Darvadstrocel(TiGenix)

点击蓝字 关 注 我 们 本文引用格式 陆雅斐,皇甫少华,杨旭,等. 脐带间充质干细胞治疗克罗恩病肛瘘的长期疗效和安全性临床观察[J/OL]中华结直肠疾病电子杂志,2026,15(01)：72-84.DOI:10.3877/cma.j.issn.2095-3224.2026.01.008 摘要 目的  本研究旨在评估人脐带间充质干细胞（hUCMSCs）局部注射治疗克罗恩病肛瘘（pfCD）的临床疗效与安全性。 方法  纳入2022年10月至2024年12月期间在南京中医药大学附属南京中医院接受治疗的19例非活动期pfCD患者（年龄15~39岁），行肛周局部hUCMSCs移植手术治疗，并进行6~12个月的随访。通过临床体征和MRI影像学评估瘘管闭合情况，观察克罗恩病活动指数（CDAI）、肛周疾病活动指数（PDAI）、视觉疼痛模拟评分（VAS）、炎症性肠病生活质量评分（IBDQ）和Wexner肛门失禁评分的动态变化，同时记录不良事件及营养指标。 结果  术后6个月和12个月的累积瘘管愈合率分别为73.7%（14/19）和90.9%（10/11），盆腔MRI证实瘘管完全闭合。患者临床活动指数在治疗全程维持在非活动期水平。与基线相比，术后第14天的CDAI评分显著下降，中位数降至27.5（13.5，40.4）（Z=−3.175，P=0.009）。PDAI指数在术后第二个月下降至2.0（0.0，2.0）（Z=−2.839，P=0.022）。VAS评分中位数在术后1个月至6个月降至0分（P>0.05）。IBDQ评分在术后第七天略有下降[201.0（195.0，212.5）（P>0.05）]，至术后第14天恢复至基线水平。Wexner肛门失禁评分较基线有改善趋势，但差异未达到统计学意义（Z=−1.472，P>0.05），表明未见肛门功能损伤。此外，研究期间42.1%（8/19）的患者出现轻度、自限性疼痛，10.5%（2/19）出现短暂低热，未发生严重不良事件。术后6个月白蛋白水平较基线显著升高（t=3.370，P=0.010）。 结论  hUCMSCs局部注射治疗pfCD具有创伤小、恢复快、疼痛轻、肛门功能保护良好等优点，显示出较高的临床有效性和安全性。 关键词：克罗恩病；脐带间充质干细胞；肛瘘；干细胞移植手术 克罗恩病（Crohn’s disease，CD）是一种以肠道慢性、透壁性炎症为主要特征的免疫性疾病，其病程迁延、易复发，严重影响患者生活质量[1,2]。肛瘘是CD最常见且最具挑战性的并发症之一，通常提示疾病亚型更为侵袭，复发率与致残风险更高[3,4]。流行病学数据显示，CD在全球范围内发病率持续攀升，约25%~80%的成人CD患者出现肛周病变，其中肛瘘的发生率高达17%~43%[5, 6]。 传统治疗克罗恩病肛瘘（perianal fistulizing Crohn’s disease，pfCD）的方法以手术为主，但具有创伤大、括约肌功能受损、术后瘘管复发率高、创面愈合困难及肛周瘢痕增生等问题，疗效有限，难以兼顾感染控制、组织修复与功能保护等多重目标 [7]。此外，近年来以抗肿瘤坏死因子-α为代表的生物制剂在CD系统性治疗中取得显著进展，但在pfCD治疗中的疗效有限，部分患者对生物制剂无应答或逐渐出现耐药性，且增加感染、诱发药物性狼疮和视神经炎等免疫相关不良反应等风险[8]。这一背景促使研究者寻求更为安全有效的局部干预手段。 自体脂肪来源干细胞（adiposederived mesenchymal stem cells，ADSCs）在促进pfCD的瘘管闭合、抑制局部炎症方面具有良好疗效，且安全性良好[9,10]。然而，ADSCs仍存在体外扩增能力有限及获取过程侵入性高等不足。相比之下，脐带间充质干细胞（human umbilical cord mesenchymal stem cells，hUCMSCs）来源于新生儿脐带组织，增殖和传代能力更高、免疫原性更低、免疫调节功能更稳定，适用于标准化生产与异体应用[11,12]。因此，本研究纳入19例pfCD患者进行hUCMSCs局部移植治疗，旨在系统评估其在复杂性pfCD中的有效性与安全性，以期为间充质干细胞治疗提供新的临床证据与理论依据，并为未来优化干细胞来源提供科学指导。  