哌啶-4-基甲基)异噁唑-3-甲酰胺盐酸盐在三乙胺（TEA）存在下，于还原胺化条件下与4-(吡咯烷-1-基)苯甲醛反应。室温搅拌过夜后，加入甲醇终止反应，经纯化得到最终化合物C12（方案4）。许多结构相似的类似物也通过类似方法进行少量修饰后合成。Riemens等人公开了包含杂芳基（如喹唑啉衍生物，图7）的式（D）化合物，可作为ACKR3的调节剂[142]。该公开还涉及该化合物在治疗癌症、自身免疫性疾病、炎症性疾病、移植排斥、纤维化或疼痛中的用途。据称这些化合物是ACKR3拮抗剂，因为它们竞争性抑制参考ACKR3激动剂的结合。例如，在放射性配体置换试验中，直接结合ACKR3并能置换氚标记的ACKR3结合参考化合物A（见图7(a)）的分子是本公开的ACKR3拮抗剂[142,143]。已合成并测试了多种化合物。表 1. C1、C12 及 ACT-1004-1239 的药代动力学特征、代谢稳定性与靶点结合结果分子编号药代动力学半衰期（<2 小时 =+，2-4 小时 =++，>4 小时 =+++）代谢稳定性半衰期（<2 小时 =+，2-4 小时 =++，4-10 小时 =+++，>10 小时 =++++）靶点结合（CX12 倍数增加）（<1=-，1-3=++，>3=+++）ACT1004-1239+++++C1++++++-C12+++++++代表性拮抗剂化合物的合成方法如方案5所示。苄基（2-羟乙基）氨基甲酸酯（I）在冰浴条件下与甲磺酰氯反应，生成中间体II。II在碱存在下与酚类化合物反应，得到酯类化合物III。酯类经氢氧化钠水解，生成相应的羧酸（IV），随后在HATU介导下与多种胺偶联，得到V。在氢化条件下脱除Cbz保护基，得到VI。另一方面，中间体V在氢化钠存在下用碘甲烷甲基化，随后脱保护得到VIII。中间体IX也可通过脱除III的Cbz保护基直接获得。IX随后与二氯喹唑啉偶联，生成X，X水解得到XI。X与多种胺偶联，得到化合物XII，XII还原得到XIII。此外，中间体XII与多种烷基卤化物反应，生成化合物XIV。放射性配体结合实验中，将4 µg（蛋白质含量）的膜与4 nM [3H]化合物A和递增浓度的未标记配体共同孵育。以未标记配体浓度为横坐标，绘制[3H]化合物A-膜结合的剂量依赖性置换曲线。使用Cheng-Prusoff方程[144]，通过校正放射性配体浓度及其对ACKR3的亲和力（Kd=18 nM），将所得IC50值转换为pKi。pKi至少为5.0的化合物是ACKR3的调节剂，更优选pKi≥5.5、或≥5.7、或≥6.0或6.4。图8列出了部分活性ACKR3拮抗剂。专利中公开的化合物通过多种反应合成。关键化合物（如P3）的合成方法如方案6所示。简要来说，3-恶唑烷酮-1-羧酸叔丁酯（T1）在甲酸铵存在下与丙二酸单乙酯（T2）反应，得到3-氨基-3-(2-乙氧基-2-氧代乙基)恶唑烷酮-1-羧酸叔丁酯（T3）。T3在二异丙基乙胺（DIPEA）存在下，经HATU介导与4-(二氟苯基)异噁唑-3-羧酸（T4）偶联，得到T5。T5中的叔丁基在三氟乙酸（TFA）存在下脱保护，生成游离胺（6）。6与4-羟基-4-甲基环己烷-1-酮（T7）在三乙酰氧基硼氢化钠存在下进行还原胺化，得到关键中间体T8。T8在氢氧化钠存在下皂化，生成相应的羧酸T9。T9随后在DIPEA存在下，经HATU介导与2-(吡啶-2-基)丙烷-2-胺（T10）偶联，得到目标化合物P3。通过制备型高效液相色谱（HPLC）分离所需异构体。图 7：具有喹唑啉骨架的 ACKR3 抑制剂（pKi ≥5.7 = ++；pKi ≥6.4 = +++）（专利 WO2022148879A1）。图 8：基于氮杂环丁烷骨架的 ACKR3 拮抗剂的通用结构 (a) 及高活性 ACKR3 拮抗剂 (b)（专利 WO 2022/225832 A1）。4. 疼痛调节中的ACKR3调节剂阿片受体是免疫系统和中枢神经系统产生的GPCRs，是镇痛、奖赏处理、应激、焦虑和抑郁的重要调节剂。已鉴定出三类阿片受体：μ（MOR）、δ（DOR）、κ（KOR）以及非经典伤害感受受体（NOP，或孤啡肽FQ受体）[145,146]。阿片受体由三类主要内源性阿片肽（内啡肽、脑啡肽和强啡肽）激活，每类肽优先结合一种或两种受体。另一方面，非经典NOP受体具有高度的伤害感受特异性和亲和力[147]。所有内源性阿片肽的主要产生部位是垂体、肾上腺、中枢神经系统和多种免疫细胞。所有内源性阿片肽均通过大型蛋白质前体的蛋白水解切割产生[148,149]。除少数显著例外，这些配体通过G蛋白启动下游信号通路，导致β-抑制蛋白募集、脱敏和受体内化[150,151]。吗啡、芬太尼和纳洛酮等非肽类阿片类药物可调节阿片受体。由于阿片受体是制药公司极具吸引力的靶点，因此仍是临床上最广泛使用的镇痛药。然而，长期使用这些药物可能导致耐受性、依赖性以及多种不良反应，如呼吸抑制或滥用。此外，阿片受体与其他GPCRs（尤其是趋化因子受体）之间的相互作用会影响阿片受体的产生、信号传导和脱敏[152-154]。方案 5：功能化喹唑啉配体的合成路线。试剂与反应条件：(a) 甲磺酰氯（MsCl），三乙胺（TEA），二氯甲烷（DCM），0°C；(b) 碳酸铯（CS₂CO₃），苯酚，二甲基甲酰胺（DMF），85°C；(c) 氢氧化钠水溶液，甲醇（MeOH），60°C；(d) O-(7 - 氮杂苯并三唑 - 1 - 基)-N,N,N',N'- 四甲基脲六氟磷酸盐（HATU），胺，二异丙基乙胺（DIPEA），二甲基甲酰胺（DMF），室温；(e) 钯 / 碳（Pd/C），氢气（H₂），甲醇（MeOH），室温；(f) 氢化钠（NaH），碘甲烷（Mel），二甲基甲酰胺（DMF），室温；(g) 2,4 - 二氯喹唑啉，二异丙基乙胺（DIPEA），室温，胺（R2）；(h) 二异丙基乙胺（DIPEA），胺（R3），85°C；(i) 氢化铝锂（LAH），四氢呋喃（THF），60°C；(j) 氢化钠（NaH），烷基卤化物，二甲基甲酰胺（DMF），室温；(k) 碳酸钾（K₂CO₃），二甲基甲酰胺（DMF），胺，65°C。方案 6：化合物 XX 的合成路线。试剂与反应条件：(a) 甲酸铵，乙醇，85°C，3 小时；(b) 二异丙基乙胺（DIPEA），O-(7 - 氮杂苯并三唑 - 1 - 基)-N,N,N',N'- 四甲基脲六氟磷酸盐（HATU），氯化铵（NH₄Cl），二氯甲烷（DCM），室温，2 小时；(c) 三氟乙酸（TFA），二氯甲烷（DCM），室温，1 小时；(d) 三乙酰氧基硼氢化钠（NaBH (OAc)₃），三乙胺（TEA），二氯甲烷 / 甲醇（4:1），室温；(e) 氢氧化钠（NaOH），四氢呋喃 / 水（1:1），室温；(f) 二异丙基乙胺（DIPEA），O-(7 - 氮杂苯并三唑 - 1 - 基)-N,N,N',N'- 四甲基脲六氟磷酸盐（HATU），二氯甲烷（DCM），室温，1 小时。