资料与方法  一、一般资料  本研究收集2022年10月至2024年12月南京中医药大学附属南京中医院肛肠医疗中心收治的19例pfCD的患者资料。本研究为非盲、单臂性临床研究，且通过南京中医院伦理审查委员会审查批准（伦理批件号：KY2018011）。纳入标准：（1）入组患者与家属均充分知情并签署知情同意书；（2）年龄≥14岁；（3）符合《炎症性肠病诊断与治疗的共识意见（2018年，北京）》[ 13]对CD的诊断标准；在筛选期的至少6个月前确诊CD；（4）缓解期或轻度活动期的CD患者，即克罗恩病活动指数（Crohn’s disease activity index，CDAI）≤220分；（5）通过临床评估或盆腔磁共振成像（pelvic magnetic resonance imaging，PMRI）、经肛超声检查（endoanal ultrasound，EAUS）评估为复杂性肛瘘的患者；（6）育龄妇女的血清/尿液妊娠试验呈阴性，受试者术后避孕6个月；（7）无其他重大疾病或者恶性肿瘤。排除标准：（1）麻醉用药或MRI造影剂过敏者；（2）肛瘘急性感染期，肛周局部存在感染症状，PMRI评估脓肿直径>2 cm；（3）因活动性CD需要立即升级治疗者；（4）伴有直肠狭窄、肛门狭窄或活动性直肠炎的患者；（5）存在严重肝脏、血液、内分泌、肺、心脏、神经、精神或脑部疾病的受试者；（6）继发于肿瘤或者结核等的肛瘘；（7）存在研究者认为不适宜参加本次临床试验的其他疾病或情况。  二、手术方法  （一）术前准备  受试者行肛周盆腔MRI平扫或肛管直肠腔内超声检查，定位瘘管的位置、长短、分支，评估是否存在脓肿；同时行肛门指检与直肠压力测定检查，评估患者肛门功能。在干细胞移植手术前至少2周，患者接受术前访视，包括麻醉评估、肛周专科检查，以确保研究人群基线特征的同质性。若患者的瘘管存在旷置挂线或引流皮筋等，在术前移除。  （二）hUCMSCs的制备与鉴定  本研究所使用的hUCMSCs由江苏拓弘康恒医药有限公司（江苏省细胞制备中心）生产提供（伦理审查批件号：20230523-k130）。其中脐带组织来自经过筛选合格的健康产妇志愿者，均在产前签署知情同意书。将新鲜脐带组织立即放入含有DMEM/F-12培养基的高温灭菌瓶内，迅速转移至已紫外灭菌的超净台内。将脐带取出放入150 mm×25 mm培养皿内，使用HBSS溶液冲洗一遍，随后纵向剖开脐带，仔细剔除其内的动脉、静脉及外膜的羊膜等组织，完整剥离并保留华通氏胶。将纯净的华通氏胶组织剪成体积约1 mm3~2 mm3的小块，PBS冲洗后将组织转移至含有10%胎牛血清、1%青霉素-链霉素双抗、生长因子（EGF，bFGF）及1% L-谷氨酰胺的DMEM/F-12培养基内放入37 ℃，5%CO2培养箱内培养14 d。细胞融合聚集70%~80%后，吸出培养基，则为原代脐带间充质干细胞，分点消化传代后鉴定干细胞表面标志物（CD90、CD73、CD105、CD31、CD326、HLA-DR、CD45、CD34、CD11b、CD19）表达量、活力检测及内毒素和病原体检测（人类免疫缺陷病毒、巨细胞病毒、乙肝病毒、丙型肝炎病毒、支原体等），检测合格后将剩余细胞计数后冻存至液氮细胞库内。本研究使用第二代干细胞，将干细胞收集进灭菌后的安瓿瓶内，与5%人血白蛋白配制成细胞混悬液。保存规格：每个安瓿瓶含有5×106个活细胞/mL，6.0~10.0 mL/瓶，共4瓶，总剂量1.2×108个活细胞/人，给药体积24 mL（本剂量参考Darvadstrocel、Cx601的试验研究剂量）在干细胞给药手术当天早上将细胞混悬液运输至手术室，4~8 ℃保存至使用完毕，制备完成后有效期为72 h。  （三）hUCMSCs移植手术方法  1．手术方法：所有患者均采用蛛网膜下腔麻醉，根据肛门直肠指诊与盆腔MRI显示的瘘管走向，使用探针探查瘘管的走向及深度、分支、内口等，避免遗漏。使用肛瘘刷及电刀电凝，由内向外清理瘘管，刮除瘘管壁上皮化部分及坏死组织。随后使用0.9%氯化钠冲洗瘘管，清除残留在管道内的坏死组织。