Meyrath等人证实，非典型趋化因子受体ACKR3可结合免疫系统和中枢神经系统细胞中存在的多种内源性阿片肽，如脑啡肽、强啡肽和孤啡肽家族[81,155]。此外，他们发现，与CXCR4和传统阿片受体不同，ACKR3对阿片肽或趋化因子无额外的经典G蛋白信号传导或可检测的ERK激活，支持其独特的“沉默”特性。研究还表明，ACKR3不仅结合活性阿片肽，还结合其前体（如大强啡肽）和无活性的N端截短肽（如强啡肽A 2-17）。这表明ACKR3是阿片系统的重要多层受体。表2列出了阿片肽的名称、序列、鉴定编号和生物学活性。该研究结果表明，ACKR3作为这类神经调节剂的清道夫，调控其与阿片受体信号传导的可利用性。因此，ACKR3是一种额外的阿片肽广谱受体。更具体地说，他们在大鼠体外模型中证实，用LIH383抑制ACKR3可增加内源性阿片肽产生的经典受体的可利用性和信号传导。因此，通过调节和/或恢复内源性阿片肽的正常水平，ACKR3有望为治疗与内源性阿片肽失调相关的疾病（如应激功能障碍疾病、抑郁症或慢性疼痛）提供更安全的治疗选择。此外，新发现的对ACKR3具有高亲和力和选择性的肽可作为激动剂结合ACKR3。具体而言，这些具有共有序列FGGXIMRRX2（SEQ ID NO:1）的肽是选择性ACKR3调节剂。这些肽的长度优选不超过15个氨基酸，对ACKR3具有高亲和力和选择性，对所测试的其他任何类型受体无调节（激动或拮抗）活性。特别是，包含氨基酸序列FGGFMRRK（SEQ ID NO:3；C端取代NH2）的肽——也称为“LIH383”——是一种高选择性和强效（EC50 0.6 nM）的ACKR3肽调节剂，其效力甚至是已知ACKR3激动剂（如化合物18，EC50为11 nM）的20倍[156]。在生物学测定中，这些肽在纳摩尔或亚纳摩尔浓度下可招募β-抑制蛋白1和β-抑制蛋白2至ACKR3受体（表2）。例如，肽LIH383对ACKR3的效力特征为EC50 0.61 nM，该EC50值基于β-抑制蛋白募集测定。β-抑制蛋白募集可通过纳米荧光素酶互补测定（如NanoBiT，Promega）确定，例如将ACKR3 C端与SmBiT融合，β-抑制蛋白N端与LgBiT融合。生物学活性如表2所示。强啡肽A、强啡肽（1-13）、大强啡肽、肾上腺啡肽和BAM22在两位数纳摩尔范围内表现出高激动活性。作为ACKR3与疼痛调节之间关联的进一步证据，Chevigné等人发现康尼定及其类似物可激活ACKR3[82,157]。因此，除先前报道的镇痛作用外，康尼定及其类似物还可用于通过ACKR3调节的其他疾病和病症，如癌症、心血管疾病、纤维化（如心脏纤维化）、炎症或自身免疫性疾病的治疗。使用基于β-半乳糖苷酶互补的β-抑制蛋白募集试验（PathHunter，DiscoverX），在GPCR家族中进行了大规模筛选以确定康尼定的靶点。使用康尼定（WW-1）评估了超过240种受体的激活和抑制情况，其中168种来自GPCRMAX面板（包括肾上腺素能、多巴胺、P2Y或血清素等60多个不同受体家族），74种来自orphanMAX面板。筛选结果确定ACKR3是康尼定调节的最具反应性的受体。康尼定对ADRA2B、ADRA2BC和HRH2无活性，而仅部分激活肥大细胞G蛋白偶联受体X2（MRGPRX2）、大麻素受体2（CBR2）和褪黑素受体1B（MTNRIB）。筛选确定ACKR3是康尼定调节的最敏感受体，其结构式如图9所示。对康尼定（EC50 27300 nM）进行系统性化学修饰，得到了一系列对ACKR3具有增强效力的化合物（所选活性化合物见表3）。值得注意的是，化合物WW-12（EC50 353 nM）的活性提高了15倍。天然康尼定及其衍生物WW-12均抑制ACKR3对内生性阿片肽BAM22的浓度依赖性吸收。因此，与LIH383类似，康尼定可能阻碍ACKR3的清除活性，从而增加具有镇痛作用的内源性阿片肽与经典阿片受体的可利用性。在仓鼠卵巢（CHO）细胞中，使用基于β-半乳糖苷酶互补的β-抑制蛋白募集测定（PathHunter，DiscoverX）评估化合物的激动活性。EC50和最大效应（%Emax）值以平均值±标准误（SEM）表示，结果来自至少两次独立的重复实验。随后，利用NanoBiT测定证实康尼定是ACKR3的完全激动剂。类似地，在U87细胞中，使用NanoBiT-β-抑制蛋白2募集实验评估了化合物WW-1（康尼定）和WW-12对人和小鼠ACKR3受体的EC50值。与生理配体CXCL12相比，这两种化合物均为人类ACKR3的完全激动剂。根据浓度-反应曲线，WW-1和WW-12的EC50值分别为16.6和0.7 µM。在基于NanoBiT的β-抑制蛋白1募集测定和人类受体中获得了类似结果。在小鼠受体（mACKR3）中也观察到类似结果。与CXCL12相比，所有分子均表现出完全激动活性，化合物WW-1（康尼定）和化合物WW-12激活受体的EC50值分别为22.0和0.9 µM。这些发现表明，本发明的化合物在激活小鼠和人类ACKR3受体方面具有相当的效力和效能。在结合竞争实验中，WW-1和WW-12与CXCL12-AF647竞争结合，IC50值分别为39.9和2.7 µM。未标记的CXCL-12的IC50=1.0 nM。这些结果表明，这些化合物结合ACKR3的正构口袋并置换受体的天然配体。WW-1和WW-12对ACKR3的选择性高于21种经典和4种非典型趋化因子受体，且这两种化合物未观察到脱靶活性。然而，未来研究中寻找用于此目的的小分子也将具有重要意义。总之，康尼定的推定作用机制及其与ACKR3的相互作用的鉴定，是对该受体在疼痛控制中功能的全面理解的重要进展，为开发新型镇痛药物提供了巨大潜力。表 2. 作为 ACKR3 激动剂的阿片肽的名称、序列、编号及生物活性名称与序列序列编号结合竞争β-抑制蛋白-1ACKR3ACKR3半数抑制浓度（IC₅₀，nM）pIC₅₀±SEM半数有效浓度（EC₅₀，nM）pEC₅₀±SEM强啡肽AYGGFLRRIRPKLWDNQ1882.77.08±0.06110.26.96±0.03强啡肽A（2-17）-GGFLRRIRPKLWDNQ19110604.96±0.0618485.73±0.13强啡肽A（2-13）-GGFLRRIRPK20*209104.68±0.1150755.30±0.49强啡肽B（1-13）YGGFLRRIRPKLK21131.66.88±0.0461.87.21±0.04强啡肽BYGGFLRRFQKVVT22465.46.33±0.09727.36.14±0.19亮啡肽YGGFLRRFQKVTRSQEDPNAYSGELFDA2369095.16±0.0713205.88±0.12大强啡肽YGGFLRRIRPKLWDNQKRYGGFLRRFQKVVT2434.07.47±0.06108.16.97±0.04甲硫氨酸脑啡肽YGGFM25无活性无活性无活性无活性肾上腺髓质素YGGFLRRV49.07.31±0.0656.57.25±0.10BAM22YGGFLRRVGRPEWWMDYQKRYG2632.77.49±0.0323.57.63±0.15孤啡肽FGGFTGARKSARKLANQ27>10000<5.00>10000<5.00孤啡肽（1-13）FGGFTGARKSARK28*>10000<5.00>10000<5.00[PheⅠ⁴(CH₂-NH)Gly²]孤啡肽(1-13)13*>10000<5.0029665.53±0.18内吗啡肽-ⅠYPWF29*无活性无活性无活性无活性内吗啡肽-230*无活性无活性无活性无活性β-内啡肽31无活性无活性无活性无活性LH833FGGPMRRK3*4.0±0.050.61±0.17。图9：通过 ACKR3 激活发挥作用的疼痛调节剂的通用结构（专利 WO 2022/136486 A1）。[(3E,4R)-3-亚乙基-1-戊基哌啶-4-基](1H-吲哚-2-基)甲酮（WW-12）的合成WW-12的合成方法如发明人所述（方案7）。通过对映选择性还原反应，由市售的3-乙酰基吡啶（X1）制备仲醇X2。通过四步交替流程将醇X2转化为β,γ-不饱和醛X6。接下来是改进的“九步一锅法”合成。根据Katritzky方法，X6与2-锂化吲哚-1-羧酸酯（X8，由二氧化碳和吲哚X7原位生成）反应，一锅法以76%的产率得到醇X9。醇X9经二氧化锰（MnO2）氧化，生成酮WW-7。脱除PMB保护基得到WW-8。WW-8用1-溴戊烷烷基化，得到WW-12。5. 专家观点尽管各ACKR具有许多相似之处，但在表达模式、配体选择性、功能和作用方式方面均具有独特特性。除了带来有趣的治疗前景（尤其是癌症和慢性疼痛治疗）外，ACKR之间的独特组合使其在趋化因子和非趋化因子配体的活性和调控作用方面具有意想不到的复杂性。CXCL12-CXCR4轴在生理学和病理学中均至关重要，而ACKR3作为CXCL12的新型高亲和力受体的鉴定，使该相互作用系统变得更加复杂。早期研究主要关注CXCL12、CXCR4和ACKR3之间的三角相互作用，而忽略了ACKR3的其他配体。由于ACKR3具有高激活敏感性[158]，且可作为非趋化因子短肽配体的受体[81,159,160]，因此在非典型受体中具有独特性。目前尚不清楚这两种特性是否为其他ACKR所共有，或者是否为ACKR3特有且相互关联的特性。ACKR3与其内源性和外源性配体一起可发挥多种功能。对于某些配体，它可能仅作为“变阻器”清除配体，而不传导任何细胞信号通路；在细胞信号传导中，它可作为辅因子与其他受体形成二聚体。我们对ACKR3及其配体在不同细胞类型中的偏向性信号网络系统的理解才刚刚起步。关于ACKR3的研究正在涌现出更多有趣且重要的关联。表 3. 非典型趋化因子受体 3（ACKR3）激动剂的结构与生物活性方案 7：WW-12 的合成路线。试剂与反应条件：(a) (S)-2-[(1,3,2 - 二氧硼杂环戊烷 - 2 - 基氧基) 二苯基甲基] 吡咯烷，硼烷 - 二甲硫醚复合物（BH₃-DMS），四氢呋喃（THF），室温，6 小时；(b)(i) 对甲氧基苄基氯（PMB-Cl），1,2 - 二氯乙烷（DCE），回流；(ii) 硼氢化钠（NaBH₄），甲醇（MeOH），室温，15 小时；(c) 氢化钾（KH），碘甲基三丁基锡（ICH₂SnBu₃），四氢呋喃（THF），室温，4 小时；(d) 正丁基锂（nBuli），−78–0°C，1 小时；(e) 三氧化硫 - 吡啶复合物（SO₃-Pyridine），二甲基亚砜（DMSO），二氯甲烷（DCM），−10–0°C，1 小时；(f) 吲哚，正丁基锂（nBuli），二氧化碳（CO₂），−78°C - 室温；随后加入叔丁基锂（tBuli），−78°C，1 小时；(g) 二氧化锰（MnO₂），二氯甲烷（DCM），室温，3 小时；(h) 氯乙酰氯（ACE-Cl），1,2 - 二氯乙烷（DCE），回流，1 小时；甲醇（MeOH），回流，1 小时；(i) 碳酸铯（Cs₂CO₃），1 - 溴戊烷，四氢呋喃（THF），60°C，24 小时。表 4. 非典型趋化因子受体 3（ACKR3）- 趋化因子配体 11（CXCL11）/ 趋化因子配体 12（CXCL12）轴在疾病中的（临床前）临床研究进展表 4. 非典型趋化因子受体 3（ACKR3）- 趋化因子配体 11（CXCL11）/ 趋化因子配体 12（CXCL12）轴在疾病中的（临床前）临床研究进展化合物适应症参考文献研发阶段CCX771（拮抗剂）去势抵抗性前列腺癌乳腺癌胶质母细胞瘤肺部炎症多发性硬化癌症[69][16][184][93][40,134][40,134]临床前临床前临床前临床前临床前临床前COX662（拮抗剂）胶质母细胞瘤（GBM）[167]临床前X7Ab多发性硬化[138–140]临床前ACT-1004-1239（拮抗剂）急性肺损伤[123]临床1,4 - 二氮杂环庚烷与吡咯烷母核（拮抗剂）癌症[130]NCT03869320 [127]*体外 / 临床前4 - 哌啶基甲基母核（拮抗剂）炎症性与神经退行性疾病[140]体外 / 临床前喹唑啉骨架（拮抗剂）炎症性与神经退行性疾病[142]体外 / 临床前氮杂吲哚母核（拮抗剂）炎症性与神经退行性疾病[146]体外 / 临床前阿片肽类拮抗剂疼痛调节[155]体外 / 临床前Colidine 及其类似物（激动剂）疼痛调节[157]体外 / 临床前* 注：本研究针对 ACT-1004-1239 的 ADME（药物吸收、分布、代谢、排泄）进行研究，该化合物是首款 ccR7 拮抗剂。由于ACKR3能够调节CXCL11和CXCL12水平并间接影响CXCR3和CXCR4活性，已成为治疗靶点。拮抗ACKR3有望治疗多种癌症、急性肺损伤等炎症性疾病以及多发性硬化症等神经退行性疾病。除ACT-1004–1239外，目前尚未有其他ACKR3调节剂进入临床研究阶段。已有多种拮抗剂在各种体外/临床前模型中进行了研究（CCX771、CCX662、CCX733、CCX754和CCX777）[49,161]（见表4）。ACT-1004–1239是一种强效且选择性的ACKR3拮抗剂，是临床开发中的首个同类药物候选物。在多发性硬化症的体外动物模型中，其表现出积极的疗效特征，可减缓疾病进程。除免疫调节作用外，ACT-1004–1239在这些动物模型中还显示出促髓鞘形成作用。因此，ACT-1004–1239可能有助于潜在的疾病恢复，并通过改变疾病进程（如多发性硬化症）发挥疾病修饰作用。研究强调CXCL11和CXCL12可作为靶点结合生物标志物，表明患病动物中的作用与CXCL11和CXCL12浓度的剂量依赖性增加相关。单次递增剂量和多次递增剂量研究均表明，ACT-1004–1239可升高健康受试者的血浆CXCL12水平。因此，这些发现支持在未来临床试验（如多发性硬化症患者试验）中继续使用CXCL12作为转化工具，在后期临床开发中可推荐最佳剂量选择。