使用可吸收线缝闭内口，使用0.9%氯化钠注射液加压灌注瘘管，观察内口是否封闭完全。助手抽取干细胞混悬液，由术者经肛门或皮肤将含1.2×108细胞的干细胞悬液均匀地多次注射至瘘管的内口、外口、瘘管壁四个象限。注射完成后，使用无菌敷料覆盖肛周手术区域，术毕。 2．术后注意事项：患者返回病房后去枕平卧6 h，禁食禁水；术后6 h后清淡、半流质饮食；患者于术后第三天开始换药，取侧卧位，使用蘸有生理盐水的棉球轻轻擦拭去分泌物，再使用干棉球或纱布轻蘸残留液体，若患者术中进行扩创引流则使用盐水纱条填塞引流，若未扩创且创面整洁干净，可直接覆盖无菌纱布固定。  3．细胞注射注意事项：（1）在对瘘管进行干细胞注射时，避免对干细胞混悬液内掺杂进亚甲蓝、碘溶液或高渗葡萄糖溶液，可能会影响细胞活性，进而影响治疗效果；（2）在进行干细胞注射时，使用22 G规格针头，既不易因针头过粗损伤组织也不会因针头细小损伤细胞。  4．合并用药：（1）pfCD患者在进行干细胞注射术后半年内不可擅自增添激素类药物；在研究过程中，保持术前CD用药的稳定剂量，除非CD病情进展至进行阶梯治疗，允许补救治疗；除非受试者的CD病情活动性进展，根据临床指南需要升级全身性药物治疗方案，此时允许其作为补救措施变更本研究设定的合并用药限制。（2）患者在进行干细胞治疗肛瘘后12个月内不能再次进行其他肛周手术。  三、观察指标及随访  （一）主要观察指标  1．瘘管愈合率：术后第1、2、3、6、12个月时，分别统计瘘管愈合的比例。（1）瘘管完全愈合：肛周视诊时外口完全消失，外口处按压无分泌物渗出，指诊时未触及明显瘘管，影像学检查较基线期改善；（2）瘘管部分愈合：视诊时外口缩小，有少许分泌物，瘘管引流量明显减少，影像学检查较基线期改善。  2．干细胞手术后1个月内与药物相关的不良事件发生率，以评估药物安全性。不良事件包括症状体征、疾病或实验室检查异常。  （二）次要观察指标  1．CD肛瘘评分：在基线期、术后1、3、7、14天和1、2、3、6个月进行视觉模拟评分法（visual analogue scale，VAS）疼痛评分；在基线期、术后第7、14天和第1、2、3、6个月时进行肛周疾病活动指数（perianal disease activity index，PDAI）、克罗恩病疾病活动指数（Crohn’s disease activity index，CDAI）、炎症性肠病生活质量问卷（inflammatory bowel disease questionnaire，IBDQ）评估。在基线期和术后6个月进行肛门Wexner失禁评分。  2．炎性指标表达水平：在基线期、术后第三天、6个月，检测C-反应蛋白（C-reactive protein，CRP）、红细胞沉降率（erythrocyte sedimentation rate，ESR）及粪便钙卫蛋白（faecal calprotectin，FC）并对其变化进行前后比较。  3．营养指标：在基线期、术后第三天、6个月，检测血清白蛋白、总蛋白并对其变化进行前后比较；在住院及随访的术后1、3、6、12个月期间，记录患者身高体重。研究流程见图1。 图1  临床研究流程图 四、统计学方法 本次采用SPSS 25.0软件进行统计分析；正态分布的计量资料采用均数±标准差（x̄±s）进行描述；非正态分布的计量资料采用M（Q1，Q3）统计描述。两组间比较，符合正态分布且方差齐者采用t检验，非正态分布或方差不齐者采用秩和检验。符合正态分布的不同时间点数据比较，采用重复测量方差分析（repeated measures ANOVA）；非正态分布的时间点数据比较，采用Friedman和Wilcoxon检验（Bonferroni校正）。由于Friedman和Wilcoxon检验均要求完整配对数据，而12个月时间点仅有11例完整记录，无法满足统计假设要求，故本研究主要统计并报告至术后6个月的数据（n=19），以保持分析一致性和方法学严谨性。P<0.05为差异有统计学意义。 结果 一、细胞制备与鉴定 hUCMSCs在培养过程中，细胞呈现出典型的纺锤形、长梭形形态，增殖情况良好。