需要在患者研究中进一步确定CXCL12水平的剂量依赖性升高及其升高幅度是否足以与疗效相关联。还需要在患者中进行额外的临床研究，以确定CXCL11是否也可用作靶点结合生物标志物。值得注意的是，由于ACT-1004–1239的免疫调节作用被认为发生在内皮细胞部位，因此测量人类血浆中的这些生物标志物可能会进一步阐明这一过程。辉瑞公司发现了一种选择性ACKR3拮抗剂（“化合物10”，IC50=622 nM），可通过与CXCL12竞争结合ACKR3，在体外阻断β-抑制蛋白通路[162]。据报道，这是首个用于ACKR3的小分子β-抑制蛋白拮抗剂，可作为阐明在心脏损伤等疾病模型中CXCL12置换与β-抑制蛋白拮抗作用的有价值工具。体外和体内药代动力学特征表明，化合物10在进行体内动物模型测试前，需要进一步优化效力和吸收、分布、代谢及排泄（ADME）特性[162]。趋化因子及其受体在白细胞和肿瘤细胞中均有表达，使其成为免疫治疗的主要靶点。然而，为避免任何不良反应，仍需进一步了解它们在不同类型癌症中的功能。靶向血液系统恶性肿瘤中过表达的趋化因子受体（如CCR4）可直接杀死肿瘤细胞，并可能引起非预期的免疫反应。因此，趋化因子受体抑制剂有望修饰基质成分、克服化疗耐药性并增强患者的免疫反应。ACKR3靶向的先前方法包括单可变域纳米抗体和小分子靶向，这些方法在ACKR3+肿瘤治疗中显示出令人鼓舞的结果[84,163,164]。由于裸单克隆抗体（mAbs）比化疗药物或小分子具有更高的靶点选择性，因此脱靶效应更少。抗体已进化为在体内具有长期生理活性，因为它们可激活抗体依赖性细胞毒性（ADCC）、补体依赖性细胞毒性（CDC）和抗体依赖性细胞吞噬作用（ADCP）等先天性免疫机制。近期一项研究使用放射性标记的抗体克隆11G8，在体内有效地靶向ACKR3+肿瘤进行正电子发射断层扫描（PET）成像[165]。然而，未报道治疗效果，这并不令人意外，因为11G8是小鼠IgG1（mIgG1）同种型，仅触发低水平的ADCC。根据Brian A. Zabel等人的研究，除标准治疗药物外，靶向ACKR3的免疫治疗性单克隆抗体（mAbs）可能有助于治疗胶质母细胞瘤（GBM）——最难以治愈的脑肿瘤类型之一[166]。为进行该研究，生成了X7Ab（一种单链FV-人FC-免疫球蛋白G1（IgG1）抗体），用于靶向人和小鼠GBM细胞中的ACKR3。结果表明，X7Ab通过激活巨噬细胞的吞噬活性以及补体和自然杀伤（NK）细胞的细胞毒性，杀死表达ACKR3的GBM肿瘤细胞和血管内皮细胞。有趣的是，X7Ab与替莫唑胺（TMZ）联合使用时，可在不牺牲治疗效果的情况下降低TMZ的剂量。替莫唑胺是一种用于治疗脑肿瘤（尤其是胶质母细胞瘤）的药物。联合给予X7Ab和TMZ的小鼠，其磁共振成像（MRI）可检测到的肿瘤显著减少，总体生存期延长。在胶质母细胞瘤的啮齿动物模型中，CCX771等小分子ACKR3抑制剂与放疗（IR）联合使用，可有效预防肿瘤复发并延长生存期[84]。在源自人类U251 GBM细胞的颅内肿瘤小鼠模型中，放疗足以在数周内阻断肿瘤生长，但肿瘤会复发。ACKR3抑制的作用在治疗停止后仍然持续，表明放疗诱导了肿瘤再生所需的短暂ACKR3介导的事件。在人类GBM和啮齿动物模型中，肿瘤细胞和/或肿瘤相关血管系统上的ACKR3表达，以及抑制人类GBM异种移植物中神经球形成的ACKR3抑制剂，表明这一过程可能代表血管生成和/或癌症干细胞增殖/分化。放疗后每日给予小鼠ACKR3抑制剂CCX771，肿瘤生长迅速减少。因此，ACKR3是胶质母细胞瘤放疗后治疗的有前景的靶点，未来将研究多种强效ACKR3拮抗剂。尽管已开发并评估了多种CXCR4拮抗剂（包括肽、小分子和抗体）的治疗用途，但寻找能有效阻断CXCL12/ACKR3通路的调节剂的研究仍在进行中[9]。然而，由于发现CXCR4抑制只能部分限制肿瘤/肿瘤微环境（TME）细胞对CXCL12梯度的反应性，因此对癌症进展过程中CXCR4/CXCL12或ACKR3/CXCL12相互作用的有效性提出了质疑。CXCL12抑制剂（如NOX012[167]、中和CXCL12的纳米抗体[168]或LIT-927[169]）可能同时影响CXCR4和ACKR3信号传导。然而，CXCL12阻断无法影响CXCR4/ACKR3共表达、串扰或异二聚化，也无法破坏由CXCL11等CXCL12以外的配体介导的ACKR3信号传导。因此，即使在设计联合治疗时应考虑潜在的不良反应，给予CXCR4/ACKR3拮抗剂仍可能作为单一疗法或与现有免疫疗法联合使用的可行治疗选择。激动剂在疼痛治疗、抗血小板和心血管研究中受到了广泛关注。ACKR3作为非典型阿片受体的发现，是将ACKR3用作疼痛治疗替代靶点的研究中的关键转折点。已发现的肽具有高 potency和选择性，尤其是LIH313，其在ACKR3上的EC50值为0.6 nM。此外，这些肽的生产成本低，有助于保持竞争力并让大多数患者能够获得。随后，开展了以ACKR3为靶点开发小分子疼痛调节剂的研究，通过全面的构效关系（SAR）研究，得到了康尼定及其多种衍生物和类似物。其中一种有前景的化合物是WW-12，其EC50为353 nM，约为康尼定（EC50 27300 nM）的15倍。然而，与肽LIH313相比，WW-12的效力要低得多。因此，药物开发中需要在药物化学方面做出重大努力，以开发更有效的小分子，这些小分子可能在疼痛治疗中具有巨大潜力。为强调ACKR3在心血管疾病中的关键作用，已在动脉粥样硬化、心肌梗死和中风的小鼠模型中尝试了多种靶向该蛋白的药理学方法[53]。此外，已构建了多种ACKR3敲除小鼠模型。尽管这些研究明确表明ACKR3可能引发细胞和组织特异性功能反应，但调控心血管疾病中ACKR3相关功能的分子机制仍存在争议。ACKR3与多种配体相互作用的能力，以及周围细胞对这些配体的产生和加工，可能与组织依赖性功能相关。在缺氧、炎症或感染条件下，ACKR3及其配体的表达上调，表明ACKR3活性可能因病理条件而异。ACKR3可干扰多种细胞内通路或与其他蛋白质形成异二聚体，这增加了另一层复杂性。总之，尽管已进行了多项使用ACKR3调节剂的药理学研究，但目前关于这些调节剂在动物中的安全性研究的已发表数据非常有限。为充分理解ACKR3调控在癌症和多发性硬化症中的作用，需要在动物和人类研究中进行更多的毒理学表征。缩写ACKR3：非典型趋化因子受体3 ADCC：抗体依赖性细胞毒性 CDC：补体依赖性细胞毒性 ADCP：抗体依赖性细胞吞噬作用 GPCR：G蛋白偶联受体 CXCL：C-X-C基序趋化因子配体 SDF-1：基质细胞衍生因子1 CXCR：C-X-C基序趋化因子受体 HATU：O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐 CSC：癌症干细胞样细胞 CAF：癌症相关成纤维细胞 IGFI：胰岛素样生长因子I DMF：二甲基甲酰胺 HIV：人类免疫缺陷病毒 ARDS：急性呼吸窘迫综合征 LPS：脂多糖 ALI：急性肺损伤 CNS：中枢神经系统 MS：多发性硬化症 EAE：实验性自身免疫性脑脊髓炎 MOG：髓鞘少突胶质细胞糖蛋白 OPC：少突胶质前体细胞 PET：正电子发射断层扫描 S1P1：鞘氨醇1-磷酸受体1 CYP3A：细胞色素P450 3A亚家族 MTNRIB：褪黑素受体1B CBR2：大麻素受体2 MRGPRX2：肥大细胞G蛋白偶联受体X2 参考文献：Hauser AS, Attwood MM, Rask-Andersen M, et al. 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Discovery of the potent, selective, orally available cxcr7 antagonist ACT-1004–1239. J Med Chem. 2020 Dec 24;63(24):15864–15882. doi: 10.1021/acs. jmedchem.0c01588•• This article describes the development of potent, selective, orally available CXCR7 antagonist ACT-1004–1239 from high- throughput screening campaign e followed by the hit-to-lead optimizations. An extensive structure activity relationship studies and pharmacokinetic studies were discussed.Pouzo L, Baumlin N, Sassi A, et al. ACT-1004-1239, a First-in-class CXCR7 antagonist with both immunomodulatory and promyelinat- ing effects for the treatment of inflammatory demyelinating dis- eases. FASEB J. 2021;35(3):1–17. doi: 10.1096/fj.202002465RPouzol L, Sassi A, Baumlin N, et al. CXCR7 antagonism reduces acute lung injury pathogenesis. Front Pharmacol. 2021;12:748740. doi: 10.3389/fphar.2021.748740Pouzol L, Tunis M, Baumlin N, et al. CXCR7 antagonism with ACT-1004–1239 reduces neuroinflammation and accelerates remyelination in murine demyelinating models. Neurology. 2021;96(2236). Available from: 15_Supplement/2236.abstractHuynh C, Henrich A, Strasser DS, et al. A multipurpose first-in- human study with the novel CXCR7 antagonist act-1004–1239 using CXCl12 plasma concentrations as target engagement bio- marker. Clin Pharmacol Ther. 2021;109(6):1648–1659. doi: 10.1002/ cpt.2154Huynh C, Seeland S, Segrestaa J, et al. Absorption, metabolism, and excretion of ACT-1004–1239, a first-in-class cxcr7 antagonist: in vitro, preclinical, and clinical data. Front Pharmacol. 2022;13:812065. doi: 10.3389/fphar.2022.812065Huynh C, Brussee JM, Pouzol L, et al. Target engagement of the first-in-class CXCR7 antagonist ACT-1004–1239 following multiple- dose administration in mice and humans. Biomed Pharmacother. 2021;144:112363. doi: 10.1016/j.biopha.2021.112363Siegel RL, Miller KD, Jemal A. Cancer statistics. 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Novel selective ackr3 mod- ulators and uses thereof WO 2020/225070 Al. . com/patent/WO2020225070A1/en?oq=WO+2020%2f225070+Al.•• According to this patent, ACKR3 binds a wide variety of endo- genous opioid peptides that are present in cells of the central nervous system (CNS) and immune system. ACKR3, an atypical opioid receptor, is a scavenger of these peptides, regulating their availability for signaling opioid receptors.Menhaji-Klotz E, Hesp KD, Londregan AT, et al. Discovery of a novel small-molecule modulator of C-X-C chemokine receptor type 7 as a treatment for cardiac fibrosis. J Med Chem. 2018 Apr 26;61 (8):3685–3696. doi: 10.1021/acs.jmedchem.8b00190Chevigné A, Szpakowska M, Namjoshi O, et al. Bruce Conolidine analogues as selective ackr3 modulators for the treatment of can- cer and cardiovascular diseases. WO 2022/136486 Al. https:// 2f136486+Al68A.