流式细胞术检测结果表明，hUCMSCs高表达干细胞标志物CD73、CD90、CD105，不表达内皮细胞、上皮细胞、免疫细胞和造血细胞标志物CD45、CD34、CD11b、CD19、CD31、CD326和HLA-DR，符合间充质干细胞的免疫表型。见图2。 图2 hUCMSCs形态与细胞免疫表型鉴定  二、患者一般资料 本研究共纳入19例因生物制剂疗效不佳而接受干细胞治疗的pfCD患者。其中男性14例（73.7%），女性5例（26.3%），平均年龄为（27.21±6.52）岁。根据蒙特利尔分型，肠道病变范围为：回肠末端型（L1）6例（31.6%），结肠型（L2）4例（21.1%），回结肠型（L3）9例（47.4%），无上消化道（L4）受累患者。肛瘘的Parks分型共计19条瘘管，其中经括约肌型9条（47.4%），括约肌上型3条（15.8%），括约肌间型6条（31.6%），括约肌外型1条（5.3%）。肛瘘内口数为1个者6例（31.6%），2个者9例（47.4%），3个者3例（15.8%），4个者1例（5.3%）；外口数为1个者9例（47.4%），2个者8例（42.1%），3个者2例（10.5%）。所有患者既往均无胃肠道手术史，但18例有肛瘘手术史：1次3例（15.8%），2次10例（52.6%），3次4例（21.1%），4次1例（5.3%）。在基线用药方面，所有患者在手术前后均持续接受生物制剂治疗以控制CD病情，具体为：乌司奴单抗10例（52.6%），英夫利西单抗8例（42.1%），阿达木单抗1例（5.3%）；无一例患者使用抗生素或激素。 截至数据分析时，11例患者（57.9%）已完成12个月随访；其余8例（42.1%）因入组时间较晚，尚未达到12个月随访终点，目前仍继续随访中，所有数据收集完整。所有患者均按计划完成了近期访视，无失访或退出情况。 所有随访患者的基线特征比较见表1。两组基线资料比较，差异无统计学意义（P>0.05），提示人口学及临床特征在不同入组时间的患者中分布均衡，具有可比性。因此，本研究术后12个月愈合情况能够代表所有数据，失访不会对研究结果产生显著偏倚影响。 表1  完成和未完成12个月随访的受试者基线信息比较[x̄±s，M（Q1，Q3）] 三、观察指标结果 （一）主要观察指标 1．瘘管愈合率 19例患者术后瘘管愈合率随时间呈上升趋势。术后1、2、3、6、12个月的瘘管愈合率分别为42.1%（8/19）、68.4%（13/19）、63.2%（12/19）、73.7%（14/19）和90.9%（10/11）（见图3）。其中，术后3个月时的愈合率63.2%（12/19）较术后2个月68.4%（13/19）有所下降，因1例患者直肠与乙状结肠连接区域CD控制差出现瘘管复发所致。随访至术后12个月的10位患者瘘管均始终保持愈合状态，术后12个月的核磁共振显示瘘管均完全闭合，触诊按压无疼痛、无渗出（见图4）。 图3  瘘管不同时间愈合率 图4  患者治疗前后不同时间肛瘘恢复情况 2．安全性 本研究未发生由hUCMSCs治疗直接导致的不良事件，亦无严重不良事件报告。主要不良事件为肛周疼痛，发生8例，占比42.1%（8/19）。此外，2例患者术后出现低热，占比10.5%（2/19）。所有不良事件均于术后1周内完全消失。 （二）次要观察指标 1．CDAI评分 在基线期、术后7、14 d和术后1、2、3、6个月比较患者CDAI评分，结果显示患者CDAI评分<150分，处于缓解期。并且治疗后各时间点CDAI评分均低于基线期评分，且在治疗后14 d及1个月时评分最低，差异有统计学意义（Z=−3.175，Z=−3.684；P<0.01）。见表2，图5。 图5  治疗前后不同时间点CDAI比较 表2CDAI评分[M（Q1，Q3）] 注：各时间点与基线比较；P值均为矫正后P值 2．PDAI评分 基线期与术后7、14 d和术后1、2、3、6个月的PDAI评分结果显示，在术后2个月、3个月及6个月时，PDAI评分均低于基线（P<0.05）。并且，自术后1个月起至所有后期随访时间点，PDAI评分中位数≤2.0，远低于疾病活动阈值（评分≤4分），提示肛周病变逐渐改善，未出现复发或进展。见表3、图6。 图6  治疗前后不同时间点PDAI比较 表3  PDAI评分[M（Q1，Q3）] 注：各时间点与基线比较；P值均为矫正后P值 3．