•• This patent reported the discovery of conolidine and its struc- ture-activity relationship studies to improve and find the small-molecule ACKR3 agonists as an alternate therapeutic option for the treatment of pain.Szpakowska M, Nevins AM, Meyrath M, et al. Different contributions of chemokine N-terminal features attest to a different ligand binding mode and a bias towards activation of ACKR3/CXCR7 compared with CXCR4 and CXCR3. Br J Pharmacol. 2018;175 (9):1419–1438. doi: 10.1111/bph.14132Meyrath M, Palmer CB, Reynders N, et al. Proadrenomedullin n-terminal 20 peptides (pamps) are agonists of the chemokine scavenger receptor ACKR3/CXCR7. ACS Pharmacol Transl Sci. 2021;4:813–823. doi: 10.1021/acsptsci.1c00006Ikeda Y, Kumagai H, Skach A, et al. Modulation of circadian glucocor- ticoid oscillation via adrenal opioid-CXCR7 signaling alters emotional behavior. Cell. 2013;155:1323–1336. doi: 10.1016/j.cell.2013.10.052Lounsbury N. 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艾伯维引进泽璟制药开发的DLL3靶向药物的T细胞疗法，首付款1亿美元，里程碑付款高达11.35亿美元。这款DLL3靶向药物，利用T细胞接合剂（T cell engager）技术，精准激活患者体内的T细胞，增强免疫系统对肿瘤细胞的识别与杀伤能力。DLL3是神经内分泌肿瘤，尤其是小细胞肺癌中的特异性高表达靶点，近年来备受免疫肿瘤领域关注。艾伯维选择围绕DLL3开发T细胞接合剂疗法，体现了其在免疫治疗领域的精准布局。相比传统抗体药物，T细胞介导疗法能更有效激活患者自身免疫系统，具备更高的治疗潜力和市场竞争力。 马斯克旗下的Neuralink联合创始人宣布，脑机接口（BCI）设备的生产流程将迎来重大变革，正式启动大规模量产。马斯克在社交媒体平台X上表示：“Neuralink将在2026年实现脑机接口设备的大规模量产，同时手术流程将大幅简化，几乎实现全自动化。”他还透露，“设备的电极线可以穿过硬脑膜，无需切除硬脑膜”，这被视为一项重要技术突破。Neuralink的脑机接口技术，旨在帮助瘫痪患者通过意念控制数字设备。马斯克曾将该设备形象地比喻为“植入颅骨的Fitbit”，设备包含一块替代小块颅骨的芯片，通过多根细如发丝的电极线与大脑相连。根据Neuralink官网介绍，N1植入物配备了1024个电极，分布在64根电极线上。此前，Neuralink曾因技术和安全问题遭到美国FDA拒绝，但数年前最终获得批准，开始人体临床试验。去年6月，公司完成了6.5亿美元的E轮融资，并于9月宣布已在12名患者体内成功植入该设备。首位接受植入的患者是29岁的四肢瘫痪者因潜水事故导致颈椎脱位，肩部以下瘫痪多年。自2025年1月植入Neuralink设备后，已能利用该设备玩视频游戏、进行网络国际象棋等活动。 法国制药巨头Servier宣布成立企业风险投资（VC）部门，首期资金规模约为2亿欧元。该部门将聚焦欧洲生物科技初创企业，支持其在药物研发和生物技术创新上的突破。新成立的风险投资部门将重点关注精准医疗、基因治疗、免疫肿瘤学及罕见病等领域的欧洲初创企业。借助Servier丰富的研发资源和全球网络，推动早期项目的临床转化和商业化进程。 Alveus Therapeutics完成约1.6亿美元的A轮融资，计划加速开发针对肥胖及代谢疾病的创新疗法，重点聚焦替西帕肽所在的双重受体激动剂领域以及胰高血糖素样肽家族相关药物的研发。Alveus 的核心管线ALV-100 是一种双功能 GIPR 拮抗剂/GLP-1R 激动剂，旨在实现持久的体重管理，提高减重质量并维持长期效果，目前处于临床2期阶段。除了ALV-100，Alveus还在研发另一款胰淀素靶向肽类药物ALV-200。该药物设计更具选择性，预计能改善现有药物的副作用，满足不同患者的需求。胰淀素作为调节食欲和能量平衡的重要激素，近年来成为减重药物研发的新热点。 专注于细胞和基因治疗的创新型生物制药公司Beacon Therapeutics完成了7500万美元C轮融资。本轮融资由高盛另类投资领投，该公司生命科学领域的管理合伙人也参与了此次投资。这笔资金将主要用于推动Beacon在视力治疗领域的研发进展，特别是针对遗传性视网膜退行性疾病的基因疗法开发及相关临床试验的拓展和数据积累。Beacon希望借助先进的基因编辑技术和细胞疗法平台，弥补全球医疗巨头强生此前在视力治疗领域未能取得成功的遗憾，为患者带来更有效的治疗方案。公司的核心管线Laru-zova（laruparetigene zovaparvovec）是一种潜在的best-in-class基因疗法，目前处于治疗X连锁视网膜色素变性（XLRP）的临床3期阶段。Laru-zova通过AAV递送功能性RPGRORF15基因拷贝，从而恢复XLRP患者视杆细胞和视锥细胞的正常功能。 细胞与基因治疗初创企业Rampart Bioscience正式宣布关闭。不到15个月前，Rampart带着1.25亿美元启动，目标是实现高效且安全的非病毒基因递送。公司希望绕过传统病毒载体的安全隐患和生产难题，打造一种新型基因治疗平台，提升DNA基因编辑和基因替代疗法的安全性与可控性。 Parabilis完成3.05亿美元融资，资金将主要用于推动其创新药物发现平台的临床前研究和药物开发。Para­bilis研发出一种独特的分子识别技术，能够精准锁定并结合那些传统方法难以作用的蛋白质平坦表面，实现对疾病相关靶点的有效调控。早期研究显示，该技术在肿瘤和神经退行性疾病等多个难治性疾病模型中展现出显著疗效。 礼来完成对生物制药企业Ventyx Biosciences的收购，交易金额接近12亿美元。Ventyx拥有多款处于临床阶段的创新药物，主要聚焦于自身免疫性疾病、心血管疾病及神经系统疾病等领域。这次收购不仅显著丰富了礼来在炎症与免疫调节领域的研发管线，尤其是获得了Ventyx开发的NLRP3炎症小体抑制剂资产。这类药物在调节炎症反应中发挥关键作用，具备广泛的治疗潜力，覆盖多种难治性炎症相关疾病。   蛋白质图谱技术创新公司InduPro Therapeutics再次获得礼来的青睐。双方宣布达成一项最高可达9.5亿美元的合作协议，聚焦利用前沿蛋白质图谱技术推动新药研发。此次协议总金额涵盖预付款、研发里程碑付款及潜在销售提成，充分体现了礼来对InduPro技术平台的高度认可。InduPro专注于结合先进的蛋白质组学与AI算法，精准绘制疾病相关蛋白质的空间结构和功能网络，从而加速靶点发现和药物设计进程。礼来此次战略合作旨在借助InduPro的蛋白质图谱技术，提升自身在免疫学及其他治疗领域的研发效率和成功率。双方将共同推进多个早期项目的临床前研究，并探索更广泛的长期合作可能性。 2026年纳斯达克生物科技行业的首个首次公开募股（IPO）诞生，Ak­tis Oncology成功在交易所挂牌，筹集资金3.18亿美元，主要用于推进其放射性药物管线的临床开发和商业化准备。Ak­tis是一家专注于肿瘤放射性药物研发的创新型生物医药公司。公司致力于开发靶向放射性同位素治疗方案，力求实现更精准、高效的癌症治疗。Ak­tis已与礼来建立战略合作伙伴关系，借助礼来丰富的研发和商业化经验，加速放射性药物的临床进展和市场布局。 辉瑞宣布与美国加州生物技术公司Cartography Biosciences达成一项多年合作协议，总金额超过8.65亿美元，旨在共同发现并开发新型肿瘤选择性抗原，为未来癌症免疫治疗开辟新路径。根据协议，Cartography将利用其独有的ATLAS和SUMMIT平台，分析健康细胞与肿瘤细胞中抗原的表达差异，筛选出具有高度肿瘤特异性的抗原。Cartography负责抗原的发现与验证工作，而辉瑞则有权选择其中的靶点，承担后续的临床开发、监管审批和商业化推广。辉瑞承诺支付最多6500万美元的前期资金及近期里程碑款项，同时还将支付行权期权费用。若所有合作选项均被激活，辉瑞还将投入超过8亿美元用于后续研发、监管和商业化里程碑付款。此外Cartography还将根据合作项目未来的净销售额，获得分级版税收入。 安进收购总部位于英国的生物技术公司Dark Blue Therapeutics，意在强化其抗癌产品线。此次收购的核心资产是一款由Dark Blue开发的小分子蛋白降解剂，主要靶向MLLT1和MLLT3蛋白，目前正处于急性髓系白血病（AML）的临床前研究阶段。双方尚未披露具体的财务细节，交易总价值最高可达8.4亿美元，包含前期付款及未来的里程碑付款。交易完成时间尚未确定。交易完成后，安进计划将Dark Blue纳入其现有研发体系，以增强早期癌症药物的研发能力。此次收购的核心资产是Dark Blue的主打候选药物DBT-3757，这是一款靶向MLLT1和MLLT3蛋白的小分子药物。根据Dark Blue官网介绍，MLLT1和MLLT3参与调控多种基因表达，包括一些潜在的致癌基因。DBT-3757通过降解这两种蛋白，为白血病及实体瘤患者带来了新的治疗希望，尤其是针对那些对已有menin抑制剂产生耐药的患者。目前该药仍处于临床前阶段，正在进行IND（临床试验申请）相关的支持性研究。 礼来与合作伙伴Nimbus Therapeutics达成一项为期多年的合作协议，重点开发一款临床前口服肥胖治疗药物，项目潜在市场价值高达13亿美元。此次合作是双方继2022年针对心脏代谢疾病中AMPK蛋白的联合研发之后的又一重大举措。Nimbus以其先进的计算化学和基于结构的药物设计技术著称，双方将利用这些技术开展针对肥胖领域未满足需求的小分子药物早期发现项目。Nimbus研发总裁Peter Tummino表示，团队结合AI驱动的预测模型与结构设计，致力于开发具有行业领先潜力的新型小分子药物。 生物技术初创公司Diagonal Therapeutics完成1.25亿美元的B轮融资，这笔资金将支持其首个候选药物DIAG723在今年启动临床试验公司专注于开发一种创新的多靶点“聚集”抗体。这类抗体能够与细胞表面受体结合，并促使它们以特定的方式聚合，从而激活因疾病受损的细胞信号通路，诱导多样化的细胞反应。DIAG723是基于这一机制的首个候选药，目标疾病包括罕见遗传病遗传性出血性毛细血管扩张症（Hereditary Hemorrhagic Telangiectasia，HHT）和肺动脉高压（Pulmonary Arterial Hypertension，PAH）。虽然最初计划针对这两种疾病分别开发药物，但发现DIAG723通过重新激活名为ALK1的信号复合体，有望同时治疗这两种疾病。本轮融资由赛诺菲创投（Sanofi Ventures）和Janus Henderson Investors联合领投，超过十家投资机构参与。其他参投机构还包括Deep Track Capital、Atlas Venture、RA Capital Management、Frazier Life Sciences和Viking Global Investors。自2024年公司公开以来，累计融资已超过2.5亿美元。 心血管生物技术公司Corsera Health完成了8000万美元A轮融资，同时其首个基于siRNA技术的候选药物已顺利进入临床阶段。此次融资由欧洲知名生命科学投资机构Forbion和专注公共健康领域的Population Health Partners联合领投，联合创始人兼联合CEO John Maraganore也亲自参与了本轮投资。Corsera成立于2025年9月，目标是通过降低动脉粥样硬化性心血管疾病（ASCVD）的风险，延长人们的健康寿命。公司正在开发一款结合AI的工具，用于预测个体终生ASCVD风险，并计划将这一预测工具与每年仅需服用一次的预防性治疗方案结合，实现精准且高效的疾病预防目前，Corsera推进的两个核心项目均基于siRNA技术：一是通过沉默PCSK9基因表达，降低“坏”胆固醇（低密度脂蛋白胆固醇，LDL-C）；二是靶向血管紧张素原（AGT），以降低血压。其中，主导项目COR-1004是一款siRNA疗法，已被证明能有效降低PCSK9蛋白水平。除了融资进展，Corsera还宣布COR-1004已进入I期临床试验，正在进行给药。