Wexner失禁评分 如下图所示，所有患者治疗后的肛门失禁评分略有下降，提示hUCMSCs手术治疗未诱发肛门失禁且能够在一定程度改善肛门功能，但差异无统计学意义（Z=−1.472，P>0.05）。见表4、图7。 图7  治疗前后Wexner评分比较 表4  Wexner失禁评分[M（Q1，Q3）] 注：各时间点与基线比较 4．VAS疼痛评分 术后3 d内VAS疼痛评分显示，患者术后短期内疼痛程度较基线期轻度升高，而在术后7 d时VAS疼痛评分出现下降，即疼痛有所缓解，随访至术后1、2、3、6个月时，患者VAS疼痛中位数降至0左右，患者疼痛基本消失，但差异无统计学意义（P>0.05）。见表5，图8。 图8  治疗前后不同时间点VAS评分比较 表5  VAS疼痛评分[M（Q1，Q3）] 注：各时间点与基线比较；P值均为矫正后P值 5．IBDQ评分 在基线期和术后7、14 d及1、2、3、6个月，采用IBDQ评分评估。研究结果表明，与基线相比，术后患者7 d内IBDQ评分降低（Z=−0.549，P>0.05），但术后1个月后恢复并稳定维持至术后6个月。所有时间点中位数>200分且Q1>190分，证实围手术期患者生命质量全程维持在良好水平。见表6，图9。 图9  治疗前后不同时间点IBDQ比较 表6  IBDQ评分[M（Q1，Q3）] 注：各时间点与基线比较；P值均为矫正后P值 6．炎症水平指标变化 由于入组患者均为缓解期或轻度活动期pfCD，故CRP、ESR和FC指标一致显示肠道及全身炎症在基线期不明显，仅在术后短期内可能由于手术应激出现一过性升高。CRP术后第三天出现短暂升高，但至术后六个月复查时完全恢复，与D3相比差异具有统计学意义（Z=3.804，P<0.001）；红细胞沉降率术后第三天上升，至第六个月恢复，与基线相比差异无统计学意义（t=−0.508，P>0.05）。FC在基线期与术后6个月内稳定于正常范围内，差异无统计学意义（Z=−1.079，P>0.05）。见表7、图10。 图10 治疗前后不同时间点炎症指标比较 表7  炎症水平指标[x̄±s，M（Q1，Q3）] 注：各时间点与基线比较；P值均为矫正后P值 7．营养状况变化 将患者基线期与术后6个月的BMI进行比较，结果显示差异无统计学意义（t=0.690，P>0.05），表明hUCMSCs局部注射未影响患者营养状况。血清蛋白指标显示急性期反应：总蛋白术后3 d至6个月始终维持在基线水平。白蛋白在基线期及术后3 d差异无统计学意义，术后第六个月则出现明显升高（t=3.370，P<0.05）。见表8、图11。 图11 治疗前后不同时间点营养指标比较 表8 营养状况指标[x̄±s，M（Q1，Q3）] 注：各时间点与基线比较；P值均为矫正后P值 讨论 CD是一种难治性、慢性自身免疫性疾病，病变可累及全消化道。CD伴发的肛门部病变，尤其是肛瘘难以治愈[14]。pfCD被CD群体称为"毁灭性病变"，是病情严重的表现，也是复杂性肛瘘中反复发作、最为难治的类型[5,15]。现有的药物和手术均难以控制或改善，绝大多数患者至少接受过一次手术治疗，但疗效不佳，使pfCD患者肛门失禁风险明显高于其他类型肛瘘[16]。肛瘘治疗目标是在最大程度保护肛门功能的前提下，治愈肛瘘。因此减轻肛门括约肌损伤是保护肛门功能的前提[3,6]。 过去3年，南京中医院肛肠专科中心门诊共诊治肛瘘患者32 339人次。本中心在大量的手术经验积累后发现，快速封闭内口，阻断感染源，尽量清除感染灶，通畅引流是复杂肛瘘手术治疗成功与否的三要素[17]。现代医学治疗复杂性肛瘘手段繁多，传统手术方式创伤大，常伴括约肌损伤；生物材料及新技术辅助术式虽创伤小，但适用范围较窄、治愈率低，缺乏大样本的长期研究，无规范化治疗方案，尚未临床广泛应用[18,19,20,21]。因此，CD伴发肛瘘的治疗仍以切开挂线引流为主，存在术后创面大、治愈率低、肛门功能受损等问题，影响患者生活质量下降[5]。2003年，GarciaOlmo等[22,23,24]首次报道采用间充质干细胞（mesenchymal stem cell，MSCs）治疗CD直肠阴道瘘的成功案例，引发了干细胞疗法在pfCD中的一系列临床试验。