该阶段试验主要评估药物的安全性和耐受性，次要目标则是观察其临床活性。公司将重点监测该疗法是否能显著降低血浆中的PCSK9及血清中的LDL-C水平，预计今年内可获得初步的概念验证数据。此外，Corsera计划启动针对AGT的COR-2003 I期临床试验，进一步拓展其心血管多靶点治疗布局。Corsera由两位生物技术领域的重量级人物联合创立：John Maraganore，前Alnylam CEO，拥有丰富的siRNA药物研发和商业化经验；以及Clive Meanwell，曾共同创立并担任Metsera CEO，擅长将创新技术转化为商业产品。两人强强联合，为Corsera奠定了坚实的技术和商业基础。   勃林格殷格翰（BI）宣布了其近期第二项聚焦肾脏疾病的合作，与基因组学公司Variant Bio签署了一份总金额超过1.2亿美元的战略合作协议。这次合作将利用Variant Bio基于AI的Inference平台，致力于发现和验证心肾疾病及肾脏疾病的新治疗靶点。Variant Bio介绍称，该平台能够整合全球多样化人群的基因组数据、深度表型数据和多组学数据，为靶点发现提供强有力的支持。双方未透露具体的财务细节，但据估计，该协议涵盖预付款、许可费和里程碑付款，总金额将超过1.2亿美元。  罗氏宣布已与美国生物技术公司Structure Therapeutics达成一项授权协议，支付1亿美元获得其专利许可，以加强自身在口服GLP-1受体激动剂领域的战略布局。这一举措旨在保护罗氏抗肥胖产品线免受潜在专利诉讼风险，确保其新药CT-996的顺利推进和市场推广。根据协议，罗氏及其子公司基因泰克（Genentech）获得Structure Therapeutics旗下与CT-996相关专利的非排他性使用权。CT-996是一款罗氏通过27亿美元收购Carmot Therapeutics获得的口服GLP-1受体激动剂。除一次性支付1亿美元外，罗氏还将根据未来CT-996产品销售额，向Structure的子公司Gasherbrum Bio支付低单位数百分比的版税。公告中未详细说明具体涵盖的专利，但市场普遍推测，Structure拥有涉及CT-996或相关分子的关键知识产权，存在潜在侵权风险，这促使罗氏主动获得许可以规避未来诉讼。 新加坡眼科研究所（SEPI）宣布终止与德国生物技术公司TME Pharma的合作，结束了双方不到七个月的眼科疾病项目合作。去年6月，SEPI曾宣布与TME Pharma达成新协议，共同推进抗CCL2 RNA适配体NOX-E36（又名emapiticap pegol）进入临床阶段。NOX-E36被视为治疗青光眼滤过手术相关纤维化及眼后部炎症等多种眼科适应症的潜力药物。根据当时签署的协议，TME Pharma将获得未来许可收益中的较大份额，并负责主导商业谈判，推动与潜在投资者及许可合作伙伴的接触。然而TME Pharma宣布，双方合作关系已正式终止。公司强调，此次合作终止“与NOX-E36的质量和潜力无关”，但其背后显然反映出资金紧张和战略调整的压力。TME新近宣布，将不再直接进入临床阶段，而是计划于本月启动毒理学相关动物模型研究，验证NOX-E36的局部给药可行性。公司称，这些动物研究是推动该药物应用于青光眼滤过手术患者的必要前期工作。此前，SEPI负责筹集NOX-E36 1b期临床试验的资金。TME表示，动物研究成本较低且更易控制，有助于在有限资金条件下继续推进项目。公开数据显示，TME截至去年年底仅剩约200万美元现金，其中约四分之一由今年6月上任的CEO Diede van den Ouden个人注资。TME此前成功推动另一款脑癌药物NOX-A12（olaptesed pegol）进入1/2期临床试验，但对CCL2抑制剂未来发展路径仍存不确定性。公司表示，已保持NOX-E36临床试验开放状态，以便未来找到合适合作伙伴时能迅速恢复试验。未来数周内，TME计划发布更明确的战略规划和市场更新。与许多资金紧张的生物技术公司类似，TME也曾探索加密货币投资的可能性，但截至目前尚未实际进入该领域。公司表示，目前尚未发现吸引力投资机会，未在加密市场进行投资。 中国台湾及美国双总部生物制药公司Foresee Pharmaceuticals宣布，将出售部分处于临床阶段的药物项目，集中资源全力推进其前列腺癌药物Camcevi的开发和商业化。本次交易中，Foresee以1000万美元预付款将其MMP-12抑制剂项目的全球权益转让给Primevera Therapeutics。该项目包括FP-025（aderamastat），主要用于治疗炎症和纤维化相关疾病。FP-025已于2023年完成过敏性哮喘患者的二期临床试验，Foresee还计划推进其在心脏肉芽肿病的中期临床研究。交易还涵盖FP-020（linvemastat），该药物已在澳大利亚健康志愿者中完成一期临床试验，Foresee原计划在中重度哮喘及炎症性肠病中开展二期试验。此外，交易还包括处于早期药物发现阶段的第三代MMP-12抑制剂。除了1000万美元的预付款外，Foresee美国子公司还将获得最高达5.745亿美元的里程碑付款，并在相关药物成功上市后，按分级单数字百分比获得销售提成。收购方Primevera Therapeutics目前公开信息极少，几乎没有数字媒体曝光。公告显示作为交易一部分，Foresee美国子公司将获得Primevera 19%的股权。 AI驱动的生物技术公司Soley Therapeutics宣布成功完成2亿美元C轮融资，计划利用这笔资金推动其主导的急性髓系白血病（AML）候选药物进入临床阶段。Soley Therapeutics依托其独特的细胞应激感知平台，结合AI与计算机视觉技术，分析人体细胞中成千上万的应激反应数据，从而辅助设计创新治疗分子。该平台不仅加速了药物研发进程，也提升了候选药物的临床转化潜力。本轮融资吸引了包括Doug Leone Family Fund、Breyer Capital和GordonMD Global Investments等老股东的持续支持，同时引入了Surveyor Capital、HRTG Partners和RWN Management等新投资方。本次融资资金将主要用于推进两款肿瘤候选药物的临床开发。其中，AML项目计划于2026年提交IND申请，另一款针对实体瘤的候选药物则进入IND申报前的关键研究阶段。此外，部分资金还将投入神经退行性疾病和代谢疾病领域的非肿瘤应激缓解药物开发，并不断强化平台能力。2025年3月，Soley与甲骨文（Oracle）和英伟达（Nvidia）达成合作协议，进一步提升了其AI技术实力，为药物研发提供强有力的技术支持。 亲爱的读者，如果您对生物医药的最新动态感兴趣，或希望了解更多前沿生物科技资讯，请关注公众号。您的每一次关注和转发，都是最大的支持和鼓励！ 👉 关注大药时记，掌握更多前沿生物科技！ 👉 分享文章，让更多人受益！