2017年脂肪干细胞产品Darvadstrocel被美国食品药品监督管理局授予治疗pfCD的"孤儿药"，2018年被欧盟药品委员会批准上市，2021年被日本厚生省批准临床使用，用于治疗CD患者复杂性肛瘘，标志着MSCs疗法在pfCD临床治疗取得里程碑式进展。2019年中国《克罗恩病肛瘘诊断与治疗的专家共识意见》推荐使用MSCs局部注射治疗pfCD[6]。2018年，美国结直肠外科医师协会（ASCRS）2018年版《肛周脓肿、肛瘘和直肠阴道瘘临床诊治指南》首次推荐MSCs治疗pfCD，2022年版指南引用江滨教授团队成果，首次将MSCs推荐为复杂性肛瘘治疗方法之一，推荐等级2B[3]，这也是中国最早报道的MSCs治疗复杂性肛瘘的临床研究[25]。标志着MSCs移植手术在pfCD治疗中具有广阔的临床应用前景，MSCs治疗肛瘘进入全球化应用阶段[26,27]。 现有研究表明，hUCMSCs通过其免疫调节、抗纤维化及组织修复等多重机制，深度参与肛瘘愈合的各个阶段，不仅减轻慢性炎症反应，还可促进瘘道的愈合、组织重建与功能恢复。具体而言，hUCMSCs分泌IL-10、转化生长因子-β、前列腺素E2等因子，促进M2型巨噬细胞极化，抑制局部炎症反应并调节T细胞应答，从而改善慢性炎症状态[28,29]；其抗纤维化效应可减少手术瘘道瘢痕形成，降低复发[30]，同时通过分泌VEGF等因子促进血管新生，改善局部供血，加速肉芽组织生成与再上皮化过程[31]。并且，MSCs手术方式能够快速封闭内口，阻断感染源；创面恢复快，减少感染几率；无需切开大量正常组织，最大程度保护括约肌功能，成功弥补其他术式不具备的"肛瘘治疗成功三要素"，成为目前肛瘘治疗的热点。 课题组前期使用ADSCs治疗pfCD，获得了良好临床疗效。大量研究显示，在肛瘘治疗中ADSCs应用最广，其次是hUCMSCs[32]。ADSCs最突出的优势在于组织来源广泛，获取便捷，通过抽脂术即可获取，供体选择灵活（自体/异体），并在肛瘘治疗中已有大量应用实例，积累了丰富的临床数据支持其有效性和安全性[33,34,35]。hUCMSCs作为来源于新生儿脐带组织的干细胞，具有强大的细胞生物学潜能：在体外增殖速率、传代能力和分化潜能、免疫调节和抗炎能力均更强；极低免疫原性，异体使用时排斥风险低，能有效地抑制过度的免疫反应、调节多种免疫细胞的功能[36,37,38]；分泌的外泌体、生长因子等生物活性物质具有更高效的促再生特性，通过促进抗炎因子分泌、抑制促炎因子释放和诱导巨噬细胞向抗炎表型分化等多种途径发挥抗炎效应[39,40]。此外，脐带组织来源相对稳定，更有利于建立标准化的细胞产品。基于此，课题组使用脐带来源的MSCs，旨在评估其在pfCD治疗中的有效性与安全性，不仅有助于深入理解不同来源MSCs的作用优势，也为未来在临床中选择来源最适宜的干细胞提供科学依据和数据支持。 本研究在课题组既有工作的基础上，进一步验证了hUCMSCs针对pfCD中的治疗效果。为了准确评估局部干细胞注射对肛瘘的独立疗效，本研究要求所有患者在术后6个月内维持术前的CD治疗方案。所有患者在干细胞局部注射手术前后均接受了规律且稳定的全身生物制剂治疗，包括乌司奴单抗（10例）、英夫利西单抗（8例）、阿达木单抗（1例）以控制肠道炎症。未有患者因病情活动升阶梯治疗，在围手术期未使用糖皮质激素或抗生素。所有患者在整个研究随访期内均成功维持原有的生物制剂治疗方案，无1例因CD活动调整治疗方案或进行手术干预。 在严格控制的条件下，本研究观察到的肛瘘愈合疗效可主要归因于局部干细胞注射治疗的效果，而非全身内科治疗的混杂影响。稳定的生物制剂治疗为局部创面愈合提供必要的基础环境，两者相辅相成，共同提高治疗效果。最终结果显示：pfCD在hUCMSCs治疗后6个月累积愈合率高达73.7%，MRI及临床检查均证实瘘管持久闭合，提示该疗法在促进肛瘘修复方面具有良好效果，显著高于课题组此前采用肛瘘切开挂线术治疗pfCD的愈合率54.5%（6/11）。所有患者在基线期进行肛周触诊时发现，19位患者均有不同程度的肛直环变硬、肛管直肠黏膜脆弱且易出血，其中4位患者存在肛管狭窄。术后6个月，肛周触诊时上述情况均明显改善。PDAI评分在术后7 d缓解，并在术后2个月稳定在1.0的极低水平，进一步证实了干细胞疗法在局部免疫调控和抗纤维化方面的强大作用。 术后14 d，患者CDAI评分中位数下降至27.5，并在随访期间持续保持在非活动状态，表明hUCMSCs不仅具有较好的安全性，还可能与生物制剂协同缓解肠道炎症，具有潜在的治疗作用。 在安全性方面，尽管42.1%患者在术后出现轻度自限性疼痛，10.5%患者出现短暂低热，但未发生严重不良事件，表明治疗方法的安全性较高。相较之下，前期行肛瘘切开挂线术的所有患者均出现术后疼痛。肛瘘切开挂线术的Wexner失禁评分在基线期为（1.5±0.7）分，术后6、12个月均为（1.2±0.8）分[8]，变化幅度较小且术后功能恢复较慢。而hUCMSCs移植后Wexner评分在术后6个月时改善，证明hUCMSCs治疗在实现瘘管闭合的同时，能够有效保护括约肌功能，降低术后失禁风险。在围手术期，患者术后28 d VAS评分中位数降至0，与课题组此前的肛瘘切开挂线术临床研究中VAS疼痛评分（术后1 d：4.91±0.83；术后3 d：4.27±0.75；术后7 d：3.18±0.75；术后15 d：2.27±0.65）相比[8]，hUCMSCs手术治疗具有疼痛轻、时间短的显著优势。本研究未见严重不良反应，炎症指标及营养参数波动均在正常生理范围内，术后6个月白蛋白水平升高，反映患者全身炎症反应消退与营养状态改善的良性循环，进一步证明了hUCMSCs对全身整体代谢状态的系统性调控潜力。hUCMSCs在本研究中表现出恢复快、安全性高、疼痛程度轻的特征，在兼顾感染控制、组织修复与功能保护中均优于传统手术。 本研究为单臂设计，样本量较小，缺乏同期随机对照是本研究的主要不足，由此可能产生偏倚风险，存在一定局限性。这主要是由于在临床实践中，对于这类经多线治疗失败的难治性患者，设立对照组存在伦理和实践上的困难。他们亟需有效治疗，临床决策通常会直接转向新的治疗选择，而非随机分配至对照组。此外，另一局限为随访时间相对有限，尚需长期随访数据来评估治疗的持久性和远期安全性。 综上所述，hUCMSCs能够调控局部组织免疫微环境，吸引机体免疫细胞在创伤局部聚集，使局部组织达到动态的免疫平衡，从而促进组织修复。本研究结果表明hUCMSCs治疗在pfCD患者中效果良好。治疗6个月的入组患者持久愈合率为73.7%，随访12个月的患者愈合率达90.9%，在实现显著疗效的同时，有效保护肛门括约肌功能。未观察到严重不良事件。且术后患者营养状态有所改善，进一步证实hUCMSCs治疗pfCD具有良好的疗效、安全性及肛门功能保护性。本研究结果表明，hUCMSCs局部注射治疗为pfCD患者提供了集高效愈合、症状控制、生活质量提升与肛门功能保障于一体的先进治疗方案，也为pfCD难治性肛瘘开拓了新思路，标志着pfCD的治疗已经迈入细胞治疗的时代。 参考文献（见本刊官网） 版权声明 本文为《中华结直肠疾病电子杂志》原创文章，版权归中华医学会所有。其他媒体、网站、公众号等如需转载本文，请联系本刊编辑部获得授权，并在文题下醒目位置注明“原文刊发于《中华结直肠疾病电子杂志》，年，卷（期）：起止页码”。谢谢合作！ 期刊介绍 《中华结直肠疾病电子杂志》是由中华人民共和国国家卫生健康委员会主管，中华医学会主办，中国国家癌症中心/中国医学科学院肿瘤医院承办，中华医学电子音像出版社有限责任公司出版的专业学术电子期刊。杂志为中国科技核心期刊。 主管：中华人民共和国国家卫生健康委员会 主办：中华医学会 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对于常规治疗无效的克罗恩病肛周瘘，Cx601（达夫司特塞尔）是一种有效且安全的治疗选择。 Cx601（达夫司特塞尔）治疗克罗恩病肛周瘘的疗效与安全性 Cx601（达夫司特塞尔）是一种由人异体脂肪来源间充质干细胞组成的悬浮液，通过局部注射给药。其作用机制并非直接修复组织，而是利用干细胞的 抗炎和免疫调节特性 来创造有利的愈合环境，从而促进瘘管闭合 1. 有效性证据 大量研究证实，对于传统治疗（如抗肿瘤坏死因子生物制剂、免疫抑制剂或外科手术）效果不佳的复杂性肛周瘘，Cx601能带来显著的临床获益。 长期疗效稳定 ： 一项发表于2024年的前瞻性全国多中心队列研究显示，在平均92周的随访中， 57.1% 的患者实现了瘘管成功闭合-1。 另一项真实世界研究（涵盖36名患者）发现，在治疗后第24周和第52周，临床缓解率（即所有外部开口闭合且无分泌物）均维持在 47.2% -2-6。 更进一步的长期随访数据（INSPECT研究）显示，在接受Cx601治疗的患者中，治疗后 156周（约3年） 时，仍有 53.5% 的患者维持临床缓解，表明其疗效具有较好的持久性 优于常规治疗 ： 一项针对随机对照试验的荟萃分析表明，接受干细胞治疗的患者，其肛周瘘的愈合率显著高于对照组， 优势比（OR）为1.42 -7。 最新的荟萃分析（2025年10月）也证实，干细胞治疗组的临床缓解率显著更高， 优势比（OR）达到2.17 -3。 通过预测模型分析，与标准治疗相比，接受Cx601治疗的患者达到临床缓解的时间更短，且复发时间更长。在治疗后的 24个月和48个月 ，Cx601组处于缓解状态的患者比例（约 48%-49% ）始终高于标准治疗组（约 32%-35% ）-4-8。 2. 安全性评估 在安全性方面，Cx601展现出了良好的表现，这也是其作为细胞疗法的关键优势之一。 操作安全性高 ：Cx601的注射是一种微创手术。一项研究中报告的中位手术时间仅为 20分钟 ，且 没有发生围手术期并发症 。 不良反应与安慰剂相当 ： 多项荟萃分析均显示，Cx601治疗组与对照组（安慰剂或标准治疗）在 不良事件 （如肛周脓肿、肛门疼痛等）的发生率上没有显著差异-3-7。这表明治疗本身不会增加额外的安全性风险。 在长达 208周（4年） 的随访中，未发现与治疗相关的异位组织形成（即在非目标部位形成组织），且肿瘤发生风险极低，仅在对照组中有1例报告-10。 免疫原性问题 ：由于Cx601是异体（来源于他人）细胞，理论上存在产生供者特异性抗体（DSA）的风险。一项研究发现，部分患者确实会产生DSA，但 并未观察到DSA的产生与治疗失败或安全性问题之间存在关联 -5。 评析 1. 定位明确：填补了难治性患者的治疗空白 对于常规治疗无效的克罗恩病肛周瘘，治疗选择非常有限。Cx601的出现，为这部分患者提供了一种全新的、作用机制完全不同的“进阶”治疗方案。其“一次注射，长期有效”的特点，相比需要长期反复用药的生物制剂，在便利性和依从性上具有优势。 2. 疗效数据稳健：从临床试验到真实世界的一致性 Cx601的有效性不仅在严格的随机对照试验（如ADMIRE-CD研究，其52周联合缓解率达56.3%）中得到验证-9，更在真实世界的临床实践中得到了重复。上述引用的多项2023-2025年间发表的真实世界研究显示，其临床缓解率稳定在 47%-57% 之间-1-2-6。这种从理想试验环境到日常临床实践的一致性，有力地证明了其疗效的可靠性。 3. 安全性与“再生”潜力 该疗法最大的亮点之一是其卓越的安全性。与手术或长期药物治疗可能带来的感染、肝功能损害或免疫抑制风险相比，Cx601的局部注射并未增加额外的严重不良反应。同时，它利用的是人体自身的修复机制，而非单纯抑制免疫，理论上为瘘管的解剖学愈合（通过MRI评估）提供了可能，这比单纯的临床症状缓解更进了一步-2-4。 4. 待解决的问题与未来展望 尽管Cx601表现出色，但仍有一些问题值得关注： 并非所有患者都有效 ：数据显示仍有约40%-50%的患者对该疗法无应答-1-2。如何通过生物标志物或更精确的患者筛选来提高应答率，是未来的研究方向。 成本与可及性 ：作为先进的细胞治疗产品，其高昂的成本是普及的一大障碍。 再治疗的可行性 ：对于首次治疗无效或复发的患者，能否进行再次注射？由于存在产生供者特异性抗体的风险，再治疗的免疫原性和有效性尚需更多研究探索-5。 总结 综合来看，Cx601（达夫司特塞尔）是目前证据充分、疗效确切的克罗恩病肛周瘘治疗方案。对于常规治疗无效的难治性患者，它是一种 安全、有效 的选择，能在大约一半的患者中实现长期的瘘管闭合，且不增加额外的安全风险。随着临床应用的增加，其远期疗效和安全性将得到更充分的验证